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      一種羅漢果甙v的提取方法

      文檔序號(hào):3493386閱讀:330來源:國知局
      一種羅漢果甙v的提取方法
      【專利摘要】一種羅漢果甙V的提取方法,以羅漢果鮮果為原料,經(jīng)清洗、破碎,再按下述步驟提?。?)糖化鮮羅漢果;2)水提取和濃縮;3)沉降離心處理;4)大孔樹脂吸附、分離,采用多樹脂柱組選擇吸附,并分段收集解析液,根據(jù)含量不同,分批次合并處理;5)離子交換樹脂精制;6)濃縮、回收乙醇;7)硅膠精制;8)濃縮和噴霧干燥,獲得終產(chǎn)品羅漢果甙V提取物。本發(fā)明工藝精制,實(shí)現(xiàn)了讓羅漢果糖各種甙元在床層中達(dá)到分段富集的效果,提取出的羅漢果甙V純度高、色澤優(yōu)、口感純正。
      【專利說明】一種羅漢果甙V的提取方法
      【技術(shù)領(lǐng)域】
      [0001]本發(fā)明涉及從天然植物中提取有效成分的方法,特別是一種從羅漢果中提取甜甙V的方法。
      【背景技術(shù)】
      [0002]當(dāng)今人類存在對(duì)甜味食品的普遍偏好,吃糖類食品成為人們攝入能量的主要方式之一,然而由于大量攝取蔗糖能引起糖尿病、肥胖癥、心臟病等各種成人病而成為社會(huì)問題。選擇使用合適的甜味劑則無論是在我們的日常生活中還是在食品、飲料、醫(yī)藥工業(yè)中都具有非常重要的作用。
      [0003]羅漢果是葫蘆科植物,此果以其甜度著名,羅漢果的甜度來自于其主要成分的羅漢果皂甙,既可入藥也可以作為食品的甜味劑。羅漢果的主要甜味成分為羅漢果甙V,它是一種無碳水化合物、無熱量的甜味劑,其甜度約為蔗糖的300倍,且口感優(yōu)良,風(fēng)味獨(dú)特,質(zhì)量穩(wěn)定,可作為一種通用 的天然甜味劑,代替人工甜味劑如阿斯巴甜,安賽蜜等,而且羅漢果甙V在高溫加熱、烹飪或燒烤時(shí)也都不會(huì)影響其風(fēng)味,因此可被廣泛地應(yīng)用于食品和飲料中作為配料。
      [0004]目前,提取羅漢果甙V的方法雖然很多,但是羅漢果甙還存在著質(zhì)量不穩(wěn)定的情況,直接影響著消費(fèi)者的使用,如其口感差異,含量差異,及其色澤均影響著羅漢果甙的市場推廣。另外,在將羅漢果甙V作為甜味劑配料方面也還存在著低甜度和低卡路里難以兼得的缺陷。

      【發(fā)明內(nèi)容】

      [0005]針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)存在的不足,本發(fā)明的目的在于提供一種純度高、色澤優(yōu)、口感純正的羅漢果甙V的提取方法。
      [0006]為實(shí)現(xiàn)上述目的,本發(fā)明的技術(shù)方案是:一種羅漢果甙V的提取方法,以羅漢果鮮果為原料,經(jīng)清洗、破碎,再按下述步驟提取:
      [0007]I)糖化鮮羅漢果:將破碎后的鮮羅漢果放入糖化溶液中,經(jīng)攪拌器攪拌均勻,保溫放置,所述糖化溶液是由多聚半乳糖醛酸酶溶解于經(jīng)過RO反滲透得到的超純水而成的溶液;其中,多聚半乳糖醛酸酶占鮮羅漢果的重量=5~10wt%。,超純水的體積=2000L,保溫溫度=25~35°C,放置時(shí)間=5h ;
      [0008]2)水提取和濃縮:先將糖化好后的鮮羅漢果用超純水進(jìn)行提?。辉儆米詠硭亓魈崛?、過濾,共四次,合并四次提取濾液;然后將合并后的提取濾液在真空減壓下濃縮;
      [0009]3)沉降離心處理:將濃縮后的提取濾液經(jīng)高速離心分離處理和沉降,獲得離心收集液,其中,離心機(jī)速度=3000~5000r/min,沉降離心分離時(shí)間=Ih ;
      [0010]4)大孔樹脂吸附、分離:采用DA201型的大孔吸附樹脂,將其裝入樹脂柱中,該樹脂柱四個(gè)串聯(lián)為一樹脂柱組,料液上柱進(jìn)行吸附;吸附結(jié)束后,用乙醇解析,收集解析液,在該解析過程中,根據(jù)泄漏液的體積,分階段解析并進(jìn)行分析,依據(jù)每個(gè)階段的解析液中羅漢果甙V的含量,分別確定出其對(duì)應(yīng)解析液的下一步處理工序;
      [0011] 5)離子交換樹脂精制:預(yù)先將選用的酸性陽離子交換樹脂和堿性陰離子交換樹脂分別裝入樹脂柱;從步驟4)中確定出需進(jìn)行陽、陰離子處理的解析液分別過陽、陰離子交換樹脂進(jìn)行處理;收集走完陽、陰離子交換樹脂得到的精制液;經(jīng)水洗后,合并所有流出液,包含步驟3)中未進(jìn)行此步驟處理的解析液;其中,酸性陽離子交換樹脂采用001 X 16苯乙烯強(qiáng)酸性陽離子,堿性陰離子交換樹脂采用201X40H強(qiáng)堿性陰離子,處理時(shí)解析液的流量=2 ~3BV/h ;
      [0012]6)濃縮、回收乙醇:將上述處理過的解析液在真空減壓、<70°C溫度下濃縮成濃縮液,并回收溶劑乙醇,其中,將濃縮液濃縮至投料鮮羅漢果重量的0.5~I倍;
      [0013]7)硅膠精制:預(yù)先將選定的硅膠裝入樹脂柱中,同時(shí)將所述濃縮液經(jīng)純化水稀釋后,通過硅膠柱,去掉液體中的雜質(zhì)以及羅漢果甜甙同系物,收集全部流出液;
      [0014]8)濃縮和噴霧干燥:先用有機(jī)膜進(jìn)行動(dòng)態(tài)脫醇、脫水濃縮,再經(jīng)二次濃縮,通過減壓蒸餾濃縮至額定濃度10~18波美度,最后通過噴霧干燥,獲得終產(chǎn)品羅漢果甙V提取物,其中,所述有機(jī)膜的膜孔徑在20~100 A °之間。
      [0015]較佳的是,所述步驟4)中,將多組所述樹脂柱組并聯(lián)設(shè)置,每組的吸附按照第一柱至第四柱依次進(jìn)行,直到第四柱出甜時(shí)為止;組與組之間的吸附根據(jù)產(chǎn)品需求,進(jìn)行選擇性吸附和層析分離。
      [0016]較佳的是,所述步驟4)中,所述料液上柱流量范圍為0.1~5BV/h,吸附結(jié)束后,水洗流量范圍為0.1~5BV/h,直至出水無色,該時(shí)間持續(xù)5~20h。
      [0017]較佳的是,所述步驟4)中,水洗后,采用45-85%乙醇解析,收集醇含量> 50%的解析液;所述分階段解析是指:攜載具有不同粒徑顆粒的解析液,在通過樹脂時(shí),不同粒徑顆粒以不同時(shí)間段,隨泄漏液通過樹脂,對(duì)該不同時(shí)間段的泄漏液分別進(jìn)行解析,并對(duì)各階段收集到的解析液進(jìn)行HPLC分析。
      [0018]較佳的是,所述步驟7)中,所述硅膠比表面為300~500m2/g,孔容為0.70~
      0.90ml/g,所述稀釋后濃縮液通過反相硅膠柱分離、洗脫,至無甜味止。
      [0019]較佳的是,所述步驟2)中,所述用自來水回流提取、過濾四次都在85~100°C以上溫度下進(jìn)行,第一次加入原料4倍體積的自來水,提取時(shí)間為2h,過濾;濾渣進(jìn)入第二次提取,加入原料2倍體積的自來水,提取時(shí)間為1.5h,過濾;濾渣進(jìn)入第三次提取,加入原料重量3倍體積的自來水,提取時(shí)間為1.0h,過濾;濾渣進(jìn)入第四次提取,加入原料重量I倍體積的自來水,提取時(shí)間為0.5h,過濾;所述真空減壓,于65°C以下濃縮至投料鮮羅漢果重量的5倍。
      [0020]與現(xiàn)有技術(shù)相比,本發(fā)明具有如下優(yōu)點(diǎn)及效果:⑴選擇吸附:大孔樹脂吸附采用四個(gè)樹脂柱串聯(lián)為一組,多樹脂柱組并聯(lián)設(shè)置,從而在使用過程中,實(shí)際操作不會(huì)受到周期性清洗、再生以及原輻物料等外因的影響,既提高了生產(chǎn)效率,延長了樹脂的使用壽命,又穩(wěn)定的確保了產(chǎn)品質(zhì)量。(2)分段收集解析液:在收集解析液時(shí),分段收集,分別檢測甜甙含量,根據(jù)含量不同,分批次合并處理,而不是通常將解析液全部收集在一起處理。從而可以有效地保證高甙含量的產(chǎn)品與中。低甙含量的批次產(chǎn)品分離,既保證了產(chǎn)品質(zhì)量,縮短了工藝周期,又可根據(jù)需求,有選擇性地提供相應(yīng)產(chǎn)品。(3)綜合效果明顯:由于本發(fā)明工藝精制,實(shí)現(xiàn)了讓羅漢果糖各種甙元在床層中達(dá)到分段富集的效果,提取出的羅漢果甙V純度高、色澤優(yōu)、口感純正。
      [0021]以下將結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)說明,該實(shí)施例僅用于解釋本發(fā)明,并不對(duì)本發(fā)明的保護(hù)范圍構(gòu)成限制。
      【具體實(shí)施方式】
      [0022]實(shí)施例:
      [0023]浸泡分兩批,一批浸泡2000克羅漢果,另一批浸泡1800克羅漢果。兩批分別過大孔樹脂吸附和解析,然后將解析液合并作為一批,并根據(jù)檢測甙V含量分類組合,單獨(dú)進(jìn)行精制,獲得三個(gè)小批次成品。
      [0024]1.1稱取2000克羅漢果,置于20000ml、溫度為80°C水中,浸泡5小時(shí),經(jīng)過濾得到浸泡液20500ml。
      [0025]大孔樹脂吸附、解析:解析液采取分段切除的方法(解析液情況總結(jié)如下表1)
      [0026]表1
      [0027]
      【權(quán)利要求】
      1.一種羅漢果甙V的提取方法,以羅漢果鮮果為原料,經(jīng)清洗、破碎,再按下述步驟提取: 1)糖化鮮羅漢果:將破碎后的鮮羅漢果放入糖化溶液中,經(jīng)攪拌器攪拌均勻,保溫放置,所述糖化溶液是由多聚半乳糖醛酸酶溶解于經(jīng)過RO反滲透得到的超純水而成的溶液;其中,多聚半乳糖醛酸酶占鮮羅漢果的重量=5~10wt%。,超純水的體積=2000L,保溫溫度=25~35°C,放置時(shí)間=5h ; 2)水提取和濃縮:先將糖化好后的鮮羅漢果用超純水進(jìn)行提?。辉儆米詠硭亓魈崛?、過濾,共四次,合并四次提取濾液;然后將合并后的提取濾液在真空減壓下濃縮; 3)沉降離心處理:將濃縮后的提取濾液經(jīng)高速離心分離處理和沉降,獲得離心收集液,其中,離心機(jī)速度=3000~5000r/min,沉降離心分離時(shí)間=Ih ; 4)大孔樹脂吸附、分離:采用DA201型的大孔吸附樹脂,將其裝入樹脂柱中,該樹脂柱四個(gè)串聯(lián)為一樹脂柱組,料液上柱進(jìn)行吸附;吸附結(jié)束后,用乙醇解析,收集解析液,在該解析過程中,根據(jù)泄漏液的體積,分階段解析并進(jìn)行分析,依據(jù)每個(gè)階段的解析液中羅漢果甙V的含量,分別確定出其對(duì)應(yīng)解析液的下一步處理工序; 5)離子交換樹脂精制:預(yù)先將選用的酸性陽離子交換樹脂和堿性陰離子交換樹脂分別裝入樹脂柱;從步驟4)中確定出需進(jìn)行陽、陰離子處理的解析液分別過陽、陰離子交換樹脂進(jìn)行處理;收集走完陽、陰離子交換樹脂得到的精制液;經(jīng)水洗后,合并所有流出液,包含步驟3)中未進(jìn)行此步驟處理的解析液;其中,酸性陽離子交換樹脂采用001X16苯乙烯強(qiáng)酸性陽離子,堿性陰離子交換樹脂采用201X40H強(qiáng)堿性陰離子,處理時(shí)解析液的流量=2 ~3BV/h ; 6)濃縮、回收乙醇:將上述處理過的解析液在真空減壓、<70°C溫度下濃縮成濃縮液,并回收溶劑乙醇,其中,將濃縮液濃縮至投料鮮羅漢果重量的0.5~I倍; 7)硅膠精制:預(yù)先將選定的硅膠裝入樹脂柱中,同時(shí)將所述濃縮液經(jīng)純化水稀釋后,通過硅膠柱,去掉液體中的雜質(zhì)以及羅漢果甜甙同系物,收集全部流出液; 8)濃縮和噴霧干燥:先用有機(jī)膜進(jìn)行動(dòng)態(tài)脫醇、脫水濃縮,再經(jīng)二次濃縮,通過減壓蒸餾濃縮至額定濃度10~18波美度,最后通過噴霧干燥,獲得終產(chǎn)品羅漢果甙V提取物。
      2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提取方法,其特征在于,所述步驟4)中,將多組所述樹脂柱組并聯(lián)設(shè)置,每組的吸附按照第一柱至第四柱依次進(jìn)行,直到第四柱出甜時(shí)為止;組與組之間的吸附根據(jù)產(chǎn)品需求,進(jìn)行選擇性吸附和層析分離。
      3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提取方法,其特征在于,所述步驟4)中,所述料液上柱流量范圍為0.1~5BV/h,吸附結(jié)束后,水洗流量范圍為0.1~5BV/h,直至出水無色,該時(shí)間持續(xù)5 ~20ho
      4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提取方法,其特征在于,所述步驟4)中,水洗后,采用45-85%乙醇解析,收集醇含量> 50%的解析液;所述分階段解析是指:攜載具有不同粒徑顆粒的解析液,在通過樹脂時(shí),不同粒徑顆粒以不同時(shí)間段,隨泄漏液通過樹脂,對(duì)該不同時(shí)間段的泄漏液分別進(jìn)行解析,并對(duì)各階段收集到的解析液進(jìn)行HPLC分析。
      5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提取方法,其特征在于,所述步驟7)中,所述硅膠比表面為300~500m2/g,孔容為0.70~0.90ml/g,所述稀釋后濃縮液通過反相硅膠柱分離、洗脫,至無甜味止。
      6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提取方法,其特征在于,所述步驟8)中,所述有機(jī)膜的膜孔徑在20~IOOA。之間。
      7.根據(jù)權(quán)利要求1至6中任一權(quán)利要求所述的提取方法,其特征在于,所述步驟2)中,所述用自來水回流提取、過濾四次都在85~100°C以上溫度下進(jìn)行,第一次加入原料4倍體積的自來水,提取時(shí)間為2h,過濾;濾渣進(jìn)入第二次提取,加入原料2倍體積的自來水,提取時(shí)間為1.5h,過濾;濾渣進(jìn)入第三次提取,加入原料重量3倍體積的自來水,提取時(shí)間為 .1.0h,過濾;濾渣進(jìn)入第四次提取,加入原料重量I倍體積的自來水,提取時(shí)間為0.5h,過濾;所述真空減壓,于65°C以下濃縮至投料鮮羅漢果重量的5倍。
      【文檔編號(hào)】C07J17/00GK103923152SQ201410190403
      【公開日】2014年7月16日 申請(qǐng)日期:2014年5月8日 優(yōu)先權(quán)日:2014年5月8日
      【發(fā)明者】徐興光, 張永, 李存彪 申請(qǐng)人:濟(jì)南漢定生物工程有限公司