一種試劑及其在二價銅離子檢測中的應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種檢測二價銅離子(Cu2+)的試劑，它是吡哆醛肼。此試劑由吡哆醛和水合肼在乙醇中回流8小時制得，反應(yīng)只需一步進(jìn)行，且反應(yīng)條件簡單，易于生產(chǎn)。本發(fā)明提供了二價銅離子的定量檢測方法，是基于吡哆醛肼，在甲醇/HEPES(pH7.4)的混合溶液中定量地檢測二價銅離子的含量。該檢測方法，對二價銅離子顯示了高的靈敏性和選擇性，檢測過程簡便、靈敏、快速，檢測結(jié)果準(zhǔn)確。
【專利說明】一種試劑及其在二價銅離子檢測中的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及二價銅離子的檢測技術(shù)，具體涉及一種試劑及其合成方法，以及這種試劑在檢測二價銅離子中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002]化學(xué)傳感器近年來由于其測定的簡單性和效果的明顯性被廣泛用于目標(biāo)分子的檢測。我們知道，銅在環(huán)境，生物和化學(xué)系統(tǒng)中具有舉足輕重的作用是必不可少的軟過渡金屬離子。銅的化合物也用于植物病害處理、自來水處理，以及用作木材和皮革的防腐劑。雖然生物體對少量銅的攝取是不可缺少的，但高劑量的銅對生物體是有害的，甚至有毒。銅中毒引起氧化應(yīng)激及相關(guān)癥狀，這可能導(dǎo)致糖尿病和許多神經(jīng)退行性疾病如老年癡呆癥，帕金森，Menke綜合癥,威爾遜。由于其顯者的生理意義和相關(guān)生物的影響，聞選擇性和聞靈敏的銅傳感器引起了極大的興趣。
[0003]吡哆醛是比色或熒光化學(xué)傳感器在特定重金屬和過渡金屬離子發(fā)展的理想平臺。我們合成了吡哆醛肼的化學(xué)探針，此探針能在準(zhǔn)水相中對銅離子進(jìn)行快速、高選擇性和高靈敏性檢測，此探針還能用于細(xì)胞成像。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的是提供一種選擇性高、能定量檢測Cu2+的新的試劑，該試劑合成方法簡單，檢測方法便于 操作，該試劑還能用于細(xì)胞成像。
[0005]本發(fā)明提供的快速檢測Cu2+的試劑和方法，是基于一種吡哆醛肼，在pH為7.4的HEPES溶液和甲醇混合溶液中定量地檢測Cu2+的含量。該檢測方法，對Cu2+顯示了高的靈敏性和選擇性，檢測過程簡便、靈敏、快速，檢測結(jié)果準(zhǔn)確。
[0006]該試劑的結(jié)構(gòu)是:
[0007]
【權(quán)利要求】
1.一種試劑:它是吡哆醛肼，其特征在于結(jié)構(gòu)式為:
2.如權(quán)利要求1所述的一種試劑的合成方法，其特征在于步驟為:吡哆醛鹽酸和過量的水合肼在乙醇中回流8小時，冷卻后過濾，再用乙醇和水重結(jié)晶得到白色的固體。
3.—種檢測二價銅離子的方法:其特征在于，步驟為: (1)、配制pH= 7.4、濃度為IOmM的HEPES緩沖溶液，配制2mM的吡哆醛肼甲醇溶液； (2)、按體積比5:5:1，將HEPES緩沖溶液、甲醇溶液和吡哆醛肼的甲醇溶液加到干凈的熒光比色皿中，在熒光分光光度儀上檢測，隨著待測樣的加入，455nm的熒光強(qiáng)度逐漸減弱； (3)、用蒸餾水配制2mM的Cu2+溶液，把ImL的HEPES緩沖溶液、ImL的甲醇溶液、200μ L的吡哆醛甲醇溶液加到另一個熒光比色皿中，分別在加入二價銅離子溶液的體積為10、20、.30、40、50、60、70、80 μ L時，在熒光分光光度儀上測定455nm對應(yīng)的熒光強(qiáng)度F為177、153、.131、110、88、63、42、17，以Cu2+濃度為橫坐標(biāo)，以相對熒光強(qiáng)度F。一 F為縱坐標(biāo)繪制圖，F(xiàn)。=.201，得到Cu2+濃度的工作曲線；線性回歸方程為=Ftl — F = 3.28+2.23c, c的單位為μΜ ; (4)、將HEPES緩沖溶液lOOOuL、甲醇溶液1000uL和吡哆醛肼甲醇溶液200uL加到干凈的熒光比色皿中，用微量進(jìn)樣器吸取VyL待測樣品溶液，加入到此干凈的熒光比色皿中，在熒光分光光度儀上檢測，將測得的熒光強(qiáng)度代入步驟(3)的線性回歸方程，得到濃度C，待測樣品C待測樣=(2200+V待測樣)u LXcX 10 /Vu L,即可求得Cu的濃度。
【文檔編號】C07D213/66GK103980189SQ201410194130
【公開日】2014年8月13日 申請日期:2014年5月8日 優(yōu)先權(quán)日:2014年5月8日
【發(fā)明者】陰彩霞, 霍方俊 申請人:山西大學(xué)