專利名稱：咪唑衍生物光學(xué)異構(gòu)體的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及咪唑衍生物的光學(xué)異構(gòu)體及其制備。
具有式Ⅰ的Medetomidine被認(rèn)為是有選擇性的和有效的α2-受體促效藥，它已被揭示，如在歐洲專利公開號(hào)72615中作為抗高血壓劑和在歐洲專利公開號(hào)187471中作為獸醫(yī)的鎮(zhèn)靜止痛劑。
本發(fā)明提供了作為新化合物的Medetomidine的旋光性d-和e-對(duì)映體和它們無毒的藥物上可接受的酸加成鹽。這些化合物可以通過下式來表示
按照本發(fā)明的特點(diǎn)，外消旋的Medetomidine可通過將該外消旋體先轉(zhuǎn)化成非對(duì)映異構(gòu)體混合物，再用分級(jí)結(jié)晶法將混合物分離成對(duì)映體Ⅱ和Ⅲ。由于Medetomidine是堿，因此它可以通過與旋光性酸如酒石酸反應(yīng)轉(zhuǎn)化成非對(duì)映異構(gòu)體鹽混合物。其它有用的旋光性酸例如為(-)-蘋果酸，(-)-扁挑酸和(+)-樟腦-10-磺酸，(+)-酒石酸對(duì)于拆開外消旋混合物是特別有用的。非對(duì)映體的分離是通過從醇例如甲醇或乙醇或它們的混合物中重復(fù)結(jié)晶來完成的。
在分離非對(duì)映體后，該酸加成鹽能反轉(zhuǎn)為游離堿，即通過用氫氧化鈉制得它堿性水溶液，再用合適的有機(jī)溶劑如二氯甲烷萃取已釋放的堿。
Medetomidine的d-和l-對(duì)映體與有機(jī)酸或無機(jī)酸反應(yīng)形成相應(yīng)的酸加成鹽，該鹽具有與堿相同的治療效能，因此它們能形成藥物上有效的酸加成鹽，例如氯化物、溴化物、硫酸鹽、硝酸鹽、磷酸鹽、磺酸鹽、甲酸鹽、酒石酸鹽、馬來酸鹽、枸椽酸鹽、萃甲酸鹽、水楊酸鹽和抗壞血酸鹽等。
Medetomidine的d-和l-對(duì)映體是有選擇性的和有效的α2-受體促效藥。
腎上腺素能受體是生理上的重要結(jié)合部位，它對(duì)去甲腎上腺素和腎上腺素有特異性，它位于細(xì)胞膜表面。交感神經(jīng)系統(tǒng)的腎上腺素能受體分成兩類不同的亞型，α-受體和β-受體，它們又進(jìn)一步劃分為兩亞組，即是α1和α2以及β1和β2受體。在這些受體類型中，β1、β2和α1主要位于例如平滑肌表面突觸后部位并因此傳遞如平滑肌的收縮或舒張;而α2-受體主要位于去甲腎上腺素能神經(jīng)末端的突觸前部位。如果在生理?xiàng)l件下用去甲腎上腺素刺激α2-受體，則中斷了腎上腺素的釋放，也就是說這是一種負(fù)反饋現(xiàn)象這種負(fù)反饋現(xiàn)象還可以通過某些合成的α2-促效藥象Medetomidine和某些它的近似衍生物來誘發(fā)。
在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中，證明了本發(fā)明的d-和l-對(duì)映體并尤其是d-對(duì)映體同外消旋混合物(即Medetomidine)相比較具有高度增強(qiáng)α2-的選擇性以及具有更高的效力。d-對(duì)映體作為如鎮(zhèn)靜一止痛、抗憂慮或抗高血壓劑的價(jià)值是能預(yù)期的。另外，在α2-腎上腺受體的生理學(xué)和藥理學(xué)的研究中，d-對(duì)映體能用作為藥理學(xué)工具。
本發(fā)明化合物的藥理學(xué)活性測(cè)定如下
1.在體外的α2-促藥效性通過分離，電刺激老鼠輸精管制品來測(cè)定α2-促藥效性(Marshall et al.，Br.J.Pharmac.62，147，151，1978)。在這個(gè)試驗(yàn)物中，α2-促效藥可以通過激活突觸前α2-腎上腺受體的來阻斷因電誘導(dǎo)的平滑肌收縮，并因此減少運(yùn)動(dòng)傳遞質(zhì)的分泌。已知的α2-促效藥如detomidine，Medetomidine和可樂寧是用作參照物。實(shí)驗(yàn)結(jié)果示于表1，在表中，α2-促效藥的作用是用pD2-值表示(即產(chǎn)生最大抑制的50%的試驗(yàn)化合物摩爾濃度的負(fù)對(duì)數(shù))。
表1化合物 α2-促效藥在體外(老鼠輸精管)的pD2d-對(duì)映體9.3l-對(duì)映體6.0(部分促藥效)Medetomidine9.0detomidine8.5可樂寧8.5這些結(jié)果表明Medetomidine的α2-促效藥活性限于d-對(duì)映體。同其它研究的試劑相比較表明d-對(duì)映體增強(qiáng)α2-促效藥活性。
2.在體外α2/α1的選擇性用大鼠的腦膜通過受體結(jié)合實(shí)驗(yàn)來研究作為α2-促效藥的d-對(duì)映體選擇性。正如Virtanen和Nyman在Eur.J.Pharmac.108，163-9，1985上揭示的那樣，d-異構(gòu)體和這些參照化合物對(duì)于同3H-可樂寧(用于α2-受體)和3H-吡唑嗪(用于α1-受體)的競(jìng)爭(zhēng)能力已作了基本研究、試驗(yàn)結(jié)果示于表2，在表中，研究試劑對(duì)于同3H-可樂寧和3H-吡唑嗪的結(jié)合競(jìng)爭(zhēng)能力用IC50-值表示(即為對(duì)于替換50%放射活性配位體所需的競(jìng)爭(zhēng)配位體的摩爾濃度)。
表2化合物3H-可樂寧3H-吡唑嗪 α2/α1-選擇性替換IC50，nM 替換IC50，nMd-對(duì)映體1.25501945849l-對(duì)映體461899754129Medetomidine3.3167005060Detomidine3.724265可樂寧6.46200969上述結(jié)果表明d-對(duì)映體同Meaetomidine和其它參照化合物比較是一個(gè)最有選擇性的α2-促效藥。
3.鎮(zhèn)靜止痛作用通過用小鼠的自發(fā)能動(dòng)性和因劇痛翻試驗(yàn)來研究本發(fā)明化合物鎮(zhèn)靜止痛性能。用Animex活性測(cè)定儀測(cè)定小鼠和大鼠的自發(fā)能動(dòng)性。在2分鐘測(cè)定周期前30分鐘，試驗(yàn)化合物經(jīng)腹膜注射給藥。
在劇痛翻滾試驗(yàn)中，將研究化合物和食鹽水以同樣情況給大鼠皮下用藥，過45分鐘后腹膜注射給于1ml1%乙酸，接著在25分鐘時(shí)間記錄翻滾的數(shù)目(Kosleretal.，F(xiàn)red.Proc，18412，1959)。
結(jié)果示于表3和表4。
表3研究化合物在減低小鼠自發(fā)能動(dòng)性的ED50值化合物 ED50(mg/kg s.c)d-對(duì)映體0.02l-對(duì)映體＞10Medetomidine0.05Detomidine0.3可樂寧0.3表4研究化合物在小鼠以乙酸誘發(fā)劇痛翻滾試驗(yàn)中的ED值化合物 ED50(mg/kg s.c)d-對(duì)映體0.01l-對(duì)映體＞10Medetomidine0.02Detomidine0.02可樂寧0.03這些結(jié)果表明d-對(duì)映體同外消旋混合物(Medetomidine)和其它參照化合物相比較有增強(qiáng)鎮(zhèn)靜止痛的性能。Medetomidine的鎮(zhèn)靜止痛作用局限于d-對(duì)映體。
4.抗憂慮作用使用Handley和Mithoni在Naunyn-Schmiedeb，Arch，Pharmacol.237，1-51984敘述的方法研究本發(fā)明化合物的抗憂慮作用。在本試驗(yàn)中，測(cè)定大鼠在升高的t-迷宮中對(duì)開口的和閉合的通道的探索方式。表明抗憂慮藥增加了對(duì)與開口通道相關(guān)的探索。在t-迷宮的中央放置一個(gè)老鼠并于5分鐘內(nèi)記錄老鼠進(jìn)入開口和閉合通道的次數(shù)，得到的結(jié)果示于表5。
表5藥物/劑量，mg/kg進(jìn)入平均數(shù)(n＝6)開口閉合總數(shù)開口/總數(shù)NaCl3.48.612.00.28d-對(duì)映體0.00034.810.614.00.200.0013.210.613.80.230.0034.09.513.50.290.015.88.814.60.390.032.53.05.50.45安定15.210.515.70.33上述結(jié)果表明d-對(duì)映體在升高的t-迷宮試驗(yàn)中有抗憂慮的表現(xiàn)。
眾所周知對(duì)于病癥斷除的連貫憂慮狀態(tài)是由于去甲腎上腺素能的機(jī)能亢進(jìn)。因此，用例如可樂寧藥物降低去甲腎上腺素的水平，能成功地治療這些病癥。在大鼠實(shí)驗(yàn)中表明d-對(duì)映體能減抄去甲腎上腺素的釋放并因此在中樞神經(jīng)系統(tǒng)和周圍神經(jīng)系統(tǒng)調(diào)和交感神經(jīng)。通過給大鼠施用d-對(duì)映體后，測(cè)定MHPG-SO4的CSF濃度(中樞神經(jīng)去甲腎上腺素的主要代謝產(chǎn)物)已經(jīng)清楚地證明了上述觀點(diǎn)。該結(jié)果示于表6。
表6
d-對(duì)映體劑量μg/kg CSF MHPG-SO4(%對(duì)照)(在施用d-對(duì)映體4小時(shí)后)01003-1010-2030-30100-655.抗高血壓作用本發(fā)明化合物的抗高血壓性能研究如下將標(biāo)準(zhǔn)體重的Sprague-Dawly大鼠首先用氨基甲酸乙酯麻醉，然后將股動(dòng)脈用聚乙烯管連接到血壓傳感器上，再將試驗(yàn)物注射入股靜脈，用記錄器自動(dòng)記錄血壓和脈博頻率，結(jié)果示于表7。
表7在麻醉大鼠中d-對(duì)映體的抗高血壓作用劑量mg/kg血壓下降%心率下降%0.001-8-210.003-23-400.01-43-470.03-45-480.1-45-50結(jié)果表明d-對(duì)映體具有明顯的抗高血壓和心動(dòng)徐緩作用。
因此d-和l-對(duì)映體及它們的無毒性的藥物上可接受的酸加成鹽或它們的混合物可以腸胃外、靜脈注射或口服給藥。一般，將有效量的本發(fā)明化合物與合適的藥物載體結(jié)合使用。按本文使用的術(shù)語(yǔ)“有效量”是指包括那些能產(chǎn)生所需要的活性但不會(huì)發(fā)生有害付作用的量。在特定場(chǎng)合時(shí)使用的正確量取決于許多因素如給藥方法，哺乳動(dòng)物種類，為施用本發(fā)明衍生物的條件等，自然也取決于衍生物的結(jié)構(gòu)。
同本發(fā)明化合物一起使用的具有代表性的藥物載體可以是固體或液體，通常以按照愿望給藥的具體安排方式來選擇。這樣，固體載體的實(shí)例包括乳糖、蔗糖、明膠和瓊脂，液體載體的實(shí)例包括水、糖漿、花生油和橄欖油。其它合適的載體是在藥劑配方領(lǐng)域中那些技術(shù)人員所公知的。本發(fā)明的衍生物和載體相結(jié)合可以制成許多可接受的形式如片劑、膠囊、栓劑、溶液、乳劑和粉劑。
以下實(shí)例說明本發(fā)明新的對(duì)映體的制備。
實(shí)例Medetomidine(堿)14g溶于50ml甲醇，10.5g(+)-酒石酸溶于50ml甲醇，將兩種溶液混合后，蒸發(fā)溶劑至體積為50ml，混合物注入冰浴中得到9g白色沉淀。將沉淀懸浮于25ml乙醇中，混合物置于超聲波中14分鐘然后過濾，用蒸汽浴加熱將沉淀溶于20ml無水乙醇和60ml甲醇的混合物，冷卻后得到5g沉淀(旋光度+55°)，用60ml甲醇重結(jié)晶后得到4.1g產(chǎn)品，旋光度+60°。將產(chǎn)品進(jìn)行反復(fù)重結(jié)晶直至旋光度不再增加為止。d-對(duì)映體酒石酸鹽溶于水中，將溶液配制成鹼性，d-對(duì)映體溶于有機(jī)溶劑如二氯甲烷或乙醚。d-對(duì)映體堿的旋光度為+75°。
d-對(duì)映體可以從母液中分離得到。
權(quán)利要求
1.一種分離Medetomidined和1對(duì)映體的方法，該方法包括將外消旋的Medetomidine通過與旋光性酸反應(yīng)轉(zhuǎn)化成非對(duì)映異構(gòu)體鹽混合物，然后通過分級(jí)結(jié)晶分離非對(duì)映異構(gòu)體鹽混合物。
2.按照權(quán)利要求1的方法，其中使用的旋光性酸是(+)-酒石酸。
3.一種制備藥物組合物的方法，包括將Medetomidine的d-或l-對(duì)映體或它的無毒的藥物上可接受的酸加成鹽同藥物載體相混合。
全文摘要
分離得到Medetomidine的d和l對(duì)映體以及它們的鹽是有選擇性的和有效的α-受體促效藥。
文檔編號(hào)C07B57/00GK1030576SQ88104440
公開日1989年1月25日 申請(qǐng)日期1988年7月16日 優(yōu)先權(quán)日1987年7月16日
發(fā)明者阿托·約翰內(nèi)斯·卡雅賴倫, 賴莫·艾那里·弗爾坦倫, 艾諾·予漢尼薩沃賴倫 申請(qǐng)人:發(fā)莫斯泰馬股份公司