專利名稱：含生化活性基團(tuán)的錸二肟和锝-99m二肟配合物的硼酸加合物的制備方法
放射性標(biāo)記生化活性基團(tuán)在診斷圖象領(lǐng)域顯得越來越重要?；旧险f來，生化活性基團(tuán)是一種代謝底物或抑制劑，要么是一種對特殊受體有親合力的分子。有關(guān)各種生化活性基團(tuán)某些性質(zhì)(例如與受體結(jié)合或新陳代謝)的知識顯示(至少在理論上)，這些基團(tuán)的放射性標(biāo)記模式可用于顯像特定器官的功能和/或狀況，而不僅僅表現(xiàn)出血液流向該器官而已。一種有效的配合物其放射性核素與生化活性基團(tuán)相互穩(wěn)定結(jié)合，并且，其配合物表現(xiàn)行為(或者說所起作用)本質(zhì)上如游離生物活性基團(tuán)一樣。
制備具此類性質(zhì)的有效配合物的許多嘗試已有報(bào)導(dǎo)，例如Fowler等人(Int.J.Appl.Radiat.Isot.1986，27，P.663—8“2—脫氧—2〔18F〕氟—D—葡萄糖的新陳代謝研究目前狀況”)研究過用18F標(biāo)記新陳代謝底物脫氧葡萄糖、用于腦診斷顯像。Winchell等人也嘗試過腦和肺顯像(J.Nucl.Med.，1980，21，P.940—6，“I—123—標(biāo)記胺用于腦研究的進(jìn)展I—123碘代苯基烷基胺在鼠腦中的定位”和J.Nucl.Med.，1980，21，P.947—52，“N—異丙基—〔123I〕P—碘代苯異丙胺單一通道腦攝取排出；與腦觸突體結(jié)合；以及在狗和猴腦中的定位”)，他們報(bào)道過苯異丙胺類化合物(已知與特定受體相互作用)的120I放射性標(biāo)記。稱之為“Spectamine”的放射性碘化苯異丙胺目前已投放市場用于腦顯像。
游離脂肪酸是通常充滿心肌層的重要底物，因此將它作為研究游離脂肪酸的β—氧化代謝途徑可能是有用的。因此，Van derWall等人(Eur.J.Nucl.Med.，1986，12，P.S11—S15，“放射性標(biāo)記游離脂肪酸的心肌顯像應(yīng)用及局限性”)研究過用發(fā)射正電子的同位素，如11C、13N和15O標(biāo)記的，以及用γ—放射同位素123I標(biāo)記的游離脂肪酸。另外、Jones等人(J.Nucl.Med.，1988，29(5)，P.935，“新型〔Tc99m〕—二氨基二硫醇—脂肪酸〔TcN2S2FA〕配合物的合成及其作為心肌顯像劑的評價(jià)”)已報(bào)道過使用帶锝—99m(99mTc)的脂肪酸顯像正常心肌層的嘗試。
乳癌中特異雌激素受體的發(fā)現(xiàn)導(dǎo)自對各種類固醇，例如雌激素類及其衍生物如雌二醇等放射性標(biāo)記的研究。人們相信，放射性標(biāo)記雌激素能顯示受體水平，并有助于確定乳癌類型及治療水平。為此，Jagoda等人(J.Nucl.Med.，1984，25，P.472—7，“〔125I〕—17—碘代乙烯基11—甲氧基雌二醇高親合性雌激素受體放射藥物學(xué)的體外體內(nèi)性質(zhì)”)研究了用于此類診斷的125I標(biāo)記甲氧雌二醇。
Gibson等人(Biochem Pharm.，Vol.32，No.12，P.1851—56，1983，“蠅蕈堿乙酰膽堿受體拮抗劑對腦和心臟受體親和力之區(qū)別”和J.Nucl.Med.，Vol.25，No.2，P.214—222，1984年2月，“I—125 4—IQNB和H—3QNB在體內(nèi)及體外的特征”)研究了在心臟和腦組織中用125I和3H放射性標(biāo)記的蠅蕈堿受體底物，例如二苯乙醇酸3—喹寧環(huán)酯(QNB)及其衍生物。
正如Martin等人(“缺氧細(xì)胞標(biāo)記物〔3H〕氟—米索硝唑的增強(qiáng)結(jié)合”J.Nucl.Med.，Vol 30，No.2，194—201(1989))及Hoffman等人(“大腦局部缺血癥中缺氧示蹤物〔H—3〕米索硝唑的結(jié)合”，Stroke，1987，18，168)，所報(bào)道的，缺氧癥介導(dǎo)的硝基—雜環(huán)基團(tuán)(如硝基咪唑類及其衍生物)已知保留于缺氧(即氧氣不足)機(jī)體組織中。腦心臟中的缺氧組織，一般因動(dòng)脈阻塞或者因需血增加而供血不足引起的局部缺血而產(chǎn)生。另外， Koh等人(J.Nucl.Med.，1989，30，P.789，“使用〔F—18〕氟米索硝唑?qū)δ[瘤缺氧癥的顯像”)嘗試了用18F放射性標(biāo)記的硝基咪唑作腫瘤的診斷顯象。
上面提到的以各種放射性標(biāo)記生化活性基團(tuán)作診斷顯象的嘗試遠(yuǎn)未提供理想的結(jié)果。例如，正電子放射同位素由迥旋加速器產(chǎn)生，需要不能廣泛采用的精良設(shè)備使之顯象。同樣123I的半衰期為13小時(shí)，生產(chǎn)成本很高。再者，99mTc與脂肪酸配合物并未表現(xiàn)出心肌攝入的游離脂肪酸特征。最后，氚標(biāo)記硝基咪唑系β—放射核素，僅能用于自動(dòng)射線照相研究，而不適宜診斷顯像。
保持了其生化活性和這些基團(tuán)的親和性并且用適當(dāng)?shù)?，易于使用的放射性核素?biāo)記的生化活性基團(tuán)放射標(biāo)記配合物，于此技術(shù)領(lǐng)域中極為有用。
根據(jù)本發(fā)明，錸二肟和锝—99m二肟配合物的硼酸加合物均與生化活性基團(tuán)結(jié)合，并且在例如用锝—99m作為診斷顯像劑時(shí)，用錸放射性核素作為放射治療劑時(shí)是有用的。這些新的配合物由下式代表IMX(Y3)Z其中M是锝—99m或錸。除非特別指明，“錸”包括186Re和188Re放射性核素及其混合物，也可包括185Re和187Re之總合。在式I及整個(gè)說明書中該符號定義如下X是陰離子；Y是具有下式結(jié)構(gòu)的連二肟或其可藥用的鹽， 而R1和R2各自分別是氫、鹵素、烷基、芳基、氨基或含氮或氧的5—，6—元雜環(huán)，要么R1和R2結(jié)合起來形成—(CR8R9)n—，其中n是3、4、5或6，而R8、R9各自獨(dú)立地為氫或烷基；Z是有下式結(jié)構(gòu)的硼衍生物，IIIB—(A1)p—R3其中R8是(或者含有)一個(gè)生化活性基團(tuán)，并且當(dāng)P＝0時(shí)(A1)p不存在，P≥1則(A1)p表示間隔基團(tuán)。
如上所示，當(dāng)由于生化活性基緊貼配合物的其余部份，而使其作用可能抑制時(shí)，則它(該生化活性基團(tuán))可通過間隔或者連結(jié)基團(tuán)(A1)p與配合物結(jié)合。該間隔基團(tuán)可以是任何化學(xué)組成部份，它的作用只是從物理意義上拉開(或者說隔離)R3上的生化活性基團(tuán)與式I配合物的其余部份之間的距離。例如，在間隔基團(tuán)中，若P為1時(shí)的A1，或者P＞1時(shí)形成直鏈或支鏈的各種A1單元各自獨(dú)立地選自如下基團(tuán)—CH2—、—CHR4—、—CR4R5—、—CH＝CH—、—CH＝CR4—、—CR4＝CR5—、—C≡C—環(huán)烷基、環(huán)烯基、芳基、雜環(huán)基、氧、氧、 —NH—、—HC＝N—、—CR4＝N—、—NR4—、—CS—；其中R4和R5各自獨(dú)立地選自烷基、鏈烯基、烷氧基、芳基、5—或6—元氮或氧雜環(huán)、鹵素、羥基或羥烷基。
在本技術(shù)領(lǐng)域中使用的對各種間隔基團(tuán)的考慮是已知的，視所需配合物的設(shè)計(jì)要求，采用適當(dāng)?shù)腜值。優(yōu)選P≤100，最好P≤20。
下面定義用于描述本發(fā)明的配合物的各種術(shù)語。這些定義適用于整個(gè)說明書采用的術(shù)語(除非特殊情況下另有限制)，這些術(shù)語既可單獨(dú)使用，也可作為一個(gè)較大基團(tuán)的一部份。
“烷基”、“鏈烯基”和“烷氧基”既指直鏈也指支鏈基團(tuán)，其碳原子數(shù)優(yōu)選1—10。
“芳基”代表苯基或取代苯基，優(yōu)選的是苯基和以1、2、3烷基、鹵代烷基、氨基烷基、烷基氨烷基、二烷基氨烷基、烷氧基、烷氧烷基、鹵素、氨基、羥基或甲?；〈谋交?br> “鹵化物”“鹵代”和“鹵素”意指氟、氯、溴、碘。
短語“含氮5—或6—元雜環(huán)”指至少含一個(gè)氮的所有5—和6—元雜環(huán)。典型的脂族基團(tuán)為結(jié)構(gòu)如下式的化合物的脫氫衍生物 其中m是0或1，而A是—O—、—N—R6、—S—或—CH—R6其中R6是氫、烷基、芳基或芳烷基。這些基團(tuán)包括吡咯烷基、哌啶基、嗎啉基、哌嗪基、4—烷基—哌嗪基、4—烷基—哌啶基和3—烷基—吡咯烷基。也包括在“5—和6—元含氮雜環(huán)”這一短語中的是芳香基團(tuán)。典型的芳香基團(tuán)是吡咯基、咪唑基、噁唑基、吡唑基、吡啶基和嘧啶基。上面的基團(tuán)可通過雜原子或碳原子相連。
短語“5—或6—元含氮或氧雜環(huán)”表示含至少一個(gè)氮原子或氧原子的所有5—元和6—元雜環(huán)。典型的基團(tuán)是如上述的在定義“5—或6—無含氮雜環(huán)”這一短語時(shí)舉出的那些，其它典型基團(tuán)是1，4—二噁烷基和呋喃基。
M為錸的本發(fā)明配合物，其生化活性基團(tuán)聯(lián)結(jié)到美國專利4,871,836(1989年10月3日批準(zhǔn))中定義的配合物上，而式I中M是Tc—99m的配合物，其生化活性基團(tuán)連結(jié)到于美國專利4705849(1987年11月10日)中定義的配合物上。
本發(fā)明提供含放射性標(biāo)記的生化活性基團(tuán)的配合物。適合本發(fā)明采用的生化活性基團(tuán)系任何新陳代謝底物或抑制劑、或者是與特定受體有親合力的一種分子。需明白，用于本發(fā)明目的的生化活性基團(tuán)(對特定受體位點(diǎn)具有親合性的分子)的范疇，限定于能按此后敘述的方法結(jié)合到式I配合物上的這類基團(tuán)。
這類合適的生化活性基團(tuán)的例子包括但并不局限于缺氧癥—介導(dǎo)的硝基—雜環(huán)基團(tuán)、苯異丙胺類、類固醇類(例如雌激素或雌二醇)、糖類(如葡萄糖衍生物)、脂肪酸、巴比土鹽、磺胺、單胺氧化酶底物，和抑制劑、抗高血壓藥物、蠅蕈堿受體底物(如二(對溴苯基)乙醇酸3—喹寧環(huán)酯)以及多巴胺受體底物如螺環(huán)哌啶酮。
本發(fā)明的配合物在此以前從未被公開過，并能有效利用它們特殊生化活性基團(tuán)的種種性能(比如受體結(jié)合、新陳代謝)提供某特定位點(diǎn)的顯像或治療。M為99mTc的本發(fā)明配合物，提供高效，十分容易使用的診斷顯像產(chǎn)物，其特征是放射性核素配合物與生化活性基團(tuán)之間的共價(jià)鍵合，而基本上保留該游離生物基團(tuán)的攝入特性。本發(fā)明用于診斷的M為99mTc的配合物有一系列典型實(shí)例很有價(jià)值，這些實(shí)例包括但不僅限于，例如當(dāng)生化活性基團(tuán)是由缺氧癥介導(dǎo)的硝基部份的還原作用捕獲的硝基雜環(huán)基(此后稱為“缺氧癥介導(dǎo)的硝基雜環(huán)基團(tuán)”)時(shí)，用于例如心臟、腦、肺和腫瘤的缺氧組織顯像。當(dāng)生化活性基團(tuán)是親油含胺化合物(如苯異丙胺)時(shí)，用于腦和肺顯像；當(dāng)生化活性基團(tuán)是糖(如葡萄糖衍生物)時(shí)用于腦、心臟或腫瘤顯像；當(dāng)生化活性基團(tuán)是脂肪酸時(shí)用于心臟顯像；當(dāng)生化活性基團(tuán)是類固醇(如顯像乳癌的雌激素)時(shí)顯像類固醇受體位點(diǎn)。
此外，當(dāng)M是Re，本發(fā)明提供用于放射性治療適應(yīng)癥的穩(wěn)定鍵合配合物。例如，上面提到的U.S4,871,836(1989.10.3批準(zhǔn))敘述了用于放射治療的Re配合物。本發(fā)明的含有雌二醇的Re配合物可用于治療乳癌。并且，基于已知腫瘤中存在缺氧組織，其中生化活性基團(tuán)是缺氧癥介導(dǎo)硝基雜環(huán)基的本發(fā)明的Re配合物也宜于作放射性治療用。當(dāng)M是Re的本發(fā)明化合物在用于放射性治療時(shí)，可注射入人體并在所希望的部位濃縮。它能使放射性核素定靶于具有極大特異性的所希望的位點(diǎn)，且然而必需注意，只有當(dāng)這些區(qū)域存在足夠相互作用位點(diǎn)(如雌激素受體或缺氧組織)使之提供該需治療區(qū)域的錸的治療水平時(shí)，放射性治療才是可能的。
除了Koh等人和Hoffman等人(上面提到的參考文獻(xiàn))外，缺氧癥介導(dǎo)的硝基雜環(huán)基(即由缺氧癥介導(dǎo)的硝基部份的還原作用捕的硝基雜環(huán)基團(tuán))的實(shí)例包括下述文章中所描述的這些“硝基—雜環(huán)治療劑的新陳代謝活化作用”(G.L.Kedderis等人，Drug Metabolism Reviews，19(1)，P.33—62，1988)；“癌癥放射和化學(xué)治療中的缺氧癥介導(dǎo)的硝基—雜環(huán)藥物”(G.E.Adams等人，BiochemPharmacology，Vol.35，No.1，P.71—76，1986)；“1—取代2—硝基咪唑類化合物結(jié)構(gòu)與活性的關(guān)系于體外試驗(yàn)中分配系數(shù)和側(cè)鏈羥基基團(tuán)對放射性敏化的影響”“D.M.Brown等人，Rad.Research，90，98—108，1982)；“缺氧細(xì)胞放射性敏化劑研制中結(jié)構(gòu)與活性之間關(guān)系”(G.E.Adams等人Int。J.Radiat.Biol.，Vol.35，No.2，133—50，1979)；以及“缺氧細(xì)胞放射性敏化劑研制中結(jié)構(gòu)與活性之間關(guān)系”(G.E.Adams等人，Int.J. Radiat.Biol.，Vol.38，No.6，613—626，1980)。所有公開的這些適合本發(fā)明配合物R3采用的硝基雜環(huán)基化合物，均通過參考結(jié)合在本文中。這些化合物包括可以含有側(cè)鏈A1的硝基雜環(huán)基，A1可作為間隔基團(tuán)，將硝基雜環(huán)部份連結(jié)到硼原子和本發(fā)明式I配合物的其余部份上。
當(dāng)生化活性基團(tuán)是缺氧癥介導(dǎo)硝基雜環(huán)基時(shí)，配合物的間隔基團(tuán)—R3部份可由下式表示 其環(huán)部份是5—或6—元環(huán)或者芳香環(huán)其中n是5—或6—元環(huán)上可供取代位的總數(shù)；一個(gè)或多個(gè)R取代基各自獨(dú)立地選自氫、鹵素、烷基芳基烷氧基、氧雜烷基、羥基烷氧基、鏈烯基、芳烷基、芳烷基酰胺、烷基酰胺、烷基胺和(烷基胺)烷基；X1可以是氮、氧、硫、—CR＝或—CRR—；而(A1)P可以不存在，這種情況是當(dāng)式IV、IV′或IV″的R3基團(tuán)通過氮原子或碳原子連接到本發(fā)明配合物的其余部份時(shí)，或者(A1)P是連接基團(tuán)，正如上面所定義過的。
上述有關(guān)缺氧癥介導(dǎo)硝基雜環(huán)基團(tuán)的參考文獻(xiàn)，反映了在此技術(shù)領(lǐng)域中目前的觀點(diǎn)即硝基雜環(huán)基的還原勢直接影響它在缺氧組織中的滯留。因此，間隔基團(tuán)(A1)P的挑選(在R3是缺氧癥介導(dǎo)硝基雜環(huán)基的情況下)不但取決于它隔斷R3與配合物其余部份的能力，也要考慮它對缺氧癥介導(dǎo)硝基雜環(huán)基團(tuán)還原勢的影響。同樣，本領(lǐng)域的現(xiàn)有知識使該領(lǐng)域的技術(shù)人員會理解根據(jù)文獻(xiàn)中指出的已知還原勢效應(yīng)在式IV、IV′、IV″的基團(tuán)中選擇A1、R、X1和—No2的值或/和位置。
優(yōu)選的缺氧癥介導(dǎo)硝基雜環(huán)基團(tuán)是2—、4—和5—硝基咪唑類，由下式表示 還可是硝基呋喃和硝基噻唑衍生物，例如 典型基團(tuán)(包括(A1)P間隔基)包括但并不只限于) 當(dāng)R3是缺氧癥介導(dǎo)硝基雜環(huán)基時(shí)最優(yōu)選的是2—硝基咪唑及其衍生物。
當(dāng)R3上的生化活性基團(tuán)是類固醇時(shí)，采用類固醇，取代類固醇衍生物或者非類固醇衍生物均可使選擇的R3基團(tuán)對類固醇受體有親和力。例如，當(dāng)R3是雌二醇 (A1)P連接基團(tuán)或硼原子(P＝O的情況)可連在分子的任何可能位置上，但優(yōu)選A1既可連于B環(huán)的一個(gè)原子上或者也可連于D環(huán)的一個(gè)原子上。此外，雌二醇分子可以在各適宜位置上由一個(gè)或多個(gè)R取代，此外R正如上面定義過的一樣。另外，類固醇分子可由已知對準(zhǔn)激素受體具有已知親和力的非甾族二醇置換，例如 其中(A1)P和R與上面定義相同。
當(dāng)生化活性基團(tuán)是蠅蕈堿受體底物時(shí)，配合物的間隔基—R3部份由下式表示 其中(A1)P和R和上面定義相同，R′是叔胺或者季胺，例如3—喹寧環(huán)醇或取代的3—喹寧環(huán)醇。
所有實(shí)施例和下述方法的敘述除特別指明外均以M是錸，包括采用“載體錸”(carrier rhenium)的情況。此短語“載體錸”意味著所使用的錸化合物含有10—7M—10—5M濃度非放射性錸。
制備本發(fā)明M是錸的配合物，可采用+3、+4、+5或+7氧化態(tài)的錸完成。能得到的+3氧化態(tài)錸化合物的例子是ReCl3(CH3CN)(PPh3)2和〔Re2Cl3〕(NBu4)2，其中Ph＝苯基、Bu＝丁基。Re(IV)可使用K2ReCl6、而Re(VII)可采用NH4ReO4或KReO4制備。Re(V)則采用〔ReOCl4〕(NBu4)和〔ReOCl4〕(AsPh4)以及ReOCl3(PPh3)2和ReO2(吡啶)4。其它本領(lǐng)域?qū)I(yè)人員所知的Re(III)、Re(IV)、Re(V)、Re(VII)試劑也可使用。
本發(fā)明的Re配合物較宜采用下式的Re中間配合物制備VReX(Y)3(其中X和Y和上面定義同)，在1989年8月28日申請的，題為“錸三(二肟)配合物”，尚未審批的U.S序號398879申請案中有所描述。將式V的中間體與硼酸衍生物(如下式)反應(yīng) 便可得到本發(fā)明的錸配合物。式V的中間體可使用上面介紹過的Re(III)、Re(IV)、Re(V)或Re(VII)試劑與提供陰離子部份(X)的原料，以及式II的連二肟相結(jié)合制備，混合物于25℃—100℃左右加熱反應(yīng)約5分鐘至8小時(shí)。若是使用Re(IV)、Re(V)或Re(VII)，應(yīng)當(dāng)采用已知方法，即加入還原劑，將初始原料充分還原為Re(III)。
制備本發(fā)明M為锝—99m的配合物，最好采用高锝酸鹽離子形式的锝—99m。高锝酸鹽離子則可從市售購得的锝—99m母—子體發(fā)生器獲得，這種锝是+7氧化態(tài)。在本技術(shù)領(lǐng)域中，使用這種類型的生成元素來產(chǎn)生高锝酸鹽是已知的并在美國專利3,369,121和3,920,995中均有詳細(xì)敘述。這些生成元素通常用鹽水洗脫，并以鈉鹽形式便獲得高锝酸離子。
99mTc配合物制備方法可選用本發(fā)明制備Re配合物的方法，包括將Re(III)、Re(IV)、Re(V)、Re(VII)或高锝酸離子(鹽的形式)與一種陰離子源、一種式VI的硼酸衍生物或其可藥用的鹽(其中R2和R′7各自是氫、烷基或芳基、或者R7和R′7連在一起為—(CR8R9)-n、這里n是2—6)以及下式的一種二肟或其可藥用的鹽相結(jié)合。 式VI化合物，若其中R3是如式IV、IV′、IV″，所定義的缺氧癥介導(dǎo)硝基雜環(huán)基，則系新的中間體，屬本發(fā)明的一部份。這類中間體結(jié)構(gòu)如下 這些化合物可以用已知的方法制備，例如下式的硼酸衍生物 其中L是離去基團(tuán)，例如鹵素等等，可于溶劑中(如二甲基甲酰胺)和有堿(如碳酸鉀)存在時(shí)與下式化合物偶合 這是制備式VII新中間體較好的方法，而制備VII′和VII″新型中間體較宜使用下式的化合物 在溶劑中有堿存在下與下式化合物偶合 或 陰離子基(X)源可以是水或者能解離釋放出適當(dāng)陰離子的酸、鹽。典型的陰離子基是羥基、鹵離子、異硫氰酸酯基(N＝C-＝-S)和硫氰酸酯基(S—C＝N)。優(yōu)選的陰離子基是鹵離子，以氯最好。假如陰離子源不是水，那么它應(yīng)當(dāng)具有適當(dāng)濃度，以便在反應(yīng)期間能有效地與可能存在的水競爭。業(yè)已發(fā)現(xiàn)，在反應(yīng)混合物中應(yīng)具有的陰離子源濃度大約為0.1—2.0摩爾。
式VI、VII、VII′和VII″的硼酸衍生物最好具有5—400左右毫摩爾的濃度，而式II的二肟的濃度優(yōu)選9—250毫摩爾。
假如將高锝酸離子、陰離子源、硼酸衍生物和二肟混合物于約2 5℃—100℃加熱5分鐘—3小時(shí)左右，則99mTc配合物形成最為順利。反應(yīng)最好在含水介質(zhì)或含水、醇混合物中，于pH小于或等于5左右進(jìn)行。以Re(III)、Re(IV)、Re(V)或(VII)為初始原料的Re配合物也可使用此法形成。但是，正如前面提到的R3或(A1)P基團(tuán)可能對上述溫度和pH參數(shù)敏感的Re配合物以及Tc—99m配合物則最好采用中間體配合物MX(Y)3與式VI、VII、VII′或VII″硼酸衍生物反應(yīng)。反應(yīng)可以在水介質(zhì)或含水乙醇混合物中，于25—100℃左右，pH≤5進(jìn)行約5分鐘至8小時(shí)。
假如采用的是含高锝酸或Re(IV)、Re(V)、Re(VII)化合物、反應(yīng)混合物中也應(yīng)當(dāng)含有還原劑。亞錫離子是較好的還原劑，可以以亞錫鹽的形式，例如鹵代亞錫(氯化亞錫或氟化亞錫)引入。還原劑的濃度為約10毫摩爾至150毫摩爾。
制備藥盒時(shí)，可加入各種配位劑(在本領(lǐng)域也稱作螯合劑)，作為配位反應(yīng)的一部分，當(dāng)然這些配位劑應(yīng)當(dāng)是可供藥用的。典型的配位劑是二亞乙基三胺—五乙酸(DTPA)、亞乙基二醇—二(β—氨基乙基醚)—N、N′—四乙酸(EGTA)、乙二胺四乙酸(EDTA)檸檬酸、酒石酸和丙二酸等。
配位反應(yīng)混合物中也可有促進(jìn)劑(催化劑)用于增進(jìn)產(chǎn)品放射性化學(xué)純度(即所需要的化學(xué)形式的放射活性百分?jǐn)?shù))。典型的促進(jìn)劑是α—羥基羧酸、例如檸檬酸、酒石酸、丙二酸。
以锝—99或錸，研究了本發(fā)明配合物的結(jié)構(gòu)，證明是 其中M＝99mTc或Re在欲使用的地方(或附近)配制本發(fā)明的配合物是很方便的。含有各成份的藥盒屬本發(fā)明的組成部份，即除了錸和锝離子外，尚需準(zhǔn)備式I錸或锝二肟配合物的硼加合物。這樣的藥盒含一種陰離子源，一種式VI、VII、VII′、VII″的硼酸衍生物或其可藥用鹽、一種式II的二肟或其可藥用鹽以及一種還原劑，還可按需選擇性地加入配位劑。
本發(fā)明M是锝的藥盒可在水溶液中配制，化合物于約100℃加熱10—30分鐘左右。為使藥盒達(dá)極大穩(wěn)定性并使標(biāo)記產(chǎn)物的放射化學(xué)純度達(dá)最大值，藥盒的pH值可用藥學(xué)上可接受的酸或堿(如鹽酸或氫氧化鈉)調(diào)至約2.0—5.5范圍內(nèi)藥盒的pH最好是大約3.0。藥盒最好采用凍干形式，也可使用在溶液中含一些或所有成份的藥盒，但它們不如相應(yīng)的凍干藥盒有效?？刹捎帽绢I(lǐng)域常用的已知分離方法、分離所需配合物。
采用高濃快速靜脈法注射的方式，可將本發(fā)明的配合物施用于宿主。注射劑量視需要而定，比如正如本領(lǐng)域所熟知需要產(chǎn)生有效的診斷影象或所需放射性治療效果。
本發(fā)明優(yōu)選的配合物是R3為缺氧癥介導(dǎo)硝基雜環(huán)基、苯異丙胺、類固醇或蠅蕈堿受體底物。最為優(yōu)選的是R3為2—硝基咪唑或其衍生物，〔4—〔2—〔(1—甲基乙基)—氨基〕丙基苯基〕，雌二醇或其衍生物，或者二(對溴苯基)乙酸酯3—喹寧環(huán)酯。
本發(fā)明的配合物中的(A1)P優(yōu)選烷基，氧雜烷基、羥烷基羥烷氧基、鏈烯基、芳烷基、芳烷基酰胺、烷基酰胺、烷基氨和(烷基胺)烷基。
(A1)P最為優(yōu)選的是如下基團(tuán)—(CH2)2—3，—CH2—CH＝CH—CH2—， (CH2)1—2，—(CH2)2O—，—CH2CH(OH)CH2OCH2—， —(A3—O—A3′)1—3和—(A3—NH—A3′)1—3；其中A3和A′3系相同或不同的烷基。
下面各例是本發(fā)明的具體實(shí)施方案。
實(shí)施例1〔99Tc(氯)(二甲基乙二肟)3〔4—〔2—〔(1—甲基乙基)氨基〕丙基〕苯基〕硼〕PF6將0.20429g(1.76mmol)二甲基乙二肟和0.13508g(0.6mmol)〔4—〔2—〔(1—甲基乙基)氨基〕丙基〕苯基〕硼酸溶于20ml乙醇和5ml水中。加入溶解于6ml 3M HCl中的0.09035g(0.5mmol)高锝酸銨。伴隨攪拌，用5分鐘的時(shí)間，滴加入溶解于5ml 4MHCl中的0.21492g(1.1mmol)氯化亞錫。溶液的顏色變成濃橙棕色，加入20ml水，并把該反應(yīng)混合物回流攪拌2小時(shí)。用二氯甲烷抽提盡反應(yīng)混合物，用六水硫酸鈉干燥合并的CH2Cl2組分，并用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮。將甲醇4M HCl和NH4PF6的甲醇溶液加到CH2Cl2濃縮物中。如PF6-鹽的所需產(chǎn)物，通過蒸發(fā)沉淀。通過過濾收集橙色沉淀物，用水洗滌并真空干燥。產(chǎn)率0.122g(31％)。
TcClC24H39N7O6BPF6CH2Cl2原素分析計(jì)算值C，34.43；H，4.68；N，11.48；實(shí)測值C，34.25；H，4.45；N，11.66。
實(shí)施例299mTc(氯化)(二甲基乙二肟)3〔4—〔2—〔(1—甲基乙基)氨基〕丙基〕苯基〕硼在5ml硅血清管瓶中，定量加入1.7mg二甲基乙二朊，7.0mg〔4—〔2—〔(1—甲基乙基)氨基〕丙基〕苯基〕硼酸，20mg檸檬酸，2mg DTPA，100mg NaCl和50μg SnCl2(于4M HCl中)(以0.5ml總體積的鹽水的形式)。加入0.5ml99mTc O-4發(fā)生器洗脫劑，在100℃加熱該混合物15分鐘，通過HPLC測定，所需產(chǎn)物的產(chǎn)率為76％，用色譜提純產(chǎn)物，得到純度為91％的產(chǎn)品。
實(shí)施例3胺—取代的硼配合物，99mTc(氯化)(二甲基乙二肟)3B—R(其中R是或含有胺)的生物分布結(jié)果由于親脂性胺通過特異結(jié)合表現(xiàn)出高的肺攝取是已知的，測定了在硼酸“冠”含有胺取代的一系列(BATO)配合物，包括實(shí)施例2中所描述的配合物在鼠肺中的攝取。其他列舉的配合物是使用如實(shí)例2中所描述的方法制備的。記錄這些化合物靜脈給藥后5和60分鐘時(shí)的肺攝取量。下列表1列出了含胺配合物的肺攝取。
表1含有胺的量

1DMG＝二甲基乙二肟表1(續(xù))胺含有量

2CDO＝1，2—環(huán)己烷二酮二肟實(shí)施例499Tc(氯)(二甲基乙二肟)3(雌二醇硼)把0.02796g(0.058mmol)99Tc(氯化)(二甲基乙二肟)3溶解于10ml乙腈中。伴隨攪拌。加入固體的0.02449g(0.072mmol)雌二醇硼酸，〔17α(E)—3，17—二羥—1，3，5(10)—雌三烯—17—基〕乙烯基硼酸。加入2ml 1M HCl，并伴隨緩慢加熱攪拌反應(yīng)混合物1到2小時(shí)。加1M HCl(3到5ml)使之產(chǎn)生沉淀用乙腈/1M HCl重結(jié)晶該產(chǎn)物。產(chǎn)率0.022g(48％)。
TcClC32H45H6O8BH2O元素分析計(jì)算值C，48.27；H，5.78；N，10.56；實(shí)測值C，48.26；H，5.70；N，10.50。
實(shí)施例599Tc(氯化)(二甲基乙二肟)3(雌二醇硼)在5ml硅血清管瓶中，稱量放入2.0mg二甲基乙二肟，2.2mg雌二醇硼酸，20mg檸檬酸，100mg NaCl和使總體積為0.6ml 33％乙醇/鹽水的100μg SnCl2(在4M HCl中)。加入0.5ml99mTcO-4發(fā)生洗脫劑，并在100℃加熱混合物15分鐘，通過HPLC測定，所需產(chǎn)物的產(chǎn)率為70％。
實(shí)施例6用于研究離體雌激素結(jié)合受體的已知特異活性的99m/99Tc(氯化)(二甲基乙二肟)3(雌二醇硼)為了準(zhǔn)確測定特異活性(Ci/mmol)，制備了即含有99Tc，又含有99mTc的樣品。通過下述方法制備樣品2mg雌二醇硼酸，0.2ml二甲基乙二肟(10mg/ml乙醇)，0.2ml檸檬酸(100mg/ml水)，0.2ml飽和NaCl(于H2O中)，0.100ml NH499TcO4(在水中3.66×10-4M)和0.1ml到0.5ml的99mTcO-4(從Mo99/Tc99m發(fā)生劑中洗脫)，為了得到所需的特異活性，把它們合并在5ml硅管瓶中。把溶解于1ml濃HCl中并稀釋到4ml(用水)的10μl SnCl2(0.100g)，加入到反應(yīng)管瓶中。在100℃加熱樣品15分鐘，冷卻5分鐘并用色譜純化(PRP—樹脂)，得到純度＞95％的產(chǎn)品。
實(shí)施例7用99m/99Tc(氯化)(二甲基乙二肟)3(雌二醇硼)研究離體雌激素受體結(jié)合E.M.Jagoda et at.，J.Nucl.Med.1984.25 472—7已在先描述了研究受體結(jié)合采用的方法?！啊?25I〕—17—碘乙烯基—11—甲氧雌二醇”高親和性雌激素受體放射藥學(xué)的體內(nèi)和體外性質(zhì)。用20—25天令雌鼠離體子宮的細(xì)胞溶質(zhì)制劑，測定锝標(biāo)記的雌二醇對雌激素受體的親合性來研究受體結(jié)合。化合物制劑的特異活性在400到2000Ci/mmol范圍內(nèi)且特異結(jié)合范圍是全部結(jié)合活性的10—30％。
實(shí)施例8用于離體蠅蕈堿受體結(jié)合的已知特異活性研究的99m/99TcCl(二甲基乙二肟)3(QNB—硼)為了準(zhǔn)確地測定特異活性(Ci/mmol)制備了含有99Tc和99mTc的樣品，用下述的方法制各樣品2mg3—喹寧核基—(4—二羥硼基二苯乙醇酸酯)(用G.W.kabalka et alNucl.Med.Biol 1989，16(4)，359—360描述的方法制備QNB—硼酸)，0.2ml二甲基乙二肟(10mg/ml乙醇)，0.2ml檸檬酸(100mg/ml水)，0.2ml飽和NaCl(水中)，0.1ml DTPA(20mg/ml 0.5M NaOH)，0.2ml γ—環(huán)糊精(25％w/v水)，0.100ml NH499TcO4(在水中3.66×10-4M)和0.1至0.5ml99mTcO4—(用Mo99/Tc99m發(fā)生劑洗脫)，為了得到所需特異活性，將它們合并在5ml硅管瓶中，把10μl SnCl2(0.100g溶解在1ml濃HCl中。且用水稀釋到4ml)加到反應(yīng)管瓶中。在100℃加熱樣品約15分鐘，冷卻5分鐘并用色譜法提純((PRP—1樹脂)，得到純度90—95％的產(chǎn)品。
實(shí)施例9用99m/99Tc(氯化)(二甲基乙二肟)3(QNB硼)研究離體蠅蕈堿受體結(jié)合，R.E.Gibson，W.J.Rzeszotarski，W.C.Eckelman，E.M.Jagoda，D.J.Weckstein，R.C.Reba，Biochemical pharmacology，1983，32(12)，1851—1856，已在前公開了研究受體結(jié)合所采用的方法。用從鼠腦分離的鼠尾狀核，對锝標(biāo)記的QNB對蠅蕈堿受體的親合性進(jìn)行測定，以研究受體結(jié)合。化合物制劑的特異活性在600—1000Ci/mmol之間，且特異結(jié)合是總結(jié)合活性的5—20％。
實(shí)施例101—(2—硝基咪唑)—苯甲基硼酸的制備A.對—甲苯基硼酸的制備對在200ml反應(yīng)容器中的，溶解在30ml乙醚中的鎂(2.5g、0.105mole)混合物，滴加入溶于150ml乙醚中的對一溴甲苯(17.1g、0.1mole)。在室溫下，攪拌反應(yīng)混合物過夜。憑借氮?dú)獾膲毫?，將暗棕色的溶液通過轉(zhuǎn)移針，轉(zhuǎn)移到加液漏斗中。
在氮?dú)鈼l件下，在-78℃，用1.5小時(shí)的時(shí)間，把該格利雅試劑滴加到在200ml乙醚中的三甲基硼酸酯(10.4g，0.1mol)的溶液中。在環(huán)境溫度下攪拌過夜后，所得的灰白色的反應(yīng)混合物，用200ml水水解，并用35ml 3N硫酸酸化。用乙醚(4×80ml)提取水層。洗滌合并的有機(jī)層并用硫酸鈉干燥。除去溶劑得到白色固體，用水重結(jié)品該固體。得到6.1g(45％)的產(chǎn)物。m. p.251—256℃(文獻(xiàn)259℃)1HNMR(DMSO)δ2.25(S，3H，—CH3)；7.12和7.64(d，4H，ArH)；7.86(S，2H，—BOH)。B.對—溴甲基苯硼酸把在20ml四氯化碳中的5ml溴溶液(2.4g，1.5×10-2mole)，加入到在40ml四氯化碳中的對一甲苯基硼酸(2.0g，1.47×10-2mole)溶液中。用150瓦日光燈泡照明，啟動(dòng)反應(yīng)。5分鐘后，溴褪色，用15分鐘的時(shí)間加入剩下的溴溶液。在加入溴時(shí)，沉淀出固體產(chǎn)物，過濾該固體并用氯仿重結(jié)晶，產(chǎn)率1.5g(49％)，m.p.154—156℃，1H NMR(DMSO)δ4.18(S，2H，—CH2Br)；7.37和7.74(d，4H，—ArH)。C.1—(2—硝基咪唑基)苯甲基硼酸的制備2—硝基咪唑(100mg，8.85×10-4mole，事先通過升華提純)和對—溴甲基苯硼酸(190mg，8.85×10-4mole)，在裝有回流冷凝管的50ml單頸園底燒瓶中，與在30ml干燥丙酮中的20mg碳酸鉀混合。在氮?dú)鈼l件下，攪拌并加熱回流反應(yīng)混合物16小時(shí)。過濾淡綠黃色溶液。在減壓條件下，把濾液蒸發(fā)至干燥，得到淡黃色固體。用水重結(jié)晶產(chǎn)物。產(chǎn)率150mg(69％)。m.p.212—214℃，1H NMR(DMSO)δ5.6(S，2H，CH2Ar)，7.1和7.75(d，4H，ArH)；7.25和7.75(S，2H，CH＝CH)。
實(shí)施例114—(2—硝基咪唑基乙基)苯基硼酸的制備A.2—(4—溴苯基)—1—鄰—特—丁基二甲基甲硅烷基乙烷4—溴苯基乙基醇(4.0g，20mmol)和咪唑(3.4g，50mmol)溶于干燥的二氯甲烷(100ml)中，用特—丁基二甲基甲硅烷基氯化物(3.1g，20mmol)處理，并在室溫和氮?dú)鈼l件下攪拌6小時(shí)。用水洗滌所得產(chǎn)物，干燥，在真空下蒸餾濃縮。產(chǎn)率 6.0g(95％)，b.p.115—117℃/0.7mm，M.S.314和316(m/e)1H NMR(CDCl3)，0.05(s，6H)，0.9(s，9H)，2.8(t，2H)，3.85(t，2H)和7.5(AB q，4H)。B.4—(2—羥乙基)苯基硼酸的制備在氮?dú)鈼l件下，對在干燥四氫呋喃(10ml)的鎂(0.264g11mmol)懸浮浮液，用小時(shí)，滴加入特—丁基二甲基甲硅烷基醚的4—溴苯基乙基醇(a，3.45g，10.9mmol)的四氫呋喃溶液(10ml)。然后加入二溴乙烷(0.1g)活化鎂。用8小時(shí)的時(shí)間將金屬緩慢進(jìn)入溶液，把該格利雅試劑冷卻到-78℃。并用新鮮蒸餾的三甲基硼酸鹽(1.15g，11mmol)處理，滴加時(shí)伴隨攪拌。使反應(yīng)混合物加溫至室溫并攪拌過夜。然后用2N鹽酸處理至酸性，從水層上分離四氫呋喃層。水層用乙酸乙酯(5×50ml)徹底提取，合并有機(jī)層，用水并且最后用飽和氯化鈉洗滌有機(jī)層。然后干燥有機(jī)相，濃縮并用色譜分離(硅膠閃層析)。用乙酸乙酯/甲醇(95∶5)洗脫，得到的硼酸用乙酸乙酯/己烷重結(jié)晶。產(chǎn)率 0.69g(38％)，m.p.218—220℃，M.S.184(M＋NH4)，156，140，1H NMR(DMSO—d6)2.7(t，2H)，4.6(t，2H)，7.1和7.7(2d，4H)和7.9(s，2H)。C.4—(2—溴乙基)苯基硼酸的制備對4—(2—羥乙基)苯基硼酸(1.66g，10mmol)的干燥的二甲基甲酰胺(25ml)溶液，加入亞乙基二醇(0.62g，10mmol)。在氮?dú)夂褪覝叵?，攪拌混合?6小時(shí)。在減壓條件下除去二甲基甲酰胺，所得到的油狀物，再保持在真空下6個(gè)多小時(shí)，該油狀物再次溶解到干燥二甲基甲酰胺中(10ml)，用冰浴冷卻，用三苯基膦(5.25g，20mmol)和N—溴琥珀酰亞胺(3.56g，20mmol)處理，在氮?dú)夂褪覝貤l件下攪拌6小時(shí)。在減壓條件下除去溶劑。殘留物用乙醚(100ml)吸收。乙醚溶液用水洗滌、干燥并濃縮，得到的油用色譜分離，得到無色固體的溴硼酸(硅膠閃層析，1∶1乙酸乙酯/己烷)。產(chǎn)物用二氯甲烷/己烷重結(jié)晶，產(chǎn)率1.4g，m.p.146—148℃。D.4—(2—硝基咪唑基乙基)—苯基硼酸的制備在氮?dú)鈼l件下，伴隨攪拌，4—(2—溴乙基)苯基硼酸(0.525g，2.72mmol)和2—硝基咪唑(0.3g，2.72mmol)，在干燥二甲基甲酰胺(15ml)中，在無水碳酸鉀(1.38g，10mmol)存在下，在60—70℃加熱48小時(shí)。減壓除去二甲基甲酰胺，所得的膠溶解在少量水中，用2N鹽酸酸化。過濾掉沉淀的固體，用水洗滌溶液。合并的水層再次用乙酸乙酯(5×50ml)提取。干燥并濃縮有機(jī)層，得到的固體與以前的沉淀固體合并，然后用色譜分離(硅膠閃層析)。用1∶1乙酸乙酯/己烷洗脫，得到一些未反應(yīng)的起始溴化物(0.1g)；繼續(xù)用2∶1乙酸乙酯/己烷洗脫，得到所需的如淺黃色結(jié)晶固體的硼酸。用四氫呋喃/己烷重結(jié)晶產(chǎn)物。產(chǎn)率0.25g(36％)，m.p.229-231℃，M.S.(M＋H)+262.1H NMR(DMSO-d6)3.1(t，2H)，4.65(t，2H)，711(d，2H)，7.14(s，1H)，7.5(s，1H)，7.69(d，2H)和7.94.(s，2H).
實(shí)施例1299mTc(氯化)(1.2—環(huán)己二酮二肟)31—(2—硝基咪唑基)苯甲基硼對10mg檸檬酸，100mg的氯化鈉，2mg1，2—環(huán)己二酮二肟，2mg二亞乙基三胺—五—乙酸，50mgγ環(huán)糊精，50μg氯化亞錫，和3mg1—(2—硝基咪唑基)苯甲基硼酸的混合物，加入1ml高锝酸鈉(99mTcO4—)的生理鹽水。在100℃加熱反應(yīng)混合物15分鐘。標(biāo)題化合物的產(chǎn)率，用高壓液相色譜(HPLC)測定，為91.4％。配合物的樣品用NucleosilHPLC柱洗脫，保留時(shí)間與如下制備的99Tc可倍標(biāo)樣相同。
實(shí)施例1399Tc(氯化)(1，2—環(huán)己二酮二肟)31—(2—硝基咪唑基)苯甲基硼的制備對溶解在10ml熱乙腈中的90.3mg(0.11mmol)99Tc(1.2—環(huán)己二酮二肟)3(u—OH)SnCl3，加入1—(2—硝基咪唑基)苯甲基硼酸(31mg，0.125mmol)和1.5ml 3N鹽酸。伴隨攪拌，緩慢加熱溶液。30分鐘后，加入10ml 1M鹽酸，并把溶液冷卻至室溫。所得的橙色沉淀(61mg，78％產(chǎn)率)用熱乙腈/1M鹽酸重結(jié)晶。
對C28H34N9BClO8Tc分析計(jì)算值C，43.59；H，4.43；N，16.20；實(shí)測值C，43.68；H，4.45；N，16.37。
在m/z＝770觀測到了強(qiáng)質(zhì)子化了的分子的離子(M＋H)+配合物的樣品用Nucleosil HPLC柱洗脫，保留時(shí)間為2.34分鐘(80/20 ACN/0.1M檸檬酸，1.5mL/分鐘)。
實(shí)施例1499mTc(氯化)(二甲基乙二肟)3—1—(2—硝基咪唑基)苯甲基硼的制備對2mg二甲基乙二肟，18mg檸檬酸，100mg氯化鈉，1mg二亞乙基三胺—五—乙酸，50mgγ環(huán)糊精，50μg氯化亞錫，和3mg1—(2—硝基咪唑基)苯甲基硼酸的凍干混合物，加入1ml高锝酸(99mTcO4—)鈉的生理鹽水溶液。在100℃加熱該藥盒15分鐘，標(biāo)題化合物的產(chǎn)率，用高壓液相色譜(HPLC)測定，為73.4％。該配合物的樣品用Nucleosil HPLC柱洗脫，保留時(shí)間與如下制備的99Tc可溶標(biāo)樣相同。
實(shí)施例1599Tc(氯化)(二甲基乙二肟)3—1—(2—硝基咪唑基)苯甲基硼對55mg99Tc(二甲基乙二肟)3(u—OH)SnCl3(0.074mmol)、加入溶于10ml乙腈中的25mg(0.10mmol)1—(2—硝基咪唑基)苯甲基硼酸。加入1ml 3N鹽酸，緩慢加熱溶液30分鐘，加入10ml 1M鹽酸，使溶液冷卻至室溫。得到的橙色結(jié)晶(32mg，62.3％產(chǎn)率)用熱乙腈/1M鹽酸溶液重結(jié)晶，得到分析純的絡(luò)合物，以0.5H2O水合物分離。
對C22H29N9BClO8.5Tc分析計(jì)算值C，37.62；H，4.33；N，17.63；實(shí)測值C，37.71；H，4.17；N，17.99。
配合物的樣品用Nucleosil HPLC柱洗脫。保留時(shí)間3.45分鐘(60/40 ACN/0.1M檸檬酸，1.5ml/分鐘)。
實(shí)施例1699mTc(氯化)(二甲基乙二肟)3—4—(2—硝基咪唑基乙基)苯基硼的制備對18mg檸檬酸、100mg氯化鈉、2mg二甲基乙二肟、1mg二亞乙基三胺—五—乙酸，50mgγ環(huán)糊精、50μg氯化亞錫和3mg 4—(2—硝基咪唑基乙基)苯基硼酸的混合物，加入20mCi99mTcO4—的1ml生理鹽水。在100℃加熱反應(yīng)該藥盒15分鐘，用HPLC測定產(chǎn)率，得到產(chǎn)率93％的標(biāo)題配合物。
實(shí)施例17含有硝基雜環(huán)基團(tuán)的化合物，通過這些基團(tuán)中的硝基部分被還原保留在缺氧組織中。因此，硝基—雜環(huán)基團(tuán)的氧化還原電位可成為這些基團(tuán)保留在低氧組織中的程度的指示。
用標(biāo)準(zhǔn)的3—電極構(gòu)型(Heinze，J.Ang.Chem.Int.，Ed.Eng.23，831.1984)對在DMF溶劑中的環(huán)電壓進(jìn)行研究。用PAR174A極譜分析儀和PAR303靜電滴汞電極儀相接獲得數(shù)據(jù)，顯示和記錄在PAR RE0074X—Y記錄儀上。參比電極是乙腈中的Ag/AgNO3；測量電極是汞。
樣品溶液一般為0.3—1.2mM，含有0.1M四丁基銨四氟硼酸鹽支持電解質(zhì)，在測量前用溶劑飽和N2排除氣體。
表2DMF峰電位(EP)值—(掃描率＝100mv/sec)的電化學(xué)結(jié)果

1BATO是硼酸锝肟并涉及到锝的硼酸三肟的絡(luò)合物2锝(氯化)(二甲基乙二肟)3(甲基硼)實(shí)施例18在離體和活體、對含有硝基咪唑的化合物的研究，證實(shí)了細(xì)胞內(nèi)硝基咪唑的結(jié)合的可能機(jī)制，是由于該硝基基團(tuán)的酶還原所導(dǎo)致的—種化學(xué)反應(yīng)物。(例如，Clarke，Wardman，和Goulding，Biochem.Pharmacol.(1980)29，2684—2687)。用黃嘌呤氧化酶測定方法，測定本發(fā)明中的硝基咪唑硼酸。測定溶液含有如下成份次黃嘌呤1ml 0.01M 溶液＝10μmole底物黃嘌呤氧化酶，0.5單位500μl pH7.4磷酸鈉磷酸鈉緩沖液，1.0ml，0.1M，pH7.4，10mg/LNa2EDTA硝基化合物0.25μMole 20μl二甲基甲酰胺在隔膜封閉的比色杯中，在加好其它所有試劑的溶液中，加入酶使反應(yīng)發(fā)生，所有的試劑在混合之前用氬氣通過其表面20分以排氣用UV/可見分光光度計(jì)在326nm，每5分鐘，測定減少的硝基(還原反應(yīng)的指征)。對所有研究的化合物，用對數(shù)(濃度)mmol/ml對時(shí)間作圖來測定硝基化合物的半衰期。結(jié)果示于表2，有兩個(gè)化合物醚醇硝唑和甲硝噠唑的兩組數(shù)據(jù)作為對比。
表 2半衰期化合物 (酶測定) Epc(DMF)*Epc(水)*甲硝噠唑 ＞24hr -1.62V -0.46 V(OH)2BB4NO295min -1.80V -0.50V醚醇硝唑 45min -1.49V -0.33V(OH)2BPhEtNO242.5min-1.53V -0.30V(OH)2BPropeneNO224min -1.56V -0.30V(OH)2BBNO211min -1.52V -0.32V實(shí)施例192—硝基咪唑—N1—〔2—丙烯基〕—3—硼酸(BpropenNO2)的制備用無水碳酸鉀(6.9g，50mmol)處理在干燥二甲基甲酰胺(15ml)中的2—硝基咪唑(1.0g，8.84mmol)，在室溫和氮?dú)鈼l件下攪拌0.5小時(shí)。使溶液冷卻到0℃，伴隨攪拌和氮?dú)?，?℃，用在干燥四氫呋喃(10ml)中的2—溴乙基—2—乙烯基—1，3，2—苯并二氧硼硫酸鉀鈉(4.23g，17.7mmol)處理一個(gè)小時(shí)。伴隨攪拌在氮?dú)庀?，?0—70℃加熱反應(yīng)混合物48小時(shí)。減壓條件下除去二甲基甲酰胺，殘留物溶解在甲醇中(100ml)。用Dowex 50×8樹脂(H+)酸代并過濾。用甲醇洗滌樹脂，合并濾液，洗滌，濃縮，色譜分離得到半固體物質(zhì)(硅膠，230—400目，乙酸乙酯的2％甲醇溶液)用二氯甲烷重結(jié)晶，該半固體物質(zhì)得到淺黃色結(jié)晶固體產(chǎn)率0.3g，m.p.138—140℃。
1H NMR(DMSO-d6)δ5.2(d，2H)，6.6(m，1H)，7.15(s，1H)，7.4(s，1H)和7.7(s，2H)分析計(jì)算值C6H8BN3O4，C36.59，H4.09，N21.34，實(shí)測C36.79，H3.66，N21.41.
實(shí)施例202—硝基咪唑基—N1—丙基—3—硼酸(BpropNO2)的制備把羥胺氫氯化物(0.417g，6mmol)，乙酸鈉(0.492g，6mmol)，乙酸乙酯(0.176g，2mmol)和在乙醇(25ml)中的BpropenNO2(實(shí)施例19，0.2g，1mmol)的混合物，伴隨攪拌，在氬氣下回流30小時(shí)。冷卻后，除去溶劑，粗產(chǎn)物直接加到閃硅膠色譜柱上，進(jìn)行色譜分離。分離的產(chǎn)物，再至少二次用色譜分離得到淺黃色固體的產(chǎn)物。產(chǎn)率0.02至0.025g(20—25％)m.p.122—124℃。1H NMR(DMSO-d6)δ0.8(t，2H，B-CH2)，1.9(m，2H)，4.4(t，2H，N-CH2)，7.2(s，1H)，7.8(s，2H，B-OH)和7.85(s，1H)M.S.(M＋H)+-200，172，154和109.分析計(jì)算為C6H10N3BO4C36.22，H5.02，N21.11實(shí)測C36.87，H4.84，N21.56.
實(shí)施例211—(4—硝基咪唑)—苯甲基硼酸(BB4NO2)的制備本化合物通過實(shí)施例10描述的方法，使4—硝基咪唑(1.13g，10mmol)和4—溴甲基苯基硼酸(3.25g，15mmol)反應(yīng)來制備。產(chǎn)率1.7g，m.p.163—165℃。
1H NMR[DMSO-d6]δ5.4(s，2H)，7.4(d，2H)，7.9(d，2H)，8.2(bs，2H)a和8.6(s，1H).13C NMR[DMSO-d6]δ50.76，121.59，126.86，134.54，134.6，137.45，137.89 and 147.18.分析計(jì)算為C10H10BN3O4C48.62，H4.08 N17.01.實(shí)測C49.39，H4.21，N16.83.M.S. +304.
實(shí)施例2299TcCl(DMG)3BphEtNO2的制備對Tc(DMG)3(μ—OHSnCl3·3H2O)(77.1mg，0.104mmol)的5ml乙腈溶液，接著加入(OH)2BphEtNO2(實(shí)施例11，28.8mg，0.11mmol)加入2滴濃HCl，把溶液加熱沸騰30分鐘，其間生成橙色固體沉淀(68mg，產(chǎn)率93％)。過濾分離沉淀，用乙腈充分洗滌，在真空下干燥。該固體溶解于1ml二甲基甲酰胺，2ml乙腈和1ml 1M鹽酸中，使溶液沸騰約30分鐘，產(chǎn)物的結(jié)晶體(31mg，全部產(chǎn)率40％)冷卻過夜后生成。分析計(jì)算TcCl(DMG)3BPhEtNO2·0.5DMF，C24.5H33N9.5BClO8.5Tc.
實(shí)測值C，39.80；H，4.60；N，17.55。
計(jì)算值C，39.64；H，4.81；N，17.92。
實(shí)施例2399mTc(氯)(二甲基乙二肟)3—1—(n—丙基—2—硝基咪唑基)硼的制備除了1—(2—硝基咪唑基)—苯甲基硼酸被4mgBpropNO2(實(shí)施例20)代替之外如實(shí)施例14所述，制備標(biāo)題化合物。用高壓液相色譜測定標(biāo)題絡(luò)合物的產(chǎn)率，為52％，配合物樣品從Nucleosil HPLC洗脫產(chǎn)率為52％。洗脫絡(luò)合物樣品的NucleosilHPLC柱的保留時(shí)間，與如實(shí)施例24所述方法制備的99Tc可溶標(biāo)樣相同。
實(shí)施例2499Tc(氯)(二甲基乙二肟)3—1—(n—丙基—2—硝基咪唑基)硼的制備對Tc(DMG)3(μ—OH)SnCl3—3H2O的10ml乙腈溶液，加入(OH)2BpropNO2(實(shí)施例20，41.8mg，0.21mmol)后加入3ml 2NHCl，緩慢加熱反應(yīng)混合物30分鐘，加入50ml 1N鹽酸，將溶液冷卻至室溫。通過抽濾分離所得絮狀橙色固體，用1M鹽酸和H2O洗滌固體產(chǎn)物，并真空干燥，得到97mg(78％)粗產(chǎn)物。使粗產(chǎn)物溶解在1mlCHCl3中，并用1×10cm硅膠色譜柱分離，色譜柱預(yù)先充滿CHCl3，并用CHCl3洗脫。把主要的橙色帶收集，蒸發(fā)干燥。再溶解在3ml CH2Cl2中，用30ml己烷處理。分析分離的純固體，全部產(chǎn)率57％。分析計(jì)算為C18H28N9BClO8Tc。
實(shí)測值 C，33.66；H，4.20；N，19.28；計(jì)算值 C，33.58；H，4.38；N，19.58。
實(shí)施例2599mTc(氯)(二甲基乙二肟)3—1—(丙烯—2—硝基咪唑基)硼(KL L498—178)的制備除了用3mg BpropenNO2(實(shí)施例19)代替1—(2—硝基咪唑基)—苯甲基硼酸，用實(shí)施例14所述的方法制備標(biāo)題化合物。用高壓液相色譜(HPLC)測定標(biāo)題絡(luò)合物的產(chǎn)率。為58％。
實(shí)施例2699mTc(氯)(二甲基乙二肟)3—1—(4—硝基咪唑基)苯甲基硼的制備除了用3mg BB4NO2(實(shí)施例21)代替1—(2—硝基咪唑基)—苯甲基硼酸。用實(shí)施例14所述的方法制備標(biāo)題化合物。用高壓液相色譜(HPLC)測定標(biāo)題絡(luò)合物的產(chǎn)率，為82％。絡(luò)合物樣品用PRP-1HPLC柱洗脫。保留時(shí)間與實(shí)施例27所述的。99Tc可倍標(biāo)樣相同。
實(shí)施例2799Tc(氯)(二甲基乙二肟)3—1—(4—硝基咪唑基)苯甲基硼的制備TcCl(DMG)3(32.7mg，0.068mmol)和BB4NO2(實(shí)施例21，17.7mg，0.073mmol)的5ml乙腈溶液，以及0.5ml 2NHCl的混合物伴隨攪拌加熱15分鐘。然后蒸發(fā)除去溶劑。產(chǎn)物用硅膠色譜柱提純，洗脫液為40/60 ACN/CH2Cl2。將主要的橙色帶蒸發(fā)至于燥，并用乙醚重結(jié)晶(產(chǎn)率61％)。分析計(jì)算為TcCl(DMG)3BB4NO2.0.2C4H10O(C22H8N9O8BCITc.0.2C4H10O.實(shí)測C，38.39；H，4.21；N，1/.44.計(jì)算C，38.75；H，4.28；N，17.84.FAB-MS(+)m/z692，[M＋H]；656，[M-Cl；579，[M-4-硝基咪唑].1H NMR(270MHz，CDCl3)δ2.9(m，12H，CDO)，3.0(m，12H，CDO)，5.2(s，2H，Bz)，7.2(d，2H，Ph)，7.4(s，1H，咪唑)，7.7(s，1H，咪唑)，7.8(d，2H，Ph)，14.8(s，2H，二肟).IR(KBr)(cm-1)3505br，1634，1545，1491，1399，1338，1228，1206s，1089s，990s，928，909，824，808.UV-VIS(CH3CN)λmax(Logε)288(4.08)，382(3.80)，460(3.41)
實(shí)施例2899mTc(氯)(1，2—環(huán)己二酮二肟)3—1—(4—硝基咪唑基)苯甲基硼的制備除了用3mg BBNO2(實(shí)施例21)代替1—(2—硝基咪唑基)—苯甲基硼酸外，用實(shí)施例12所述的方法制備標(biāo)題化合物。用高壓液相色譜(HPLC)測定標(biāo)題絡(luò)合物的產(chǎn)率，為86％。絡(luò)合物樣品用PRP—1 HPLC柱洗脫，保留值與下述制備的99TC可倍標(biāo)樣相同。
實(shí)施例2999mTc(氯)(1，2—環(huán)己二酮二肟)3—1—(4—硝基咪唑基)苯甲基硼的制備TcCl(CDO)3(25.7mg 0.046mmol)和BB4NO2(實(shí)施例21，11.6mg，0.48mmol)溶解在5ml ACN和0.5ml 3M鹽酸中的混合物，伴隨攪拌加熱30分鐘。加入5ml 1M鹽酸后，生成橙色固體沉淀，并過濾收集(粗產(chǎn)率83％)。分析計(jì)算锝C28H34N9O8ClBTc.0.5C4H10OC，44.65；H，4.87；N，15.62.實(shí)測C，44.81；H，4.95；N，16.05.FAB-MS(+)m/z769.M734，[M-Cl]；657，[M4-硝基咪唑].1H NMR(270MHz，CDCl3)δ7.4(m，18H，Me)，5.2(s，2H，Bz)，7.2(d，2H，Pn)，7.5(s，1H，咪唑)，7.7(s，1H，咪唑)，7.8(d，2H，Ph)，14.8(s，2H，二肟)，IR(KBr)(cm-1)3450br，1631，1546，
1446，1430，1380，1337，1286，1229，1203s，1061s，960s，924，902，866，847.UV-VIS(CH3CN)λmax(Logε)290(4.35)，386(4.11)，462(3.76).
實(shí)施例3099mTc(羥)(二甲基乙二肟)3—1—(2硝基咪唑基)苯甲基硼的制備按照實(shí)施例14所述的方法制備化合物99mTc(氯化)(二甲基乙二肟)3—1—(2—硝基咪唑基)苯甲基硼。然后用PRP—1反相樹脂吸附提純。用1ml鹽水和1ml 1∶1乙醇/鹽水洗滌，然后用0.4ml 95％乙醇洗脫配合物。把400μl等分的pH8.0磷酸緩沖液(0.1M)加入到混合物中，在37℃加熱30分鐘。在其間，氯配位體軸被羥基置換用HPLC測定產(chǎn)率96％該絡(luò)合物樣品與99Tc(OH(二甲基乙二肟)3—1—(2—硝基咪唑基)—苯甲基硼標(biāo)準(zhǔn)樣品共同洗脫。該物質(zhì)通過用氫氧化鈉液體處理99Tc—氯配合物制備。
實(shí)施例3199mTc(氯)(1，2—環(huán)己二酮二肟)3—1—(丙烷—硝基咪唑基)硼的制備除了用3mg BpropNO2(實(shí)施例20)代替1—(2—硝基咪唑基)—苯甲基硼酸外，用實(shí)施例12所述的方法制備標(biāo)題化合物。用高壓液相色譜(HPLC)測定標(biāo)題配合物的產(chǎn)率為95％。
實(shí)施例3299mTc(氯)(1，2—環(huán)己二酮二肟)3—1—(丙烯—硝基咪唑基)硼的制備除了用3mg BpropenNO2(實(shí)施例19)代替1—(2—硝基咪唑基)—苯甲基硼酸外，用實(shí)施例12所述的方法制備標(biāo)題化合物。用高壓液相色譜(HPLC)測定標(biāo)題絡(luò)合物的產(chǎn)率，為83％。
實(shí)施例33(R)—1—氮雜二環(huán)〔2，2，2〕辛—3—基—(R)—α—(4)—苯基硼酸—α—苯基乙酸乙酯(R，R—QNB硼酸)的制備通過下述的反應(yīng)式制備該化合物 A.(RS)—3—乙酰氧基喹寧環(huán)用乙酐(100ml)處理(RS)—3—奎寧環(huán)醇(25g，0.2mmol)的吡啶(100ml)溶液，保持在50℃4小時(shí)，然后放置在室溫下15小時(shí)。真空條件下除去吡啶和過量的乙酐，然后把澄清的淺棕色油狀物溶解在水中(25ml)，用飽和碳酸鉀使其呈弱堿性。然后用氯仿(5×50ml)提取酯，提取物用用K2CO3充分干燥。真空蒸發(fā)掉溶劑，殘留物產(chǎn)率20.6g(62％)。為無色液態(tài)的(RS)—3—乙酰氧奎寧環(huán)1HNMR(CDCl3)δ1.31-2.01(m，6H)，2.11(s，3H，OCOCH3)，2.62-2.95(m，5H)，3.18-3.31(m，1H)，4.80(m，1H，3H).
B.(R)—(+)—3—乙酰氧基奎寧環(huán)把(RS)—3—乙酰氧基奎寧環(huán)(34g，0.2mmol)加入到L—(+)—酒石酸(30.13g，0.2mmol)的乙醇溶液中(80％，142ml)。使溶液保持在室溫過夜，過濾生成的無色結(jié)晶固體(40g)，并用乙醇(80％，280ml)重結(jié)晶兩次，得到25.5g(65％)的拆分的(R)—(+)—3—乙酰氧基奎寧環(huán)的酒石酸鹽mp96—98℃ Lit.2mp94—95.5℃。將拆分了的(R)—(+)—3—乙酰氧基奎寧環(huán)酒石酸鹽(25.0g)的水(5ml)溶液。用飽和K2CO3使溶液呈弱堿性，并用氯仿(5×25ml)提取溶液。用Na2SO4充分干燥合并的CHCl3提取物，并過濾。真空蒸發(fā)除去溶劑后，蒸餾出無色液體的(R)—(+)—3—乙酰氧基奎寧環(huán)。產(chǎn)率10.7g(88％)[α]D25＋29.96°(c2.93，乙醇.).Lit.(Cohen etal.J.Pharm.Sci.，(1989)，78，833-836[α]D25＋29.8°(c3.0，乙醇).
1H NMR(CDCl3)δ1.30-2.01(m，6H)，2.13(s，3H，OCOCH3)，2.62-2.98(m，5H)，3.18-3.30(m，1H)，4.82(m，1H，3-H).
C.(R)—(+)—4—硝基二苯乙醇酸對在沸騰乙酸乙酯(250ml)中的奎寧(39.6g，90％，1.1mmol)的懸浮液，加入外消旋的(RS)—4—硝基二苯乙醇酸(30.0g，1.1mmol)，并保持在室溫18小時(shí)。過濾結(jié)晶生成的鹽，用乙酸乙酯四次重結(jié)晶后，具有不變的熔點(diǎn)120—122℃；產(chǎn)率19.5g(59.4％)TLC(硅膠，甲苯—HOAC91)Rf0.24。
然后用過量的6M鹽酸處理奎寧鹽(1g，1.68mmol)并用乙酸乙酯提取。提取物用無水MgSO4干燥，在減壓條件下除去容劑，然后把得到的產(chǎn)物加到硅膠(8g)柱上，用CH2Cl2—MeOH(95∶5)洗脫，合并含有化合物的組分，并蒸發(fā)得到無色的糊狀物，糊狀物緩慢結(jié)晶生成乳色的固體。產(chǎn)率0.35(77％)mp104—106℃薄層色譜〔硅膠，甲苯—HOAc〕9∶1〕Rf0.3；〔α〕25D＋50.11°(C1.34，丙酮)，Lit.(Rzeszotarski et al.J.Med.Chem.，(1981)，27，156—160)?！拨痢矰24＋49.4(C1.34，丙酮)。
1H NMR(CDCl3)δ4.80(bs，2H，COOH和OH，7.35(m，5H，C6H5)，7.71和8.21(2d，4H，C6H4)。D.(R)—4—氨基二苯乙醇酸(R)—4—硝基二苯乙醇酸(2.0g，7.33mmol)的乙醇溶液(25ml)，用肼(1.0ml)和阮內(nèi)—Ni(0.8g)處理，并在氮?dú)鈼l件下于室溫?cái)嚢?8小時(shí)。過濾除去阮內(nèi)—Ni的粉末，用乙醇洗滌，把乙醇層濃縮到很小的體積，并用水稀釋(75ml)。用乙醚(2×50ml)提取水層，在減壓下蒸發(fā)水層，得到淺黃色(R)—4—氨基二苯乙醇酸的固體，產(chǎn)率82％(1.46g)；mp139—140℃(分解)；TLC〔硅膠，丙酮〕Rf0.20；1H NMR(D2O)δ6.75和7.18(2d，4H，C6H4)和7.31(s，5H，C6H5)E.(R)—4—碘二苯乙醇酸碘二苯乙醇酸的制備是通過在-5℃，用30分鐘的時(shí)間，把亞硝酸鈉(1.7g，24.64mmol)的水(10ml)溶液滴加到(R)—4—(氨基二苯乙醇酸)(3.0g，12.35mmol)的10％鹽酸(100ml)溶液中。在-5℃，繼續(xù)攪拌附加的30分鐘。然后緩慢加入碘化鉀(4.09g，24.64mmol)的水(10ml)溶液。然后在0℃攪拌反應(yīng)混合物1個(gè)小時(shí)，在環(huán)境溫度下攪拌1個(gè)小時(shí)。用乙酸乙酯(3×75ml)提取所得的混合物，合并的提取液用硫代硫酸鈉(10％，2×50ml)，水(2×50ml)洗滌，用硫酸鈉充分干燥。除去溶劑，得到棕色的糊狀物，用色譜柱(硅膠，乙醇/二氯甲烷洗脫)提純，得到淺黃色固體的產(chǎn)物。產(chǎn)率2.18g(50％)；mp80—81℃；TLC〔硅膠，甲苯—乙酸9∶1〕Rf0.40；〔α〕D25＋24.7°(C0.132，acetone)；1H NMR(CDCl3)δ5.50(bs，2H，COOH和OH)，7.21和7.69(2d；4H，C6H4)和7.41(s，5H，C6H5)。F.(R)—3—奎寧環(huán)基—(R)—4—碘二苯乙醇酯對(R)—4—碘二苯乙醇酸(0.26g，0.74mmol的干燥二甲基甲酰胺(2ml)的溶液，用少量的1，1′—羰基二咪唑(0.12g，0.74mmol)處理，在氮?dú)鈼l件下，于室溫?cái)嚢?個(gè)小時(shí)。在該淺黃色溶液中，加入(R)—3—奎寧環(huán)醇(0.93g，0.73mmol)，在室溫下繼續(xù)攪拌另外的15小時(shí)。在真空條件下濃縮反應(yīng)混合物，然后加入水(50ml)并用乙醚(3×30ml)提取。合并的醚提取液用飽和碳酸氫鈉(2×20ml)，水(2×20ml)洗滌。用無水硫酸鈉充分干燥。對所得的糊狀物，加入硅膠(0.5g)，乙醚(5ml)并干燥。含有化合物的干燥硅膠粉末，被加到硅膠柱(10g)上，用5％甲醇在二氯甲烷溶劑中的混合物洗脫。合并含有化合物的餾分，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀蒸發(fā)，得到淺黃色的固體，產(chǎn)率75％，(0.256g)；mp124-127℃；TLC硅膠，MeOH-NH4OH 982]Rf0.65；1H NMR(CDCl3)δ1.15-1.89(m，4H)，2.01(s，1H)2.42-2.81(m，5H)，3.21(m，1H)，4.52(bs，1H，OH)，5.01(m，1H)，5.01(m，1H)和7.15-7.82(m，9H，Ar-H).G.(RR)—QNB硼酸在-78℃，在干燥的10ml RB燒瓶中，對(R)—3—奎寧環(huán)基—(R)—4—碘二苯乙醇酸酯(0.60g，1.3mmol)的新蒸四氫呋喃(2.0ml)的溶液，借助注射器緩慢加入n—BuLi(0.2g，2.5M，1.25ml，3.13mmol)。在上述溫度下攪拌20分鐘。然后把新蒸餾的三乙基硼酸酯(0.378g，0.441ml，2.59mmol)加入到反應(yīng)混合物中，在-78℃，再攪拌1個(gè)小時(shí)，使溫度升到環(huán)境溫度，攪拌18小時(shí)。然后用幾滴水處理反應(yīng)反應(yīng)混合物，傾倒除去溶液相。得到半固體物質(zhì)，然后對該物質(zhì)用乙醚反復(fù)洗滌，最后用乙醚研磨，得到無色的固體。把該固體溶解于含有＜5％乙腈的水溶液中，過濾并加到反相C18HPLC柱上(Dynamax C18，4.14×25cm，8micron)在isocratic條件下用含有0.1％三氟乙酸/水的12.5％乙腈洗脫。餾分的鑒定借助分析HPLC(DynamaxC18，0.46×25cm，8micron，18％乙腈與在0.1％三氟乙酸中的0.1％三氟乙酸，收集純度＞98％標(biāo)題化合物的餾分，冷凍干燥得到以三氟乙酸鹽形式存在的(RR)—QNB硼酸的無色固體，產(chǎn)率0.025g(4.4％)；1HNMR(CD3OD)δ1.68(m，2H)，1.95(m，2H)，2.35(s，1H)，2.81—3.35(m，5H)，3.80(m，1H)，5.31(m，1H)和7.28—7.71(m，9H，Ar—H)。MSC24H29O6NB的準(zhǔn)確計(jì)算值438.2092；實(shí)測值438.2088。
實(shí)施例34(S)—1—氮雜雙環(huán)〔2，2，2〕辛—3—基—(R)—α—羥—α—(4)—苯基硼酸—α—苯基乙酸酯(R，S—QNB硼酸)該化合物通過實(shí)施例33的反應(yīng)制備用S—奎寧環(huán)醇取代R—奎寧環(huán)醇A.(S)—3—乙酰氧基奎寧環(huán)從實(shí)施例33A得到的母液(制備(R)—3—乙酰氧基奎寧環(huán)的)，被真空濃縮且殘留物用碳酸鉀使之顯堿性。用氯仿(3×50ml)提取該酶，用硫酸鈉干燥。蒸發(fā)掉溶劑得到7.5g的粗酯，把酯加到(—)—酒石酸6.5g的80％乙醇溶液中，形成的鹽用實(shí)施例33A所述的方法提純。mp95—96℃。文獻(xiàn)(Cohenet al.J.Pharm.Sci.，(1989)，78，83.3836)mp94—96℃。B.(S)—3—奎寧環(huán)基—(R)—4—碘二苯乙醇酸酯用(R)—4—碘二苯乙醇酸(0.26g，0.73mmol)1，1′—羰基二咪唑(0.12g，0.74mmol)和(R)—3—奎寧環(huán)醇(0.93g，0.73mmol)在干燥二甲基甲酰胺(2ml)中如合成(R)—3—奎寧環(huán)基—(R)—4—碘二苯乙醇酸酯(實(shí)施例33)的方法，制備無色糊狀的標(biāo)題化合物，產(chǎn)率73％(0.25g)。TLC〔硅膠，MeOH—NH4OH982〕Rf0.69；1H NMR(CDCl3)δ1.15—1.89(m，4H)，2.01(s，1H)，2.42—2.81(m，5H)，3.21(m，1H)，4.52(bs，1H，OH)，5.01(m，1H)，5.01(m，1H)和7.15—7.82(m，9H，Ar—H)。C.(S)—1—氮雜雙環(huán)〔2，2，2〕辛—3—基—(R)—α—羥基—α—(4)—苯基硼酸—α—苯基乙酸乙酯用(S)—3—奎寧環(huán)基—(R)—4—碘二苯乙醇酸酯(0.6g，1.3mmol)，n—BuLi(0.2g，2.5M，1.25ml，3.13mmol)和三乙基硼酸酯(0.378g，0.441ml，2.59mmol)在干燥四氫呋喃中，在-78℃，用如合成(RR)—QNB硼酸(實(shí)施例33)所述的方法，合成無色固體(TFA鹽的形式)的上述化合物，產(chǎn)率11％(58mg)。1H NMR(CD3OD)δ1.68(m，2H)1.95(m，2H)，2.35(s，1H)，2.81—3.35(m，5H)，3.80(m，1H)，5.31(m，1H))和7.28—7.71(m，9H，Ar—H)。MS準(zhǔn)確計(jì)算分子量為C24H29O6NB438.2092；實(shí)測值438.1190。
實(shí)施例35(S)—1—氮雜雙環(huán)〔2，2，2〕辛—3—基—(S)—α—羥基—α—(4)—苯基硼酸—a—苯基乙酸乙酯(S，S—QNB硼酸)的制備通過下述的反應(yīng)式制備本化合物 A.(RS)—4—溴二苯乙醇酸對4—溴二苯酮(54.81g，0.21mol)的干燥二氯甲烷(500ml)溶液，加入碘化鋅(0.5g)，在氮?dú)鈼l件下，在室溫下攪拌。然后從另一個(gè)燒瓶，用1小時(shí)的時(shí)間，滴加入三甲基硅氰化物(25g，0.25mol)，并在室溫下攪拌72小時(shí)。然后用飽和碳酸氫鈉(200ml)處理反應(yīng)混合物并攪拌1小時(shí)。分離出有機(jī)層，用水洗滌(2×150ml)并濃縮。殘留物懸浮在H2OHClAcOH(13L3；500ml)中，并用油浴在85—90℃加熱48小時(shí)。然后在真空濃縮溶液至約100ml，并用飽和碳酸氫鈉(400ml)處理，用乙醚(3×100ml)提取。然后用6 N鹽酸酸化水層，分離得到的固體溶于乙醚中(300ml)。用水洗滌有機(jī)層，過濾并蒸發(fā)濾液，得到無色的(RS)—4—溴二苯乙醇酸的結(jié)晶固體，產(chǎn)率19％(12g)；mp125—126℃；TLC〔硅膠，甲苯—乙酸〕Rf0.32；1H NMR(DMSO—d6)δ2.38(bs，2H，COOH和OH)和7.38—7.70(m，9H，AR—H)。B.3—S—奎寧環(huán)基4′—溴二苯乙醇酸酯N，N′—羰二咪唑(0.810g，0.005mol)在氮?dú)鈼l件下被加到外消旋對一溴二苯乙醇酸(1.53g，0.005mol)的二甲基甲酰胺(5ml)的溶液中，并在40℃攪拌反應(yīng)混合物1小時(shí)。加入S—奎寧環(huán)醇(0.8g，0.0063mol)并在40℃攪拌混合物24小時(shí)。完成反應(yīng)后，得到1.12g 3—S—奎寧環(huán)基4′—溴二苯乙醇酸酯。mp.151—53℃，1H NMR(DMSO—d6)δ1.3—3.3(m，奎寧環(huán)基質(zhì)子)，4.9(m，1H，CHO)，7.3—7.7(m，9H，ArH)。MS(M2＋H)+＝416+和418+。C(S)-1—氮雜二環(huán)〔2.2.2〕辛—3—基—(S)—α—羥—α—(4)—苯基硼酸—α—苯基乙酸酯對冷卻(-78℃)的3—S—奎寧環(huán)基4′—溴二苯乙醇酸酯(417mg，0.001mol)的干燥四氫呋喃(30ml)的溶液用注射器加入n—BuLi(2.5M的己烷溶液，1.0ml，0.165g，0.0025mol)。在-78℃攪拌混合物1小時(shí)。并在-78℃加入三乙基硼酸酯2ml。在-78℃再攪拌另外的1小時(shí)，并在室溫下攪拌4小時(shí)。除去四氫呋喃，殘留物用水處理并用乙酸乙酯提取，用硫酸鈉干燥。蒸發(fā)掉溶劑得到半固體物質(zhì)，用乙醚研磨得到100mg的(RS)，S—QNB—硼酸。mp212—215℃(分解)。如實(shí)施例33G所述。通過制備HPLC，從非對映異構(gòu)體的混合物中分離出S，S對映異構(gòu)體。S，S—對映異構(gòu)體的1H NMR(D2O)δ1.40-1.70(m，2H)，1.17-3.03(m，2H)，2.32(s，1H)，2.65-2.85(m，1H)，3.))-3.22(m，4H)，3.60(m，1H)，5.28(m，1H)，7.35(m，7H)，7.72(d，2H).
實(shí)施例36(R)—1—氮雜雙環(huán)〔2.2.2〕辛—3—基—(S)—α—(4)—苯基硼酸—α—苯基乙酸酯(S，R—QNB硼酸)通過示于實(shí)施例35的反應(yīng)式制備本化合物。A.3—R—奎寧環(huán)基4′—溴二苯乙醇酸酯在氮?dú)庀掳袾，N′—羰基二咪唑(0.810g，0.005mmol)加到對—溴二苯乙醇酸(實(shí)施例35A，1.53g，
0.005mmol)的二甲基甲酰胺(5ml)的溶液中，在40℃攪拌反應(yīng)混合物1小時(shí)。在40℃，R—奎寧環(huán)醇(0.8g，0.0063mol)被加到混合物中，攪拌混合物24小時(shí)。真空條件下除去二甲基甲酰胺，并把殘留物倒入水中。過濾沉淀的固體并在空氣中干燥。產(chǎn)率1.2g(58％)。
1H NMR(DMSO—d6)δ1.3—3.3(m，奎寧環(huán)基質(zhì)子)，4.9(m，1H，CHO)，7.3-7.7(m，9H，ArH)。MSM2—H)+＝416+和418+。
B.(R)—1—氮雜雙環(huán)〔2.2.2〕辛—3—基—(S)—α—羥—α—(4)—苯基硼酸—α—苯基乙酸酯對冷卻的(-78℃)3—奎寧環(huán)基4′—溴二苯酸酯(316mg，0.00076mol)的干燥四氫呋喃(30ml)的溶液，用注射器加入n—BuLi(2.5M己烷溶液，0.72ml，0.12g，0.0018mol)。在-78℃攪拌混合物1小時(shí)，并在此溫度下加入三乙基硼酸酯(1ml)。在-78℃再攪拌混合物1小時(shí)，并在室溫下攪拌4小時(shí)。除去四氫呋喃，用水處理殘留物。
并用乙酸乙酯提取，用硫酸鈉干燥。蒸發(fā)掉溶劑得到的半固體用乙醚研磨。得到固體，產(chǎn)率50mg。實(shí)施例33G中所述。通過制備HPLC從非對映異構(gòu)體的混合物中，分離出S.R對映異構(gòu)體，mpz13—215℃(分解)1H NMR(D2O)δ1.41-1.70(m，2H)，1.71-2.02(m，2H)，2.32(s，1H)，2.65-2.85(m，1H)，3.00-3.22(m，4H)，3.60(m，1H)，5.28(m，1H)，7.35(m，7H)，7.72(d，2H)
實(shí)施例3799mTcCl(DMG)3〔(RR或RS)QNB硼〕的制備在5ml硅血清管瓶中，定量加入2.0mg的二甲基乙二肟，1.5mg 3—R—奎寧環(huán)基—(4—硼—R—二苯乙醇酸酯)(RR—QNB—硼酸)或3—R—奎寧環(huán)基—(4—硼—S—二苯乙醇酸酯)(RS—QNB—硼酸)，20mg檸檬酸，100mgNaCl，2.0mg二亞乙基三胺五—乙酸，和125μgSnCl2(在4M HCl中)(全部體積0.7ml 28％乙醇/鹽水)。加入0.5ml99mTcO4—發(fā)生洗脫劑，并把混合物加熱到70℃15分鐘，用HPLC測定所需化合物的產(chǎn)率為60—70％。反應(yīng)混合物用PRP—1樹脂，進(jìn)行色譜提純得到產(chǎn)物的純度大于90％。
實(shí)施例3899mTcCl(CDO)3(QNB—硼)的制備對5ml硅血清管瓶定量加入2.0mg1，2—環(huán)己二酮二肟1.5mg3—奎寧環(huán)基—(4—硼—二苯乙醇酸酯)(QNB—硼酸)，20mg檸檬酸，100mg NaCl，2.0mg二亞乙基三胺五一乙酸，和125μg SnCl2(在4M HCl中)(全部體積0.7ml的28％乙醇/鹽水)。加入0.5ml99mTcO4—發(fā)生洗脫劑。在70℃加熱混合物約15分鐘，用HPLC測定所需化合物的產(chǎn)率為83％。用PRP—1樹脂色譜分離提純反應(yīng)混合物，得到的產(chǎn)物的純度＞90％。
實(shí)施例中硼酸的結(jié)構(gòu)式
權(quán)利要求
1.一種適合以99mTc或錸放射性核素標(biāo)記的藥盒，該藥盒包括(i)一種陰離子源；(ii)能夠就地反應(yīng)形成硼殘基的硼化合物或其可藥用鹽，所述化合物具有下式 其中R7和R′7各自分別為H、烷基、芳基，或R7和R′7結(jié)合在一起形成亞烷基-(CR8R9)2-6-，R8和R9各自分別為H或烷基；R3是一個(gè)生化活性基團(tuán)，選自缺氧癥介導(dǎo)的硝基雜環(huán)類；苯異丙胺類；類固醇類，如雌激素或雌二醇；糖類；脂肪酸類，但不包括C2-19羧烷基和羧烯基；巴比妥酸鹽類；磺酰胺類；單胺氧化酶底物和抑制劑，但不包括R4R5N-烷基，其中R4和R5各自分別是H或烷基，或R4、R5和N形成5元或6元雜環(huán)；抗高血壓劑；蠅蕈堿受體底物；多巴胺受體底物；A1是化學(xué)鍵或間隔基團(tuán)；(iii)一種式HO-N＝C(R1)-(R2)C＝N-OH的二肟化合物或其可藥用鹽，其中R1和R2各自分別是氫、鹵素、烷基、芳基、氨基或者5元或6元含氮或氧的雜環(huán)，或者R1和R2相結(jié)合形成-(CR8R9)n-，其中n是3、4、5或6，R8和R9各自分別是氫或烷基；(iv)任選的一種還原劑。
2.權(quán)利要求1的藥盒，其中陰離子源是鹵離子源。
3.權(quán)利要求2的藥盒，其中陰離子是Cl或Br。
4.權(quán)利要求1或2的藥盒，其中所述二肟是1，2-環(huán)己二酮二肟、1，2-環(huán)戊二酮二肟、或3-甲基-1，2-環(huán)戊二酮二肟。
5.權(quán)利要求1-4中任一項(xiàng)的藥盒，其中R3選自雌二醇即[17(α(E)-3，17-二羥基-1，3，5(10)-雌三烯-17-基]乙烯基和MIVE即[[11-β，17α(E)]-3，17-二羥基-11-甲氧基-1，3，5(10)-雌三烯基]乙烯基、4-[2-[(1-甲基乙基)氨基]丙基]苯基、一種蠅蕈堿受體底物、以及二(對溴苯基)乙醇酸3-奎寧環(huán)酯。
6.一種制備權(quán)利要求1的藥盒的方法，該方法包括將以下試劑組合在一起a)一種陰離子源；b)式VI、VII、VII＇、VII″的硼化合物或其鹽 其中各符號的定義如權(quán)利要求1所述；c)式II的二肟或其鹽 其中R1和R2的定義如權(quán)利要求1所述；d)任選的一種還原劑和/或配位劑。
全文摘要
锝-99m與放射活性的錸二肟配合物的硼酸加合物，其中的每一個(gè)包括生化活性基團(tuán)，這些加合物作為診斷和治療劑是有效的。
文檔編號C07F13/00GK1120437SQ9510933
公開日1996年4月17日 申請日期1995年8月1日 優(yōu)先權(quán)日1990年1月18日
發(fā)明者A·D·納恩, K·E·林德, S·尤里松, W·C·?？藸柭?申請人:布拉科國際有限公司