專利名稱：一種可作藥用的阿拉伯－半乳多糖的活性六糖片段的制備的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明是關(guān)于有生物活性的、特別是涉及可作藥用的阿拉伯-半乳多糖的活性六糖片段的制備。
阿拉伯半乳多糖蛋白(AGPs)是一類廣泛分布于植物組織和乳汁中的重要糖蛋白，它們在生物體內(nèi)的作用還不是很清楚，但用單克隆抗體作為對照，表明阿拉伯半乳多糖蛋白的最小決定單元與植物形態(tài)形成中的細(xì)胞發(fā)育有關(guān)，而從中草藥Angelica acutiloba和Bupleurum falcatum中提取出的阿拉伯半乳多糖，則是治療婦科疾病和關(guān)節(jié)炎的中草藥的有效成分。
至今尚未有文獻(xiàn)明確地報(bào)導(dǎo)阿拉伯半乳多糖的確切結(jié)構(gòu)，但Albersheim的研究組指出這種多糖的活性片段是包含三個(gè)β1-6連接的半乳糖，而且其中一個(gè)半乳糖有一個(gè)α連接的阿拉伯呋喃糖的四糖(P.Albersheim et al，Carbohydrate Research 275，1995，295-307)。為確定寡糖結(jié)構(gòu)-活性的關(guān)系，就要制備各種不同的異構(gòu)體，這些異構(gòu)體還能用于藥物篩選，本發(fā)明即是關(guān)于可作藥用的阿拉伯-半乳多糖的活性六糖片段的簡易制備方法。
本發(fā)明的目的是這樣實(shí)現(xiàn)的，將六糖分為兩個(gè)部分，再將它們縮合。即由三糖供體與三糖受體縮合而得。
本發(fā)明的合成方法在于1.以2，4-二苯甲?；?6-三苯甲基-3-叔丁基二甲基硅基-D-半乳糖異丙硫醇苷為原料，經(jīng)選擇性脫除6位三苯甲基，得到6位為游離羥基的半乳糖單糖受體，將此單糖受體與苯甲?；腄-半乳糖亞胺酯的糖基供體偶聯(lián)，得到1-6連接的雙糖，將此雙糖的3位硅烷基脫除，得到3位為游離羥基的雙糖受體，將此雙糖受體與苯甲?；?L-阿拉伯糖亞胺酯的糖基供體偶聯(lián)，得到一個(gè)在半乳糖6位連有另一個(gè)D-半乳糖、3位連有一個(gè)L-阿拉伯糖的三糖異丙硫醇苷的三糖供體，如下結(jié)構(gòu)式所示
2.以4，6-芐叉基-D-半乳糖的甲基苷為原料，經(jīng)2位選擇性苯甲?；?，再脫除芐叉基，然后在6位選擇性硅烷化，得到3，4位為游離羥基的單糖受體，將此單糖受體與苯甲酰化的L-阿拉伯糖亞胺酯的糖基供體在3位選擇性偶聯(lián)，得到1-3連接的雙糖，將此雙糖的6-位硅烷基脫除，得到4，6位為游離羥基的雙糖受體，將此雙糖受體與6-硅烷基-2，3，4-三苯甲?；?D-半乳糖硫酚苷的糖基供體偶聯(lián)，得到在6位連接的三糖，將此三糖?；倜摮沁€原端的糖的6位硅烷基，即得到三糖受體，如下結(jié)構(gòu)式所示 3.將三糖供體與三糖受體在N-碘代丁二酰亞胺-三甲基硅三氟甲磺酸酯的作用下偶聯(lián)，得到保護(hù)的六糖，再在甲醇-氨溶液中脫除保護(hù)，得到游離的六糖，如下結(jié)構(gòu)式所示 以上結(jié)構(gòu)式中，Tr＝三苯甲基，TBDPS＝叔丁基二苯基硅烷基Ac＝乙?；鵅z＝苯甲酰基，Me＝甲基以下結(jié)合實(shí)施例進(jìn)行說明。3-氧-叔丁基二甲基硅基-2，4-二-氧-苯甲?；?β-D-半乳吡喃糖異丙硫苷(2)的制備4.24g(5.29mmol)6-氧-三苯甲基-3-氧-叔丁基二甲基硅基-2，4，-二-氧-苯甲酰基-β-D-半乳吡喃糖異丙硫苷(1)溶于1ml二氯甲烷，加入10ml 50～60％的三氟乙酸，室溫下攪拌30分鐘。濃縮除去三氟乙酸(甲苯帶)，上柱，用1/3的乙酸乙酯-石油醚淋洗液淋洗，得白色結(jié)晶2.53g(85.5％)。m.p.110～111℃；1H NMR0.005(s，3H，SiCH3)，0.16(s，3H，SiCH3)，0.74(s，9H，C(CH3)3)，1.41(d，3H，CH3)，1.44(d，3H，CH3)，3.39(m，1H，CH)，3.72(q，1H，J6a.6b11.1，J6a.56.3Hz，H-6a)，3.93(q，1H，J6b.55.7Hz，H-6b)，4.02(t，1H，J5.6a6.2，J5.6b5.7Hz，H-5)，4.28(d，1H，J3.26.9，J3.4＜1Hz，H-3)，4.88(d，1H，J1.29.9Hz，H-1)，5.62(d，1H，J3.4＜1Hz，H-4)，5.73(t，1H，J2.3＝J3.49.6Hz，H-2)，7.58～8.28(m，10H，PhCO)2，3，4，6-四-氧-苯甲?；?β-D-半乳吡喃糖基-(1→6)-3-氧-叔丁基二甲基硅基-2，4-二-氧-苯甲?；?β-D-半乳吡喃糖異丙硫苷(4)的制備2.00g(3.57mmol)化合物2和2.27g(3.75mmol)2，3，4，6-四-氧-苯甲?；?β-D-半乳吡喃糖基-2，2，2-三氯乙酰亞胺酯(3)混合，在油泵上抽干。在N2氛圍保護(hù)下，加入20ml干燥的二氯甲烷，0℃下攪拌溶解，然后加入40μl TMSOTf(0.05equiv化合物2)，攪拌1小時(shí)。三乙胺中和，濃縮，上柱，用1/3的乙酸乙酯-石油醚淋洗液淋洗，得漿狀液體3.44g(84.7％)。1HNMR 0.005(s，3H，SiCH3)，0.16(s，3H，SiCH3)，0.74(s，9H，C(CH3)3)，1.31(d，3H，CH3)，1.41(d，3H，CH3)，3.12(m，1H，CH)，3.99(q，1H，J3.27.6，J3.42.4Hz，H-3A)，4.15～4.38(m，3H，J6a.6b10.8，J6a.52.6，J6b.56.7Hz，H-6aA，H-6bA，H-5A)，4.44(br t，1H，J5.6b＝J5.6a＝6.3Hz，H-5B)，4.52(q，1H，J6a.56.6，J6a.6b11.0Hz，H-6aB)，4.65(q，1H，J6b.56.0，J6a.6b11.0Hz，H-6bB)，4.80(d，1H，J1.29.8Hz，H-1A)，5.08(d，1H，J1.27.8Hz，H-1B)，5.64(br t，1H，J1.29.9，J2.38.2Hz，H-2A)，5.72(dd，1H，J2.310.0，J3.43.0Hz，H-3B)，5.78(d，1H，J3.43.0Hz，H-4A)，5.96(t，1H，J1.2＝J2.3＝8.1Hz，H-2B)，6.13(d，1H，J3.42.8Hz，H-4B)，7.37～8.29(m，30H，PhCO).2，3，4，6-四-氧-苯甲酰基-β-D-半乳吡喃糖基-(1→6)-2，4-二-氧-苯甲?；?β-D-半乳吡喃糖異丙硫苷(5)的制備2.50g(2.20mmol)化合物4溶于1ml二氯甲烷，加入10ml 90％的三氟乙酸，室溫下攪拌1小時(shí)。濃縮除去三氟乙酸(甲苯帶)，上柱，用1/3的乙酸乙酯-石油醚淋洗液淋洗，得漿狀液體1.72g(76.4％)。1HNMR 1.01(d，3H，CH3)，1.06(d，3H，CH3)，2.98(m，1H，CH)，3.75～3.94(m，3H，J6a.6b10.8Hz，J6a.52.6，J6b.56.7Hz，H-6aA，H-6bA，H-5A)，4.04(q，1H，J3.28.1，J3.42.4Hz，H-3A)，4.10～4.25(m，2H，J5.6a6.3，J6b.56.0，J6a.6b11.0Hz，H-6aB，H-5B)，4.32(q，1H，J6b.56.0，J6a.6b11.0Hz，H-6bB)，4.11(d，1H，J1.29.8Hz，H-1A)，4.78(d，1H，J1.27.8Hz，H-1B)，5.22(br t，1H，J1.29.9，J2.38.2Hz，H-2A)，5.45(dd，1H，J2.39.9，J3.42.9Hz，H-3B)，5.59(d，1H， J3.43.0Hz，H-4A)，5.68(t，1H，J1.2＝J2.37.8Hz，H-2B)，5.84(d，1H，J3.42.8Hz，H-4B)，7.11～8.01(m，30H，PhCO).2，3，4，6-四-氧-苯甲?；?β-D-半乳吡喃糖基-(1→6)-[2，3，5--三-氧-苯甲?；?α-L-阿拉伯糖基-(1→3)]-2，4-二-氧-苯甲酰基-β-D-半乳吡喃糖異丙硫苷(7)的制備1.50g(1.46mmol)化合物5和0.933g(1.54mmol)2，3，5--三-氧-苯甲?；?α-L-阿拉伯糖基-2，2，2-三氯乙酰亞胺酯(6)混合，在油泵上抽干。在N2氛圍保護(hù)下，加入15ml干燥的二氯甲烷，0℃下攪拌溶解，然后加入26μl TMS0Tf(0.1equiv化合物3)，攪拌1小時(shí)。三乙胺中和，濃縮，上柱，用1/2的乙酸乙酯-石油醚淋洗液淋洗，得漿狀液體1.68g(78.0％)。1HNMR 1.08(d，3H，CH3)，1.17(d，3H，CH3)，3.06(m，1H，CH)，3.78(q，1H，J6a.6b11.8Hz，J6a.52.7，H-6aA)，4.08～4.15(m，2H，J6a.6b11.8Hz，J6a.52.7，J6b.55.8Hz，H-6bA，H-5A)，4.18～4.23(m，3H，J2.37.8，J3.43.4，J5.6a6.3，J6b.56.0，J6a.6b10.8Hz，H-3A，H-6aB，H-5B)，4.36(q，1H，J6b.56.0，J6a.6b10.8Hz，H-6bB)，4.66(d，1H，J1.210.0Hz，H-1A)，4.70(dd，1H，J4.5a3.7，J5a.5b12.2Hz，H-5aC)，4.84(m，1H，J4.35.7，J4.5a4.6，J4.5b2.8Hz，H-4C)，4.87(d，1H，J1.27.9Hz，H-1B)，4.93(dd，1H，J4.5b2.8，J5a.5b12.1Hz，H-5bC)，5.25(br s，1H，H-2C)，5.31(S，1H，H-1C)，5.48(br d，1H，J3.45.5Hz，H-3C)，5.52(dd，1H，J2.310.4，J3.43.4Hz，H-3B)，5.66(t，1H，J1.2＝J2.3＝9.8Hz，H-2B)，5.77(dd，1H，J1.210.3，J2.37.9Hz，H-2A)，5.88(d，1H，J3.43.4Hz，H-4A)，5.92(d，1H，J3.43.3Hz，H-4B)，7.21～8.09(m，45H，PhCO).13CNMR 23.39(CH3)，23.78(CH3)，35.00(CH)，61.68(C-6B)，63.27(C-5C)，67.93(C-4B)，68.19(C-6A)，69.68(C-2A)，70.18(C-2B)，70.58(C-4A)，71.15(C-3A)，71.73(C-3B)，77.10(C-5A)，77.54(C-3C)，77.66(C-5B)，81.57(C-4C)，82.52(C-2C)，83.56(C-1A)，100.99(C-1B)，107.67(C-1C)，164.61～166.11(9C，PhCO)MS(M+Na)1491.61；(M+K)1507.586-氧-叔丁基二苯基硅基-2，3，4-三-氧-苯甲酰基-β-D-半乳吡喃糖苯硫苷(8)的制備2.20g(8.09mmol)β-D-半乳吡喃糖苯硫苷溶于8ml吡啶中，加入2.70ml叔丁基二苯基氯硅烷，攪拌16小時(shí)。待反應(yīng)完全后，加入3.30ml苯甲酰氯，攪拌反應(yīng)10小時(shí)。濃縮除去吡啶(甲苯帶)，上柱，用1/3的乙酸乙酯-石油醚淋洗液淋洗，得漿狀液體4.95g(74.4％)。1HNMR 1.01(s，9H，C(CH3)3)，3.79(q，1H，J6a.6b10.1，J6a.57.7Hz，H-6a)，3.90(q，1H，J6a.6b10.2，J6b.56.1Hz，H-6b)，4.14(brt，1H，J5.6b6.6，J5.6a6.9Hz，H-5)，4.98(d，1H，J1.29.5Hz，H-1)，5.61(dd，1H，J3.29.8，J3.42.9Hz，H-3)，5.68(t，1H，J2.3＝J3.4＝9.8Hz，H-2)，6.0.6(d，1H，J3.42.8Hz，H-4)，7.21～7.97(m，30H，PhCO)4，6-氧-異丙叉基-2-氧-苯甲?；?α-D-半乳吡喃糖甲基苷(9)的制備7.00g(29.9mmol)4，6-異丙叉基-α-D-半乳吡喃糖甲基苷溶于25ml吡啶中，加入3.8ml苯甲酰氯(1.05equiv)和20mmg催化劑DMAP，控溫在50～60℃攪拌5小時(shí)。反應(yīng)體系用二氯甲烷和水體系萃取，有機(jī)相用無水硫酸鈉干燥，濃縮干燥液，上柱，用1/3的乙酸乙酯-石油醚淋洗液淋洗，得白色結(jié)晶4.2g(產(chǎn)率41.6％)。1HNMR1.53(s，3H，CH3)，1.64(s，3H，CH3)，3.48(s，3H，OCH3)，3.79(d，2H，J6a.6b＜1，J6a.5＝J6b.5＝6.4Hz，H-6a，H-6b)，4.18(br t，1H，J5.6a＝J6b.5＝6.4，J4.51.7Hz，H-5)，4.33(dd，1H，J5.41.7，J3.46.8Hz，H-4)，4.55(dd，1H，J3.28.1，J3.46.8Hz，H-3)，5.00(d，1H，J1.23.4Hz，H-1)，5.14(dd，1H，J1.23.4，J2.38.1Hz，H-2)，7.27～8.11(m，5H，PhCO).2-氧-苯甲?；?α-D-半乳吡喃糖甲基苷(10)的制備2.90g(8.58mmol)化合物9溶于1ml二氯甲烷，加入8ml 90％的三氟乙酸，室溫下攪拌30分鐘。待反應(yīng)完全后，濃縮除去三氟乙酸(甲苯帶)，上柱，用純乙酸乙酯淋洗，得白色結(jié)晶2.50g(97.6％)。m.p.158～159℃；1HNMR 3.30(s，3H，OCH3)，3.78～4.10(br m，5H，J6a.6b10.2，J2.36.6Hz，H-6a，H-6b，H-5，H-4，H-3)，4.96(d，1H，J1.23.3Hz，H-1)，5.22(dd，1H，J1.23.3，J2.36.6Hz，H-2)，7.24～8.01(m，5H，PhCO).6-氧-叔丁基二苯基硅基--2-氧-苯甲?；?-α-D-半乳吡喃糖甲基苷(11)的制備2.50g(8.39mmol)化合物10溶于10ml吡啶中，加入2.8ml叔丁基二苯基氯硅烷和20mmg催化劑DMAP，室溫下攪拌過夜。用二氯甲烷和水體系萃取，有機(jī)相用無水硫酸鈉干燥，濃縮干燥液，上柱，用1/2的乙酸乙酯-石油醚淋洗液淋洗，得漿狀液體4.05g(90.0％)。1HNMR 0.99(s，9H，C(CH3)3)，3.23(s，3H，OCH3)，3.77(q，1H，J6b.55.2，J6a.54.8Hz，H-5)，3.82～3.93(br m，2H，J6b.6a10.8，J6b.56.0，J6a.55.7Hz，H-6b，H-6a)，4.03(dd，1H，J3.29.9，J3.43.3Hz，H-3)，4.12(d，1H，J3.43.3Hz，H-4)，4.93(d，1H，J1.23.6Hz，H-1)，5.16(dd，1H，J1.23.6，J2.39.9Hz，H-2)，7.16～8.00(m，15H，PhCO).2，3，5--三-氧-苯甲?；?α-L-阿拉伯糖基-(1→3)-6-氧-叔丁基二苯基硅基-2-氧-苯甲?；?α-D-半乳吡喃糖甲基苷(12)的制備2.50g(4.66mmol)化合物11和2.97g(4.90mmol)2，3，5--三-氧-苯甲酰基-α-L-阿拉伯糖基-2，2，2-三氯乙酰亞胺酯(6)混合，在油泵上抽干。在N2氛圍保護(hù)下，加入20ml干燥的二氯甲烷，0℃下攪拌溶解，然后加入42μl TMSOTf(0.05equiv化合物3)，攪拌1小時(shí)。三乙胺中和，濃縮，上柱，用1/4的乙酸乙酯-石油醚淋洗液淋洗，得漿狀液體3.28g(71.8％)。1HNMR 0.96(s，9H，C(CH3)3)，3.23(s，3H，OCH3)，3.75～3.94(br d，3H，J6b.5＝J6a.5＝5.1，J6b.6a＜1J6b.5Hz，H-5D，H-6bD，H-6aD)，4.17(d，1H，J3.43.0Hz，H-4D)，4.29(dd，1H，J3.210.2，J3.43.0Hz，H-3D)，4.48～4.64(m，2H，J5a.5b10.0，J4.5a4.8，J4.5b5.4Hz，H-4F，H-5aF)，4.70(dd，1H，J5a.5b10.5，J4.5b5.4Hz，H-5bF)，5.09(d，1H，J1.23.6Hz，H-1D)，5.34(dd，1H，J1.23.6，J2.310.2Hz，H-2D)，5.41(br s，1H，H-2F)，5.49(d，1H，J3.43.9Hz，H-3F)，5.52(s，1H，H-1F)，7.06～8.10(m，30H，PhCO).2，3，5-三-氧-苯甲酰基-α-L-阿拉伯糖基-(1→3)-2-氧-苯甲?；?α-D-半乳吡喃糖甲基苷(13)的制備3.00g(3.06mmol)化合物12溶于1ml二氯甲烷，加入20ml 90％的三氟乙酸，室溫下攪拌1小時(shí)。待反應(yīng)完全后，碳酸氫鈉中和，然后用二氯甲烷和水體系萃取，有機(jī)相用無水硫酸鈉干燥，濃縮干燥液，上柱，用2/3的乙酸乙酯-石油醚淋洗液淋洗，得漿狀液體1.94g(85.5％)。1HNMR 3.31(s，3H，OCH3)，3.70～4.00(br m，3H，J6b.5＝J6a.5＝5.1，J6b.6a9.9Hz，H-5D，H-6bD，H-6aD)，4.22(d，1H，J3.43.0Hz，H-4D)，4.35(dd，1H，J3.29.9，J3.43.0Hz，H-3D)，4.52～4.68(br m，2H，J5a.5b10.0，J4.5a4.8，J4.5b5.4Hz，H-4F，H-5aF)，4.74(dd，1H，J5a.5b10.5，J4.5b5.4Hz，H-5bF)，5.10(d，1H，J1.23.3Hz，H-1D)，5.40(dd，1H，J1.23.3，J2.39.9Hz，H-2D)，5.44(br s，1H，H-2F)，5.51(br d，1H，J3.43.9Hz，H-3F)，5.54(s，1H，H-1F)，7.16～8.00(m，30H，PhCO).2，3，5-三-氧-苯甲酰基-α-L-阿拉伯糖基-(1→3)-[6-氧-叔丁基二苯基硅基-2，3，4-三-氧-苯甲?；?β-D-半乳吡喃糖基-(1→6)]--2-氧-苯甲酰基-α-D-半乳吡喃糖甲基苷(14)的制備1.68g(2.26mmol)化合物13和1.96g(2.38mmol)6-氧-叔丁基二苯基硅基-2，3，4-三-氧-苯甲?；?β-D-半乳吡喃糖苯硫苷(8)混合，在油泵上抽干。在N2氛圍保護(hù)下，加入15ml干燥的二氯甲烷，0℃下攪拌溶解，然后加入1.34g NIS，120μlTMS0Tf(0.3equivDonor)，攪拌1小時(shí)。三乙胺中和，濃縮，上柱，用2/5的乙酸乙酯-石油醚淋洗液淋洗，得漿狀液體2.31(70.2％)。1HNMR 0.97(s，9H，C(CH3)3)，2.87(s，3H，OCH3)，3.80～3.90(m，3H，H-6aD，H-6bD，H-6aE)，3.97(br d，1H，J5.6a8.3，H-5D)，4.07～4.13(m，1H，H-4A，H-5E，H-6bE)，4.28(dd，1H，J2.310.5，J3.43.4Hz，H-3D)，4.59～4.64(m，2H，J4.5a3.9，J5a.5b12.1Hz，H-5aF，H-4F)，4.73(q，1H，J4.5b2.7Hz，H-5bF)，4.80(d，1H，J1.23.6Hz，H-1D)，4.85(d，1H，J1.27.8Hz，H-1E)，5.32(dd，1H，J1.23.6，J2.310.4Hz，H-2D)，5.45(br s，1H，H-2F)，5.51(s，1H，H-1F)，5.53(br d，1H，J3.43.0，H-3F)，5.63(dd，1H，J3.43.3，J2.310.4Hz，H-3E)，5.72(dd，1H，J1.27.8，J2.310.4Hz，H-2E)，6 07(d，1H，J3.42.9Hz，H-4E)，7.07～8.03(m，45H，PhCO)2，3，5-三-氧-苯甲?；?α-L-阿拉伯糖基-(1→3)-[6-氧-叔丁基二苯基硅基-2，3，4-三-氧-苯甲酰基-β-D-半乳吡喃糖基-(1→6)]-4-氧-乙?；?2-氧-苯甲?；?α-D-半乳吡喃糖甲基苷(15)的制備1.42g(0.979mmol)化合物14溶于4ml吡啶中，加入2ml乙酸酐，室溫下攪拌約20小時(shí)。濃縮除去吡啶和乙酸酐，上柱，用2/5的乙酸乙酯-石油醚淋洗液淋洗，得漿狀液體1.22g(83.6％)。1HNMR 1.00(s，9H，C(CH3)3)，1.87(s，3H，CH3CO)，2.92(s，3H，OCH3)，3.61(q，1H，J5.6a8.0，J6a.6b10.6Hz，H-6aD)，3.78～3.85(m，2H，J6a.6b13.1Hz，H-6aE，H-6bE)，3.94(q，1H，J5.6b2.5，J6a.6b10.6Hz，H-6bD)，4.07(t，1H，J6b.5＝J6a.5＝7.4Hz，H-5E)，4.14(br d，1H，J5.6a8.0Hz，H-5D)，4.44(dd，1H，J2.310.5，J3.43.4Hz，H-3D)，4.67(dd，1H，J4.5a3.9，J5a.5b12.1Hz，H-5aF)，4.78(m，1H，H-4F)，4.83(d，1H，J1.27.8Hz，H-1E)，4.85(d，1H，J1.23.6Hz，H-1D)，4.90(dd，1H，J4.5b2.7Hz，H-5bF)，5.28(dd，1H，J1.23.5，J2.310.6Hz，H-2D)，5.36(br s，1H，H-2F)，5.45(s，1H，H-1F)，5.48～5.54(br d，2H，J5.0，H-4D，H-3F)，5.62(dd，1H，J3.43.3，J2.310.4Hz，H-3E)，5.69(dd，1H，J1.27.8，J2.310.4Hz，H-2E)，6.06(d，1H，J3.42.9Hz，H-4E)，7.09～8.06(m，45H，PhCO)2，3，5-三-氧-苯甲?；?α-L-阿拉伯糖基-(1→3)-[2，3，4-三-氧-苯甲酰基-β-D-半乳吡喃糖基-(1→6)]-4-氧-乙?；?-2-氧-苯甲酰基-α-D-半乳吡喃糖甲基苷(16)的制備1.00g(0.668mmol)化合物15溶于0.5ml二氯甲烷，加入10ml 90％的三氟乙酸，室溫下攪拌3小時(shí)。待反應(yīng)完全后，濃縮除去三氟乙酸(甲苯帶)，上柱，用2/3的乙酸乙酯-石油醚淋洗液淋洗，得漿狀液體651mg(77.4％)。1HNMR 1.94(s，3H，CH3CO)，2.99(s，3H，OCH3)，3.64～3.68(m，2H，H-6aD，H-6aE)，3.85(dd，1H，J6a.6b11.9，J5.6b6.4，H-6bE)，3.96(dd，1H，J5.6b3.1，J6a.6b9.3，H-6bD)，4.07(t，1H，J6b.5＝J6a.5＝7.0Hz，H-5E)，4.18(dd，1H，J5.6a＝J5.6b＝4.6Hz，H-5D)，4.46(dd，1H，J2.310.5，J3.43.4Hz，H-3D)，4.68(dd，1H，J4.5a3.9，J5a.5b12.1Hz，H-5aF)，4.78(m，1H，H-4F)，4.85～4.87(q，2H，J1.27.8Hz，J1.23.8Hz，H-1D，H-1E)，4.93(dd，1H，J4.5b2.8Hz，H-5bF)，5.31(dd，1H，J1.23.6，J2.310.5Hz，H-2D)，5.36(s，1H，H-2F)，5.46(s，1H，H-1F)，5.51(br d，1H，J3.43.7Hz，H-3F)，5.57(d，1H，J3.43.3Hz，H-4D)，5.58(dd，1H，J3.43.3，J2.310.6Hz，H-3E)，5.82～5.87(m，2H，H-2E，H-4E)，7.22～8.10(m，35H，PhCO).13CNMR 20.70(CH3CO)，55.02(OCH3)，60.54(C-6E)，63.30(C-5F)，68.38(C-5D)，68.94(C-4E)，69.28(C-6D)，69.95(C-2E)，70.98(C-4D)，71.24(C-2D)，71.71(C-3E)，71.95(C-3D)，74.04(C-5E)，77.86(C-3F)，81.29(C-4F)，82.26(C-2F)，97.07(C-1D)，101.92(C-1E)，107.54(C-1F)，164.78～166.83(7C，PhCO)，170.24(CH3CO)2，3，4，6-四-氧-苯甲?；?β-D-半乳吡喃糖基-(1→6)-[2，3，5--三-氧-苯甲?；?α-L-阿拉伯糖基-(1→3)]-2，4-二-氧-苯甲?；?β-D-半乳吡喃糖基-(1→6)-2，3，4-三-氧-苯甲?；?β-D-半乳吡喃糖基-(1→6)-[2，3，5--三-氧-苯甲?；?α-L-阿拉伯糖基-(1→3)]-4-氧-乙?；?2-氧-苯甲酰基-α-D-半乳吡喃糖甲基苷(17)的制備600mg(0.477mmol)化合物16和735mg(0.501mmol)化合物7混合，在油泵上抽干。在N2氛圍保護(hù)下，加入10ml干燥的二氯甲烷，0℃下攪拌溶解，然后加入282mgNIS(2.5equivDonor)，47μl TMSOTf(0.5equivDonor)，攪拌1小時(shí)。三乙胺中和，濃縮，上柱，用2/3的乙酸乙酯-石油醚淋洗液淋洗，得漿狀液體1.05g(83.1％)。1HNMR 1.86(s，3H，CH3CO)，2.93(s，3H，OCH3)，3.33(dd，1H，J5.6b2.7.1，J6a.6b11.8，H-6aA)，3.58(dd，1H，J6a.6b9.3，J5.6a8.0，H-6aD)，3.75～3.92(m，5H，H-6aE，H-6bE，H-5E，H-6aB，H-6bD)，3.95(dd，1H，J5.6b5.8，H-6bA)，4.02～4.15(m，5H，H-3A，H-5AH-5B，H-6bB，H-5D)，4.44(dd，1H，J2.310.5，J3.43.4Hz，H-3D)，4.51(d，1H，J1.28.0Hz，H-1A)，4.54(d，1H，J1.27.8Hz，H-1B)，4.66(dd，1H，J4.5a3.9，J5a.5b12.1Hz，H-5aF)，4.72～4.85(br，4H，H-1D，H-1E，H-5aC，H-4F)，4.91(dd，1H，J4.5b2.8Hz，H-5bF)，4.98～5.05(br，2H，H-5bC，H-4C)，5.24～5.29(m，3H，H-1C，H-2C，H-2D)，5.36(s，1H，H-2F)，5.44(s，1H，H-1F)，5.46～5.62(m，6H，H-2A，H-3B，H-3C，H-4D，H-3E，H-3F)，5.64～5.68(m，2H，H-2B，H-2E)，5.81～5.84(m，2 H，H-4A，H-4B)，5.96(d，1H，H-4E)，7.21～8.21(m，80H，PhCO).13CNMR 20.61(CH3CO)，54.89(OCH3)，61.22(C-6B)，63.22(C-5F)，63.37(C-5C)，66.36(C-6A)，66.46(C-6E)，67.75(C-4B)，67.99(C-4E)，68.28(C-5D)，68.69(C-6D)，69.44(C-4A)，69.87(C-2B)，69.92(C-2E)，70.76(C-3B)，70.90(C-3A)，71.24(C-2D)，71.61(C-3E)，71.68(2C，C-2A，C-4D)，71.92(C-3D)，72.40(C-5A)，72.57(C-5E)，76.40(C-5B)，77.65(C-3F)，77.81(C-3C)，81.18(C-4F)，81.64(C-4C)，82.28(C-2F)，81.82.61(C-2F)，97.93(C-1D)，100.79(C-1B)，100.94(C-1A)，101.60(C-1E)，107.50(C-1F)，107.68(C-1C)，164.62～166.18(16C，PhCO)，169.91(CH3CO)β-D-半乳吡喃糖基-(1→6)-[α-L-阿拉伯糖基-(1→3)]-β-D-半乳吡喃糖基-(1→6)-β-D-半乳吡喃糖基-(1→6)-[α-L-阿拉伯糖基-(1→3)]-α-D-半乳吡喃糖甲基苷(18)的制備1.05g化合物17溶于20ml無水甲醇中，通入氨氣至飽和(反應(yīng)體系由冷變熱，再變冷即可)。然后，靜止放置7天，濃縮，用純甲醇在葡萄糖凝膠LH-20柱淋洗，得白色固體213mg，產(chǎn)率86％。[α]D25＝-8.3°(c3.1，H2O)，1H NMR(D2O，400MHz)δ3.25-4.27，4.35，4.52，4.57，5.27，5.23，5.17。
權(quán)利要求
1.一種可作藥用的阿拉伯-半乳多糖的活性六糖片段的制備方法，其特征在于以2，4-二苯甲?；?6-三苯甲基-3-叔丁基二甲基硅基-D-半乳糖異丙硫醇苷為原料，經(jīng)選擇性脫除6位三苯甲基，得到6位為游離羥基的半乳糖單糖受體，將此單糖受體與苯甲?；腄-半乳糖亞胺酯的糖基供體偶聯(lián)，得到1-6連接的雙糖，將此雙糖的3位硅烷基脫除，得到3位為游離羥基的雙糖受體，將此雙糖受體與苯甲?；?L-阿拉伯糖亞胺酯的糖基供體偶聯(lián)，得到一個(gè)在半乳糖6位連有另一個(gè)D-半乳糖、3位連有一個(gè)L-阿拉伯糖的三糖異丙硫醇苷的三糖供體，如下結(jié)構(gòu)式所示
2.以4，6-芐叉基-D-半乳糖的甲基苷為原料，經(jīng)2位選擇性苯甲酰化，再脫除芐叉基，然后在6位選擇性硅烷化，得到3，4位為游離羥基的單糖受體，將此單糖受體與苯甲?；腖-阿拉伯糖亞胺酯的糖基供體在3位選擇性偶聯(lián)，得到1-3連接的雙糖，將此雙糖的6-位硅烷基脫除，得到4，6位為游離羥基的雙糖受體，將此雙糖受體與6-硅烷基-2，3，4-三苯甲?；?D-半乳糖硫酚苷的糖基供體偶聯(lián)，得到在6位連接的三糖，將此三糖?；?，再脫除非還原端的糖的6位硅烷基，即得到三糖受體，如下結(jié)構(gòu)式所示
3.將三糖供體與三糖受體在N-碘代丁二酰亞胺-三甲基硅三氟甲磺酸酯的作用下偶聯(lián)，得到保護(hù)的六糖，再在甲醇-氨溶液中脫除保護(hù)，得到游離的六糖，如下結(jié)構(gòu)式所示 以上結(jié)構(gòu)式中，Tr＝三苯甲基，TBDPS＝叔丁基二苯基硅烷基Ac＝乙?；鵅z＝苯甲?；琈e＝甲基
全文摘要
本發(fā)明是關(guān)于有生物活性的、特別是涉及可作藥用的阿拉伯－半乳多糖的活性六糖片段的合成。該活性片段的主鏈?zhǔn)?－6β－連接的D－半乳四糖,在主鏈還原端半乳糖及另一個(gè)半乳糖的3位連有α－連接的L－阿拉伯呋喃糖,這樣的活性片段可用三糖與三糖縮合的策略制備。
文檔編號C08B37/00GK1369509SQ0110371
公開日2002年9月18日 申請日期2001年2月12日 優(yōu)先權(quán)日2001年2月12日
發(fā)明者杜宇國, 顧國鋒, 楊鋒, 孔繁祚 申請人:中國科學(xué)院生態(tài)環(huán)境研究中心