專利名稱：：活體相關物質(zhì)的非特異性吸附抑制劑及涂覆制品的方法
技術領域：
：本發(fā)明涉及一種活體相關物質(zhì)的非特異性吸附抑制劑，所述抑制劑抑制活體相關物質(zhì)如在臨床診斷試劑、臨床診斷設備、生物芯片等中使用的各種蛋白質(zhì)的非特異性吸附，本發(fā)明也涉及用所述非特異性吸附抑制劑涂覆制品的方法。
背景技術：
：近年來，高靈敏度試驗已為疾病的早期檢測等目的所需要，診斷試劑靈敏度的提高是一個重要的問題。此外，在使用固相如聚苯乙烯板和磁性粒子的診斷試劑情況下，為提高靈敏度的目的，檢測方法正從使用酶顯色的方法向使用可獲得更高靈敏度的熒光或化學發(fā)光的方法轉(zhuǎn)變。但實際上尚未獲得足夠的靈敏度。一個原因是，在活體分子如血清共存下檢測特定物質(zhì)的診斷情況下，共存的活體分子、第二抗體、發(fā)射基質(zhì)等會非特異性地附著到固相、工具、容器等上。因此，噪聲增大，阻礙靈敏度的提高。相應地，在診斷免疫檢測情況下，為了減少由除特異性結(jié)合物質(zhì)之外的物質(zhì)向免疫反應中所用的固相的表面以及工具和容器上的非特異性吸附所引起的靈敏度降低，通常通過使用源自生物體的物質(zhì)如白蛋白、酪蛋白和明膠作為非特異性吸附抑制劑來抑制非特異性吸附，從而降低噪聲。但即便加入常規(guī)方法得到的非特異性吸附抑制劑，非特異性吸附仍然存在。此外，當使用源自活體的非特異性吸附抑制劑時，存在以BSE為代表的生物體污染的問題。因此通過化學合成開發(fā)高性能的非特異性吸附抑制劑是需要的。作為化學合成的非特異性吸附抑制劑，JP-A-10-153599和JP-A-11-352127中提出了含聚氧乙烯的聚合物，日本專利第43443891號中提出了特定的甲基丙烯酸類共聚物。但它們的非特異性吸附抑制效果不足。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明提供一種活體相關物質(zhì)的非特異性吸附抑制劑，其可抑制活體相關物質(zhì)如蛋白質(zhì)向診斷化學發(fā)光免疫檢測等中所用的固相表面和工具及容器上的非特異性吸附，本發(fā)明也提供用所述非特異性吸附抑制劑涂覆制品的方法。根據(jù)本發(fā)明的一個實施方案的用于活體相關物質(zhì)的非特異性吸附抑制劑包含共聚物，所述共聚物包含下式(l)所代表的重復單元(A):<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>其中，R。代表氫原子或甲基，Z代表下式(la)或(lb)所代表的基團<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>其中，Ri和I^獨立地代表氫原子、含l-8個碳原子的烷基或被至少一種選自羥基、羧基、烷氧基、酰氧基和烷氧基羰基的基團所取代的含1-8個碳原子的烷基；其中，113和114獨立地代表單鍵、亞甲基、被羥基或g取代的<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>亞甲基、含2-7個碳原子的亞烷基或被羥基或羧基所取代的含2-7個碳原子的亞烷基，其中113和114的碳原子的總數(shù)為4-10;其中R3和R"中的至少一個可具有醚鍵，Y代表單鍵、O和S中的任意一個，和下式(2)所代表的重復單元(B):其中，R5代表氫原子或甲基，和116代表苯基或-<:02117所代表的基團，其中R"代表含1-12個碳原子的取代或未取代烷基、脂環(huán)烴或芳香烴。具體實施例方式為了解決上述問題，本發(fā)明的發(fā)明人已發(fā)現(xiàn)特定組成的共聚聚合物對活體相關物質(zhì)具有高的非特異性吸附抑制效果，從而完成本發(fā)明。根據(jù)本發(fā)明，所述活體相關物質(zhì)是指脂類、蛋白質(zhì)、糖類或核酸。根據(jù)活體相關物質(zhì)的上述非特異性吸附抑制劑的上述式(l)，R1可代表氫原子或曱基，112可代表選自氫原子、甲基和羥乙基中的至少一種。根據(jù)活體相關物質(zhì)的上述非特異性吸附抑制劑，上述重復單元(B)可為衍生自至少一種水中溶解度低于20%的單體的結(jié)構(gòu)。才艮據(jù)活體相關物質(zhì)的上述非特異性吸附抑制劑的上述式(2)，R5可代表氫原子或甲基，116可代表-<:02117基團，W可代表選自甲基、乙基和甲氧基乙基中的至少一種。根據(jù)活體相關物質(zhì)的上述非特異性吸附抑制劑，前述共聚物可進一步包含下式(3)所代表的重復單元(C):-CH2—Y~~j—~<3〉其中，RS代表氫原子或甲基，W代表包含至少一個搭基或酮基的有機基團。根據(jù)活體相關物質(zhì)的上述非特異性吸附抑制劑，其還可包含酰肼化合物(H)，每一分子所述酰肼化合物(H)包含至少兩個肼基。根據(jù)本發(fā)明的一個實施方案的用于涂覆制品的方法包括使制品與包含上述活體相關物質(zhì)的非特異性吸附抑制劑的溶液接觸的步。下面將示,J性地描述，據(jù)本發(fā)明的一個實p施方案的'，,相關物的方法。1.活體相關物質(zhì)的非特異性吸附抑制劑1.1活體相關物質(zhì)的非特異性吸附抑制劑的構(gòu)成1.本實施方案中涉及的活體相關物質(zhì)的非特異性吸附抑制劑包含共聚物，所述共聚物包含下式(1)所代表的重復單元(A):I'CH廣9一'—.(1)C—zo其中，Rn代表氫原子或甲基，Z代表下式(la)或(lb)所代表的基團<formula>formulaseeoriginaldocumentpage8</formula>其中，W和I^獨立地代表氫原子、含l-8個碳原子的烷基或被至少一種選自羥基、羧基、烷氧基、酰氧基和烷氧基羰基的基團所取代的含1-8個碳原子的烷基；<formula>formulaseeoriginaldocumentpage8</formula>其中，1^和114獨立地代表單鍵、亞甲基、被羥基或羧基取代的亞甲基、含2-7個碳原子的亞烷基或被羥基或羧基所取代的含2-7個碳原子的亞烷基，其中113和114的碳原子的總數(shù)為4-10;其中R3和W中的至少一個可具有醚鍵，Y代表單鍵、O和S中的任意一個，和下式(2)所代表的重復單元(B):<formula>formulaseeoriginaldocumentpage8</formula>其中，Rs代表氫原子或甲基，和116代表苯基或-<:02117所代表的基團，其中R〒代表含l-12個碳原子的取代或未取代烷基、脂環(huán)烴或芳香烴。本實施方案中涉及的活體相關物質(zhì)的非特異性吸附抑制劑可含上述共聚物作為其一部分或者可單獨由上述共聚物構(gòu)成。1.2活體相關物質(zhì)的非特異性吸附抑制劑的物理性質(zhì)和應用關于本實施方案中涉及的活體相關物質(zhì)的非特異性吸附抑制劑，上述共聚物的數(shù)均分子量通常為1,000到1,000,000，優(yōu)選2,000到100,000，更優(yōu)選3,000到50,000。此外，上述共聚物的分子量分布通常為1.5到3(重均分子量/數(shù)均分子量)。這是因為當上述共聚物的數(shù)均分子量低于上述范圍時，存在非特異性吸附抑制效果不足的情況。另一方面，當上述共聚物的數(shù)均分子量高于上述范圍時，存在因溶液粘度的增加而變得難以進行涂覆和操作的情況。本實施方案中涉及的活體相關物質(zhì)的非特異性吸附抑制劑中所含的共聚物是水溶性的。根據(jù)本發(fā)明，"水溶性的"是指當將共聚物加到25C的水中并與水混合至聚合物固含量為1%時，肉眼觀察到所述共聚物透明地或半透明地溶解于水中。本實施方案中涉及的活體相關物質(zhì)的非特異性吸附抑制劑具有高的非特異性吸附抑制效果。本實施方案中涉及的活體相關物質(zhì)的非特異性吸附抑制劑可示例性地以如下方式起作用。根據(jù)本實施方案中涉及的活體相關物質(zhì)的非特異性吸附抑制劑，所述非特異性吸附抑制劑可通過上述共聚物的重復單元(B)的疏水鍵附著到容器壁表面、工具等上，并且蛋白質(zhì)、脂類等的非特異性吸附也可因壁表面通過重復單元(A)變得親水而得到抑制。由于本實施方案中涉及的活體相關物質(zhì)的非特異性吸附抑制劑因擁有其中重復單元(A)和重復單元(B)相平衡的共聚物而表現(xiàn)出高吸附速率，故其尤其可有效地抑制蛋白質(zhì)等引起非特異性吸附的物質(zhì)吸附至容器壁表面、工具等。此外，根據(jù)本實施方案中涉及的活體相關物質(zhì)的非特異性吸附抑制劑，上述共聚物的重復單元(B)與蛋白質(zhì)相互作用，并且重復單元(A)具有水分散活性。因此，其可通過阻止蛋白質(zhì)通過構(gòu)象變化而變?yōu)槭杷裕瑥亩鴮崿F(xiàn)蛋白質(zhì)在含水溶劑中的增溶。例如通過將本實施方案中涉及的活體相關物質(zhì)的非特異性吸附抑制劑涂覆到容器、工具等上的方法或加入到診斷試劑的稀釋劑、反應溶劑或防腐劑中的方法，其表現(xiàn)出強烈抑制蛋白質(zhì)等的非特異性吸附的效果。也就是說，根據(jù)本發(fā)明一個實施方案的用于涂覆制品的方法包括使所述制品與包含本實施方案中涉及的活體相關物質(zhì)的非特異性吸附抑制劑的溶液接觸的步驟。此外，通過用作免疫診斷試劑的稀釋劑，本實施方案中涉及的號。此外，當被加到蛋白質(zhì)溶液中例如作為用作臨床診斷試劑的標記抗體、標記抗原、酶、第一抗體或第一抗原的穩(wěn)定劑、血漿制劑中所含蛋白質(zhì)的穩(wěn)定劑、清洗隱形眼鏡中使用的酶等的穩(wěn)定劑等時，本實施方案中涉及的活體相關物質(zhì)的非特異性吸附抑制劑具有長時間保持蛋白質(zhì)活性的效果。1.3重復單元(A)在上述共聚物中，上述式(l)所代表的重復單元(A)可有助于高的非特異性吸附抑制效果的表達。由上述式(la)中R1和R2所代表的含1-8個碳原子的取代或未取代烷基的實例包括取代或未取代的直鏈或支化烷基，如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、己基、庚基、辛基、和這些基團被官能團如羥基、烷氧基等所取代的基團。更示例性地，優(yōu)選在上述式(l)中，Ri代表氫原子或甲基，R2代表選自氫原子、曱基和羥乙基中的至少一種。此外，與上述式(lb)對應的環(huán)結(jié)構(gòu)的實例包括吡咯烷基、哌啶子基、嗎啉代、硫代嗎啉代等。1.4重復單元(B)在上述共聚物中，通過使共聚物的親水/疏水平衡移向疏水側(cè)，上述式(2)所代表的重復單元(B)可有助于高的非特異性吸附抑制效果的表達。10由上述式(2)中RS所代表的含1-12個碳原子的取代或未取代烷基的實例包括取代或未取代的直鏈或支化烷基，如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、己基、庚基、辛基、和這些基團被官能團如羥基、烷氧基所取代的基團。此外，上述式(2)中R5所代表的脂環(huán)烴的實例包括異冰片基(isobonylgroup)和環(huán)己基，R5所代表的芳香烴的實例包括節(jié)基。此外，優(yōu)選在上述式(2)中113代表氫原子或甲基，R"為-C02R5所代表的基團，RS代表選自甲基、乙基和曱氧基乙基中的至少一種。此外，在上述共聚物中可分別含至少一種或多種重復單元(A)和重復單元(B)。就此而論，除重復單元(A)和重復單元(B)外，上述共聚物還可含重復單元(C)。1.5重復單元(C)根據(jù)本實施方案中涉及的活體相關物質(zhì)的非特異性吸附抑制劑，上述共聚物還可含下式(3)所代表的重復單元(C):其中，Rs代表氫原子或甲基，W代表包含至少一個醛基或酮基的有機基團。在上述共聚物中，重復單元(C)可有助于提高所形成的涂覆膜(非特異性吸附抑制劑層)的耐久性。根據(jù)本發(fā)明，醛基是指與一個碳原子相連的醛基，酮基是指與兩個碳原子相連的羰基，不包括羧基和氨基。在上述式(3)中，Rs優(yōu)選為氫原子。W優(yōu)選為具有醛基的有機基團，如甲?；?、甲耽基苯基、下式(4)所代表的含醛基的酯基ii<formula>formulaseeoriginaldocumentpage12</formula>其中，R"到R"獨立地為氫原子、曱基或乙基；下式(5)所代表的含醛基的酰胺基<formula>formulaseeoriginaldocumentpage12</formula>其中，R"到R"獨立地為氫原子、曱基或乙基等；或含有酮基的有機基團，如乙酖基、乙?；交?、下式(6)所代表的含酮基的酯基<formula>formulaseeoriginaldocumentpage12</formula>其中，R"到R"獨立地為氫原子、甲基或乙基；下式(7)所代表的含酮基的耽胺基<formula>formulaseeoriginaldocumentpage12</formula>其中，R"到R"獨立地為氫原子、甲基或乙基等。更優(yōu)選作為W的有機基團為甲?；?、乙酰基和下式(8)所代表的有機基團，最優(yōu)選的有機基團為下式(8)所代表的有機基團。CH3-C—NH一C一CH2一COCH3"…(s)II0CH31.6酰肼化合物(H)每一分子酰肼化合物(H)具有至少兩個肼基。酰肼化合物(H)的實例包括總共含2-10個、特別是4-6個碳原子的二羧酸二酰肼，例如草酸二酰肼、丙二酸二酰肼、琥珀酸二酰肼、戊二酸二酰肼、己二酸二醜肼、癸二酸二酰肼、鄰苯二曱酸二酰肼、間苯二甲酸二酰肼、對苯二甲酸二酰肼、馬來酸二酰肼、富馬酸二酰肼、衣康酸二酰肼等；含三個或更多官能團的酏肼如檸檬酸三酰肼、次氨基三乙酸(nitriloaceticacid)三酰肼、環(huán)己烷三羧酸三酰肼、乙二胺四乙酸四酰肼等；水溶性的二肼，例如含2-4個碳原子的脂肪族二肼等，如l,2-乙二肼、1，2-丙二肼、1，3-丙二肼、1，2-丁二肼、1，3-丁二肼、1，4-丁二肼、2,3-丁二肼等，和這類多官能度肼衍生物的至少部分肼基通過使其與羰基化合物(如乙醛、丙醛、丁醛、丙酮、甲基乙基酮、二乙基酮、甲基正丙基酮、甲基正丁基酮、雙丙酮醇等)反應而被封端的化合物，例如己二酸二酰肼單丙酮腙、己二酸二酰肼雙丙酮腙等。在這些酰肼化合物(H)中，優(yōu)選的是，選自己二酸二酰肼、癸二酸二酰肼、間苯二甲酸二酰肼和己二酸二酏肼雙丙酮腙中的至少一種。酰肼化合物(H)可單獨使用或以兩種或更多種物質(zhì)的混合物使用。優(yōu)選酰肼化合物(H)的用量為使得上述共聚物中醛基和酮基的總量與酰肼化合物(H)的肼基的摩爾當量比在1:0.1-5、優(yōu)選1:0.5-1.5、更優(yōu)選1:0.7-1.2范圍內(nèi)。在這種情況下，當肼基少于1當量(基于l當量醛基和酮基總量)時，所形成的涂層(非特異性吸附抑制劑層)在某些情況下在耐久性方面會變差。另一方面，當肼基超過5當量時，非特異性吸附抑制效果在某些情況下會降低。雖然跣肼化合物(H)可在制備本實施方案中涉及的活體相關物質(zhì)的非特異性吸附抑制劑的任選步驟中混入，但為了保持制備上述共聚物時的聚合穩(wěn)定性，優(yōu)選將全部量的酰肼化合物(H)在制備上述共聚物之后混入。酰肼化合物(H)具有形成親水網(wǎng)絡結(jié)構(gòu)的活性，從而在涂覆本實施方案中涉及的活體相關物質(zhì)的非特異性吸附抑制劑后，在干燥步驟中通過所述酰肼化合物的肼基與上述共聚物的酮基和/或醛基的反應可實現(xiàn)非特異性吸附抑制劑層的交聯(lián)。雖然該交聯(lián)反應通常在常溫且不使用催化劑下進行，但其可通過添加催化劑如水溶性的金屬鹽等例如硫酸鋅、硫酸錳、硫酸鈷等或通過加熱進行干燥來加速。2.活體相關物質(zhì)的非特異性吸附抑制劑的制備接下來，描述制備上述共聚物所用的單體組合物。2.1單體(a)重復單元(A)具有衍生自至少一種單體(a)的結(jié)構(gòu)。優(yōu)選單體(a)為至少一種選自丙烯酰胺和N-取代的丙烯酰胺單體的單體。N-取代的丙烯酰胺單體的實例包括N，N-二甲基丙烯酰胺、N，N-二乙基丙烯酰胺、N-異丙基丙烯酰胺、N-羥乙基丙烯酰胺、丙烯?；鶈徇⒈；量┩?、丙烯酰基哌啶等。單體(a)更優(yōu)選的實例包括選自丙烯酰胺、N-羥乙基丙烯酰胺和N，N-二甲基丙烯酰胺中的至少一種，還更優(yōu)選的實例包括N，N-二甲基丙烯酰胺或N，N-二甲基丙烯酰胺與N,N-二乙基丙烯酰胺的組合。2.2單體(b)重復單元(B)具有衍生自至少一種單體(b)的結(jié)構(gòu)。單體(b)為至少一種水中溶解度低于20%的單體。根據(jù)本發(fā)明，"水中溶解度低于20%的單體"是指這樣的單體，即將該單體加到25"C的水中至20。/。的單體濃度并攪拌后肉眼可確定該單體與水相的分離。由于單體(b)水中溶解度低于20%,故可表現(xiàn)出高的非特異性吸附抑制效果。單體(b)的實例包括(曱基)丙烯酸甲氧基乙酯、(甲基)丙烯酸甲酯、(甲基)丙烯酸乙酯、(甲基)丙烯酸丙酯、(曱基)丙烯酸丁酯、(甲基)丙烯酸2-乙基己酯、(甲基)丙烯酸月桂酯、(甲基)丙烯酸環(huán)己酯、(甲基)丙烯酸異冰片酯、(甲基)丙烯酸芐酯、苯乙烯等。更優(yōu)選的單體(b)為選自甲基丙烯酸曱酯、丙烯酸乙酯和丙烯酸甲氧基乙酯中的至少一種。2.3單體組合物和聚合根據(jù)本實施方案中涉及的活體相關物質(zhì)的非特異性吸附抑制劑，除重復單元(A)和重復單元(B)外，其可含有重復單元(C)，并且還可含有重復單元(D)。單體(c)為形成重復單元(C)的組分，單體(d)為形成重復單元(D)的組分。也就是說，重復單元(C)具有衍生自至少一種單體(c)的結(jié)構(gòu)。重復單元(D)具有衍生自至少一種單體(d)的結(jié)構(gòu)。優(yōu)選單體(c)為選自丙烯醛、甲酖基苯乙烯、乙烯基甲基酮、乙烯基苯基酮、具有上述式(4)-(7)所代表的基團的(甲基)丙烯酰胺和(甲基)丙烯酸酯中的至少一種。從共聚能力角度來看，更優(yōu)選單體(c)為選自丙烯醛、乙烯基甲基酮和雙丙酮丙烯酰胺中的至少一種。從單體的安全性角度來看，最優(yōu)選單體(c)為雙丙酮丙烯酰胺。當將1-10重量％的陰離子單體，特別是苯乙烯磺酸、異戊二烯磺酸、2-丙烯酰胺基-2-曱基丙磺酸等，用作其他單體(d)并與單體(a)和單體(b)(必要時還有單體(c))共聚生產(chǎn)共聚物且將產(chǎn)物用作免疫診斷試劑的稀釋劑時，在某些情況下可獲得抑制非特異性分析物的信號的效果。用于制備上述共聚物的單體組合物優(yōu)選含30-99重量％的單體(a)、1-70重量。/。的單體(b)、0-49重量。/。的單體(c)和0-49重量％的其他單體(d)，更優(yōu)選含40-95重量。/。的單體(a)、5-60重量％的單體(b)、0-30重量。/o的單體(c)和0-20重量。/。的其他單體(d)，基于100重量％的全部單體。在特別需要耐久性的情況下，所述單體組合物優(yōu)選含30-97重量。/。的單體(a)、1-68重量。/c的單體(b)、2-49重量％的單體(c)和0-49重量。/。的其他單體(d)，基于100重量％的全部單體。當單體(a)和(b)在上述范圍之外時，非特異性吸附抑制效果在某些情況下會變差。另外，當單體(c)低于2重量。/。時，耐久性在某些情況下會變差，而當其超過49重量％時，非特異性吸附抑制效果在某些情況下會變差。所用的單體可在對作為工業(yè)原料購得的那些進行純化后用于共聚或不經(jīng)純化直接用于共聚。單體的聚合可通過例如常規(guī)已知的聚合方法如自由基聚合、陰離子聚合、陽離子聚合等進行，其中，從易于生產(chǎn)的角度來看，優(yōu)選自由基聚合。此外，單體的聚合通過將其與常規(guī)已知的溶劑、引發(fā)劑、鏈轉(zhuǎn)移劑等一起攪拌和加熱進行。聚合時間通常為30分鐘到24小時，聚合溫度約為0到1201C。優(yōu)選聚合后的共聚物水溶液經(jīng)滲析膜、滲析器(Dialyzer)、Acilyzer等純化。3.實施例和對比例雖然下面結(jié)合實施例對本發(fā)明進行了更詳細的描述，但本發(fā)明不限于此。在實施例中，重均分子量(Mw)和數(shù)均分子量(Mn)通過使用單分散系聚乙二醇作為標準物的凝膠滲透色鐠法(GPC)測定，并使用TosohCorporation生產(chǎn)的TSK凝膠a-M柱，分析條件為流量lmL/min，洗脫溶劑為O.lmM的氯化鈉水溶液/丙烯腈混合溶劑，柱溫為40X:。吸光度通過NipponBio-RadLaboratories生產(chǎn)的680型微孔板讀數(shù)儀測定。3.1實施例13.1.1非特異性吸附抑制劑(N-l)的合成混合卯0g水、作為單體(a)的60g二曱基丙烯酰胺和30g二乙基丙烯酰胺、作為單體(b)的10g甲基丙烯酸甲酯和作為鏈轉(zhuǎn)移劑的lg半胱胺鹽酸鹽，并將其投入裝配了攪拌器的可分離式燒瓶中。用氮氣向其中鼓泡，將內(nèi)容物的溫度升至70n,加入2g2,2'-偶氮雙(2-甲基丙脒)二鹽酸鹽作為引發(fā)劑，然后聚合2小時。再將溫度升至801C進行3小時的熟化，然后降至室溫。所得共聚物溶液用滲析器純化，然后凍干得到95g該實施例的非特異性吸附抑制劑(N-l)。GPC測得該非特異性吸附抑制劑(N-1)的數(shù)均分子量為8，000，重均分子量為16,000。3.1.2非特異性吸附抑制效果的測定向由聚苯乙烯制得的96孔板(下文稱"96孔板，，)中灌入0.5%的非特異性吸附抑制劑(N-1)水溶液，并于37"C孵育30分鐘，然后用離子交換水洗滌5次。接著向96孔板中灌入辣根過氧化物酶標記的小鼠IgG抗體(Millipore生產(chǎn)的"AP124P")水溶液，并在室溫下孵育30分鐘，然后用PBS緩沖液洗滌三次。然后用TMB(3，3'，5,5'-四甲基聯(lián)苯胺)/過氧化氫水溶液/硫酸顯色以測定450nm下的吸光度。3.2實施例2和3根據(jù)與實施例i相同的操作進行，不同的是單體根據(jù)表1中所示的單體比率使用。3.3對比例117通過與實施例1中"3丄1非特異性吸附抑制劑(N-1)的合成"相同的方法獲得共聚聚合物(X-1),不同的是單獨使用100g二乙基丙烯酰胺作為單體而不是使用60g二甲基丙烯酰胺和30g二乙基丙烯酰胺作為單體(a)以及10g甲基丙烯酸甲酯作為單體(b)。GPC測得共聚聚合物(X-1)的數(shù)均分子量為5,200，重均分子量為13,000。此外采用與"3丄2非特異性吸附抑制效果的測定"相同的方法測定使用共聚聚合物(X-1)時的吸光度。3.4對比例2通過與實施例1中"3丄1非特異性吸附抑制劑(N-1)的合成"相同的方法獲得共聚聚合物(X-2)，不同的是單獨使用100g二曱基丙烯酰胺作為單體而不是使用60g二甲基丙烯酰胺和30g二乙基丙烯酰胺作為單體(a)以及10g曱基丙烯酸曱酯作為單體(b)。GPC測得共聚聚合物(X-2)的數(shù)均分子量為9,800,重均分子量為20,000。此外采用與"3.1.2非特異性吸附抑制效果的測定"相同的方法測定使用共聚聚合物(X-2)時的吸光度。3.5對比例3用牛血清白蛋白(BSA)代替實施例1中的非特異性吸附抑制劑(N-l),并用與"3.1.2非特異性吸附抑制效果的測定"相同的方法測定使用BSA時的吸光度。3.6對比例4根據(jù)與實施例1中"3丄1非特異性吸附抑制劑(N-1)的合成"相同的方法進行，不同的是單獨使用100g甲基丙烯酸甲酯作為單體而不是使用60g二甲基丙烯酰胺和30g二乙基丙烯酰胺作為單體(a)以及10g甲基丙烯酸甲酯作為單體(b)。但由于加入引發(fā)劑后數(shù)分18鐘內(nèi)生成大量的白色凝固物，故終止聚合。3.7對比例5用市售聚乙烯基吡咯烷酮代替實施例1中的非特異性吸附抑制劑(N-1)。用與"3.1.2非特異性吸附抑制效果的測定"相同的方法測定使用BSA時的吸光度。3.8測定結(jié)果上述實施例和對比例的非特異性吸附抑制效果的測定結(jié)果在表1中示出。表l<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>丙烯酰胺(對應于單體(a))的高聚物或使用牛血清白蛋白的情況相比，通過使用實施例1-3中涉及的活體相關物質(zhì)的非特異性吸附抑制劑，小鼠IgG抗體對96孔板的非特異性吸附量可顯著降低。3.9實施例43.9.1非特異性吸附抑制劑(N-4)的合成通過與實施例1中"3丄1非特異性吸附抑制劑(N-1)的合成"相同的方法獲得作為共聚聚合物的非特異性吸附抑制劑(N-4)，不同的是使用56g二甲基丙烯酰胺和16g二乙基丙烯酰胺作為單體(a)、8g曱基丙烯酸甲酯作為單體(b)以及20g雙丙酮丙烯酰胺作為單體(c)，而不是使用60g二甲基丙烯跣胺和30g二乙基丙烯酰胺作為單體(a)以及10g甲基丙烯酸甲酯作為單體(b)。GPC測得該非特異性吸附抑制劑(N-4)的數(shù)均分子量為9，000，重均分子量為25,000。此外，采用與"3丄2非特異性吸附抑制效果的測定"相同的方法測定使用該非特異性吸附抑制劑(N-4)時的吸光度。3.9.2用表面活性劑洗滌后的非特異性吸附抑制效果的測定向96孔板中灌入0.5。/。的非特異性吸附抑制劑(N-4)水溶液，并于371C孵育30分鐘，然后用離子交換水洗滌。殘留的水用氣槍吹掉。于401C干燥3小時。再用聚氧乙烯失水山梨醇單月桂酸酯(其為表面活性劑)洗滌三次。接著向96孔板中灌入辣根過氧化酶標記的小鼠IgG抗體(Millipore生產(chǎn)的"AP124P，，)水溶液，并在室溫下孵育30分鐘，然后用PBS緩沖液洗滌三次。然后用TMB(3，3'，5,5'-四甲基聯(lián)苯胺)/過氧化氫水溶液/硫酸顯色以測定450nm下的吸光度。3.10實施例5通過向10g非特異性吸附抑制劑(N-4)中加入lg己二酸二酰肼并使用0.55。/。的含非特異性吸附抑制劑(N-4)和己二酸二酰肼的水溶液，進行非特異性吸附抑制效果的測定，以及用表面活性劑洗滌后的非特異性吸附抑制效果的測定。3.11對比例6使用BSA進行非特異性吸附抑制效果的測定以及用表面活性劑洗滌后的非特異性吸附抑制效果的測定。3.12測定結(jié)果上述實施例4和5及對比例6的測定結(jié)果在表2中示出。表2<table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table>根據(jù)表2可以確認，與對比例6中使用BSA的情況相比，通過使用實施例4和5中涉及的活體相關物質(zhì)的非特異性吸附抑制劑，可顯著降低用表面活性劑洗滌后的非特異性吸附量。特別是，根據(jù)實施例5可以確認，通過使用含酰肼化合物(H)的非特異性吸附抑制劑，可顯著降低用表面活性劑洗滌后的非特異性吸附量。根據(jù)上述活體相關物質(zhì)的非特異性吸附抑制劑，其具有高的特異性吸附抑制效果，因為其包含含有上述式(l)所代表的重復單元(A)和上述式(2)所代表的重復單元(B)的共聚物。雖然前面已結(jié)合具體的實施例對本發(fā)明進行了詳細描述，但對于本領域技術人員而言顯而易見可以增加各種改變和變體，只要所述改變和變體不偏離本發(fā)明的精神和范圍即可。本專利申請基于2007年11月9日提交的日本專利申請2007-291793和2008年3月11日提交的日本專利申請2008-61119，其內(nèi)容通過引用并入本文。權利要求1.一種活體相關物質(zhì)的非特異性吸附抑制劑，其包含共聚物，所述共聚物包含下式(1)所代表的重復單元(A)其中，R0代表氫原子或甲基，Z代表下式(1a)或(1b)所代表的基團其中，R1和R2獨立地代表氫原子、含1-8個碳原子的烷基或被至少一種選自羥基、羧基、烷氧基、酰氧基和烷氧基羰基的基團所取代的含1-8個碳原子的烷基；其中，R3和R4獨立地代表單鍵、亞甲基、被羥基或羧基取代的亞甲基、含2-7個碳原子的亞烷基或被羥基或羧基所取代的含2-7個碳原子的亞烷基，其中R3和R4的碳原子的總數(shù)為4-10；其中R3和R4中的至少一個可具有醚鍵，Y代表單鍵、O和S中的任意一個，和下式(2)所代表的重復單元(B)其中，R5代表氫原子或甲基，和R6代表苯基或-CO2R7所代表的基團，其中R7代表含1-12個碳原子的取代或未取代烷基、脂環(huán)烴或芳香烴。2.根據(jù)權利要求1的所述活體相關物質(zhì)的非特異性吸附抑制劑，其中在上述式(l)中，Ri代表氫原子或甲基，和W代表選自氫原子、甲基和羥乙基中的至少一種。3.根據(jù)權利要求1或2所述的活體相關物質(zhì)的非特異性吸附抑制劑，其中上述重復單元(B)為衍生自至少一種水中溶解度低于20%的單體的結(jié)構(gòu)。4.根據(jù)權利要求l-3中任一項所述的活體相關物質(zhì)的非特異性吸附抑制劑，其中在上述式(2)中，Rs代表氫原子或甲基；116代表-<:02117;和RM戈表選自甲基、乙基和甲氧基乙基中的至少一種。5.根據(jù)權利要求l-4中任一項所述的活體相關物質(zhì)的非特異性吸附抑制劑，其中上述共聚物還包含下式(3)所代表的重復單元(C):其中，Rs代表氫原子或甲基，W代表包含至少一個醛基或酮基的有機基團。6.根據(jù)權利要求l-5中任一項所述的活體相關物質(zhì)的非特異性吸附抑制劑，所述抑制劑還包含酰肼化合物(H)，每一分子所述酖肼化合物(H)包含至少兩個肼基。7.—種涂覆制品的方法，所述方法包括使所述制品與包含根據(jù)權利要求1-6中任一項所述的活體相關物質(zhì)的非特異性吸附抑制劑的溶液接觸的步驟。全文摘要本發(fā)明涉及一種活體相關物質(zhì)的非特異性吸附抑制劑，所述抑制劑抑制活體相關物質(zhì)如在臨床診斷試劑、臨床診斷設備、生物芯片等中使用的各種蛋白質(zhì)的非特異性吸附，本發(fā)明還涉及用所述非特異性吸附抑制劑涂覆制品的方法。文檔編號C08L33/24GK101430333SQ200810176519公開日2009年5月13日申請日期2008年11月7日優(yōu)先權日2007年11月9日發(fā)明者小川俊博,田守功二,高本英司申請人:Jsr株式會社