專利名稱：：多支鏈聚氧化亞烷基衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及用于包括修飾生物相關(guān)物質(zhì)在內(nèi)的用途的多支鏈聚氧化亞垸基衍生物和制備多支鏈反應(yīng)性聚氧化亞垸基衍生物的中間體。另外，本發(fā)明涉及結(jié)合聚氧化亞垸基衍生物的修飾的生物相關(guān)物質(zhì)。
背景技術(shù)：
：近年來，隨著基因工程的進展，人們對藥物的開發(fā)和研究活躍地進行開來，這使用了生物相關(guān)物質(zhì)，例如細胞間信號傳導(dǎo)物質(zhì)(例如激素和細胞因子)、抗體和酶。當這些物質(zhì)注入生物體內(nèi)時，由于通過腎臟中的神經(jīng)纖維球的過濾和通過肝臟、脾臟等中的巨噬細胞的攝取，這些生物相關(guān)物質(zhì)通常被從體內(nèi)清除，因此它們在血液中的半衰期較短，因此難以獲得足夠的藥理效果。為了解決這些問題，嘗試通過將生物相關(guān)物質(zhì)包含在脂質(zhì)體或聚合物膠束中、或者增加它們的分子量、或者通過使用兩親性聚合物(例如糖鏈、或聚乙二醇、或白蛋白)進行化學(xué)修飾以形成水化層來改善在生物體內(nèi)的行為。另外，通過使用聚氧化亞烷基進行修飾，還獲得降低毒性和抗原性以及增強水難溶性藥劑的溶解性的效果。近年來，在使用聚氧化亞垸基修飾生物相關(guān)物質(zhì)的情況中，為了不阻斷活性位點或者為了使用更少的聚氧化亞烷基數(shù)目來獲得更大的水化層，人們對增加聚氧化亞烷基衍生物的分子量進行了研究。然而，在制備高分子量的聚氧化亞垸基的情況中，在制備中產(chǎn)生了諸如純度降低和粘度增加之類的問題，因此無法有效地獲得適用于生物相關(guān)物質(zhì)的修飾劑的聚氧化亞垸基。另一方面，為了更有效地增加分子量，提出開發(fā)使用具有支鏈結(jié)4構(gòu)的聚氧化亞乙基。專利文獻1描述了使用如下聚氧化亞烷基的天冬酰胺酶，所述聚氧化亞烷基具有含有氰尿酰氯作為主要骨架的雙鏈結(jié)構(gòu)，專利文獻2描述了使用如下聚氧化亞垸基的干擾素-OC，所述聚氧化亞烷基具有含有賴氨酸作為主要骨架的雙鏈結(jié)構(gòu)。此外，專利文獻3描述了使用聚氧化亞烷基的生物相關(guān)物質(zhì)，所述聚氧化亞垸基具有含有1，2-丙三醇作為主要骨架的雙鏈結(jié)構(gòu)。這些結(jié)構(gòu)都具有雙鏈結(jié)構(gòu)作為基本骨架，但為了獲得更大的水化層，從開發(fā)醫(yī)藥用途的觀點來看要求具有更多支鏈結(jié)構(gòu)的聚氧化亞烷基。專利文獻4和5描述了具有含有環(huán)己垸環(huán)、單糖(例如葡萄糖或山梨糖醇)、或多羧酸(例如檸檬酸)作為基本骨架的三至五支鏈結(jié)構(gòu)的聚氧化亞烷基衍生物，專利文獻6和7描述了具有含有三甘油作為基本骨架的四鏈結(jié)構(gòu)的聚氧化亞烷基衍生物。由于專利文獻4和5中描述的聚氧化亞烷基衍生物是通過使過量的單鏈聚氧化亞垸基衍生物反應(yīng)而引入基本骨架(例如環(huán)狀多元醇)中來制備的，未與基本骨架反應(yīng)的多余的單鏈聚氧化亞垸基衍生物殘留，因此其應(yīng)該被除去。另外，在目標聚氧化亞烷基鏈的數(shù)量為較多的數(shù)量時，由于其中未引入目標鏈的數(shù)量的雜質(zhì)作為副產(chǎn)物產(chǎn)生，因此非常難于消除這些雜質(zhì)，因而其工業(yè)生產(chǎn)是更困難的。專利文獻6和7中描述的聚氧化亞垸基衍生物是通過將環(huán)氧乙烷加入三甘油單烯丙基醚中而獲得的。然而在使用堿作為加成反應(yīng)的催化劑的情況下，烯丙基醚重排為丙烯基醚，并且進一步地在中和步驟等中使用酸的情況下，體系變得局部呈酸性，并且丙烯基醚被轉(zhuǎn)化為羥基，使得目標產(chǎn)物的純度變低。而且，在專利文獻6和7中，盡管通過使烯丙基醚基團與具有巰基的羧酸或具有巰基的有機胺反應(yīng)而形成硫醚鍵來引入羧基或氨基，但是使得所得化合物僅限于具有硫醚鍵的那些。如上所述，仍未獲得這樣的具有多個數(shù)量的聚氧化亞垸基鏈的衍生物，該衍生物能夠有效地用于包括修飾生物相關(guān)物質(zhì)在內(nèi)的用途，并且工業(yè)上容易制備，因此十分期望開發(fā)這樣的多支鏈聚氧化亞烷基衍生物。專利文獻l:日本專利申請公開JP-B-61-42558專利文獻2:日本專利申請公開JP-A-10-67800專利文獻3:日本專利申請公開JP-A-2004-197077專利文獻4:WO01/048052小冊子專利文獻5:WO02/060978小冊子專利文獻6:日本專利申請公開JP-A-2000-1542專利文獻7:日本專利申請公開JP-A-2000-4467
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明所要解決的問題本發(fā)明的目的是提供新型多支鏈聚氧化亞垸基衍生物和制備該多支鏈聚氧化亞烷基衍生物的中間體。具體而言，本發(fā)明的目的是提供高分子量多支鏈聚氧化亞垸基衍生物，其可以保持使用多支鏈聚氧化亞烷基衍生物修飾的生物相關(guān)物質(zhì)的高活性，并且可以容易地制備所述修飾的物質(zhì)；所述多支鏈聚氧化亞垸基衍生物的中間體；以及結(jié)合所述多支鏈聚氧化亞垸基衍生物的生物相關(guān)物質(zhì)。解決問題的手段作為深入研究以解決上述問題的結(jié)果，本發(fā)明人開發(fā)了一種新型多支鏈聚氧化亞烷基衍生物并因此完成了本發(fā)明。艮P，本發(fā)明涉及一種多支鏈聚氧化亞垸基衍生物和制備該多支鏈聚氧化亞垸基衍生物的中間體，如式(1A)中所示，所述多支鏈聚氧化亞垸基衍生物在甘油的1位具有反應(yīng)性基團，在甘油的2和3位具有氧化亞烷基鏈，并且在氧化亞烷基鏈的末端通過多元醇骨架還具有多支鏈結(jié)構(gòu)。此外，本發(fā)明還涉及使用聚亞垸基二醇衍生物修飾的生物相關(guān)物質(zhì)。即，本發(fā)明如下列方面所述。一種由式(1A)表示的聚氧化亞烷基衍生物:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>其中A10和A20獨立地表示具有2至4個碳原子的氧化亞垸基，m表示20至500，n表示15至700，R表示氫原子或具有1至20個碳原子的烴基，X表示能夠與生物相關(guān)物質(zhì)反應(yīng)的官能團，并且a表示1、3或5。X」-0-(A10)」0(A20)n-R0-(A20)n-R-O—(A10)，-0-(A20)n-fR-0-(A20)n-R(1)其中A10和A20獨立地表示具有2至4個碳原子的氧化亞烷基，m表示20至500，n表示15至700，R表示氫原子或具有1至20個碳原子的烴基，并且X表示能夠與生物相關(guān)物質(zhì)反應(yīng)的官能團。—種生物相關(guān)物質(zhì)，其是通過與所述由式(1A)表示的聚氧化亞垸基衍生物的反應(yīng)而修飾的。一種由式(1B)表示的聚氧化亞烷基衍生物0-(A10),-0—(A10)X1_l0-(A20)n-R0(A20)n-R);(1B)-0(A20)n-R)a-0(A20)n_R其中A10和A20獨立地表示具有2至4個碳原子的氧化亞垸基，m表示20至500，n表示15至700，R表示氫原子或具有1至20個碳原子的烴基，Xi表示可被保護的羥基，并且a表示l、3或5?！N由式(A)表示的聚氧化亞烷基衍生物:[<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>(A)其中A10和A20獨立地表示具有2至4個碳原子的氧化亞烷基，m表示20至500，n表示15至700，R表示氫原子或具有1至20個碳原子的經(jīng)基，并且乂1表示可被保護的羥基。發(fā)明的優(yōu)點由于根據(jù)本發(fā)明的新型多支鏈聚氧化亞垸基衍生物(IA)具有多支鏈結(jié)構(gòu)，并且所述衍生物還不降低與其結(jié)合的生物相關(guān)物質(zhì)的活性，因此所述衍生物可以在保持生物相關(guān)物質(zhì)的活性位點的條件下提供較大的水化層。另外，通過增加具有多支鏈結(jié)構(gòu)的聚氧化亞烷基衍生物的支鏈，可以降低粘度。作為降低粘度的優(yōu)點，例如可以提到在所述衍生物用于修飾生物相關(guān)物質(zhì)時容易處理，更具體而言，可以提到能夠降低注射所需要的壓力、能夠減輕注射時的疼痛等。另外，還可以提到下列優(yōu)點還能夠在通過分階段地進行本身已知的生產(chǎn)步驟來進行制備時不產(chǎn)生問題的條件下制備高純度的衍生物。此外，由于所述衍生物在能夠與生物相關(guān)物質(zhì)形成化學(xué)結(jié)合的官能團和多支鏈結(jié)構(gòu)之間具有雙鏈結(jié)構(gòu)(其具有特定的分子量)，因此可以改善生物相關(guān)物質(zhì)和多支鏈聚氧化亞烷基衍生物(IA)之間的反應(yīng)性。根據(jù)本發(fā)明，可以提供具有這種特性的新型多支鏈聚氧化亞垸基衍生物及其中間體。200本發(fā)明的最佳實施方式在本說明書中，由式(1A)表示的聚氧化亞垸基衍生物的a為1、3或5，并且優(yōu)選為1或3。特別地，從可以進一步降低在制備過程中形成的雜質(zhì)的觀點來看，優(yōu)選其中a為1的一種衍生物，即由式(l)表示的聚氧化亞烷基衍生物。在本說明書中，A10和A20各自獨立地表示具有2至4個碳原子的氧化亞烷基。具體而言，其包括具有2至4個碳原子、優(yōu)選2至3個碳原子的氧化亞垸基，例如氧化亞乙基、氧化亞丙基、氧化三亞甲基、氧基-l-乙基亞乙基、氧基1,2-二甲基亞乙基、和氧化四亞甲基。A10和A20中的氧化亞烷基可以彼此相同或不同，并且可以無規(guī)或嵌段方式加入。通常，碳原子數(shù)越少，親水性越高。該基團優(yōu)選為氧化亞乙基或氧化亞丙基，更優(yōu)選為氧化亞乙基。在本說明書中，m和n各自為加入的氧化亞垸基的平均摩爾數(shù)。m為20至500，優(yōu)選為40至300，更優(yōu)選為50至230，進一步優(yōu)選為80至150，n為15至700，優(yōu)選為50至700，更優(yōu)選為80至500，進一步優(yōu)選為100至350。雙鏈結(jié)構(gòu)部分(A10鏈)的分子量為2,000至40,000，優(yōu)選為5,000至25,000，進一步優(yōu)選為8,000至15,000。在a為1、3或5的情況下，多鏈結(jié)構(gòu)部分(八20鏈)的分子量為3,000至80,000，優(yōu)選為10,000至75，000，進一步優(yōu)選為20,000至65,000。多支鏈聚氧化亞垸基衍生物(1A)的分子量變化取決于"能夠與生物相關(guān)物質(zhì)反應(yīng)的官能團"的種類，但其通常為5,000至120,000，優(yōu)選為20,000至100,000，進一步優(yōu)選為30,000至80,000。聚氧化亞垸基衍生物(1B)的分子量通常為5,000至120,000,優(yōu)選為20,000至100,000，進一步優(yōu)選為30,000至80,000。另外，關(guān)于雙鏈結(jié)構(gòu)部分(A10鏈)的分子量與多鏈部分(A20鏈)的分子量的比，在雙鏈結(jié)構(gòu)部分(A&鏈)的分子量被認為1時，在a為1、3或5的情況下，多鏈部分(八20鏈)的分子量為1至40，優(yōu)選為1.5至10，進一步優(yōu)選為2至5。在式(l)的多支鏈聚氧化亞垸基衍生物中由X表示的"能夠與生物相關(guān)物質(zhì)反應(yīng)的官能團"并無特別限定，只要其是能夠與生物相關(guān)物質(zhì)反應(yīng)的官能團并且是能夠形成化學(xué)結(jié)合的基團即可。就此而言，聚氧化亞烷基鏈和官能團之間的結(jié)合部分中優(yōu)選不含硫醚健。這是因為在結(jié)合部分中含有硫醚健時，結(jié)合的穩(wěn)定性往往變差。官能團可通過連接體與生物相關(guān)物質(zhì)結(jié)合，因此由X表示的"能夠與生物相關(guān)物質(zhì)反應(yīng)的官能團"的概念也包括連接體部分。在優(yōu)選的實施方案中，X是由組(I)表示的基團組(I):[化學(xué)式5]0.-NH2(a)-NO(b)OiiCO—N(c)0II00II0o0—C0_/~N02(d)——0_C-CH2W1(e)~~Z—6—NHNH2(f)ONH2(g)Oii,、Z——CH())OII1-O—S—R1(m)IIOCOOH(h)O,、、II/,'、-O—C_NI(k)-Z——SH(i)/\O匿O-CO~N\i(1)-C三CH(n)-N3(o)其中W表示具有1至10個碳原子的烴基，所述烴基可含有氟原子，Wi表示卣素原子，以及Z表示聚亞垸基二醇氧基和官能團之間的連接體。在與生物相關(guān)物質(zhì)的氨基反應(yīng)的情況下，由(c)、(d)、(h)、(j)、(k)和(l)表示的基團是優(yōu)選的；在與生物相關(guān)物質(zhì)的巰基反應(yīng)的情況下，由(b)、(c)、(d)、(e)、(h)、(i)、(j)、(k)、(l)和(n)表示的基團是優(yōu)選的；在與生物相關(guān)物質(zhì)的不飽和鍵反應(yīng)的情況下，由(i)和(o)表示的基團是優(yōu)選的；在與生物相關(guān)物質(zhì)的羧基反應(yīng)的情況下，由(a)、(g)和(i)表示的基團是優(yōu)選的；在與生物相關(guān)物質(zhì)的醛基反應(yīng)的情況下，由(a)、(f)、(g)和(i)表示的基團是優(yōu)選的；以及在與生物相關(guān)物質(zhì)的疊氮化物鍵反應(yīng)的情況下，由(n)表示的基團是優(yōu)選的。由(m)表示的基團被用作反應(yīng)中間體。組(I)中的Z是聚亞垸基二醇氧基和反應(yīng)性官能團之間的連接體，其并無特別限定，只要其不含硫醚鍵并且是能夠在兩種基團之間形成共價鍵的基團即可，但其優(yōu)選包括具有1至8個碳原子、優(yōu)選1至6個碳原子的基團，例如亞烷基、亞苯基、和含有酯鍵、氨基甲酸酯鍵、酰胺鍵、醚鍵、碳酸酯鍵或仲氨基的亞烷基。優(yōu)選的亞垸基包括亞甲基、亞乙基、三亞甲基、亞丙基、亞異丙基、四亞甲基、亞丁基、亞異丁基、五亞甲基、六亞甲基等。更優(yōu)選地，例如可以提到諸如下列(zl)之類的結(jié)構(gòu)。作為含有酯鍵的亞烷基，進一步優(yōu)選可以提到諸如下列(z2)之類的結(jié)構(gòu)。作為含有酰胺鍵的亞垸基，更優(yōu)選可以提到諸如下列(z3)之類的結(jié)構(gòu)。作為含有醚鍵的亞垸基，更優(yōu)選可以提到諸如下列(z4)之類的結(jié)構(gòu)。作為含有氨基甲酸酯鍵的亞垸基，進一步優(yōu)選可以提到諸如下列(z5)之類的結(jié)構(gòu)。作為含有仲氨基的亞烷基，更優(yōu)選可以提到諸如下列(z6)之類的結(jié)構(gòu)。在各式中，s為l至6的整數(shù)，優(yōu)選為l至3的整數(shù)，進一步優(yōu)選為2至3的整數(shù)。組(n)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage13</formula>其中S為l至6的整數(shù)，優(yōu)選為1、2或3。W是具有1至IO個碳原子的烴基，所述烴基可含有氟原子，并且具體烴基包括下列烴基例如甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、叔丁基、己基、壬基、乙烯基、苯基、芐基、4-甲基苯基、三氟甲基、2，2,2-三氟甲基、4-(三氟甲氧基)苯基等。優(yōu)選為甲基、乙烯基、4-甲基苯基、和2,2,2-三氟甲基。Wi表示鹵素原子(例如Cl或Br)，優(yōu)選為Br或I，更優(yōu)選為I。在本說明書中，R為氫原子或具有1至20個碳原子的烴基，具體烴基包括垸基(在式中，l至7個碳原子)，例如甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、叔丁基、戊基、異戊基、己基、和庚基；芳垸基，例如節(jié)基、甲苯基、丁基苯基、和三苯甲基等。所述烴基優(yōu)選為具有1至7個碳原子的烴基，更優(yōu)選為具有1至4個碳原子的烴基，例如甲基、乙基、或叔丁基、或芐基，進一步優(yōu)選為甲基。根據(jù)本發(fā)明，"生物相關(guān)物質(zhì)"是指涉及生物體的物質(zhì)，其例子包括構(gòu)成生物體的物質(zhì)或者對生物體具有生理活性的物質(zhì)(生理活性物質(zhì))。例如，能夠被式(l)的多支鏈聚氧化亞垸基衍生物修飾的生物相關(guān)物質(zhì)包括下列這些物質(zhì)。(1)動物細胞構(gòu)成物質(zhì)，例如磷脂、糖脂和糖蛋白動物細胞構(gòu)成物質(zhì)是構(gòu)成細胞膜等的成分，其種類并無特別限定，但其例子包括磷脂、糖脂和糖蛋白。更具體的磷脂的例子包括磷脂酸、磷脂酰膽堿、磷脂酰乙醇胺、心磷脂、磷脂酰絲氨酸、和磷脂酰肌醇。另外，還包括它們的溶血異構(gòu)體。這些磷脂可以是衍生自天然產(chǎn)物(例如蛋黃或大豆)的那些，或者可以是合成產(chǎn)物。脂肪酸的組成并無特別限定，但可優(yōu)選包括具有12至22個碳原子的脂肪酸。這些脂肪酸可以是飽和脂肪酸，或者可以是含有不飽和鍵的那些。更具體的糖脂的例子包括神經(jīng)酰胺、腦苷脂、鞘氨醇、神經(jīng)節(jié)苷脂、和甘油糖脂。另外，還包括脂肪酸、甘油一酸酯、甘油二酯、膽固醇、和膽汁酸。(2)體液構(gòu)成物質(zhì)，例如血液、淋巴液和骨髓液體液構(gòu)成物質(zhì)是指存在于細胞內(nèi)部和外部的液體組分，并且其種類并無特別限定，但其例子包括血液、淋巴液和骨髓液。構(gòu)成這些體液的更具體的組分的例子包括血紅蛋白、白蛋白、凝血因子等。(3)生理活性物質(zhì)，例如維生素、神經(jīng)傳遞素、蛋白、多肽和藥物生理活性物質(zhì)是指控制機體功能的成分，并且種類并無特別限定，但其例子包括維生素、神經(jīng)傳遞素、蛋白、多肽和藥物。更具體的維生素的例子包括維生素A、維生素B、維生素C、維生素D、維生素E、維生素K等。更具體的神經(jīng)傳遞素的例子包括腎上腺素、去甲腎上腺素、多巴胺、乙酰膽堿、GABA、谷氨酸、天冬氨酸等。更具體的蛋白和多肽的例子包括下列物質(zhì)。激素，例如垂體后葉激素、甲狀腺激素、雄性激素、雌性激素、和腎上腺皮質(zhì)激素。血清蛋白，例如血紅蛋白和血液因子。免疫球蛋白，例如IgG、IgE、IgM、IgA和IgD。細胞因子及其片段，例如白介素(IL-1、IL-2、IL-3、IL-4、IL-5、IL隱6、IL隱7、IL-8、IL陽9、IL-IO、IL-ll和IL-12亞型)、干擾素(-a、-卩、-Y)、粒細胞集落刺激因子(a和p型)、巨噬細胞集落刺激因子、粒-巨噬細胞集落剌激因子、血小板源生長因子、磷脂酶活化蛋白、胰島素、高血糖素、植物凝集素、蓖麻毒、腫瘤壞死因子、表皮生長因子、轉(zhuǎn)化生長因子(-a、-p)、成纖維細胞生長因子、肝細胞生長因子、血管內(nèi)皮生長因子、神經(jīng)生長因子、骨生長因子、類胰島素生長因子、肝素結(jié)合生長因子、腫瘤生長因子、膠質(zhì)細胞系源神經(jīng)營養(yǎng)因子、巨噬細胞分化因子、分化誘導(dǎo)因子、白血病抑制因子、雙調(diào)蛋白、生長調(diào)節(jié)素、促紅素、紅細胞生成素、血栓形成素、和降鈣素。酶，例如蛋白水解酶、氧化還原酶、轉(zhuǎn)移酶、水解酶、裂解酶、異構(gòu)酶、連接酶、天冬酰胺酶、精氨酸酶、精氨酸脫氨酶、腺苷脫氨酶、超氧化物歧化酶、內(nèi)毒素酶、過氧化氫酶、胰凝乳蛋白酶、脂肪酶、尿酸酶、彈性蛋白酶、溶栓酶、尿激酶、尿激酶原、二磷酸腺苷酶、酪氨酸酶、膽紅素氧化酶、葡萄糖氧化酶、葡萄糖酶(glucodase)、半乳糖苷酶、葡萄糖腦苷脂酶、和葡萄糖苷酸酶。單克隆抗體和多克隆抗體及其片段。聚氨基酸，例如聚-L-賴氨酸和聚-D-賴氨酸。疫苗，例如肝炎B疫苗、瘧疾疫苗、黑素瘤疫苗、和HIV-1疫苗、以及抗原。另外，還包括醣蛋白。此外，還包括生理活性與這些生理活性物質(zhì)的生理活性類似的結(jié)構(gòu)相似的物質(zhì)。另外，這些蛋白和多肽可從它們的天然源或經(jīng)歷基因工程的細胞中分離，或者可通過各種合成方法來制備。藥物(即生理活性物質(zhì))并無特別限定，但更優(yōu)選包括抗癌劑和抗真菌劑。更具體的抗癌劑并無特別限定，但包括(例如)紫杉醇、阿霉素、多柔比星、順鉑、道諾霉素、絲裂霉素、長春新堿、表柔比星、甲氨蝶呤、5-氟尿嘧啶、阿克拉霉素、依達比星、博來霉素、吡柔比星、培洛霉素、萬古霉素、和喜樹堿。具體的抗真菌劑并無特別限定，但包括(例如)兩性霉素B、制霉菌素、氟胞嘧啶、咪康唑、氟康唑、伊曲康唑、酮康唑、和肽類抗真菌劑。另外，這些生理活性物質(zhì)還包括(例如)具有抗氧化作用、PAF抑制作用、抗炎作用、和抗真菌作用的類黃酮、類萜、類胡蘿卜素、皂角苷、類固醇、苯醌、蒽醌、噸酮、香豆素、生物堿、卟啉、和多酚。多支鏈聚氧化亞垸基衍生物(lA)可通過將下列化合物(pla)(其為聚氧化亞烷基衍生物)轉(zhuǎn)化為具有能夠與生物相關(guān)物質(zhì)反應(yīng)的官能團的化合物來制備。H2C-0(A20)n-R(H(-0(A20)n-R)a<formula>formulaseeoriginaldocumentpage17</formula>(P1a)另外，化合物(pla)可通過(例如)下圖中示出的路線來制備,[化學(xué)式8]<formula>formulaseeoriginaldocumentpage18</formula>1，2-環(huán)氧烷烴的聚合<formula>formulaseeoriginaldocumentpage18</formula>其中E表示羥基的保護基團，L表示離去基團，并且其他符號的意思與上述相同。作為羥基的保護基團，可以提到芐基、叔丁基、三苯甲基等。作為離去基團，可以提到氧化鈉基團、氧化鉀基團、鹵素基團(例如Cl或Br)、甲磺?；?,2,2-三氟乙垸磺?；取Ｔ谏蠄D中，中間體包括對應(yīng)于聚氧化亞烷基衍生物(lB)的式(pla)、(plb)和(plc)的中間體。下面將描述制備化合物(pla)的合適的具體例子。在2,2-二甲基-1，3-二氧戊環(huán)-4-甲醇的羥基被保護基團(例如芐基或叔丁基)保護后，環(huán)狀縮醛結(jié)構(gòu)在酸性條件下分開，從而產(chǎn)生兩個羥基。通常40至IOOO摩爾的量的1,2-環(huán)氧烷烴與所述兩個羥基聚合。CH2—OHICH—OHICH2—OH縮酮化3CH2—OHCH——0\,CH3CH—0\CH3H~0CH3CH2_0CH3(Pie)b為了使用其中a分別為1、3或5的多元醇獲得其中b為0、l或2的多元醇衍生物(ple)，例如可以如PROCTECTIONGROUPSINORGANICSYNTHESIS(THEODORAW.GREENEatal.)中所述，使用通常的羥基保護方法來進行縮酮化。這種縮酮化可包括在相鄰或非相鄰的羥基上進行的一種縮酮化。另外，作為ple，可以使用通過這些方法制備的異構(gòu)體中的任意一種。通過將離去基團L引入所得多元醇衍生物(ple)而獲得的化合物(pld)與聚氧化亞烷基的末端結(jié)合，然后環(huán)狀縮醛結(jié)構(gòu)裂開，從而在a為l(即b為O)的情況下產(chǎn)生四個羥基，在a為3(即b為l)的情況下產(chǎn)生八個羥基，以及在a為5(即b為2)的情況下產(chǎn)生十二個羥基。裂開通常在酸性條件下進行。通常，50至2000摩爾的量的1,2-環(huán)氧垸烴與多個羥基聚合，然后末端進行垸基醚化。然后，保護基團E裂開，從而產(chǎn)生新的羥基(上述化合物(pla))。H2C-0(A20)n-RH2—OHH-0(A20)n—RHC—0(A10)m-CH2H2C—0(A10)m-CH2H(U0(A20>n-RH2C—0(A20)n-R(PO)由于相同的制備方法適用于a為1、3或5(即b為0、1、2)的情況中的任意一種，因此下文中將描述a為l(即b為O)的情況。其中a為l(即b為O)的化合物(pO)可通過下圖中示出的路線來制備。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage21</formula>團(例如Cl或Br)、甲磺?；?、2，2，2-三氟乙垸磺酰基等。在上圖中，中間體包括對應(yīng)于聚氧化亞垸基衍生物(A)的式(pO)、(pA)和(pB)的中間體。下面將描述制備化合物(pO)的合適的具體例子。在2,2-二甲基-1,3-二氧戊環(huán)-4-甲醇的羥基被保護基團(例如芐基或叔丁基)保護后，環(huán)狀縮醛結(jié)構(gòu)在酸性條件下分開，從而產(chǎn)生兩個羥基。通常40至1000摩爾的量的1，2-環(huán)氧烷烴與所述兩個羥基聚合。此外，在2,2-二甲基-1,3-二氧戊環(huán)-4-甲醇與末端結(jié)合后，環(huán)狀縮醛結(jié)構(gòu)開裂，從而產(chǎn)生四個羥基。開裂通常在酸性條件下進行。通常，50至2000摩爾的量的1，2-環(huán)氧垸烴與四個羥基聚合，然后末端進行烷基醚化。然后，保護基團(例如芐基或叔丁基)開裂，從而產(chǎn)生新的羥基(上述化合物(pO))。在R為氫原子的化合物的情況下，在末端烷基醚化時，在與保護2,2-二甲基-1,3-二氧戊環(huán)-4-甲醇的羥基的保護基團不同的保護基團醚化后，保護2,2-二甲基-1,3-二氧戊環(huán)-4-甲醇的羥基的保護基團開裂，從而產(chǎn)生新的羥基。在羥基通過下面提到的方法轉(zhuǎn)化為官能團后，聚氧化亞垸基鏈的末端羥基的保護基團開裂，從而獲得目標化合物。如上所述，通過使用1，2-環(huán)氧垸烴加成聚合反應(yīng)可以以工業(yè)上合適的方式在不使用柱純化的情況下高收率地制備高純度的聚亞烷基二醇衍生物。作為使用保護基團的保護，例如2,2-二甲基-1,3-二氧戊環(huán)-4-甲醇的羥基的芐基醚化，可以提到下列方法。l)其可以通過在存在堿性催化劑(例如氫氧化鈉或氫氧化鉀)、在非質(zhì)子溶劑中或不使用任何溶劑的條件下使氯甲苯或溴甲苯與2，2-二甲基-l,3-二氧戊環(huán)-4-甲醇反應(yīng)來完成。2)其可以通過金屬鈉、金屬鉀、氫化鈉、氫化鉀、甲醇鈉、甲醇鉀、叔丁醇鉀等在非質(zhì)子溶劑中或不使用任何溶劑的條件下使2,2-二甲基-l,3-二氧戊環(huán)-4-甲醇的羥基轉(zhuǎn)化為醇化物、然后在堿性條件下使醇化物與氯甲苯或溴甲苯反應(yīng)來完成。3)其可以通過使用甲磺酰氯、對甲苯磺酰氯、2,2,2-三氟乙基磺酰氯等在非質(zhì)子溶劑中或不使用任何溶劑的條件下活化2,2-二甲基-1，3-二氧戊環(huán)-4-甲醇的羥基、然后與芐醇的醇化物反應(yīng)來完成。在芐基醚化后環(huán)狀縮醛結(jié)構(gòu)的脫保護通過在使用酸(例如乙酸、磷酸、硫酸或鹽酸)將pH調(diào)節(jié)至1至4的水溶液中反應(yīng)來完成，從而可以制備式(7)的化合物。1,2-環(huán)氧烷烴與具有兩個羥基(其通過環(huán)狀縮醛結(jié)構(gòu)的脫保護而新形成)的式(7)的化合物的加成聚合的方法并無特別限定，但可以通過下列步驟(D1)和(D2)來完成。CH2-OCH2《〉CHOHICHgOH..,("步驟(D1):作為式(7)的化合物的醇化方法，使用金屬鈉或鉀、優(yōu)選金屬鈉作為催化劑、在催化劑量為5至50摩爾％的條件下進行醇解，然后在10至50'C下溶解。步驟(D2):在5(TC至13(TC的反應(yīng)溫度下進行1,2-環(huán)氧垸烴的加成聚合關(guān)于步驟(D1)中的催化劑的量，由于在小于5摩爾％時1,2-環(huán)氧烷烴的聚合速率降低并且熱累積增加，從而導(dǎo)致形成諸如末端乙烯基醚化合物之類的雜質(zhì)，因此在高質(zhì)量的高分子量化合物的制備中，催化劑的使用量為5摩爾％或更高是有利的。當催化劑的量超過50摩爾%時，在醇化反應(yīng)時反應(yīng)溶液的粘度增加或者溶液固化，因此存在攪拌效率降低和無法促進醇化的趨勢。另外，當溶液固化時，其處理往往困難，這引起吸濕。當醇化物吸水時，衍生自水的亞烷基二醇化合物形成并且作為雜質(zhì)不利地混入醫(yī)藥用途中。在溶解溫度高于5(TC時，可能發(fā)生分解反應(yīng)以形成芐醇和甘油。在形成芐醇時，其引發(fā)了與1,2-環(huán)氧垸烴的加成聚合，從而產(chǎn)生分子量為目標化合物的分子量0.5倍的低分子量雜質(zhì)。在形成衍生自芐醇的低分子量雜質(zhì)時，如同目標化合物中的情況那樣，官能團通過羥基的垸基醚化和隨后步驟中的脫保護而引入，使得雜質(zhì)轉(zhuǎn)化為能夠與生物相關(guān)物質(zhì)反應(yīng)的低分子量雜質(zhì)?？赡艽嬖谶@樣的情況這種雜質(zhì)可與生物相關(guān)物質(zhì)反應(yīng)并且改變所得制劑的性能。另外，在形成甘油時，其也引發(fā)了與1,2-環(huán)氧垸烴的加成聚合，從而產(chǎn)生分子量為目標化合物的分子量1.5倍的高分子量雜質(zhì)。由于所述高分子量雜質(zhì)不具有芐基，并且其末端羥基只被垸基醚化，因此沒有引入官能團。然而，在含有這種雜質(zhì)的同時與藥劑等結(jié)合時，所得制劑是不均一的，因此質(zhì)量往往變化。此外，該制劑不適用于要求高純度產(chǎn)品的醫(yī)藥用途。當在低于l(TC的溫度下進行溶解時，如同催化劑的量高于50摩爾％的情況那樣，在醇化反應(yīng)時反應(yīng)溶液的粘度增加或者溶液固化，其處理往往變得困難并且引起吸濕。反應(yīng)溶劑并無特別限定，只要其為非質(zhì)子溶劑即可，例如甲苯、苯、二甲苯、乙腈、乙酸乙酯、四氫呋喃、氯仿、二氯甲烷、二甲基亞砜、二甲基甲酰胺或二甲基乙酰胺，但優(yōu)選為甲苯或無溶劑。反應(yīng)時間優(yōu)選為1至24小時。在時間少于1小時時，注意到催化劑不會完全溶解。在時間長于24小時時，注意到可能發(fā)生上述分解反應(yīng)。關(guān)于步驟(D2)中的反應(yīng)溫度，當溫度低于5(TC時，聚合速率較低并且熱累積增加，從而導(dǎo)致式(6)的化合物的質(zhì)量降低的趨勢。另外，當溫度高于13(TC時，在聚合過程中發(fā)生諸如末端的乙烯基醚化之類的副反應(yīng)，因此目標化合物的質(zhì)量往往降低。在聚合過程中，隨著分子量增加，反應(yīng)溶液的粘度也增加，使得可以可任選地加入非質(zhì)子溶劑(優(yōu)選甲苯)。作為醇化步驟中的另一種制備方法，可以提到下面的步驟(D3)。步驟(D3):加入5摩爾％至50摩爾％的量的甲醇鈉、叔丁醇鉀或甲醇鉀、優(yōu)選甲醇鈉作為催化劑，并且在6(TC至8(TC下進行反應(yīng)。此時，為了促進交換反應(yīng)，可以進行減壓操作。出于上述提到的原因，催化劑的量優(yōu)選為5摩爾％至50摩爾％。關(guān)于反應(yīng)溫度，當溫度低于6(TC時，交換反應(yīng)的轉(zhuǎn)化降低，并且殘留醇(例如甲醇)，這導(dǎo)致通過1,2-環(huán)氧垸烴的加成聚合而形成分子量為目標化合物的分子量0.5倍的雜質(zhì)。當溫度高于8(TC時，發(fā)生分解反應(yīng)。醇化反應(yīng)需要高溫，并且由于分解反應(yīng)易于發(fā)生，反應(yīng)時間優(yōu)選為1至3小時。當時間少于1小時時，注意到醇化物的轉(zhuǎn)化降低。當時間長于3小時時，可能發(fā)生分解反應(yīng)。反應(yīng)溶劑并無特別限定，只要其為非質(zhì)子溶劑即可，但優(yōu)選為甲苯或無溶劑。隨后末端與2,2-二甲基-l,3-二氧戊環(huán)-4-甲醇的醚化(IPG化)可通過下列方法(1)或(2)來完成(l)將聚亞垸基二醇鏈的末端轉(zhuǎn)化為醇化物、然后使其與甲磺?；?，2-二甲基-1,3-二氧戊環(huán)-4-甲醇(甲磺酸2，2-二甲基-1，3-二氧戊環(huán)-4-甲酯)反應(yīng)的方法；(2)使用甲磺酰氯、對甲苯磺酰氯、2,2,2-三氟乙基磺酰氯等活化聚亞垸基二醇鏈的末端羥基、然后與2,2-二甲基-1,3-二氧戊環(huán)-4-甲醇的醇化物反應(yīng)的方法。方法(2)是優(yōu)選的，下面將對其進行更詳細地描述。制備方法(2)包括下列步驟(C1)、(C2)和(C3)。步驟(C1):將脫卣劑和由式(6a)表示的化合物加入由式(6)表示的化合物中、然后使它們在2(TC至6(TC下反應(yīng)以獲得式(5)的化合物的步驟。CHO(A，O)巾HCH20(A10)mH…(6)14]R，(6a)Jf9s=o學(xué)V[化學(xué)式15]CH2—OCH2OCHO(A20)m—§-R16OCH20(A20)m—§-R1O','(5)使用的脫鹵劑包括有機堿，例如三乙胺、吡啶和4-二甲基氨基吡啶；以及無機堿，例如碳酸鈉、氫氧化鈉、碳酸氫鈉、乙酸鈉、碳酸鉀和氫氧化鉀。優(yōu)選的脫氯化氫劑為有機堿，例如三乙胺、吡啶或4-二甲基氨基吡啶。另外，反應(yīng)中使用的脫鹵劑的量優(yōu)選為式(6)中的一個羥基的1至8倍當量，更優(yōu)選為1至4倍當量。在使用的式(6a)的化合物中，W為能夠與羥基反應(yīng)的基團，優(yōu)選為Cl或Br，R1為具有1至10個碳原子的烴基(可含有氟原子)，優(yōu)選為甲基、苯基、或?qū)谆交８线m地，最優(yōu)選其中W為Cl并且W為甲基的甲磺酰氯。另外，反應(yīng)中使用的化合物(6a)的量優(yōu)選為式(6)中的一個羥基的1至6倍當量，更優(yōu)選為1至3倍當量。此時使用的溶劑并無特別限定，只要去為非質(zhì)子溶劑即可，并且優(yōu)選包括甲苯、苯、二甲苯、乙腈、乙酸乙酯、四氫呋喃、氯仿、二氯甲烷、二甲基亞砜、二甲基甲酰胺或二甲基乙酰胺，但更優(yōu)選為能夠共沸除去體系中的水分的甲苯。反應(yīng)中使用的溶劑的量優(yōu)選為式(6)的化合物的0.5倍重量至10倍重量。在式(6)的化合物具有較大的分子量的情況下，反應(yīng)溶液的粘度增加并且轉(zhuǎn)化降低，使得優(yōu)選使用所述溶劑稀釋反應(yīng)溶液。反應(yīng)溫度并無特別限定，但為了抑制副反應(yīng)優(yōu)選為6(TC或更低，并且為了抑制反應(yīng)溶液的粘度的增加優(yōu)選為2(TC或更高。反應(yīng)時間優(yōu)選為1至24小時。當時間少于l小時時，注意到轉(zhuǎn)化較低。當時間長于24小時時，注意到可能發(fā)生副反應(yīng)。在反應(yīng)時，可在反應(yīng)之前進行從初始材料中除去水分的操作，例如共沸除去水分。另外，可加入抗氧化劑，例如2,6-二叔丁基對甲酚。此外，隨著反應(yīng)的進行，伴隨式(5)的化合物的形成而形成鹽，但是反應(yīng)混合物可這樣用于隨后的步驟中，或可以通過過濾除去鹽，或在過濾后式(5)的化合物可通過純化方式(例如萃取、重結(jié)晶、吸附處理、再沉淀、柱層析、或超臨界萃取)來純化。步驟(C2):將由式(7a)表示的化合物加入式(5)的化合物中、然后使它們在2(TC至8(TC下反應(yīng)以獲得式(4)的化合物的步驟。H3CH3C\2C1O-CH——CH，一OM(7a)在式(7a)中，M為堿金屬，例如鈉或鉀，優(yōu)選為鈉。反應(yīng)中使用的化合物(7a)的量優(yōu)選為衍生自式(5)的化合物(6a)的個官能團的2至8倍當量，更優(yōu)選為2至5倍當量。反應(yīng)中使用的溶劑并無特別限定，只要其為上述非質(zhì)子溶劑即可，并且優(yōu)選為甲苯。反應(yīng)中使用的溶劑的量優(yōu)選為式(5)的化合物的0.5倍至IO倍當量。在式(5)的化合物具有較大的分子量的情況下，反應(yīng)溶液的粘度增加，使得優(yōu)選使用所述溶劑稀釋反應(yīng)溶液。反應(yīng)溫度并無特別限定，但為了抑制副反應(yīng)優(yōu)選為8(TC或更低，并且為了抑制反應(yīng)溶液的粘度的增加優(yōu)選為2(TC或更高。反應(yīng)時間優(yōu)選為1至24小時。當時間少于l小時時，注意到轉(zhuǎn)化較低。當時間長于24小時時，注意到可能發(fā)生副反應(yīng)。在反應(yīng)時，可在反應(yīng)之前進行從初始材料中除去水分的操作，例如共沸除去水分。步驟(C3):過濾反應(yīng)溶液或使用濃度為10重量％或更高的無機鹽水溶液洗滌反應(yīng)溶液的步驟。在所述步驟中，無機鹽并無特別限定，但優(yōu)選為氯化鈉。當濃度小于10重量％時，目標化合物移至水層中，從而降低方法的收率。使用水洗滌的操作可以重復(fù)數(shù)遍。進行步驟(C3)以除去過多加入的初始材料和作為副產(chǎn)物制得的鹽。當在下個位置中再次進行步驟(C1)至(C3)的情況下，忽略所述步驟可引起副反應(yīng)。另外，為了提高氧化亞烷基鏈末端的IPG化率，優(yōu)選再次重復(fù)步驟(C1)至(C3)。在氧化亞垸基鏈末端的IPG化率較低時，如上所述，注意到可形成多官能雜質(zhì)。這樣獲得的式(4)的化合物可通過純化方式(例如萃取、重結(jié)晶、吸附處理、再沉淀、柱層析或超臨界萃取)來純化。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage29</formula>式(4)的化合物的環(huán)狀縮醛結(jié)構(gòu)的脫保護通過轉(zhuǎn)化為使用酸(例如<formula>formulaseeoriginaldocumentpage29</formula>1至4的水溶液來進行，從而可以制備式(3)的化合物。通過1，2-環(huán)氧烷烴與具有四個羥基(其通過環(huán)狀縮醛結(jié)構(gòu)的脫保護而新形成)的式(3)的化合物的加成聚合而制備式(2)的化合物的方法并無特別限定，但所述化合物可以通過下列步驟(B1)和(B2)來制備。步驟(B1):進行下述交換反應(yīng)來作為式(3)的化合物的醇化方法在不使用任何溶劑或者在化合物溶解于溶劑(如甲苯)并且進行回流除去水分后，使用甲醇鈉、叔丁醇鉀或甲醇鉀、優(yōu)選甲醇鈉作為催化劑，在6(TC至IO(TC下加入催化劑量為新形成的羥基的2至25摩爾％的催化劑，然后在6(TC至IO(TC、0.05至0MPa的真空下0.2至4小時以除去所含的甲醇。另外，在60。C至130。C、0.05至0MPa的真空下除去所含的甲苯。步驟(B2):在5(TC至13(TC的反應(yīng)溫度下進行1,2-環(huán)氧烷烴的加成聚合關(guān)于步驟(B1)中的催化劑的量，由于在小于2摩爾％時1,2-環(huán)氧垸烴的聚合速率降低并且熱累積增加，從而導(dǎo)致形成諸如末端乙烯基醚化合物之類的雜質(zhì)，因此在高質(zhì)量的高分子量化合物的制備中，催化劑的使用量為2摩爾％或更高是有利的。當催化劑的量超過25摩爾%時，在醇化反應(yīng)時反應(yīng)溶液的粘度增加或者液體固化，因此存在攪拌效率降低和無法促進醇化的趨勢。另外，當溶液固化時，其處理往往困難，這引起吸濕。當醇化物吸收水時，衍生自水的亞烷基二醇化合物形成并且作為雜質(zhì)不利地混入醫(yī)藥用途中。在交換反應(yīng)的溫度低于6(TC時，交換反應(yīng)的轉(zhuǎn)化降低并且殘留諸如甲醇之類的醇，使得通過1,2-環(huán)氧烷烴的加成聚合形成不同于目標化合物的雜質(zhì)。在反應(yīng)溫度高于8(TC時，可能發(fā)生分解反應(yīng)。在醇化反應(yīng)中，需要升高溫度，但是由于易于發(fā)生分解反應(yīng)，因此交換反應(yīng)時間有利地為0.2至4小時。在反應(yīng)時間少于0.2小時時，注意到醇化反應(yīng)的轉(zhuǎn)化降低。在時間長于4小時時，注意到可能發(fā)生分解反應(yīng)。在除去甲苯時，如果溫度高于130°C，發(fā)生分解反應(yīng)，其中發(fā)生聚氧化亞垸基鏈的消除并且形成分子量為一半的產(chǎn)物。在溫度低于60卩時，可能發(fā)生固化，這可能導(dǎo)致處理中的問題。反應(yīng)溶劑并無特別限定，只要其為非質(zhì)子溶劑即可，例如甲苯、苯、二甲苯、乙腈、乙酸乙酯、四氫呋喃、氯仿、二氯甲烷、二甲基亞砜、二甲基甲酰胺或二甲基乙酰胺，但優(yōu)選為甲苯或無溶劑。反應(yīng)時間優(yōu)選為1至24小時。在時間少于1小時時，注意到催化劑不會完全溶解。在時間長于24小時時，注意到可能發(fā)生上述分解反應(yīng)。關(guān)于步驟(B2)中的反應(yīng)溫度，當溫度低于5(TC時，聚合速率較低并且熱累積增加，從而導(dǎo)致式(2)的化合物的質(zhì)量降低的趨勢。另外，當溫度高于13(TC時，在聚合過程中發(fā)生諸如末端的乙烯基醚化之類的副反應(yīng)，因此目標化合物的質(zhì)量往往降低。在聚合過程中，隨著分子量增加，反應(yīng)溶液的粘度也增加，使得可以可任選地加入非質(zhì)子溶劑(優(yōu)選甲苯)。[化學(xué)式19]H2C-0(A20)n—HH2—O-CH2hQHC_0(A20)n—HHC—0(A10)m-CH2H2C—0(A10)m-CH2HC-0(A20)n—HH2i_0(A20)n—H隨后末端的烷基醚化可通過下列方法(1)或(2)來完成(1)將聚亞烷基二醇鏈的末端轉(zhuǎn)化為醇化物、然后使其與齒代垸反應(yīng)的方法；(2)使用甲磺酰氯、對甲苯磺酰氯、2，2，2-三氟乙基磺酰氯等活化聚亞垸基二醇鏈的末端羥基、然后與垸醇的醇化物反應(yīng)的方法方法(2)是優(yōu)選的，下面將對其進行更詳細地描述。制備方法(2)包括下列步驟(A1)、(A2)和(A3)。步驟(Al):將脫卣劑和由式(6a)表示的化合物加入由式(2)表示的化合物中、然后使它們在2(TC至6(TC下反應(yīng)的步驟。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage32</formula>[化學(xué)式21]<formula>formulaseeoriginaldocumentpage33</formula>一H2C-0(A20)n—f—R1H2-0-CH2hQH+-0(A20)n>^g—r1HC—0(A10)m-CH26H2C—0(A10)m-H2gH9-0(A20)n—#—R1l700H2C-0(A^D)n^~g—Ri6…(B)使用的脫鹵劑包括有機堿，例如三乙胺、吡啶和4-二甲基氨基吡啶；以及無機堿，例如碳酸鈉、氫氧化鈉、碳酸氫鈉、乙酸鈉、碳酸鉀和氫氧化鉀。優(yōu)選的脫氯化氫劑為有機堿，例如三乙胺、吡啶或4-二甲基氨基吡啶。另外，反應(yīng)中使用的脫鹵劑的量優(yōu)選為式(2)中的一個羥基的1至8倍當量，更優(yōu)選為1至4倍當量。在使用的式(6a)的化合物中，W優(yōu)選為Cl或Br,Ri優(yōu)選為甲基、苯基、或?qū)谆交?。更合適地，最優(yōu)選其中W為Cl并且Ri為甲基的甲磺酰氯。另外，反應(yīng)中使用的化合物(6a)的量優(yōu)選為式(2)中的一個羥基的1至6倍當量，更優(yōu)選為1至3倍當量。此時使用的溶劑并無特別限定，只要其為非質(zhì)子溶劑即可，并且優(yōu)選包括甲苯、苯、二甲苯、乙腈、乙酸乙酯、四氫呋喃、氯仿、二氯甲烷、二甲基亞砜、二甲基甲酰胺或二甲基乙酰胺，但更優(yōu)選為能夠共沸除去體系中的水分的甲苯。反應(yīng)中使用的溶劑的量優(yōu)選為式(2)的化合物的0.5倍重量至10倍重量當量。在式(2)的化合物具有較大的分子量的情況下，反應(yīng)溶液的粘度增加并且轉(zhuǎn)化降低，使得優(yōu)選用所述溶劑稀釋反應(yīng)溶液。反應(yīng)溫度并無特別限定，但為了抑制副反應(yīng)優(yōu)選為6(TC或更低，并且為了抑制反應(yīng)溶液的粘度的增加優(yōu)選為2(TC或更高。反應(yīng)時間優(yōu)選為1至24小時。當時間少于l小時時，注意到轉(zhuǎn)化較低。當時間長于24小時時，注意到可能發(fā)生副反應(yīng)。在反應(yīng)時，可在反應(yīng)之前進行從初始材料中除去水分的操作，例如共沸除去水分。另外，可加入抗氧化劑，例如2,6-二叔丁基對甲酚。此外，隨著反應(yīng)的進行并伴隨式(B)的化合物的形成而形成鹽，但是反應(yīng)混合物可這樣用于隨后的步驟中，或可以通過過濾除去鹽，或在過濾后式(B)的化合物可通過純化方式(例如萃取、重結(jié)晶、吸附處理、再沉淀、柱層析、或超臨界萃取)來純化。步驟(A2):將由式(la)表示的化合物加入式(B)的化合物中、然后使它們在2(TC至8(TC下反應(yīng)以獲得式(0)的化合物的步驟。R—OM■(丄a)在式(la)中，R如上所述，并且M為堿金屬，例如鈉或鉀，優(yōu)選為鈉。反應(yīng)中使用的化合物(la)的量優(yōu)選為衍生自式(B)的化合物(6a)的一個羥基的2至8倍當量，更優(yōu)選為2至5倍當量。反應(yīng)中使用的溶劑并無特別限定，只要其為上述非質(zhì)子溶劑即可，并且優(yōu)選為甲苯。反應(yīng)中使用的溶劑的量優(yōu)選為式(B)的化合物的0.5倍量至IO倍當量。在式(B)的化合物具有較大的分子量的情況下，反應(yīng)溶液的粘度增加，使得優(yōu)選使用所述溶劑稀釋反應(yīng)溶液。反應(yīng)溫度并無特別限定，但為了抑制副反應(yīng)優(yōu)選為8(TC或更低，并且為了抑制反應(yīng)溶液的粘度的增加優(yōu)選為2(TC或更高。反應(yīng)時間優(yōu)選為1至24小時。當時間少于l小時時，注意到轉(zhuǎn)化較低。當時間長于24小時時，注意到可能發(fā)生副反應(yīng)。在反應(yīng)時，可在反應(yīng)之前進行從初始材料中除去水分的操作，例如共沸除去水分。步驟(A3):過濾反應(yīng)溶液或使用濃度為10重量％或更高的無機鹽水溶液洗滌反應(yīng)溶液的步驟。在所述步驟中，無機鹽并無特別限定，但優(yōu)選為氯化鈉。當濃度小于10重量％時，目標化合物移至水層中，從而顯著地降低方法的收率。使用水洗滌的操作可以重復(fù)數(shù)遍。進行步驟(A3)以除去加入的過多初始材料和作為副產(chǎn)物制得的鹽。當在下個位置中再次進行步驟(A1)至(A3)的情況下，忽略所述步驟可引起副反應(yīng)。在進行脫芐基步驟作為下個步驟的情況下，這些雜質(zhì)作為催化劑毒物，因此可以影響轉(zhuǎn)化。另外，為了提高氧化亞烷基鏈末端的垸基醚化率，優(yōu)選再次重復(fù)步驟(A1)至(A3)。在氧化亞烷基鏈末端的烷基醚化率較低時，如上所述，注意到可形成多官能雜質(zhì)。這樣獲得的式(O)的化合物可通過純化方式(例如萃取、重結(jié)晶、吸附處理、再沉淀、柱層析或超臨界萃取)來純化。H2C_0(A20)n—RH2—0-CH2-<QHC-0(A20)n~~RHC—0(A10)m-CH2H2C—0(A10)m-CH2HC-0(A20)n—RH2C-0(A20)n—R...fn)通過連續(xù)的脫芐基來制備化合物(pO)的方法并無特別限定，但其可以通過在下面步驟(Z)中使用氫化還原催化劑和氫供體進行氫化來制備。步驟(Z):使由式(O)表示的化合物進行氫化還原反應(yīng)的步驟。氫化還原催化劑有利地為金屬催化劑等，優(yōu)選為鎳、鈀，特別地為鈀。載體并無特別限定，但優(yōu)選為氧化鋁或碳，更優(yōu)選為碳。鈀的量優(yōu)選為式(0)的化合物的1至20重量％。在其量小于1重量％時，脫保護的轉(zhuǎn)化降低，因此注意到下個步驟中官能化率降低。另外，在其量大于20重量％時，可發(fā)生聚亞烷基二醇鏈的分解反應(yīng)，注意到產(chǎn)生上述反應(yīng)性低分子量化合物作為副產(chǎn)物。反應(yīng)溶劑并無特別限定，但優(yōu)選包括甲醇、乙醇、2-丙醇等，更優(yōu)選為甲醇。氫供體并無特別限定，但包括氫氣、環(huán)己烯、2-丙醇、甲酸銨等。反應(yīng)溫度優(yōu)選為60'C或更低。在溫度高于6(TC時，可發(fā)生聚亞垸基二醇鏈的分解反應(yīng)，注意到產(chǎn)生反應(yīng)性低分子量化合物。反應(yīng)時間并無特別限定。在使用大量的催化劑時，反應(yīng)在短時間內(nèi)完成。但在量很小時，需要更長的時間。反應(yīng)時間優(yōu)選為1至5小時。當時間少于1小時時，注意到轉(zhuǎn)化較低。當時間長于5小時時，可發(fā)生聚亞垸基二醇鏈的分解反應(yīng)。所得式(pO)的化合物可通過純化方式(例如萃取、重結(jié)晶、吸附處理、再沉淀、柱層析或超臨界萃取)來純化。這樣獲得的化合物是由下式(pO)表示的聚亞垸基二醇衍生物，并且其基本上不含仲羥基[化學(xué)式24]H2C'0(A20)n-RH2—OHHC-0(A20)n—RH—0(A10)m一iH2H2C—0(A10)m—CH2H-0(A20)n—RH2C-o(A20)n—R(P0)其中A10和A20表示具有2至4個碳原子的氧化亞垸基，m表示20至500，n表示15至700，并且R表示氫原子或具有1至20個碳原子的烴基。由于式(pO)的化合物基本上不含仲羥基，因此隨后官能團引入反應(yīng)的轉(zhuǎn)化較高，并且可以獲得高純度的聚亞烷基二醇衍生物。在存在仲羥基的情況下，隨后官能團引入反應(yīng)的轉(zhuǎn)化較低，并且修飾的生物相關(guān)物質(zhì)的純度降低，使得可能產(chǎn)生使藥劑等含有雜質(zhì)的問題?；衔?pO)的羥基可通過下列方法而轉(zhuǎn)化為多種官能團。例如，可通過下列所述制備方法來進行制備LaboratorySynthesisofPolyethyleneGlycolDerivatives(J.MILTONHARRISetal)、POLY(ETHYLENEGLYCOL)CHEMISTRY(J.MILTONHARRIS)、JP-A-7-316285和JP-T-2007-508427。另外，即使在多支鏈聚氧化亞烷基衍生物(1B)的情況下，官能團也可以通過類似的方法引入。(l)使用鹵代垸基羧酸衍生物、琥珀酸酐、戊二酸酐等引入羧基、然后轉(zhuǎn)化為其活性酯鹵代垸基羧酸衍生物可以按照下述方式獲得例如，將具有羥基的支化的聚氧化亞烷基衍生物溶解于甲苯中，在ll(TC下除去水分后，在4(TC下加入氫氧化鈉，并且滴加6-溴己酸乙酯進行反應(yīng)；在將水加入反應(yīng)溶液中進行水解后，使用鹽酸使反應(yīng)溶液變?yōu)樗嵝?，在除去甲苯層后，使用氯仿萃取和濃縮，然后使用乙酸乙酯進行結(jié)晶化。另外，將具有羥基的支化的聚氧化亞垸基衍生物溶解于甲苯中，在11(TC下除去水分后，加入乙酸鈉、琥珀酸酐或戊二酸酐以進行反應(yīng)。在冷卻后，過濾反應(yīng)溶液，使用己垸進行結(jié)晶并且使用乙酸乙酯和己烷使晶體析出，從而可以獲得聚氧化亞垸基琥珀酸酯或戊二酸酯衍生物。將這些羧基衍生物溶解于甲苯中，通過在4(TC下加入N-羥基琥珀酰亞胺、二環(huán)己基碳化二亞胺來進行活化，在過濾后，使用乙酸乙酯和己烷使晶體析出，從而可以獲得活化的酯化衍生物。(2)與甲磺酰氯的甲磺?；瘜⒕哂辛u基的支化的聚氧化亞烷基衍生物溶解于甲苯中，在110。C下除去水分后，在4(TC下加入三乙胺和甲磺酸，通過加入乙醇來完成反應(yīng)，然后用乙酸乙酯和己烷使過濾的反應(yīng)溶液結(jié)晶析出。因此，可以獲得甲磺?；苌?。(3)使用硫脲、二硫代碳酸酯等轉(zhuǎn)化為巰基將在(2)中獲得的甲磺?；苌锶芙庥?-丙醇中，加入硫脲，在4(TC下反應(yīng)后，在8(TC下加入氫氧化鈉水溶液進行水解，在用鹽酸使反應(yīng)溶液變?yōu)樗嵝院螅褂寐确螺腿?，在濃縮后，用乙醇和己烷使晶體析出。因此，可以獲得巰基衍生物。(4)使用對硝基苯基氯碳酸酯、二琥珀酰亞胺基碳酸酯、羰基二咪唑等引入活性碳酸酯基團關(guān)于對硝基苯基碳酸酯衍生物，將具有羥基的支鏈聚氧化亞烷基衍生物溶解于甲苯中，在ll(TC下除去水分后，在60'C下加入三乙胺和對硝基苯基氯甲酸酯進行反應(yīng)，然后用乙酸乙酯和己烷使過濾的反應(yīng)溶液結(jié)晶析出。因此，可以獲得活性碳酸酯衍生物。(5)通過氰化、氫化、或甲磺?；?、胺化轉(zhuǎn)化為氨基關(guān)于氰基衍生物，將具有羥基的支化的聚氧化亞烷基衍生物溶解于離子交換水中，在冰冷卻下加入氫氧化鉀水溶液，滴加丙烯腈以進行反應(yīng)。在中和后，使用氯仿萃取，在濃縮后，用乙酸乙酯和己垸使晶體析出。因此，可以獲得氰基衍生物。將氰基衍生物、甲苯、和氫化催化劑(例如鎳)加入高壓反應(yīng)裝置中并溶解，在13(TC下加入氫氣直至4MPa以進行反應(yīng)?？梢杂眉痕惯^濾的反應(yīng)溶液結(jié)晶，從而獲得氨基衍生物。可選擇地，將在(2)中獲得的甲磺酰化衍生物溶解于氨水中并在60r下反應(yīng)。在通過鼓入氮氣冒泡來除去氨后，使用甲苯萃取，在濃縮后，使用甲苯和己垸結(jié)晶。因此，可以獲得氨基衍生物。(6)通過馬來酰胺化、經(jīng)過閉環(huán)反應(yīng)的馬來酰亞胺化、馬來酰亞胺化試劑(馬來酰亞胺基丙酸N-羥基琥珀酸酯、馬來酰亞胺基己酸N-羥基琥珀酸酯等)來引入馬來酰亞胺基團將在(5)中獲得的氨基衍生物溶解于甲苯中并和馬來酸酐反應(yīng)，然后使用乙酸乙酯和己垸結(jié)晶，從而可以獲得馬來酰胺衍生物。將其溶解于乙腈中，并在加入乙酸鈉和乙酸酐后，使它們在8(TC下反應(yīng)。在過濾后，將反應(yīng)溶液濃縮并使用乙酸乙酯和己垸結(jié)晶，從而可以獲得馬來酰亞胺衍生物。可選擇地，將在(5)中獲得的氨基衍生物溶解于甲苯中，加入馬來酰亞胺基丙酸N-羥基琥珀酸酯以進行反應(yīng)。在將反應(yīng)溶液過濾后，使用乙酸乙酯和己烷結(jié)晶。因此可以獲得馬來酰亞胺衍生物。(7)通過烷基縮醛化和水解引入醛基將在(2)中獲得的甲磺酰化衍生物溶解于甲苯中，加入通過將鈉溶解于3,3-二乙氧基丙醇中而獲得的溶液，然后使它們在4(TC下反應(yīng)。在反應(yīng)溶液過濾后，使用乙酸乙酯和己烷結(jié)晶，從而可以獲得丙醛衍生物。將其溶解于離子交換水中，在使用磷酸的酸性條件下進行水解，然后使用氯仿萃取，濃縮，將反應(yīng)溶液過濾，使用乙酸乙酯和己烷結(jié)晶，從而可以獲得馬來酰胺衍生物。(8)使用乙炔化試劑(炔丙胺等)引入乙炔基將在(4)中獲得的活性碳酸酯衍生物溶解于甲苯中，使炔丙胺與其在4(TC下反應(yīng)，然后使用乙酸乙酯和己垸結(jié)晶，從而可以獲得乙炔衍生物。(9)使用疊氮化試劑(例如疊氮化鈉)引入疊氮基將在(2)中獲得的甲磺?；苌锶芙庥诩妆街?，使疊氮化鈉與其在6(TC下反應(yīng)，然后將反應(yīng)溶液過濾，使用乙酸乙酯和己烷結(jié)晶，從而可以獲得疊氮化物衍生物。使用上述方法，式(pO)中的羥基可被轉(zhuǎn)化為能夠與生物相關(guān)物質(zhì)反應(yīng)的官能團。根據(jù)本發(fā)明，可以獲得使用具有多支鏈結(jié)構(gòu)的聚氧化亞垸基修飾的生物相關(guān)物質(zhì)。由于結(jié)合的聚氧化亞烷基具有多支鏈結(jié)構(gòu)，因此生物相關(guān)物質(zhì)可以在不阻斷活性位點的情況下提供較大的水化層，因此所述物質(zhì)可以保持活性。另外，由于所述衍生物在能夠與生物相關(guān)物質(zhì)形成化學(xué)結(jié)合的官能團和多支鏈結(jié)構(gòu)之間具有雙鏈結(jié)構(gòu)(其具有特定的分子量)，因此增強生物相關(guān)物質(zhì)和多支鏈聚氧化亞垸基衍生物之間的反應(yīng)性，使得可以高效地獲得生物相關(guān)物質(zhì)的聚氧化亞垸基修飾的產(chǎn)物。實施例下面將參照實施例來更詳細地描述本發(fā)明。就此而言，使用^-NMR分析和羥基值(OHV)來分析和鑒定實施例中的化合物?！狧-NMR分析方法>:在'H-NMR分析中，使用由NipponDenshiDatumK.K.制造的JNM-ECP400。NMR數(shù)據(jù)中的積分值為理論值。OHV分析方法、在OHV分析中，使用鄰苯二甲酸酐法進行測定(根據(jù)JISK1557)。為了測定濕度，使用KarlFischer濕度計("7S8/3-20型"，由Metrohm-Shibata制造)，并且使用"HydramailComposite2"(由Sigma-Aldrich生產(chǎn))作為KarlFischer試劑。(實施例1)多支鏈聚氧化亞垸基衍生物(1)(11=甲基，A10、八20=氧化亞乙基，n=114，m二170，并且分子量=約40,000的情況)的合成(實施例1-1)向裝有溫度計、氮氣加入管和攪拌器的2L四頸燒瓶中加入1050.0g(7.94摩爾)的通過蒸餾Solketal[由ALDRICH生產(chǎn)]而獲得的2,2-二甲基-l,3-二氧戊環(huán)-4-甲醇(IPG)和1050.0g的干甲苯。在攪拌下加入氮氣，分批加入36.5g(1.59摩爾)的鈉以獲得IPG鈉產(chǎn)物(IPG-Na)/甲苯的溶液。IPG3.78毫摩爾/g，鈉0.76毫摩爾/g。(實施例1-2)向裝有溫度計、氮氣加入管和攪拌器的1000ml圓底燒瓶中加入132.2g(l.O摩爾)的2，2-二甲基-1,3-二氧戊環(huán)-4-甲醇、231.4g(1.2摩爾)的28%的甲醇鈉的甲醇溶液、和500ml的甲苯。向其中加入氮氣，在減壓下回流甲苯1小時以通過蒸餾除去甲醇。將溶液保持在8(TC下，使用滴液漏斗在2小時的時間內(nèi)分批加入126.6g(1.0摩爾)的氯甲苯，接著進一步進行2小時的反應(yīng)。使反應(yīng)溶液除去溶劑并通過蒸餾純化(b.p.93-95°C/266Pa)以獲得4-(節(jié)基氧基甲基)-2,2-二甲基-l,3-二氧戊環(huán)。iH-NMR(CDC13，內(nèi)標TMS)S(ppm):1.36,1.42(3H,3H,s，C腿2)2),3.45-3.57(2H，m,￡H20-C(CH3)2)，3.73-3.76(1H，m，CHO-C(CHOA4.03-4.07，4.28-4.32(2H，m，CH20-CH7Ph),4.57(2H,q，-CH2Ph),7.15-7.40(5H,m，-CH2￡li)(Ph表示苯基)。(實施例1-3)向1L燒杯中稱重加入222g(1.0摩爾)l-2中制得的4-(芐基氧基甲基)-2,2-二甲基-l，3-二氧戊環(huán)、250ml乙醇、和400ml蒸餾水，使用磷酸將整體的pH調(diào)節(jié)至2。加入氮氣，將溶液加熱至70。C。在反應(yīng)1.5小時后，使用氫氧化鈉將溶液的pH調(diào)節(jié)至7。使用吸附劑"KYOWAADIOOO"(由KyowaHakkoKogyoCo.,Ltd.生產(chǎn))將所得鹽進行吸附處理，然后除去溶劑以獲得3-芐基氧基-l,2-丙二醇。iH-NMR(CDC13,內(nèi)標TMS)5(ppm):3.50-3.71(4H,m,CH2OH,CH二O陽CH，Ph),3.86-3.91(1H,m，CHOH),4.54(2H,m，-纖Ph),7.27-7.38(5H,m，-CH逃)。(實施例1-4)向裝有溫度計、氮氣加入管和攪拌器的300ml圓底燒瓶中加入27.3g(0.15摩爾)的3-芐基氧基-l,2-丙二醇、127g的干甲苯、和0.9g(39毫摩爾26摩爾％)的金屬鈉。向其中加入氮氣，在室溫下攪拌整體直至金屬鈉溶解。將溶液加入5L高壓釜中，并將系統(tǒng)的內(nèi)部用氮氣取代后，接著加熱至100。C。然后，在100。C至150°C、在lMPa或更低的壓力下加入1473g(33.5摩爾)的環(huán)氧乙烷，接著連續(xù)進行反應(yīng)另一小時。當在減壓下除去未反應(yīng)的環(huán)氧乙垸氣體后，將殘余物冷卻至60'C并使用85%的磷酸水溶液將pH調(diào)節(jié)至7.5以獲得下列化合物(pl)。'H曙NMR(CDC13，內(nèi)標TMS)S(ppm):3.40-3.80(901H,m,_^lO(0)mH,CHO(CH2CH20)mH，CH2OCH7Ph),4.54(2H,s,-CH2Ph),7.27-7.38(5H,m,-CH逃)。分子量(OHV):9，870(m,112)。HC—0(CH2CH20)mHH2C—0(CH2CH20)mH(pi)m:約112(實施例1-5)向裝有溫度計、氮氣加入管、攪拌器、Dean-stark管和冷凝管的5L四頸燒瓶中加入870g的在1-4中制得的化合物(pl)、3.0kg的甲苯、和0.65g的2,6-二叔丁基對甲酚，然后在攪拌和加入氮氣的同時將整體加熱至6(TC以進行溶解。將所得溶液加熱至ll(TC，使用甲苯除去約250g的餾分作為共沸物，從而實現(xiàn)水分除去。在冷卻至40。C后，加入28.8g的三乙胺，然后在30分鐘的時間內(nèi)滴加26.5g的甲磺酰氯，接著在4(TC下反應(yīng)3小時。向其中加入685g的在1-1中制得的IPG-Na/甲苯溶液，接著在40r下反應(yīng)3小時。加入1.0kg的25重量。/。的氯化鈉溶液，在50。C下整體攪拌15分鐘。在靜置15分鐘后，除去下層。重復(fù)五次使用水的洗滌步驟。在使用水洗滌后使上層在50°C、微減壓下除去250g的餾分以進行水的除去。另外，加入硫酸鎂并通過攪拌30分鐘來除去水分。將溶液過濾，收集濾液，加入5.0kg的正己烷以進行結(jié)晶。在通過過濾來收集晶體后，使用5.0kg的正己垸洗滌晶體。通過過濾來收集晶體，真空干燥以獲得880g的下列化合物(p2)。'H-NMR(CDC13,內(nèi)標TMS)5(ppm):3.40-3.80(905H,m,-CH20(CH2CH20)mCH2-,￡HO(￡M2,0)￡Hr,CH2OCH，Ph),4.54(2H,s,-CH2Ph),7.27-7.38(5H,m,-CH2￡h),1.37(12H，d,(-O-)，C(-CH二)，)，4.05(4H,m,-0-CH7-CH(0)-CH，-0-)。(實施例1-6)向裝有溫度計、氮氣加入管、攪拌器和底栓的20L燒瓶中加入750g的在1-5中獲得的化合物(p2)和13.5kg的離子交換水，加入氮氣使化合物溶解。在避光的條件下，滴加85%的磷酸，使得將pH調(diào)節(jié)至pH為1.80，接著在室溫下反應(yīng)3小時。加入ION的氫氧化鈉水溶液以進行中和，然后加入2.7kg的氯化鈉，使用ION的氫氧化鈉水溶液進一步將pH調(diào)節(jié)為6.0至7.0。使用2.25L的氯仿萃取，在取出下層后，再加入1.5L的氯仿以進行萃取。合并下層，濃縮，將濃縮殘余物溶解于2.5kg的甲苯中。然后，將1.9kg的正己烷加入已經(jīng)濾去不溶性物質(zhì)的濾液中以進行結(jié)晶，在通過過濾收集晶體后，使用1.9kg的正己烷洗滌晶體。通過過濾來收集晶體，真空干燥以獲得720g的下列化合物(p3)。H^C—OCH^~^,HC—0(CH2CH20)H2C—0(CH2CH20)(p2)m,1123,5c3Hc/3H.c22oIIH￡H卜Hmmolc2H44!H-NMR(CDC13,內(nèi)標TMS)S(ppm):3.40-3.80(909H，m，-CH20(CH2CH20)mCH2-，CHO(CH2CH20)mCH2-,CH2OCH，Ph),-0-CH7-CH(0)-CH2-0-)，4.54(2H,s，-CH2Ph)，7.27-7.38(5H,m，-CH逃)。一H2C—OHH2-OCH2~^^HC-OHHC—0(CH2CH20)m—CH2H2C—0(CH2CH20)m—CH2HC—OHIH2C-OH(p3)m:約112(實施例1-7)向裝有溫度計、氮氣加入管、攪拌器、Dean-stark管和冷凝管的5L四頸燒瓶中加入713g的在1-6中制得的化合物(p3)和2850g的甲苯，然后整體在IIO'C下回流以除去水分。在冷卻至6(TC后，滴加5.38g的28%的甲醇鈉的甲醇溶液，然后在75'C、減壓下除去甲醇。將反應(yīng)溶液加入裝有溫度計、氮氣加入管和攪拌器的5L耐壓容器中，在95°C、減壓下進一步除去甲苯。在將系統(tǒng)的內(nèi)部用氮氣取代后，接著將整體加熱至100。C。然后，在IO(TC至150°C、在lMPa或更低的壓力下滴加695g的環(huán)氧乙垸，接著連續(xù)進行反應(yīng)另2小時。在取出672g的所得反應(yīng)產(chǎn)物后，在1MPa或更低的壓力下分批加入639g的環(huán)氧乙垸，接著連續(xù)進行反應(yīng)另2小時。反應(yīng)產(chǎn)物中加入1230g的甲苯以溶解。當在95'C、減壓下除去520g的甲苯以除去水分后，在lMPa或更低的壓力下加入279g的環(huán)氧乙烷，接著連續(xù)進行反應(yīng)另2小時。在冷卻至6(TC后，使用85。/。的磷酸水溶液將pH調(diào)節(jié)至7.5以獲得760g的下列化合物(p4)。iH-NMR(CDC13,內(nèi)標TMS)S(ppm):3.40-3.80(3，631H,m,國區(qū)0(0)￡^-,CHO(CH2CH20)mCHr,CH2OCH7Ph,CHO(CH2CH20)CHr,-CH20(CH2CHzO)A4.54(2H,s,-CH2Ph),7.27-7.38(5H,m，-CH2￡h)°分子量(OHV):39,790(11=約170)。[化學(xué)式28]H2—OCH2~^^HC-0(CH2CH20)n—HHC—0(CH2CH20)m—CH2H2C—0(CH2CH20)m—CH2HC-0(CH2CH20)n—HH2C-0(CH2CH20)n—H(p4)m一勺112，11=約170(實施例1-8)向裝有溫度計、氮氣加入管、攪拌器、Dean-stark管和冷凝管的500mL四頸燒瓶中加入150g的在1-7中制得的化合物(p4)、640g的甲苯和0.11g的2,6-二叔丁基對甲酚，然后在攪拌和加入氮氣的同時將整體加熱至6(TC以進行溶解。將所得溶液加熱至ll(TC，使用甲苯除去約40g的餾分作為共沸物，從而除去水分。在冷卻至4(TC后，加入2.54g的三乙胺，然后在10分鐘的時間內(nèi)滴加2.33g的甲磺酰氯，接著在4(TC下反應(yīng)3小時。加入9.07g的28%的甲醇鈉的甲醇溶液，接著在4(TC下反應(yīng)3小時。加入1.5kg的25重量％的氯化鈉溶液，在5(TC下攪拌整體15分鐘。在靜置15分鐘后，除去下層。重復(fù)兩次使用水的洗滌步驟。在使用水洗滌后使上層在5(TC、微減壓下除去200g的餾分以進行水的除去。另外，加入硫酸鎂并通過攪拌30分鐘來除去水分。將溶液過濾，收集濾液，加入600g的正己垸以進行結(jié)晶。在通過過濾來收集晶體后，使用600g的正己垸洗滌晶體。通過過濾來收集晶體，真空干燥以獲得130g的下列化合物(p5)。'H-薩R(CDC13,內(nèi)標TMS)S(ppm):3.40-3,80(3,631H,m，-CH20(CH2CH20)mCHr,CHO(CH2CH20)mCH2-,CH2OCH7Ph,CHO(CH2CH20)nCHr,-CH20(CH2CH20)A4.54(2H，s,-CH2Ph),7.27-7.38(5H,m,-CH逃)，3.38(12H，s，-CH二)。H2—OCH2~^^HC-0(CH2CH20)n-CH3HC—0(CH2CH20)m—CH2H2C—0(CH2CH20)m—CH2HC-0(CH2CH20)n—CH3H2C-0(CH2CH20)n—CH3(p5)111=約112，11=約170(實施例1-9)向裝有溫度計、氮氣加入管、攪拌器和冷凝管的500mL圓底燒瓶中加入120g的在1-8中制得的化合物(p5)和60g的5%鈀-碳(含水50%的產(chǎn)物)。在被氮氣取代后，加入1.2L的甲醇和200mL的環(huán)己烯，在52"C至55"C加熱整體和緩慢回流以反應(yīng)3小時。在將反應(yīng)溶液冷卻至室溫后，通過過濾除去鈀-碳，濃縮濾液。然后，加入1.2L的甲苯和1.2L的正己垸以析出晶體。通過過濾收集所得晶體，干燥以獲得107g的下列化合物(p6)。'H-廳R(CDC13,內(nèi)標TMS)S(ppm):3.-3.80(3,631H,m，-CH20(CH2CH20)mCHr,CHOfCI^CH^mCHr,CHO(CH2CH20)CHr，隱纖O(纖纖O)n),3.38(12H,s，-￡Hi)。[化學(xué)式30]H2-0(CH2CH20)n-CH3H2-OHHC-0(CH2CH20)n—CH3H-0(CH2CH20)m—d:H2H2C—0(CH2CH20)m—CH2，_0(CH2CH20)n_CH3H2C-0(CH2CH20)n-CH3(p6)111=約112,11=約170(實施例1-10)向裝有溫度計、氮氣加入管、攪拌器和冷凝管的500mL圓底燒瓶中加入50g的在1-9中制得的化合物(p6)、3.1g的50%的氫氧化鉀水溶液和50g的離子交換水。在被氮氣取代后，將它們?nèi)芙獠⒗鋮s至l(TC，然后加入50g的丙烯腈，接著反應(yīng)4小時。在使用磷酸中和反應(yīng)溶液后，加入100g的乙酸乙酯以進行萃取和除去雜質(zhì)，然后使用300g的氯仿將目標產(chǎn)物萃取和收集。在將硫酸鎂加入氯仿層中以除去水分，然后通過過濾除去，濃縮濾液。通過加入500mL的乙酸乙酯和500mL的正己烷析出晶體，通過過濾收集所得晶體，干燥以獲得40g的下列化合物(p7)。!H-雇R(CDC13,內(nèi)標:TMS)S(ppm):3.40-3.80(3,633H,m,-CCH20)mCH2-,CHO(CH2CH20)mCH2-,CHO(CH2CH20)nCH2、-CH20(CH2CH20)n,-OCH2CH7CN),3.38(12H，s,-CH!),2.62(2H,t,-CH2CN)。[化學(xué)式31]H2-0(CH2CH20)n—CH3Nsc-CH2CH20—，HC_0(CH2CH20)n-CH3H-0(CH2CH20)m—(!:H2H2C—0(CH2CH20)m—CH2H-0(CH2CH20)n-CH3H2C-0(CH2CH20)n—CH3(p7)111=約112，11=約170(實施例1-11)向裝有溫度計、氮氣加入管和攪拌器的1L耐壓容器中加入30g的在l-10中制得的化合物(p7)、2.7g的Ni催化劑、和545g的甲苯。在被氮氣取代后，將整體在6(TC下溶解，加入氨氣至0.5MPa，加入氫氣至3.5MPa，整體加熱至13(TC，接著反應(yīng)3小時。在冷卻后，通過鼓入氮氣冒泡來使整體脫氣，在將反應(yīng)溶液過濾后，濃縮濾液。通過加入300mL的甲苯和450mL的正己烷來使?jié)饪s液結(jié)晶析出。通過過濾收集所得晶體，干燥以獲得25g的下列化合物(p8)。!H-NMR(D20，內(nèi)標DSS)S(ppm):3.40-3.80(3,633H，m,-CH20(CH2CH20)mCHr,CHO(CH2CH20)mCHr,CHO(CH2CH20)CH2-,-CH20(CH2CH20),-OCH2CH7CN)，3.38(12H,s,-CH二),2.80(2H,t，-CH2NHA1.80(2H,m，-,CH2NH2)。[化學(xué)式32]H2C-0(CH2CH20)n—CH3H2N—CH2CH2CH20—H2H_0(CH2CH20)n—CH3HC—0(CH2CH20)m—CH2H2C—0(CH2CH20)m—CH2HC-0(CH2CH20)n—CH3H2C-0(CH2CH20)n—CH3(p8)m二約112，11=約170(實施例1-12)向裝有溫度計、氮氣加入管、攪拌器和冷凝管的500mL圓底燒瓶中加入15g的在1-11中制得的化合物(p8)、78g的甲苯、禾n12g的乙腈。在被氮氣取代后，將整體在4(TC下溶解，冷卻至25"C，然后加入0.19g的N-甲基嗎啉和0.15g的馬來酰亞胺基丙酸N-羥基琥珀酸酯，接著反應(yīng)5小時。在將反應(yīng)溶液過濾后，向濾液中加入150g的乙酸乙酯和200g的正己烷以析出晶體。另夕卜，向所得晶體中加入9g的乙腈、270g的乙酸乙酯和200g的正己垸以析出晶體。通過過濾收集所得晶體，干燥以獲得14g的下列化合物(p9)。iH-NMR(CDC13,內(nèi)標TMS)5(ppm):3.40-3.80(3,633H,m，國,OC纖O)m纖-,CHO(CH2CH20)mCH2-,CHOfCHzCH^XH^-,-CH20(CH2CH20)n,-OCH2CH，CN,-CH2NHCO),3_38(12H，s,-CH^,2.48(2H,t,-NHCOCH2CH7-),1.75(2H，m,-CH2CH，NHCO),6.70(2H,s,-CH=CH-)。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage51</formula>(p9)111=約112，11=約170(實施例1-13)向裝有溫度計、氮氣加入管、攪拌器和冷凝管的500mL圓底燒瓶中加入15g的在1-11中制得的化合物(p8)、65g的甲苯、0.0015g的2，6-二叔丁基對甲酚和0.15g的乙酸鈉。在被氮氣取代后，將整體在55'C下溶解，然后加入0.33g的戊二酸酐，接著反應(yīng)5小時。另外，向反應(yīng)溶液中加入0.7g的N-羥基琥珀酰亞胺，在冷卻至40。C后加入1.2g的N',N-二環(huán)己基碳化二亞胺，接著反應(yīng)4小時。在將反應(yīng)溶液過濾后，向濾液中加入105g的正己烷以析出晶體。另外，向所得晶體中加入12g的乙腈、110g的乙酸乙酯和80g的正己垸以析出晶體。通過過濾收集所得晶體，干燥以獲得13g的下列化合物(p10)。iH隱NMR(CDC13,內(nèi)標:TMS)5(ppm):3.40-3.80(3,633H,m,-CH20(CH2CH20)mCHr,，0)￡1^-,皿00鹿2陽,-CH20(CH2CH20),-OCH2CH7CN,國C罕HCO)，3.38(12H，s,國CH二),2.7(2H,t,-NHCOCH，CHCH2CO-),2.3(2H,t,-NHCOCH2CH7CH7CO-),2.1(2H,multi,-NHCOCH7CH2CH7CO-),1.75(2H,m，-CH2CH7NHCO),2.85(4H,s，陽纖錢-)。[化學(xué)式34]OCH2CH2CH2-g-NHCH2CH2CH20-CH:，0(CH2CH20)m.CH2H2C-0(CH2CH20)m《H2H2C.O(CH;jCH20)nCH3H60(CH2CH20)n《H3HOO(CH2CH20)nCH3H^'0(CH2CH20)nCH3(plO)m,112，n-約170(實施例l-14)胰島素的修飾使用實施例1-13中獲得的琥珀酰亞胺化合物(plO)來修飾胰島素(由SEROLOGICALSCORPORATIONPN生產(chǎn)，重組人胰島素，Mw5800)。使用0.1N的碳酸鈉緩沖液(pH-9.0)來制備10mg/ml的胰島素緩沖液。在將6.9mg的式(plO)的化合物加入100pi的所述溶液中后，在4。C下反應(yīng)20小時。將全部量的反應(yīng)溶液加入在Q-SepharoseFF(由Amersham生產(chǎn))柱上并用20mM的Tris-HCl緩沖液(pl^8.2)平衡。在平衡后，使通過將NaCl加入緩沖液中至1N而獲得的溶液通過柱，獲得使用(pl0)修飾的胰島素部分，同時通過UV監(jiān)測洗出液。在將20(il的部分和20^的tris-SDS樣品處理液混合后，將混合物在沸水浴中加熱2分鐘30秒，然后使20^的溶液經(jīng)十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(4至20%)分析，這表明胰島素是使用式(pll)修飾的。通過CBB染色法進行染色。(實施例2)多支鏈聚氧化亞烷基衍生物(1A)(R^甲基，AiO、AZ(^氧化亞乙基，n=114，m=85，a=3，并且分子量=約40,000的情況)的合成(實施例2-1)向裝有溫度計、氮氣加入管、攪拌器和底栓的20L燒瓶中加入100g(0.66摩爾)的木糖醇[由WakoPureChemicalIndustries,Ltd.生產(chǎn)]、191.7g的2，2-二甲氧基丙垸和3.74mg的對甲苯磺酸一水合物。鼓入氮氣冒泡，整體加熱至65'C以進行反應(yīng)直至木糖醇溶解。整體加熱至80°C，在微減壓下除去約54g的2,2-二甲氧基丙垸部分，進一步蒸餾以獲得79.4g的下列化合物1,2,3,4-二亞異丙基木糖醇(下文中被稱為DIXY)。1H-NMR(CDC13，內(nèi)標TMS)5(ppm):1.38,1.44(6H,6H,s，C(CH3)2),3.58-3.67(1H，m,CHO-C(CH丄3.78-3.91(2H,m,CH20-C(CHQ,3,96-4.03(1H，m,CHO-C(CH丄4.03-4.09(2H,m，-CH2OH)4.18-4.24(1H,m，CHO-C(CIH(實施例2-2)向裝有溫度計、氮氣加入管和攪拌器的2L四頸燒瓶中加入820.0g(3.53摩爾)的在2-1中制得的化合物DIXY和820.0g的干甲苯。在攪拌下加入氮氣，分批加入16.2g(0.71摩爾)的鈉并使其溶解，從而獲得DIXY鈉產(chǎn)物(DIXY-Na)/甲苯的溶液。DIXY2.15毫摩爾/g，鈉0.43毫摩爾/g。(實施例2-3)向裝有溫度計、氮氣加入管、攪拌器、Dean-stark管和冷凝管的5L四頸燒瓶中加入870g的在1-4中制得的化合物(pl)、3.0kg的甲苯、和0.65g的2，6-二叔丁基對甲酚，然后在攪拌和加入氮氣的同時將整體加熱至6(TC以進行溶解。將所得溶液加熱至ll(TC，使用甲苯除去約250g的餾分作為共沸物，從而除去水分。在冷卻至4(TC后，加入28.8g的三乙胺，然后在30分鐘的時間內(nèi)滴加26.5g的甲磺酰氯，接著在4(TC下反應(yīng)3小時。向其中加入1210g的在2-2中制得的DIXY-Na/甲苯溶液，接著在4(TC下反應(yīng)3小時。向其中加入1.0kg的25重量。/。的氯化鈉溶液，整體在5(TC下攪拌15分鐘。在靜置15分鐘后，除去下層。重復(fù)五次使用水的洗滌步驟。在使用水洗滌后使上層在50°C、微減壓下除去250g的餾分以進行水的除去。另外，加入硫酸鎂并通過攪拌30分鐘來除去水分。將溶液過濾，收集濾液，加入5.0kg的正己垸以進行結(jié)晶。在通過過濾來收集晶體后，使用5.0kg的正己烷洗滌晶體。通過過濾來收集晶體，真空干燥以獲得900g的下列化合物(p12)。'H-雇R(CDC13,內(nèi)標:TMS)S(ppm):4.54(2H,s，-CH2Ph),7.27-7.38(5H,m,-CH逃)，1.37(24H,d,(-O-)，C(-CH!)，)。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage54</formula>(實施例2-4)向裝有溫度計、氮氣加入管、攪拌器和底栓的20L燒瓶中加入750g的在2-3中獲得的化合物(pl2)和13.5kg的離子交換水，加入氮氣使化合物溶解。在避光的條件下，滴加85%的磷酸，使得將pH調(diào)節(jié)至pH為1.80，接著在室溫下反應(yīng)3小時。加入10N的氫氧化鈉水溶液以進行中和，然后加入2.7kg的氯化鈉，使用ION的氫氧化鈉水溶液進一步將pH調(diào)節(jié)為6.0至7.0。使用2.25L的氯仿萃取，在取出下層后，再加入1.5L的氯仿以進行萃取。合并下層，濃縮，將濃縮殘余物溶解于2.5kg的甲苯中。然后，將1.9kg的正己垸加入已經(jīng)濾去不溶性物質(zhì)的濾液中以進行結(jié)晶，在通過過濾收集晶體后，使用1.9kg的正己烷洗滌晶體。通過過濾來收集晶體，真空干燥以獲得708g的下列化合物(pl3)。iH-NMR(CDC13,內(nèi)標:TMS)5(ppm):4.54(2H,s，-CH2Ph),7.27-7.38(5H,m,-CH逃)。He—0《CH2CH20)m-H2c—0(CH2CH20)IHC—OHIH2C—OH(pl3)m,112HHHHSEHoooo99一一一IH2H2I一clclclclcc-cIc(實施例2-5)向裝有溫度計、氮氣加入管、攪拌器、Dean-stark管和冷凝管的5L四頸燒瓶中加入700g的在2-4中制得的化合物(pl3)和2850g的甲苯，然后整體在ll(TC下回流以除去水分。在冷卻至6(TC后，滴加5.30g的28%的甲醇鈉的甲醇溶液，然后在75°C、減壓下除去甲醇。將反應(yīng)溶液加入裝有溫度計、氮氣加入管和攪拌器的5L耐壓容器中，在95°C、減壓下進一步除去甲苯。在將系統(tǒng)的內(nèi)部用氮氣取代后，接著整體加熱至10(TC。然后，在IOO'C至150°C、在lMPa或更低的壓力下分批加入705g的環(huán)氧乙烷，接著連續(xù)進行反應(yīng)另2小時。在取出680g的所得反應(yīng)產(chǎn)物后，在1MPa或更低的壓力下滴加650g的環(huán)氧乙垸，接著連續(xù)進行反應(yīng)另2小時。在冷卻至60'C后，使用85%的磷酸水溶液將pH調(diào)節(jié)至7.5以獲得770g的下列化合物(p14)。1H-NMR(CDC13，內(nèi)標:TMS)5(ppm):4.54(2H,s，-CH2Ph),7.27-7.38(5H，m,-CH逃)。分子量(OHV):40,494(11=約87)。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage56</formula>(pi4)1!1=約112,11=約87(實施例2-6)向裝有溫度計、氮氣加入管、攪拌器、Dean-stark管和冷凝管的500mL四頸燒瓶中加入150g的在2-5中制得的化合物(p14)、640g的甲苯和0.11g的2，6-二叔丁基對甲酚，然后在攪拌和加入氮氣的同時將整體加熱至6(TC以進行溶解。將所得溶液加熱至ll(TC，使用甲苯除去約40g的餾分作為共沸物，從而除去水分。在冷卻至4(TC后，加入5.08g的三乙胺，然后在IO分鐘的時間內(nèi)滴加4.66g的甲磺酰氯，接著在40'C下反應(yīng)3小時。加入18.14g的28%的甲醇鈉的甲醇溶液，接著在4(TC下反應(yīng)3小時。加入1.5kg的25重量％的氯化鈉溶液，整體在5(TC下攪拌15分鐘。在靜置15分鐘后，除去下層。重復(fù)兩次使用水的洗滌步驟。在使用水洗滌后使上層在5CTC、微減壓下除去200g的餾分以進行水的除去。另外，加入硫酸鎂并通過攪拌30分鐘來除去水分。將溶液過濾，收集濾液，加入600g的正己烷以進行結(jié)晶。在通過過濾來收集晶體后，使用600g的正己烷洗滌晶體。通過過濾來收集晶體，真空干燥以獲得120g的下列化合物(p15)。tH-NMR(CDC13，內(nèi)標:TMS)5(ppm):4.54(2H,s,-CH2Ph),7.27-7.38(5H,m，-CH2￡li),3.38(24H，s,-CH2)。[化學(xué)式39]H2C—0(CH2CH20)n—CH3HC—0(CH2CH20)n—CH3—HC—0(CH2CH20>n—CH3H2C—0CH2~^""^H^-0(CH2CH20)n—CH3HC——0(CH2CH20)m—CH2H2C—0(CH2CH20)m—H2HC—0(CH2CH20)n—CH3H(Uo(CH2CH20)n—CH3HC—0(CH2CH20)n—CH3H2C—0(CH2CH20)n—CH3(pi5)m二約112，n二約87(實施例2-7)向裝有溫度計、氮氣加入管、攪拌器和冷凝管的500mL圓底燒瓶中加入120g的在2-6中制得的化合物(pl5)和60g的5%鈀-碳(含水50%的產(chǎn)物)。在被氮氣取代后，加入1.2L的甲醇和200mL的環(huán)己烯，在52'C至55'C降整體加熱和緩慢回流以反應(yīng)3小時。在將反應(yīng)溶液冷卻至室溫后，通過過濾除去鈀-碳，濃縮濾液。然后，加入1.2L的甲苯和1.2L的正己烷以析出晶體。通過過濾收集所得晶體，干燥以獲得112g的下列化合物(p16)。iH-顧R(CDC13,內(nèi)標TMS)S(ppm):3.38(24H，s,-CH^。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage59</formula>向裝有溫度計、氮氣加入管、攪拌器和冷凝管的500mL圓底燒瓶中加入50g的在2-7中制得的化合物(p16)、3.1g的50%的氫氧化鉀水溶液和50g的離子交換水。在被氮氣取代后，將整體溶解并冷卻至l(TC，然后加入50g的丙烯腈，接著反應(yīng)4小時。在使用磷酸中和反應(yīng)溶液后，加入100g的乙酸乙酯以進行萃取和除去雜質(zhì)，然后使用300g的氯仿將目標產(chǎn)物萃取和收集。在將硫酸鎂加入氯仿層中以除去水分，然后通過過濾除去，濃縮濾液。通過加入500mL的乙酸乙酯和500mL的正己烷析出晶體，通過過濾收集所得晶體，干燥以獲得45g的下列化合物(p17)。iH-NMR(CDC13,內(nèi)標TMS)S(ppm):3.38(24H,s,-CH工),2.62(2H,t,-纖CN)。[化學(xué)式41〗H2C—0(CH2CH20)n—CH3HCHD(CH2CH20)n—CH3H(Uo(CH2CH20)n—CH3N三C一CH2CH廣0—CH2HC—0(CH2CH20)n—CH3HC—0(CH2CH20)m—CH2H2C—0(CH2CH20)m—CH2HC—0(CH2CH20)n—CH3HC—0(CH2CH20)n—CH3HC~~0(CH2CH20)「CH3H2C—0(CH2CH20)n—CH3(pi7)111=約112，n^約87(實施例2-9)向裝有溫度計、氮氣加入管和攪拌器的1L耐壓容器中加入30g的在2-8中制得的化合物(p17)、2.7g的Ni催化劑、和545g的甲苯。在被氮氣取代后，將整體在6(TC下溶解，加入氨氣至0.5MPa，加入氫氣至3.5MPa，整體加熱至13(TC，接著反應(yīng)3小時。在冷卻后，通過鼓入氮氣冒泡來使整體脫氣，在將反應(yīng)溶液過濾后，濃縮濾液。通過加入300mL的甲苯和450mL的正己烷來使?jié)饪s液結(jié)晶析出。通過過濾收集所得晶體，干燥以獲得24g的下列化合物(p18)。JH國NMR(D20,內(nèi)標DSS)S(ppm):3.38(24H,s，國CH二),2.80(2H,t-C罕HA1.80(2H，m,-CH2CH7NH7)。[化學(xué)式42]H2C—0(CH2CH20)rCH3HC-0(CH2CH20)n—CH3HC—0(CH2CH20)n—CH3H2N—CH2CH2CH2—0—(pH2HC—0(CH2CH20)n—CH3HC—0(CH2CH20)m—CH2H2C—0(CH2CH20)m—CH2HC—0(CH2CH20)n—CH3HC—0(CH2CH20)n—CH3HC—0(CH2CH20)n—CH3H2C—0(CH2CH20)n—CH3(pi8)111=約112，n^約87(實施例2-10)向裝有溫度計、氮氣加入管、攪拌器和冷凝管的500mL圓底燒瓶中加入15g的在2-9中制得的化合物(p18)、78g的甲苯、和12g的乙腈。在被氮氣取代后，將整體在4(TC下溶解，冷卻至25i:，然后加入0.19g的N-甲基嗎啉和0.15g的馬來酰亞胺基丙酸N-羥基琥珀酸酯，接著反應(yīng)5小時。在將反應(yīng)溶液過濾后，向濾液中加入150g的乙酸乙酯和200g的正己烷以析出晶體。另夕卜，向所得晶體中加入9g的乙腈、270g的乙酸乙酯和200g的正己垸以析出晶體。通過過濾收集所得晶體，干燥以獲得13g的下列化合物(p19)。丄H-麗R(CDC13,內(nèi)標TMS)S(ppm):3.38(24H,s,-CH丄),2.48(2H,t，隱NHC0纖CH2-)，1.75(2H，m，-CH二C腦HCO)，6.70(2H，s，-CH=CH-)0[化學(xué)式43]<formula>formulaseeoriginaldocumentpage62</formula>(實施例2-11)向裝有溫度計、氮氣加入管、攪拌器和冷凝管的500mL圓底燒瓶中加入15g的在2-9中制得的化合物(p18)、65g的甲苯、0.0015g的2，6-二叔丁基對甲酚和0.15g的乙酸鈉。在被氮氣取代后，將整體在55"C下溶解，然后加入0.33g的戊二酸酐，接著反應(yīng)5小時。另外，向反應(yīng)溶液中加入0.7g的N-羥基琥珀酰亞胺，在冷卻至4(TC后加入1.2g的N',N-二環(huán)己基碳化二亞胺，接著反應(yīng)4小時。在將反應(yīng)溶液過濾后，向濾液中加入105g的正己垸以析出晶體。另外，向所得晶體中加入12g的乙腈、110g的乙酸乙酯和80g的正己垸以析出晶體。通過過濾收集所得晶體，干燥以獲得13g的下列化合物(p20)。!H-NMR(CDC13，內(nèi)標TMS)S(ppm):3.38(24H，s,-CH二),2.7(2H,t,-NHCOCH2CH2^CO-)，2.3(2H,t,-NHCO,CH2CH2CO-)，2.1(2H,multi,-NHCOCH,CH丄CH，CO-),1.75(2H,m,-CH2CHrNHCO)，2.85(4H,'CH2CH2CH2—C—N—CH2CH2CH2—O—CH2H^-0(CH2CH20)n—CH3,]1________I—IH—0(CH2CH20)m'丄2H2C—0(CH2CH20)m—CH2'0(CH2CH20)n—CH3HC—0(CH2CH20)「CH3HC_0(CH2CH20)n—CH3H2C_0(CH2CH20)n—CH3(p20)111=約112，n-約87(實施例2-12)胰島素的修飾使用實施例2-11中獲得的琥珀酰亞胺化合物(p20)來修飾胰島素(由SEROLOGICALSCORPORATIONPN生產(chǎn)，重組人胰島素，Mw5800)。使用0.1N的碳酸鈉緩沖液(pH-9.0)來制備10mg/ml的胰島素緩沖液。在將6.9mg的式(p20)的化合物加入100pi的所述溶液中后，在4"下反應(yīng)20小時。將全部量的反應(yīng)溶液加入在Q-SepharoseFF(由Amersham生產(chǎn))柱上并用20mM的Tris-HCl緩沖液&11=8.2)平衡。在平衡后，使通過將NaCl加入緩沖液中至1N而獲得的溶液通過柱，獲得使用(p20)修飾的胰島素部分，同時通過UV監(jiān)測洗出液。在將20nl的部分和20^的tris-SDS樣品處理液混合后，將混合物在沸水浴中加熱2分鐘30秒，然后使20pi的溶液進行十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(4至20%)分析，這表明胰島素是使用式(p20)修飾的。通過CBB染色法進行染色。(粘度的測定)使用實施例1-9中獲得的化合物(p6)和實施例2-7中獲得的化合物(pl6)來進行粘度的測定。作為比較化合物，使用SUNBRIGHTMEH-40T、根據(jù)JP-A-2004-197077的實施例16合成的分子量為40,000的二支鏈PEG。具體而言，按照下列方式進行粘度的測定。使用二甲基亞砜制備各樣品的10%的溶液。將lmL溶液加入到E型粘度計RE-105(由TOKI生產(chǎn))的樣品杯中(其在低溫恒溫水浴中加熱至4(TC)，將杯置于粘度計中，然后測定粘度。結(jié)果列于下表l中。支鏈的數(shù)目粘度(mPa-s)化合物(p6)化合物(pl6)SUNBRIGHTMEH-40T二支鏈PEG423.9818.8157.4250,3由表1清晰可見，由于通過本發(fā)明獲得的化合物可以通過增加支鏈來降低粘度，因此不僅在制備方法中不會產(chǎn)生任何問題，而且在所述化合物用于生物相關(guān)物質(zhì)的修飾時可以預(yù)期可操作性會得到改善。盡管己經(jīng)參照其具體實施方案詳細地說明了本發(fā)明，但對本領(lǐng)域技術(shù)人員而言顯而易見的是，在不背離本發(fā)明的精神和范圍的情況下可進行各種修正和改變。本申請基于2007年2月28日提交的日本專利申請No.2007-50782，其內(nèi)容通過引用的方式并入本文中。此外，所有的參考文獻都全部并入。工業(yè)實用性由于多支鏈聚氧化亞烷基衍生物(1A)具有多支鏈結(jié)構(gòu)，因此所述衍生物可以在保持生物相關(guān)物質(zhì)的活性位點的條件下提供較大的水化層，使得使用所述衍生物修飾的生物相關(guān)物質(zhì)難以降低活性并且可以獲得足夠的藥效。另外，聚氧化亞烷基衍生物可以通過增加支鏈來降低粘度，并且由于在制備方法中不會產(chǎn)生任何問題而可以高純度地制備。另外，通過降低粘度，在用于修飾生物相關(guān)物質(zhì)時的處理變得容易。因此，所述衍生物可明顯用于使用所述生物相關(guān)物質(zhì)作為活性物質(zhì)的藥物。權(quán)利要求1.一種由式(1A)表示的聚氧化亞烷基衍生物其中A1O和A2O獨立地表示具有2至4個碳原子的氧化亞烷基，m表示20至500，n表示15至700，R表示氫原子或具有1至20個碳原子的烴基，X表示能夠與生物相關(guān)物質(zhì)反應(yīng)的官能團，并且a表示1、3或5。2.—種由式(l)表示的聚氧化亞烷基衍生物:-0-(A20)n-R-0-(A20)n-R，0-(A10)m」-0—(A10)m-X」-0-(A20)n-F5-0-(A20)n-R(1)其中A10和A20獨立地表示具有2至4個碳原子的氧化亞烷基，m表示20至500，n表示15至700，R表示氫原子或具有1至20個碳原子的烴基，并且X表示能夠與生物相關(guān)物質(zhì)反應(yīng)的官能團。3.—種生物相關(guān)物質(zhì)，其是通過與所述由式(1A)表示的聚氧化亞垸基衍生物的反應(yīng)而修飾的。4.一種由式(1B)表示的聚氧化亞垸基衍生物-0-(A10)m-0-(A10)X1m-0-(A20)n-R);(1B)-0(A20)n-R)a-0(A20)n-R其中A10和A20獨立地表示具有2至4個碳原子的氧化亞垸基，m表示20至500，n表示15至700，R表示氫原子或具有1至20個碳原子的烴基，乂1表示可被保護的羥基，并且a表示l、3或5。5.—種由式(A)表示的聚氧化亞垸基衍生物X1」-0(A20)n-R-0-(A20)n-R-0-(A10)m」Lo—(A1。)fh~0-(A20)n-K-0-(A20)n-R(A)其中A10和A20獨立地表示具有2至4個碳原子的氧化亞垸基，m表示20至500，n表示15至700，R表示氫原子或具有1至20個碳原子的烴基，并且Xi表示可被保護的羥基。全文摘要本發(fā)明的目的是提供一種新型多支鏈聚氧化亞烷基衍生物和制備該多支鏈聚氧化亞烷基衍生物的中間體。具體而言，本發(fā)明的目的是提供多支鏈聚氧化亞烷基衍生物，其可以保持使用多支鏈聚氧化亞烷基衍生物修飾的生物相關(guān)物質(zhì)的高活性，并且可以容易地制備所述修飾的物質(zhì)；所述多支鏈聚氧化亞烷基衍生物的中間體；以及結(jié)合所述多支鏈聚氧化亞烷基衍生物的生物相關(guān)物質(zhì)。根據(jù)本發(fā)明的新型多支鏈聚氧化亞烷基衍生物是具有能夠與生物相關(guān)物質(zhì)反應(yīng)的官能團的聚氧化亞烷基衍生物(1)，并且根據(jù)本發(fā)明的生物相關(guān)物質(zhì)具有通過與上述聚氧化亞烷基衍生物(1)反應(yīng)而修飾的結(jié)構(gòu)。此外，根據(jù)本發(fā)明的制備新型多支鏈聚氧化亞烷基衍生物的中間體為聚氧化亞烷基衍生物(A)。其中A¹O和A²O獨立地表示具有2至4個碳原子的氧化亞烷基，m表示20至500，n表示15至700，R表示氫原子或具有1至20個碳原子的烴基，X表示能夠與生物相關(guān)物質(zhì)反應(yīng)的官能團，以及X¹表示可被保護的羥基。文檔編號C08G65/329GK101622295SQ20088000632公開日2010年1月6日申請日期2008年2月28日優(yōu)先權(quán)日2007年2月28日發(fā)明者吉岡宏樹,坂上研二,城崎智洋申請人:日油株式會社