專利名稱：從發(fā)酵法生產(chǎn)衣康酸產(chǎn)生的土曲霉廢菌絲體中提取殼聚糖的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及到一種提取殼聚糖的方法，尤其涉及到利用衣康酸發(fā)酵產(chǎn)生的土曲霉廢菌 絲體提取殼聚糖的方法，屬于工業(yè)廢棄物資源化利用技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
衣康酸(Itaconicacid)又稱為甲叉丁二酸、亞甲基琥珀酸，衣康酸及其酯類是生產(chǎn)腈 綸等化纖、合成樹脂、塑料、橡膠、藥物、表面活性劑、無毒食品包裝材料、除草劑、乳 膠、除垢劑、粘合劑等的重要工業(yè)原料，是一種應(yīng)用前景十分廣闊的化學(xué)合成中間體,廣泛 應(yīng)用于化工、醫(yī)藥、造紙、紡織、印刷等領(lǐng)域。
衣康酸生產(chǎn)方法主要有發(fā)酵法和化學(xué)合成法，參見劉建軍，衣康酸發(fā)酵的研究[P]，天 津科技大學(xué)博士論文，2003。發(fā)酵法原料來源豐富、生產(chǎn)條件溫和、易于控制、產(chǎn)品成本相 對較低，在經(jīng)濟(jì)上占有一定優(yōu)勢，因此，國際上多采用該方法；化學(xué)合成法又根據(jù)采用的 原料不同，主要分為檸檬酸合成法和石油化工產(chǎn)品合成法，由于化學(xué)合成法存在許多不足， 到目前為止這一工藝方法尚沒有應(yīng)用于衣康酸的工業(yè)化生產(chǎn)。
發(fā)酵法生產(chǎn)衣康酸是以糖類為主要原料，補(bǔ)充適當(dāng)?shù)牡春蜔o機(jī)鹽，控制適宜的溫度 等條件，利用衣康酸生產(chǎn)菌種土曲霉轉(zhuǎn)化葡萄糖生成衣康酸，發(fā)酵液經(jīng)除雜、提取、精制 等工序制備成品衣康酸。我國發(fā)酵法生產(chǎn)衣康酸是在上世紀(jì)末才研究成功的新技術(shù)，在衣 康酸發(fā)酵過程中，土曲霉的繁殖、菌絲體的積累是衣康酸發(fā)酵生產(chǎn)必需的，但發(fā)酵結(jié)束后 形成的土曲霉廢菌絲體的處理技術(shù)一直是人們關(guān)注的問題，尤其是環(huán)境友好意識以及資源 利用意識的加強(qiáng)，工業(yè)廢棄物資源化利用技術(shù)的研究已引起廣泛重視。
廢菌絲體作為發(fā)酵行業(yè)的主要固體廢渣，數(shù)量巨大。早期的處理方案主要是直接作為 飼料、鍋爐焚燒或丟棄，由于多數(shù)廢菌絲體成分復(fù)雜、具有異味、適口性差，直接作為飼 料效果不好，鍋爐焚燒或丟棄造成了資源浪費和環(huán)境污染。而廢菌絲體中含有多種有用的 成分，進(jìn)行有效的分離，可以提高其附加值，廢菌絲體的資源化利用技術(shù)在檸檬酸、啤酒 行業(yè)等行業(yè)的研究參見曹健，黑曲霉幾丁質(zhì)和殼聚糖的研究[M].微生物學(xué)通報，1995， 22 (4): 200-203.和陳忻等，用絲狀真菌制備殼聚糖的研究[M].精細(xì)化工，2000， 3: 133-135， 和李浪等，從檸檬酸生產(chǎn)廢渣中提取殼聚糖的研究[M].糧食流通技術(shù)，2004,1: 40-42。
幾丁質(zhì)是N-乙酰-D-葡萄糖胺以e-i， 4糖苷鍵連接起來的直鏈多聚物，又稱甲殼質(zhì)
或甲殼素，幾丁質(zhì)在自然界的儲量位居第二，僅次于纖維素，幾丁質(zhì)是白色或灰白色無定 型、半透明固體，不溶于水、稀酸、稀堿、濃堿和一般有機(jī)溶劑，可溶于濃鹽酸、硫酸、 磷酸和無水甲酸。無論是天然存在的幾丁質(zhì)還是人工制備的幾丁質(zhì)，并不是每個糖基上都 有N-乙?；?，幾丁質(zhì)分子中糖基與N-乙?；Y(jié)合的程度以N-乙酰度表示，通常，N-乙酰度 低于55%稱為殼聚糖，N-乙酰度大于55%稱為幾丁質(zhì)，參見MuzzarelliR.A.A. Chitin[M],Oxford:Perga-monPree， 1977。殼聚糖由于分子內(nèi)含有活潑的羥基和氨基等基團(tuán)，可發(fā)生多種化學(xué)反應(yīng)，并具有很好的生物相容性、吸濕性、吸附性、成膜性和保濕性， 無毒、易生物降解，在醫(yī)藥、農(nóng)業(yè)、環(huán)保、紡織、印染、造紙、生物發(fā)酵等領(lǐng)域具有廣泛 的用途,參見蘇海佳等，交聯(lián)菌絲體吸附劑的制備及其對Cr"的吸附性[M].環(huán)境污染治理技 術(shù)與設(shè)備2005， 8: 10-13。幾丁質(zhì)廣泛存在于海洋節(jié)肢動物(如蟲下、蟹)的甲殼和植物、
某些微生物的細(xì)胞壁中，如絲狀真菌中的黑曲霉、土曲霉等。目前殼聚糖主要從蝦、蟹殼 中提取得到，市場價格非常昂貴。
衣康酸發(fā)酵產(chǎn)生的土曲霉菌絲體是衣康酸生產(chǎn)中主要的固體廢渣，板框壓搾的濕渣占
總發(fā)酵液的2% (W/V)，含水50%左右。由于廢菌絲體中含有少量殘留衣康酸，適口性差， 不能直接作為動物飼料，目前衣康酸工廠所采用的主要處理方式是鍋爐燒掉或空場堆放， 待風(fēng)干后集中填埋，由于菌體自溶并產(chǎn)生惡臭，尤其是夏季，環(huán)境污染嚴(yán)重。土曲霉屬于 真菌類，菌體細(xì)胞壁的主要成分是殼聚糖或幾丁質(zhì)，約占菌體干重的20%左右。以土曲霉衣 康酸發(fā)酵廢菌絲體為原料提取生產(chǎn)殼聚糖，不但為工業(yè)廢水處理提供高效絮凝劑，為醫(yī)藥、 食品和化工行業(yè)提供重要的原料，而且還為衣康酸發(fā)酵工廠解決固體廢渣的污染，變廢為 寶，實現(xiàn)循環(huán)經(jīng)濟(jì)開辟了一條新途徑，具有重要的社會效益、經(jīng)濟(jì)效益和環(huán)境效益。

發(fā)明內(nèi)容
為實現(xiàn)衣康酸發(fā)酵中產(chǎn)生的土曲霉廢菌絲體的資源化利用，提高其利用價值，減少污 染，本發(fā)明提供一種利用土曲霉廢菌絲體提取殼聚糖的方法。本發(fā)明方法可以實現(xiàn)從土曲 霉衣康酸發(fā)酵廢菌體提取殼聚糖，殼聚糖提取率達(dá)到12%以上(相對干菌絲體計)。
本發(fā)明所述利用土曲霉廢菌絲體提取殼聚糖，步驟如下 (1)衣康酸發(fā)酵土曲霉廢菌體的預(yù)處理
衣康酸發(fā)酵產(chǎn)生的土曲霉廢菌體除菌絲體外，含有許多其他成分，吸附了殘留的培養(yǎng) 基以及代謝產(chǎn)物、菌絲自溶物、色素、無機(jī)鹽等，在用于提取殼聚糖以前，必須進(jìn)行預(yù)處 理，預(yù)處理的目的主要是去除上述雜質(zhì)組分。
預(yù)處理方法是將含水率10%以下的土曲霉廢菌絲體與10 30g/L的鹽酸按1: 4 8 的質(zhì)量比均勻混合，溫度3(TC、浸泡時間2-3小時，期間每隔30分鐘攪拌5分鐘。然后過 濾回收菌絲體，水洗至pH值中性，60°0干燥至水分10%以下。
(2) 衣康酸發(fā)酵土曲霉廢菌絲體蛋白的去除 土曲霉衣康酸發(fā)酵廢菌體中蛋白質(zhì)的比例大，蛋白質(zhì)含量達(dá)44-50%，菌體蛋白的存在
對殼聚糖的提取影響很大，將步驟(1)獲得的預(yù)處理后的干菌絲體用于提取殼聚糖以前， 必須盡可能的除去其中的蛋白質(zhì)。
土曲霉廢菌絲體蛋白的去除方法是將步驟(1)獲得的預(yù)處理后的干菌絲體與30 50g/L的氫氧化鈉溶液混合均勻，NaOH溶液與干菌絲體的質(zhì)量比為30 40: 1，溫度控制在 90 95°C，反應(yīng)時間為8-9小時。然后，過濾回收濾餅，水洗濾餅至pH值中性，60'C干燥 至水分10%以下，蛋白去除率在85%以上。得干濾餅。
(3) 殼聚糖粗品的制備
步驟(2)獲得的脫蛋白以后的土曲霉菌絲體的成分主要是幾丁質(zhì)，及非甲殼素糖類雜質(zhì)，而脫乙酰度大于55%的幾丁質(zhì)才稱為殼聚糖，需要對其中的幾丁質(zhì)進(jìn)行脫乙酰，制備殼 聚糖粗品。具體方法如下-
將步驟(2)制得的干濾餅與30 50g/L的鹽酸溶液按1: 5 10的質(zhì)量比混合均勻， 溫度控制在60-62°C，浸泡5-6小時，期間每隔30分鐘攪拌5分鐘。4000r/min、離心15 分鐘回收沉淀，水洗至中性，6CTC干燥至水分1(B以下即為殼聚糖粗品，脫乙酰度80%以上。 (4)殼聚糖的精制
步驟(3)獲得的殼聚糖粗品除含有殼聚糖外，還含有部分非甲殼素糖類、核酸等雜質(zhì)， 要獲得精制的殼聚糖產(chǎn)品，必須對殼聚糖粗品進(jìn)行精制，精制方法是
將步驟(3)獲得的殼聚糖粗品與40g/L的氫氧化鈉溶液按1: 5的質(zhì)量比混合均勻， 18-22。C攪拌30-35分鐘，4000r/min、離心15分鐘回收沉淀，水洗至中性。然后，分別用 10倍體積的95%的乙醇和丙酮分別洗滌，回收濾餅，25-6(TC干燥，制得精品殼寡糖。
本發(fā)明方法的殼聚糖提取率達(dá)到12%以上(相對干菌絲體)，得到的殼聚糖樣品經(jīng)紅外 線法鑒定，與標(biāo)準(zhǔn)殼聚糖結(jié)構(gòu)一致。
上述步驟(l)所述的鹽酸濃度優(yōu)選20g/L， 土曲霉廢菌絲體與鹽酸質(zhì)量比優(yōu)選l: 5。
上述步驟(2)所述的氫氧化鈉溶液濃度優(yōu)選40g/L， NaOH溶液與干菌絲體的質(zhì)量比 優(yōu)選l: 4，浸泡溫度控制優(yōu)選92r。
上述步驟(3)所述的鹽酸濃度優(yōu)選40g/L，干濾餅與鹽酸溶液質(zhì)量比優(yōu)選l: 8。
上述的廢菌絲體蛋白的測定采用GB/T14771—93微量凱氏定氮法。
上述的廢菌絲體粗脂肪的測定采用索氏抽提法(GB 5512-85)。
上述的廢菌絲體灰分按下述的方法測定
將稱得的樣品，先在電爐上燒至無煙，再放進(jìn)馬福爐中550攝氏度灼燒2至4h， 直至恒重(兩次稱重之差不大于0.2毫克)。
上述的廢菌體粗纖維的測定采用GB/T5009. 10-2003中的方法。
上述的殼聚糖提取率按下述的方法計算 『
y = cto畫"100%
ry
式中Kw^聚糖提取率(％) /^,_一殼聚糖重量(g) % 一干菌體重量(g)
上述的脫乙酰度(DD)按下述方法測定 雙突躍電位滴定法參閱參考文獻(xiàn)[賈之慎,李奇彪.雙突躍電位滴定法測定殼聚糖脫
乙酰度.化學(xué)世界，2001, (5) :240-241]。
原理殼聚糖胺基呈游離態(tài)，屬伯胺，具有陽離子性質(zhì)，可與酸定量地發(fā)生質(zhì)子化，
形成殼聚糖的膠體溶液，溶液中過量的酸，可以用堿液進(jìn)行反滴，這樣，通過溶解殼聚糖樣品的酸量與滴定用去的堿量之差，就可推算出與殼聚糖中自由氨基結(jié)合的酸的量，即樣 品殼聚糖中自由氨基的量。雙突躍電位滴定法是以溶液的pH值對NaOH標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定體積 作圖，即得到酸堿滴定曲線，做pH值對V,的一級微商曲線，得到雙突躍滴定曲線，通過 兩突躍點之間消耗NaOH標(biāo)準(zhǔn)溶液的差值可以計算出殼聚糖樣品的脫乙酰度。
考慮到殼聚糖制備過程中可能殘留的酸堿會對結(jié)果造成一定的影響，將殼聚糖樣品預(yù)先 裝柱，水洗至中性，置于105'C烘箱中烘至恒重后，放入干燥器中。
步驟精密稱取約0.2克樣品(三份，分別為樣品1、樣品2、樣品3)，置于250mL 三角燒瓶或燒杯中，加入O. lmol/L的標(biāo)準(zhǔn)鹽酸溶液25.00mL，于室溫下用磁力攪拌器攪拌 至完全溶解，加入蒸餾水20.00 mL，作為待測樣品溶液。
用0. lraol/L的標(biāo)準(zhǔn)NaOH溶液進(jìn)行滴定(慢滴，磁力攪拌)，每滴加約0. 50mLNaOH標(biāo)準(zhǔn) 溶液，記下體積V及相應(yīng)pH值，直至pH〉10，以溶液的pH值對NaOH滴定體積作圖，得酸 堿滴定曲線，以ApH對AV做一級微商曲線，即得雙突躍滴定曲線，由兩突躍點之差就可 計算出樣品的脫乙酰度。
計算公式由殼聚糖脫乙酰度的定義(分子中脫除乙?；逆溄Y(jié)數(shù)與總鏈結(jié)數(shù)的百分 比)可知
T^oz、 一 n n 203 n DD(%) -~r X100%=-X100%=-x脇
N , W-161n 綱2n 式(1)
n = C2 (V2-V3) /1000
根據(jù)不同的終點判定方式選擇不同的公式
氨基質(zhì)量分?jǐn)?shù)為
式(2)
<formula>formula see original document page 6</formula>
式(3)
所以，殼聚糖脫乙酰度也可用氨基質(zhì)量分?jǐn)?shù)表示為:
<formula>formula see original document page 6</formula>
式(4)
式中
W-殼聚糖樣品的質(zhì)量，g (以干基計)； W,2—氨基質(zhì)量分?jǐn)?shù)％n_W g殼聚糖樣品中氨基葡萄糖殘基的物質(zhì)的量，mol;
N- W g殼聚糖樣品中N-乙酰氨基葡萄糖殘基的物質(zhì)的量，mol;
C「標(biāo)準(zhǔn)HC1溶液的濃度，mol/L;
C2-標(biāo)準(zhǔn)Na0H溶液的濃度，mol/L;
V「溶解樣品時所加的標(biāo)準(zhǔn)HC1溶液的體積，mL;
V2-到達(dá)滴定終點時所消耗標(biāo)準(zhǔn)NaOH溶液的體積，mL;
V3-出現(xiàn)第一突變點時消耗標(biāo)準(zhǔn)NaOH溶液的體積，mL;
203-N-乙酰氨基葡萄糖殘基的相對分子量；
161-氨基葡萄糖殘基的相對分子量；
16-氨基的相對分子量。
殼聚糖產(chǎn)品用途廣泛，市場前景廣闊，本發(fā)明以衣康酸發(fā)酵產(chǎn)生的土曲霉廢菌絲體為 原料提取殼聚糖，提取率達(dá)到12%以上(相對干菌體)，提高了土曲霉廢菌絲體的利用價值， 減少了污染，具有良好的推廣應(yīng)用前景。目前尚未檢索到利用衣康酸發(fā)酵產(chǎn)生的土曲霉廢 菌絲體為原料提取殼聚糖的文獻(xiàn)報道。


圖1是本發(fā)明實施例1得到的殼聚糖樣品紅外光譜圖，圖2為標(biāo)準(zhǔn)商品殼聚糖紅外光 譜圖。
具體實施例方式
以下實施例中使用的原料廢菌絲體為青島瑯琊臺集團(tuán)股份有限公司生產(chǎn)衣康酸過程 中產(chǎn)生的風(fēng)干的土曲霉廢菌絲體，主要成分組成(干)蛋白質(zhì)44-50%，粗纖維30-35°/0， 粗脂肪4-5%，灰分2-4%。 實施例1
(1) 衣康酸發(fā)酵土曲霉廢菌體的預(yù)處理
稱取水分含量9.8W的土曲霉廢菌體10Kg，置于帶有多孔假底的不銹鋼抽濾罐中(假底 孔的直徑為2咖，開孔率為40%)，加入50U 20g/L的鹽酸，攪拌均勻，控制溫度3(TC，每 30分鐘攪拌5分鐘，浸泡2小時后，利用菌體形成的濾層自然過濾回收菌體，自來水洗漆 上述菌體至pH值中性，抽濾至水分含量在60%左右，6(TC滾筒干燥至水分10%以下。土曲 霉廢菌體的預(yù)處理后，由紅褐色變?yōu)槿榘咨ㄟ^預(yù)處理，獲得乳白色菌體8.45Kg,水分含 量8. 4%，菌體損失率8. 58%。
(2) 衣康酸發(fā)酵土曲霉廢菌體蛋白的去除
將步驟(1)獲得的乳白色菌體8.45Kg,置于帶有多孔假底的不銹鋼抽濾罐中，(假底 孔的直徑為2mm,開孔率為40%)，加入38L、 40g/L的氫氧化鈉溶液，混合均勻，溫度控制 在92"C，每30分鐘攪拌5分鐘，浸泡3小時。然后，抽濾回收濾餅，自來水洗滌至pH值 中性，6(TC滾筒干燥至水分10%以下。獲得脫蛋白菌體4. 84Kg,水分8. 8%，蛋白含量8. 47%， 菌體蛋白含量由47.8(F。減少到8.47%，菌體蛋白脫除率為89.92%。
(3) 殼聚糖粗制品的制備
7將步驟(2)的干菌絲濾餅4. 84Kg與50L、 40g/L的鹽酸溶液混合均勻，溫度控制在60 °C，浸泡5小時，期間每30分鐘攪拌5分鐘。4000r/min、離心15分鐘回收沉淀，水洗至 中性，6(TC干燥，獲得殼聚糖粗品2. 24Kg，水分9.4%。 (4)殼聚糖的精制
將獲得的殼聚糖粗品2.24Kg與40g/L的氫氧化鈉溶液按l: 5的比例，混合均勻2(TC 攪拌30分鐘，4000r/min、離心15分鐘回收沉淀，水洗至中性。然后，分別用10倍的95% 的乙醇和丙酮洗滌，回收濾餅，6(TC干燥，獲得精制殼寡糖1. 32Kg，水分9. 1%。殼聚糖提 取率達(dá)到13. 3% (相對千菌絲體計)，脫乙酰度84. 5%。 實施例2.
(1) 衣康酸發(fā)酵土曲霉廢菌體的預(yù)處理
稱取水分含量8. 1%的土曲霉廢菌體5Kg，置于帶有多孔假底的不銹鋼抽濾罐中(假底 孔的直徑為2mm,開孔率為40%)，加入IOL、 20g/L的鹽酸，攪拌均勻，控制溫度35'C，每 30分鐘攪拌一次，2小時后，利用菌體形成的濾層自然過濾回收菌體，水洗上述菌體至pH 值中性，抽濾至干，6(TC干燥箱烘干2小時，獲得乳白色菌體4.05Kg,水分含量7.5y。，菌 體損失率18. 5%。
(2) 衣康酸發(fā)酵土曲霉廢菌體蛋白的去除
將步驟(l)獲得的菌體，置于帶有多孔假底的不銹鋼抽濾罐中，(假底孔的直徑為2mm， 開孔率為40%)，加入l札、40g/L的氫氧化鈉溶液，混合均勻，溫度控制在95'C以上，連 續(xù)攪拌30分鐘后，浸泡2小時。真空抽濾并回收濾餅，自來水洗滌至pH值中性，獲得脫 蛋白菌體2. 74Kg,水分20. 8%，菌體蛋白含量由45. 60%減少到7. 47%。
(3) 殼聚糖粗制品的制備
將步驟(2)的菌絲濾餅與18L、 40g/L的鹽酸溶液混合均勻，溫度控制在55'C，浸泡 6小時，4000r/min、離心15分鐘回收沉淀，水洗至中性，6(TC干燥，獲得殼聚糖粗品1. 04Kg， 水分7. 4%。 (4)殼聚糖的精制
將步驟(3)獲得的殼聚糖粗品與40g/L的氫氧化鈉溶液按l: 5的比例，混合均勻2(TC攪 拌30分鐘，4000r/min、離心15分鐘回收沉淀，水洗至中性。然后，分別用10倍的95% 的乙醇和丙酮洗滌，回收濾餅，60'C干燥，獲得精制殼寡糖0.58Kg，水分8.4%。殼聚糖提 取率達(dá)到12% (相對干菌絲體計)，脫乙酰度86. 1%。
權(quán)利要求
1、利用土曲霉廢菌絲體提取殼聚糖的方法，步驟如下(1)將含水率10％以下的土曲霉廢菌絲體與10～30g/L的鹽酸按1∶4～8的質(zhì)量比均勻混合，溫度30℃、浸泡時間2-3小時，期間每隔30分鐘攪拌5分鐘；然后過濾回收菌絲體，水洗至pH值中性，60℃干燥至水分10％以下；(2)將步驟(1)制得的干菌絲體與30～50g/L的氫氧化鈉溶液混合均勻，NaOH溶液與干菌絲體的質(zhì)量比為30～40∶1，溫度控制在90～95℃，反應(yīng)時間為8-9小時，去除蛋白；然后，過濾回收濾餅，水洗濾餅至pH值中性，60℃干燥至水分10％以下，得干濾餅；(3)將步驟(2)制得的干濾餅與30～50g/L的鹽酸溶液按1∶5～10的質(zhì)量比混合均勻，溫度控制在60-62℃，浸泡5-6小時，期間每隔30分鐘攪拌5分鐘。4000r/min、離心15分鐘回收沉淀，水洗至中性，60℃干燥至水分10％以下即為殼聚糖粗品；(4)將步驟(3)獲得的殼聚糖粗品與40g/L的氫氧化鈉溶液按1∶5的質(zhì)量比混合均勻，18-22℃攪拌30-35分鐘，4000r/min、離心15分鐘回收沉淀，水洗至中性；然后，分別用10倍體積的95％的乙醇和丙酮分別洗滌，回收濾餅，25-60℃干燥，制得精品殼聚糖。
2、 如權(quán)利要求1所述的利用土曲霉廢菌絲體提取殼聚糖的方法，其特征在于步驟(1) 所述的鹽酸為優(yōu)選20g/L。
3、 如權(quán)利要求1所述的利用土曲霉廢菌絲體提取殼聚糖的方法，其特征在于步驟(l) 所述的土曲霉廢菌絲體與鹽酸質(zhì)量比為1: 5。
4、 如權(quán)利要求1所述的利用土曲霉廢菌絲體提取殼聚糖的方法，其特征在于步驟(2) 所述的氫氧化鈉溶液濃度為40g/L，氫氧化鈉溶液與干菌絲體的質(zhì)量比為1: 4，浸泡溫 度控制在92'C。
5、 如權(quán)利要求1所述的利用土曲霉廢菌絲體提取殼聚糖的方法，其特征在于步驟(3) 所述的鹽酸濃度為40g/L，干濾餅與鹽酸溶液質(zhì)量比為1: 8。
全文摘要
本發(fā)明涉及從發(fā)酵法生產(chǎn)衣康酸產(chǎn)生的土曲霉廢菌絲體中提取殼聚糖的方法，將土曲霉廢菌絲體與鹽酸混合、浸泡、過濾回收菌絲體，干燥；再與氫氧化鈉溶液混勻，溫度90～95℃反應(yīng)8-9小時，過濾回收濾餅、干燥，制得的干濾餅與鹽酸溶液按比例混勻，60-62℃浸泡5-6小時，離心回收沉淀，干燥即為殼聚糖粗品，殼聚糖粗品與氫氧化鈉溶液按1∶5的質(zhì)量比混勻，18-22℃攪拌30-35分鐘，離心回收沉淀，洗滌，干燥得精品殼聚糖。殼聚糖產(chǎn)品用途廣泛，本發(fā)明以衣康酸發(fā)酵產(chǎn)生的土曲霉廢菌絲體為原料提取殼聚糖，提取率達(dá)到12％以上，減少了污染。
文檔編號C08B37/00GK101538335SQ20091002030
公開日2009年9月23日 申請日期2009年4月7日 優(yōu)先權(quán)日2009年4月7日
發(fā)明者劉建軍, 李丕武 申請人:山東輕工業(yè)學(xué)院