專(zhuān)利名稱(chēng)：一種具有梯度結(jié)構(gòu)的細(xì)菌纖維素膜及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種具有梯度結(jié)構(gòu)的細(xì)菌纖維素膜及其制備方法，特別是涉及一種上表面致密向下連續(xù)過(guò)渡之疏松下表面的細(xì)菌纖維素膜及其制備方法。
背景技術(shù)：
細(xì)菌 纖維素(Bacterial Cellulose，也稱(chēng)微生物纖維素)是一種納米纖維材料。其以細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)部作為生物合成反應(yīng)器，將葡萄糖小分子在酶催化作用下經(jīng)過(guò)一系列復(fù)雜的變構(gòu)過(guò)程最終通過(guò)β -1, 4-糖苷鍵結(jié)合形成β -1, 4-葡萄糖鏈由細(xì)菌系細(xì)胞側(cè)面的催化位點(diǎn)擠出。β -1, 4-葡萄糖鏈彼此之間通過(guò)分子內(nèi)與分子間氫鍵作用，逐步、分層地形成脂多糖層、類(lèi)晶團(tuán)聚體、纖維素微纖并最終形成纖維素。這一系列的細(xì)胞外(Extracellular)成形過(guò)程被稱(chēng)為“纖維素的自組裝”。正是這個(gè)獨(dú)特的微生物參與的過(guò)程賦予了細(xì)菌纖維素良好的理化性能:超細(xì)三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)；良好的吸濕、保濕以及透氣性能；超高的持水性與濕態(tài)強(qiáng)度；高抗張強(qiáng)度與彈性模量等等。大量研究表明細(xì)菌纖維素材料具有良好的體內(nèi)、體外生物相容性，加上其優(yōu)異的形狀可調(diào)控性與形狀維持性使其在食品，造紙，音像制品以及生物醫(yī)用領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用。革蘭氏陰性的葡糖醋桿菌的賴(lài)氧特性決定了 BC在靜態(tài)培養(yǎng)過(guò)程中形成于培養(yǎng)液表面。由于纖維素膜上下表面氧氣濃度的差異導(dǎo)致BC具有原位成形(in situ modability)的梯度結(jié)構(gòu)(上表面致密向下逐漸過(guò)渡至疏松，多孔)。BC天然形成的梯度結(jié)構(gòu)在形貌上與人體皮膚致密的表皮層、疏松的真皮層與皮下組織十分相似。令人遺憾的是，這種獨(dú)特的仿生構(gòu)造無(wú)法實(shí)現(xiàn)可控地構(gòu)筑。研究人員通過(guò)在靜置培養(yǎng)階段添加陽(yáng)離子淀粉(2-羥基-3-三甲基銨氯化丙基淀粉，TMAP淀粉，質(zhì)量體積比2%)，由于陽(yáng)離子淀粉中側(cè)基的空間位阻以及電荷排斥作用大大影響了纖維素微纖之間與絲束之間氫鍵結(jié)合，因此得到的BC存在著明顯分層的致密部分與疏松部分且致密層厚度較薄。進(jìn)一步的研究發(fā)現(xiàn)，添加淀粉后得到復(fù)合材料結(jié)晶度下降，同時(shí)淀粉主要覆蓋于纖維素表面且分布極不均勻，淀粉顆粒團(tuán)聚現(xiàn)象嚴(yán)重?，F(xiàn)有技術(shù)通過(guò)向發(fā)酵培養(yǎng)液中添加淀粉使BC出現(xiàn)明顯的致密與疏松分層現(xiàn)象，但是存在的問(wèn)題是:淀粉構(gòu)筑梯度結(jié)構(gòu)的作用機(jī)理不明確；梯度結(jié)構(gòu)中致密層較薄且無(wú)法調(diào)節(jié)致密層與疏松層之間的比例，致密層與疏松層之間存在著明顯的分層，影響材料的力學(xué)性能；淀粉在復(fù)合材料中分散均勻性較差且主要覆蓋于纖維素表面。利用微生物的生物代謝過(guò)程制備纖維素，由于其原材料來(lái)源天然，制備過(guò)程溫和以及最終產(chǎn)物綠色環(huán)保且能夠自然降解吸引了眾多研究者的關(guān)注。細(xì)菌纖維素逐步層次化的細(xì)胞外自組裝(self-assembly)過(guò)程使材料在成形過(guò)程中具有極強(qiáng)的結(jié)構(gòu)可調(diào)控性。

發(fā)明內(nèi)容
針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)存在的不足之處，本發(fā)明在靜置發(fā)酵培養(yǎng)之前，向發(fā)酵培養(yǎng)液中先添加作物淀粉，加熱使其完全糊化且均勻分散于培養(yǎng)液中后，再加入增稠劑。接入菌種后，進(jìn)入靜態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)階段時(shí)，利用作物淀粉糊化后形成的溶膠-凝膠多相體系，增加發(fā)酵培養(yǎng)液粘度，降低培養(yǎng)液中的溶氧指數(shù)，使BC由致密的上表面向下連續(xù)過(guò)渡至疏松的下表面，無(wú)明顯物理分層使。利用增稠劑中支鏈型大分子的空間位阻效應(yīng)，阻礙由微生物代謝糖源形成的纖維素微纖絲之間的氫鍵結(jié)合過(guò)程，使BC內(nèi)部無(wú)定形區(qū)面積增加，在保證材料力學(xué)性能的前提下，適當(dāng)降低材料的結(jié)晶度，提高材料的液體吸收性以及柔軟程度；同時(shí)，通過(guò)調(diào)節(jié)作物淀粉與增稠劑之間的質(zhì)量比，能夠有效地改變復(fù)合材料中致密區(qū)域與疏松區(qū)域之間的比例，從而能夠快速簡(jiǎn)便地制備出具有上層致密向下逐漸過(guò)渡到疏松的仿生梯度結(jié)構(gòu)并且復(fù)合材料具有較強(qiáng)的結(jié)構(gòu)可設(shè)計(jì)性。本發(fā)明的一種具有梯度結(jié)構(gòu)的細(xì)菌纖維素膜的制備方法，包括以下步驟:I)發(fā)酵培養(yǎng)液的調(diào)配；培養(yǎng)液組分，以質(zhì)量百分?jǐn)?shù)計(jì)，單位為wt%:葡萄糖、果糖、蔗糖或甘露醇2 5，蛋白胨0.05 0.5，酵母膏0.05 0.5，檸檬酸0.01 0.1，磷酸氫二鈉0.02 0.2，磷酸二氫鉀0.01 0.1，增稠劑0.1 I ;作物淀粉0.1 I ;其中，所述增稠劑與所述作物淀粉質(zhì)量比為1:1.2 1.5 ;培養(yǎng)液的pH為4.0 6.0 ;將培養(yǎng)液加熱至50 80°C范圍內(nèi)，使增稠劑溶解并均勻分散于培養(yǎng)液中，同時(shí)使作物淀粉產(chǎn)生糊化且 均勻分散于培養(yǎng)液中，經(jīng)過(guò)高壓蒸汽滅菌后紫外輻照并冷卻至室溫，通純氧，即得發(fā)酵培養(yǎng)液；2)菌種擴(kuò)培；將所述的發(fā)酵培養(yǎng)液接種和擴(kuò)培；擴(kuò)培程度:葡糖醋桿菌細(xì)胞數(shù)目在2X IO5 2 X IO7 個(gè)/ml ；3)靜置培養(yǎng)；將擴(kuò)培后的菌液轉(zhuǎn)移至裝有發(fā)酵培養(yǎng)液的培養(yǎng)容器中，放置于恒溫培養(yǎng)箱中，28 32°C靜置培養(yǎng)；當(dāng)細(xì)菌纖維素膜厚度達(dá)到3 5_時(shí)，將其取出，即得到具備梯度結(jié)構(gòu)的細(xì)菌纖維素薄膜；4)后處理；靜置培養(yǎng)結(jié)束后，將上述的具備梯度結(jié)構(gòu)的細(xì)菌纖維素薄膜浸泡至濃度為I 10wt%的氫氧化鈉溶液中，煮沸保持2 10小時(shí)，用純凈水清洗至pH為7.0，材料內(nèi)毒素〈0.5EU/ml，再將處理后的細(xì)菌纖維素薄膜高壓滅菌并包裝低溫封存，即為具備梯度結(jié)構(gòu)的細(xì)菌纖維素膜。作為優(yōu)選的技術(shù)方案:如上所述的一種具有梯度結(jié)構(gòu)的細(xì)菌纖維素膜的制備方法，所述的增稠劑是指甲基纖維素、羧甲基纖維素、果膠、瓊脂、卡拉膠或黃原膠；所述的作物淀粉是指谷類(lèi)淀粉、薯類(lèi)淀粉、豆類(lèi)淀粉、藕淀粉或葛根淀粉；其中谷類(lèi)淀粉為小麥淀粉、玉米淀粉或高粱淀粉，薯類(lèi)淀粉為馬鈴薯淀粉、紅薯淀粉或木薯淀粉，豆類(lèi)淀粉為綠豆淀粉、蠶豆淀粉或豌豆淀粉。如上所述的一種具有梯度結(jié)構(gòu)的細(xì)菌纖維素膜的制備方法，所述的高壓蒸汽滅菌后紫外輻照是指將所述培養(yǎng)液置于高壓滅菌鍋內(nèi)121°C滅菌處理30分鐘后取出置于紫外燈下輻照冷卻至室溫。
如上所述的一種具有梯度結(jié)構(gòu)的細(xì)菌纖維素膜的制備方法，所述的通純氧是指將醫(yī)用氧以lL/min的速度通入上述的培養(yǎng)液中，并維持30分鐘；所述的接種是指用滅菌后的接種環(huán)鉤取適量保存于4°C下試管中的葡糖醋桿菌菌種，并轉(zhuǎn)移至所述的發(fā)酵培養(yǎng)液中；所述的擴(kuò)培是指將接入菌種后的發(fā)酵培養(yǎng)基于28 32°C下?lián)u床培養(yǎng)8 24小時(shí)。如上所述的一種具有梯度結(jié)構(gòu)的細(xì)菌纖維素膜的制備方法，所述的高壓滅菌是指將所述后處理后的具有梯度結(jié)構(gòu)的細(xì)菌纖維素薄膜浸泡在純凈水中置于高壓滅菌鍋內(nèi)121°C滅菌處理30分鐘后取出冷卻至室溫；所述的低溫封存是指將高壓滅菌后的具有梯度結(jié)構(gòu)的細(xì)菌纖維素膜于4°C下保存。本發(fā)明還提供了一種根據(jù)上述方法制得的具有梯度結(jié)構(gòu)的細(xì)菌纖維素膜，所述的具有梯度結(jié)構(gòu)的細(xì)菌纖維素膜是上表面致密向下連續(xù)過(guò)渡至下表面疏松的細(xì)菌纖維素膜，所述的連續(xù)過(guò)渡是指細(xì)菌纖維素內(nèi)部的纖維素微纖絲之間通過(guò)β_1，4-葡萄糖鏈中的分子內(nèi)與分子間氫鍵結(jié)合，無(wú)明顯物理分層；其中所述上表面致密的纖維素含量為0.7Χ 10_2 1.0X 10_2g/cm3，所述下表面疏松的纖維素含量為0.2 X Kr2 0.5 X IOVcm3。如上所述的一種具有梯度結(jié)構(gòu)的細(xì)菌纖維素膜，所述的細(xì)菌纖維素膜是由微生物消耗糖源，代謝形成纖維素微纖絲通過(guò)分子內(nèi)與分子間氫鍵結(jié)合形成。如上所述的一種具有梯度結(jié)構(gòu)的細(xì)菌纖維素膜，所述的微生物是指能夠生物合成纖維素的微生物，為葡糖醋桿菌、產(chǎn)醋桿菌、醋化桿菌、巴氏醋桿菌、葡萄糖桿菌、農(nóng)桿菌、根瘤菌、八疊球菌、洋蔥假單胞菌、椰毒假單胞菌或空腸彎曲菌中的一種或幾種。如上所述的一種具有梯度結(jié)構(gòu)的細(xì)菌纖維素膜，所述的細(xì)菌纖維素膜的厚度為2 IOmm0
有益效果與現(xiàn)有技術(shù)先比，本發(fā)明的有益效果是:( I)將作物淀粉與增稠劑進(jìn)行復(fù)配加入到發(fā)酵培養(yǎng)液中，能夠?qū)崿F(xiàn)細(xì)菌纖維素膜致密上表面向下連續(xù)過(guò)渡之疏松下表面；通過(guò)改變作物淀粉與增稠劑之間的比例，能夠可控地制備不懂梯度結(jié)構(gòu)的細(xì)菌纖維素膜(2)本發(fā)明制備原料來(lái)源廣泛；生物合成過(guò)程溫和、無(wú)污染；產(chǎn)品綠色、安全；一種具有梯度結(jié)構(gòu)的細(xì)菌纖維素膜生產(chǎn)成本低廉，制備過(guò)程可控，產(chǎn)品可設(shè)計(jì)、附加值高，具有較大規(guī)?；a(chǎn)的前景


圖1是本發(fā)明一種具有梯度結(jié)構(gòu)的細(xì)菌纖維素膜的截面剖視示意圖；圖2是圖1致密層的截面掃描電鏡圖；圖3是圖1疏松層的截面掃描電鏡圖；圖4是圖1致密層的表面掃描電鏡圖；圖5是圖1疏松層的表面掃描電鏡具體實(shí)施例方式下面結(jié)合具體實(shí)施方式
，進(jìn)一步闡述本發(fā)明。應(yīng)理解，這些實(shí)施例僅用于說(shuō)明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的范圍。此外應(yīng)理解，在閱讀了本發(fā)明講授的內(nèi)容之后，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以對(duì)本發(fā)明作各種改動(dòng)或修改，這些等價(jià)形式同樣落于本申請(qǐng)所附權(quán)利要求書(shū)所限定的范圍。本發(fā)明還提供了一種根據(jù)上述方法制得的具有梯度結(jié)構(gòu)的細(xì)菌纖維素膜，如圖1所示，所述的具有梯度結(jié)構(gòu)的細(xì)菌纖維素膜是上表面致密向下連續(xù)過(guò)渡至下表面疏松的細(xì)菌纖維素膜，所述的連續(xù)過(guò)渡是指細(xì)菌纖維素膜內(nèi)部的纖維素微纖絲之間通過(guò)β -1, 4-葡萄糖鏈中的分子內(nèi)與分子間氫鍵結(jié)合，無(wú)明顯物理分層；如圖2和4所示，其中所述上表面致密的纖維素含量為0.7Χ10_2 1.0X10_2g/cm3,如圖3和5所不，所述下表面疏松的纖維素含量為0.2X 10 2 0.5X 10 2g/cm3。如上所述的一種具有梯度結(jié)構(gòu)的細(xì)菌纖維素膜，所述的細(xì)菌纖維素膜是由微生物消耗糖源，代謝形成纖維素微纖絲通過(guò)分子內(nèi)與分子間氫鍵結(jié)合形成。如上所述的一種具有梯度結(jié)構(gòu)的細(xì)菌纖維素膜，所述的微生物是指能夠生物合成纖維素的微生物，為葡糖醋桿菌、產(chǎn)醋桿菌、醋化桿菌、巴氏醋桿菌、葡萄糖桿菌、農(nóng)桿菌、根瘤菌、八疊球菌、洋蔥假單胞菌、椰毒假單胞菌或空腸彎曲菌中的一種或幾種。如上所述的一種具有梯度結(jié)構(gòu)的細(xì)菌纖維素膜，所述的細(xì)菌纖維素膜的厚度為2 IOmm0實(shí)施例1I)發(fā)酵培養(yǎng)液的調(diào)配；培養(yǎng)液組分，以質(zhì)量百分?jǐn)?shù)計(jì)，單位為wt%:葡萄糖、果糖、蔗糖或甘露醇2，蛋白胨0.05，酵母膏0.05，檸檬酸0.01，磷酸氫二鈉0.02，磷酸二氫鉀0.01，甲基纖維素0.1，小麥淀粉0.1 ；培養(yǎng)液的pH為4.0 ;將培養(yǎng)液加熱至50°C使甲基纖維素溶解并均勻分散于培養(yǎng)液中，同時(shí)使小麥淀粉產(chǎn)生糊化且均勻分散于發(fā)酵培養(yǎng)液中，經(jīng)過(guò)高壓蒸汽滅菌后紫外輻照并冷卻至室溫，通純氧，即得發(fā)酵培養(yǎng)液；2)菌種擴(kuò)培；將所述的發(fā)酵培養(yǎng)液接種和擴(kuò)培；擴(kuò)培程度:木醋桿菌細(xì)胞數(shù)目在2X IO5個(gè)/ml。3)靜置培養(yǎng)；將擴(kuò)培后的菌液轉(zhuǎn)移至裝有發(fā)酵培養(yǎng)液的培養(yǎng)容器中，放置于恒溫培養(yǎng)箱中，28°C靜置培養(yǎng)；當(dāng)細(xì)菌纖維素膜厚度達(dá)到2_時(shí)，將其取出，即得到具備梯度結(jié)構(gòu)的細(xì)菌纖維素薄膜；4)后處理；靜置培養(yǎng)結(jié)束后，將上述的具備梯度結(jié)構(gòu)的細(xì)菌纖維素薄膜浸泡至濃度為lwt%的氫氧化鈉溶液中，煮沸保持2小時(shí)，用純凈水清洗至pH為7.0，材料內(nèi)毒素〈0.5EU/ml，再將處理后的細(xì)菌纖維素薄膜高壓滅菌并包裝低溫封存，即為厚度為2mm的上表面致密的纖維素含量為0.7X10_2g/cm3，下表面疏松的纖維素含量為0.2X10_2g/cm3具備梯度結(jié)構(gòu)的細(xì)菌纖維素膜。實(shí)施例2 I)發(fā)酵培養(yǎng)液的調(diào)配；
培養(yǎng)液組分，以質(zhì)量百分?jǐn)?shù)計(jì)，單位為wt%:葡萄糖、果糖、蔗糖或甘露醇3，蛋白胨0.2，酵母膏0.2，檸檬酸0.05，磷酸氫二鈉0.1，磷酸二氫鉀0.05，甲基纖維素0.5，小麥淀粉0.5 ；培養(yǎng)液的pH為5.0;將培養(yǎng)液加熱至70°C使甲基纖維素溶解并均勻分散于培養(yǎng)液中，同時(shí)使小麥淀粉產(chǎn)生糊化且均勻分散于發(fā)酵培養(yǎng)液中，經(jīng)過(guò)高壓蒸汽滅菌后紫外輻照并冷卻至室溫，通純氧，即得發(fā)酵培養(yǎng)液；2)菌種擴(kuò)培；將所述的發(fā)酵培養(yǎng)液接種和擴(kuò)培；擴(kuò)培程度:木醋桿菌細(xì)胞數(shù)目在2X IO6個(gè)/ml。3)靜置培養(yǎng)；將擴(kuò)培后的菌液轉(zhuǎn)移至裝有發(fā)酵培養(yǎng)液的培養(yǎng)容器中，放置于恒溫培養(yǎng)箱中，30°C靜置培養(yǎng)；當(dāng)細(xì)菌纖維素膜厚度達(dá)到5_時(shí)，將其取出，即得到具備梯度結(jié)構(gòu)的細(xì)菌纖維素薄膜；4)后處理；靜置培養(yǎng)結(jié)束后，將上述的具備梯度結(jié)構(gòu)的細(xì)菌纖維素薄膜浸泡至濃度為5wt%的氫氧化鈉溶液中，煮沸保持5小時(shí)，用純凈水清洗至pH為7.0，材料內(nèi)毒素〈0.5EU/ml，再將處理后的細(xì)菌纖維素薄膜高壓滅菌并包裝低溫封存，即為厚度為5mm的上表面致密的纖維素含量為0.8X10_2g/cm3，下表面疏松的纖維素含量為0.4X10_2g/cm3具備梯度結(jié)構(gòu)的細(xì)菌纖維素膜。實(shí)施例3I)發(fā)酵培養(yǎng)液的調(diào)配；培養(yǎng)液組分，以質(zhì)量百分?jǐn)?shù)計(jì)，單位為wt%:葡萄糖、果糖、蔗糖或甘露醇5，蛋白胨0.5，酵母膏0.5，檸檬酸0.1，磷酸氫二鈉0.2，磷酸二氫鉀0.1，甲基纖維素1，小麥淀粉I ;培養(yǎng)液的pH為6.0 ;將培養(yǎng)液加熱至80°C使增稠劑溶解并均勻分散于培養(yǎng)液中，同時(shí)使小麥淀粉產(chǎn)生糊化且均勻分散于發(fā)酵培養(yǎng)液中，經(jīng)過(guò)高壓蒸汽滅菌后紫外輻照并冷卻至室溫，通純氧，即得發(fā)酵培養(yǎng)液；2)菌種擴(kuò)培；將所述的發(fā)酵培養(yǎng)液接種和擴(kuò)培；擴(kuò)培程度:木醋桿菌細(xì)胞數(shù)目在2X IO7個(gè)/ml。3)靜置培養(yǎng)；將擴(kuò)培后的菌液轉(zhuǎn)移至裝有發(fā)酵培養(yǎng)液的培養(yǎng)容器中，放置于恒溫培養(yǎng)箱中，32°C靜置培養(yǎng)；當(dāng)細(xì)菌纖維 素膜厚度達(dá)到10_時(shí)，將其取出，即得到具備梯度結(jié)構(gòu)的細(xì)菌纖維素薄膜；4)后處理；靜置培養(yǎng)結(jié)束后，將上述的具備梯度結(jié)構(gòu)的細(xì)菌纖維素薄膜浸泡至濃度為10wt%的氫氧化鈉溶液中，煮沸保持10小時(shí)，用純凈水清洗至pH為7.0，材料內(nèi)毒素〈0.5EU/ml,再將處理后的細(xì)菌纖維素薄膜高壓滅菌并包裝低溫封存，即為厚度為IOmm的上表面致密的纖維素含量為1.0X 10_2g/cm3,下表面疏松的纖維素含量為0.5 X 10_2g/cm3具備梯度結(jié)構(gòu)的細(xì)菌纖維素膜。
實(shí)施例4I)發(fā)酵培養(yǎng)液的調(diào)配；培養(yǎng)液組分，以質(zhì)量百分?jǐn)?shù)計(jì)，單位為wt%:葡萄糖、果糖、蔗糖或甘露醇5，蛋白胨0.5，酵母膏0.5，檸檬酸0.1，磷酸氫二鈉0.2，磷酸二氫鉀0.1，羧甲基纖維素I，玉米淀粉I ;培養(yǎng)液的pH為5.0 ;將培養(yǎng)液加熱至80°C使羧甲基纖維素溶解并均勻分散于培養(yǎng)液中，同時(shí)使玉米淀粉產(chǎn)生糊化且均勻分散于發(fā)酵培養(yǎng)液中，經(jīng)過(guò)高壓蒸汽滅菌后紫外輻照并冷卻至室溫，通純氧，即得發(fā)酵培養(yǎng)液；2)菌種擴(kuò)培；將所述的發(fā)酵培養(yǎng)液接種和擴(kuò)培；擴(kuò)培程度:木醋桿菌細(xì)胞數(shù)目在2X IO7個(gè)/ml。3)靜置培養(yǎng)；將擴(kuò)培后的菌液轉(zhuǎn)移至裝有發(fā)酵培養(yǎng)液的培養(yǎng)容器中，放置于恒溫培養(yǎng)箱中，32°C靜置培養(yǎng)；當(dāng)細(xì)菌纖 維素膜厚度達(dá)到10_時(shí)，將其取出，即得到具備梯度結(jié)構(gòu)的細(xì)菌纖維素薄膜；4)后處理；靜置培養(yǎng)結(jié)束后，將上述的具備梯度結(jié)構(gòu)的細(xì)菌纖維素薄膜浸泡至濃度為10wt%的氫氧化鈉溶液中，煮沸保持10小時(shí)，用純凈水清洗至pH為7.0，材料內(nèi)毒素〈0.5EU/ml,再將處理后的細(xì)菌纖維素薄膜高壓滅菌并包裝低溫封存，即為厚度為IOmm的上表面致密的纖維素含量為1.0X 10_2g/cm3,下表面疏松的纖維素含量為0.5 X 10_2g/cm3具備梯度結(jié)構(gòu)的細(xì)菌纖維素膜。實(shí)施例5I)發(fā)酵培養(yǎng)液的調(diào)配；培養(yǎng)液組分，以質(zhì)量百分?jǐn)?shù)計(jì)，單位為wt%:葡萄糖、果糖、蔗糖或甘露醇5，蛋白胨0.5，酵母膏0.5，檸檬酸0.1，磷酸氫二鈉0.2，磷酸二氫鉀0.1，果膠I，高亮淀粉I ;培養(yǎng)液的pH為5.0 ;將培養(yǎng)液加熱至80°C使果膠溶解并均勻分散于培養(yǎng)液中，同時(shí)使高粱淀粉產(chǎn)生糊化且均勻分散于發(fā)酵培養(yǎng)液中，經(jīng)過(guò)高壓蒸汽滅菌后紫外輻照并冷卻至室溫，通純氧，即得發(fā)酵培養(yǎng)液；2)菌種擴(kuò)培；將所述的發(fā)酵培養(yǎng)液接種和擴(kuò)培；擴(kuò)培程度:木醋桿菌細(xì)胞數(shù)目在2X IO7個(gè)/ml。3)靜置培養(yǎng)；將擴(kuò)培后的菌液轉(zhuǎn)移至裝有發(fā)酵培養(yǎng)液的培養(yǎng)容器中，放置于恒溫培養(yǎng)箱中，32°C靜置培養(yǎng)；當(dāng)細(xì)菌纖維素膜厚度達(dá)到10_時(shí)，將其取出，即得到具備梯度結(jié)構(gòu)的細(xì)菌纖維素薄膜；4)后處理；靜置培養(yǎng)結(jié)束后，將上述的具備梯度結(jié)構(gòu)的細(xì)菌纖維素薄膜浸泡至濃度為10wt%的氫氧化鈉溶液中，煮沸保持10小時(shí)，用純凈水清洗至pH為7.0，材料內(nèi)毒素〈0.5EU/ml,再將處理后的細(xì)菌纖維素薄膜高壓滅菌并包裝低溫封存，即為厚度為IOmm的上表面致密的纖維素含量為l.0X 10_2g/cm3,下表面疏松的纖維素含量為0.5 X 10_2g/cm3具備梯度結(jié)構(gòu)的細(xì)菌纖維素膜。實(shí)施例6I)發(fā)酵培養(yǎng)液的調(diào)配；培養(yǎng)液組分，以質(zhì)量百分?jǐn)?shù)計(jì)，單位為wt%:葡萄糖、果糖、蔗糖或甘露醇5，蛋白胨0.5，酵母膏0.5，檸檬酸0.1，磷酸氫二鈉0.2，磷酸二氫鉀0.1，瓊脂1，馬鈴薯淀粉I;培養(yǎng)液的pH為5.0;將培養(yǎng)液加熱至80°C使瓊脂溶解并均勻分散于培養(yǎng)液中，同時(shí)使馬鈴薯淀粉產(chǎn)生糊化且均勻分散于發(fā)酵培養(yǎng)液中，經(jīng)過(guò)高壓蒸汽滅菌后紫外輻照并冷卻至室溫，通純氧，即得發(fā)酵培養(yǎng)液；2)菌種擴(kuò)培；將所述的發(fā)酵培養(yǎng)液·接種和擴(kuò)培；擴(kuò)培程度:木醋桿菌細(xì)胞數(shù)目在2X IO7個(gè)/ml。3)靜置培養(yǎng)；將擴(kuò)培后的菌液轉(zhuǎn)移至裝有發(fā)酵培養(yǎng)液的培養(yǎng)容器中，放置于恒溫培養(yǎng)箱中，32°C靜置培養(yǎng)；當(dāng)細(xì)菌纖維素膜厚度達(dá)到IOmm時(shí)，將其取出，即得到具備梯度結(jié)構(gòu)的細(xì)菌纖維素薄膜；4)后處理；靜置培養(yǎng)結(jié)束后，將上述的具備梯度結(jié)構(gòu)的細(xì)菌纖維素薄膜浸泡至濃度為10wt%的氫氧化鈉溶液中，煮沸保持10小時(shí)，用純凈水清洗至pH為7.0，材料內(nèi)毒素〈0.5EU/ml,再將處理后的細(xì)菌纖維素薄膜高壓滅菌并包裝低溫封存，即為厚度為IOmm的上表面致密的纖維素含量為1.0X 10_2g/cm3,下表面疏松的纖維素含量為0.5 X 10_2g/cm3具備梯度結(jié)構(gòu)的細(xì)菌纖維素膜。實(shí)施例7I)發(fā)酵培養(yǎng)液的調(diào)配；培養(yǎng)液組分，以質(zhì)量百分?jǐn)?shù)計(jì)，單位為wt%:葡萄糖、果糖、蔗糖或甘露醇5，蛋白胨0.5，酵母膏0.5，檸檬酸0.1，磷酸氫二鈉0.2，磷酸二氫鉀0.1，卡拉膠I，紅薯淀粉I ;培養(yǎng)液的pH為5.0;將培養(yǎng)液加熱至80°C使卡拉膠溶解并均勻分散于培養(yǎng)液中，同時(shí)使紅薯淀粉產(chǎn)生糊化且均勻分散于發(fā)酵培養(yǎng)液中，經(jīng)過(guò)高壓蒸汽滅菌后紫外輻照并冷卻至室溫，通純氧，即得發(fā)酵培養(yǎng)液；2)菌種擴(kuò)培；將所述的發(fā)酵培養(yǎng)液接種和擴(kuò)培；擴(kuò)培程度:木醋桿菌細(xì)胞數(shù)目在2X IO7個(gè)/ml。3)靜置培養(yǎng)；將擴(kuò)培后的菌液轉(zhuǎn)移至裝有發(fā)酵培養(yǎng)液的培養(yǎng)容器中，放置于恒溫培養(yǎng)箱中，32°C靜置培養(yǎng)；當(dāng)細(xì)菌纖維素膜厚度達(dá)到10_時(shí)，將其取出，即得到具備梯度結(jié)構(gòu)的細(xì)菌纖維素薄膜；4)后處理；靜置培養(yǎng)結(jié)束后，將上述的具備梯度結(jié)構(gòu)的細(xì)菌纖維素薄膜浸泡至濃度為10wt%的氫氧化鈉溶液中，煮沸保持10小時(shí)，用純凈水清洗至pH為7.0，材料內(nèi)毒素〈0.5EU/ml,再將處理后的細(xì)菌纖維素薄膜高壓滅菌并包裝低溫封存，即為厚度為IOmm的上表面致密的纖維素含量為1.0X 10_2g/cm3,下表面疏松的纖維素含量為0.5 X 10_2g/cm3具備梯度結(jié)構(gòu)的細(xì)菌纖維素膜。實(shí)施例81)發(fā)酵培養(yǎng)液的調(diào)配；培養(yǎng)液組分，以質(zhì)量百分?jǐn)?shù)計(jì)，單位為wt%:葡萄糖、果糖、蔗糖或甘露醇5，蛋白胨0.5，酵母膏0.5，檸檬酸0.1，磷酸氫二鈉0.2，磷酸二氫鉀0.1，黃原膠I，木薯淀粉I ;培養(yǎng)液的pH為5.0;將培養(yǎng)液加熱至80°C使黃原膠溶解并均勻分散于培養(yǎng)液中，同時(shí)使木薯淀粉產(chǎn)生糊化且均勻分散于發(fā)酵培養(yǎng)液中，經(jīng)過(guò)高壓蒸汽滅菌后紫外輻照并冷卻至室溫，通純氧，即得發(fā)酵培養(yǎng)液；2)菌種擴(kuò)培；將所述的發(fā)酵培養(yǎng)液接種和擴(kuò)培；擴(kuò)培程度:木醋桿菌細(xì)胞數(shù)目在2X IO7個(gè)/ml。3)靜置培養(yǎng)；將擴(kuò)培后的菌液轉(zhuǎn)移至裝有發(fā)酵培養(yǎng)液的培養(yǎng)容器中，放置于恒溫培養(yǎng)箱中，32°C靜置培養(yǎng)；當(dāng)細(xì)菌纖維素膜厚度達(dá)到10_時(shí)，將其取出，即得到具備梯度結(jié)構(gòu)的細(xì)菌纖維素薄膜； 4)后處理；靜置培養(yǎng)結(jié)束后，將上述的具備梯度結(jié)構(gòu)的細(xì)菌纖維素薄膜浸泡至濃度為10wt%的氫氧化鈉溶液中，煮沸保持10小時(shí)，用純凈水清洗至pH為7.0，材料內(nèi)毒素〈0.5EU/ml,再將處理后的細(xì)菌纖維素薄膜高壓滅菌并包裝低溫封存，即為厚度為IOmm的上表面致密的纖維素含量為1.0X 10_2g/cm3,下表面疏松的纖維素含量為0.5 X 10_2g/cm3具備梯度結(jié)構(gòu)的細(xì)菌纖維素膜。實(shí)施例91)發(fā)酵培養(yǎng)液的調(diào)配；培養(yǎng)液組分，以質(zhì)量百分?jǐn)?shù)計(jì)，單位為wt%:葡萄糖、果糖、蔗糖或甘露醇5，蛋白胨0.5，酵母膏0.5，檸檬酸0.1，磷酸氫二鈉0.2，磷酸二氫鉀0.1，羧甲基纖維素I，綠豆淀粉1 ;培養(yǎng)液的pH為5.0;將培養(yǎng)液加熱至80°C使羧甲基纖維素溶解并均勻分散于培養(yǎng)液中，同時(shí)使綠豆淀粉產(chǎn)生糊化且均勻分散于發(fā)酵培養(yǎng)液中，經(jīng)過(guò)高壓蒸汽滅菌后紫外輻照并冷卻至室溫，通純氧，即得發(fā)酵培養(yǎng)液；2)菌種擴(kuò)培；將所述的發(fā)酵培養(yǎng)液接種和擴(kuò)培；擴(kuò)培程度:木醋桿菌細(xì)胞數(shù)目在2X IO7個(gè)/ml。3)靜置培養(yǎng)；將擴(kuò)培后的菌液轉(zhuǎn)移至裝有發(fā)酵培養(yǎng)液的培養(yǎng)容器中，放置于恒溫培養(yǎng)箱中，32°C靜置培養(yǎng)；當(dāng)細(xì)菌纖維素膜厚度達(dá)到10_時(shí)，將其取出，即得到具備梯度結(jié)構(gòu)的細(xì)菌纖維素薄膜；
4)后處理；靜置培養(yǎng)結(jié)束后，將上述的具備梯度結(jié)構(gòu)的細(xì)菌纖維素薄膜浸泡至濃度為10wt%的氫氧化鈉溶液中，煮沸保持10小時(shí)，用純凈水清洗至pH為7.0，材料內(nèi)毒素〈0.5EU/ml,再將處理后的細(xì)菌纖維素薄膜高壓滅菌并包裝低溫封存，即為厚度為IOmm的上表面致密的纖維素含量為1.0X 10_2g/cm3,下表面疏松的纖維素含量為0.5 X 10_2g/cm3具備梯度結(jié)構(gòu)的細(xì)菌纖維素膜。實(shí)施例10I)發(fā)酵培養(yǎng)液的調(diào)配；培養(yǎng)液組分，以質(zhì)量百分?jǐn)?shù)計(jì)，單位為wt%:葡萄糖、果糖、蔗糖或甘露醇5，蛋白胨
0.5，酵母膏0.5，檸檬酸0.1，磷酸氫二鈉0.2，磷酸二氫鉀0.1，羧甲基纖維素1，蠶豆淀粉I ;培養(yǎng)液的pH為5.0 ;將培養(yǎng)液加熱至80°C使羧甲基纖維素溶解并均勻分散于培養(yǎng)液中，同時(shí)使蠶豆淀粉產(chǎn)生糊化且均勻分散于發(fā)酵培養(yǎng)液中，經(jīng)過(guò)高壓蒸汽滅菌后紫外輻照并冷卻至室溫，通純氧，即得發(fā)酵培養(yǎng)液；2)菌種擴(kuò)培；將所述的發(fā)酵培養(yǎng)液接種和擴(kuò)培；擴(kuò)培程度:木醋桿菌細(xì)胞數(shù)目在2X IO7個(gè)/ml。3)靜置培養(yǎng)；將擴(kuò)培后的菌液轉(zhuǎn)移至裝有發(fā)酵培養(yǎng)液的培養(yǎng)容器中，放置于恒溫培養(yǎng)箱中，32°C靜置培養(yǎng)；當(dāng)細(xì)菌纖維素膜厚度達(dá)到10_時(shí)，將其取出，即得到具備梯度結(jié)構(gòu)的細(xì)菌纖維素薄膜；4)后處理；靜置培養(yǎng)結(jié)束后，將上述的具備梯度結(jié)構(gòu)的細(xì)菌纖維素薄膜浸泡至濃度為10wt%的氫氧化鈉溶液中，煮沸保持10小時(shí)，用純凈水清洗至pH為7.0，材料內(nèi)毒素〈0.5EU/ml,再將處理后的細(xì)菌纖維素薄膜高壓滅菌并包裝低溫封存，即為厚度為IOmm的上表面致密的纖維素含量為1.0X 10_2g/cm3,下表面疏松的纖維素含量為0.5 X 10_2g/cm3具備梯度結(jié)構(gòu)的細(xì)菌纖維素膜。實(shí)施例11I)發(fā)酵培養(yǎng)液的調(diào)配；培養(yǎng)液組分，以質(zhì)量百分?jǐn)?shù)計(jì)，單位為wt%:葡萄糖、果糖、蔗糖或甘露醇5，蛋白胨
0.5，酵母膏0.5，檸檬酸0.1，磷酸氫二鈉0.2，磷酸二氫鉀0.1，羧甲基纖維素I，豌豆淀粉I ;培養(yǎng)液的pH為5.0;將培養(yǎng)液加熱至80°C使羧甲基纖維素溶解并均勻分散于培養(yǎng)液中，同時(shí)使豌豆淀粉產(chǎn)生糊化且均勻分散于發(fā)酵培養(yǎng)液中，經(jīng)過(guò)高壓蒸汽滅菌后紫外輻照并冷卻至室溫，通純氧，即得發(fā)酵培養(yǎng)液；2)菌種擴(kuò)培；將所述的發(fā)酵培養(yǎng)液接種和擴(kuò)培；擴(kuò)培程度:木醋桿菌細(xì)胞數(shù)目在2X IO7個(gè)/ml。

3)靜置培養(yǎng)；
將擴(kuò)培后的菌液轉(zhuǎn)移至裝有發(fā)酵培養(yǎng)液的培養(yǎng)容器中，放置于恒溫培養(yǎng)箱中，32°C靜置培養(yǎng)；當(dāng)細(xì)菌纖維素膜厚度達(dá)到10_時(shí)，將其取出，即得到具備梯度結(jié)構(gòu)的細(xì)菌纖維素薄膜；4)后處理；靜置培養(yǎng)結(jié)束后，將上述的具備梯度結(jié)構(gòu)的細(xì)菌纖維素薄膜浸泡至濃度為10wt%的氫氧化鈉溶液中，煮沸保持10小時(shí)，用純凈水清洗至pH為7.0，材料內(nèi)毒素〈0.5EU/ml,再將處理后的細(xì)菌纖維素薄膜高壓滅菌并包裝低溫封存，即為厚度為IOmm的上表面致密的纖維素含量為1.0X 10_2g/cm3,下表面疏松的纖維素含量為0.5 X 10_2g/cm3具備梯度結(jié)構(gòu)的細(xì)菌纖維素膜。實(shí)施例12I)發(fā)酵培養(yǎng)液的調(diào)配；培養(yǎng)液組分，以質(zhì)量百分?jǐn)?shù)計(jì)，單位為wt%:葡萄糖、果糖、蔗糖或甘露醇5，蛋白胨0.5，酵母膏0.5，檸檬酸0.1，磷酸氫二鈉0.2，磷酸二氫鉀0.1，羧甲基纖維素I，藕淀粉I ;培養(yǎng)液的pH為5.0;將培養(yǎng)液加熱至80°C使羧甲基纖維素溶解并均勻分散于培養(yǎng)液中，同時(shí)使藕淀粉產(chǎn)生糊化且均勻分散于發(fā)酵培養(yǎng)液中，經(jīng)過(guò)高壓蒸汽滅菌后紫外輻照并冷卻至室溫，通純氧，即得發(fā)酵培養(yǎng)液；2)菌種擴(kuò)培；

將所述的發(fā)酵培養(yǎng)液接種和擴(kuò)培；擴(kuò)培程度:木醋桿菌細(xì)胞數(shù)目在2X IO7個(gè)/ml。3)靜置培養(yǎng)；將擴(kuò)培后的菌液轉(zhuǎn)移至裝有發(fā)酵培養(yǎng)液的培養(yǎng)容器中，放置于恒溫培養(yǎng)箱中，32°C靜置培養(yǎng)；當(dāng)細(xì)菌纖維素膜厚度達(dá)到10_時(shí)，將其取出，即得到具備梯度結(jié)構(gòu)的細(xì)菌纖維素薄膜；4)后處理；靜置培養(yǎng)結(jié)束后，將上述的具備梯度結(jié)構(gòu)的細(xì)菌纖維素薄膜浸泡至濃度為10wt%的氫氧化鈉溶液中，煮沸保持10小時(shí)，用純凈水清洗至pH為7.0，材料內(nèi)毒素〈0.5EU/ml,再將處理后的細(xì)菌纖維素薄膜高壓滅菌并包裝低溫封存，即為厚度為IOmm的上表面致密的纖維素含量為1.0X 10_2g/cm3,下表面疏松的纖維素含量為0.5 X 10_2g/cm3具備梯度結(jié)構(gòu)的細(xì)菌纖維素膜。實(shí)施例13I)發(fā)酵培養(yǎng)液的調(diào)配；培養(yǎng)液組分，以質(zhì)量百分?jǐn)?shù)計(jì)，單位為wt%:葡萄糖、果糖、蔗糖或甘露醇5，蛋白胨
0.5，酵母膏0.5，檸檬酸0.1，磷酸氫二鈉0.2，磷酸二氫鉀0.1，羧甲基纖維素1，葛根淀粉I ;培養(yǎng)液的pH為5.0 ;將培養(yǎng)液加熱至80°C使羧甲基纖維素溶解并均勻分散于培養(yǎng)液中，同時(shí)使葛根淀粉產(chǎn)生糊化且均勻分散于發(fā)酵培養(yǎng)液中，經(jīng)過(guò)高壓蒸汽滅菌后紫外輻照并冷卻至室溫，通純氧，即得發(fā)酵培養(yǎng)液；2)菌種擴(kuò)培；
將所述的發(fā)酵培養(yǎng)液接種和擴(kuò)培；擴(kuò)培程度:木醋桿菌細(xì)胞數(shù)目在2X IO7個(gè)/ml。3)靜置培養(yǎng)；將擴(kuò)培后的菌液轉(zhuǎn)移至裝有發(fā)酵培養(yǎng)液的培養(yǎng)容器中，放置于恒溫培養(yǎng)箱中，32°C靜置培養(yǎng)；當(dāng)細(xì)菌纖維素膜厚度達(dá)到10_時(shí)，將其取出，即得到具備梯度結(jié)構(gòu)的細(xì)菌纖維素薄膜；4)后處理；靜置培養(yǎng)結(jié)束后，將上述的具備梯度結(jié)構(gòu)的細(xì)菌纖維素薄膜浸泡至濃度為10wt%的氫氧化鈉溶液中，煮沸保持10小時(shí)，用純凈水清洗至pH為7.0，材料內(nèi)毒素〈0.5EU/ml,再將處理后的細(xì)菌纖維素薄膜高壓滅菌并包裝低溫封存，即為厚度為IOmm的上表面致密的纖維素含量為1.0X 10_2g/cm3,下表面疏松的纖維素含量為0.5 X 10_2g/cm3具備梯度結(jié)構(gòu)的細(xì)菌纖維 素膜。
權(quán)利要求
1.一種具有梯度結(jié)構(gòu)的細(xì)菌纖維素膜的制備方法，其特征是包括以下步驟: 1)發(fā)酵培養(yǎng)液的調(diào)配； 培養(yǎng)液組分，以質(zhì)量百分?jǐn)?shù)計(jì)，單位為Wt%:葡萄糖、果糖、蔗糖或甘露醇2 5，蛋白胨0.05 0.5，酵母膏0.05 0.5，檸檬酸0.01 0.1，磷酸氫二鈉0.02 0.2，磷酸二氫鉀0.01 0.1，增稠劑0.1 I ;作物淀粉0.1 I ; 其中，所述增稠劑與所述作物淀粉質(zhì)量比為1:1.2 1.5 ; 培養(yǎng)液的pH為4.0 6.0 ; 將培養(yǎng)液加熱至50 80°C范圍內(nèi)，使增稠劑溶解并均勻分散于培養(yǎng)液中，同時(shí)使作物淀粉產(chǎn)生糊化且均勻分散于培養(yǎng)液中，經(jīng)過(guò)高壓蒸汽滅菌后紫外輻照并冷卻至室溫，通純氧，即得發(fā)酵培養(yǎng)液； 2)菌種擴(kuò)培； 將所述的發(fā)酵培養(yǎng)液接種和擴(kuò)培；擴(kuò)培程度:葡糖醋桿菌細(xì)胞數(shù)目在2 X IO5 2 X IO7個(gè)/ml ； 3)靜置培養(yǎng)； 將擴(kuò)培后的菌液轉(zhuǎn)移至裝有發(fā)酵培養(yǎng)液的培養(yǎng)容器中，放置于恒溫培養(yǎng)箱中，28 32°C靜置培養(yǎng)；當(dāng)細(xì)菌纖維素膜厚度達(dá)到2 IOmm時(shí)，將其取出，即得到具備梯度結(jié)構(gòu)的細(xì)菌纖維素薄膜； 4)后處理； 靜置培養(yǎng)結(jié)束后，將上述的具備梯度結(jié)構(gòu)的細(xì)菌纖維素薄膜浸泡至濃度為I 10wt%的氫氧化鈉溶液中，煮沸保持2 10小時(shí)，用純凈水清洗至pH為7.0，材料內(nèi)毒素〈0.5EU/ml，再將處理后的細(xì)菌纖維素薄膜高壓滅菌并包裝低溫封存，即為具備梯度結(jié)構(gòu)的細(xì)菌纖維素膜。
2.如權(quán)利要求1所述的一種具有梯度結(jié)構(gòu)的細(xì)菌纖維素膜的制備方法，其特征在于，所述的增稠劑是指甲基纖維素、羧甲基纖維素、果膠、瓊脂、卡拉膠或黃原膠；所述的作物淀粉是指谷類(lèi)淀粉、薯類(lèi)淀粉、豆類(lèi)淀粉、藕淀粉或葛根淀粉；其中谷類(lèi)淀粉為小麥淀粉、玉米淀粉或高粱淀粉，薯類(lèi)淀粉為馬鈴薯淀粉、紅薯淀粉或木薯淀粉，豆類(lèi)淀粉為綠豆淀粉、蠶豆淀粉或豌豆淀粉。
3.如權(quán)利要求1所述的一種具有梯度結(jié)構(gòu)的細(xì)菌纖維素膜的制備方法，其特征在于，所述的高壓蒸汽滅菌后紫外輻照是指將所述培養(yǎng)液置于高壓滅菌鍋內(nèi)121°C滅菌處理30分鐘后取出置于紫外燈下輻照冷卻至室溫。
4.如權(quán)利要求1所述的一種具有梯度結(jié)構(gòu)的細(xì)菌纖維素膜的制備方法，其特征在于，所述的通純氧是指將醫(yī)用氧以lL/min的速度通入上述的培養(yǎng)液中，并維持30分鐘；所述的接種是指用滅菌后的接種環(huán)鉤取適量保存于4°C下試管中的葡糖醋桿菌菌種，并轉(zhuǎn)移至所述的發(fā)酵培養(yǎng)液中；所述的擴(kuò)培是指將接入菌種后的發(fā)酵培養(yǎng)基于28 32°C下?lián)u床培養(yǎng)8 24小時(shí)。
5.如權(quán)利要求1所述的一種具有梯度結(jié)構(gòu)的細(xì)菌纖維素膜的制備方法，其特征在于，所述的高壓滅菌是指將所述后處理后的具有梯度結(jié)構(gòu)的細(xì)菌纖維素薄膜浸泡在純凈水中置于高壓滅菌鍋內(nèi)121°C滅菌處理30分鐘后取出冷卻至室溫；所述的低溫封存是指將高壓滅菌后的具有梯度結(jié)構(gòu)的細(xì)菌纖維素膜于4°C下保存。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法制得的一種具有梯度結(jié)構(gòu)的細(xì)菌纖維素膜，其特征是:所述的具有梯度結(jié)構(gòu)的細(xì)菌纖維素膜是上表面致密向下連續(xù)過(guò)渡至下表面疏松的細(xì)菌纖維素膜，所述的連續(xù)過(guò)渡是指細(xì)菌纖維素膜內(nèi)部纖維素微纖絲之間均通過(guò)β -1, 4-葡萄糖鏈中的分子內(nèi)與分子間氫鍵結(jié)合，無(wú)明顯物理分層； 其中所述上表面致密的纖維素含量為0.7 X IO-2 1.0X 10_2g/cm3，所述下表面疏松的纖維素含量為 0.2X 1(Γ2 0.5Χ l(T2g/cm3。
7.如權(quán)利要求6所述的一種具有梯度結(jié)構(gòu)的細(xì)菌纖維素膜，其特征在于，所述的細(xì)菌纖維素膜是由微生物消耗糖源，代謝形成纖維素微纖絲通過(guò)分子內(nèi)與分子間氫鍵結(jié)合形成。
8.如權(quán)利要求7所述的一種具有梯度結(jié)構(gòu)的細(xì)菌纖維素膜，其特征在于，所述的微生物是指能夠生物合成纖維素的微生物，為葡糖醋桿菌、產(chǎn)醋桿菌、醋化桿菌、巴氏醋桿菌、葡萄糖桿菌、農(nóng)桿菌、根瘤菌、八疊球菌、洋蔥假單胞菌、椰毒假單胞菌或空腸彎曲菌中的一種或幾種。
9.如權(quán)利要求6所述的一種具有梯度結(jié)構(gòu)的細(xì)菌纖維素膜，其特征在于，所述的細(xì)菌纖維素膜的厚度為2 10mm。
全文摘要
一種具有梯度結(jié)構(gòu)的細(xì)菌纖維素膜及其制備方法，通過(guò)向在發(fā)酵培養(yǎng)液中添加作物淀粉，加熱使其糊化后再加入增稠劑，進(jìn)行靜態(tài)培養(yǎng)得到的細(xì)菌纖維素膜具有上表面致密向下連續(xù)過(guò)渡到下表面疏松的梯度結(jié)構(gòu)。通過(guò)調(diào)節(jié)作物淀粉與增稠劑的比例能夠?qū)崿F(xiàn)細(xì)菌纖維素膜的梯度結(jié)構(gòu)原位快速可控制備。本發(fā)明制備原料來(lái)源廣泛；生物合成過(guò)程溫和、無(wú)污染；產(chǎn)品綠色安全，生產(chǎn)成本低廉，過(guò)程可控，產(chǎn)品可設(shè)計(jì)，具有較強(qiáng)的規(guī)?；a(chǎn)前景。一種具有梯度結(jié)構(gòu)的細(xì)菌纖維素膜適用于包括面膜，降溫貼，傷口敷料，人工皮膚等化妝品與生物醫(yī)用材料領(lǐng)域。
文檔編號(hào)C08L1/02GK103233050SQ20131014094
公開(kāi)日2013年8月7日 申請(qǐng)日期2013年4月22日 優(yōu)先權(quán)日2013年4月22日
發(fā)明者王華平, 楊敬軒, 李喆, 吳旭君, 孫曉曉, 陳仕艷 申請(qǐng)人:東華大學(xué)