本發(fā)明涉及一種蟬花的培養(yǎng)方法，具體涉及一種蟬花的雙向人工培養(yǎng)方法。
背景技術(shù)：
：中藥蟬花為蟬棒束孢IsariacicadaeMiquel(蟬擬青霉Paecilomycescicadae(Miquel)Samson)寄生在某些蟬若蟲上形成的菌蟲復(fù)合體，是我國傳統(tǒng)著名的中藥材之一，其藥用比冬蟲夏草早800年。醫(yī)家認(rèn)為蟬花是一種與冬蟲夏草相近的珍貴藥材。天然蟬花多生長于竹林中，浙江天目山一帶是蟬花的主產(chǎn)區(qū)，被稱為“南方的蟲草”?，F(xiàn)代藥理研究表明天然蟬花及人工培養(yǎng)蟬花中含有多糖、腺苷和N6-(2-羥乙基)腺苷等核苷類物質(zhì)、氨基酸、生物堿及麥角甾醇等多種活性物質(zhì)，具有明顯的解熱鎮(zhèn)痛、抗驚厥等作用，以及顯著的抗腎功能衰竭作用，還具有明顯的抗腫瘤，調(diào)節(jié)免疫，抗氧化、抗衰老、抑制乙型肝炎病毒等作用。人工培養(yǎng)蟬花毒性甚微，小鼠口服60g/kg無毒性。近年來，利用生物發(fā)酵技術(shù)人工培養(yǎng)蟬花并進(jìn)一步深度開發(fā)利用逐漸成為研究的熱點(diǎn)。人工培育蟬花，主要是通過固體發(fā)酵的原理，利用小麥作為培養(yǎng)基。將蟬棒束孢通過斜面種子接種到搖瓶、發(fā)酵罐擴(kuò)大培養(yǎng)，經(jīng)固體發(fā)酵形成若花狀分叉多枝的孢梗束子實(shí)體，經(jīng)采收干燥即可作食藥用原料。目前，蟬花的人工培養(yǎng)主要是單面培養(yǎng)，即采用立體培養(yǎng)架培養(yǎng)，菌絲只能單向生長，不利于培養(yǎng)基和培養(yǎng)空間的充分利用；且該方法培養(yǎng)時間長，不利于節(jié)約生產(chǎn)成本。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的在于提供一種蟬花的雙向人工培養(yǎng)方法。本發(fā)明的目的是通過如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的：一種蟬花的雙向人工培養(yǎng)方法，該方法包括如下步驟：步驟1，蟬花菌種在液體培養(yǎng)基中進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)；步驟2，在培養(yǎng)室內(nèi)將步驟1經(jīng)過擴(kuò)大培養(yǎng)得到的菌種接種到固體培養(yǎng)基中進(jìn)行固體培養(yǎng)，菌絲體生長階段，保持黑暗條件；當(dāng)處于孢梗束生長階段時轉(zhuǎn)為光照培養(yǎng)，在菌絲體長滿培養(yǎng)基時，將培養(yǎng)基進(jìn)行懸空；和步驟3，對孢梗束進(jìn)行采收；所述黑暗可以是基本黑暗條件。進(jìn)一步，菌絲體長滿培養(yǎng)基時，培養(yǎng)基出現(xiàn)板結(jié)時將培養(yǎng)基進(jìn)行懸空。進(jìn)一步，培養(yǎng)基懸空后與培養(yǎng)容器頂部和底部的距離分別為12～16cm；更進(jìn)一步，培養(yǎng)基懸空后與培養(yǎng)容器頂部和底部的距離分別為14～15cm。進(jìn)一步，步驟2固體培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)溫度為20～30℃；更進(jìn)一步，在菌絲體生長階段，培養(yǎng)溫度為22～24℃；在孢梗束生長階段，培養(yǎng)溫度為20～22℃；進(jìn)一步，在孢梗束生長階段光照強(qiáng)度為100～200Lx。進(jìn)一步，步驟2固體培養(yǎng)過程中相對濕度為50～70％；更進(jìn)一步，相對濕度為65～70％。本發(fā)明步驟1所述液體培養(yǎng)過程以菌種擴(kuò)增為目的，可采用常規(guī)的菌種擴(kuò)培方法，包括斜面培養(yǎng)、搖瓶培養(yǎng)、種子罐培養(yǎng)、發(fā)酵罐培養(yǎng)中的任意一種或幾種方法的組合；所用培養(yǎng)基為本領(lǐng)域常規(guī)的液體培養(yǎng)基，如馬鈴薯-蔗糖-瓊脂培養(yǎng)基、馬鈴薯-葡萄糖-瓊脂培養(yǎng)基、馬鈴薯-蔗糖-水培養(yǎng)基、馬鈴薯-葡萄糖-水培養(yǎng)基、酵母浸出粉-復(fù)合氨基酸-蔗糖培養(yǎng)基，酵母浸出粉-白砂糖-大豆水解蛋白培養(yǎng)基，麩皮煮汁-白砂糖培養(yǎng)基等。本發(fā)明步驟2中所述固體培養(yǎng)基為本領(lǐng)域常規(guī)固體培養(yǎng)基，如谷物培養(yǎng)基，可選自小麥、玉米、大米、小米、黃豆粉、蕎麥、大麥、燕麥、糙米、粳米中的任意一種或幾種；農(nóng)作物秸桿培養(yǎng)基，如麥稈、玉米桿、棉桿、豆桿、芝麻桿中的任意一種或幾種；農(nóng)作物皮殼培養(yǎng)基，如麩皮、大豆皮、棉籽殼等；經(jīng)濟(jì)林木樹枝培養(yǎng)基等；其中優(yōu)選谷物培養(yǎng)基。本發(fā)明中所述蟬花(IsariacicadaeMiquel)是廣布種，廣泛分布在我國秦嶺-淮河以南的18個省、市、區(qū)。在我國長江以南的亞熱帶和熱帶地區(qū)，且多在低洼地帶及滇藏高原的金沙江、怒江、瀾滄江和雅魯藏布江等河谷地帶。只要在其生長季節(jié)，每年的6～8月，按照一般中藥材的采集方法都可采到，是現(xiàn)有技術(shù)中已知菌種，并可以從商業(yè)途徑購買獲得。本發(fā)明所用的蟬花菌株為第CN201110178274.6號專利中公開的保藏號為CGMCCNo.3453的蟬擬青霉菌株[Paecilomycescicadae(Miq.)Samson]。本發(fā)明培養(yǎng)方法的有益效果在于：①雙向培養(yǎng)能夠更充分地利用和轉(zhuǎn)化培養(yǎng)基，孢梗束得率較單向培養(yǎng)提高了20-40％，而產(chǎn)品的內(nèi)在質(zhì)量與單面培養(yǎng)相比無顯著性差異；②雙向培養(yǎng)能夠更充分地利用了培養(yǎng)空間；③雙向培養(yǎng)的培養(yǎng)周期較單向培養(yǎng)明顯縮短(可節(jié)省2d)，節(jié)約了生產(chǎn)成本，增加了年生產(chǎn)批次。附圖說明圖1柵欄狀支架俯視圖1.支架；2.長方形延伸；3.橫梁圖2培養(yǎng)盒示意圖1.上盒蓋；2.透氣膜孔；3.支架；4.下盒蓋具體實(shí)施方式實(shí)驗(yàn)例1蟬花菌種的擴(kuò)大培養(yǎng)斜面培養(yǎng)：將分離純化的菌種接種于斜面試管中，再將接種菌種的斜面試管放入22℃培養(yǎng)箱，培養(yǎng)時間為7天，待菌絲長滿試管；搖瓶培養(yǎng)：在500m1三角瓶中裝入200m1液體培養(yǎng)基，在0.11Mpa壓力下高壓滅菌30分鐘，待冷卻至室溫，將1支斜面試管的菌種接種到500m1三角瓶培養(yǎng)基上，并置于恒溫振蕩培養(yǎng)箱，溫度22±1℃，150轉(zhuǎn)/分鐘條件下培養(yǎng)，培養(yǎng)時間為3天；種子罐培養(yǎng)：在50L氣升式發(fā)酵罐中裝入20L液體培養(yǎng)基，培養(yǎng)基溫度大于95℃，加入食用消泡劑，加入量為培養(yǎng)基重量的0.03％，在0.11Mpa壓力下，通入蒸汽加熱到121℃，并保壓30～45分鐘；滅菌后，冷卻至20℃時，將4瓶上述培養(yǎng)好的500m1搖瓶菌種接入培養(yǎng)基，培養(yǎng)溫度為22±1℃，通氣量為1：0.5V/Vmin，保壓4.903～7.0845×104Pa，經(jīng)3天通氣培養(yǎng)，達(dá)到對數(shù)生長期后即可，終培養(yǎng)體積為20L。發(fā)酵罐培養(yǎng)：在500L氣升式發(fā)酵罐中裝入200L液體培養(yǎng)基，培養(yǎng)基溫度大于95℃，加入食用消泡劑，加入量為培養(yǎng)基重量的0.03％，在0.11Mpa壓力下，通入蒸汽加熱到121℃，并保壓30～45分鐘；滅菌后，冷卻至20℃時，將上述培養(yǎng)好的200L種子罐種子全部接入培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為22±1℃，通氣量為1：0.5V/Vmin，保壓4.903～7.0845×104Pa，經(jīng)3天通氣培養(yǎng)，達(dá)到對數(shù)生長期后即可。終培養(yǎng)體積為200L。斜面試管培養(yǎng)基：每1升液體含有200克馬鈴薯煮汁，20克蔗糖，20克瓊脂，余補(bǔ)水至1000毫升，pH值為6.5；搖瓶、種子罐及發(fā)酵罐中的液體培養(yǎng)基：含有酵母浸出粉1％，復(fù)合氨基酸0.5％，白砂糖3.5％，余量補(bǔ)水至100％，pH值為6.5。實(shí)驗(yàn)例2蟬花菌種的擴(kuò)大培養(yǎng)斜面培養(yǎng)：將分離純化的菌種接種于斜面試管中，再將接種菌種的斜面試管放入22℃培養(yǎng)箱，培養(yǎng)時間為7天，待菌絲長滿試管；搖瓶培養(yǎng)：在500m1三角瓶中裝入200m1液體培養(yǎng)基，在0.11Mpa壓力下高壓滅菌30分鐘，待冷卻至室溫，將1支斜面試管的菌種接種到500m1三角瓶培養(yǎng)基上，并置于恒溫振蕩培養(yǎng)箱，溫度22±1℃，150轉(zhuǎn)/分鐘條件下培養(yǎng)，培養(yǎng)時間為3天；種子罐培養(yǎng)：在50L氣升式發(fā)酵罐中裝入20L液體培養(yǎng)基，培養(yǎng)基溫度大于95℃，加入食用消泡劑，加入量為培養(yǎng)基重量的0.03％，在0.11Mpa壓力下，通入蒸汽加熱到121℃，并保壓30～45分鐘；滅菌后，冷卻至20℃時，將4瓶上述培養(yǎng)好的500m1搖瓶菌種接入培養(yǎng)基，培養(yǎng)溫度為22±1℃，通氣 量為1：0.5V/Vmin，保壓4.903～7.0845×104Pa，經(jīng)3天通氣培養(yǎng)，達(dá)到對數(shù)生長期后即可，終培養(yǎng)體積為20L。斜面試管培養(yǎng)基：每1升液體含有200克馬鈴薯煮汁，20克蔗糖，20克瓊脂，余補(bǔ)水至1000毫升，pH值為6.5；搖瓶及種子罐培養(yǎng)基：每1升液體含有30克酵母浸出粉，30克白砂糖，5克大豆水解蛋白，加水補(bǔ)至1000毫升，pH值為6.5。實(shí)驗(yàn)例3蟬花菌種的擴(kuò)大培養(yǎng)斜面培養(yǎng)：將分離純化的菌種接種于斜面試管中，再將接種菌種的斜面試管放入22℃培養(yǎng)箱，培養(yǎng)時間為7天，待菌絲長滿試管；種子罐培養(yǎng)：在50L氣升式種子罐中裝入20L液體培養(yǎng)基，培養(yǎng)基溫度大于95℃，加入食用消泡劑，加入量為培養(yǎng)基重量的0.03％，在0.11Mpa壓力下，通入蒸汽加熱到121℃，并保壓30～45分鐘；滅菌后，冷卻至20℃時，將4瓶上述斜面試管的菌種接入培養(yǎng)基，培養(yǎng)溫度為22±1℃，通氣量為1：0.5V/Vmin，保壓4.903～7.0845×104Pa，經(jīng)3天通氣培養(yǎng)，達(dá)到對數(shù)生長期后即可，終培養(yǎng)體積為20L。發(fā)酵罐培養(yǎng)：在500L氣升式發(fā)酵罐中裝入200L液體培養(yǎng)基，培養(yǎng)基溫度大于95℃，加入食用消泡劑，加入量為培養(yǎng)基重量的0.03％,在0.11Mpa壓力下，通入蒸汽加熱到121℃，并保壓30～45分鐘；滅菌后，冷卻至20℃時，將上述培養(yǎng)好的200L種子罐種子全部接入培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為22±1℃，通氣量為1：0.5V/Vmin，保壓4.903～7.0845×104Pa，經(jīng)3天通氣培養(yǎng)，達(dá)到對數(shù)生長期后即可。終培養(yǎng)體積為200L。斜面試管培養(yǎng)基：每1升液體含有200克馬鈴薯煮汁，20克蔗糖，20克瓊脂，余補(bǔ)水至1000毫升，pH值為6.5；種子罐及發(fā)酵罐培養(yǎng)基：每1升液體含有40克麩皮煮汁，30克白砂糖，余補(bǔ)水至1000毫升，pH值為6.5。實(shí)施例4固體發(fā)酵培養(yǎng)培養(yǎng)容器：耐高壓滅菌的塑料袋，在塑料袋中置入一個柵欄狀支架，如圖1所示，所述支架包括支架1和長方形延伸2，所述長方形延伸2位于支架1的兩側(cè)。當(dāng)對培養(yǎng)基進(jìn)行懸空處理時，將支架兩側(cè)的長方形延伸2放置于橫梁3即可。固體培養(yǎng)基：將小麥清洗控水后，加入適量的水，其重量比為小麥:水為1：1.4，拌勻后裝入塑料袋中，扎緊袋口。將裝好培養(yǎng)基的培養(yǎng)容器放置滅菌鍋內(nèi)，121℃下滅菌30～50min；滅菌后，培養(yǎng)容器移置緩沖室內(nèi)，自然冷卻至24℃以下移置接種室內(nèi)。接種：接種前培養(yǎng)容器先在超凈工作臺或百級層流罩內(nèi)(下)用紫外光照射0.5h；每個塑料袋中按7％的接種量接種實(shí)施例1得到的菌種，接種后的塑料袋放入培養(yǎng)室培養(yǎng)。培養(yǎng)過程和培養(yǎng)條件：菌絲體生長階段，培養(yǎng)室溫度為22～24℃，空氣相對濕度65％～70％，將培養(yǎng)室遮光，使發(fā)菌室基本黑暗；待菌絲體長滿培養(yǎng)基時，培養(yǎng)基由于菌絲滲透、扭結(jié)并與其中的小麥顆粒相互纏繞而逐漸板結(jié)，轉(zhuǎn)入光照培養(yǎng)，同時將平鋪于柵欄支架上的已經(jīng)板結(jié)的培養(yǎng)基進(jìn)行懸空處理，即將塑料袋中柵欄狀支架的兩側(cè)延伸分別放置在橫梁上，從而將培養(yǎng)基質(zhì)懸空，塑料袋上下均保持12～16cm對稱的培養(yǎng)空間。此后為誘導(dǎo)形成孢梗束時期，培養(yǎng)室溫度為20～22℃，空氣相對濕度65％～70％，保證有散射光(100Lx～200Lx)誘導(dǎo)孢梗束形成。培養(yǎng)室要適時通風(fēng)換氣，保持發(fā)菌室空氣新鮮。采收及處理：至孢梗束成熟，尚未大量產(chǎn)生孢子時進(jìn)行采收；采收后的孢梗束在相對濕度45％～50％的除濕間除濕40h～50h，進(jìn)入烘干室準(zhǔn)備烘干。烘箱設(shè)置溫度60℃，干燥時間8h～10h。干燥結(jié)束后裝入PE袋中，扎口放置陰涼干燥處。干燥結(jié)束測定孢梗束水分，其應(yīng)≤6％。實(shí)施例5固體發(fā)酵培養(yǎng)培養(yǎng)容器：聚丙烯培養(yǎng)盒，如圖2所示，所述培養(yǎng)盒包括上盒蓋1、透氣膜孔2、支架3和下盒蓋4，所述支架3固定于下盒蓋4上，距離上盒蓋頂 和下盒蓋均14cm，支架平面距離下盒蓋口的平面2.5cm，在上盒蓋1和下盒蓋4上分別有兩個透氣膜孔2，上貼透氣膜；當(dāng)對培養(yǎng)基進(jìn)行懸空處理時，緩慢將培養(yǎng)盒上下倒置，培養(yǎng)基就會在重力作用下平落支架3上。固體培養(yǎng)基：將大米清洗控水后，加入適量的水，其重量比為大米:水為1：1.3，拌勻后裝入培養(yǎng)盒中，此時上盒蓋在下，下盒在上，培養(yǎng)基在上盒蓋里。將裝好培養(yǎng)基的培養(yǎng)容器放置滅菌鍋內(nèi)，121℃下滅菌30～50min；滅菌后，培養(yǎng)容器移置緩沖室內(nèi)，自然冷卻至24℃以下移置接種室內(nèi)。接種：接種前培養(yǎng)容器先在超凈工作臺或百級層流罩內(nèi)(下)用紫外光照射0.5h；每個培養(yǎng)容器按5％的接種量接種實(shí)施例2得到的菌種，接種后的容器放入培養(yǎng)室培養(yǎng)。培養(yǎng)過程和培養(yǎng)條件：菌絲體生長階段，培養(yǎng)室溫度為22～24℃，空氣相對濕度65％～70％，將培養(yǎng)室遮光，使發(fā)菌室基本黑暗；待菌絲體長滿培養(yǎng)基時，培養(yǎng)基由于菌絲滲透、扭結(jié)并與其中的小麥顆粒相互纏繞而逐漸板結(jié)，轉(zhuǎn)入光照培養(yǎng)，同時將已經(jīng)板結(jié)的培養(yǎng)基質(zhì)進(jìn)行懸空處理，即緩慢將培養(yǎng)盒上下倒置，已經(jīng)板結(jié)的培養(yǎng)基就會在重力作用下平落支架上。此后為誘導(dǎo)形成孢梗束時期，培養(yǎng)室溫度為20～22℃，空氣相對濕度65％～70％，保證有散射光(100Lx～200Lx)誘導(dǎo)孢梗束形成。培養(yǎng)室要適時通風(fēng)換氣，保持發(fā)菌室空氣新鮮。采收及處理：同實(shí)施例4。實(shí)施例6固體發(fā)酵培養(yǎng)培養(yǎng)容器：耐高壓滅菌的塑料袋，在塑料袋中置入一個柵欄狀支架，如圖1所示，所述支架包括不銹鋼支架1和長方形延伸2，所述長方形延伸2位于不銹鋼支架1的兩側(cè)，當(dāng)對培養(yǎng)基進(jìn)行懸空處理時，將支架兩側(cè)的長方形延伸2放置于橫梁3即可。固體培養(yǎng)基：將糙米清洗控水后，加入適量的水，其重量比為糙米：水為1：1.5，拌勻后裝入塑料袋中，扎緊袋口。將裝好培養(yǎng)基的培養(yǎng)容器放置滅菌鍋內(nèi)，121℃下滅菌30～50min；滅菌后，培養(yǎng)容器移置緩沖室內(nèi)，自 然冷卻至24℃以下移置接種室內(nèi)。接種：接種前培養(yǎng)容器先在超凈工作臺或百級層流罩內(nèi)(下)用紫外光照射0.5h；每個塑料袋中按7％的接種量接種實(shí)施例3得到的菌種，接種后的塑料袋放入培養(yǎng)室培養(yǎng)。培養(yǎng)過程和培養(yǎng)條件：菌絲體生長階段，培養(yǎng)室溫度為22～24℃，空氣相對濕度65％～70％，將培養(yǎng)室遮光，使發(fā)菌室基本黑暗；待菌絲體長滿培養(yǎng)基時，培養(yǎng)基由于菌絲滲透、扭結(jié)并與其中的小麥顆粒相互纏繞而逐漸板結(jié)，轉(zhuǎn)入光照培養(yǎng)，同時將平鋪于柵欄裝支架上的已經(jīng)板結(jié)的培養(yǎng)基進(jìn)行懸空處理，即將塑料袋中柵欄狀支架的兩側(cè)延伸分別擱在梁上，從而將培養(yǎng)基質(zhì)懸空，塑料袋上下均保持12～16cm對稱的培養(yǎng)空間。此后為誘導(dǎo)形成孢梗束時期，培養(yǎng)室溫度為20～22℃，空氣相對濕度65％～70％，保證有散射光(100Lx～200Lx)誘導(dǎo)孢梗束形成。培養(yǎng)室要適時通風(fēng)換氣，保持發(fā)菌室空氣新鮮。采收及處理：同實(shí)施例4。實(shí)施例7固體發(fā)酵培養(yǎng)培養(yǎng)容器：聚丙烯培養(yǎng)盒，如圖2所示，所述培養(yǎng)盒包括上盒蓋1、透氣膜孔2、支架3和下盒蓋4，所述支架3固定于下盒蓋4上，距離上盒蓋頂和下盒蓋均14cm，支架平面距離下盒蓋口的平面2.5cm，在上盒蓋1和下盒蓋4上分別有兩個透氣膜孔2，上貼透氣膜，當(dāng)對培養(yǎng)基進(jìn)行懸空處理時，緩慢將培養(yǎng)盒上下倒置，培養(yǎng)基就會在重力作用下平落支架3上。固體培養(yǎng)基：小米清洗控水后，加入適量的水，其重量比為小米:水為1：1.3，拌勻后裝入培養(yǎng)盒中，此時上盒蓋在下，下盒在上，培養(yǎng)基在上盒蓋里。將裝好培養(yǎng)基的培養(yǎng)容器放置滅菌鍋內(nèi)，121℃下滅菌30～50min；滅菌后，培養(yǎng)容器移置緩沖室內(nèi)，自然冷卻至24℃以下移置接種室內(nèi)。接種：接種前培養(yǎng)容器先在超凈工作臺或百級層流罩內(nèi)(下)用紫外光照射0.5h；每個培養(yǎng)容器按5％的接種量接種實(shí)施例1得到的菌種，接種后的容器放入培養(yǎng)室培養(yǎng)。培養(yǎng)過程和培養(yǎng)條件：菌絲體生長階段，培養(yǎng)室溫度為22～24℃，空氣相對濕度65％～70％，將培養(yǎng)室遮光，使發(fā)菌室基本黑暗；待菌絲體長滿培養(yǎng)基時，培養(yǎng)基由于菌絲滲透、扭結(jié)并與其中的小麥顆粒相互纏繞而逐漸板結(jié)，轉(zhuǎn)入光照培養(yǎng)，同時將已經(jīng)板結(jié)的培養(yǎng)基質(zhì)進(jìn)行懸空處理，即緩慢將培養(yǎng)盒上下倒置，已經(jīng)板結(jié)的培養(yǎng)基就會在重力作用下平落在柵欄橫桿上。此后為誘導(dǎo)形成孢梗束時期，培養(yǎng)室溫度為20～22℃，空氣相對濕度65％～70％，保證有散射光(100Lx～200Lx)誘導(dǎo)孢梗束形成。培養(yǎng)室要適時通風(fēng)換氣，保持發(fā)菌室空氣新鮮。采收及處理：同實(shí)施例4。實(shí)施例8對照實(shí)施例固體培養(yǎng)基：將小麥清洗控水后，加入適量的水，其重量比為小麥:水為1：1.4，拌勻后裝入密封的聚丙烯盒子中(盒子上方蓋打孔，孔上貼中有透氣膜)；將裝好培養(yǎng)基的培養(yǎng)容器放置滅菌鍋內(nèi)，121℃下滅菌30～50min；滅菌后，培養(yǎng)容器移置緩沖室內(nèi)，自然冷卻至24℃以下移置接種室內(nèi)。接種：接種前培養(yǎng)容器先在超凈工作臺或百級層流罩內(nèi)(下)用紫外光照射0.5h；每個培養(yǎng)容器按7％的接種量接種實(shí)施例1得到的菌種，接種后的容器放入培養(yǎng)室培養(yǎng)。培養(yǎng)條件：培養(yǎng)室溫度為22～24℃，空氣相對濕度65％～70％；首先要將培養(yǎng)室遮光，使發(fā)菌室基本黑暗。待菌絲體長滿培養(yǎng)基時，轉(zhuǎn)入光照培養(yǎng)。接種后定期檢查，及時剔除生長勢差、感染雜菌的培養(yǎng)容器。此后為誘導(dǎo)形成孢梗束時期，保持培養(yǎng)室溫度為20～22℃，相對空氣濕度65％～70％，保證有散射光(100Lx～200Lx)誘導(dǎo)孢梗束形成。培養(yǎng)室要適時通風(fēng)換氣，保持發(fā)菌室空氣新鮮。采收及處理：同實(shí)施例4。培養(yǎng)結(jié)果比較1、實(shí)施例4-8固體培養(yǎng)時間和孢梗束得率結(jié)果比較，結(jié)果見表1。表1培養(yǎng)時間和孢梗束得率結(jié)果培養(yǎng)時間/天孢梗束得率％實(shí)施例42614.1±1.35Aa實(shí)施例52612.2±1.02Bb實(shí)施例62613.1±1.30Aa實(shí)施例72613.5±1.24Aa實(shí)施例82811.0±1.03Cc2、實(shí)施例4及實(shí)施例8孢梗束營養(yǎng)成分含量比較，結(jié)果見表2。表2孢梗束營養(yǎng)成分含量通過比較可以看出，實(shí)施例4～7的雙面培養(yǎng)較實(shí)施例8的單面培養(yǎng)具有明顯優(yōu)勢：①雙向培養(yǎng)能夠更充分地利用和轉(zhuǎn)化培養(yǎng)基，孢梗束得率較單向培養(yǎng)提高了20～40％，而產(chǎn)品的內(nèi)在質(zhì)量與單面培養(yǎng)相比無顯著性差異；②雙向培養(yǎng)能夠更充分地利用了培養(yǎng)空間；③雙向培養(yǎng)的培養(yǎng)周期較單向培養(yǎng)明顯縮短(可節(jié)省2天)，節(jié)約了生產(chǎn)成本，增加了年生產(chǎn)批次。當(dāng)前第1頁1 2 3