本發(fā)明涉及萬古霉素的制備方法技術(shù)領(lǐng)域,尤其涉及一種通過嗎啉-正丙醛制備萬古霉素的制備方法。
背景技術(shù):
萬古霉素是抗生素的一種,其分子式為C66H74Cl2N9O24。其半衰期:4~8小時,腎衰竭9天,對厭氧菌和革蘭氏陰性細(xì)菌無效,血液透析不會移除。在印度等南亞國家出現(xiàn)的“超級病菌”NDM-1,已經(jīng)蔓延到英國、美國、加拿大、澳大利亞、荷蘭等國家,國內(nèi)專家稱南亞超級病菌不會大流行,萬古霉素能見效。
萬古霉素屬于糖肽類大分子抗生素,萬古霉素的藥力較強(qiáng),在其他抗生素對病菌無效時會被使用。主要用于葡萄球菌(包括耐青霉素和耐新青霉素株)、難辨梭狀芽胞桿菌等所致的系統(tǒng)感染和腸道感染,如心內(nèi)膜炎、敗血癥、偽膜性腸炎等。
為制得萬古霉素,需要通過離子交換、脫色、色譜分離、超濾、納濾、結(jié)晶、溶解、冷凍干燥等多種提取精制手段。其中結(jié)晶過程可以提高萬古霉素純度,去除部分色素等雜質(zhì),但因萬古霉素鹽酸鹽晶體生長緩慢,結(jié)晶過程易受雜質(zhì)干擾,結(jié)晶難度較大,僅僅通過離子交換和脫色的粗提取液很難結(jié)晶出來。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:
本發(fā)明的目的是克服現(xiàn)有技術(shù)的不足,提供一種通過嗎啉-正丙醛制備萬古霉素的制備方法。
本發(fā)明的技術(shù)方案如下:本發(fā)明提供一種通過嗎啉-正丙醛制備萬古霉素的制備方法,包括以下步驟:
a、取一定量的萬古霉素濾液加入配制好2%的破乳劑中攪拌均勻,在攪拌狀態(tài)下加入1/3的嗎啉-正丙醛,混合均勻,輸送至POD機(jī)的前混合器中,緩緩加稀硫酸,調(diào)節(jié)pH1.9-2.1,再次加入余下2/3嗎啉-正丙醛,開機(jī)混合,觀察水相與溶媒相分層時間,測萃取相酸水pH,分離出含凈抗生素活性洗脫液;
b、在沉淀容器中沉淀步驟a中所得的含凈抗生素活性洗脫液,得到晶體漿料,并且攪拌該晶體漿料,將PH值連續(xù)調(diào)節(jié)至所需程度,直至完全沉淀,得到晶體沉淀物;
c、將步驟b得到的晶體沉淀物溶解為水溶液,然后通過陰離子交換樹脂將其轉(zhuǎn)為萬古霉素。
本發(fā)明優(yōu)選的,根據(jù)步驟a中,所述稀硫酸的pH范圍為1.0~3.0。
本發(fā)明優(yōu)選的,根據(jù)步驟b中,通過在含凈抗生素活性洗脫液中加入與水互溶的有機(jī)溶劑來結(jié)晶,結(jié)晶前溶液中萬古霉素含量為5.0%~30.0%。
本發(fā)明優(yōu)選的,所述機(jī)溶劑為甲醇、乙醇、異丙醇或丙酮。
本發(fā)明優(yōu)選的,所述機(jī)溶劑加入量為:甲醇為2~6倍結(jié)晶液體積;乙醇為1.5~5.5倍結(jié)晶液體積;異丙醇為1.2~5倍結(jié)晶液體積;丙酮為1.0~4.5倍結(jié)晶液體積。
本發(fā)明優(yōu)選的,根據(jù)步驟b中,結(jié)晶過程起始溫度為25~60℃;結(jié)晶過程終點(diǎn)溫度為0~30℃;結(jié)晶過程降溫速度為0.5~5℃/分鐘。
本發(fā)明優(yōu)選的,根據(jù)步驟c中,晶體用水溶解后的萬古霉素濃度為1.0%~20.0%。
本發(fā)明優(yōu)選的,根據(jù)步驟c中,所述陰離子交換樹脂為717樹脂、D293樹脂或D301FD樹脂。
本發(fā)明優(yōu)選的,所述陰離子交換樹脂用量按制備1克萬古霉素需要用2~10mL的陰離子交換樹脂計(jì)。
本發(fā)明的有益效果如下:
采用上述方案,本發(fā)明制備所得萬古霉素有效組份大大得到提高,其它雜質(zhì)大大降低,純度很高,色譜純度可達(dá)到95%以上,同時產(chǎn)品外觀顏色得到明顯改觀,適于口服或注射給藥;本發(fā)明具有制作方法簡便和工藝流程適用于大批量生產(chǎn)的優(yōu)點(diǎn)。
附圖說明
圖1為本發(fā)明所述一種通過嗎啉-正丙醛制備萬古霉素的制備方法的流程圖。
具體實(shí)施方式
以下結(jié)合附圖和具體實(shí)施例,對本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)說明。
請參閱圖1,本發(fā)明提供一種通過嗎啉-正丙醛制備萬古霉素的制備方法,包括以下步驟:
a、取一定量的萬古霉素濾液加入配制好2%的破乳劑中攪拌均勻,在攪拌狀態(tài)下加入1/3的嗎啉-正丙醛,混合均勻,輸送至POD機(jī)的前混合器中,緩緩加稀硫酸,調(diào)節(jié)pH1.9-2.1,再次加入余下2/3嗎啉-正丙醛,開機(jī)混合,觀察水相與溶媒相分層時間,測萃取相酸水pH,分離出含凈抗生素活性洗脫液;
b、在沉淀容器中沉淀步驟a中所得的含凈抗生素活性洗脫液,得到晶體漿料,并且攪拌該晶體漿料,將PH值連續(xù)調(diào)節(jié)至所需程度,直至完全沉 淀,得到晶體沉淀物;
c、將步驟b得到的晶體沉淀物溶解為水溶液,然后通過陰離子交換樹脂將其轉(zhuǎn)為萬古霉素。
根據(jù)步驟a中,所述稀硫酸的pH范圍為1.0~3.0。
根據(jù)步驟b中,通過在含凈抗生素活性洗脫液中加入與水互溶的有機(jī)溶劑來結(jié)晶,結(jié)晶前溶液中萬古霉素含量為5.0%~30.0%。
所述機(jī)溶劑為甲醇、乙醇、異丙醇或丙酮。
所述機(jī)溶劑加入量為:甲醇為2~6倍結(jié)晶液體積;乙醇為1.5~5.5倍結(jié)晶液體積;異丙醇為1.2~5倍結(jié)晶液體積;丙酮為1.0~4.5倍結(jié)晶液體積。
根據(jù)步驟b中,結(jié)晶過程起始溫度為25~60℃;結(jié)晶過程終點(diǎn)溫度為0~30℃;結(jié)晶過程降溫速度為0.5~5℃/分鐘。
根據(jù)步驟c中,晶體用水溶解后的萬古霉素濃度為1.0%~20.0%。
根據(jù)步驟c中,所述陰離子交換樹脂為717樹脂、D293樹脂或D301FD樹脂。
所述陰離子交換樹脂用量按制備1克萬古霉素需要用2~10mL的陰離子交換樹脂計(jì)。
實(shí)施例一:
本發(fā)明包括以下步驟:
a、取一定量的萬古霉素濾液加入配制好2%的破乳劑中攪拌均勻,在攪拌狀態(tài)下加入1/3的嗎啉-正丙醛,混合均勻,輸送至POD機(jī)的前混合器中,緩緩加稀硫酸,調(diào)節(jié)pH1.9,再次加入余下2/3嗎啉-正丙醛,開機(jī)混合,觀察水相與溶媒相分層時間,測萃取相酸水pH,分離出含凈抗生素活性洗 脫液,所述稀硫酸的pH范圍為1.0;
b、在沉淀容器中沉淀步驟a中所得的含凈抗生素活性洗脫液,得到晶體漿料,并且攪拌該晶體漿料,將PH值連續(xù)調(diào)節(jié)至所需程度,直至完全沉淀,得到晶體沉淀物,通過在含凈抗生素活性洗脫液中加入與水互溶的有機(jī)溶劑來結(jié)晶,結(jié)晶前溶液中萬古霉素含量為5.0%,所述機(jī)溶劑為甲醇,所述機(jī)溶劑加入量為:甲醇為2~6倍結(jié)晶液體積;結(jié)晶過程起始溫度為25℃;結(jié)晶過程終點(diǎn)溫度為0℃;結(jié)晶過程降溫速度為0.5℃/分鐘;
c、將步驟b得到的晶體沉淀物溶解為水溶液,然后通過陰離子交換樹脂將其轉(zhuǎn)為萬古霉素,晶體用水溶解后的萬古霉素濃度為1.0%,所述陰離子交換樹脂為717樹脂,所述陰離子交換樹脂用量按制備1克萬古霉素需要用2mL的陰離子交換樹脂計(jì)。
實(shí)施例一:
本發(fā)明包括以下步驟:
a、取一定量的萬古霉素濾液加入配制好2%的破乳劑中攪拌均勻,在攪拌狀態(tài)下加入1/3的嗎啉-正丙醛,混合均勻,輸送至POD機(jī)的前混合器中,緩緩加稀硫酸,調(diào)節(jié)pH2.1,再次加入余下2/3嗎啉-正丙醛,開機(jī)混合,觀察水相與溶媒相分層時間,測萃取相酸水pH,分離出含凈抗生素活性洗脫液,所述稀硫酸的pH范圍為3.0;
b、在沉淀容器中沉淀步驟a中所得的含凈抗生素活性洗脫液,得到晶體漿料,并且攪拌該晶體漿料,將PH值連續(xù)調(diào)節(jié)至所需程度,直至完全沉淀,得到晶體沉淀物,通過在含凈抗生素活性洗脫液中加入與水互溶的有 機(jī)溶劑來結(jié)晶,結(jié)晶前溶液中萬古霉素含量為30.0%,所述機(jī)溶劑為丙酮,所述機(jī)溶劑加入量為:丙酮為1.0~4.5倍結(jié)晶液體積,結(jié)晶過程起始溫度為60℃;結(jié)晶過程終點(diǎn)溫度為30℃;結(jié)晶過程降溫速度為5℃/分鐘;
c、將步驟b得到的晶體沉淀物溶解為水溶液,然后通過陰離子交換樹脂將其轉(zhuǎn)為萬古霉素,晶體用水溶解后的萬古霉素濃度為20.0%,所述陰離子交換樹脂為D293樹脂,所述陰離子交換樹脂用量按制備1克萬古霉素需要用10mL的陰離子交換樹脂計(jì)。
綜上所述,采用上述方案,本發(fā)明制備所得萬古霉素有效組份大大得到提高,其它雜質(zhì)大大降低,純度很高,色譜純度可達(dá)到95%以上,同時產(chǎn)品外觀顏色得到明顯改觀,適于口服或注射給藥;本發(fā)明具有制作方法簡便和工藝流程適用于大批量生產(chǎn)的優(yōu)點(diǎn)。
以上僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例而已,并不用于限制本發(fā)明,凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)所作的任何修改、等同替換和改進(jìn)等,均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。