本公開的化合物可用于治療對GABA_A受體復(fù)合物的調(diào)節(jié)響應(yīng)的疾病和病癥。GABA_A受體超家族代表主要的抑制性神經(jīng)遞質(zhì)γ-氨基丁酸或GABA通過其起作用的受體類別中的一種。廣泛地，盡管不均勻地在哺乳動(dòng)物的大腦分布，GABA通過稱為GABA A受體的蛋白質(zhì)的復(fù)合物介導(dǎo)其許多動(dòng)作，這導(dǎo)致氯化物傳導(dǎo)性和膜極化改變。

已經(jīng)鑒定了GABA_A受體亞基的許多cDNA。迄今，已經(jīng)鑒定了至少6α、3β、3γ、1ε、1δ和2rho亞基。通?？山邮艿氖?，天然的GABA A受體典型地由2α、2β和1γ亞基組成(Pritchett和Seeburg Science 1989；245:1389-1392和Knight等人,Recept.Channels 1998；6:1-18)。證據(jù)例如信息分配、基因組定位和生化研究結(jié)果顯示主要的天然存在的受體組合是α1β2γ2、α2β3γ2、α3β3γ2和α5β3γ2(Mohler等人Neuroch.Res.1995；20(5):631-636)。

公開了與細(xì)胞表面受體結(jié)合的化合物特別是式I化合物。優(yōu)選的本發(fā)明的化合物與GABA受體結(jié)合，特別是這些化合物具有對GABA_A受體的親和力。因此，這些化合物被認(rèn)為在患者的寬范圍的疾病或病癥的治療中有潛在用途，其特征在于GABA_A受體的調(diào)節(jié)。

在一特定實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物被認(rèn)為可用于治療、預(yù)防或緩解焦慮癥例如有或沒有廣場恐怖癥的驚恐病、沒有驚恐病歷史的廣場恐怖癥、動(dòng)物和其它恐怖包括社交恐懼癥、強(qiáng)迫癥、和泛焦慮癥或物質(zhì)誘導(dǎo)的焦慮癥；應(yīng)激障礙包括創(chuàng)傷后和急性應(yīng)激障礙；睡眠障礙；記憶障礙；神 經(jīng)癥；驚厥性疾病如癲癇或小兒發(fā)熱驚厥；偏頭痛、情緒障礙；抑郁或雙相情感障礙例如單次發(fā)作或復(fù)發(fā)性嚴(yán)重抑郁障礙、心境惡劣障礙、I型和II型雙相躁狂障礙、和循環(huán)型情感障礙、精神病包括精神分裂癥；腦缺血引起的神經(jīng)變性；注意缺陷多動(dòng)障礙；疼痛和傷害感受；嘔吐包括急性、遲發(fā)性和預(yù)期性嘔吐，特別是通過化療或放射引起的嘔吐；暈動(dòng)病、手術(shù)后惡心和嘔吐；進(jìn)食障礙包括神經(jīng)性厭食和神經(jīng)性貪食；經(jīng)前期綜合征；神經(jīng)痛如三叉神經(jīng)痛；肌肉痙攣或痙攣狀態(tài)例如在截癱患者中的；藥物濫用或依賴的影響包括酒精戒斷；和認(rèn)知障礙例如阿爾茨海默氏??；腦缺血、中風(fēng)、頭部創(chuàng)傷；耳鳴、例如受時(shí)差或輪班工作的影響的個(gè)體中的晝夜節(jié)律紊亂。

本公開的新化合物是式I化合物或其互變異構(gòu)同等型

其中R1選自鹵素、硝基、低級(jí)烷基磺?；?、氰基、三氟甲基低級(jí)烷基、低級(jí)烷氧基、低級(jí)烷氧基羰基、羧基、低級(jí)烷基氨基磺?；⑷图?jí)烷基、低級(jí)烷硫基、羥基低級(jí)烷基、烷氧基低級(jí)烷基、低級(jí)烷硫基低級(jí)烷基、低級(jí)烷基亞磺?；图?jí)烷基、低級(jí)烷基磺?；图?jí)烷基、低級(jí)烷基亞磺?；?、低級(jí)烷酰基、芳?；⒎蓟?、芳基氧基，其中上面所用的術(shù)語“低級(jí)”優(yōu)選指1至3個(gè)碳原子，且R2選自氫、烷基、烷氧基、烷硫基和烷基羰基，各烷基基團(tuán)優(yōu)選具有1至3個(gè)碳原子，和它們的互變異構(gòu)同等型、非毒性的藥學(xué)上可接受的鹽或其前藥。

如本文所用并且除非另外指明，術(shù)語“藥學(xué)上可接受的鹽”包括該術(shù)語所涉及的化合物的非毒性的酸和堿加成鹽。可接受的非毒性的酸加成鹽包括由本領(lǐng)域已知的有機(jī)和無機(jī)酸或堿衍生的那些，所述酸包括例如鹽酸、 氫溴酸、磷酸、硫酸、甲磺酸、乙酸、酒石酸、乳酸、琥珀酸、檸檬酸、蘋果酸、馬來酸、山梨酸、烏頭酸、水楊酸、鄰苯二甲酸、栓塞酸(embolic acid)、庚酸等。性質(zhì)上是酸性的化合物能夠與各種藥學(xué)上可接受的堿形成鹽?？捎糜谥苽浯祟愃嵝曰衔锏乃帉W(xué)上可接受的堿加成鹽的堿是形成非毒性的堿加成鹽(即含藥理學(xué)上可接受的陽離子的鹽，例如但不限于堿金屬或堿土金屬鹽，并尤其是鈣、鎂、鈉或鉀鹽)的那些。適宜的有機(jī)堿包括但不限于N,N-二芐基乙二胺、氯普魯卡因、膽堿、二乙醇胺、乙二胺、葡甲胺(N-甲基葡糖胺)、賴氨酸、精氨酸或組氨酸和普魯卡因。

根據(jù)本公開的2-氰基-3-環(huán)丙基-3-羥基-N-芳基-硫代丙烯酰胺衍生物的生理上可接受的鹽可以是含有游離羧基的根據(jù)本公開的物質(zhì)/化合物的金屬或銨鹽。特別優(yōu)選的那些是例如鈉、鉀、鎂或鈣鹽，和由氨或有機(jī)胺例如乙胺、二-或三-乙胺、二-或三-乙醇胺、二甲基氨基乙醇、精氨酸、賴氨酸、組氨酸或乙二胺衍生的銨鹽。

如本文所用并且除非另外指明，術(shù)語“前藥”是指化合物的衍生物，其能夠在生物條件(體外或體內(nèi))下水解、氧化或以其他方式反應(yīng)，以提供所述化合物。前藥的實(shí)例包括但不限于包含可生物水解部分的根據(jù)本公開的化合物的衍生物，所述可生物水解部分例如可生物水解的酰胺、可生物水解的酯、可生物水解的氨基甲酸酯、可生物水解的碳酸酯、可生物水解的酰脲和可生物水解的磷酸酯類似物。前藥的其他實(shí)例包括包含-NO、-NO2、-ONO或-ONO2部分的本公開的免疫調(diào)節(jié)化合物的衍生物。前藥可以典型地使用公知的方法例如Burger's Medicinal Chemistry and Drug Discovery,172-178,949-982(Manfred E.Wolff ed.,5th ed.1995)和Design of Prodrugs(H.Bundgaard ed.,Elselvier,New York 1985)中所述的那些來制備。如本文所用并且除非另外指明，術(shù)語“可生物水解的酰胺”、“可生物水解的酯”、“可生物水解的氨基甲酸酯”、“可生物水解的碳酸酯”、“可生物水解的酰脲”、“可生物水解的磷酸酯”分別是指化合物的酰胺、酯、氨基甲酸酯、碳酸酯、酰脲或磷酸酯，其：1)不干擾化合物的生物活性， 但能夠在體內(nèi)賦予化合物有利的性質(zhì)，諸如攝取、作用持續(xù)時(shí)間或作用起始；或者2)沒有生物活性，但是在體內(nèi)轉(zhuǎn)化成生物活性化合物?？缮锼獾孽サ膶?shí)例包括但不限于低級(jí)烷基酯、低級(jí)酰氧基烷基酯(如乙酰氧基甲基酯、乙酰氧基乙基酯、氨基羰基氧基甲基酯、新戊酰氧基甲基酯和新戊酰氧基乙基酯)、內(nèi)酯酯(例如酞基酯和硫代酞基酯)、低級(jí)烷氧基酰氧基烷基酯(如甲氧基羰基-氧基甲基酯、乙氧基羰基氧基乙基酯和異丙氧基羰基氧基乙基酯)、烷氧基烷基酯、膽堿酯和酰氨基烷基酯(如乙酰氨基甲基酯)。可生物水解的酰胺的實(shí)例包括但不限于低級(jí)烷基酰胺、[α]-氨基酸酰胺、烷氧基?；０泛屯榛被榛驶０??？缮锼獾陌被姿狨サ膶?shí)例包括但不限于低級(jí)烷基胺、取代的乙二胺、氨基酸、羥烷基胺、雜環(huán)和雜芳族胺以及聚醚胺。

各烷基具有1至3個(gè)碳原子的烷基、烷氧基、烷硫基和烷基羰基的實(shí)例是甲基、乙基、丙基和異丙基、甲氧基乙氧基、丙氧基和異丙氧基、甲硫基、乙硫基、丙硫基和異丙硫基和乙酰基、乙基羰基和丙基羰基。鹵素包括氟、氯、溴和碘。

優(yōu)選的式I化合物是其中R2是氫、甲基或乙基，且R1選自氟、氯、碘(jodine)、三氟甲基、氰基、硝基、甲烷亞磺?；?、甲烷磺?；?、三氟甲烷亞磺?；腿淄榛酋；哪切?。

尤其優(yōu)選的化合物是2-氰基-3-環(huán)丙基-3-羥基-N-(3-甲基-4-三氟甲基-苯基)-硫代丙烯酰胺、2-氰基-3-環(huán)丙基-3-羥基-N-(3-乙基-4-三氟甲基-苯基)-硫代丙烯酰胺、2-氰基-3-環(huán)丙基-N-(4-氟-3-甲基-苯基)-3-羥基-硫代丙烯酰胺、2-氰基-3-環(huán)丙基-N-(4-氟-3-乙基-苯基)-3-羥基-硫代丙烯酰胺、2-氰基-3-環(huán)丙基-N-(4-氟-苯基)-3-羥基-硫代丙烯酰胺2-氰基-3-環(huán)丙基-3-羥基-N-(3-甲基-4-硝基-苯基)-硫代丙烯酰胺、2-氰基-3-環(huán)丙基-3-羥基-N-(3-乙基-4-硝基-苯基)-硫代丙烯酰胺、2-氰基-3-環(huán)丙基-3-羥基-N-(4-硝基-苯基)-硫代丙烯酰胺、2-氰基-3-環(huán)丙基-3-羥基-N-(4-三氟甲烷亞磺?；?苯基)-硫代丙烯酰胺、2-氰基-N-(4-氰基-3-甲基-苯基)-3-環(huán)丙基-3-羥基-硫代丙烯酰胺、2-氰基-N-(4-氰基-3-乙基-苯基)-3-環(huán)丙基-3-羥基-硫代丙烯酰胺、2-氰基-N-(4-氰基-苯基)-3-環(huán)丙基-3-羥基-硫代丙烯酰胺、2-氰基-3-環(huán)丙基-3-羥基-N-(4-三氟甲烷亞磺酰基-3-甲基-苯基)-硫代丙烯酰胺、2-氰基-3-環(huán)丙基-3-羥基-N-(4-三氟-甲烷磺?；?苯基)-硫代丙烯酰胺、2-氰基-3-環(huán)丙基-3-羥基-N-(4-三氟甲烷磺酰基-3-甲基-苯基)-硫代丙烯酰胺、2-氰基-3-環(huán)丙基-3-羥基-N-(4-((三氟甲基)硫基)苯基)-硫代丙烯酰胺、2-氰基-3-環(huán)丙基-3-羥基-N-(3-甲基-4-((三氟甲基)硫基)苯基)-硫代丙烯酰胺、2-氰基-3-環(huán)丙基-N-(4-氯-3-甲基-苯基)-3-羥基-硫代丙烯酰胺、2-氰基-3-環(huán)丙基-N-(4-氯-3-乙基-苯基)-3-羥基-硫代丙烯酰胺、2-氰基-3-環(huán)丙基-N-(4-氯-苯基)-3-羥基-硫代丙烯酰胺和它們的互變異構(gòu)同等型、非毒性的藥學(xué)上可接受的鹽或其前藥。

本公開還涉及藥物組合物，其包含治療有效量的至少一種上述式I化合物或其互變異構(gòu)體或其任何異構(gòu)體或其異構(gòu)體的任何混合物、或上面所定義的其藥學(xué)上可接受的鹽，以及任選的至少一種可接受的和惰性的藥用載體、賦形劑或稀釋劑。

此外，本公開涉及作為藥物的上述化合物和組合物，其特別用于治療、預(yù)防或緩解焦慮癥例如有或沒有廣場恐怖癥的驚恐病、沒有驚恐病歷史的廣場恐怖癥、動(dòng)物和其它恐怖包括社交恐懼癥、強(qiáng)迫癥、和泛焦慮癥或物質(zhì)誘導(dǎo)的焦慮癥；應(yīng)激障礙包括創(chuàng)傷后和急性應(yīng)激障礙；睡眠障礙；記憶障礙；神經(jīng)癥；驚厥性疾病如癲癇或小兒發(fā)熱驚厥；偏頭痛、情緒障礙；抑郁或雙相情感障礙例如單次發(fā)作或復(fù)發(fā)性嚴(yán)重抑郁障礙、心境惡劣障礙、I型和II型雙相躁狂障礙、和循環(huán)型情感障礙、精神病包括精神分裂癥；腦缺血引起的神經(jīng)變性；注意缺陷多動(dòng)障礙；疼痛和傷害感受包括慢性疼痛、急性疼痛、神經(jīng)性疼痛、肌肉骨骼疼痛、炎性疼痛；嘔吐包括急性、遲發(fā)性和預(yù)期性嘔吐，特別是通過化療或放射引起的嘔吐；暈動(dòng)病、手術(shù)后惡心和嘔吐；進(jìn)食障礙包括神經(jīng)性厭食和神經(jīng)性貪食；經(jīng)前期綜合征；神經(jīng)痛如三叉神經(jīng)痛；肌肉痙攣或痙攣狀態(tài)例如在截癱患者中的；藥物濫用或依賴的影響包括酒精戒斷；和認(rèn)知障礙例如阿爾茨海默氏??；腦缺血、 中風(fēng)、頭部創(chuàng)傷；耳鳴、例如受時(shí)差或輪班工作的影響的個(gè)體中的晝夜節(jié)律紊亂或活動(dòng)物體包括人的，所述病癥、疾病或疾患對GABA_A受體復(fù)合物的調(diào)節(jié)響應(yīng)。這可包括向此類有其需要的活體施用治療有效量的如上面詳細(xì)描述的組合物的化合物的步驟。

光學(xué)純的組合物可使用已知的拆分劑或手性柱以及其它標(biāo)準(zhǔn)有機(jī)化學(xué)合成技術(shù)而不對稱地合成或者拆分。在本公開中使用的化合物可包括為外消旋的、立體異構(gòu)體富集的或立體異構(gòu)體純的化合物和其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑合物、立體異構(gòu)體和前藥。

如本文所用，并且除非另有說明，術(shù)語“溶劑合物”是指本公開的化合物或它的鹽，其還包括通過非共價(jià)分子間力結(jié)合的化學(xué)計(jì)量或非化學(xué)計(jì)量量的溶劑。當(dāng)溶劑是水時(shí)，所述溶劑合物是水合物。

如本文中所用，并且除非另外指明，術(shù)語“立體異構(gòu)體”包括所有對映異構(gòu)體純/立體異構(gòu)體純的和對映異構(gòu)體/立體異構(gòu)體富集的本公開的化合物。此外，術(shù)語“立體異構(gòu)體”還包括互變異構(gòu)體，其為很容易通過化學(xué)反應(yīng)(互變異構(gòu))互變的有機(jī)化合物的異構(gòu)體。

如本文所用，且除非另有說明，術(shù)語“立體異構(gòu)體純”或“對映異構(gòu)體純”是指化合物包含一種立體異構(gòu)體并且基本上不含其相反立體異構(gòu)體或?qū)τ丑w。例如，當(dāng)化合物包含80％、90％或95％或更多的一種立體異構(gòu)體和20％、10％或5％或更少的相反的立體異構(gòu)體時(shí)，化合物是立體異構(gòu)體或?qū)τ钞悩?gòu)體純的，在某些情況下，當(dāng)相對于特定的手性中心，化合物為約80％ee(對映體過量)或更大、優(yōu)選等于或大于90％ee，并且更優(yōu)選相對于特定的手性中心為95％ee時(shí)，本公開的化合物被認(rèn)為相對于手性中心是光學(xué)活性的或立體異構(gòu)體/對映異構(gòu)體純的{即基本上R-形式或基本上S-形式}的。

如本文所用，且除非另有說明，術(shù)語“立體異構(gòu)體富集的”或“對映異構(gòu)體富集的”包括外消旋混合物以及本公開的化合物的立體異構(gòu)體的其 它混合物{例如，R/S＝30/70、35/65、40/60、45/55、55/45、60/40、65/35和70/30)。本公開的各種抑制劑化合物含有一個(gè)或多個(gè)手性中心，并且可以作為對映體的外消旋混合物或非對映體的混合物存在。本公開包括立體異構(gòu)體純形式的這些化合物的應(yīng)用，以及那些形式的混合物的應(yīng)用。例如，包含等量或不等量的本公開的特定抑制劑化合物的對映異構(gòu)體的混合物可以在本公開的方法和組合物中使用。這些異構(gòu)體可被不對稱地合成或者使用標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)諸如手性柱或手性拆分劑拆分。見，例如，Jacques,J.,等人，Enantiomers,Racemates and Resolutions(Wiley-Interscience,New York,1981)；Wilen,S.H.,等人,Tetrahedron 33:2725(1977)；Eliel,E.L.,Stereochemistry of Carbon Compound(McGraw-Hill,NY,1962)；和Wilen,S.H.,Tables of Resolving Agents and Optical Resolutions p.268(E.L.Eliel,Ed.,Univ.of Notre Dame Press,Notre Dame,IN,1972)。

應(yīng)當(dāng)指出的是，如果描繪的結(jié)構(gòu)和給出該結(jié)構(gòu)的名稱之間有差異，則描繪的結(jié)構(gòu)將被給予更大的權(quán)重。此外，如果結(jié)構(gòu)或結(jié)構(gòu)的一部分的立體化學(xué)沒有用例如粗線或虛線指明，則該結(jié)構(gòu)或結(jié)構(gòu)的部分被解釋為包括其所有立體異構(gòu)體。

文中使用的術(shù)語“生理學(xué)功能衍生物”是指本身不是藥學(xué)活性的，但在體內(nèi)即在施用該化合物的個(gè)體中被轉(zhuǎn)換成它們的藥物活性形式的化合物。生理學(xué)功能衍生物的實(shí)例為前藥，如本申請?jiān)谝韵旅枋龅哪切?/p>

如本文所用的術(shù)語“衍生物”指的是從類似的化合物衍生的化合物或可被想象產(chǎn)生于另一化合物的化合物，如果一個(gè)原子被另一個(gè)原子或原子的組替換。如本文所用的術(shù)語“衍生物”還指至少在理論上可以從前體化合物而形成的化合物(參見Oxford Dictionary of Biochemistry and Molecular Biology.Oxford University Press.ISBN 0-19-850673-2)。

對于特定活性劑應(yīng)用的本公開的化合物的特定施用途徑的適用性將取決于活性劑本身(例如它是否可以通過口服施用，而在進(jìn)入血流之前不分解)和正在被治療的疾病。用于根據(jù)本公開的化合物的施用途徑的一個(gè)有利的 實(shí)施方案是口服。其它施用途徑是本領(lǐng)域中的普通技術(shù)人員已知的。

治療有效量的至少一種化合物的劑量不同，并且也取決于待治療的每個(gè)個(gè)體患者的年齡和狀況。在本公開的一個(gè)實(shí)施方案中，對于文中所述的疾患和病癥，本公開的化合物的推薦的每日劑量范圍位于從約的范圍內(nèi)，一般給予約1mg-10g/體、優(yōu)選5mg-5g/體和更優(yōu)選10mg-2g/體的活性成分的每日劑量用于預(yù)防和/或治療該疾病，以及一般施用約0.5-1mg、5mg、10mg、50mg、100mg、250mg、500mg、1g、2g和3g的平均單次劑量。

雖然施用至少一種化合物預(yù)防疾病的期限取決于物種和被預(yù)防的疾患的性質(zhì)和嚴(yán)重性而變化，但是該化合物通?？啥唐诨蜷L期即1周至1年施用給人類。

藥物組合物可以被用于制備個(gè)體的單一單位劑型。本公開的新化合物可以以藥物組合物的形式使用，例如，以固體、半固體或液體形式使用，其含有作為活性成分的一種或多種根據(jù)本公開的化合物以及適于口服、腸胃外、如靜脈內(nèi)、肌肉內(nèi)、鞘內(nèi)、皮下、腸內(nèi)、直腸內(nèi)或鼻內(nèi)施用的藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑?；钚猿煞挚梢岳缗c用于片劑、丸劑、膠囊劑、栓劑、溶液(例如鹽水)、乳劑、混懸劑(例如橄欖油)、軟膏和適合使用的任何其它形式的通常的非毒性的、藥學(xué)可接受的載體混合?？梢允褂玫妮d體是水、葡萄糖、乳糖阿拉伯膠、明膠、甘露醇、淀粉糊、三硅酸鎂、玉米淀粉、角蛋白、膠體二氧化硅、馬鈴薯淀粉、脲和固體、半固體或液體形式的其它適合用于制造制劑的載體，并且另外可以使用輔助劑、穩(wěn)定劑、增稠劑和著色劑和香料?；钚詫ο蠡衔镆宰阋灶A(yù)防和/或治療該疾病的有效量被包括在藥物組合物中。

本公開的單一單位劑型適于口服、粘膜(例如經(jīng)鼻、舌下、陰道、頰或直腸)、腸胃外(例如皮下、靜脈內(nèi)、推注、肌內(nèi)或動(dòng)脈內(nèi))、局部(例如滴眼劑或其他眼用制劑)、透皮或經(jīng)皮給藥至患者。劑型的實(shí)例包括但不限于：片劑；囊片；膠囊劑、例如軟彈性明膠膠囊；扁囊；含錠(troches)；錠劑(lozenges)；分散劑；栓劑；散劑；氣霧劑(例如鼻噴霧劑或吸入劑)；凝膠劑；適合于口服或粘膜施用至患者的液體劑型包括混懸劑(例如水性或非水性液體混懸劑、水包油乳劑、或水包油液體乳劑)、溶液劑和酏劑；適合于腸胃外施用至患者的液體劑型；滴眼劑或適于局部施用的其他眼用制劑；和可重構(gòu)以提供適于胃腸外施用至患者的液體劑型的無菌固體(例如晶體或無定形固體)。

本公開的劑型的組成、形狀和類型通常取決于其用途而不同。例如，與在相同疾病的長期治療中使用的劑型相比，在疾病的急性治療中使用的劑型可以包含更大量的一種或多種活性劑。同樣地，與用于治療相同疾病的口服劑型相比，腸胃外劑型可以包含更少量的一種或多種活性劑。其中由本公開涵蓋的具體劑型將彼此不同的這些和其他方式將是本領(lǐng)域技術(shù)人員顯而易見的。參見，例如，Remington’s Pharmaceutical Sciences,18th ed.,Mack Publishing,Easton PA(1990)。

典型的藥物組合物和劑型包含一種或多種賦形劑。合適的賦形劑是藥學(xué)領(lǐng)域的技術(shù)人員公知的，并且本文中提供了合適的賦形劑的非限制性實(shí)例。一種特定的賦形劑是否適于摻入藥物組合物或劑型中取決于本領(lǐng)域公知的多種因素，包括但不限于，其中該劑型將被施用于患者的方式。例如，口服劑型如片劑可含有不適于腸胃外劑型使用的賦形劑。特定賦形劑的適合性也可取決于劑型中的具體活性劑。例如，一些活性劑的分解可被一些賦形劑例如乳糖加速，或當(dāng)暴露于水時(shí)被加速。含有伯胺或仲胺的活性劑是特別易于這種加速分解的。因此，本公開包括含有極少(如果有的話)乳糖或其它單糖或二糖的藥物組合物和劑型。如本文所用，術(shù)語“無乳糖”表示存在的乳糖的量(如果有的話)不足以實(shí)質(zhì)上增加活性成分的降解速率。

本公開的不含乳糖的組合物可包括在本領(lǐng)域中熟知的，并且列在例如，美國藥典(USP)25-NF20(2002)中的賦形劑。一般而言，無乳糖組合物包含藥學(xué)上相容的和藥學(xué)上可接受量的活性成分、粘合劑/填充劑和潤滑劑。優(yōu) 選的無乳糖的劑型包含活性成分、微晶纖維素、預(yù)膠化淀粉和硬脂酸鎂。

本公開還包括含有活性成分的無水藥物組合物和劑型，因?yàn)樗赡艽龠M(jìn)一些化合物的降解。例如，加入水(例如5％)作為確定特性如貯存期限或制劑隨時(shí)間的穩(wěn)定性來模擬長期貯存的手段在制藥領(lǐng)域中是廣為接受的。參見例如Jens T.Carstensen,Drug Stability:Principles&Practice,2d.Ed.,Marcel Dekker,NY,NY,1995,pp.379-80。實(shí)際上，水和熱加速一些化合物的分解。因此，水對制劑的作用可能有很大的意義，因?yàn)樗趾?或濕度是在制造、處理、包裝、貯存、運(yùn)輸和使用制劑的過程中經(jīng)常遇到的。

本公開的無水藥物組合物和劑型可以使用無水或含有低水分的成分和低水分或低濕度條件來制備。如果預(yù)期制造、包裝和/或貯存過程中與水分和/或濕度發(fā)生實(shí)質(zhì)性接觸，包含乳糖和至少一種含有伯或仲胺的活性成分的藥物組合物和劑型優(yōu)選是無水的。無水藥物組合物應(yīng)該被制備和貯存，使得其無水性質(zhì)被保持。因此，無水組合物優(yōu)選使用已知防止暴露于水的材料包裝，使得它們可以被包含在合適的制劑盒中。合適的包裝的實(shí)例包括但不限于密封的箔、塑料、單位劑量容器(例如小瓶)、泡罩包裝和條帶包裝。

本公開還包括包含通過其降低活性成分分解速率的一種或多種化合物的藥物組合物和劑型。這樣的化合物，其在本文中稱為“穩(wěn)定劑”，包括但不限于抗氧化劑如抗壞血酸、pH緩沖劑或鹽緩沖劑。

如同賦形劑的量和類型，劑型中的活性劑的量和具體類型可根據(jù)各種因素例如但不限于施用給患者的途徑而不同。然而，本公開的典型劑型包含約0.10至約150mg的本公開的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑合物、水合物、立體異構(gòu)體、包合物或前藥。典型的劑型包含約0.1、1、2、5、7.5、10、12.5、15、17.5、20、25、50、100、150或200mg的本公開的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑合物、水合物、立體異構(gòu)體、包合物或前藥。在一個(gè)具體的實(shí)施方案中，優(yōu)選的劑型包含約1、2、5、10、25或50mg的量的根據(jù)本說明書的化合物。在一個(gè)具體實(shí)施方案中，優(yōu)選 的劑型包含約5、10、25或50mg的量的根據(jù)本說明書的化合物。

適合于口服施用的本公開的藥物組合物的口服劑型可以以離散的劑型例如但不限于片劑(例如咀嚼片)、囊片、膠囊和液體(例如矯味糖漿)提供。此類劑型包含預(yù)定量的活性成分，并且可以通過本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的藥學(xué)方法來制備。通常參見Remington's Pharmaceutical Sciences,18th ed.,Mack Publishing,Easton PA(1990)。

本公開的典型口服劑型通過按照常規(guī)藥物混合技術(shù)將活性成分與至少一種賦形劑充分混合而制得。賦形劑可以采取多種形式，這取決于施用所需的制劑形式。例如，適用于口服液體或氣霧劑劑型的賦形劑包括但不限于水、二醇、油、醇、矯味劑、防腐劑和著色劑。適用于固體口服劑型{例如散劑、片劑、膠囊和囊片)的賦形劑的實(shí)例包括但不限于淀粉、糖、微晶纖維素、稀釋劑、制粒劑、潤滑劑、粘合劑和崩解劑。

因?yàn)樗鼈円子谑┯?，片劑和膠囊代表最有利的口服劑量單位形式，其中使用固體賦形劑。如果需要，片劑可以通過標(biāo)準(zhǔn)水性或非水技術(shù)進(jìn)行包衣。此類劑型可通過任何藥學(xué)方法制備。一般而言，藥物組合物和劑型如下制備：均勻和緊密地將活性成分與液體載體、細(xì)碎的固體載體、或兩者混合，如果需要，然后將產(chǎn)物成形為所需的形式。

例如，片劑可以通過壓制或模制來制備。壓制的片劑可通過在合適的機(jī)器中壓制任選地與賦形劑混合的自由流動(dòng)形式的活性成分如粉末或顆粒來制備。模制片劑可通過在合適的機(jī)器中將用惰性液體稀釋劑潤濕的粉狀化合物的混合物模制來制備。

可以在本公開的口服劑型中使用的賦形劑的實(shí)例包括但不限于粘合劑、填充劑、崩解劑和潤滑劑。適用于藥物組合物和劑型的粘合劑包括但不限于玉米淀粉、馬鈴薯淀粉或其它淀粉、明膠、天然和合成的樹膠如阿拉伯膠、藻酸鈉、海藻酸、其它藻酸鹽、粉末黃蓍膠、瓜爾膠、纖維素及其衍生物{例如乙基纖維素、醋酸纖維素、羧甲基纖維素鈣、羧甲基纖維素 鈉)、聚乙烯吡咯烷酮、甲基纖維素、預(yù)膠化淀粉、羥丙基甲基纖維素{例如，Nos.2208,2906,2910)、微晶纖維素以及其混合物。

微晶纖維素的適當(dāng)形式包括但不限于以AVICEL-PH-101、AVICEL-PH-103AVICEL RC-581、AVICEL-PH-105銷售的材料(可購自FMC Corporation,American Viscose Division,Avicel Sales,Marcus Hook,PA)及其混合物。具體的粘合劑是作為AVICEL RC-581出售的微晶纖維素和羧甲基纖維素鈉的混合物。合適的無水或低水分的賦形劑或添加劑包括AVICEL-PH-103(TM)和淀粉1500LM。適用于本文所公開的藥物組合物和劑型的填充劑的實(shí)例包括但不限于滑石粉、碳酸鈣(例如顆?；蚍勰?、微晶纖維素、粉狀纖維素、葡萄糖結(jié)合劑(dextrate)、高嶺土、甘露醇、硅酸、山梨糖醇、淀粉、預(yù)膠化淀粉以及它們的混合物。在本公開的藥物組合物中的粘合劑或填充劑通常以藥物組合物或劑型的約50至約99重量％存在。

在本公開的組合物中使用崩解劑，以提供在暴露于水環(huán)境時(shí)發(fā)生崩解的片劑。包含太多崩解劑的片劑可能貯存時(shí)崩解，而含有太少可能不會(huì)以期望的速率或在期望的條件下崩解。因此，足夠量的崩解劑(既不太多也不太少，不會(huì)不利地改變活性成分的釋放)應(yīng)當(dāng)被用于形成本公開的固體口服劑型。崩解劑的使用量基于制劑的類型而變化，并且是易于由本領(lǐng)域中的普通技術(shù)人員確定的。典型的藥物組合物包含約0.5至約15重量％的崩解劑、優(yōu)選約1至約5重量％的崩解劑。

可以在本公開的藥物組合物和劑型中使用的崩解劑包括但不限于瓊脂、海藻酸、碳酸鈣、微晶纖維素、交聯(lián)羧甲纖維素鈉、交聚維酮、波拉克林鉀、淀粉羥乙酸鈉、馬鈴薯或木薯淀粉、其它淀粉、預(yù)膠化淀粉、其它淀粉、粘土、其它藻膠、其它纖維素、樹膠以及它們的混合物。

可以在本公開的藥物組合物和劑型使用的潤滑劑包括但不限于：硬脂酸鈣、硬脂酸鎂、礦物油、輕質(zhì)礦物油、甘油、山梨醇、甘露醇、聚乙二醇、其它二醇、硬脂酸、月桂基硫酸鈉、滑石粉、氫化植物油(例如花生油、棉籽油、葵花籽油、芝麻油、橄欖油、玉米油和大豆油)、硬脂酸鋅、油酸 乙酯、月桂酸乙酯、瓊脂及其混合物。其它的潤滑劑包括例如syloid硅膠(AEROSIL200，由W.R.Grace Co.of Baltimore,MD制造)、合成二氧化硅的凝結(jié)氣霧劑(由Degussa Co.of Piano,TX銷售)、CAB-O-SIL(由Cabot Co.of Boston,MA銷售的高熱產(chǎn)生的二氧化硅產(chǎn)品(pyrogenic silicon dioxide))以及它們的混合物。如果使用，潤滑劑通常以摻入其的藥物組合物或劑型的小于約1重量％的量使用。

本公開的優(yōu)選的固體口服劑型包含本公開的化合物、無水乳糖、微晶纖維素、聚乙烯吡咯烷酮、硬脂酸、膠體無水二氧化硅和明膠。

本公開的活性成分可以通過控釋裝置或通過本領(lǐng)域普通技術(shù)人員公知的遞送裝置施用。實(shí)例包括但不限于在美國專利：3,845,770；3,916,899；3,536,809；3,598,123；和4,008,719、5,674,533、5,059,595、5,591,767、5,120,548、5,073,543、5,639,476、5,354,556和5,733,566描述的那些，將其每一個(gè)通過引用并入本文。使用不同的比例以提供所需的釋放曲線的例如羥丙基甲基纖維素、其它聚合物基質(zhì)、凝膠、可滲透的膜、滲透系統(tǒng)、多層包衣、微粒、脂質(zhì)體、微球或它們的組合，這些劑型可用于提供一種或多種活性成分的緩慢釋放或控制釋放。本領(lǐng)域普通技術(shù)人員已知的合適的控釋制劑包括本文所述的那些可以容易地選擇用于本公開的活性成分。因此本公開包括適合于口服施用的單一單位劑型，例如但不限于適于控制釋放的片劑、膠囊、軟膠囊和囊片。

所有控釋藥物產(chǎn)品具有改善藥物治療超過其非控釋的對應(yīng)品的共同目標(biāo)。理想地，在醫(yī)學(xué)治療中最佳設(shè)計(jì)的控制釋放制劑的應(yīng)用特征在于在最小量的時(shí)間以最小的藥物物質(zhì)用來治愈或控制疾患?？蒯屩苿┑膬?yōu)點(diǎn)包括延長的藥物活性，降低的施用頻率，和增加的患者依從性。此外，控釋制劑可用于影響作用開始的時(shí)間或其它特性例如藥物的血液水平，并因此可以影響的副作用(例如不良作用)的發(fā)生。

大多數(shù)控釋制劑被設(shè)計(jì)成最初釋放迅速產(chǎn)生所需的治療效果的量的藥物(活性成分)，并逐步和連續(xù)釋放其它量的藥物以在較長時(shí)間內(nèi)維持該治 療或預(yù)防效果的水平。為了保持藥物在體內(nèi)的該恒定水平，藥物必須從劑型以將替換被代謝和從體內(nèi)排出的藥物量的速率釋放?；钚猿煞值目蒯尶梢酝ㄟ^各種條件來刺激，包括但不限于pH、溫度、酶、水或其它生理?xiàng)l件或化合物。

腸胃外劑型可以通過各種途徑施用至患者，所述途徑包括但不限于皮下、靜脈內(nèi)(包括推注)、肌內(nèi)和動(dòng)脈內(nèi)。因?yàn)樗鼈兊氖┯玫湫偷乩@過患者對抗污染物的天然防御，胃腸外劑型優(yōu)選是無菌的或能夠在施用給患者前被滅菌。腸胃外劑型的實(shí)例包括但不限于準(zhǔn)備用于注射的溶液、準(zhǔn)備被溶解或懸浮在藥學(xué)上可接受的用于注射的載體的干燥產(chǎn)品、準(zhǔn)備用于注射的混懸劑和乳劑?？捎糜谔峁┍竟_的腸胃外劑型的合適的溶媒是本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的。實(shí)例包括但不限于：USP注射用水；水性溶媒例如但不限于氯化鈉注射液、林格氏注射液、葡萄糖注射液、葡萄糖和氯化鈉注射液和乳酸化林格注射液；水混溶的溶媒例如但不限于乙醇、聚乙二醇和聚丙二醇；和非水性溶媒例如但不限于玉米油、棉籽油、花生油、芝麻油、油酸乙酯、肉豆蔻酸異丙酯和苯甲酸芐酯。

增加本文公開的一種或多種活性成分的溶解度的化合物也可以摻入到本公開的腸胃外劑型。例如，環(huán)糊精及其衍生物可以用來增加本公開的化合物和它的衍生物的溶解度。見，例如，美國專利號(hào)5,134,127，其通過引用并入本文。

本公開的局部和粘膜劑型包括但不限于噴霧劑、氣霧劑、溶液、乳劑、混懸劑、滴眼劑或其他眼用制劑或本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的其他形式。見例如Remington's Pharmaceutical Sciences,16th and 18th eds.,Mack Publishing,Easton PA(1980&1990)；和Introduction to Pharmaceutical Dosage Forms,4th ed.,Lea&Febiger,Philadelphia(1985)。適于治療口腔內(nèi)粘膜組織的劑型可以配制成漱口劑或口腔凝膠。

可以用來提供本公開涵蓋的局部和粘膜劑型的合適賦形劑{例如，載體和稀釋劑)和其它材料是制藥領(lǐng)域技術(shù)人員公知的，并且取決于給定藥物組 合物或劑型將被應(yīng)用的具體的組織?？紤]這一事實(shí)，典型的賦形劑包括但不限于：水、丙酮、乙醇、乙二醇、丙二醇、丁烷-1,3-二醇、肉豆蔻酸異丙酯、棕櫚酸異丙酯、礦物油、以及它們的混合物，以形成溶液、乳液或凝膠，其是無毒的和藥學(xué)上可接受的。如果需要，保濕劑或濕潤劑也可以加到藥物組合物和劑型中。這樣的添加成分的實(shí)例在本領(lǐng)域中是公知的。例如，見Remington's Pharmaceutical Sciences,16th and 18th eds.,Mack Publishing,Easton PA(1980&1990)。

藥物組合物或劑型的pH值也可以被調(diào)整，以改善一種或多種活性成分的遞送。類似地，溶劑載體的極性、其離子強(qiáng)度或張力可被調(diào)節(jié)以改善遞送。化合物例如硬脂酸鹽/酯還可被加入到藥物組合物或劑型中，以有利地改變一種或多種活性成分的親水性或親脂性，從而改善遞送。就此，硬脂酸鹽/酯可以充當(dāng)制劑的脂質(zhì)載體，作為乳化劑或表面活性劑，和作為遞送增強(qiáng)劑或滲透增強(qiáng)劑?；钚猿煞值牟煌柠}、水合物或溶劑合物可用于進(jìn)一步調(diào)節(jié)所得組合物的性質(zhì)。

典型地，本公開的活性成分優(yōu)選不同時(shí)或通過相同的施用途徑給予患者。因此本公開涵蓋藥盒，在由醫(yī)務(wù)人員使用時(shí)，其可以簡化向患者施用適當(dāng)量的活性成分。

本公開的典型的藥盒包含本公開的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑合物、水合物、立體異構(gòu)體、前藥或包合物的劑型。本公開的藥盒可進(jìn)一步包含另外的活性劑。所述另外的活性劑的實(shí)例包括但不限于本文公開的那些(參見，例如第4.2節(jié))。本公開的藥盒可進(jìn)一步包括用于施用活性成分的裝置。這樣的裝置的實(shí)例包括但不限于注射器、滴液袋、貼片和吸入劑。

本發(fā)明還涉及上述式I化合物或上述藥物組合物用于治療對GABA_A受體復(fù)合物的調(diào)節(jié)響應(yīng)的疾病和病癥的用途，所述疾病和病癥特別是以下疾?。航箲]癥例如有或沒有廣場恐怖癥的驚恐病、沒有驚恐病歷史的廣場恐怖癥、動(dòng)物和其它恐怖包括社交恐懼癥、強(qiáng)迫癥、和泛焦慮癥或物質(zhì)誘 導(dǎo)的焦慮癥；應(yīng)激障礙包括創(chuàng)傷后和急性應(yīng)激障礙；睡眠障礙；記憶障礙；神經(jīng)癥；驚厥性疾病如癲癇或小兒發(fā)熱驚厥；偏頭痛、情緒障礙；抑郁或雙相情感障礙例如單次發(fā)作或復(fù)發(fā)性嚴(yán)重抑郁障礙、心境惡劣障礙、I型和II型雙相躁狂障礙、和循環(huán)型情感障礙、精神病包括精神分裂癥；腦缺血引起的神經(jīng)變性；注意缺陷多動(dòng)障礙；疼痛和傷害感受；嘔吐包括急性、遲發(fā)性和預(yù)期性嘔吐，特別是通過化療或放射引起的嘔吐；暈動(dòng)病、手術(shù)后惡心和嘔吐；進(jìn)食障礙包括神經(jīng)性厭食和神經(jīng)性貪食；經(jīng)前期綜合征；神經(jīng)痛如三叉神經(jīng)痛；肌肉痙攣或痙攣狀態(tài)例如在截癱患者中的；藥物濫用或依賴的影響包括酒精戒斷；和認(rèn)知障礙例如阿爾茨海默氏??；腦缺血、中風(fēng)、頭部創(chuàng)傷；耳鳴、例如受時(shí)差或輪班工作的影響的個(gè)體中的晝夜節(jié)律紊亂。此外，本發(fā)明涉及制備式I化合物的方法，其包括使式II化合物

其中R1和R2具有上面的定義，

和硫光氣與各胺(式II)和碳酸氫鈉在二氯甲烷和水的混合物反應(yīng)，形成式III化合物

然后接連地使后者與3-環(huán)丙基-3-氧代-丙腈反應(yīng)，以獲得式I的化合物。優(yōu)選地，式III化合物與3-環(huán)丙基-3-氧代-丙腈的反應(yīng)在無水有機(jī)溶劑諸如四氫呋喃或二氯甲烷中在叔丁醇鉀存在下進(jìn)行。

用于制備式I化合物的一般反應(yīng)可以由下式描述，其中R1和R2具有 上述的含義。

用于制備新的2-氰基-3-環(huán)丙基-3-羥基-N-芳基-硫代丙烯酰胺衍生物的一般方法如下。

在第一步驟中，可以在例如約5℃的溫度將硫光氣添加到式II的各胺和碳酸氫鈉在有機(jī)溶劑例如二氯甲烷和水的混合物中?？蓪⒎磻?yīng)介質(zhì)在環(huán)境溫度(例如20℃)下攪拌例如30分鐘?？梢苑蛛x各相，并將水層用不與水混溶的有機(jī)溶劑例如二氯甲烷萃取。可以將合并的有機(jī)層用例如Na₂SO₄干燥，并例如在減壓下例如在不低于200毫巴、在40℃濃縮。將所得到的異硫氰酸酯用于第二步驟。

在第二步驟中，向叔丁醇鉀在有機(jī)溶劑例如THF中的冷卻溶液中，超過例如約30分鐘加入3-環(huán)丙基-3-氧代-丙腈在有機(jī)溶劑例如THF中的溶液，同時(shí)保持冷卻，例如約0℃的溫度。反應(yīng)后，在例如約0℃，例如攪拌一定時(shí)間，例如約1小時(shí)，將溶液冷卻到溫度低于約0℃，例如約-20℃。將各異硫氰酸酯溶解于有機(jī)溶劑例如THF中，并加入到所述溶液中，例如超過約25分鐘。將反應(yīng)物溫?zé)嶂镰h(huán)境溫度。該反應(yīng)的完成可以以通常的方式例如通過TLC檢查。此外，產(chǎn)物可用通常的方法例如通過萃取、干燥和重結(jié)晶純化和分離。

以下實(shí)施例說明本發(fā)明，而不限制它。

實(shí)施例

一般方法1

在5℃將硫光氣(114mmol,1.25當(dāng)量)滴加至各胺(91mmol,1當(dāng)量)和碳 酸氫鈉(318mmol,3.5當(dāng)量)在二氯甲烷(240ml)和水(240ml)中的混合物中。將反應(yīng)介質(zhì)在環(huán)境溫度劇烈攪拌30min。分離各相，將水層用二氯甲烷(50ml)萃取。將合并的有機(jī)層用Na₂SO₄干燥，并真空下濃縮(在40℃不低于200mbar)。將獲得的異硫氰酸酯直接用于下一步驟。

一般方法2

經(jīng)30分鐘，向叔丁醇鉀(91.6mmol,1.1當(dāng)量)的THF(260ml)冷卻溶液中加入3-環(huán)丙基-3-氧代-丙腈(83.2mmol,1.0當(dāng)量)的THF(130ml)溶液，同時(shí)將溫度保持在0℃。在0℃再攪拌1小時(shí)后，將溶液冷卻至–20℃。將各異硫氰酸酯(83.2mmol,1.0當(dāng)量)溶解在THF(130ml)中，并經(jīng)25分鐘加至所述橙色溶液中。使反應(yīng)混合物升到室溫。TLC指示原料完全轉(zhuǎn)化。將澄清溶液倒到冰冷的1N HCl(1L)中，用二氯甲烷(1L)萃取，用Na₂SO₄干燥并蒸發(fā)至干。將得到的粗固體從MTBE中重結(jié)晶。

實(shí)施例1

2-氰基-3-環(huán)丙基-3-羥基-N-(3-甲基-4-三氟甲基-苯基)-硫代丙烯酰胺

采用15.9g 3-甲基-4-三氟甲基-苯基胺(根據(jù)參考文獻(xiàn)EP 1500643制備的)，根據(jù)一般方法1制備4-異硫氰基-2-甲基-1-三氟甲基-苯。以100％產(chǎn)率作為橙色油狀物獲得中間體(步驟1)，沒有進(jìn)一步純化即用于下一步驟。根據(jù)一般方法2，使來自步驟1的產(chǎn)物(19.7g)與9.9g 3-環(huán)丙基-3-氧代-丙腈反應(yīng)。

實(shí)施例2

采用13g 4-氟-3-甲基苯基-異硫氰酸酯(購自Chempur)，根據(jù)一般方法2制備2-氰基-3-環(huán)丙基-N-(4-氟-3-甲基-苯基)-3-羥基-硫代丙烯酰胺。

實(shí)施例3

2-氰基-3-環(huán)丙基-3-羥基-N-(3-甲基-4-硝基-苯基)-硫代丙烯酰胺

采用24g 3-甲基-4-硝基苯胺(購自TCI)，根據(jù)一般方法1制備4-異硫氰基-2-甲基-1-硝基-苯。以99％產(chǎn)率作為淡棕色固體獲得中間體，沒有進(jìn)一步純化即用于下一步驟。根據(jù)一般方法2使來自步驟1的產(chǎn)物(27.1g)與15.2g 3-環(huán)丙基-3-氧代-丙腈反應(yīng)。

實(shí)施例4

2-氰基-3-環(huán)丙基-3-羥基-N-(4-硝基-苯基)-硫代丙烯酰胺

采用15g異硫氰酸4-硝基苯基酯(購自Aldrich)，根據(jù)一般方法2制備2-氰基-3-環(huán)丙基-3-羥基-N-(4-硝基-苯基)-硫代丙烯酰胺。

實(shí)施例5

2-氰基-3-環(huán)丙基-3-羥基-N-(4-三氟甲基硫烷基-苯基)-硫代丙烯酰胺

采用15g 4-(三氟甲基硫基)苯胺(購自Sinochem)，根據(jù)一般方法1制備1-異硫氰基-4-三氟甲基硫烷基-苯。以99％產(chǎn)率作為橙黃色針狀物獲得中間體，沒有進(jìn)一步純化即用于下一步驟。根據(jù)一般方法2使來自步驟1的產(chǎn)物(18.4g)與8.5g 3-環(huán)丙基-3-氧代-丙腈反應(yīng)。

實(shí)施例6

2-氰基-N-(4-氰基-3-甲基-苯基)-3-環(huán)丙基-3-羥基-硫代丙烯酰胺

采用15g 4-氨基-2-甲基-芐腈(根據(jù)參考文獻(xiàn)EP 1500643制備的)，根據(jù)一般方法1制備4-異硫氰基-2-甲基-芐腈。以96％產(chǎn)率作為橙色固體獲得 中間體，沒有進(jìn)一步純化即用于下一步驟。根據(jù)一般方法2使來自步驟1的產(chǎn)物(19.1g)與11.9g 3-環(huán)丙基-3-氧代-丙腈反應(yīng)。

實(shí)施例7

2-氰基-N-(4-氰基-苯基)-3-環(huán)丙基-3-羥基-硫代丙烯酰胺

采用15g異硫氰酸4-氰基苯基酯(購自Alfa)，根據(jù)一般方法2制備2-氰基-N-(4-氰基-苯基)-3-環(huán)丙基-3-羥基-硫代丙烯酰胺。

實(shí)施例8

2-氰基-3-環(huán)丙基-3-羥基-N-(4-三氟甲烷亞磺?；?苯基)-硫代丙烯酰胺

采用27.9g 4-三氟甲烷亞磺酰基-苯基胺(根據(jù)參考文獻(xiàn)WO2006/20358制備的)，根據(jù)一般方法1制備1-異硫氰基-4-三氟甲烷亞磺?；?苯。以75％產(chǎn)率作為橙色固體獲得中間體，沒有進(jìn)一步純化即用于下一步驟。根據(jù)一般方法2使來自步驟1的產(chǎn)物(30.8g,80％純)與13.4g 3-環(huán)丙基-3-氧代-丙腈反應(yīng)。通過從乙醇中結(jié)晶進(jìn)行純化。

實(shí)施例9

2-氰基-3-環(huán)丙基-3-羥基-N-(4-三氟甲烷磺?；?苯基)-硫代丙烯酰胺

采用12.7g 4-三氟甲烷磺?；?苯基胺(根據(jù)參考文獻(xiàn)WO2006/20358制備的)，根據(jù)一般方法1制備1-異硫氰基-4-三氟甲烷磺酰基-苯。以94％產(chǎn)率作為棕色油狀物獲得中間體，沒有進(jìn)一步純化即用于下一步驟。根據(jù)一般方法2，使來自步驟1的產(chǎn)物(14.1g)與5.8g 3-環(huán)丙基-3-氧代-丙腈反應(yīng)。 在下面表I中給出實(shí)施例的波譜分析和產(chǎn)率數(shù)據(jù)

表I

藥理學(xué)數(shù)據(jù)和活性

已進(jìn)行了一系列非臨床藥理學(xué)研究以支持根據(jù)本公開的化合物在人個(gè)體中的臨床評(píng)價(jià)。這些研究按照國際公認(rèn)的研究設(shè)計(jì)指南進(jìn)行，并符合良好實(shí)驗(yàn)室規(guī)范(GLP)的要求，除非另有說明。

實(shí)驗(yàn)方法I

GABA_A受體結(jié)合測定：

在放射性配體結(jié)合測定(Lewin等人,.1989)中，測定試驗(yàn)化合物對大鼠的大腦皮質(zhì)中GABA門控Cl^-通道(GABA_A受體復(fù)合物)的親合性。將大腦皮質(zhì)的膜勻漿在22℃下在試驗(yàn)化合物存在和不存在情況下用3nM[³⁵S]TBPS(-叔丁基二環(huán)phosphoorothionate)溫育120分鐘。溫育后，將樣品迅速在真空下通過玻璃纖維濾器過濾，并用96-樣品細(xì)胞收集器用冰冷的緩沖液沖洗數(shù)次。將過濾器干燥，然后使用閃爍混合物(Microscint 0, Packard)在閃爍計(jì)數(shù)器上計(jì)數(shù)放射性。將各化合物在數(shù)個(gè)濃度進(jìn)行測試，以便計(jì)算對大鼠的大腦皮質(zhì)的GABA_A受體復(fù)合物的親和性的IC₅₀值。

結(jié)果

在下面的表II提供試驗(yàn)化合物的IC₅₀值

表II

實(shí)驗(yàn)方法II

對人GABA_A受體復(fù)合物的不同亞基組合的電生理測定。

通過使用膜片鉗技術(shù)在穩(wěn)定表達(dá)人GABA_A受體復(fù)合物的不同的亞基組合的HEK293細(xì)胞上研究試驗(yàn)化合物的功能正調(diào)節(jié)活性。簡言之，測定試驗(yàn)化合物的濃度增加時(shí)響應(yīng)于GABA(GABA_A受體的天然配體)增加的峰值內(nèi)向電流。為了計(jì)算正調(diào)節(jié)活性，GABA(EC₂₀濃度)的平均作用設(shè)定為100％。此外，試驗(yàn)化合物的所有測得的電流對于通過加入天然配體GABA的EC20濃度引發(fā)的電流進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化(百分比)。

結(jié)果：

表III顯示在不同人GABA_A受體亞基組合上測定的各試驗(yàn)化合物的標(biāo)準(zhǔn)化的百分電流值。100％的值等同于具有與加入GABA的EC20濃度相當(dāng)?shù)男Ч幕衔铩?/p>

表III

實(shí)驗(yàn)方法III

用實(shí)施例1、實(shí)施例2、實(shí)施例3、實(shí)施例4或?qū)嵤├?的化合物的治療能夠逆轉(zhuǎn)大鼠的通過在脊神經(jīng)結(jié)扎(SNL)損傷誘發(fā)的神經(jīng)性疼痛。

方法的描述

作為外周神經(jīng)痛的體內(nèi)模型的SNL模型或Chung模型

根據(jù)Chung等人，2004(見參考文獻(xiàn)列表)的方法進(jìn)行手術(shù)。簡言之，將動(dòng)物麻醉并將它們的后背毛發(fā)修剪。在無菌條件下，在較低的腰椎和骶水平進(jìn)行縱向切口，露出在左側(cè)的椎旁肌。由小刮刀移除結(jié)締組織和肌肉，在其后骨結(jié)構(gòu)變得可見。首先除去動(dòng)物的L6椎骨左橫突，以暴露L4和L5脊神經(jīng)。然后小心地分離L5脊神經(jīng)并用6-0絲線緊緊結(jié)扎?？偸窃谧笸?同側(cè)爪)進(jìn)行手術(shù)，右腿(對側(cè)爪)保持完好無損，并作為對照。在手 術(shù)完成后，確認(rèn)止血并使用絲線層縫合肌肉，并用金屬夾閉合皮膚，然后停止麻醉。軸索變性發(fā)生，所有類型的軸突大約同樣受到影響。跟隨有顯著的機(jī)械異常性疼痛，伴有自發(fā)性疼痛行為，持續(xù)數(shù)周沒有恢復(fù)。機(jī)械異常性疼痛通常是手術(shù)后1-2周開始評(píng)估。

機(jī)械異常性疼痛的評(píng)估

根據(jù)由Chaplan和同事描述的方法(Chaplan等，1994)來確定機(jī)械異常性疼痛閾值。在指定的手術(shù)后時(shí)間點(diǎn)，將損傷大鼠置于一升高的透明塑料、金屬網(wǎng)底籠。10至15分鐘的適應(yīng)期后，用2至60g的彎曲力的八von Frey絲(Stoelting,Wood Dale,IL)，采用向上-和-向下法，測定縮爪的50％的機(jī)械閾值。

在Chung模型中的實(shí)驗(yàn)1(圖1a)

脊神經(jīng)結(jié)扎(SNL)損傷后，將個(gè)體大鼠隨機(jī)分至治療組。使用下列組：

第1組：SNL+僅溶媒(羧甲基纖維素和無菌水)，從DPO7(治療前)直到DPO12口服管飼5天。

第2組：SNL+在溶媒中的實(shí)施例1(10mg/kg)，從DPO7(治療前)直到DPO12通過口服管飼5天。

第3組：SNL+在溶媒中的實(shí)施例2(10mg/kg)，從DPO7(治療前)到DPO12通過口服管飼5天。

結(jié)果

傷害感受閾值定義為大鼠縮回它的爪子的力(g)(截止力60g)。損傷之前，對于所有動(dòng)物同側(cè)爪，閾值為60g。作為脊神經(jīng)結(jié)扎的結(jié)果，如圖1a中所示，損傷后一周，所有組中傷害感受閾值降低到約20g。在該時(shí)間點(diǎn)(治 療前或DPO7)，用實(shí)施例1、實(shí)施例2或溶媒的5日口服治療開始。溶媒處理的動(dòng)物的縮回閾值在接下來的幾周保持穩(wěn)定在10g。作為實(shí)施例1治療的結(jié)果，閾值提高到約45至50g(DPO21和DPO28)，并保持在30g(DPO35)直至實(shí)驗(yàn)結(jié)束。如在圖1a中所示，用實(shí)施例2治療的大鼠的縮回閾值在DPO21增加到40g，并保持在那里直到DPO35實(shí)驗(yàn)結(jié)束。統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)揭示了從DPO14直到DPO35兩個(gè)治療組和溶媒對照組之間的非常強(qiáng)的顯著差異(雙向ANOVA,RM,p<0,001)(圖1a)。因此，實(shí)施例1(2-氰基-3-環(huán)丙基-3-羥基-N-(3-甲基-4-三氟甲基-苯基)-硫代丙烯酰胺)和實(shí)施例2(2-氰基-3-環(huán)丙基-N-(4-氟-3-甲基-苯基)-3-羥基-硫代丙烯酰胺)都可以逆轉(zhuǎn)脊神經(jīng)結(jié)扎誘導(dǎo)的神經(jīng)性疼痛。

在Chung模型中的實(shí)驗(yàn)2(圖1b)

脊神經(jīng)結(jié)扎(SNL)損傷后，將個(gè)體大鼠隨機(jī)分至治療組。使用下列組：

第1組：SNL+僅溶媒(羧甲基纖維素和無菌水)，從DPO14直到DPO19口服管飼5天。

第2組：SNL+在溶媒中的實(shí)施例3(10mg/kg)，從DPO14直到DPO19通過口服管飼5天。

第3組：SNL+在溶媒中的實(shí)施例4(10mg/kg)，從DPO14直到DPO19通過口服管飼5天。

第4組：SNL+在溶媒中的實(shí)施例6(10mg/kg)，從DPO14直到DPO19通過口服管飼5天。

結(jié)果

傷害感受閾值定義為大鼠縮回它的爪子的力(g)(截止力60g)。損傷之前，對于所有動(dòng)物同側(cè)爪，閾值為60g。作為脊神經(jīng)結(jié)扎的后果，損傷后1周(DPO14)在所有組傷害感受閾值下降至約18克。在該時(shí)間點(diǎn)(DPO14)， 用實(shí)施例3、實(shí)施例4、實(shí)施例6或溶媒的5日口服治療啟動(dòng)。溶媒治療的動(dòng)物的縮回閾值在接下來的幾周保持穩(wěn)定在10到20g。作為實(shí)施例3治療的結(jié)果，閾值在DPO21提高到約35克并保持在近23-25g直到在DPO35實(shí)驗(yàn)結(jié)束。用實(shí)施例4治療的大鼠的縮回閾值在DPO21增加到近50g并保持在30克直到在DPO35實(shí)驗(yàn)結(jié)束。如在圖1b中所示，用實(shí)施例6治療的大鼠的縮回閾值在DPO21增加到近40g并維持在近28至38g，直到在DPO35實(shí)驗(yàn)結(jié)束。統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)揭示了從DPO19直到DPO35三個(gè)治療組和溶媒對照組之間的非常強(qiáng)的顯著差異(雙向ANOVA,RM,p<0,001)(圖1b)。因此，實(shí)施例3(2-氰基-3-環(huán)丙基-N-(4-氟-3-甲基-苯基)-3-羥基-硫代丙烯酰胺)、實(shí)施例4()和實(shí)施例6(2-氰基-N-(4-氰基-3-甲基-苯基)-3-環(huán)丙基-3-羥基-硫代丙烯酰胺)都可以逆轉(zhuǎn)脊神經(jīng)結(jié)扎誘導(dǎo)的神經(jīng)性疼痛。

實(shí)驗(yàn)方法V

用實(shí)施例1、實(shí)施例2、實(shí)施例3或?qū)嵤├?的治療可以逆轉(zhuǎn)大鼠后爪的通過辣椒素注射誘導(dǎo)的急性疼痛。

方法的描述

作為急性疼痛的體內(nèi)模型的辣椒素誘導(dǎo)的疼痛

將大鼠輕輕地限制住，并用具有29號(hào)針頭的0.3ml胰島素注射器(Terumo Europe,Belgium)將在鹽水中的辣椒素(10μg在10μl 10％Tween80中)注射到后爪的足底表面。

辣椒素模型中的實(shí)驗(yàn)1(圖2a)

辣椒素注射后，將個(gè)體大鼠隨機(jī)分至治療組。使用下列組：

第1組：辣椒素注射+注射后約40分鐘通過口服管飼僅溶媒(羧甲基纖維素和無菌水)。

第2組：辣椒素注射+注射后約40分鐘通過口服管飼在溶媒中的實(shí)施例1(1mg/kg)。

第3組：辣椒素注射+注射后約40分鐘通過口服管飼在溶媒中的實(shí)施例3(1mg/kg)。

機(jī)械異常性疼痛的評(píng)估

機(jī)械異常性疼痛的評(píng)估參見實(shí)驗(yàn)方法III/方法的描述。

結(jié)果

傷害感受閾值定義為大鼠縮回它的爪子的力(g)(截止力60g)。辣椒素注射前，所有動(dòng)物同側(cè)爪的閾值為60g。注射后三十分鐘，再次評(píng)估傷害感受閾值，在所有組降低至約7-14g。該評(píng)估直接跟隨著實(shí)施例1、實(shí)施例3或溶媒的施用。如在圖2a中所示，用實(shí)施例1治療的大鼠的縮回閾值150分鐘后迅速增加至30g，并在辣椒素注射后210分鐘幾乎達(dá)到50g。作為實(shí)施例3治療的結(jié)果，縮回閾值緩慢增加并在150分鐘后達(dá)到40g，并在辣椒素注射后210分鐘達(dá)到近50g。相反地，溶媒治療的動(dòng)物保持在10-20g之間的縮回閾值(圖2a)。統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)揭示了兩個(gè)治療組和溶媒之間有很強(qiáng)的顯著差異(雙向ANOVA RM；p<0.01)。因此，實(shí)施例1(2-氰基-3-環(huán)丙基-3-羥基-N-(3-甲基-4-三氟甲基-苯基)-硫代丙烯酰胺)和實(shí)施例3(2-氰基-3-環(huán)丙基-3-羥基-N-(3-甲基-4-硝基-苯基)-硫代丙烯酰胺)都可以逆轉(zhuǎn)由辣椒素誘導(dǎo)的急性機(jī)械異常性疼痛。

辣椒素模型中的實(shí)驗(yàn)2(圖2b)

辣椒素注射后，將個(gè)體大鼠隨機(jī)分至治療組。使用下列組：

第1組：辣椒素注射+注射后約40分鐘通過口服管飼僅溶媒(羧甲基纖維素和無菌水)。

第2組：辣椒素注射+注射后約40分鐘通過口服管飼在溶媒中的實(shí)施例2(10mg/kg)。

第3組：辣椒素注射+注射后約40分鐘通過口服管飼在溶媒中的實(shí)施例6(10mg/kg)。

機(jī)械異常性疼痛的評(píng)估

機(jī)械異常性疼痛的評(píng)估參見實(shí)驗(yàn)方法III/方法描述。

結(jié)果

傷害感受閾值定義為大鼠縮回它的爪子的力(g)(截止力60g)。辣椒素注射前，所有動(dòng)物同側(cè)爪的閾值為60g。注射后三十分鐘，再次評(píng)估傷害感受閾值，所有組中降低至約10-17g。該評(píng)估直接跟隨著實(shí)施例2、實(shí)施例6或溶媒的施用。如在圖2b中所示，實(shí)施例2治療的大鼠的縮回閾值在150分鐘后迅速增加至幾乎40g并在辣椒素注射后210分鐘保持在近33g。作為實(shí)施例6治療的結(jié)果，縮回閾值緩慢增加并在150分鐘后達(dá)到35g，并在辣椒素注射后210分鐘保持在25g。相反地，溶媒治療的動(dòng)物保持在10-20g之間的縮回閾值(圖2b)。統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)揭示了兩個(gè)治療組和溶媒之間的顯著差異(雙向ANOVA RM；p<0.05)。因此，實(shí)施例2(2-氰基-3-環(huán)丙基-N-(4-氟-3-甲基-苯基)-3-羥基-硫代丙烯酰胺)和實(shí)施例6(2-氰基-N-(4-氰基-3-甲基-苯基)-3-環(huán)丙基-3-羥基-硫代丙烯酰胺)都可以逆轉(zhuǎn)由辣椒素誘導(dǎo)的急性機(jī)械異常性疼痛。

附圖的簡要說明

圖1(A)顯示脊神經(jīng)結(jié)扎后(Chung模型)和口服管飼10mg/kg實(shí)施例1(2-氰基-3-環(huán)丙基-3-羥基-N-(3-甲基-4-三氟甲基-苯基)-硫代丙烯酰胺)、實(shí)施例2(2-氰基-3-環(huán)丙基-N-(4-氟-3-甲基-苯基)-3-羥基-硫代丙烯酰胺)或溶媒從DPO7(治療前)直到DPO12的50%爪縮回閾值(g)。***p<0.001

圖1(B)顯示脊神經(jīng)結(jié)扎后(Chung模型)和口服管飼10mg/kg實(shí)施例3(2-氰基-3-環(huán)丙基-3-羥基-N-(3-甲基-4-硝基-苯基)-硫代丙烯酰胺)、實(shí)施例4 (2-氰基-3-環(huán)丙基-3-羥基-N-(4-硝基-苯基)-硫代丙烯酰胺)、實(shí)施例6(2-氰基-N-(4-氰基-3-甲基-苯基)-3-環(huán)丙基-3-羥基-硫代丙烯酰胺)或溶媒從DPO14直到DPO 19的50%爪縮回閾值(g)。***p<0.001

圖2(A)顯示辣椒素誘導(dǎo)的疼痛后和辣椒素注射后約40分鐘口服管飼1mg/kg實(shí)施例1(2-氰基-3-環(huán)丙基-3-羥基-N-(3-甲基-4-三氟甲基-苯基)-硫代丙烯酰胺)、實(shí)施例3(2-氰基-3-環(huán)丙基-3-羥基-N-(3-甲基-4-硝基-苯基)-硫代丙烯酰胺)或溶媒的50%爪縮回閾值(g)。**p<0.01

圖2(B)顯示辣椒素誘導(dǎo)的疼痛后和辣椒素注射后約40分鐘口服管飼10mg/kg實(shí)施例2(2-氰基-3-環(huán)丙基-N-(4-氟-3-甲基-苯基)-3-羥基-硫代丙烯酰胺)、實(shí)施例6(2-氰基-N-(4-氰基-3-甲基-苯基)-3-環(huán)丙基-3-羥基-硫代丙烯酰胺)或溶媒的50%爪縮回閾值(g)。*p<0.05

上述公開的實(shí)施方案旨在僅僅是示例性的，并且本領(lǐng)域的技術(shù)人員將認(rèn)識(shí)到或能夠使用不超過常規(guī)實(shí)驗(yàn)確定具體化合物、材料和步驟的許多等價(jià)體。所有這些等價(jià)體都被認(rèn)為是本公開的范圍之內(nèi)。

參考文獻(xiàn)列表

下面的公開文本引入文中作為參考：

WO 00/69842 A1

EP 731 099 A1

US 2003/0229134

EP 1500643

WO2006/20358

Chaplan,S.R.,等人,1994.Quantitative assessment of tactile allodynia in the rat paw.J Neurosci Methods.53,55-63.

Chung,J.M.,等人,2004.Segmental Spinal Nerve Ligation Model of Neuropathic Pain.Methods in Molecular Medicine,Vol.99:Pain Research:Methods and Protocols

Lewin,A.H.,De Costa,B.R.,Rice,K.C.和Skolnick,P.(1989).Meta-and para-isothiocyanato-t-butylbicycloorthobenzoate:irreversible ligands of the aminobutyric acid-regulated chloride ionophore.Mol.Pharmacol.,35:189.