本發(fā)明涉及一種抗氧化多肽制備工藝，特別涉及一種小棗的抗氧化多肽制備工藝，屬于抗氧化多肽制造技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)：

小棗為鼠李科落葉灌木或小喬木植物棗樹的成熟果實。我國栽培棗樹范圍極廣，北邊達到遼寧的錦州、北鎮(zhèn)一帶，以山東、河北、山西、陜西、甘肅、安徽、浙江產(chǎn)量最多。著名品種有金絲小棗，果實小，含糖量多。小棗能提高人體免疫力，并可抑制癌細胞，藥理研究發(fā)現(xiàn)，紅棗能促進白細胞的生成，降低血清膽固醇，提高血清白蛋白，保護肝臟。紅棗中還含有抑制癌細胞，甚至可使癌細胞向正常細胞轉(zhuǎn)化的物質(zhì)；經(jīng)常食用鮮棗的人很少患膽結(jié)石，這是因為鮮棗中豐富的維生素C，使體內(nèi)多余的膽固醇轉(zhuǎn)變?yōu)槟懼?，膽固醇少了，結(jié)石形成的概率也就隨之減少；小棗中富含鈣和鐵，它們對防治骨質(zhì)疏松產(chǎn)貧血有重要作用，中老年人更年期經(jīng)常會骨質(zhì)疏松，正在生長發(fā)育高峰的青少年和女性容易發(fā)生貧血，小棗對他們會有十分理想的食療作用，其效果通常是藥物不能比擬的；小棗對病后體虛的人也有良好的滋補作用；小棗所含的蘆丁，是一種使血管軟化，從而使血壓降低的物質(zhì)，對高血壓病有防治功效；小棗還可以抗過敏、除腥臭怪味、寧心安神、益智健腦、增強食欲。小棗因為具有非常好的營養(yǎng)價值而受到人們的青睞，因此種植量非常大，每年在農(nóng)戶手中有大量的殘次小棗因品相太差而無法銷售出去，被浪費丟棄，增加了農(nóng)戶的種植成本，降低了農(nóng)戶的收入。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是克服每年在農(nóng)戶手中有大量的殘次小棗因品相太差而無法銷售出去，被浪費丟棄，增加了農(nóng)戶的種植成本，降低了農(nóng)戶的收入的缺陷，提供一種小棗的抗氧化多肽制備工藝。

為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供了如下的技術(shù)方案：

本發(fā)明提供了一種小棗的抗氧化多肽制備工藝，制作步驟為：

1）小棗蛋白提?。簩⑿椫糜诤嫦鋬?nèi)低溫烘干，粉碎后，取一定量的小棗粉，按一定料液比加水，超聲波震蕩10小時，然后以4000r/min低溫離心20min，去除不溶性雜質(zhì)，得到上清液，為蛋白粗提液。上清液用1mol/L的鹽酸溶液調(diào)整濾液pH為4～4.5，酸沉淀蛋白質(zhì)，4000r/min離心20min獲得沉淀物，沉淀物用蒸餾水洗至中性，冷凍干燥制得蛋白質(zhì)粉備用；

2）小棗蛋白酶解：取適量小棗蛋白粉，以底物濃度為3%配制蛋白溶液，調(diào)節(jié)至所需的溫度55℃，添加鹽酸或氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH=7，加堿性蛋白酶和植物蛋白酶(共5000U/g)協(xié)同酶解（兩酶配比值為1:1），加酶的時候充分攪拌，保證酶與底物充分接觸，恒溫水浴鍋內(nèi)震蕩，酶解時間5h，反應(yīng)過程中需添加鹽酸或氫氧化鈉以保證pH值不變。酶解至預(yù)定時間后，置于90℃水浴中10min，滅酶，取上清液，真空濃縮。冷凍干燥為小棗多肽，粉碎過篩后為小棗多肽粉。

作為本發(fā)明的一種優(yōu)選技術(shù)方案，在所述小棗多肽粉制備過程中對酶解液中抗氧化多肽得率進行檢驗，其步驟為：所述酶解液中多肽得率用酸可溶性多肽計，將等體積的三氯乙酸（TCA，10%）加入到棗酶解液中，靜置0.5h后在4000r/min速度離心20min，取上清液用凱式定氮法測定氮的質(zhì)量。計算結(jié)果如下：

抗氧化能力用羥自由基清除率來測試：選取三支10mL比色管，依次加入羅丹明6G溶液和H2SO4溶液，第一支比色管作試劑參比，其余兩支再分別加入FeSO₄和H₂O₂溶液，在第三支中加入酶解液，用水稀釋至并搖勻，常溫下放置12 min，以蒸餾水為空白參比，在波長520 nm處測定3個體系吸光度值，試劑參比體系的吸光度為A，未加酶解液的體系的A₀，加酶解液的為As。酶解液中多肽的抗氧化能力可以用清除率表示,清除率的計算公式如下:

清除率%=（As－A₀）／（A－A₀）×100%

經(jīng)過計算，小棗蛋白酶解液的抗氧化多肽得率為55.03%，?OH清除率為80.31%。

作為本發(fā)明的一種優(yōu)選技術(shù)方案，小棗多肽粉制備過程中產(chǎn)生的廢棄液在濃縮后還可以用于制備棗泥。

本發(fā)明所達到的有益效果是：小棗產(chǎn)量巨大，每年在農(nóng)戶手中有大量的殘次小棗被浪費丟棄，本發(fā)明提取小棗蛋白進行酶解制備多肽，廢棄液在濃縮還可以用來制備棗泥，而制備出的抗氧化多肽，可以用作食品添加劑，做成各種食品，不僅能起到抗氧化作用，而且被人體極易吸收，對健康有利。

具體實施方式

以下對本發(fā)明的優(yōu)選實施例進行說明，應(yīng)當(dāng)理解，此處所描述的優(yōu)選實施例僅用于說明和解釋本發(fā)明，并不用于限定本發(fā)明。

實施例1

本發(fā)明提供了一種小棗的抗氧化多肽制備工藝，制作步驟為：

1）小棗蛋白提?。簩⑿椫糜诤嫦鋬?nèi)低溫烘干，粉碎后，取一定量的小棗粉，按一定料液比加水，超聲波震蕩10小時，然后以4000r/min低溫離心20min，去除不溶性雜質(zhì)，得到上清液，為蛋白粗提液。上清液用1mol/L的鹽酸溶液調(diào)整濾液pH為4～4.5，酸沉淀蛋白質(zhì)，4000r/min離心20min獲得沉淀物，沉淀物用蒸餾水洗至中性，冷凍干燥制得蛋白質(zhì)粉備用；

2）小棗蛋白酶解：取適量小棗蛋白粉，以底物濃度為3%配制蛋白溶液，調(diào)節(jié)至所需的溫度55℃，添加鹽酸或氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH=7，加堿性蛋白酶和植物蛋白酶(共5000U/g)協(xié)同酶解（兩酶配比值為1:1），加酶的時候充分攪拌，保證酶與底物充分接觸，恒溫水浴鍋內(nèi)震蕩，酶解時間5h，反應(yīng)過程中需添加鹽酸或氫氧化鈉以保證pH值不變。酶解至預(yù)定時間后，置于90℃水浴中10min，滅酶，取上清液，真空濃縮。冷凍干燥為小棗多肽，粉碎過篩后為小棗多肽粉。

在小棗多肽粉制備過程中對酶解液中抗氧化多肽得率進行檢驗，其步驟為：所述酶解液中多肽得率用酸可溶性多肽計，將等體積的三氯乙酸（TCA，10%）加入到棗酶解液中，靜置0.5h后在4000r/min速度離心20min，取上清液用凱式定氮法測定氮的質(zhì)量。計算結(jié)果如下：

抗氧化能力用羥自由基清除率來測試：選取三支10mL比色管，依次加入羅丹明6G溶液和H₂SO₄溶液，第一支比色管作試劑參比，其余兩支再分別加入FeSO₄和H₂O₂溶液，在第三支中加入酶解液，用水稀釋至并搖勻，常溫下放置12 min，以蒸餾水為空白參比，在波長520 nm處測定3個體系吸光度值，試劑參比體系的吸光度為A，未加酶解液的體系的A₀，加酶解液的為As。酶解液中多肽的抗氧化能力可以用清除率表示,清除率的計算公式如下:

清除率%=（As－A₀）／（A－A₀）×100%

經(jīng)過計算，小棗蛋白酶解液的抗氧化多肽得率為55.03%，?OH清除率為80.31%。

小棗多肽粉制備過程中產(chǎn)生的廢棄液在濃縮后還可以用于制備棗泥。

小棗產(chǎn)量巨大，每年在農(nóng)戶手中有大量的殘次小棗被浪費丟棄，本發(fā)明提取小棗蛋白進行酶解制備多肽，廢棄液在濃縮還可以用來制備棗泥，而制備出的抗氧化多肽，可以用作食品添加劑，做成各種食品，不僅能起到抗氧化作用，而且被人體極易吸收，對健康有利。

最后應(yīng)說明的是：以上所述僅為本發(fā)明的優(yōu)選實施例而已，并不用于限制本發(fā)明，盡管參照前述實施例對本發(fā)明進行了詳細的說明，對于本領(lǐng)域的技術(shù)人員來說，其依然可以對前述各實施例所記載的技術(shù)方案進行修改，或者對其中部分技術(shù)特征進行等同替換。凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)，所作的任何修改、等同替換、改進等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。