本發(fā)明屬于農(nóng)副產(chǎn)品加工技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種從核桃粕中提取核桃粗蛋白的方法。

背景技術(shù)：

農(nóng)產(chǎn)品加工廢棄物主要包括飲料制造業(yè)的果皮殘?jiān)?，畜禽加工的下腳料，生產(chǎn)淀粉的木薯渣、馬鈴薯渣，制糖業(yè)的甜菜渣、甘蔗渣，糧油加工后的稻殼、麥麩、菜籽餅粕、豆渣等，釀造業(yè)的酒糟、乳制品加工過程中的乳清以及餐廚垃圾等。這些廢棄物如不妥善安置，勢必會造成環(huán)境的極大污染。而這些廢棄物仍然含有大量的有機(jī)質(zhì)，相對開發(fā)價(jià)值高，因此將這些農(nóng)產(chǎn)品加工廢棄物通過各種再循環(huán)利用技術(shù)手段生產(chǎn)蛋白質(zhì)產(chǎn)品，不僅可以延長農(nóng)產(chǎn)品加工的產(chǎn)業(yè)鏈，獲得較好的經(jīng)濟(jì)效益，而且可以解決環(huán)境污染問題。

核桃含有豐富的優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì)，其含量在15%左右，生產(chǎn)核桃油后的核桃粕中的蛋白質(zhì)含量達(dá)到40%以上，且必需的氨基酸含量高，與肉類蛋白可以相比，而且還含有人體必需的多種維生素和礦物質(zhì)，不含膽固醇，是一種優(yōu)良的食品原料。目前, 國內(nèi)外對核桃偏重于其油脂方面的研究, 對于核桃蛋白質(zhì)的開發(fā)利用研究很少。中國專利（申請公布號CN102936610A）公開了一種從核桃粕中高效提取蛋白的方法，該方法按如下步驟進(jìn)行：a.將核桃粕粉碎成核桃粕粉；b.按照正己烷：丁二酸二異辛酯磺酸鈉＝1mL：0.04～0.10g配比，將正己烷溶解在丁二酸二異辛酯磺酸鈉中，得混合液，然后將混合液與電解質(zhì)緩沖液混合，得反膠束溶液；c.將a步驟的核桃粕粉與b步驟的反膠束溶液按照反膠束溶液：核桃粕粉＝1mL：0.02～0.10g配比混合，攪拌或利用微波與酶法輔助萃取，離心后的上清液即為蛋白前萃液；d.將c步驟的蛋白前萃液與電解質(zhì)溶液按照蛋白前萃液：電解質(zhì)溶液＝1：0.5～1：2體積份混合，攪拌或利用微波輔助萃取，離心后的下層清液即為蛋白后萃液；e.將d步驟的蛋白后萃液經(jīng)層析柱脫鹽，得產(chǎn)品。本發(fā)明采用反膠束萃取核桃蛋白，根據(jù)核桃蛋白特性選擇合適的萃取條件和反膠束溶液，同時(shí)采用微波與酶法協(xié)同反膠束體系作用，明顯提高了蛋白質(zhì)的提取率， 是核桃粕蛋白資源的高效開發(fā)利用的新途徑。 由于核桃蛋白被表面活性劑與水分子保護(hù)，不與有機(jī)溶劑接觸，提取溫度低，因此不會失活與變性。但工藝較為復(fù)雜，制作成本高。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明提供了一種從核桃粕中提取核桃粗蛋白的方法。

具體的，一種從核桃粕中提取核桃粗蛋白的方法，包括以下步驟：

（1）取核桃粕用乙醇浸泡脫去油脂，然后過濾，得脫脂核桃粕；

（2）將脫脂核桃粕干燥、粉碎，得核桃粕粉碎料；

（3）將核桃粕粉碎料與氫氧化鈉水溶液混合，于溫度為30-40℃條件下浸提40-60min，得核桃粕浸提液；

（4）將核桃粕浸提液離心分離，取上層上清液，備用；

（5）將上清液用酸堿劑調(diào)節(jié)pH為4.5-4.6，靜置1-2h，然后離心分離上清液，取下層沉淀，即得所述粗蛋白。

作為本發(fā)明所述從核桃粕中提取核桃粗蛋白的方法的進(jìn)一步限定，在步驟（1）中，所述乙醇的濃度為80-90%，浸泡時(shí)間為1-2h。

進(jìn)一步，所述核桃粕和乙醇的用量比為1g：8-15ml。

作為本發(fā)明所述從核桃粕中提取核桃粗蛋白的方法的進(jìn)一步限定，在步驟（2）中，所述脫脂核桃粕于30-40℃條件下烘干至恒重，所述核桃粕粉碎料的粒徑為120-250μm。

作為本發(fā)明所述從核桃粕中提取核桃粗蛋白的方法的進(jìn)一步限定，在步驟（3）中，所述氫氧化鈉水溶液濃度為0.01mol/L，所述核桃粕粉碎料與氫氧化鈉水溶液的質(zhì)量比為1:6-12。

作為本發(fā)明所述從核桃粕中提取核桃粗蛋白的方法的進(jìn)一步限定，在步驟（4）中，所述離心分離是在3000-4000r/min條件下離心5-8min。

作為本發(fā)明所述從核桃粕中提取核桃粗蛋白的方法的進(jìn)一步限定，在步驟（5）中，所述酸堿劑1mol/L的硫酸，所述離心分離是在3000-4000r/min條件下離心8-12min。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明工藝方法步驟簡單，提取周期短，制備成本低，可以快速、高效、節(jié)能地從核桃粕中提取出高品質(zhì)的粗蛋白，提取率達(dá)50%以上，所制備得的粗蛋白純度達(dá)70%以上，具有很好的市場前景和經(jīng)濟(jì)效益，值得推廣應(yīng)用。

具體實(shí)施方式

以下結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)說明，本實(shí)施例僅是對本發(fā)明作更清楚的說明，而不是對本發(fā)明的限制。

實(shí)施例1

一種從核桃粕中提取核桃粗蛋白的方法，包括以下步驟：

（1）取核桃粕用85%乙醇按用量比為1g：12ml浸泡1.5h脫去油脂，然后過濾，得脫脂核桃粕；

（2）將脫脂核桃粕于35℃條件下烘干至恒重，粉碎，過90目篩，得核桃粕粉碎料；

（3）將核桃粕粉碎料與0.01mol/L氫氧化鈉水溶液按質(zhì)量比為1:9混合，于溫度為35℃條件下浸提50min，得核桃粕浸提液；

（4）將核桃粕浸提液在3500r/min條件下離心6min，取上層上清液，備用；

（5）將上清液用1mol/L的硫酸調(diào)節(jié)pH為4.5，靜置1.5h，然后將上清液在3500r/min條件下離心10min，取下層沉淀，即得所述粗蛋白。

經(jīng)測定，本實(shí)施例工藝提取率為51%，所制備得的粗蛋白純度為75%。

實(shí)施例2

一種從核桃粕中提取核桃粗蛋白的方法，包括以下步驟：

（1）取核桃粕用90%乙醇按用量比為1g：8ml浸泡2h脫去油脂，然后過濾，得脫脂核桃粕；

（2）將脫脂核桃粕于30℃條件下烘干至恒重，粉碎，過60目篩，得核桃粕粉碎料；

（3）將核桃粕粉碎料與0.01mol/L氫氧化鈉水溶液按質(zhì)量比為1: 12混合，于溫度為30℃條件下浸提60min，得核桃粕浸提液；

（4）將核桃粕浸提液在3000r/min條件下離心5min，取上層上清液，備用；

（5）將上清液用1mol/L的硫酸調(diào)節(jié)pH為4.6，靜置2h，然后將上清液在4000r/min條件下離心8min，取下層沉淀，即得所述粗蛋白。

經(jīng)測定，本實(shí)施例工藝提取率為53%，所制備得的粗蛋白純度為70%。

實(shí)施例3

一種從核桃粕中提取核桃粗蛋白的方法，包括以下步驟：

（1）取核桃粕用82%乙醇按用量比為1g：11ml浸泡1h脫去油脂，然后過濾，得脫脂核桃粕；

（2）將脫脂核桃粕于40℃條件下烘干至恒重，粉碎，過100目篩，得核桃粕粉碎料；

（3）將核桃粕粉碎料與0.01mol/L氫氧化鈉水溶液按質(zhì)量比為1:10混合，于溫度為35℃條件下浸提45min，得核桃粕浸提液；

（4）將核桃粕浸提液在4000r/min條件下離心5min，取上層上清液，備用；

（5）將上清液用1mol/L的硫酸調(diào)節(jié)pH為4.5，靜置1h，然后將上清液在4000r/min條件下離心8min，取下層沉淀，即得所述粗蛋白。

經(jīng)測定，本實(shí)施例工藝提取率為52%，所制備得的粗蛋白純度為72%。

實(shí)施例4

一種從核桃粕中提取核桃粗蛋白的方法，包括以下步驟：

（1）取核桃粕用90%乙醇按用量比為1g： 15ml浸泡1h脫去油脂，然后過濾，得脫脂核桃粕；

（2）將脫脂核桃粕于38℃條件下烘干至恒重，粉碎，過90目篩，得核桃粕粉碎料；

（3）將核桃粕粉碎料與0.01mol/L氫氧化鈉水溶液按質(zhì)量比為1:8混合，于溫度為32℃條件下浸提60min，得核桃粕浸提液；

（4）將核桃粕浸提液在3000r/min條件下離心8min，取上層上清液，備用；

（5）將上清液用1mol/L的硫酸調(diào)節(jié)pH為4.6，靜置2h，然后將上清液在3800r/min條件下離心10min，取下層沉淀，即得所述粗蛋白。

經(jīng)測定，本實(shí)施例工藝提取率為51%，所制備得的粗蛋白純度為73%。

以上顯示和描述了本發(fā)明的基本原理、主要特征和優(yōu)點(diǎn)。本領(lǐng)域的技術(shù)人員應(yīng)該了解，本發(fā)明不受上述實(shí)施例的限制，上述實(shí)施例和說明書中描述的只是說明本發(fā)明的原理，在不脫離本發(fā)明精神和范圍的前提下，本發(fā)明還會有各種變化和改進(jìn)，這些變化和改進(jìn)都落入要求保護(hù)的本發(fā)明范圍內(nèi)。本發(fā)明要求保護(hù)范圍由所附的權(quán)利要求書及其等效物界定。