本發(fā)明屬于醫(yī)藥中間體的合成技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種具有苯并1,4-二氧雜環(huán)己二烯酮結(jié)構(gòu)的FSHR拮抗劑的制備方法。

背景技術(shù)：

促性腺激素在人體中表現(xiàn)出重要的生理機(jī)能，比如新陳代謝、體溫調(diào)節(jié)和生殖過(guò)程。它是由下丘腦合成和分泌的，通過(guò)誘導(dǎo)垂體中促卵泡激素(FSH)/黃體生成激素(LH)的分泌，并進(jìn)一步誘導(dǎo)卵巢中各級(jí)卵泡的生長(zhǎng)發(fā)育及排卵。FSH是哺乳動(dòng)物生殖過(guò)程中的核心激素，在胎兒性分化、胎兒期卵子峰發(fā)生和卵泡閉鎖、性成熟期卵泡的發(fā)生發(fā)育和成熟、顆粒細(xì)胞芳香化酶活化和雄激素向雌激素的轉(zhuǎn)化、生殖周期的調(diào)節(jié)中起到不可替代的關(guān)鍵作用。FSH對(duì)靶器官的作用主要由FSH受體(FSHR)所介導(dǎo)。研究表明，F(xiàn)SHR不僅只表達(dá)于性腺，也在骨骼、前列腺、卵巢表面上皮等其它組織的表達(dá)。FSH在體內(nèi)水平過(guò)高，會(huì)導(dǎo)致骨質(zhì)流失，一些激素依賴性疾病，如卵巢癌、前列腺癌、子宮內(nèi)膜異位、卵巢過(guò)度刺激綜合征等，都受FSH影響很大；通過(guò)抑制FSH的分泌，可以進(jìn)而抑制性腺分泌性激素，導(dǎo)致血中疾病依賴性激素水平降低，抑制癌細(xì)胞的生長(zhǎng)或預(yù)防、緩解、治療其他病癥；例如，西曲瑞克就是按照該機(jī)理對(duì)卵巢癌發(fā)揮抗增殖效應(yīng)。本發(fā)明根據(jù)目前已有的FSH受體抑制劑藥物分子，對(duì)其結(jié)構(gòu)進(jìn)行優(yōu)化得到了一種具有苯并1,4-二氧雜環(huán)己二烯酮結(jié)構(gòu)的FSH拮抗劑藥物分子，并對(duì)其進(jìn)行了相關(guān)活性測(cè)試。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明解決的技術(shù)問(wèn)題是提供了一種合成方法簡(jiǎn)單、分子結(jié)構(gòu)新穎且對(duì)FSH受體作用效果較好的新型FSHR拮抗劑的制備方法。

本發(fā)明為解決上述技術(shù)問(wèn)題采用如下技術(shù)方案，該具有苯并1,4-二氧雜環(huán)己二烯酮結(jié)構(gòu)的FSHR拮抗劑藥物分子的結(jié)構(gòu)為

一種具有苯并1,4-二氧雜環(huán)己二烯酮結(jié)構(gòu)的FSH拮抗劑的制備方法，其特征在于具體步驟為：

A、2-溴-4-硝基苯甲酸甲酯和2-碘苯硼酸在催化劑四(三苯基膦)鈀的作用下經(jīng)過(guò)取代反應(yīng)得到2’-碘-5-硝基聯(lián)苯-2-甲酸甲酯；

B、2’-碘-5-硝基聯(lián)苯-2-甲酸甲酯在催化劑還原鐵粉的作用下經(jīng)過(guò)硝基還原反應(yīng)得到2’-碘-5-氨基聯(lián)苯-2-甲酸甲酯；

C、2’-碘-5-氨基聯(lián)苯-2-甲酸甲酯在催化劑亞硝酸鈉的作用下經(jīng)過(guò)氨基還原氧化反應(yīng)得到2’-碘-5-羥基聯(lián)苯-2-甲酸甲酯；

D、3-羥基-4-甲氧基甲苯和2-溴丙烷發(fā)生取代反應(yīng)得到3-異丙氧基-4-甲氧基甲苯；

E、3-異丙氧基-4-甲氧基甲苯在催化劑鐵粉的作用下發(fā)生1位和6位溴代反應(yīng)得到3-異丙氧基-4-甲氧基-6-溴芐溴；

F、2’-碘-5-羥基聯(lián)苯-2-甲酸甲酯與3-異丙氧基-4-甲氧基-6-溴芐溴在羥基氫活化催化劑鈀/羥基磷灰石的作用下發(fā)生取代反應(yīng)得到5-(2-溴-5-異丙氧基-4-甲氧基苯甲醇)-2’-碘聯(lián)苯-2-甲酸甲酯；

G、5-(2-溴-5-異丙氧基-4-甲氧基苯甲醇)-2’-碘聯(lián)苯-2-甲酸甲酯在苯環(huán)氫活化催化劑鈀/羥基磷灰石的作用下進(jìn)行分子內(nèi)成環(huán)反應(yīng)得到3-(2-碘苯)-8-異丙氧基-9-甲氧基-6H-二苯并吡喃-2-甲酸甲酯；

H、3-(2-碘苯)-8-異丙氧基-9-甲氧基-6H-二苯并吡喃-2-甲酸甲酯在堿性溶液中水解后再進(jìn)行酸化得到3-(2-碘苯)-8-異丙氧基-9-甲氧基-6H-二苯并吡喃-2-甲酸；

I、3-(2-碘苯)-8-異丙氧基-9-甲氧基-6H-二苯并吡喃-2-甲酸在氫化鋁鋰的作用下經(jīng)羧基氧化還原反應(yīng)得到3-(2-碘苯)-8-異丙氧基-9-甲氧基-6H-二苯并吡喃-2-甲醇；

J、3-(2-碘苯)-8-異丙氧基-9-甲氧基-6H-二苯并吡喃-2-甲醇與對(duì)甲基磺酰氯進(jìn)行羥基活化保護(hù)反應(yīng)得到3-(2-碘苯)-8-異丙氧基-9-甲氧基-6H-二苯并吡喃-2-甲基對(duì)甲基磺酸酯；

K、3-(2-碘苯)-8-異丙氧基-9-甲氧基-6H-苯并吡喃-2-甲基對(duì)甲基磺酸酯在甲基活化催化劑碘化亞銅的作用下發(fā)生分子內(nèi)成環(huán)反應(yīng)得到8-異丙氧基-9-甲氧基-6H-苯并吡喃并苯基并環(huán)己烷并苯；

L、8-異丙氧基-9-甲氧基-6H-苯并吡喃并苯基并環(huán)己烷并苯在溴化鋰的作用下脫去甲基和異丙基得到8,9-二羥基-6H-苯并吡喃并苯基并環(huán)己烷并苯；

M、8,9-二羥基-6H-苯并吡喃并苯基并環(huán)己烷并苯與氯乙酰氯在定位催化劑乙酸鈣的作用下成環(huán)得到目標(biāo)化合物。

進(jìn)一步優(yōu)選，所述的2’-碘-5-羥基聯(lián)苯-2-甲酸甲酯的具體合成過(guò)程為：(1)在反應(yīng)容器中將2-溴-4-硝基苯甲酸甲酯、2-碘苯硼酸和碳酸鉀加入到體積比為10:1的DME與水的混合溶液中，氮?dú)獗Ｗo(hù)下于室溫?cái)嚢?0min，再加入催化劑四(三苯基膦)鈀，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下攪拌均勻，升高溫度至100℃反應(yīng)直至TLC監(jiān)控原料反應(yīng)完全，在真空條件下蒸除溶劑，剩余物加入二氯甲烷中，再用純凈水洗滌兩次，有機(jī)相經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥后蒸除溶劑，再經(jīng)硅膠柱層析分離提純得到2’-碘-5-硝基聯(lián)苯-2-甲酸甲酯；(2)在反應(yīng)容器中將催化劑還原鐵粉加入到冰乙酸中，升溫至85℃后攪拌反應(yīng)45min，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下加入溶有2’-碘-5-硝基聯(lián)苯-2-甲酸甲酯的冰乙酸溶液，滴加完后于85℃反應(yīng)直至TLC監(jiān)控原料反應(yīng)完全，然后通過(guò)硅藻土過(guò)濾反應(yīng)液，硅藻土用熱的冰乙酸進(jìn)行洗滌，在真空條件下蒸除反應(yīng)溶劑，加入飽和碳酸氫鈉，再用乙酸乙酯萃取反應(yīng)液三次，合并有機(jī)相，有機(jī)相經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥后蒸除溶劑，濃縮得到2’-碘-5-胺基聯(lián)苯-2-甲酸甲酯；(3)在反應(yīng)容器中于0℃將2’-碘-5-胺基聯(lián)苯-2-甲酸甲酯加入到質(zhì)量濃度為5％的稀硫酸中，攪拌10min后再滴加溶有氧化催化劑亞硝酸鈉的水溶液，滴加完后保持溫度繼續(xù)反應(yīng)1h，再升溫至60℃反應(yīng)直至TLC監(jiān)控原料反應(yīng)完全，然后冷卻至室溫，用乙酸乙酯萃取反應(yīng)液三次，合并有機(jī)相，有機(jī)相經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥后蒸除溶劑，經(jīng)硅膠柱層析分離提純得到2’-碘-5-羥基聯(lián)苯-2-甲酸甲酯。

進(jìn)一步優(yōu)選，所述的3-異丙氧基-4-甲氧基-6-溴芐溴的具體合成過(guò)程為：(1)在反應(yīng)容器中將3-羥基-4-甲氧基甲苯和2-溴丙烷加入到無(wú)水處理的DMF中，再加入碳酸鉀，升溫至回流反應(yīng)直至TLC監(jiān)控原料反應(yīng)完全，在真空條件下蒸除溶劑，剩余物加入到水中，再用二氯甲烷萃取水相三次，合并有機(jī)相，最后蒸除溶劑后得到3-異丙氧基-4-甲氧基甲苯；(2)在反應(yīng)容器中將3-異丙氧基-4-甲氧基甲苯加入到冰乙酸中，再加入定位催化劑鐵粉，在室溫條件下滴加溴素，30min滴加完，升溫至40℃反應(yīng)直至TLC監(jiān)控原料反應(yīng)完全，真空下蒸除溶劑冰乙酸，濃縮物中加入質(zhì)量濃度為20％的氫氧化鈉溶液，過(guò)濾反應(yīng)液，濾液用二氯甲烷萃取三次，合并有機(jī)相，有機(jī)相再經(jīng)過(guò)無(wú)水硫酸鈉干燥后濃縮得到3-異丙氧基-4-甲氧基-6-溴-芐溴。

進(jìn)一步優(yōu)選，步驟F的具體合成過(guò)程為：在反應(yīng)容器中將2’-碘-5-羥基聯(lián)苯-2-甲酸甲酯和3-異丙氧基-4-甲氧基-6-溴芐溴加入到干燥的丙酮中，再加入羥基氫活化催化劑鈀/羥基磷灰石，加熱至回流反應(yīng)直至TLC監(jiān)控原料反應(yīng)完全，在真空條件下蒸除反應(yīng)溶劑，濃縮物加入到二氯甲烷中，再用純凈水洗滌有機(jī)相三次，分出有機(jī)相，在真空條件下蒸除溶劑后得到粗品，再經(jīng)硅膠柱層析分離提純得到純品5-(2-溴-5-異丙氧基-4-甲氧基苯甲醇)-2’-碘聯(lián)苯-2-甲酸甲酯。

進(jìn)一步優(yōu)選，步驟G的具體合成過(guò)程為：在反應(yīng)容器中將5-(2-溴-5-異丙氧基-4-甲氧基苯甲醇)-2’-碘聯(lián)苯-2-甲酸甲酯和碳酸鉀加入到二甲基乙酰胺中，在N₂保護(hù)下加入苯環(huán)氫活化催化劑鈀/羥基磷灰石，往反應(yīng)體系中持續(xù)通入N₂，同時(shí)排出N₂，使其保持一個(gè)穩(wěn)定流通環(huán)境，室溫?cái)嚢?0min后密閉反應(yīng)容器，將反應(yīng)容器放置在微波反應(yīng)器中，加熱到100℃反應(yīng)直至TLC監(jiān)控原料反應(yīng)完全，從微波反應(yīng)器中取出反應(yīng)容器并加入純凈水淬滅反應(yīng)，再用乙酸乙酯萃取反應(yīng)液三次，合并有機(jī)相，再用無(wú)水硫酸鈉干燥后蒸除溶劑，最后經(jīng)硅膠柱層析分離提純得到3-(2-碘苯)-8-異丙氧基-9-甲氧基-6H-二苯并吡喃-2-甲酸甲酯。

進(jìn)一步優(yōu)選，步驟H的具體合成過(guò)程為：在反應(yīng)容器中將3-(2-碘苯)-8-異丙氧基-9-甲氧基-6H-二苯并吡喃-2-甲酸甲酯加入到乙醇中，再加入溶有氫氧化鈉的水溶液，升溫至70℃反應(yīng)直至TLC監(jiān)控原料反應(yīng)完全，在真空條件下蒸除溶劑，剩余物加入到水中，再用乙酸乙酯洗滌水相三次，水相用稀鹽酸溶解調(diào)節(jié)pH為3，再用二氯甲烷萃取水相三次，合并有機(jī)相后蒸除溶劑得到3-(2-碘苯)-8-異丙氧基-9-甲氧基-6H-二苯并吡喃-2-甲酸。

進(jìn)一步優(yōu)選，步驟I的具體合成過(guò)程為：在反應(yīng)容器中將3-(2-碘苯)-8-異丙氧基-9-甲氧基-6H-二苯并吡喃-2-甲酸加入到無(wú)水THF中，反應(yīng)溫度降低至-60℃，滴加氫化鋁鋰的四氫呋喃溶液，保持溫度繼續(xù)反應(yīng)2h，再升溫至0℃反應(yīng)2h，加入冰水淬滅反應(yīng)，抽濾反應(yīng)液，濾液用乙酸乙酯萃取多次，合并有機(jī)相蒸除溶劑后得到3-(2-碘苯)-8-異丙氧基-9-甲氧基-6H-二苯并吡喃-2-甲醇。

進(jìn)一步優(yōu)選，步驟J的具體合成過(guò)程為：在反應(yīng)容器中將3-(2-碘苯)-8-異丙氧基-9-甲氧基-6H-二苯并吡喃-2-甲醇、對(duì)甲基磺酰氯和碳酸鉀加入到DMF中，升溫至80℃反應(yīng)直至TLC監(jiān)控原料反應(yīng)完全，加入純凈水淬滅反應(yīng)，再用乙酸乙酯萃取三次，合并有機(jī)相，有機(jī)相經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥后蒸除溶劑，再經(jīng)硅膠柱層析分離提純得到3-(2-碘苯)-8-異丙氧基-9-甲氧基-6H-二苯并吡喃-2-甲基對(duì)甲基磺酸酯。

進(jìn)一步優(yōu)選，步驟K的具體合成過(guò)程為：在反應(yīng)容器中將3-(2-甲基苯)-8-異丙氧基-9-甲氧基-6H-二苯并吡喃-2-甲基對(duì)甲基磺酸酯加入到乙腈中，再加入甲基活化催化劑碘化亞銅，氮?dú)獗Ｗo(hù)反應(yīng)體系，攪拌升溫至70℃反應(yīng)直至TLC監(jiān)控原料反應(yīng)完全，減壓蒸除溶劑乙腈，再加入甲基叔丁基醚，冷卻至-5℃，攪拌過(guò)程中有大量固體析出，過(guò)濾反應(yīng)液得到固體，并用冷甲苯洗滌，濾餅烘干后得到8-異丙氧基-9-甲氧基-6H-苯并吡喃并苯基并環(huán)己烷并苯。

進(jìn)一步優(yōu)選，步驟L的具體合成過(guò)程為：在反應(yīng)容器中將8-異丙氧基-9-甲氧基-6H-苯并吡喃并苯基并環(huán)己烷并苯加入到二氯甲烷中，再加入溴化鋰，于0℃攪拌反應(yīng)直至TLC監(jiān)控原料反應(yīng)完全，然后蒸除反應(yīng)溶劑得到8,9-二羥基-6H-苯并吡喃并苯基并環(huán)己烷并苯。

進(jìn)一步優(yōu)選，步驟M的具體合成過(guò)程為：在反應(yīng)容器中將8,9-二羥基-6H-苯并吡喃并苯基并環(huán)己烷并苯和氯乙酰氯加入到二氯甲烷中，再加入碳酸鉀和定位催化劑乙酸鈣于0℃反應(yīng)直至TLC監(jiān)控原料反應(yīng)完全，蒸除反應(yīng)溶劑得到目標(biāo)化合物。

本發(fā)明所述的具有苯并1,4-二氧雜環(huán)己二烯酮結(jié)構(gòu)的FSH拮抗劑的合成路線為：

本發(fā)明合成工藝簡(jiǎn)單且成本低廉，經(jīng)過(guò)活性測(cè)試可知制得的具有苯并1,4-二氧雜環(huán)己二烯酮結(jié)構(gòu)的FSH拮抗劑藥物分子對(duì)FSHR受體的作用效果較好，有望進(jìn)一步推廣應(yīng)用。

具體實(shí)施方式

以下通過(guò)實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的上述內(nèi)容做進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明，但不應(yīng)該將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實(shí)施例，凡基于本發(fā)明上述內(nèi)容實(shí)現(xiàn)的技術(shù)均屬于本發(fā)明的范圍。

實(shí)施例1

在反應(yīng)瓶中，把2-溴-4-硝基苯甲酸甲酯5.0g、2-碘苯硼酸4.0g和碳酸鉀5g加入到體積比為10:1的DME與水的混合溶液120mL中，氮?dú)獗Ｗo(hù)下室溫?cái)嚢?0min；，再加入催化劑四(三苯基膦)鈀1g，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下攪拌均勻，緩慢升高溫度至100℃，反應(yīng)14h后TLC監(jiān)控原料反應(yīng)完全，在真空條件下蒸除溶劑，剩余物加入二氯甲烷中，再用純凈水50mL洗滌兩次，有機(jī)相經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥后，蒸除溶劑，再經(jīng)硅膠柱層析分離提純得到純凈的2’-碘-5-硝基聯(lián)苯-2-甲酸甲酯4.9g；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ:8.41(s,1H),8.23(d,J＝2.4Hz,1H),8.16(d,J＝8.6Hz,1H),7.57-7.50(m,2H),7.41-7.31(m,2H),3.72(s,3H)。

實(shí)施例2

在反應(yīng)瓶中，把還原鐵粉5g加入到冰乙酸70mL中，升溫至85℃后攪拌反應(yīng)45min，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下緩慢加入溶有2’-碘-5-硝基聯(lián)苯-2-甲酸甲酯6g的冰乙酸溶液70mL，滴加完后在85℃條件下繼續(xù)反應(yīng)2h，TLC監(jiān)控原料反應(yīng)完全后通過(guò)硅藻土進(jìn)行過(guò)濾反應(yīng)液，硅藻土再用一定量的熱的冰乙酸進(jìn)行洗滌，在真空條件下蒸除反應(yīng)溶劑，加入一定量的飽和碳酸氫鈉，再用乙酸乙酯萃取反應(yīng)液三次，合并有機(jī)相，有機(jī)相經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥后蒸除溶劑，濃縮得到純凈的2’-碘-5-胺基聯(lián)苯-2-甲酸甲酯5.1g；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ:7.72(d,J＝8.6Hz,1H),7.41-7.35(m,1H),7.24(d,J＝8.6Hz,2H),7.18(s,1H),6.63(s,1H),6.45(s,1H),6.02(s,2H),3.54(s,3H)。

實(shí)施例3

在反應(yīng)瓶中，在溫度為0℃條件下，把2’-碘-5-胺基聯(lián)苯-2-甲酸甲酯5.0g加入到質(zhì)量濃度為5％的稀硫酸100mL中，攪拌10min后，再緩慢滴加溶有亞硝酸鈉2.0g的水溶液20mL，滴加完后保持溫度繼續(xù)反應(yīng)1h，再緩慢升溫至60℃反應(yīng)8h，TLC監(jiān)控原料反應(yīng)完全后冷卻至室溫，用乙酸乙酯萃取反應(yīng)液三次，合并有機(jī)相，有機(jī)相經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥后蒸除溶劑，經(jīng)硅膠柱層析分離提純得到純凈的2’-碘-5-羥基聯(lián)苯-2-甲酸甲酯3.9g；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ:10.45(s,1H),7.84(d,J＝8.6Hz,1H),7.45-7.38(m,1H),7.37-7.20(m,3H),6.92(d,J＝8.0Hz,1H),6.72(s,1H),3.59(s,3H)。

實(shí)施例4

在反應(yīng)瓶中，把3-羥基-4-甲氧基甲苯10g和2-溴丙烷10g加入到無(wú)水處理的DMF100mL中，再加入碳酸鉀15g，緩慢升溫至回流反應(yīng)24h，TLC監(jiān)控原料反應(yīng)完全，在真空條件下蒸除溶劑，剩余物加入到水中，再用二氯甲烷萃取水相三次，合并有機(jī)相，最后蒸除溶劑后得到產(chǎn)品3-異丙氧基-4-甲氧基甲苯13g；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ:7.31-7.28(m,1H),7.17-7.12(m,2H),5.08-5.01(m,1H),4.57-4.47(m,2H),4.34(d,J＝8.0Hz,2H),3.75(s,3H),1.28(d,J＝8.0Hz,6H)。

實(shí)施例5

在反應(yīng)瓶中，把3-異丙氧基-4-甲氧基甲苯15g加入到冰乙酸100mL中，再加入定位催化劑鐵粉3g，在室溫條件下緩慢滴加溴素8mL，約30min滴加完，升溫至40℃后反應(yīng)10h，TLC監(jiān)控原料反應(yīng)完全，真空下蒸除溶劑冰乙酸，濃縮物中加入一定量的質(zhì)量濃度為20％的氫氧化鈉溶液，過(guò)濾反應(yīng)液，濾液用二氯甲烷萃取三次，合并有機(jī)相，有機(jī)相再經(jīng)過(guò)無(wú)水硫酸鈉干燥后濃縮得到3-異丙氧基-4-甲氧基-6-溴-芐溴23g；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ:7.29(s,1H),7.20(s,1H),4.72(s,2H),4.61-4.53(m,1H),3.81(s,3H),1.28(d,J＝8.0Hz,6H)。

實(shí)施例6

在反應(yīng)瓶中加入二氯化鈀5g，再加入質(zhì)量比為1:1的甲醇-水混合溶液250mL，再加入羧甲基纖維素鈉1g，用碳酸鈉調(diào)節(jié)體系的pH為4.5，加入羥基磷灰石50g，在室溫下攪拌2h后放入高壓釜中，在100KPa，100℃條件下攪拌加氫還原反應(yīng)2h，減壓抽濾，去離子水洗至中性且經(jīng)硝酸銀溶液檢測(cè)無(wú)氯離子，在常壓60℃條件下干燥3h得到鈀/羥基磷灰石40g。

實(shí)施例7

在反應(yīng)瓶中，把2’-碘-5-羥基聯(lián)苯-2-甲酸甲酯10g和3-異丙氧基-4-甲氧基-6-溴芐溴15g加入到干燥的丙酮5000mL中，再加入羥基氫活化催化劑鈀/羥基磷灰石1g，加熱至回流反應(yīng)4h，TLC監(jiān)控原料反應(yīng)完全，在真空條件下蒸除反應(yīng)溶劑，濃縮物加入到二氯甲烷150mL中，再用純凈水100mL洗滌有機(jī)相三次，分出有機(jī)相，在真空條件下蒸除溶劑后得到產(chǎn)品粗品，再經(jīng)硅膠柱層析分離提純得到純凈的5-(2-溴-5-異丙氧基-4-甲氧基苯甲醇)-2’-碘聯(lián)苯-2-甲酸甲酯15g；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ:7.94(d,J＝8.0Hz,1H),7.47-7.41(m,1H),7.40(s,1H),7.34-7.18(m,5H),7.03(s,1H),5.18(s,2H),4.61-4.53(m,1H),3.81(s,3H),3.62(s,3H),1.28(d,J＝8.0Hz,6H)。

實(shí)施例8

在反應(yīng)瓶中，把5-(2-溴-5-異丙氧基-4-甲氧基苯甲醇)-2’-碘聯(lián)苯-2-甲酸甲酯10g和碳酸鉀5g加入二甲基乙酰胺100mL中，在N₂保護(hù)下加入苯環(huán)氫活化催化劑鈀/羥基磷灰石1g，往反應(yīng)體系中不停通入N₂，同時(shí)排出N₂，使其保持一個(gè)穩(wěn)定流通環(huán)境，室溫?cái)嚢?0min后密閉反應(yīng)瓶，把其放置在微波反應(yīng)器中，加熱到100℃反應(yīng)24h，TLC監(jiān)控原料反應(yīng)完全；從微波反應(yīng)器中拿出反應(yīng)瓶，加入一定量的純凈水淬滅反應(yīng)，再用乙酸乙酯萃取反應(yīng)液三次，合并有機(jī)相，再用無(wú)水硫酸鈉干燥后蒸除溶劑，最后經(jīng)硅膠柱層析分離提純得到3-(2-碘苯)-8-異丙氧基-9-甲氧基-6H-二苯并吡喃-2-甲酸甲酯7.5g；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ:8.57(d,J＝8.0Hz,1H),7.68-7.51(m,4H),7.43(s,1H),7.11-7.05(m,3H),5.20(s,2H),4.70(d,J＝12.0Hz,1H),3.89(s,3H),3.83(s,3H),1.25(d,J＝8.0Hz,6H)。

實(shí)施例9

在反應(yīng)瓶中，把3-(2-碘苯)-8-異丙氧基-9-甲氧基-6H-二苯并吡喃-2-甲酸甲酯5g加入到乙醇30mL中，再加入溶有氫氧化鈉2.5g的水溶液10mL，升溫至70℃反應(yīng)1h，TLC監(jiān)控原料反應(yīng)完全，在真空條件下蒸除溶劑，剩余物加入到水中，再用乙酸乙酯30mL洗滌水相三次，水相再用稀鹽酸溶解調(diào)節(jié)pH為3，再用二氯甲烷萃取水相三次，合并有機(jī)相，最后蒸除溶劑后得到3-(2-碘苯)-8-異丙氧基-9-甲氧基-6H-二苯并吡喃-2-甲酸4.1g；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ:8.56(d,J＝8.0Hz,1H),7.68-7.51(m,4H),7.43(s,1H),7.11-7.05(m,3H),5.22(s,2H),4.70(d,J＝12.0Hz,1H),3.81(s,3H),1.27(d,J＝8.0Hz,6H)。

實(shí)施例10

在反應(yīng)瓶中，把3-(2-碘苯)-8-異丙氧基-9-甲氧基-6H-二苯并吡喃-2-甲酸10g加入到無(wú)水THF 200mL中，反應(yīng)溫度降低至-60℃，緩慢滴加氫化鋁鋰的四氫呋喃溶液30mL，保持溫度繼續(xù)反應(yīng)2h，再緩慢升溫至0℃，反應(yīng)2h，加入一定量的冰水淬滅反應(yīng)，抽濾反應(yīng)液，濾液用乙酸乙酯萃取多次，合并有機(jī)相蒸除溶劑后得到3-(2-碘苯)-8-異丙氧基-9-甲氧基-6H-二苯并吡喃-2-甲醇7.7g；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ:8.61(d,J＝8.0Hz,1H),7.71-7.57(m,4H),7.43-7.39(m,2H),7.11-7.15(m,2H),5.22(s,2H),4.70(s,1H),4.53(s,2H),3.81(s,3H),1.21(d,J＝8.0Hz,6H)。

實(shí)施例11

在反應(yīng)瓶中，把3-(2-碘苯)-8-異丙氧基-9-甲氧基-6H-二苯并吡喃-2-甲醇10g、對(duì)甲基磺酰氯5g和碳酸鉀20g加入到DMF，緩慢升溫至80℃，反應(yīng)8h后TLC監(jiān)控原料反應(yīng)完全，加入一定量的純凈水淬滅反應(yīng)，再用乙酸乙酯50mL萃取三次，合并有機(jī)相，有機(jī)相經(jīng)無(wú)水硫酸鈉30g干燥后蒸除溶劑得到純凈的3-(2-碘苯)-8-異丙氧基-9-甲氧基-6H-二苯并吡喃-2-甲基對(duì)甲基磺酸酯8.4g；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ:7.87-7.55(m,5H),7.39-7.09(m,3H),5.09(s,2H),4.56(s,1H),4.31(s,2H),3.79(s,3H),3.13(s,3H),1.25-1.20(m,6H)。

實(shí)施例12

在反應(yīng)瓶中，把3-(2-甲基苯)-8-異丙氧基-9-甲氧基-6H-二苯并吡喃-2-甲基對(duì)甲基磺酸酯10g加入到乙腈150mL中，再加入催化劑碘化亞銅5g，氮?dú)獗Ｗo(hù)反應(yīng)體系，機(jī)械攪拌加熱升溫至70℃，反應(yīng)10h后經(jīng)TLC監(jiān)控原料反應(yīng)完全，減壓蒸出溶劑乙腈，再加入一定量的甲基叔丁基醚700mL，冷卻至-5℃，攪拌過(guò)程中逐漸有大量固體析出，過(guò)濾反應(yīng)液得到固體，并用一定量的冷甲苯200mL洗滌，濾餅烘干后得到8-異丙氧基-9-甲氧基-6H-苯并吡喃并苯基并環(huán)己烷并苯9.3g；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ:7.95(d,J＝12.0Hz,2H),7.72(d,J＝12.0Hz,1H),7.55-7.48(m,4H),7.22-7.21(m,1H),5.17(s,2H),4.73(s,1H),3.84(s,3H),3.01-2.97(m,4H),1.27-1.22(m,6H)。

實(shí)施例13

在反應(yīng)瓶中，把8-異丙氧基-9-甲氧基-6H-苯并吡喃并苯基并環(huán)己烷并苯15g加入到二氯甲烷300mL中，再加入溴化鋰10g，在0℃條件下攪拌2h，TLC監(jiān)控原料反應(yīng)完全后，蒸除反應(yīng)溶劑得到8,9-二羥基-6H-苯并吡喃并苯基并環(huán)己烷并苯；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ:7.82-7.77(m,3H),7.55-7.48(m,4H),7.22-7.21(m,1H),5.37-5.35(m,2H),5.17(s,2H),3.06-3.02(m,4H)。

實(shí)施例14(缺少原料氯乙酰氯的加入，已補(bǔ)充)

在反應(yīng)瓶中，把8,9-二羥基-6H-苯并吡喃并苯基并環(huán)己烷并苯15g加入到二氯甲烷300mL中，再加入碳酸鉀10g和定位催化劑乙酸鈣，在0℃條件下緩慢滴加氯乙酰氯30mL攪拌2h，TLC監(jiān)控原料反應(yīng)完全后，蒸除反應(yīng)溶劑得到目標(biāo)化合物13g.¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ:7.89-7.85(m,2H),7.68(d,J＝12.0Hz,1H),7.52-7.47(m,4H),7.21-7.20(m,1H),5.37-5.35(m,2H),5.17(s,2H),4.78(s,2H),3.06-3.02(m,4H)。

實(shí)施例15

抗腫瘤活性測(cè)試

收集生長(zhǎng)期卵巢癌細(xì)胞OVCAR-3，以MTS法測(cè)定一下化合物的抗癌活性，將細(xì)胞以適當(dāng)濃度(每毫升4×10⁴個(gè)細(xì)胞)加到96孔細(xì)胞培養(yǎng)板中(含10％胎小牛血清得培養(yǎng)液配成單個(gè)細(xì)胞懸液)，培養(yǎng)24小時(shí)后，在37℃、體積濃度為5％的CO₂條件下與不同濃度的化合物作用72小時(shí)，然后將MTS(最終質(zhì)量濃度2mg/mL)和DMS(最終摩爾濃度30μM)的混合物直接加入含細(xì)胞的培養(yǎng)基中，繼續(xù)置培養(yǎng)箱孵育4h。作用4h后，棄去上清液，每孔加入150μLDMSO，振蕩，細(xì)胞存活率通過(guò)其對(duì)MTS作用的代謝物在酶聯(lián)免疫監(jiān)測(cè)儀490nm波長(zhǎng)下的吸收率測(cè)定，F(xiàn)SHR拮抗劑藥物分子對(duì)該細(xì)胞的抑制率IC50為201μmol·L^-1。

初步生物活性測(cè)試表明，該化合物在卵巢癌細(xì)胞OVCAR-3中對(duì)癌細(xì)胞均有抑制作用。

綜上所述，本發(fā)明提供了一種具有苯并1,4-二氧雜環(huán)己二烯酮結(jié)構(gòu)的FSHR拮抗劑及其制備方法，這是該類化合物該用途的首次發(fā)現(xiàn)，具有重大的研發(fā)潛力。

以上實(shí)施例描述了本發(fā)明的基本原理、主要特征及優(yōu)點(diǎn)，本行業(yè)的技術(shù)人員應(yīng)該了解，本發(fā)明不受上述實(shí)施例的限制，上述實(shí)施例和說(shuō)明書中描述的只是說(shuō)明本發(fā)明的原理，在不脫離本發(fā)明原理的范圍下，本發(fā)明還會(huì)有各種變化和改進(jìn)，這些變化和改進(jìn)均落入本發(fā)明保護(hù)的范圍內(nèi)。