本發(fā)明涉及生物制品技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種防治土傳病害復(fù)合菌劑及其制備方法。

背景技術(shù)：

我國(guó)農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中，由于化學(xué)肥料的長(zhǎng)期使用，致使農(nóng)田生態(tài)環(huán)境、土壤理化性質(zhì)、土壤結(jié)構(gòu)和土壤微生物區(qū)系受到不同程度的破壞，以及植物土傳病害的病原物的復(fù)合侵染，在一定程度上嚴(yán)重影響了農(nóng)產(chǎn)品的生產(chǎn)。

隨著微生物技術(shù)在農(nóng)業(yè)中的應(yīng)用，利用有益微生物殺滅或壓低病原生物數(shù)量以控制植物病害發(fā)生、發(fā)展，許多功能菌也廣泛應(yīng)用于農(nóng)藥和肥料領(lǐng)域，為實(shí)現(xiàn)環(huán)保、無(wú)污染和高效農(nóng)業(yè)生產(chǎn)提供了有效的方法和解決途徑。

目前市面上同類技術(shù)產(chǎn)品雖能在秸稈資源的利用和對(duì)土壤有機(jī)質(zhì)的提升方面有一定促進(jìn)作用，但仍存在著以下問題：菌種存活能力差，多種微生物一起培養(yǎng)產(chǎn)生拮抗，容易造成部分菌種死亡，從而影響生防效果；菌種之間會(huì)產(chǎn)生抗衡，適應(yīng)性差，應(yīng)用效果不穩(wěn)定；制備方法不完善、不成熟，工業(yè)化程度低。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種既能促進(jìn)土壤改良、又有良好生防效果的防治土傳病害復(fù)合菌劑。

為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明的技術(shù)方案是：防治土傳病害復(fù)合菌劑，包括如下重量份的組份：熒光假單孢菌液體菌種25～35份；枯草芽孢桿菌液體菌種25～35份；巨大芽孢桿菌液體菌種25～35份；蘇云金桿菌液體菌種25～35份；哈次木霉液體菌種3～7份；大豆蛋白粉8～12份；牛肉膏1～3份；瓊脂1～3份；磷酸氫二鉀8～12份；尿素8～12份；糖蜜15～25份。

作為優(yōu)選，所述防治土傳病害復(fù)合菌劑包括如下重量份的組份：熒光假單孢菌液體菌種30份；枯草芽孢桿菌液體菌種30份；巨大芽孢桿菌液體菌種30份；蘇云金桿菌液體菌種30份；哈次木霉液體菌種5份；大豆蛋白粉10份；牛肉膏2份；瓊脂2份；磷酸氫二鉀10份；尿素10份；糖蜜20份。

由于采用了上述技術(shù)方案，本防治土傳病害復(fù)合菌劑具有以下有益效果：

(1)將每種微生物的功能組合為強(qiáng)勢(shì)的菌體，菌種功能各異，完美搭配相符；其中包含固氮、絮凝能力較強(qiáng)的熒光假單胞及解磷菌的芽孢桿菌，分解有機(jī)質(zhì)、纖維、蛋白、秸稈及農(nóng)殘所用的哈次木霉；枯草芽孢桿菌、蘇云金桿菌對(duì)鱗翅目、雙翅目及膜翅目有較強(qiáng)的殺傷力，巨大芽孢桿菌解磷、解藥，是典型的好氣菌，這個(gè)群體具有強(qiáng)有力的防治能力；本產(chǎn)品具有強(qiáng)大的存活能力，能快速繁殖，具有固氮、溶磷、防止肥分流失的效果。

(2)菌種通過(guò)單獨(dú)培養(yǎng)成熟穩(wěn)定后按一定比例組合，避免了多種微生物一起培養(yǎng)產(chǎn)生拮抗造成部分菌種死亡的現(xiàn)象，按照真細(xì)菌的比例搭配避免了菌之間的抗衡，本產(chǎn)品是一種多功能復(fù)合型的生防菌群，對(duì)當(dāng)前的土壤改良、農(nóng)業(yè)的環(huán)保、廢棄秸稈垃圾有著很好的解決方式，既能促進(jìn)土壤改良，又有很好的生防效果，利于改善土壤結(jié)構(gòu)、防止肥分流失、保護(hù)生態(tài)環(huán)境。

本發(fā)明還提供了上述防治土傳病害復(fù)合菌劑的制備方法，包括如下步驟：

步驟一、培養(yǎng)基的制備

(1)培養(yǎng)基a的制備

取氨基酸、磷酸二氫鉀、葡萄糖、蛋白胨、尿素、牛肉膏和水制成重量含量為氨基酸1.5～2.5％、磷酸二氫鉀1.5～2.5％、葡萄糖0.5～1.5％、蛋白胨0.1～0.9％、尿素0.1～0.9％、牛肉膏0.5～1.5％的混合液，ph值6.5～7.5，得培養(yǎng)基a；

(2)培養(yǎng)基b的制備

取硝酸鉀、氯化鈉、糖蜜、葡萄糖和水制成重量含量為硝酸鉀0.3～0.8％、氯化鈉0.1～0.3％，糖蜜3～8％，葡萄糖1～3％的混合液，ph值6.5～7.5，得培養(yǎng)基b；

步驟二、液體菌種的培養(yǎng)

取熒光假單孢菌、枯草芽孢桿菌、巨大芽孢桿菌和蘇云金桿菌先在無(wú)菌室純化復(fù)壯，然后分別用500克培養(yǎng)基a進(jìn)行培養(yǎng)，得到熒光假單孢菌液體菌種、枯草芽孢桿菌液體菌種、巨大芽孢桿菌液體菌種和蘇云金桿菌液體菌種；培養(yǎng)條件為25～30℃搖床培養(yǎng)24～72小時(shí)；

取哈次木霉先在無(wú)菌室純化復(fù)壯，然后分別用500克培養(yǎng)基b進(jìn)行培養(yǎng)，得到哈次木霉液體菌種；培養(yǎng)條件為25～30℃搖床培養(yǎng)24～72小時(shí)；

步驟三、液體菌種的熟化

將步驟二中培養(yǎng)后的熒光假單孢菌液體菌種、枯草芽孢桿菌液體菌種、巨大芽孢桿菌液體菌種、蘇云金桿菌液體菌種和哈次木霉液體菌種分別投入90～100公斤培養(yǎng)基中，在種子罐內(nèi)25～35℃培養(yǎng)5～8天，熟化后備用；

步驟四、液體菌種的復(fù)合與強(qiáng)化

取步驟三中熟化后的熒光假單孢菌液體菌種、枯草芽孢桿菌液體菌種、巨大芽孢桿菌液體菌種、蘇云金桿菌液體菌種、哈次木霉液體菌種、以及大豆蛋白粉、牛肉膏、瓊脂、磷酸氫二鉀、尿素、糖蜜按比例混合成復(fù)合體，即制得該防治土傳病害復(fù)合菌劑。

作為優(yōu)選，步驟四中各組份的重量份配比如下：熒光假單孢菌液體菌種25～35份；枯草芽孢桿菌液體菌種25～35份；巨大芽孢桿菌液體菌種25～35份；蘇云金桿菌液體菌種25～35份；哈次木霉液體菌種3～7份；大豆蛋白粉8～12份；牛肉膏1～3份；瓊脂1～3份；磷酸氫二鉀8～12份；尿素8～12份；糖蜜15～25份。

由于采用了上述技術(shù)方案，本制備方法具有以下有益效果：利用各自微生物的特性在培養(yǎng)過(guò)程中實(shí)行菌種的單獨(dú)培養(yǎng)，菌種成熟穩(wěn)定后加以復(fù)合使其進(jìn)入穩(wěn)定狀態(tài)，防止混合后導(dǎo)致有些菌種衰微，避免了多種微生物一起培養(yǎng)產(chǎn)生拮抗造成部分菌種死亡的現(xiàn)象。本制備方法簡(jiǎn)單易于實(shí)現(xiàn)，這種方式復(fù)合而成菌種功能各異，完美搭配相符，具有固氮、溶磷、解鉀、分解有機(jī)質(zhì)、抑制蟲害和促進(jìn)有機(jī)質(zhì)轉(zhuǎn)換、加速有機(jī)質(zhì)分解養(yǎng)分等功能，既能促進(jìn)土壤改良，又有很好的生防效果。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合實(shí)施例，進(jìn)一步闡述本發(fā)明。

實(shí)施例1

本實(shí)施例中，防治土傳病害復(fù)合菌劑包括如下重量份的組份：熒光假單孢菌液體菌種25份；枯草芽孢桿菌液體菌種25份；巨大芽孢桿菌液體菌種25份；蘇云金桿菌液體菌種25份；哈次木霉液體菌種3份；大豆蛋白粉8份；牛肉膏1份；瓊脂1份；磷酸氫二鉀8份；尿素8份；糖蜜15份。

其制備方法包括如下步驟：

步驟一、培養(yǎng)基的制備

(1)培養(yǎng)基a的制備

取氨基酸、磷酸二氫鉀、葡萄糖、蛋白胨、尿素、牛肉膏和水制成重量含量為氨基酸1.5％、磷酸二氫鉀1.5％、葡萄糖0.5％、蛋白胨0.2％、尿素0.3％、牛肉膏0.5％的混合液，ph值6.5～7.5，得培養(yǎng)基a；

(2)培養(yǎng)基b的制備

取硝酸鉀、氯化鈉、糖蜜、葡萄糖和水制成重量含量為硝酸鉀0.3％、氯化鈉0.1％，糖蜜4％，葡萄糖1％的混合液，ph值6.5～7.5，得培養(yǎng)基b；

步驟二、液體菌種的培養(yǎng)

取熒光假單孢菌、枯草芽孢桿菌、巨大芽孢桿菌和蘇云金桿菌先在無(wú)菌室純化復(fù)壯，然后分別用500克培養(yǎng)基a進(jìn)行培養(yǎng)，得到熒光假單孢菌液體菌種、枯草芽孢桿菌液體菌種、巨大芽孢桿菌液體菌種和蘇云金桿菌液體菌種；培養(yǎng)條件為25～30℃搖床培養(yǎng)24～72小時(shí)；

取哈次木霉先在無(wú)菌室純化復(fù)壯，然后分別用500克培養(yǎng)基b進(jìn)行培養(yǎng)，得到哈次木霉液體菌種；培養(yǎng)條件為25～30℃搖床培養(yǎng)24～72小時(shí)；

步驟三、液體菌種的熟化

將步驟二中培養(yǎng)后的熒光假單孢菌液體菌種、枯草芽孢桿菌液體菌種、巨大芽孢桿菌液體菌種、蘇云金桿菌液體菌種和哈次木霉液體菌種分別投入90～100公斤培養(yǎng)基中，在種子罐內(nèi)25～35℃培養(yǎng)5～8天，熟化后備用；

步驟四、液體菌種的復(fù)合與強(qiáng)化

取步驟三中熟化后的熒光假單孢菌液體菌種、枯草芽孢桿菌液體菌種、巨大芽孢桿菌液體菌種、蘇云金桿菌液體菌種、哈次木霉液體菌種、以及大豆蛋白粉、牛肉膏、瓊脂、磷酸氫二鉀、尿素、糖蜜按上述重量份比例混合成復(fù)合體，即制得該防治土傳病害復(fù)合菌劑。

實(shí)施例2

本實(shí)施例中，防治土傳病害復(fù)合菌劑包括如下重量份的組份：熒光假單孢菌液體菌種30份；枯草芽孢桿菌液體菌種30份；巨大芽孢桿菌液體菌種30份；蘇云金桿菌液體菌種30份；哈次木霉液體菌種5份；大豆蛋白粉10份；牛肉膏2份；瓊脂2份；磷酸氫二鉀10份；尿素10份；糖蜜20份。

其制備方法包括如下步驟：

步驟一、培養(yǎng)基的制備

(1)培養(yǎng)基a的制備

取氨基酸、磷酸二氫鉀、葡萄糖、蛋白胨、尿素、牛肉膏和水制成重量含量為氨基酸2％、磷酸二氫鉀2％、葡萄糖1％、蛋白胨0.5％、尿素0.5％、牛肉膏1％的混合液，ph值6.5～7.5，得培養(yǎng)基a；

(2)培養(yǎng)基b的制備

取硝酸鉀、氯化鈉、糖蜜、葡萄糖和水制成重量含量為硝酸鉀0.5％、氯化鈉0.2％，糖蜜5％，葡萄糖2％的混合液，ph值6.5～7.5，得培養(yǎng)基b；

步驟二、液體菌種的培養(yǎng)

取熒光假單孢菌、枯草芽孢桿菌、巨大芽孢桿菌和蘇云金桿菌先在無(wú)菌室純化復(fù)壯，然后分別用500克培養(yǎng)基a進(jìn)行培養(yǎng)，得到熒光假單孢菌液體菌種、枯草芽孢桿菌液體菌種、巨大芽孢桿菌液體菌種和蘇云金桿菌液體菌種；培養(yǎng)條件為25～30℃搖床培養(yǎng)24～72小時(shí)；

取哈次木霉先在無(wú)菌室純化復(fù)壯，然后分別用500克培養(yǎng)基b進(jìn)行培養(yǎng)，得到哈次木霉液體菌種；培養(yǎng)條件為25～30℃搖床培養(yǎng)24～72小時(shí)；

步驟三、液體菌種的熟化

將步驟二中培養(yǎng)后的熒光假單孢菌液體菌種、枯草芽孢桿菌液體菌種、巨大芽孢桿菌液體菌種、蘇云金桿菌液體菌種和哈次木霉液體菌種分別投入90～100公斤培養(yǎng)基中，在種子罐內(nèi)25～35℃培養(yǎng)5～8天，熟化后備用；

步驟四、液體菌種的復(fù)合與強(qiáng)化

取步驟三中熟化后的熒光假單孢菌液體菌種、枯草芽孢桿菌液體菌種、巨大芽孢桿菌液體菌種、蘇云金桿菌液體菌種、哈次木霉液體菌種、以及大豆蛋白粉、牛肉膏、瓊脂、磷酸氫二鉀、尿素、糖蜜按上述重量份比例混合成復(fù)合體，即制得該防治土傳病害復(fù)合菌劑。

實(shí)施例3

本實(shí)施例中，防治土傳病害復(fù)合菌劑包括如下重量份的組份：熒光假單孢菌液體菌種35份；枯草芽孢桿菌液體菌種35份；巨大芽孢桿菌液體菌種35份；蘇云金桿菌液體菌種35份；哈次木霉液體菌種7份；大豆蛋白粉12份；牛肉膏3份；瓊脂3份；磷酸氫二鉀12份；尿素12份；糖蜜25份。

其制備方法包括如下步驟：

步驟一、培養(yǎng)基的制備

(1)培養(yǎng)基a的制備

取氨基酸、磷酸二氫鉀、葡萄糖、蛋白胨、尿素、牛肉膏和水制成重量含量為氨基酸2.5％、磷酸二氫鉀2.5％、葡萄糖1.5％、蛋白胨0.8％、尿素0.8％、牛肉膏1.5％的混合液，ph值6.5～7.5，得培養(yǎng)基a；

(2)培養(yǎng)基b的制備

取硝酸鉀、氯化鈉、糖蜜、葡萄糖和水制成重量含量為硝酸鉀0.8％、氯化鈉0.3％，糖蜜8％，葡萄糖3％的混合液，ph值6.5～7.5，得培養(yǎng)基b；

步驟二、液體菌種的培養(yǎng)

取熒光假單孢菌、枯草芽孢桿菌、巨大芽孢桿菌和蘇云金桿菌先在無(wú)菌室純化復(fù)壯，然后分別用500克培養(yǎng)基a進(jìn)行培養(yǎng)，得到熒光假單孢菌液體菌種、枯草芽孢桿菌液體菌種、巨大芽孢桿菌液體菌種和蘇云金桿菌液體菌種；培養(yǎng)條件為25～30℃搖床培養(yǎng)24～72小時(shí)；

取哈次木霉先在無(wú)菌室純化復(fù)壯，然后分別用500克培養(yǎng)基b進(jìn)行培養(yǎng)，得到哈次木霉液體菌種；培養(yǎng)條件為25～30℃搖床培養(yǎng)24～72小時(shí)；

步驟三、液體菌種的熟化

將步驟二中培養(yǎng)后的熒光假單孢菌液體菌種、枯草芽孢桿菌液體菌種、巨大芽孢桿菌液體菌種、蘇云金桿菌液體菌種和哈次木霉液體菌種分別投入90～100公斤培養(yǎng)基中，在種子罐內(nèi)25～35℃培養(yǎng)5～8天，熟化后備用；

步驟四、液體菌種的復(fù)合與強(qiáng)化

取步驟三中熟化后的熒光假單孢菌液體菌種、枯草芽孢桿菌液體菌種、巨大芽孢桿菌液體菌種、蘇云金桿菌液體菌種、哈次木霉液體菌種、以及大豆蛋白粉、牛肉膏、瓊脂、磷酸氫二鉀、尿素、糖蜜按上述重量份比例混合成復(fù)合體，即制得該防治土傳病害復(fù)合菌劑。

以上所述僅為本發(fā)明示意性的具體實(shí)施方式，并非用以限定本發(fā)明的范圍。任何本領(lǐng)域的技術(shù)人員，在不脫離本發(fā)明的構(gòu)思和原則的前提下所作出的等同變化與修改，均應(yīng)屬于本發(fā)明保護(hù)的范圍。