本發(fā)明屬于黃酮類化合物的提取領(lǐng)域，特別涉及一種從昆侖雪菊中提取紫鉚因的方法。
背景技術(shù)：
：紫鉚因，又名紫鉚查爾酮，英文名稱：butein、2',3,4,4'-tetrahydroxychalcone，cas登記號487-52-5，化學(xué)結(jié)構(gòu)式如下：紫鉚因是一種來源廣泛的植物多酚類物質(zhì)。已有報道證明，紫鉚因可以抑制抗體相關(guān)的腎小球腎炎；在體外還可以抑制一些人類腫瘤細胞的增殖。文獻1(“苦豆子酚性成分的研究”，王桂云，中國中藥雜志，第34卷第10期，2009年5月)報道了一種從苦豆子中提取紫鉚因的方法，5kg苦豆子種子粉末，提取得到50mg紫鉚因。文獻2(“昆侖雪菊中2個黃酮類化合物的分離鑒定及其抗氧化活性評價”，楊英士，南京農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報，第37卷第4期，2014年)報道了一種從昆侖雪菊中提取得到紫鉚因的方法，采用甲醇萃取昆侖雪菊，二次硅膠柱梯度洗脫，得到紫鉚因，且測定了紫鉚因的抗氧化活性。文獻3(“紫鉚因抑制膀胱癌細胞增殖的體內(nèi)外研究”，張麗瑞，腫瘤防治研究，第41卷第7期，2014年)報道了紫鉚因具有抗膀胱癌細胞增殖作用。文獻4(cn200810038433.0)報道了紫鉚因在制備抑制血管新生藥物中的應(yīng)用。可見，紫鉚因有較好的用途，但是其提取方法往往是采用萃取和多次硅膠柱層析的方法，這種提取方法較為繁瑣，且提取率低。為了克服該問題，本發(fā)明提出了一種全新的紫鉚因提取方法。技術(shù)實現(xiàn)要素：本發(fā)明提供了一種紫鉚因的提取方法，該方法以昆侖雪菊為原料，粉碎后用醇類溶劑提取，然后再用大孔樹脂純化，最后結(jié)晶和洗滌后，即可得到純度較高的紫鉚因。該方法具有操作簡單，時間短且提取率和純度高等優(yōu)點。本發(fā)明的技術(shù)方案具體如下：一種紫鉚因的提取方法，包括如下步驟：(1)以晾干的昆侖雪菊為原料，粉碎過篩得粉末；(2)將上述粉末加入到醇類溶劑中，采用索氏提取器提取3-10小時，過濾，取上清液；(3)將上清液加入到大孔吸附樹脂h-60中，吸附2-10小時后，水洗樹脂柱，再用乙醇-丙酮-正己烷的混合溶劑洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮，得初產(chǎn)物；(4)將初產(chǎn)物用乙醇回流溶解，放置結(jié)晶，過濾后再用低極性溶劑洗滌2次并干燥，得到紫鉚因。優(yōu)選的，第(1)步中用10-100g昆侖雪菊作為原料；第(1)步中粉碎過篩所采用的是選自100、200、300、400、500目的篩子。優(yōu)選的，第(2)步中的醇類溶劑選自：甲醇、乙醇、正丙醇、異丙醇，所加入溶劑的體積量是原料粉末重量的5-10倍。索氏提取時間選自3、4、5、6、7、8、9、10個小時。優(yōu)選的，第(3)步中，大孔樹脂的洗脫溶劑乙醇-丙酮-正己烷的體積比例范圍為：8-10:3-5:1-2，吸附時間選自2、3、4、5、6、7、8、9、10個小時。優(yōu)選的，第(4)步中所采用的低極性溶劑選自：石油醚、正己烷、氯仿、甲苯、乙醚等。采用本發(fā)明的方法提取紫鉚因，具有操作簡單，安全可靠，時間短，提取率和純度高等優(yōu)點，且適合大批量進行提取。具體實施方式下面結(jié)合具體實施例進一步闡釋本發(fā)明。實施例1取50g晾干的昆侖雪菊，粉碎過200目篩得粉末；將該粉末加入到250ml甲醇中，采用索氏提取器提取8小時，過濾，取上清液；將上清液加入到500g大孔吸附樹脂h-60中，吸附6小時，1.5l水分三次洗樹脂柱，再用體積比例為10:5:1的乙醇-丙酮-正己烷混合溶劑洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮，得初產(chǎn)物；將初產(chǎn)物用20ml乙醇回流溶解，放置結(jié)晶，過濾后再用石油醚洗滌2次并干燥，得到黃色粉末紫鉚因0.23g，對照標(biāo)準品用高效液相檢測，其特征鋒位置相同，且計算得含量為98.1％。1h-nmr(dmso-d6,300mhz)δ:7.25(1h,d,j＝1.5hz,h-2),6.26(1h,d,j＝2.1hz,h-3′),6.37(1h,dd,j＝9.1,2.1hz,h-5′),6.75(1h,d,j＝8.1hz,h-5),7.21(1h,dd,j＝8.1,1.5hz,h-6),8.15(1h,d,j＝9.0hz,h-6′),7.62(1h,brs,h-α),7.62(1h,brs,h-β),9.82(1h,s,3-oh),9.25(1h,s,4-oh),10.76(1h,s,4′-oh),13.55(1h,s,2′oh)。ms：273.1[m+h]+。經(jīng)核磁和質(zhì)譜確認其為紫鉚因。大孔樹脂的篩選實驗：采用與實施例1相同的方法，區(qū)別在于將大孔樹脂替換，得到的結(jié)果如表1所示。表1：大孔樹脂篩選實驗結(jié)果序號大孔樹脂類型產(chǎn)量(克)純度(％)1h-600.2398.12d1010.0835.23hpd400a0.1152.14lsa-400.0540.35ab-80.1231.26xda-70.1027.1從表1中可以看出，h-60大孔樹脂是提取紫鉚因的最佳樹脂。實施例2取100g晾干的昆侖雪菊，粉碎過100目篩得粉末；將該粉末加入到500ml甲醇中，采用索氏提取器提取10小時，過濾，取上清液；將上清液加入到1kg大孔吸附樹脂h-60中，吸附10小時，3l水分三次洗樹脂柱，再用體積比例為9:5:2的乙醇-丙酮-正己烷混合溶劑洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮，得初產(chǎn)物；將初產(chǎn)物用40ml乙醇回流溶解，放置結(jié)晶，過濾后再用石油醚洗滌2次并干燥，得到黃色粉末紫鉚因0.48g，采用高效液相檢測含量為97.5％。實施例3取10g晾干的昆侖雪菊，粉碎過500目篩得粉末；將該粉末加入到50ml乙醇中，采用索氏提取器提取5小時，過濾，取上清液；將上清液加入到100g大孔吸附樹脂h-60中，吸附3小時，500ml水分三次洗樹脂柱，再用體積比例為8:3:2的乙醇-丙酮-正己烷混合溶劑洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮，得初產(chǎn)物；將初產(chǎn)物用10ml乙醇回流溶解，放置結(jié)晶，過濾后再用氯仿洗滌2次并干燥，得到黃色粉末紫鉚因0.04g，采用高效液相檢測含量為98.8％。實施例4取20g晾干的昆侖雪菊，粉碎過200目篩得粉末；將該粉末加入到100ml乙醇中，采用索氏提取器提取5小時，過濾，取上清液；將上清液加入到200g大孔吸附樹脂h-60中，吸附5小時，1l水分三次洗樹脂柱，再用體積比例為10:5:1的乙醇-丙酮-正己烷混合溶劑洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮，得初產(chǎn)物；將初產(chǎn)物用15ml乙醇回流溶解，放置結(jié)晶，過濾后再用石油醚洗滌2次并干燥，得到黃色粉末紫鉚因0.09g，采用高效液相檢測含量為97.9％。當(dāng)前第1頁12