專利名稱:一種從木豆根莖中提取、分離和純化染料木素的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及從植物中提取、分離和純化活性性成分的一種方法，具體是從木豆的 新鮮或干燥根莖中提取、分離和純化染料木素。
背景技術(shù)：
染料木素(Genistein)是一種異黃酮類化合物，廣泛存在于豆科植物中，是一種 雌激素樣化合物。在體內(nèi)代謝中它能與內(nèi)源性雌激素受體結(jié)合發(fā)揮雌激素樣作用，被稱為 植物性雌激素類藥物。醫(yī)藥中主要用于治療由缺乏雌激素引起的婦女病和老年性骨質(zhì)疏松 癥。在當(dāng)今世界范圍內(nèi)，由于人口老齡化，骨質(zhì)疏松癥等老年疾病發(fā)病率呈上升趨勢，雌激 素類藥物作為骨質(zhì)疏松治療的主要藥物有著良好的市場銷售前景。異黃酮類雌激素只有 苷原形式才有雌激素活性，染料木素為異黃酮的苷原，易吸收，吸收至人體后可直接發(fā)揮作 用，無需象大豆異黃酮中大多數(shù)苷在體內(nèi)代謝后才可起作用，臨床使用排除了吸收不完全 和吸收后體內(nèi)水解不完全等因素，提高了藥物利用度，減少了對(duì)療效的干擾。此外，染料木 素還在抗腫瘤(SanjeevBanerjee et al，2005)、抗氧化(Huachen Wei et al，1998)、降血 脂(金永生等，2002)、體外抗肝纖維化(Qi Lihong et al，2001)、雌激素作用和抗雌激素 作用(鄭杰等，1998)等方面具有明顯的生物活性，估計(jì)隨著研究的深入，有關(guān)染料木素的 研究和開發(fā)將成為倍受人們關(guān)注的新熱點(diǎn)。染料木素的開發(fā)應(yīng)用具有良好的發(fā)展前景。但 是，有關(guān)提純工藝的文獻(xiàn)報(bào)道很少，已有的提取純化染料木素的方法主要是傳統(tǒng)的醇提取、 柱層析純化。傳統(tǒng)的提純過程漫長且目標(biāo)化合物損失較多，采用多次硅膠柱層析，操作步驟 繁多且洗脫液以氯仿、丙酮、乙酸乙醋等毒性較大、價(jià)格較高的試劑為主。中國專利“染料木 素的提取方法”(公開號(hào)CN1465571)中采用傳統(tǒng)的醇提、濃縮、水沉、回流、抽濾、加熱回流 水解等方法得到染料木素，此法不夠精細(xì)、有機(jī)溶劑用量大、產(chǎn)品雜質(zhì)含量高、得率低。王鳳 芹(2007年)等采用傳統(tǒng)的柱層析方法分離得到染料木素，歷時(shí)長，得率低。為此，有必要 尋找來源豐富的原料和提取簡單、成本低廉的制備工藝，以供大量生產(chǎn)，為染料木素作為藥 品的開發(fā)提供條件。目前，作為提取染料木素的原料主要為豆類作物和齒狀植物，據(jù)文獻(xiàn)報(bào) 道染料木素在主要原料中的含量為葛根0. 065% -0. 078% ；槐角0. 5% -1% ；紅車軸草 0.3%左右；豆豉0. 34%左右；大豆0.04% -0.24%。國內(nèi)外的研究普遍認(rèn)為大豆是染料 木素的重要食物來源，但由于分離條件、手段等多種因素影響，大豆異黃酮中各種活性成分 分離難度較大、分離成本高，而且大量實(shí)驗(yàn)研究證明大豆中的染料木素含量較低，成品收率 約為原料的0. 04%，因此，用大豆作為原料很難產(chǎn)生較大的開發(fā)價(jià)值。
為了克服上述問題，本發(fā)明人通過多年來對(duì)木豆的實(shí)驗(yàn)研究，發(fā)現(xiàn)從木豆根莖中 可提取含量較高的染料木素，并且木豆是迄今為止世界上唯一一種食用木本且用途最多的 豆類作物。因此，木豆可作為一種生產(chǎn)染料木素的理想原料。
木豆[Cajanus cajan(L. )Millsp.]，英文常用名為Pigeonpea，為蝶形花科熱帶或 亞熱帶木本植物、常綠灌木。又名樹豆、千年豆等，其根、莖、葉、化、莢全身是寶，綜合價(jià)值 極高，除具有顯著的藥用價(jià)值外，還具有很高的經(jīng)濟(jì)、生態(tài)利用價(jià)值。作為一種民間用藥它具有清涼、消熱、解毒、止痛止血、抑菌消炎等功效，常用于治療外傷、燒傷、感染、褥瘡和抗 菌消炎等(劉中秋等，1998;孫紹美等，1995)。此外，木豆提取物制劑在印度、巴西、古巴、 墨西哥、南非等國用于治療感冒、支氣管炎、麻疹、痢疾、肝炎、皮膚病、燒傷、潰瘍、腫瘤等疾 病(Abbiw DK.，1990 ；Duke JA. et al, 1994 ；Milliken W.，1997 ；Graver JK.，2002)，療效顯 著。我國臨床組方用于治療股骨頭壞死以及循環(huán)系統(tǒng)疾病(袁浩等，2004)。
現(xiàn)在已知的木豆中活性成分包括芹菜素、木犀草素、牡荊苷、異牡荊苷、木豆素、木 豆素A、木豆素C、球松素、染料木素、水楊酸、β -谷留醇、柚皮素_4’、7_ 二甲醚、三十一烷、 二4^一烷、Cajanol 和一些揮發(fā)油類成分(林勵(lì)等，1999 ；Christopher JC. et al, 1982 ；程 赫青等，1992)。其中木豆根莖中的染料木素含量可達(dá)到原料的2%左右，且原料資源豐富、 活性突出，具有良好的保健品和藥用開發(fā)前景。
綜上所述，在利用植物資源分離純?nèi)玖夏舅氐倪^程中，主要的影響因素在于原料 選取不當(dāng)、提取工藝落后、原料處理和分離過程中普遍存在染料木素的流失、純化過程漫 長，使得成本升高。因此，有必要尋找一種簡便安全經(jīng)濟(jì)高效的提取純化染料木素的方法。 本發(fā)明旨在建立一種通過多種現(xiàn)代生物誘導(dǎo)技術(shù)和分離純化技術(shù)相結(jié)合的方法，實(shí)現(xiàn)簡單 快速、收率高的提取、分離純化染料木素的方法。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種以木豆新鮮或干燥的根莖為原料，通過勻漿誘導(dǎo)技 術(shù)、酶和酸誘導(dǎo)技術(shù)、溶劑提取技術(shù)、超聲波振蕩絮凝技術(shù)、負(fù)壓空化混懸液固萃取技術(shù)、大 孔吸附樹脂富集技術(shù)、正相硅膠中壓柱層析分離技術(shù)及低溫析晶和重結(jié)晶技術(shù)大量、快速 獲得染料木素單體，該方法簡單易行、目標(biāo)化合物損失少。本發(fā)明的目的是通過以下方案來 達(dá)到的
木豆新鮮或干燥的根莖經(jīng)過水勻漿體系誘導(dǎo)、酶和酸誘導(dǎo)水解，可提高染料木素 含量，后經(jīng)70-95%乙醇溶劑提取，提取物加入水在40-50°C超聲波振蕩、靜止絮凝，所得到 絮凝物經(jīng)負(fù)壓空化混懸液固萃取、大孔樹脂法富集和一次正相硅膠中壓柱層析后得到染料 木素的產(chǎn)品，純度大于80%，經(jīng)過低溫析晶和重結(jié)晶得到純度大于95%的純品。
上述的染料木素提取純化方法，其特征在于，取一定量的新鮮或干燥的木豆根莖 加入水，溫度40-50°C，體積為固體質(zhì)量的4-8倍，連續(xù)勻漿誘導(dǎo)3次，每次l-5min。勻漿 過程的強(qiáng)大剪切力使植物細(xì)胞壁破壞，細(xì)胞內(nèi)酶、染料木素游離物和加合物以及各種前體 底物向溶劑中充分釋放，在勻漿機(jī)械脅迫誘導(dǎo)和自體內(nèi)酶生物轉(zhuǎn)化合成的雙重作用下可提 高染料木素含量。在提取過程中使用酶和酸對(duì)木豆新鮮或干燥根莖進(jìn)行誘導(dǎo)水解；將勻漿 誘導(dǎo)后的漿液用檸檬酸、冰醋酸或鹽酸調(diào)PH為4. 0-5. 5 ；取0. 2-0. 8%固形物重量的復(fù)合 酶(纖維素酶、果膠酶、葡萄糖苷酶)，溶于PH為4. 0-5. 5的緩沖液中，在50-60°C水浴中 激活8-15分鐘；將激活后的復(fù)合酶緩沖液加入勻漿誘導(dǎo)漿液中，在溫度為45-60°C的水浴 上酶解5-10小時(shí)。通過誘導(dǎo)水解，在有效破除細(xì)胞壁的同時(shí)可以使染料木素葡萄糖苷、染 料木素與纖維素和木質(zhì)素等的結(jié)合體水解，使得游離染料木素含量顯著提高，所用復(fù)合酶 為纖維素酶、果膠酶、葡萄糖苷酶。乙醇提取液所提物質(zhì)為勻漿誘導(dǎo)和酶和酸誘導(dǎo)后的固 形物，提取方法選自超聲波輔助提取、冷浸提取、超臨界C02提取、微波輔助提取，誘導(dǎo)后固 形物使用70-95%乙醇提取，誘導(dǎo)液及乙醇提取液合并濃縮后，木豆根莖提取物中加入水，將提取物加入3-6倍體積的40-50°C溫水，于超聲波振蕩提取器中50-60KHZ條件下振蕩絮 凝20-30min，靜止15-20min，超聲波的震蕩作用使得粘稠絮凝物中包含的極性較大的雜質(zhì) 逐漸溶出，絮凝物富集了提取液中95 99%的染料木素。得到絮凝物，以0. 04-0. 06MPa 負(fù)壓為動(dòng)力用乙酸乙酯進(jìn)行負(fù)壓空化混懸液固萃取，萃取所用的溶劑體積為提取物質(zhì)量的 0. 5-2% (L g)，萃取次數(shù)為5-7次，所用溶劑除乙酸乙酯外還包括三氯甲烷、二氯甲烷， 有機(jī)相回收溶劑后可得目標(biāo)固形物；該方法是以負(fù)壓為動(dòng)力，利用氣泡產(chǎn)生的空化效應(yīng)、湍 流效應(yīng)的一種強(qiáng)化液固萃取工藝。濃縮萃取液至干，得到的固形物以20-30%乙醇混懸， 配置成料液濃度為2-4mg/mL混懸藥液，同時(shí)將大孔吸附樹脂采用濕法裝柱，保留液面，將 混懸的藥液通過吸附柱，上樣量0. 5-1BV,以流速為每小時(shí)6-8mL/g樹脂、PH = 5條件下過 吸附柱。吸附后用30-40%乙醇3BV洗雜質(zhì)，然后用50-60%乙醇8-10BV解吸。收集解析 液，濃縮至干得到固形物。預(yù)先稱取質(zhì)量為提取物質(zhì)量的5-8倍的硅膠，采用濕法裝柱，所 用溶劑除三氯甲烷外，還包括二氯甲烷、乙酸乙酯。將所得固形物用少量有機(jī)溶劑溶解，加 入與浸膏質(zhì)量比為1 1.2(w/w)的層析硅膠拌勻、減壓旋干，裝入正相硅膠中壓柱。先后 以10-20BV三氯甲烷、三氯甲烷甲醇(20 1)、甲醇連續(xù)中壓洗脫連續(xù)中壓洗脫，收集洗 脫液，每份1/40-1/20BV。TLC監(jiān)測收集流分，合并相同部分，展開劑為三氧甲烷甲醇= 30 1-1 1，紫外波長為254nm和360nm。得到染料木素溶液，低溫析晶得到產(chǎn)品，重結(jié)晶 后得到純品。
上述的木豆中染料木素的提取純化方法所用的大孔吸附樹脂為D101、NKA-9、 NKA-2、AB-8、AL-9、H103、ADS-7、ADS-8、ADS-17、ADS-21 型等。
上述的木豆中染料木素的提取純化方法所用硅膠為300-800目。中壓硅膠柱流動(dòng) 相包括(二氯甲烷、三氯甲烷、乙酸乙酯、丙酮)一(甲醇)的不同比例梯度。
重結(jié)晶所用的溶劑為石油醚、乙醚、正己烷、二氯甲烷、三氯甲烷、丙酮、乙睛和甲 醇，重結(jié)晶所用溶劑比例為(石油醚、乙醚或正己烷)(三氯甲烷、二氯甲烷、丙酮、乙睛 或甲醇)=50 1-1 1。低溫析晶溫度為-10°C-25°C。
本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)
1.本發(fā)明以在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中大都被廢棄的新鮮或者干燥木豆根莖為原料，可以在不 破壞植物生態(tài)平衡、不影響農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的基礎(chǔ)上，對(duì)植物資源進(jìn)行高效合理的利用。
2.采用先進(jìn)的勻漿誘導(dǎo)技術(shù)、酶和酸誘導(dǎo)技術(shù)、溶劑提取技術(shù)、超聲波振蕩絮凝技 術(shù)、負(fù)壓空化混懸液固萃取技術(shù)、大孔吸附樹脂富集技術(shù)、正相硅膠中壓柱層析分離技術(shù)及 低溫析晶和重結(jié)晶技術(shù)用于染料木素的誘導(dǎo)和提取分離，所得產(chǎn)品得率高、純度高。
3.該方法簡單易行，周期短，有機(jī)溶劑用量少，能耗低，成本低，可實(shí)現(xiàn)大規(guī)模的染 料木素產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)。


圖一為染料木素的結(jié)構(gòu)
圖二為分離純化流程圖
具體實(shí)施方案
實(shí)施例1[0020]稱取木豆干燥根莖lOOOg，加入8倍體積的40°C溫水后連續(xù)勻漿誘導(dǎo)3次，每次 lmin，將勻漿誘導(dǎo)好的漿液用檸檬酸、冰醋酸或鹽酸調(diào)PH為4. 0 ；取0. 2%固形物重量的復(fù) 合酶(纖維素酶、果膠酶、葡萄糖苷酶)，溶于PH為4. 0的緩沖液中，在50°C水浴中激活8 分鐘；將激活后的復(fù)合酶緩沖液加入勻漿誘導(dǎo)漿液中，在溫度為45°C的水浴上酶解5小時(shí)。 誘導(dǎo)液分離后固形物使用70%乙醇提取，誘導(dǎo)液及乙醇提取液合并濃縮后將提取物加入 40°C溫水(4. 5L)中，于超聲波提取器中50-60KHZ條件下振蕩絮凝20min，靜止15min，取絮 凝物，以0. 05MPa負(fù)壓為動(dòng)力用13. 5L乙酸乙酯進(jìn)行負(fù)壓空化混懸液固萃取，濃縮萃取液， 以30%乙醇配置成料液濃度為4mg/mL混懸藥液，上樣量0. 8BV,流速為每小時(shí)8mL/g樹脂、 PH = 5條件下過NKA-9型大孔過吸附樹脂柱。吸附后用30%乙醇3BV洗雜質(zhì)，然后用60%乙 醇IOBV解吸。收集解吸液，濃縮至干后用少量甲醇溶解，加入與浸膏質(zhì)量比為1 1.2(w/w) 的目數(shù)為500-800的層析硅膠拌勻、50°C減壓蒸干。預(yù)先稱取提取物質(zhì)量5-8倍的500-800 目硅膠，采用三氯甲烷濕法裝柱，將拌好樣品的硅膠裝入中壓柱內(nèi)，先后以15BV三氯甲烷、 三氯甲烷甲醇(20 1)、甲醇連續(xù)中壓洗脫連續(xù)中壓洗脫，TLC監(jiān)測收集流分，濃縮得到 染料木素，低溫析晶得到產(chǎn)品，重結(jié)晶后得到化合物為染料木素，91. 18mg，純度為95%。
實(shí)施例2
稱取木豆新鮮根莖3. 32kg (干重為Ikg)，加入6倍體積的50°C溫水后連續(xù)勻漿誘 導(dǎo)3次，每次5min，將勻漿誘導(dǎo)好的漿液用檸檬酸、冰醋酸或鹽酸調(diào)PH為5. 5 ；取0. 8 %固 形物重量的復(fù)合酶(纖維素酶、果膠酶、葡萄糖苷酶)，溶于PH為5. 5的緩沖液中，在60°C 水浴中激活15分鐘；將激活后的復(fù)合酶緩沖液加入勻漿誘導(dǎo)漿液中，在溫度為60°C的水浴 上酶解10小時(shí)。誘導(dǎo)液分離后固形物使用95%乙醇提取，誘導(dǎo)液及乙醇提取液合并濃縮后 將提取物加入50°C溫水(6L)中，于超聲波提振蕩取器中50-60KHZ條件下振蕩絮凝20min， 靜止15min，取絮凝物，以0. 06MPa負(fù)壓為動(dòng)力用三氯甲烷進(jìn)行負(fù)壓空化混懸液固萃取，濃 縮萃取液，以30%乙醇配置成料液濃度為2mg/mL混懸藥液，上樣量0. 6BV，流速為每小時(shí) 8mL/g樹脂、PH = 5條件下過NKA-2型大孔過吸附樹脂柱。吸附后用30%的乙醇洗雜質(zhì)， 之后用60%乙醇9BV解吸，收集解吸液，濃縮至干后用少量甲醇溶解，加入與浸膏質(zhì)量比為 1 1.2(w/w)的目數(shù)為300-400層析硅膠拌勻、50°C減壓蒸干。預(yù)先稱取提取物質(zhì)量5-8倍 的300-400目硅膠，采用三氯甲烷濕法裝柱，將拌好樣品的硅膠裝入中壓柱內(nèi)，先后以13BV 三氯甲烷、三氯甲烷甲醇(20 1)、甲醇連續(xù)中壓洗脫連續(xù)中壓洗脫，TLC監(jiān)測收集流分， 濃縮得到染料木素，低溫析晶得到產(chǎn)品，重結(jié)晶后得到化合物為染料木素102. 33mg，純度為 95%。
權(quán)利要求
一種從木豆根莖中提取、分離和純化染料木素的方法，其主要特征在于木豆新鮮或干燥根莖勻漿誘導(dǎo)后經(jīng)酶和酸誘導(dǎo)水解以增加游離的染料木素含量，誘導(dǎo)后固形物使用70 95％乙醇提取，誘導(dǎo)液及乙醇提取液合并濃縮后加入40 50℃水超聲波振蕩絮凝，靜止，所得到絮凝物經(jīng)乙酸乙酯負(fù)壓空化混懸液固萃取、大孔吸附樹脂法富集和一次正相硅膠中壓柱層析后得到染料木素的制品，經(jīng)過低溫析晶和重結(jié)晶得到純度大于95％的純品。
2.按照權(quán)利要求
1所述的從木豆根莖中提取、分離和純化染料木素的方法，其特征在 于勻漿誘導(dǎo)所用的溶劑為水，溫度40-50°C，體積為固體質(zhì)量的4-8倍，連續(xù)誘導(dǎo)3次，每 次l-5min ；勻漿過程的強(qiáng)大剪切力使植物細(xì)胞壁破壞，細(xì)胞內(nèi)酶、染料木素游離物和加合 物以及各種前體底物向溶劑中充分釋放，在勻漿機(jī)械脅迫誘導(dǎo)和自體內(nèi)酶生物轉(zhuǎn)化合成的 雙重作用下可提高染料木素含量。
3.按照權(quán)利要求
1所述的從木豆根莖中提取、分離和純化染料木素的方法，其特征在 于在提取過程中使用酶和酸對(duì)木豆新鮮或干燥根莖進(jìn)行誘導(dǎo)水解；將勻漿誘導(dǎo)后的漿液 用檸檬酸、冰醋酸或鹽酸調(diào)PH為4. 0-5. 5 ；取0. 2-0. 8%固形物重量的復(fù)合酶，溶于pH為 4. 0-5. 5的緩沖液中，在50-60°C水浴中激活8-15分鐘；將激活后的復(fù)合酶緩沖液加入勻漿 誘導(dǎo)漿液中，在溫度為45-60°C的水浴上酶解5-10小時(shí)；通過誘導(dǎo)水解，在有效破除細(xì)胞壁 的同時(shí)可以使染料木素葡萄糖苷、染料木素與纖維素和木質(zhì)素等的結(jié)合體水解，使得游離 染料木素含量顯著提高，所用復(fù)合酶為纖維素酶、果膠酶、葡萄糖苷酶。
4.按照權(quán)利要求
1所述的從木豆根莖中提取、分離和純化染料木素的方法，其特征在 于乙醇提取液所提物質(zhì)為勻漿誘導(dǎo)和酶和酸誘導(dǎo)后的固形物，提取方法選自超聲波輔助 提取、冷浸提取、超臨界C02提取、微波輔助提取，所用溶劑為70-95%乙醇。
5.按照權(quán)利要求
1所述的從木豆根莖中提取、分離和純化染料木素的方法，其特征在 于木豆根莖提取物中加入水，溫度40-50°C，體積為提取物質(zhì)量的3-6倍，超聲波振蕩絮凝 時(shí)間為20-30min，頻率為50_60KHz，靜止時(shí)間為15-20min ；超聲波的震蕩作用使得粘稠絮 凝物中包含的極性較大的雜質(zhì)逐漸溶出，絮凝物富集了提取液中95 99%的染料木素。
6.按照權(quán)利要求
1所述的從木豆根莖中提取、分離和純化染料木素的方法，其特征在 于對(duì)絮凝物進(jìn)行負(fù)壓空化混懸液固萃取，所用溶劑除乙酸乙酯外還包括三氯甲烷、二氯甲 烷，萃取所用的溶劑體積為提取物質(zhì)量的0.5-2% (L g)，萃取次數(shù)為5-7次，所用壓力為 0. 04-0. 06MPa，有機(jī)相回收溶劑后可得目標(biāo)固形物；該方法是以負(fù)壓為動(dòng)力，利用氣泡產(chǎn)生 的空化效應(yīng)、湍流效應(yīng)的一種強(qiáng)化液固萃取工藝。
7.按照權(quán)利要求
1所述的從木豆根莖中提取、分離和純化染料木素的方法，其特征在 于所用樹脂選自 D101、NKA-9、NKA-2、AB-8、AL-9、H103、ADS-7、ADS-8、ADS-17、ADS-21 廣譜 性大孔吸附樹脂，該方法中大孔樹脂吸附步驟采用濕法裝柱，保留液面，將負(fù)壓空化混懸液 固萃取所得到的固形物部分用20-30%乙醇溶液配制成料液濃度為2-4mg/mL混懸藥液，同 時(shí)將大孔吸附樹脂采用濕法裝柱，保留液面，將混懸的藥液通過吸附柱，上樣量為0. 5-1BV, 以流速為每小時(shí)6-8mL/g樹脂、PH = 5條件下過吸附柱；吸附后用30-40%乙醇3BV洗雜 質(zhì)，然后用50-60%乙醇8-10BV解吸；收集解吸液，濃縮至干，所得固形物為粗目標(biāo)產(chǎn)物。
8.按照權(quán)利要求
1所述的從木豆根莖中提取、分離和純化染料木素的方法，其特征在 于正相硅膠中壓柱層析所用樣品為樹脂富集后所得固形物，所用硅膠為300-800目；預(yù) 先稱取質(zhì)量為樣品量的5-8倍的硅膠，采用濕法裝柱，所用溶劑除三氯甲烷外，還包括二氯甲烷、乙酸乙酯；將樣品用少量有機(jī)溶劑溶解，加入與浸膏質(zhì)量比為1 1.2(W/W)的層析 硅膠拌勻、減壓旋干，裝入預(yù)先裝好的硅膠柱中；先后以10-20BV三氯甲烷、三氯甲烷甲 醇(20 1)、甲醇連續(xù)中壓洗脫，收集洗脫液，每份Ι/40- ΛθΒν;用硅膠薄層層析檢測洗 脫液成分，合并相同部分，展開劑為三氯甲烷甲醇=30 1-1 1，紫外波長為254nm和 360nmo
9.按照權(quán)利要求
1所述所述的從木豆根莖中提取、分離和純化染料木素的方法，其特 征在于重結(jié)晶所用的溶劑為石油醚、乙醚、正己烷、二氯甲烷、三氯甲烷、丙酮、乙睛和甲 醇，重結(jié)晶所用溶劑比例為(石油醚、乙醚或正己烷)(三氯甲烷、二氯甲烷、丙酮、乙睛 或甲醇)=50 1-1 1，低溫析晶溫度為-10°C-25°C。
專利摘要
本發(fā)明涉及一種從木豆根莖中提取、分離和純化中草藥活性成分染料木素的方法。目的是提供一種簡便、安全、經(jīng)濟(jì)有效的從木豆根莖中提取、分離純化高純度染料木素的方法，所采取的技術(shù)方案是以木豆新鮮或干燥根莖為原料，采用勻漿誘導(dǎo)技術(shù)、酶和酸誘導(dǎo)技術(shù)、溶劑提取技術(shù)、超聲波振蕩絮凝技術(shù)、負(fù)壓空化混懸液固萃取技術(shù)、大孔吸附樹脂富集技術(shù)、正相硅膠中壓柱層析分離技術(shù)及低溫析晶和重結(jié)晶技術(shù)等得到精制的染料木素，純度達(dá)95％以上。該方法的原料豐富易得，工藝簡單易行，所得染料木素得率高和純度高。本方法適用于工業(yè)化生產(chǎn)，產(chǎn)品附加值高。
文檔編號(hào)B01D21/28GKCN101497594 B發(fā)布類型授權(quán) 專利申請(qǐng)?zhí)朇N 200910071470
公開日2011年3月23日 申請(qǐng)日期2009年3月3日
發(fā)明者付玉杰, 劉威, 華欣, 孔羽, 張謖, 楊梅, 祖元?jiǎng)? 祖柏實(shí), 顧成波 申請(qǐng)人:東北林業(yè)大學(xué);付玉杰導(dǎo)出引文BiBTeX, EndNote, RefMan