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      皮膚化妝護理系統(tǒng)和方法

      文檔序號:3708055閱讀:268來源:國知局
      專利名稱:皮膚化妝護理系統(tǒng)和方法
      技術(shù)領(lǐng)域
      本發(fā)明涉及皮膚化妝護理系統(tǒng)和方法,它包括靜磁體(staticmagnet)和羥基酸。
      電流產(chǎn)生的磁場牽涉包括癌癥在內(nèi)的許多疾病。相比之下,可以認為靜磁場是安全的,可以在醫(yī)療上用于治療疼痛和用來刺激循環(huán)。靜磁體(也知道其是“永久磁體”)以不同的尺寸和強度被使用。它們可以用肩帶(strap)、腰帶(belt)或線帶(tape)附著在身體上。
      在化妝領(lǐng)域,公開過含有磁體顆粒如六鐵酸鋇的組合物。1996年的K.Stanzl會議文摘公開,這樣的組合物減少皮膚的皺折,增大皮膚的測量的結(jié)實程度和濕潤水平。
      也請見Happi在1996年3月的文章《安全有效的Cellulite治療》(A Safe Effective Cellulite Treatment),該文敘述了使用含有磁化六鐵酸鋇晶體治療Cellul ite的皮膚乳脂。
      Lancaster的德國專利申請書DE 4325071敘述了使用加到在磷脂囊中含有氟碳化合物的化妝基礎(chǔ)物中的磁化顆粒來刺激血液循環(huán)和改善毛發(fā)的生長。該組合物可以呈皂、乳脂、凝膠、繃帶、膏藥或噴霧劑等形式。該組合物可以含有抗氧化劑。
      據(jù)認為,在化妝組合物中的磁化顆粒具有隨機的取向。
      SRL公司Eidos的西班牙專利申請書ES 2099685公開了磁化的化妝制劑,它含有片狀的磁體單元,能產(chǎn)生直至12,000Gauss(在S.I.單位是1.2Tesla)的磁場強度。
      Rhenmagnet Horst Baermann公司的德國專利申請書DE 3613280公開了含有小永久磁體(0.5~30mm)的化妝面膜。該面膜還含有使皮膚結(jié)實和平滑的物質(zhì),比如植物或動物提取物。據(jù)說這些物質(zhì)可以更好地滲入皮膚,由于使用了磁體產(chǎn)生的加熱和促進血液循環(huán)其作用更得到改善。這些磁體可以具有兩個磁極,也可以具有多個交變的磁極。
      Bioflex公司將含有交變磁極的同心環(huán)形磁體商品化以減少面部的皺紋。
      上述的先有技術(shù)方法都沒有公開任何將永久磁體的S極和化妝活性物敷在皮膚上的皮膚化妝護理方法。類似地,先有技術(shù)沒有公開由永久磁體層和化妝成分層組成的二元化妝貼片,后者優(yōu)選是一種經(jīng)皮的或水凝膠貼片。
      本發(fā)明在其第一個實施方案(A)中包括一種化妝處理皮膚的方法,該方法包括(a)在皮膚上貼上含有至少一個N極和一個S極的靜磁體的S極;以及(b)在皮膚上涂布在可化妝用的載體中含有有化妝效果成分的皮膚化妝護理的組合物。
      按照本發(fā)明的方法,可以同時或先后貼上磁體和涂布組合物。
      在本發(fā)明的第二個實施方案(B)中,還包括含有如下組成的二元化妝貼片(i)靜磁體層;(ii)載有化妝活性物的化妝成分層;其中兩層相互貼合,而且(i)層的S極向著(ii)層定向。
      除了在操作實施例和對照實施例中,或者另外專門指出,在此說明中,所有指出指材料的數(shù)量或反應條件、材料的物理性能和/或用途的數(shù)字都要理解為用“大約”一詞來修飾。
      除非專有說明,所有的數(shù)量都以水包油乳液的重量計。
      文中使用的術(shù)語“皮膚”包括在面部、頸部、背部、腿部、臂部、手部和頭部的皮膚。
      實施方案A皮膚的化妝護理方法本發(fā)明的皮膚化妝護理方法涉及將永久磁體的S極貼布在皮膚上。本發(fā)明的該磁體可以具有任何的形狀或形式。優(yōu)選條形磁體(具有一個N極和一個S極)。可以借助于肩帶或膏藥,或者布帶或粘接劑將該磁體貼布在皮膚上。為了使本發(fā)明方法所獲得的化妝效果最佳化,該磁體的厚度優(yōu)選至少是1.0cm,最優(yōu)選至少是1.5cm。適合于本發(fā)明的磁體一般強度為0.00004~0.2Tesla,優(yōu)選0.01~0.1Tesla。
      本發(fā)明的皮膚化妝護理方法包括將含有有化妝效果成分的化妝組合物涂布在皮膚上。該化妝效果成分優(yōu)選自羥基酸、類視黃醇、維生素C、植酸和皮膚去色素劑如育亨賓和曲酸。
      羥基羧酸加強增生作用,增加角質(zhì)細胞中神經(jīng)酰胺的生物合成,增加表皮厚度,以及加大正常皮膚的脫屑作用,致使皮膚更光滑,看起來更年輕。
      該羥基酸可以選自α-羥基酸、β-羥基酸如水楊酸、其它羥基酸如二羥基羧酸、羥基二元羧酸、羥基三元羧酸和它們的混合物,或者它們各種立體異構(gòu)體(DL、D或L)的混合物。
      優(yōu)選地,α-羥基羧酸選自具有如下通式(1)α-羥基酸
      這里M是H或飽和或不飽和、直鏈或分支的含有1~27個碳原子的烴基鏈。
      甚至更優(yōu)選選自乳酸、2-羥基辛酸、羥基月桂酸、羥基乙酸、鄰羥基苯甲酸和它們混合物的羥基羧酸。當存在有立體異構(gòu)體時,最優(yōu)選L異構(gòu)體。
      應該理解,按照組合物的pH值不同,羥基酸可以以其鹽的形式,比如銨鹽、鉀鹽或鈉鹽的形式存在。
      某些羥基酸酯,特別是水楊酸C1~C30酯具有抗老化性和油控制活性,可以包括在組合物中。特別優(yōu)選的酯是水楊酸十三烷基酯。
      羥基酸組分的數(shù)量優(yōu)選是0.01~20%(重量),更優(yōu)選是0.05~10%(重量),最優(yōu)選是0.1~3%(重量)。
      該化妝組合物優(yōu)選含有選自維生素A化合物(類視黃醇)和維生素C的維生素。
      類視黃醇在活體外加強角質(zhì)細胞的增生作用,通過皮膚的成纖維細胞增加表皮厚度增加膠原的合成。這導致防護了陽光損害和使起皺的皮膚變得更光滑。在本文中使用的術(shù)語“類視黃醇”包括視黃酸、視黃醇、視黃醛和C2~C20的視黃酯。包括在術(shù)語“視黃酸”中的是13-順式視黃酸和全反式視黃酸。
      術(shù)語“視黃醇”包括視黃醇的下列異構(gòu)體全反式視黃醇、13-順式視黃醇、11-順式視黃醇、9-順式視黃醇、3,4-二脫氫視黃醇。優(yōu)選的異構(gòu)體是全反式視黃醇、13-順式視黃醇、3,4-二脫氫視黃醇、9-順式視黃醇。最優(yōu)選的是全反式視黃醇,因為其商業(yè)來源廣泛。
      視黃酯是視黃醇的酯。術(shù)語“視黃醇”如上所定義。適合于本發(fā)明使用的視黃酯是視黃醇的C2~C20酯。視黃酯的例子包括但不限于棕櫚酸視黃酯、甲酸視黃酯、乙酸視黃酯、丙酸視黃酯、丁酸視黃酯、戊酸視黃酯、異戊酸視黃酯、己酸視黃酯、庚酸視黃酯、辛酸視黃酯、壬酸視黃酯、癸酸視黃酯、十一碳酸視黃酯、月桂酸視黃酯、十三碳酸視黃酯、肉豆蔻酸視黃酯、十五碳酸視黃酯、十七碳酸視黃酯、硬脂酸視黃酯、異硬脂酸視黃酯、十九碳酸視黃酯、花生酸視黃酯、山崳酸視黃酯、亞油酸視黃酯、油酸視黃酯、乳酸視黃酯、羥基乙酸視黃酯、羥基辛酸視黃酯、羥基月桂酸視黃酯、酒石酸視黃酯。最優(yōu)選的酯選自C2、C3和C16酯,因為它們最容易在市場上得到,或者是亞油酸酯,因為它們的效果優(yōu)異。
      本發(fā)明組合物中類視黃醇的含量為每克組合物33~330,000IU,優(yōu)選330~16,500IU,最優(yōu)選1,650~6,600IU。
      該組合物優(yōu)選包括曲酸或育亨賓作為皮膚脫色素劑,或者是數(shù)量從0.0001~50%,優(yōu)選0.001~25%的植酸作為抗炎劑。
      在本發(fā)明方法中使用的組合物還含有可用于化妝品的載體,用作組合物中有化妝效果成分的稀釋劑、分散劑或載體,當該組合物涂布到皮膚上時使它們?nèi)菀追稚㈤_。
      該載體可以是含水的、無水的或乳液。該組合物優(yōu)選是含水的或者是乳液,特別是油包水或水包油型乳液。當有水存在時,其含量可以是5~99%(重量),優(yōu)選20~70%(重量),最優(yōu)選是35~60%(重量)。
      除了水以外,也可以用揮發(fā)性的溶劑在本發(fā)明的組合物中作為載體。最優(yōu)選的是單羥基C1~C3烷醇。這包括乙醇、甲醇和異丙醇。單羥基烷醇的含量可以是1~70%(重量),優(yōu)選是10~50%(重量),最優(yōu)選是15~40%(重量)。
      也可以用潤膚材料作為可以用于化妝的載體,它們可以呈硅油或合成酯的形狀。該潤膚材料的量可以為0.1~50%,優(yōu)選1~20%(重量)。
      硅油可以分成揮發(fā)性和非揮發(fā)性兩種。這里使用的術(shù)語“揮發(fā)性”指的是在環(huán)境溫度下該材料具有可以測量的蒸氣壓。揮發(fā)性硅油優(yōu)選選自含有3~9個硅原子,更優(yōu)選含有4~5個硅原子的環(huán)狀或直線的聚二甲基硅氧烷。直線的揮發(fā)性硅油的粘度在25℃下一般小于大約5cSt,而環(huán)狀揮發(fā)性硅油的粘度一般小于大約10cSt。用作潤膚材料的非揮發(fā)性硅油包括聚烷基硅氧烷、聚烷基芳基硅氧烷和聚醚硅氧烷共聚物。在這里可以使用的基本不揮發(fā)聚烷基硅氧烷包括比如在25℃下粘度為500~2500萬cSt的聚二甲基硅氧烷。在本發(fā)明中可以使用的優(yōu)選非揮發(fā)性潤膚材料中是在25℃下粘度大約為10~400cSt的聚二甲基硅氧烷。
      在酯類潤膚材料中有(1)具有10~20個碳原子的脂肪酸的鏈烯基或烷基酯。其例子包括新戊酸異花生醇酯、異壬酸異壬醇酯、肉豆蔻酸油醇酯、硬脂酸油醇酯和油酸油醇酯;(2)醚-酯,如乙氧基化脂肪醇的脂肪酸酯;(3)多元醇的酯。乙二醇單脂肪酸和二脂肪酸酯、二乙二醇單脂肪酸和二脂肪酸酯、聚1,2-亞乙基二醇(200-6000)單和二脂肪酸酯丙二醇。單脂肪酸和二脂肪酸酯、聚丙二醇2000單油酸酯、聚丙二醇2000單硬脂酸酯、乙氧基化的丙二醇單硬脂酸酯、甘油單脂肪酸和二脂肪酸酯、多甘油多脂肪酸酯、乙氧基化的甘油單硬脂酸酯、1,3-丁二醇單硬脂酸酯、1,3-丁二醇二硬脂酸酯、聚氧乙烯多元醇脂肪酸酯、縮水山梨糖醇脂肪酸酯,而聚氧亞乙基縮水山梨糖醇脂肪酸酯是滿意的羥基醇酯。
      (4)蠟酯,比如蜂蠟、鯨蠟、肉豆蔻酸肉豆蔻醇酯、硬脂酸硬脂醇酯和山萮酸花生醇酯;(5)類固醇酯,其中的例子是膽固醇脂肪酸酯。
      也可以包括具有10~30個碳原子的脂肪酸作為可用于本發(fā)明組合物的可用于化妝的載體。作為說明的此類物質(zhì)是壬酸、月桂酸、肉豆蔻酸、棕櫚酸、硬脂酸、異硬脂酸、羥基硬脂酸、油酸、亞麻酸、蓖麻油酸、花生酸、山萮酸和芥酸。
      也可以使用多羥基醇類型的濕潤劑作為本發(fā)明組合物的可以用于化妝品的載體。濕潤劑的目的是增加潤膚材料的效果、減少起皮、刺激累積的皮屑脫落和改善皮膚的觸覺。典型的多羥基醇包括甘油、聚亞烷基二醇,更優(yōu)選的是亞烷基二醇及其衍生物,這包括丙二醇、二丙二醇、聚丙二醇、聚乙二醇及其衍生物、山梨糖醇、羥丙基山梨糖醇、己二醇、1,3-丁二醇、1,2,6-己三醇、乙氧基化的甘油、丙氧基化的甘油和它們的混合物。為了有最好的結(jié)果,該濕潤劑優(yōu)選是丙二醇或透明質(zhì)酸鈉。濕潤劑的數(shù)量可以是組合物重量的0.5~30%,優(yōu)選1~15%。
      還可以使用增稠劑作為本發(fā)明組合物的可用于化妝品載體的一部分。典型的增稠劑包括交聯(lián)的丙烯酸酯如Carbopol 982、疏水改性的丙烯酸酯如Carbopol 1382、纖維素衍生物和天然橡膠。在可以使用的纖維素衍生物中有羧甲基纖維素鈉、羥丙基甲基纖維素、羥丙基纖維素、羥乙基纖維素、乙基纖維素和羥甲基纖維素。本發(fā)明適用的天然橡膠包括瓜爾膠、呫噸膠、菌核、鹿角菜膠、果膠和它們的混合物。增稠劑的數(shù)量可以為0.0001~5%,一般為0.001~1%,優(yōu)選為0.01~0.5%(重量)。
      可以選擇性地把水、溶劑、聚硅氧烷、酯類、脂肪酸、濕潤劑和/或增稠劑構(gòu)成可用于化妝品的載體,其數(shù)量為1~99.9%,優(yōu)選80~99%(重量)。
      油或油性物質(zhì)可以與乳化劑一起存在,以提供油包水型或水包油型乳液,這在很大程度上取決于使用的乳化劑的平均親水-親油平衡值(HLB)。
      在本發(fā)明的化妝組合物中也可以存在著表面活性劑。表面活性劑的總濃度為該組合物重量的0.1~40%,優(yōu)選1~20%,最優(yōu)選為1~5%。表面活性劑可以選自陰離子型、非離子型、陽離子型和兩性離子型的活性物。特別優(yōu)選的非離子型表面活性劑是每個分子中具有2~100個縮合的氧化乙烯基或氧化丙烯基的、具有C10~C20脂肪醇或脂肪酸疏水鏈段的非離子型表面活性劑;與2~20摩爾的氧化烷基縮合的C2~C10烷基酚;乙二醇的單脂肪酸酯和二脂肪酸酯;脂肪酸單甘油酯、縮水山梨糖醇的單和二C8~C20烷脂肪酸酯;嵌段共聚物(環(huán)氧乙烷/環(huán)氧丙烷)以及聚環(huán)氧乙烷縮水山梨糖醇和它們的混合物。烷基多配糖物和糖苷脂肪酰胺(如甲基葡糖酰胺)也是適當?shù)姆请x子型表面活性劑。
      優(yōu)選是陰離子型表面活性劑包括皂類、烷基醚硫酸鹽和磺酸鹽、烷基硫酸鹽和磺酸鹽、烷基苯磺酸鈉、烷基和二烷基磺基琥珀酸鹽、C8~C20酰基羥乙磺酸鹽、?;劝彼猁}、C8~C20烷基醚磷酸鹽和它們的混合物。
      在本發(fā)明的化妝組合物中可以存在陽光吸收劑。陽光吸收劑包括一般用來阻隔紫外線的一些材料。說明性的化合物是對氨基苯甲酸、肉桂酸鹽和水楊酸鹽的衍生物。比如可以使用Avo二苯甲酮(Parsol1789)、甲氧基肉桂酸辛酯和2-羥基-4-甲氧基二苯甲酮(也叫Benzophenone)。甲氧基肉桂酸辛酯和2-羥基-4-甲氧基二苯甲酮的商品名分別是Parsol MCX和Benzophenone-3。在組合物中使用的陽光吸收劑的確切的數(shù)量可以根據(jù)所需防護陽光紫外輻射的程度而變化。
      許多化妝組合物,特別是含水的化妝組合物必須防止?jié)摵挠泻ξ⑸锏纳L。因此,防腐劑是必需的。適當?shù)姆栏瘎┌▽αu基苯甲酸烷基酯、己內(nèi)酰脲衍生物、丙酸鹽和各種季胺化合物。本發(fā)明特別優(yōu)選的防腐劑是甲基paraben、丙基paraben、苯氧基乙醇和芐醇。防腐劑的一般用量是組合物重量的大約0.1~2%。
      可以在本發(fā)明的化妝組合物中加入粉末。這些粉末包括白堊、滑石粉、漂白土、高嶺土、淀粉、綠土、化學改性的硅酸鎂鋁、有機改性的蒙脫土、水合硅酸鋁、氣相法白碳黑、辛烯基琥珀酸淀粉鋁和它們的混合物。
      該組合物可以包裝在適當?shù)娜萜鲀?nèi),以適應其粘度和便于消費者使用。比如洗劑或流體乳脂可以包裝在瓶子或滾珠涂布器中,或者在膠囊中,或者在推進劑驅(qū)動的氣溶膠裝置中,或者是裝有適合于用手指操縱的小泵的容器中。當組合物是乳脂時,可以簡單地將其儲存在不易變形的瓶子或擠壓的容器如管或帶蓋的瓶中。
      在使用時,可以將磁體的S極和該組合物相繼(可以磁體在先,也可以組合物在先)或同時貼在皮膚的相同區(qū)域。磁體貼在皮膚上的時間上幾分鐘到幾小時。從適當?shù)娜萜骰蛲坎计髦袛D出,涂在暴露的皮膚上的組合物是比如1~100mL,如果需要,然后用手或手指或適當?shù)墓ぞ邔⑵渫坎奸_來和/或在皮膚上摩擦。磁體和組合物可以包裝在一起,作為同一個套件的一部分,或者是單獨地分別銷售。
      實施方案B化妝雙貼片在其第二個實施方案(B)中,本發(fā)明還包括化妝雙貼片,它包括(i)一個靜磁體層;(ii)一個化妝成分層,其中裝有包括有化妝效果成分的化妝組合物;其中的兩層相互貼在一起,(i)層的S極向著(ii)層定向。
      在此實施方案中,磁體層可以是任何形狀和尺寸的,但是是一層薄膜。透過皮膚的或水凝膠層含有如上面實施方案A的所述的化妝活性物。這兩層通過粘接系統(tǒng)附著在一起。
      該雙貼片的形狀可以與所附著的所需區(qū)域的形狀相吻合,比如呈圓形、呈鼻子的條形、呈直角的方形等。該雙貼片可以借助于帶子或粘接劑敷在皮膚上。該貼片優(yōu)選貼在最接近皮膚的皮膚層(ii)上。
      有化妝效果的成分可以是任何有益于皮膚的成分,但優(yōu)選選自如上在實施方案A中所敘述的有化妝效果的成分。
      下面的特定實施例進一步說明本發(fā)明,但不對本發(fā)明構(gòu)成限制。
      材料和方法在此研究中使用的條形磁體從New York州,New Brunswick市的Mc Master Carr公司得到。這些磁體是具有N極(N極)和S極(S極)的永久磁體,也稱作靜磁體(與建立磁場以及疊加的電場的電磁體相對)。在此處敘述的實驗中,提到將N極或S極貼到細胞上,這僅僅意味著N極或S極十分接近該細胞,不可能將磁體的一極與另一極分開。在此研究中使用的磁體的生物磁強度是在邊緣處700~750Gauss,在磁條的中部是280~300Gauss。
      在磁研究中使用的Bioflex生物磁體從Florida州OaklandPark市的Bioflex公司得到。該Bioflex磁體片是永久磁體,是一個同心圓環(huán),交變的磁極沿著環(huán)分布。這使得細胞與一系列的S-N極相接觸。在此研究中使用的Bioflex磁體在邊緣的磁場強度是240Gauss,在磁體的中部是87Gauss。
      在這里敘述的所有實驗中,為了避免由于在磁體的不同區(qū)域內(nèi)(邊緣和中間)磁場的不同而造成的變異性,將在96孔板中60個孔中放置的細胞放在條形磁體或Bioflex磁體的中部。類似地,豬皮活組織也放在磁體的中間。
      在此實驗中使用的細胞是正常人的角質(zhì)細胞和豬皮組織培養(yǎng)基。用研磨處理從新生兒包皮分離的正常人角質(zhì)細胞在絲裂霉素處理的確立了分裂菌落的3T3鼠成纖維細胞存在下,在DME培養(yǎng)基/5%的胎牛血清中生長。在這些條件下角質(zhì)細胞生長直至其第三代。對于此實驗,將第三代角質(zhì)細胞沉積在含有0.15mM的無血清角質(zhì)細胞生長培養(yǎng)基(KGM;從California州,San Diego市的Clonetics公司得到)中。從Clonetics公司得到新生兒成纖維細胞,在含有10%的胎牛血清的Dulbecco最低基本培養(yǎng)基(DMEM)中生長。在第4~10代之間的細胞中進行實驗。
      從Pensylvania州Buckshire Farms得到新切下的2~3周大的小豬的皮。此豬皮先用肥皂徹底清洗,然后用10x含抗菌素(青霉素、鏈霉素)的培養(yǎng)基清洗。然后將此豬皮切成200μm厚。從此洗過的豬皮打孔得到7mm活體組織。然后再用10x的抗菌素培養(yǎng)基洗滌此活體組織,最后用正常的DMEM洗滌兩次。在每個transwell板中用1mL無血清DMEM床從板的底部培養(yǎng)3個活體組織,表皮面朝上。在此條件下平衡此活體組織后3天開始進行實驗。
      磁力對角質(zhì)細胞生長的影響角質(zhì)細胞沉積在96孔板的60個孔中間(3000細胞/孔)。24小時以后,將板放在磁體(條形磁體或Bioflex磁體)中間頂部,再生長4天直至細胞70~80%匯合。每兩天或三天更換培養(yǎng)基。對照組放在非磁性金屬板的頂部,測試板放在條形磁體(N極或S極向上)的頂部或者Bioflex磁體的中間。在某些研究中測量細胞與磁力的關(guān)系,將板彼此摞起放在磁體的頂部,使得底部的板最接近磁體(磁力最高),而頂部的板離磁體最遠(磁力最低)。在不同的培養(yǎng)器中進行評估N極和S極磁體影響的研究,以避免一個磁體對另一個磁體的影響。在生長4天以后,從培養(yǎng)器中取出板,用磷酸鹽緩沖液鹽水(PBS)洗滌兩次,用100μL的二苯基亞胺H33258溶液(從Calbiochem公司得到—基礎(chǔ)溶液制備成1mg/mL蒸餾水,儲存在4℃的暗處,不超過1周)培養(yǎng)。在室溫下的暗處培養(yǎng)15分鐘以后,在Milipore Cytofluor 2000(ex/em=360/460nm)上測量熒光。用牛胸腺DNA標準計算出DNA含量,表示為μg/孔,或表示為未暴露在磁體下的對照孔的百分數(shù)。在全部使用單層培養(yǎng)基的研究中,使用至少24個不同孔的平均+/-標準偏差,以用Student t-檢驗計算統(tǒng)計顯著性。
      豬皮組織培養(yǎng)物的DNA合成在如上所述制備的豬皮組織培養(yǎng)基平衡3天以后,除去培養(yǎng)基,加入1mL新鮮培養(yǎng)基,通過直接在該培養(yǎng)基中加入由100倍濃縮的原料加水配成的不同濃度的乳酸處理這些孔。與加入乳酸的同時,也把選擇的培養(yǎng)基暴露在條形磁體的S極或N極下,或者暴露在Bioflex磁體下。磁體放在培養(yǎng)基碟的頂部,以直接暴露表皮(用在頂部的表皮側(cè)面進行組織培養(yǎng))。3天以后,改變培養(yǎng)基,重新加入乳酸,每個孔中加入10μC的3H-胸腺嘧啶脫氧核苷。再將板培養(yǎng)24小時。在此培養(yǎng)周期結(jié)束時,除去活體組織,邊振搖邊用PBS洗滌1小時,在10mL2M的溴化鈉溶液中振搖培養(yǎng)過夜,以將表皮與真皮分開。用PBS洗滌活體組織,用手術(shù)刀小心從真皮上撕下表皮。在50℃下用1mL的0.5N氫氧化鈉溶液消化表皮和真皮,用200μL進行放射活性計數(shù)。計算出DNA合成速度,表示為cpm/7mm沖下的真皮或表皮活體組織,在某些實驗中也表示為對照組的百分數(shù)。所有的組織培養(yǎng)實驗進行至少6次,用學生t-檢驗計算出統(tǒng)計分析的平均+/-標準偏差。
      實施例1比較不同厚度的磁體。研究了增加厚度[即增加磁力(Bioflex磁體)]對角質(zhì)細胞單層培養(yǎng)基中角質(zhì)細胞增生的影響。
      磁體厚度DNA含量 比對照組高%P值對照組(無磁體) 820+/-2200.75cm 825+/-451.731cm 855+/-205.12>0.11.5cm 930+/-2812.4>0.05此實驗評價了不同厚度的Bioflex磁體對角質(zhì)細胞增生的影響,以確定對于該影響需要什么樣的最佳的力。正如從下面表中所看到的,當磁體的厚度增大(因而磁力也加大)時,對增生的影響最大。厚度1.5cm或者更厚的磁體明顯地增大了單層培養(yǎng)基中角質(zhì)細胞的增生。
      實施例2評估Bioflex磁體(較弱的磁力,70~100Gauss)和具有較強磁力的條形磁體(300~400Gauss)之間的不同。使用的條形磁體的S極向著此研究的細胞。在3次分別的研究中,磁體增加了角質(zhì)細胞的增生,然而在3次研究中有2次顯示出,條形磁體比Bioflex磁體增加得更多。
      實施例3實施例3評價了乳酸和磁場在誘發(fā)角質(zhì)細胞增生中的協(xié)同效果。在此研究中,使用了活體外角質(zhì)細胞培養(yǎng)基,2mM的乳酸使增生增加5.4%。在統(tǒng)計學上此增加是不明顯的。單獨使用Bioflex磁體時也激發(fā)增生達5.5%,在該實驗使用的條件下,在統(tǒng)計學上這也是不明顯的。然而,在Bioflex磁體存在下,乳酸激發(fā)角質(zhì)細胞增生15%,在統(tǒng)計學上這就是明顯的了(p>0.001)。因此,此實驗揭示了乳酸和磁體在激發(fā)角質(zhì)細胞增生方面的協(xié)同效果。
      乳酸和磁場對角質(zhì)細胞增生的協(xié)同效果如用DNA的含量所測試對照組 乳酸 Bioflex磁體乳酸+(無磁體) (2mM) Bioflex磁體平均 241254 256277標準偏差 5.3 6.315P值 0.35 0.36 0.001實施例4實施例4比較了磁體的幾何形狀對豬皮組織培養(yǎng)基表皮細胞增生的影響,如N極與S極;條形磁體與Bioflex環(huán)形磁體。如在方法中所述進行豬皮的培養(yǎng)。在此實驗中,Bioflex磁體對表皮細胞的增生沒有明顯的影響。條形磁體,無論是N極還是S極,都表現(xiàn)出對增生有較高的刺激。條形磁體N極的影響最小,與對照組相比高24%,在統(tǒng)計學上不是很大。然而,條形磁體的S極明顯地刺激了豬表皮細胞的增生,比對照組高87%。此研究表明,條形磁體比Bioflex磁體要好,因為其磁場較強,而條形磁體的S極明顯地比N極好。
      不同磁體的幾何形狀對器官培養(yǎng)基表皮影響的比較。磁體幾何形狀 DNA合成+/-std 對照組之% P值(cpm/7mm活檢)對照組(無磁體)4346+/-2911001Bioflex環(huán)形 4427+/-3101020.75條形磁體S極 8125+/-8091870.001條形磁體N極 5411+/-1073 1240.172實施例5實施例5評價了乳酸(LA)的劑量響應和乳酸與條形磁體S極對豬表皮細胞增生的協(xié)同效應。在此實驗中,2.0mM的乳酸影響不大只有0.02,而0.2mM對表皮細胞沒有明顯影響。如同在前面所看到的,條形磁體的S極對增生有明顯的影響。如同所預期,在不同濃度的乳酸存在下,磁體S極的增生都明顯地高于對照組。當與只用S極進行對比時,只是最高濃度的乳酸明顯不同,與僅僅最高濃度的乳酸是明顯的這一結(jié)論相似。用LA和S極觀察到協(xié)同效應,2mM的乳酸比對照組高43%;只用S極比對照組高87%;乳酸+S極比對照組高165%,這高于加和響應43+87=130。
      DNA合成 是對照p值是p值與S(cpm/活體組織) 組的%對照組 極的對平均+/-STD的倍數(shù) 比對照組,無磁體4346+/-291 100 1無乳酸乳酸0.02Mm4670+/-497 107 0.37乳酸0.2Mm 5030+/-958 115 0.30乳酸2.0mM 6216+/-1035 143 0.04只用磁體S極 8125+/-809 187 0.0011.00S極+0.02mM乳酸7915+/-2807 182 0.01 0.90S極+0.2mM乳酸 8402+/-512 193 0.0010.64S極+2.0mM乳酸 11523+/-2123265 0.0010.06實施例6實施例6說明在豬表皮增生中S極與N極和乳酸協(xié)同效應的比較。暴露在S極下的豬皮比暴露在N極下的豬皮顯示出更高的增生作用。只用0.2mM的乳酸對表皮增生沒有明顯的影響,與實施例5的數(shù)據(jù)相似。然而,當與N極或S極磁體合用時,0.2mM乳酸比對照組表現(xiàn)出高得多的增生作用。S極+乳酸組表現(xiàn)出最大的增生響應,比對照組高146%,與單用乳酸或單用S極的對照組相比,這表現(xiàn)出協(xié)同效應。N極+乳酸組比對照組的增生響應顯示出高112%,但與單用N極的對照組相比,這不是協(xié)同效應。因此,此實驗證實了前面的結(jié)論,即在豬皮組織培養(yǎng)基中,乳酸+S極磁體顯示出表皮細胞的協(xié)同生長響應。組 DNA合成 是對照p值 p值p值p值(cpm/活體組織)組的%與對照組N極/S極S極/S極N極/N極平均+/-STD 比較 +乳酸較對照組 32958+/-11944 100 1.00無磁體和乳酸S極 60668+/-23675 184 0.0063 1.00 1.00N極 54831+/-12393 166 0.0045 0.59 1.00對照組+ 41076+/-24767 124 0.4070.2mMLAS極+LA 81393+/-11738 246 >0.0001 0.07N極+LA 69726+/-29913 211 0.00910.306實施例7在實施例7中,測量真皮增生與乳酸和磁極處理的關(guān)系。對于真皮,S極比N極顯示出更大的增加。單用乳酸明顯地刺激了真皮增生。然而與在表皮中的結(jié)論相反,磁體與乳酸的合用對真皮不顯示協(xié)同效應。組DNA合成 是對照 p值 p值 p值 p值(cpm/活體組織) 組的% 與對照 N極/S極 S極/S極 N極/N極平均+/-STD 組比較 +乳酸+乳酸較對照組9435+/-2221 100 1.00無磁體和乳酸S極 13940+/-7673142 0.234 1.00 1.00N極 11839+/-4095125 0.235 0.639 1.00對照組+ 15306+/-4656162 0.0190.2mMLAS極+LA17244+/-4259182 0.0025 0.298N極+LA16886+/-2227178 0.00210.092實施例8
      組成貼片以提供附著在含活性物層的S極取向磁層,貼在皮膚上,使活性物從其層中在取向的磁場中滲入皮膚。
      有如下所詳細敘述的4種組成方式8A.非織造的貼片A.磁片(S極朝上)B.粘接劑層C.浸有w/粘接劑和活性物的非織造布D.(任選)粘接劑層實施例羥基酸和各種賦形劑以及水溶性粘接劑一起使用,然后用來浸入非織造布。粘接劑/活性物組合物的例子是80%的陰離子聚合物,如Gantrez S-972%氨基甲基丙醇6%乳酸0.2%防腐劑適量的水B層將A層附著在C層上,是選自表1的粘接劑,與A層和C層都相容。
      C層是浸有活性物和水溶性粘接劑的非織造布,可以附著在皮膚上。粘接劑選自表2。在該產(chǎn)品的一個實施方案中,C層中的粘接劑用來將C層粘附在A層上。
      另一個實施方案是,壓敏粘接劑(PSA)D層涂布在非織造布上。PSA涂布得成為連續(xù)層,或者是對水和活性物的可以半滲透的連續(xù)層。
      8B.水凝膠貼片A.磁片(S極朝下(south side down))B.粘接劑層C.浸有w/水凝膠和羥基酸的非織造布D.(任選)粘接劑層實施例帶有浸漬1∶10水凝膠羥的聚酯非織造布。凝膠組合物的例子是55%的水
      28%的聚丙烯酸鈉鹽衍生物15%的甘油1%的呫噸膠1%的NaClB層將A層附著在C層上,是選自表1的粘接劑,與A層和C層都相容。
      凝膠的表面張力實現(xiàn)C層與皮膚的粘接。
      另一個實施方案是,壓敏粘接劑(PSA)D層涂布在非織造布上。PSA涂布得成為非連續(xù)層,或者是對水和活性物的可以半滲透的連續(xù)層。
      8C.壓敏粘接劑(PSA)貼片A.簡單實施例用含有羥基乙酸的粘接劑A.磁片(S極朝下)B.(任選)粘接劑層F.(任選)塑料薄膜C.含有在實施例中的混合活性物5%羥基乙酸的粘接劑層液體儲藏劑的例子5%的甘油4%的琥珀酸2%的羥基乙酸1%的Carbopol0.2%的防腐劑適量的水B.控制釋放A.磁片(S極朝下)B.粘接劑層F.塑料薄膜C1.含有2%乳酸的液體儲藏劑C2.半滲透膜(控制速度)D.粘接劑層液體儲藏劑的例子
      5%的甘油4%的琥珀酸2%的羥基乙酸1%的Carbopol0.2%的防腐劑適量的水在簡單的貼片中,C層中的粘接劑選自表1,適合于將其粘接在A層上。如果沒有該粘接劑,可以加入B層和F層。B層是選自表1的,與A層和C層都相容的粘接劑。F層是包括聚氨酯、聚酯、聚乙烯或聚氯乙烯的塑料薄膜。薄膜的厚度是1.0~10.0mil。該薄膜也可以是發(fā)泡的,厚度為20~200mil。
      控制釋放貼片使用B層和F層,來分隔和包含含有液體加上來自磁片的活性物的儲藏劑。粘接劑層D可以是涂布在半滲透膜上的非連續(xù)層,或者是對水和活性物的流動沒有明顯影響的連續(xù)層。
      8D.聚硅氧烷片貼片
      B層將A層附著在C層上,是選自表1的粘接劑,與A層和C層都相容。
      聚硅氧烷片適合于疤痕、傷口、伸展痕跡和/或其它皮膚疾患的治療。在袋中的聚硅氧烷流體或凝膠類似地可用于治療皮膚疾患。
      表1粘接劑的類型丙烯酸 乙烯基丙烯酸 丙烯酸酯苯乙烯-丁二烯環(huán)氧樹脂Chloropane彈性體 聚乙烯醇聚酰亞胺聚硅氧烷 聚氨酯 聚醋酸乙烯亞乙基乙酸乙烯酯 天然橡膠或合成橡膠表2水溶性粘接劑的類型丙烯酸 丙烯酸酯丙烯酸乙烯酯烷基醋酸乙烯苯乙烯磺酸酯 甜菜堿 聚乙烯醇N-乙烯基環(huán)酰胺 琥珀酸酯苯乙烯烷基乙烯基醚 乙烯基吡啶 馬來酸酯實施例9用MelanoDerm活皮膚等價物檢驗在S極磁性存在下或不存在下,植酸(0.5%)對于細胞素釋放的影響。在培養(yǎng)的過程中,一組組織暴露在S極磁性下,同樣的第二系列不暴露在磁性下,在24小時培養(yǎng)后測試培養(yǎng)培養(yǎng)基的IL1-a和PGE-2。在沒有磁性時,培養(yǎng)基中IL-1a和PGE-2的濃度都有明顯的增加。在有磁性存在下,此增加被抑制。
      材料活皮膚等價物MelanoDermTMMEL-300,是含有有功能黑素細胞的三維表皮模型,由Massachusetts州Ashland市的MatTek公司制造,是在此實驗中使用的組織。
      植酸在水中以0.5%的濃度測試植酸。在初步的實驗中,顯示出此濃度對Melano Derm組織是無毒的(按MTT評價對組織的生存活力沒有影響)。
      磁體Edmund Scientific公司提供的6英寸×4英寸×1英寸的立方體狀永久定向鐵錳陶瓷磁鐵,提供給放在磁鐵表面上方培養(yǎng)板水平面的磁場強度大約650+/-200Gauss。
      方法活體外培養(yǎng)將50L植酸溶液(0.5%)涂布在4個MEL-300組織的角質(zhì)層表面上。用8個未曾處理的MEL-300組織作為對照組。將一半組織(即2個植酸和4個未處理的對照組)放在6英寸×4英寸鐵錳磁鐵的S極表面上,在37℃和5%的二氧化碳氣氛下培養(yǎng)24小時。
      在培養(yǎng)24小時以后,從培養(yǎng)培養(yǎng)基中取出組織,測試MTT,以確定組織的生存活力。測試培養(yǎng)培養(yǎng)基的細胞素IL1-a和PGE-2的含量。將該組織的試樣冷凍,在以后7天進行第二次細胞素測定。用商用的96孔Elisa套件進行細胞素測定。
      結(jié)果IL-1a和PGE-2的Elisa測試結(jié)果匯總在表1中,詳細結(jié)果在表2中。
      表1.磁性對植酸刺激細胞素釋放的影響
      此結(jié)果表明,磁性抑制了植酸從皮膚表皮組織刺激IL-1a和PGE-2。因為IL-1a和PGE-2都是前炎性間介物,磁性抑制其釋放就表明了磁性的抗炎性效果。因為在沒有活性物存在下,磁鐵對細胞素的釋放沒有明顯的影響,此結(jié)果表明了磁性對如植酸的刺激皮膚產(chǎn)生炎性間介物的活性物抗炎性的影響。
      表II植酸對組織釋放IL1-a和PGE-2的影響IL1-a(i) IL1-a(ii) 對未處理 有磁性對無磁 PGE-2(i)PGE-2(ii) 對未處理 有磁性對無磁的T檢驗 性的對偶T檢驗 的T檢驗 性的對偶T檢驗p(T<=t)2-Tail p(T<=t)2-Tail未處理的 107.8 90.7 25401520116.4 117.1 31382104172.4 83.7 206991047.2 1460396平均105+/-38 1767+/-882未處理的+磁鐵 126.1 63.5 950 228163.7 89.1 1793646235.8 120.2 37362583113.2 42043021平均130+/-56 0.345 2145+/-14740.544植酸/無磁鐵285.3 186.2 53265621222.9 141.1 46734923平均209+/-61 0.00075136+/-421 0.001植酸/磁體 239.1 158.2 20561899108.9 98.4 23872030平均151.2+/-640.164 0.0572093+/-208 0.493 0.002從表I和表II的結(jié)果可以看出,S極磁性抑制了植酸對皮膚表皮組織的原炎性作用(pro-inflammatory)。
      實施例10測試了在有S極磁性存在下和沒有S極磁性存在下,曲酸、維生素C和育亨賓降低MelanoDerm活皮膚等價物色素沉著的能力。在培養(yǎng)的過程中,將一系列組織暴露在S極磁性下,相同的另一系列不暴露在S極磁性下,在14天的培養(yǎng)以后,用原發(fā)顏色形象分析估計每一組織中形成的黑色素。
      結(jié)果表明在沒有磁性存在下每種活性物能夠降低色素沉著,而在有S極磁性存在下,降低色素沉著的能力增強了。
      材料活皮膚等價物MelanoDermTMMEL-300是含有有功能黑素細胞的三維表皮模型,由Massachusetts州Ashland市的MatTek公司制造,是在此實驗中使用的組織。每個MEL-300套件具有24塊組織。
      色素沉著活性物將3種色素沉著活性物加入到具有如下最終濃度的Melanoderm培養(yǎng)培養(yǎng)基中,(a)曲酸—500mol(b)育亨賓—25mol(c)抗壞血酸—285mol磁體Edmund Scientific公司提供的6英寸×4英寸×1英寸的立方體狀永久定向鐵錳陶瓷磁鐵,提供給放在磁鐵表面上方培養(yǎng)板水平面的磁場強度大約650+/-200Gauss。
      方法在活體外培養(yǎng)2個MEL-300套件每個有24塊組織塊,用同樣的活性物制備。每種活性物,即維生素C、曲酸和育亨賓放在如上所規(guī)定的濃度下的5塊組織的培養(yǎng)培養(yǎng)基上。4塊組織是未處理的。其余5塊組織用此處未報道的刺激活性物處理,因為它對色素沉著沒有明顯的影響。將一個如上所制備的MEL-300套件放在6英寸×4英寸的鐵錳磁鐵S極表面上進行培養(yǎng),同樣的第二個MEL-300套件在同樣的而且遮蔽了磁鐵的培養(yǎng)器的相反一側(cè)(頂部左邊對底部右邊)進行培養(yǎng)。
      在37℃和標準大氣壓下(5%的二氧化碳),在養(yǎng)護培養(yǎng)基中培養(yǎng)14天。養(yǎng)護培養(yǎng)基和活性物每周補足4次。在第7天,從每個活性物和對照組中取出2塊組織,每組剩下3塊組織(未處理組是2塊),用于第14天的評估。
      黑色素產(chǎn)生的評估在第14天完成實驗時,每個MEL-300培養(yǎng)板的組織塊從上面照相。每塊組織看起來象是一個小圓餅,具有不同深度的棕色。將兩個MEL-300培養(yǎng)皿的照片(一個在磁鐵上培養(yǎng),一個沒有磁鐵)掃描進Pentium II計算機。使用在Optimas影象定量軟件包中的顏色分析宏來測量每個圓餅的顏色原色含量。用藍色含量作為黑色素顏料指數(shù)(使用此影象分析系統(tǒng),初步的實驗證實,黑色素的原色是藍色的原則—通過比較高加索人類皮膚彩色照片上周圍被沒有色素沉著的皮膚包圍的棕色雀斑和老年斑確定了這一點)。藍色強度標尺是0~255,這里0是被藍色飽和,而255是完全沒有藍色。用計算機計算其總體范圍0~255的百分比,將每塊組織的實際藍色標尺讀數(shù)轉(zhuǎn)變?yōu)閍%藍色值。
      在下面的表格中給出了關(guān)鍵的結(jié)論。
      磁性對去色素沉著活性物活性的影響
      在沒有磁性時,3種去色素沉著活性物顯示出比未處理的對照組組織更少的色素沉著。在磁鐵S極側(cè)面培養(yǎng)的組織比未處理的對照組,即在沒有磁鐵時所見到的表現(xiàn)出較強的色素沉著降低。在有磁鐵存在下和沒有磁鐵存在下,活性物之間的差別,在統(tǒng)計上是顯著的(p<0.05)。在對照組所見到的色素沉著,對于沒有磁鐵(78%)和有磁鐵(79%),沒有明顯的差別,顯示出在沒有活性物存在下,S極磁性不具有去色素沉著的作用。因此,該結(jié)果表明,S極磁性增強了曲酸、育亨賓和維生素C的去皮膚色素沉著作用。
      實施例11此實施例測量各種活性物在與磁體一起使用時,對活體外脂肪細胞(sebocyte)產(chǎn)生脂的影響。
      從成年男性得到的人脂肪細胞的二次培養(yǎng)基在48孔組織培養(yǎng)板(Massachusetts州,Cambridge市Costar公司)的內(nèi)24孔中生長直至匯合。脂肪細胞生長培養(yǎng)基含有Clonetics角質(zhì)細胞基底培養(yǎng)基(KBM)再補充以14μg/mL的牛垂體提取液、0.4μg/mL的氫化可的松、5μg/mL胰島素、10ng/mL表皮生長因子、1.2×10-10M霍亂毒素、100單位/mL青霉素和100μg/mL鏈霉素。全部培養(yǎng)基都在37℃和7.5%的二氧化碳存在下進行培養(yǎng)。培養(yǎng)基每周更換3次。
      在實驗的第一天,除去生長培養(yǎng)基,用滅菌的Dulbecco改性Eagle培養(yǎng)基(DMEM;無酚紅)洗滌脂肪細胞3次。在每個試樣(一式三份)中加入新鮮DMEM,同時加入5μL溶解在乙醇中的測試試劑(312.5μM水楊酸三異癸酯或10μM亞麻酸視黃酯;每個試樣一式六份)中的測試試劑。對照組包括單加入的乙醇。每塊磁鐵夾在兩個板之間24小時。對于脂肪細胞板中的2個,狀態(tài)是N極指著上方,對于另外兩個,狀態(tài)相反即S極朝上,一個板作為對照組(沒有磁鐵)。
      在24小時以后,加入14C-乙酸鹽緩沖溶液(最終濃度為5mM,56mCi/mmol比活性)。然后將脂肪細胞返回到培養(yǎng)基中經(jīng)過4小時,在此以后用磷酸鹽緩沖液淋洗每個培養(yǎng)基3次,除去未結(jié)合的標記物。采集保留在脂肪細胞中的放射性標記物,用Beckman閃爍計數(shù)器計數(shù)。
      用JMP軟件包進行統(tǒng)計分析。
      用Student T檢驗比較每一對α=0.05正值表示一對平均值顯著不同縮寫Cont沒有磁鐵的對照組板TDS水楊酸三異癸酯RL亞麻酸視黃酯NTN極磁鐵面朝上,組織培養(yǎng)板在磁鐵上面NBN極磁鐵面朝上,組織培養(yǎng)板在磁鐵下面STS極磁鐵面朝上,組織培養(yǎng)板在磁鐵上面SBS極磁鐵面朝上,組織培養(yǎng)板在磁鐵下面
      權(quán)利要求
      1.一種化妝用雙貼片,它包括(i)一種靜磁體層;(ii)一種含有有化妝效果成分的非織造的、穿透皮膚的水凝膠或聚硅氧烷片;其中兩層靠粘接劑彼此粘結(jié)在一起。
      2.一種處理皮膚的化妝方法,該方法包括(a)將靜磁體的S極貼在皮膚上;以及(b)將一種在可以用在化妝中的載體中含有有化妝效果的成分組成的皮膚化妝護理組合物涂布在皮膚上。
      3.如權(quán)利要求2的方法,其中磁體的厚度至少為1cm。
      4.如權(quán)利要求2的方法,其中有化妝效果的成分選自羥基酸、類視黃醇、維生素C、植酸、育亨賓和曲酸。
      全文摘要
      基于將靜磁體的S極貼在皮膚上,同時在皮膚上涂布一種化妝組合物的皮膚化妝方法。還公開了一種含有一個靜磁體層和一種非織造的、含有有化妝效果成分的穿透皮膚的水凝膠或聚硅氧烷片的化妝用雙貼片,其中的兩層靠粘接劑彼此粘結(jié)在一起。
      文檔編號C08L83/00GK1252966SQ9912363
      公開日2000年5月17日 申請日期1999年10月29日 優(yōu)先權(quán)日1998年10月29日
      發(fā)明者A·P·茲奈登, A·W·約翰遜, C·A·博斯科, S·薩馬拉斯 申請人:尤尼利弗公司
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