"CFU/ml。
[0025] 所述玉米巧水不溶性木聚糖平板；玉米巧30g/l，款皮20g/l，低聚木糖巧5P，購自 山東龍力生物科技股份有限公司）5g/l，酵母提取物5g/l，蛋白腺5g/l，P冊.5-7. 5,121°C 滅菌20min。
[0026] 所述液體種子培養(yǎng)基的配方是；低聚木糖巧5P，購自山東龍力生物科技股份有 限公司）lOg/L ;酵母提取物lOg/L ;蛋白腺lOg/L ;磯酸二氨鐘0. 6g/L ;氯化巧0. 3g/L， P冊.5-7. 0,12TC滅菌 20min。
[0027] ②發(fā)酵：將生長良好的上述種子液接到發(fā)酵培養(yǎng)基中，發(fā)酵生產(chǎn)木聚糖酶。發(fā)酵條 件為；50°C，pH自然，轉速為200-3(K)巧m;發(fā)酵罐培養(yǎng)基組成；步驟（2)中爆破渣30~50g/ L酵母粉5g/l，膜蛋白腺5g/l，磯酸二氨鐘0.6g/l，氯化巧3g/L，走水硫酸儀0. 3g/l，硫酸 亞鐵0. 3g/L。發(fā)酵過程中4她時，每升發(fā)酵液補加5g酵母粉和5g膜蛋白腺，6化時，每升 發(fā)酵液補加2ml吐溫，發(fā)酵84~12化，獲得木聚糖酶酶液。
[002引步驟（3)中，釀酒酵母為耐高溫釀酒高活性干酵母（為常規(guī)市售產(chǎn)品，購自安琪酵 母股份有限公司）。活化方法為；將步驟（2)中的爆破渣進行酶解糖化制備水解糖液。具 體步驟為；向水中加入爆破渣，使爆破渣干物質(zhì)含量為10%~25% (w/w)，抑為4~6;按 照爆破渣干物質(zhì)中每克纖維素質(zhì)量添加5~10FPU纖維素酶酶液，50°C糖化2~2化得到 水解糖液。
[0029] 按照每升上述水解糖液中加入0~5克的玉米漿及0. 5~1克耐高溫釀酒高 活性干酵母（安琪酵母股份有限公司），34°C活化4~她，此時酵母數(shù)量為2X10化即/ ml-1X10"CFU/ml，即得活化后的釀酒酵母。
[0030] 步驟（3)中，活化后的釀酒酵母菌液的接種量為發(fā)酵液體積的10% (v/v)。
[0031] 步驟（3)中，所述酶解反應器為專利201420441746. 1實施例1中所述的木質(zhì)纖維 原料酶解反應器，使固含量一次達到10%~25%。
[003引步驟（4)中，丙酬、了醇發(fā)酵菌拜氏梭菌ATCC55025(ClostridiumbeijerinckU) 的活化方法為：制備拜氏梭菌活化液：將爆破渣進行酶解糖化制備水解糖液。具體步驟為： 向水中加入爆破渣，使爆破渣干物質(zhì)含量為10%~25%(w/w)，pH為4~6;按照爆破渣干 物質(zhì)中每克纖維素質(zhì)量添加5~10FPU纖維素酶酶液，50°C糖化2~2化得到水解糖液， 水解糖液中葡萄糖的濃度為40g/L。按照每升上述水解糖液中加入20克的玉米漿，抑為 6. 5~7. 5,115°C滅菌20min，即得拜氏梭菌活化液，接入ATCC55025拜氏梭菌菌種，37°C活 化16~2化，即得活化后的拜氏梭菌菌液，此時，拜氏梭菌的數(shù)量為106C即/ml~101化即/ ml。
[0033] 步驟（4)中，發(fā)酵條件為34~4(TC，厭氧反應60~96h。所述拜氏梭菌ATCC55025 是由美國典型微生物菌種保藏中屯、ATCC保藏（山東大學贈予）。
[0034] 木質(zhì)纖維素生物質(zhì)主要由纖維素、半纖維素和木質(zhì)素組成，纖維素可W被纖維素 酶分解為葡萄糖，半纖維素可W被木聚糖酶分解為木糖，為提高酶解產(chǎn)糖效率需要對原料 進行一定預處理。本發(fā)明是通過低損失的氨爆預處理，通過預處理后回收氨水，剩余的廢渣 含有纖維素、木質(zhì)素和半纖維素，通過預處理的木質(zhì)纖維素原料作為誘導物來替代微晶纖 維素起到誘導纖維素酶產(chǎn)生，使纖維素酶=大酶系比例更利于降解該類預處理物料，然后 通過酶系復配及高固含量酶解設備達到玉米枯桿一次濃度為10%~25%，實現(xiàn)原料快速 降粘，利用纖維素和半纖維素糖化降解成葡萄糖和木糖的工藝，混合發(fā)酵生產(chǎn)己醇和丙酬、 了醇；通過己醇、了醇和丙酬=種產(chǎn)品同時蒸饋，解決原有了醇發(fā)酵含量低蒸饋能耗高的弊 端，使得現(xiàn)有常規(guī)發(fā)酵生產(chǎn)丙酬和了醇具有市場競爭力，剩余殘渣的木質(zhì)素主要可W制備 木質(zhì)素成型燃料。S種產(chǎn)物的比例根據(jù)菌種不同產(chǎn)生差異，由公開號為CN101358218的專 利一種利用枯桿生產(chǎn)木糖聯(lián)產(chǎn)丙酬、了醇和己醇的方法W及公開號為CN101440381的專利 一種W戊糖和己糖共發(fā)酵生產(chǎn)丙酬了醇的方法中可W看出，無論是傳統(tǒng)梭菌還是高了醇比 梭菌的發(fā)酵產(chǎn)物中總容劑只有2%左右，本發(fā)明方法最大程度的實現(xiàn)了木質(zhì)纖維原料的綜 合利用，同時實現(xiàn)了有機溶劑含量大于4%，極大的降低了蒸饋成本。
[0035] 本發(fā)明的有益效果；
[0036] 1、氨法爆破預處理可W疏松木質(zhì)纖維素原料的致密結構，部分去除木質(zhì)素和少量 半纖維素，同時破壞纖維素結晶，提高酶解效率。
[0037] 2、整個爆破過程中基本無抑制物產(chǎn)生；殘留于物料中的NH4+可W在后期發(fā)酵過程 中當做氮源。
[003引 3、堿液浸泡可W加強爆破效果，特別是氨水回收利用可W減少氨水的使用，氨可 W作為氮源在后續(xù)發(fā)酵中被利用，預處理過程中無污染物排放。
[0039] 4、己醇發(fā)酵和丙酬了醇發(fā)酵在同一反應器中同時混合發(fā)酵，前期己醇生產(chǎn)的二氧 化碳給了醇發(fā)酵提供了充足的厭氧環(huán)境；其次充分利用原料中的五碳糖、六碳糖共同發(fā)酵、 達到節(jié)約設備，節(jié)約投資，而且第一步發(fā)酵中衰亡的酵母可W作為第二步發(fā)酵微生物的營 養(yǎng)。
[0040] 5、己醇、丙酬、了醇=種產(chǎn)物比例合理，由于高濃物料糖化使得酒精含量較高，同 時ABE發(fā)酵的副產(chǎn)物此時可W與了醇同時進行分離，有機溶劑的增加，降低了蒸饋成本。
【附圖說明】
[0041] 圖1為本發(fā)明方法的技術路線圖。
【具體實施方式】
[0042] 實施例1
[0043] 下面結合附圖和實施例對本發(fā)明進一步說明。
[0044] 如圖1所示，一種玉米枯桿聯(lián)產(chǎn)己醇、丙酬和了醇的方法，具體包括W下步驟：
[0045] 1、玉米枯桿剪切至3cm，置于3倍質(zhì)量的10% (w/w)氨水溶液中，室溫浸泡化，過 濾將固液分離，液體用于下一批物料浸泡；固體置于爆破機（地S-200B，鶴壁正道生物能源 公司，河南）中，2. 5MI^a保壓60s，瞬間降壓噴出爆破渣；爆破渣置于4倍質(zhì)量的水中，用硫 酸調(diào)抑為5. 5。
[0046] 2、草酸青霉纖維素酶菌種活化及發(fā)酵
[0047] (1)菌種活化；草酸青霉在PDA平板上于30°C條件下，生長7天，然后挑取單菌落 劃線于含有PDA瓊脂（馬鈴馨粉；5.Og/l，葡萄糖；20.Og/l，瓊脂；15.Og/l，氯霉素；0.Ig/ L)的茄形瓶中，28°C培養(yǎng)7天，然后用無菌水洗出，接入液體活化培養(yǎng)基中培養(yǎng)36h，即得活 化后的草酸青霉，草酸青霉的數(shù)量為1Xl〇iiCFU/ml。
[0048] 所述PDA平板的成分是；馬鈴馨300克、葡萄糖20克、瓊脂15~20克、自來水1000 毫升、自然抑。
[0049] 所述液體活化培養(yǎng)基的配方是；葡萄糖lOg/l，蛋白腺lOg/l，玉米巧lOg/l，款皮 lOg/L碳酸巧 5g/L。
[0化0] (2)發(fā)酵；將活化好的上述菌種按照10% (v/v)的接種量轉接于液體發(fā)酵培養(yǎng)基 中，調(diào)節(jié)抑為5. 0~5. 5,12rC滅菌30min，發(fā)酵72~12化獲得纖維素酶酶液。
[0化1] 所述液體發(fā)酵培養(yǎng)基的配方是；爆破渣30g/l，款皮30g/l，尿素Ig/L，1豆餅粉 lOg/l，硫酸錠2g/l，硫酸儀0. 5g/L和磯酸二氨鐘3g/L。
[0化2] 注：本實施例中草酸青霉保藏在中國普通微生物保藏管理中屯、，保藏編號CGMCC NO. 5302 〇
[0053] 3、鏈霉菌木聚糖酶菌種活化及發(fā)酵
[0054] (1)菌種活化備霉菌木聚