甘油磷脂酰膽堿的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及甘油磷脂酰膽堿的制備領(lǐng)域，具體地，涉及一種甘油磷脂酰膽堿的制 備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 磷脂是含磷酸根的類脂化合物的總稱，廣泛分布于自然界中。幾乎所有的細(xì)胞中 都含有磷脂，它是細(xì)胞膜的基本組成成分，是重要的生命物質(zhì)。目前，商品磷脂一般是從 大豆中提取的，其中磷脂的組成主要有磷脂酰膽堿（PC)、磷脂酰乙醇胺（PE)、磷脂酰肌醇 (PI)、磷脂酰絲氨酸（PS)、磷脂酸（PA)等。大豆磷脂除具有生理活性外，還具有乳化、速 溶、潤(rùn)濕、分散、抗氧化、增溶等特性，被廣泛應(yīng)用于食品、醫(yī)藥、化妝品、紡織、制革、飼料等 領(lǐng)域。由于分子結(jié)構(gòu)的關(guān)系，磷脂在某些方面的應(yīng)用具有局限性。為了改善磷脂的性能，拓 寬磷脂的應(yīng)用領(lǐng)域，生產(chǎn)特殊需要的磷脂產(chǎn)品，需要對(duì)天然磷脂產(chǎn)品進(jìn)行加工改性。
[0003] 甘油磷脂酰膽堿是磷脂酰膽堿（PC)分子上的兩個(gè)脂肪?；耆凰獾舻漠a(chǎn) 物，它具有顯著的穩(wěn)定腦部認(rèn)知能力的作用，甚至可以修復(fù)早期老年失智癥患者部分已受 損的認(rèn)知能力。不像那些抑制乙酰膽堿分解的藥物，GPC是刺激機(jī)體產(chǎn)生新的磷脂酰膽堿。 動(dòng)物研宄顯示，GPC可以預(yù)防記憶力的喪失。在實(shí)驗(yàn)條件控制的對(duì)照組比較之后發(fā)現(xiàn)，被喂 食GPC鼠齡較大的老鼠，其腦部專司記憶力及學(xué)習(xí)能力的海馬區(qū)域中，神經(jīng)連接的損失較 少?？茖W(xué)家Kidd PM根據(jù)一篇對(duì)于13個(gè)臨床實(shí)驗(yàn)報(bào)告的回顧評(píng)論，歸納得出：在針對(duì)4, 054 個(gè)老年記憶力喪失，或中風(fēng)或輕微中風(fēng)，所引起的血管性失智的病患上，GPC可以持續(xù)改善 腦部的記憶及注意力，即使在多種的實(shí)驗(yàn)測(cè)試環(huán)境，它仍能顯著的改善病人的臨床癥狀。
[0004] 此外，GPC通過對(duì)神經(jīng)生長(zhǎng)因子的作用，可以保護(hù)及增進(jìn)神經(jīng)間的傳導(dǎo)。神經(jīng)生長(zhǎng) 因子接受器會(huì)因老化而減少，而GPC可以促進(jìn)其生長(zhǎng)，修復(fù)，而且可以增加神經(jīng)生長(zhǎng)因子接 受器在小腦皮質(zhì)（Cerebellar Cortex，它是腦中控制動(dòng)作協(xié)調(diào)的區(qū)域）中的表現(xiàn)。GPC通 過不同的機(jī)制激發(fā)神經(jīng)傳導(dǎo)物質(zhì)6八1^(丫-31]1；[110131^71'；[03(^(1，丫氨基丁酸）的釋放，使腦 細(xì)胞得到更多的GABA。而老年人腦部的GABA含量的下降，會(huì)造成認(rèn)知能力受損，導(dǎo)致失智 癥，抑郁癥，以及精神病等常見的腦部退化癥狀的發(fā)生，如阿茲海默癥和亨丁頓舞蹈癥。
[0005] 目前，國(guó)內(nèi)對(duì)GPC可見文獻(xiàn)的報(bào)道極少，而國(guó)外對(duì)GPC的研宄給予了高度關(guān)注，并 對(duì)其臨床基礎(chǔ)應(yīng)用開展了大量的研宄。Canal N等研宄表明，年輕健康人服用GPC具有提 高其注意力、記憶力及認(rèn)知能力的作用。Parnetti L等（2001)研宄表明對(duì)于腦環(huán)境惡化 及患有阿茲海默癥的患者，服用GPC后具有顯著的改善記憶力減退的效果。Aguglia E等 (1993)、Barbagallo Sangiorgi G 等（1993)、Tomasina C 等（1994)研宄表明對(duì)于腦中風(fēng) 及腦損傷患者服用獨(dú)特療效。Ceda GP等（1994)研宄表明，GPC具有復(fù)蘇老年人激素功能 的作用。Sannita WG(1993)在年齡50多歲的人群中開展了一項(xiàng)"年齡伴隨記憶力減退"的 研宄表明，服用GPC具有提高記憶力的功能。Abbati C等（1993)、Sicurella L等（1991)、 Sicurella L等（1990)在對(duì)65歲人群的臨床研宄表明，GPC具有提高膽堿連接神經(jīng)的反應(yīng) 時(shí)間及視覺皮層表現(xiàn)有關(guān)的多巴胺功能途徑。Di Perri R等（1991)、Frattola L等（1991) 等（1992)、Muratorio A 等（1993)、Paciaroni E 等（1991)、Ban TA 等（1992)、Palleschi M等（1993)等相繼開展研宄表明GPC提高了整體臨床癥狀，包括認(rèn)知能力、情緒癥狀和體外 癥狀例如疲勞、頭暈。Ban TA 等（1991)、Palleschi M 等（1992)、Schettini G 等（1993)、 Parnetti L等（1993)相繼開展研宄表明GPC對(duì)于治療阿茲海默癥具有重要改善作用。 Aguglia E 等（1993)、Barbagallo Sangiorgi G 等（1994)、Tomasina C 等（1996)、Gambi D等（1993) Xonsoli D (1994)相繼開展研宄表明GPC對(duì)于治療腦中風(fēng)具有重要改善作用。 de Moliner P等（1993)對(duì)健康的年輕志愿者口服GPC進(jìn)行了研宄，十小時(shí)后，發(fā)現(xiàn)GPC能 夠很好的被吸收和明顯增加了膽堿的離子水平。Tserng K-Y等（2004)研宄認(rèn)為GPC是體 內(nèi)合成PC極為重要的前體物質(zhì)。Ferraro L等（1996)研宄認(rèn)為GPC也支持其他信號(hào)體系 例如多巴胺、降腎上腺素和GABA功能。
[0006] 甘油磷脂酰膽堿（GPC)是膽堿來源，具有良好的改善記憶和認(rèn)知功能，它能穿過 血腦屏障，是乙酯酰膽堿和磷酸卵磷脂合成的膽堿源。多項(xiàng)研宄表明，GPC能改善認(rèn)知功能， 并且有較好的耐受性并在改善心理功能，神經(jīng)系統(tǒng)觀念和記憶力方面起著重要作用。它是 一種重要的神經(jīng)遞質(zhì)和磷脂前體，對(duì)腦血管具有保護(hù)作用。在一項(xiàng)對(duì)55-65歲男性老年器 質(zhì)性腦綜合征患者進(jìn)行的為期12周的隨機(jī)的同劑量甘油磷脂酰膽堿和奧拉西坦療效的比 較研宄中，表明兩者都有很好的耐受性，無病人因不良反應(yīng)而出現(xiàn)停止治療的現(xiàn)象。奧拉西 坦在維持治療中療效起效快，但隨著治療的停止藥效快速的衰退；甘油磷脂酰膽堿起效慢， 但療效更持久，停止治療8周后與8周治療期間的臨床療效一致。從國(guó)外多年的臨床療效 來看，甘油磷脂酰膽堿在治療顱腦損傷及老年癡呆方面都有很好的療效，且副作用小。
[0007] 在歐洲，治療阿茲海默癥的藥物"Gliation"，其主要活性成分就是GPC。GPC的藥 效，較易為病患所接受，而且副作用較少。
[0008] 國(guó)內(nèi)關(guān)于該產(chǎn)品的研宄報(bào)告很少，主要的制備路線有以下幾種：
[0009] 1、天然提取
[0010] 以天然大豆磷脂為原料，水解后，過柱精制得到產(chǎn)品。該路線工藝簡(jiǎn)單，來源豐富， 但由于磷脂中磷脂酰膽堿含量偏低，造成最終成本偏高，而且水解過程中容易造成手性結(jié) 構(gòu)消旋，致使產(chǎn)品旋光度不合格。
[0011] 2、全合成路線
[0012] 路線一（三步反應(yīng)）：
[0013]
[0014] 路線二（二步反應(yīng)）：
[0015]
[0016] 以上路線工藝復(fù)雜，手性中間體成本偏高，在手性中間體開環(huán)過程中，也容易產(chǎn)生 消旋。
[0017] 因此，提供一種制備方法簡(jiǎn)單，合成率高，大大降低生產(chǎn)成本的甘油磷脂酰膽堿的 制備方法是本發(fā)明亟需解決的問題。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0018] 針對(duì)上述現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)中甘油磷脂酰膽堿從天然物 質(zhì)中提取時(shí)往往由于磷脂中磷脂酰膽堿含量偏低，造成最終成本偏高，而且水解過程中容 易造成手性結(jié)構(gòu)消旋，致使產(chǎn)品旋光度不合格等問題，同時(shí)傳統(tǒng)的合成方法工藝復(fù)雜，成本 較高的問題，從而提供一種制備方法簡(jiǎn)單，合成率高，大大降低生產(chǎn)成本的甘油磷脂酰膽堿 的制備方法。
[0019] 為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供了一種甘油磷脂酰膽堿的制備方法，其中，所述制 備方法包括：
[0020] 1)將如式（I)所示的化合物和無水碳酸鈉混合，制得混合物Ml ;
[0021] 2)將混合物Ml和（R)-(-)-3-氯-1，2-丙二醇置于無水乙醇中回流，得到混合物 M2 ；
[0022] 3)將混合物M2稀釋5-10倍后流經(jīng)第一離子交換樹脂，得到混合物M3 ;
[0023] 4)將混合物M3稀釋2-4倍后流經(jīng)第二離子交換樹脂，得到混合物M4 ;
[0024] 5)將混合物M4用濃度為70-90重量％的乙醇洗滌后得到混合物M5 ;
[0025] 6)將混合物M5用蒸餾水洗滌后得到混合物M6 ;
[0026] 7)將混合物M6流經(jīng)第三離子交換樹脂后過濾取濾液，制得甘油磷脂酰膽堿；
[0027]
[0028] 其中，R 為 Ca2+或 Mg2+。
[0029] 通過上述技術(shù)方案，本發(fā)明將如式（I)所示的化合物與無水碳酸鈉混合后制得混 合物M1，而后將混合物Ml與（R)-(-)_3-氯-1，2-丙二醇置于無水乙醇中進(jìn)行回流，將回流 后制得的混合物M2經(jīng)稀釋一定倍數(shù)后流經(jīng)第一離子交換樹脂，而后再稀釋另一倍數(shù)后流 經(jīng)第二離子交換樹脂，最后再用乙醇及蒸餾水洗滌后再流經(jīng)第三離子交換樹脂，進(jìn)而使通 過這種方式制得的甘油磷脂酰膽堿的制備方法不僅簡(jiǎn)單，且得到的產(chǎn)物純度高，大大節(jié)省 了生產(chǎn)成本，提高了生產(chǎn)效率。
[0030] 本發(fā)明的其他特征和優(yōu)點(diǎn)將在隨后的【具體實(shí)施方式】部分予以詳細(xì)