一種丹參酮iia衍生物及其制備和應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及丹參酮IIA的衍生物及其在制藥中的應(yīng)用，屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 丹參酮IIA是丹參的主要有效成分。研宄表明，丹參酮IIA對多種腫瘤細(xì)胞具有 細(xì)胞毒性作用，并可誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞分化和凋亡，抑制腫瘤細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移。其擢用機制可能 與抑制DNA合成、調(diào)節(jié)細(xì)胞周期、影響凋亡和原癌基因的表達(dá)等有關(guān)。丹參酮IIA的抗腫瘤 作用目前在白血病、肝癌、胃癌等臨床治療中已有應(yīng)用，且表現(xiàn)出較好的療效。
[0003] 環(huán)磷酰胺、丙卡巴肼和白消安等藥物具有較好的抗腫瘤活性，其原因是它們結(jié)構(gòu) 中含有氮芥、N-甲基肼和亞乙基磺酸甲酯等活性結(jié)構(gòu)片段，這些結(jié)構(gòu)片段在體內(nèi)能對DNA 產(chǎn)生烷基化作用，起到抗腫瘤作用。本發(fā)明將具有生物烷化作用的氮芥、N-甲基肼和亞乙 基磺酸甲酯等結(jié)構(gòu)片段，拼合到丹參酮ΠΑ的結(jié)構(gòu)中，制備毒性低、作用良好的抗腫瘤的丹 參酮IIA衍生物。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的在于提供一種抗腫瘤效果好的的丹參酮IIA衍生物，其具有良好的 抗癌活性，并且毒性較低。
[0005] 本發(fā)明另一目的在于提供上述丹參酮IIA衍生物的制備方法。
[0006] 本發(fā)明還有一個目的在于提供上述丹參酮IIA衍生物在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng) 用。
[0007] 本發(fā)明上述目的通過以下技術(shù)方案予以實現(xiàn)： 一種丹參酮ΠΑ衍生物，其結(jié)構(gòu)如式（I)所示，
式中，&和1?2各自獨立的選自H、烴基、被鹵素、磺酸酯基、羥基、氨基、羧基和烷氧基取 代的烴基、氨基、取代氨基、NO J1-Cltl?；?、雜環(huán)、各種芳香環(huán)。
[0008] 作為優(yōu)選方案，本發(fā)明丹參酮IIA衍生物選自如下化合物。
本發(fā)明丹參酮ΠΑ衍生物的制備方法如下式所示：
式中，&和1?2各自獨立的選自Η、烴基、被鹵素、磺酸酯基、羥基、氨基、羧基和烷氧基取 代的烴基、氨基、取代氨基、NO J1-Cltl?；?、雜環(huán)、各種芳香環(huán)。
[0009] 與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有如下有益效果： (1) 經(jīng)體外實驗證明，本發(fā)明的丹參酮IIA衍生物與其母體丹參酮IIA相比，增強了對 腫瘤細(xì)胞的抑制作用； (2) 本發(fā)明的丹參酮IIA衍生物的制備方法簡單易行，產(chǎn)率高，易純化； (3) 本發(fā)明的丹參酮IIA衍生物結(jié)構(gòu)新穎，對腫瘤細(xì)胞的生長具有抑制效果，為制備選 擇性抑制腫瘤細(xì)胞、對機體內(nèi)毒性小的丹參酮ΠΑ衍生物類藥物打下基礎(chǔ)，具有潛在的產(chǎn) 業(yè)化開發(fā)價值。
【具體實施方式】
[0010] 以下結(jié)合實施例來進一步解釋本發(fā)明，但實施例并不對本發(fā)明作任何形式的限 定。
[0011] 實施例1 化合物（1)的制備： 將2.928(0.01111〇1)1，2-去氫丹參酮1從加入到201^乙醇中，攪拌，冷卻至0°〇，加入 2. 37g(0. 015111〇1)疆11〇4與 95mL 水的溶液和四丁基溴化銨 IOmg,用 0· 48g(0. 012mol)Na0H 控制反應(yīng)體系pH〉12,反應(yīng)4小時，過濾，蒸除乙醇，乙酸乙酯提?。↖OmL x 3)，干燥，濃縮， 柱層析純化，得到順式-1，2-二羥基丹參酮IIA，收率50%。
[0012] 將3. 26g(0.0 lmol)順式-1，2-二羥基丹參酮IIA溶于20mL氯仿，冷卻至0°C，加 入2. 83g (0· 01 Imol)氮芥磷酰二氯和2. 22g (0· 022mol) Et3N,自然升至室溫，反應(yīng)8小時，過 濾，濾液濃縮，柱層析純化，得化合物（1 )，收率80%。1H NMR( 300MHz，CDCl3) δ 7. 70-7. 60 (m， 2H), 7.22 (s, 1H), 5.01 (d，/=6. 2Ηζ，1Η), 3.68-3. 66 (m, 8H), 3.60 (m，lH), 2.10 (m， 1H), 2.05 (s, 3H), 1.91 (m, 1H), 1.40 (s, 6H)。
[0013] 實施例2 化合物（2)的制備： 用2. 15g(0.011mol)2-氯乙胺基磷酰二氯代替實施例1中的2.83g(0.011mol)氮 芥磷酰二氯，其它操作同實施例1，得到化合物（2)，收率77%。1H NMR (300MHz，⑶Cl3) δ 7. 70-7. 60 (m, 2H), 7. 22 (s, 1H), 5. 01 (d, / = 6. 2Hz, 1H), 3. 68-3. 66 (m, 4H), 3.59(m, 1H), 2.11 (m, 1H), 2.07 (s, 3H), 2.0 (br, 1H), 1.93 (m, 1H), 1.40 (s, 6H)。
[0014] 實施例3 化合物（3)的制備： 用4. 15g(0.0 llmol)雙(亞乙基磺酸甲酯基）氨基磷酰二氯代替實施例1中的 2. 83g(0.0 llmol)氮芥磷酰二氯，其它操作同實施例1，得到化合物（3)，收率82%。1H NMR (300MHz，CDCl3) δ7· 71-7.59(m，2H), 7.22(s, 1H), 5.00(d, /=6·2Ηζ，1Η)， 3. 87-3. 68(m, 8H), 3. 60(m, 1H), 3. 14(s, 6H), 2. 04(m, 1H),2. 01(s, 3H), 1.93(m, 1H), L40(s，6H)〇
[0015] 實施例4 化合物（4)的制備： 用1.78g(0.011mol)，甲基肼基磷酰二氯代替實施例1中的2.83g(0.011mol)氮 芥磷酰二氯，其它操作同實施例1，得到化合物（4)，收率72%。1H NMR (300MHz，⑶Cl3) δ 7. 71-7. 59 (m, 2H), 7. 22 (s, 1H), 5. 00 (d, / = 6. 2Hz, 1H), 3. 61(m, 1H), 2. 47 (s, 3H), 2.03 (m, 1H), 2.01 (s, 3H), 2.0 (br, 2H), 1.91 (m, 1H), 1.40 (s, 6H)。
[0016] 實施例5 丹參酮IIA衍生物的體外抗腫瘤活性 化合物體外抗腫瘤活性用IC5tl值評定：將細(xì)胞按一定密度接種于含10體積％小牛血 清的RPMI1640培養(yǎng)基（內(nèi)含適量青霉素、鏈霉素合谷氨酰胺)的96孔板中，5wt%C02,37°C條 件下培養(yǎng)24小時后，換用不同濃度授試藥物(用PBS配制成1 μ g/mL工作液，使用時按需要 用培養(yǎng)基稀釋）的新鮮培養(yǎng)基，不同稀釋濃度的陽性對照藥順鉑藥液為陽性對照，每組設(shè)6 個平行孔，繼續(xù)培養(yǎng)48小時。取出96孔培養(yǎng)板，每孔加入20 μ L 5mg/mL的MTT，繼續(xù)培養(yǎng) 4小時。取出培養(yǎng)板，倒出培養(yǎng)基，每孔加入200 μ L DMS0,平板搖床震搖5分鐘，待結(jié)晶溶 解后，置酶聯(lián)檢測儀，于570nm波長下測定各孔的OD值。按下列公式求出生長抑制率，并用 Bliss法求出半數(shù)抑制濃度IC5Q。
[0017] 抑制率=(1-用藥組平均OD值/對照組平均OD值）X 100%。
[0018] 丹參酮IIA衍生物對A549 (人肺腺癌）腫瘤細(xì)胞株的抑制活性見表1。
[0019] 實驗結(jié)果表明，與丹參酮IIA相比，本發(fā)明的丹參酮IIA衍生物對人肺癌細(xì)胞 (A549)均有顯著的抑制作用。
[0020]
實施例6 丹參酮IIA衍生物對小鼠肝癌22 (H22)抑制活性 一、材料與方法 1.動物：ICR種小鼠，雌雄各半，體重18-22g，由河北省實驗動物中心提供。
[0021] 2.腫瘤細(xì)胞株：肝癌22 (H22)，由河北省實驗動物中心提供。
[0022] 3.藥品：環(huán)磷酰胺，由上海華聯(lián)制藥有限公司提供。
[0023] 4.接種方法：無菌抽取接種H22瘤種8天的小鼠的腹水，以生理鹽水稀釋10倍， 0. 02%伊紅（臺盼藍(lán))染色，滴加到細(xì)胞計數(shù)板上計數(shù)后，調(diào)細(xì)胞濃度至2. 5*107個/mL，于小 鼠后肢腋窩下接種，每只〇. 2mL。
[0024] 5.給藥方法：按體重隨機分組，將小鼠分成腫瘤陰性對照組，環(huán)磷酰胺陽性對照 組20mg/Kg. d，丹參酮IIA衍生物和丹參酮IIA20mg/Kg. d，每組各10只，除環(huán)磷酰胺組外， 其余每組在接種前一個星期開始經(jīng)口灌胃給藥，陰性對照組給予一定劑量的生理鹽水。接 種后次日各組均給藥，連續(xù)9天，第10天處死小鼠后摘瘤稱重，計算抑制率。
[0025] 二、結(jié)果 丹參酮IIA衍生物對小鼠肝癌22(H22)有明顯抑制作用（表1)。觀察給藥前后小鼠的 體重變化，本發(fā)明的丹參酮IIA衍生物毒性明顯低于環(huán)磷酰胺，抑瘤率與丹參酮IIA相比， 有顯著差異（表2)。
[0026]
【主權(quán)項】
1. 一種丹參酮IIA衍生物，其為具有如下式（I)的結(jié)構(gòu)，式中，&和1?2各自獨立的選自H、烴基、被鹵素、磺酸酯基、羥基、氨基、羧基和烷氧基取 代的烴基、氨基、取代氨基、NOJ1-Cltl?；?、雜環(huán)、各種芳香環(huán)。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所示的式（I)丹參酮IIA衍生物，其特征在于：所述式（I)化合物優(yōu) 選自下式。3. 權(quán)利要求1所示的式（I)丹參酮IIA衍生物的制備方法，該方法包括以下步驟：式中，&和1?2各自獨立的選自H、烴基、被鹵素、磺酸酯基、羥基、氨基、羧基和烷氧基取 代的烴基、氨基、取代氨基、NOJ1-Cltl?；?、雜環(huán)、各種芳香環(huán)。4. 根據(jù)權(quán)利1所述的式（I)的丹參酮IIA衍生物在制備抗癌藥物中的應(yīng)用。
【專利摘要】本發(fā)明公開一種丹參酮IIA衍生物。本發(fā)明的丹參酮IIA衍生物的結(jié)構(gòu)如式（I）所示。式中，R1和R2各自獨立的選自H、烴基、被鹵素、磺酸酯基、羥基、氨基、羧基和烷氧基取代的烴基、氨基、取代氨基、NO、C1-C10?；㈦s環(huán)、各種芳香環(huán)。本發(fā)明還涉及該類化合物的制備方法及在腫瘤治療中的用途。
【IPC分類】A61P35/00, C07J73/00, A61K31/665
【公開號】CN104961794
【申請?zhí)枴緾N201510344177
【發(fā)明人】張寶華, 史蘭香, 劉斯婕, 郭瑞霞
【申請人】石家莊學(xué)院
【公開日】2015年10月7日
【申請日】2015年6月22日