一種含有聚乙二醇基的丹參酮iia衍生物及其制備和應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及丹參酮IIA的衍生物及其在制藥中的應(yīng)用，屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 丹參為唇形科植物丹參的根和莖，具有祛瘀止痛，活血通經(jīng)、清心除煩的功效，臨 床上主要用于心腦血管疾病。丹參的化學(xué)成分分為水溶性酚酸和脂溶性二萜醌。丹參酮IIA 屬于丹參的脂溶性成分之一，其藥理作用廣泛，臨床可用于多種疾病的治療。但是，丹參酮 IIA不溶于水，在體內(nèi)的生物利用度低，一直以來沒有一種直接以丹參酮IIA做成的藥物制 劑用于臨床，限制了它的應(yīng)用。
[0003] 聚乙二醇具有良好的水溶性，是常用的藥用輔料。本發(fā)明用無毒無害的聚乙二醇 與丹參酮IIA進行拼接，增強了丹參酮IIA的水溶性，提高丹參酮IIA的生物利用度。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的在于提供一種含有聚乙二醇基的丹參酮IIA衍生物，其具有作用于 心腦血管疾病的作用。
[0005] 本發(fā)明的另一目的在于提供上述含有聚乙二醇基的丹參酮IIA衍生物的制備方 法。
[0006] 本發(fā)明的再一目的在于提供上述含有聚乙二醇基的丹參酮IIA衍生物的用途。
[0007] 以下對本發(fā)明進行詳細描述。
[0008] 本發(fā)明提供以下式（I)和式（II)的含有聚乙二醇基的丹參酮IIA衍生物，結(jié)構(gòu)如 下式所示：
式中，n為0-15的整數(shù)，優(yōu)選0-5的整數(shù)。
[0009] 本發(fā)明通式（I)化合物包括其立體異構(gòu)體和互變異構(gòu)體。
[0010] 本發(fā)明還提供了上述式（I)和式（II)化合物的制備方法，步驟包括：
本發(fā)明的含有聚乙二醇基的丹參酮IIA衍生物有顯著的治療心腦血管疾病作用和抗 癌活性，還具有抗氧化、抗炎癥、抗過敏、抗真菌及保肝護肝等的作用。
[0011] 通過以下實施例進一步舉例說明本發(fā)明，但應(yīng)注意本發(fā)明的范圍并不受這些實施 例的任何限制。
【具體實施方式】
[0012] 實施例1 乙二醇基雙丹參酮IIA(1)的制備 化合物（1)的結(jié)構(gòu)如下所示：
丹參酮IIA(2. 94g，10mmol)溶于15mL重蒸的DMF中，冰浴冷卻后，滴加P0C13(2. 28g，15mmol),撤去冰浴，室溫反應(yīng)過夜，反應(yīng)完畢，倒入30mL冰水中，用乙酸乙 酯15mLx3萃取，用水15mLx2、NaHC03溶液15mLx2、飽和食鹽水15mLx2洗滌，無水Na2S04 干燥，過濾，濃縮，硅膠柱層析純化，得16-甲?；⑼狪IA，收率45%。
[0013] 16-甲酰基丹參酮IIA(3. 22g，10mmol)溶于25mL甲醇與12mL二氯甲烷混合溶劑 中，冰浴冷卻下，加入NaBH4(0. 76g，20mmol)，反應(yīng)20分鐘，慢慢加入12mL水，整除甲醇和 二氯甲烷，水層用乙酸乙酯10mLx3萃取，無水Na2S04干燥，過濾，濃縮，硅膠柱層析純化，得 16-羥甲基丹參酮IIA，收率85%。
[0014] 16-羥甲基丹參酮IIA(3. 24g, 10mmol)溶于20mL無水二氯甲烷中，加入乙二醇 (0. 37g，6mmol)，然后在冰鹽浴冷卻下，加入5滴BF3 ?Et2 0,片刻后撤去冰浴，室溫攪拌 24h。用薄板色譜檢測反應(yīng)進程。待反應(yīng)基本完成，反應(yīng)液依次用15mLx2飽和碳酸氫 鈉、15mLx2水、15mLx2飽和氯化鈉溶液洗滌至中性，無水Na2S04干燥，過濾，減壓蒸去溶 劑，殘余油狀物在硅膠柱上純化，得到化合物（1)，產(chǎn)率57%。4NMR(400MHz，⑶Cl3)S: 7.60(d，/=8.1Hz，2H)，7.46 (d，方8.1Hz，2H)，5.07 (s，4H), 3.68 (t, /= 6.2Hz，4H)， 3. 05 (m，4H)，2. 20 (s，6H)，1. 77-1. 79 (m，4H)，1. 63-1. 66 (m，4H)，1. 29 (s，12H)。
[0015] 實施例2 一縮二乙二醇基雙丹參酮IIA(2)的制備 化合物（2)的結(jié)構(gòu)如下所示：
16-羥甲基丹參酮IIA(3. 24g，10mmol)溶于20mL無水二氯甲烷中，加入一 縮二乙二醇（0. 63g，6mmol)，其他操作同實施例1，得到化合物（2)，產(chǎn)率43%。 :HNMR(400MHz,CDC13) 8 ：7. 60(d, /= 8.1Hz, 2H) , 7. 46 (d, /=8. 1Hz, 2H), 5. 07(s, 4H), 3. 62(t, /=6. 2Hz, 8H), 3. 05 (m, 4H), 2. 20 (s, 6H), 1. 77-1. 79 (m, 4H), 1. 63-1. 66(m, 4H), 1. 29(s, 12H)。
[0016] 實施例3 二縮三乙二醇基雙丹參酮IIA(3)的制備 化合物（3)的結(jié)構(gòu)如下所示：
16-羥甲基丹參酮IIA(3. 24g, 10mmol)溶于20mL無水二氯甲烷中，加入二 縮三乙二醇（0.90g，6mmol)，其他操作同實施例1，得到化合物（3)，產(chǎn)率40%。4 NMR(400MHz，CDC13)S:7.60(d，/=8.1Hz，2H)，7.46(d，方8.1Hz，2H)，5.07(s，4H)， 3.61(t，/= 6. 2Hz，12H), 3.05 (m，4H), 2.20 (s，6H), 1.77-1. 79 (m，4H)， 1. 63-1. 66(m，4H)，1. 29(s，12H)。
[0017] 實施例4 三縮四乙二醇基雙丹參酮IIA(4)的制備 化合物（4)的結(jié)構(gòu)如下所示：
16-羥甲基丹參酮IIA(3. 24g，10mmol)溶于20mL無水二氯甲烷中，加入三 縮四乙二醇（1.44g，7. 5mmol)，其他操作同實施例1，得到化合物（4)，產(chǎn)率31%。 :HNMR(400MHz,CDC13) 8 ：7. 60(d, /= 8.1Hz, 2H) , 7. 46 (d, / = 8.lHz,2H), 5. 07(s, 4H), 3. 62(t, / = 6. 2Hz, 16H), 3. 04(m, 4H), 2. 20 (s, 6H), 1. 77-1. 79 (m, 4H), 1. 63-1. 66(m, 4H), 1. 29(s, 12H)。
[0018] 實施例5 一縮二乙二醇基丹參酮IIA(5)的制備 化合物（5)的結(jié)構(gòu)如下所示：
16-輕甲基丹參酮IIA(3. 24g, 10mmol)溶于20mL無水二氯甲燒中，加入一縮二乙 二醇（1.06g，10mmol)，其他操作同實施例1，得到化合物（5)，產(chǎn)率56%。蟲NMR(400 MHz，CDCl3)S:7.60(d，/=8.1Hz，lH)，7.46(d，^8.1Hz，lH)，5.07(s，2H)，3.79(t， /=6.2Hz，2H)，3.61(t, /= 6. 2Hz，6H), 3.04 (m, 2H), 2.20 (s，3H), 2.00 (br，lH)， 1. 77-1. 79 (m，2H)，1. 63-1. 66 (m，2H)，1. 29 (s，6H)。
[0019] 實施例6 二縮三乙二醇基丹參酮IIA(6)的制備 化合物（6)的結(jié)構(gòu)如下所示：
16-羥甲基丹參酮IIA(3. 24g，10mmol)溶于20mL無水二氯甲烷中，加入二縮三乙 二醇（1.50g，10mmol)，其他操作同實施例1，得到化合物（6)，產(chǎn)率46%。巾NMR(400 MHz，CDC13)S:7.60(d，/=8.1Hz，lH)，7.46(d，方8.1Hz，lH)，5.07(s，2H), 3.77(t， /=6.2Hz，2H)，3.61(t, /= 6. 2Hz，8H), 3.04 (m, 2H), 2.20 (s，3H), 2.00 (br，lH)， 1. 77-1. 79 (m，2H)，1. 63-1. 66 (m，2H)，1. 29 (s，6H)。
[0020] 實施例7 含有聚乙二醇基的丹參酮IIA衍生物對糖尿病大鼠的治療研究 1.材料 1. 1實驗動物 SPF級SD大鼠，由東南大學(xué)醫(yī)學(xué)院動物實驗中心提供。
[0021] 1.2主要試劑 丹參酮IIA磺酸鈉注射液(諾新康)，上海第一生化藥業(yè)有限公司； 甘油三酯測定試劑盒，浙江東鷗生物工程有限公司； 總膽固醇測定試劑盒，上海榮盛生物技術(shù)有限公司； 鏈脲佐菌素（STZ)，Sigma公司。
[0022] 2實驗方法 2. 1糖尿病大鼠模型的建立 正常SPF級雄性SD大鼠86只，體重200-250g，隨機分為正常對照組（C0N組，6只）和 實驗組（DM組，80只）。禁食18小時后，實驗組腹腔注射1%STZ(60mg*Kg3冰冷檸檬酸緩 沖液（0.lmol?L\pH4. 2,誘導(dǎo)糖尿病模型，正常對照組注射等量的檸檬酸緩沖液。72小 時后測定空腹尾靜脈血糖>12mmol?L\持續(xù)三天，確認糖尿病模型建立成功，并給予實驗 組尚糖尚脂飲食。
[0023] 2. 2丹參酮IIA治療組大鼠模型建立 將建模成功后的實驗組隨機分為糖尿病對照組（20只）和丹參酮IIA衍生物治療組 (TSND組，60只），自建模成功后第二天起，丹參酮IIA治療組大鼠每天分別肌肉注射丹參酮 IIA衍生物水溶液（lmg?Kg:)，其它兩組注射等量聚乙二醇水溶液。
[0024] 2. 3大鼠血膽固醇、甘油三酯含量的測定 大鼠斷尾，取尾靜脈血2mL，肝素抗凝。3500rpm/min離心10分鐘，得到上層透亮血清lmL，按照試劑盒說明書測定血膽固醇、甘油三酯含量。
[0025] 3 結(jié)果 3. 1大鼠實驗30天后體重及血糖變化 大鼠實驗30天后體重及血糖變化如表1所示。正常對照組，自由飲食30天后，體重增 大、大鼠毛色光潔柔順。糖尿病對照組，自由飲食30天后，體重較實驗前明顯減輕，大鼠飲 水量及尿量均明顯增加。丹參酮IIA衍生物治療組，自由飲食30天后，體重和血糖較實驗 前均無明顯變化。說明，丹參酮IIA衍生物延緩了糖尿病大鼠的病程進展。
[0026]
3.2大鼠實驗30天后血膽固醇及甘油三酯含量變化 大鼠實驗30天后，血膽固醇及甘油三酯含量變化如表2所示。正常飼養(yǎng)30天后，DM3Qd 組大鼠與C0N3M組相比，血膽固醇含量明顯增高（P〈0. 05)，而經(jīng)過丹參酮IIA衍生物治療30 天后，大鼠血膽固醇含量與DM3Qd組相比，明顯下降。DM3Qd組大鼠與CON3Qd組相比，血甘油三 酯含量明顯增高（P〈〇. 05)，而經(jīng)過丹參酮IIA衍生物治療30天后，大鼠血甘油三酯含量與 DM3(]d組相比，明顯下降。
[0027]
【主權(quán)項】
1. 一種含有聚乙二醇基的丹參酮IIA衍生物，包括其立體異構(gòu)體和互變異構(gòu)體，如式 (I)和式（II)所示：式中，n為0-15的整數(shù)。2. 根據(jù)權(quán)利1所述式（I)和式（II)的含有聚乙二醇基的丹參酮IIA衍生物，其特征在 于，n為0-15的整數(shù)，更優(yōu)選0-5的整數(shù)。3. 根據(jù)權(quán)利1所述的式（I)和式（II)的含有聚乙二醇基的丹參酮IIA衍生物，其特征 在于：所述式（I)和式（II)化合物的具體實例包括： 乙二醇基雙丹參酮IIA(1); 一縮二乙二醇基雙丹參酮IIA(2); 二縮三乙二醇基雙丹參酮IIA(3); 三縮四乙二醇基雙丹參酮IIA(4); 一縮二乙二醇基丹參酮IIA(5); 二縮三乙二醇基丹參酮IIA(6)。4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述含有聚乙二醇基的丹參酮IIA衍生物，其制備方法包括以下步 驟：式中，n為0-150的整數(shù)。5.根據(jù)權(quán)利1所述的式（I)和式（II)的含有聚乙二醇基的丹參酮IIA衍生物，其在治 療心腦血管疾病中的應(yīng)用。
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種含有聚乙二醇基的丹參酮IIA衍生物及其制備方法和應(yīng)用。本發(fā)明的有益效果在于，提供了一種新的丹參酮衍生物，其可用于心腦血管疾病的治療；本發(fā)明的含有聚乙二醇基的丹參酮IIA衍生物具備較好的水溶性，有利于進入血腦屏障，增加療效，大大提高丹參酮IIA的生物利用度。
【IPC分類】C07J73/00, A61P9/00
【公開號】CN105037484
【申請?zhí)枴緾N201510344165
【發(fā)明人】張寶華, 史蘭香, 劉斯婕, 郭瑞霞
【申請人】石家莊學(xué)院
【公開日】2015年11月11日
【申請日】2015年6月22日