核酸擴(kuò)增裝置和溫度調(diào)節(jié)功能的異常檢測方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及核酸擴(kuò)增裝置和溫度調(diào)節(jié)功能的異常檢測方法。
【背景技術(shù)】
[0002]作為對生物體來源的檢查用材料中含有的核酸進(jìn)行檢查時使用的核酸擴(kuò)增技術(shù)，有例如使用聚合酶鏈反應(yīng)(Polymerase Chain React1n，以下稱為PCR)法。關(guān)于PCR法，通過對混合有檢查用材料與試劑的反應(yīng)液的溫度按照預(yù)定的條件進(jìn)行控制，能夠選擇性擴(kuò)增所期望的堿基序列。
[0003]另外，作為其他的核酸擴(kuò)增法，還開發(fā)了 NASBA(Nucleic Acid Sequence-BasedAmplificat1n,依賴核酸序列的擴(kuò)增技術(shù))法、LANP(Loop-Mediated IsothermalAmplificat1n，環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增)法那樣的將反應(yīng)液的溫度控制為一定、實(shí)現(xiàn)核酸擴(kuò)增的方法。
[0004]這樣的核酸擴(kuò)增方法在例如病毒性感染的診斷等臨床檢查領(lǐng)域中也被積極地采用，期望通過自動化實(shí)現(xiàn)檢查的效率化、省力化、高精度化。
[0005]日本特開2010-104382號公報記載了對多個小瓶一起進(jìn)行目標(biāo)核酸的擴(kuò)增的裝置。該日本特開2010-104382號公報中記載的裝置中，為了對含有混合有試劑和檢查用材料的液體反應(yīng)混合物的多個小瓶進(jìn)行擴(kuò)增，將含有該混合物的小瓶僅以微孔板可容納的數(shù)量設(shè)置于可進(jìn)行同時設(shè)置的一體化的區(qū)塊，按照用于使目標(biāo)核酸特異性擴(kuò)增的單一方案，一邊監(jiān)測設(shè)置于區(qū)塊的溫度傳感器的測定值，一邊對區(qū)塊的溫度進(jìn)行控制。根據(jù)該現(xiàn)有技術(shù)，能夠?qū)ν环桨敢M(jìn)行分析的多個檢查用材料一并處理。
[0006]現(xiàn)有技術(shù)文獻(xiàn)
[0007]專利文獻(xiàn)
[0008]專利文獻(xiàn)1:日本特開2010-104382號

【發(fā)明內(nèi)容】

[0009]發(fā)明要解決的問題
[0010]在核酸擴(kuò)增技術(shù)中，根據(jù)擴(kuò)增對象的堿基序列的不同，使用的試劑、溫度、時間等條件(方案)不同。因此，在對擴(kuò)增對象的堿基序列不同的多種檢查用材料進(jìn)行并行處理時，需要對各種檢查用材料的方案中規(guī)定的溫度及其時間分別進(jìn)行設(shè)定。
[0011]然而，上述的日本特開2010-104382號公報中記載的自動分析裝置中，各培養(yǎng)器被控制為一定溫度，因此為了處理多個方案而需要多個培養(yǎng)器，裝置結(jié)構(gòu)和反應(yīng)容器的移動順序變得復(fù)雜。
[0012]本發(fā)明是鑒于上述內(nèi)容而做出，目的在于提供一種核酸擴(kuò)增裝置，其特征在于能夠?qū)嵤┮訮CR法、恒溫?cái)U(kuò)增法為代表的核酸分析方法，特別是有效率地檢測溫度調(diào)節(jié)功能的異常。
[0013]解決問題的手段
[0014]為了達(dá)到上述目的，本發(fā)明采用權(quán)利要求書記載的構(gòu)成。作為一個具體例子，在對混合有檢查用材料與試劑的反應(yīng)液的核酸進(jìn)行擴(kuò)增的核酸擴(kuò)增裝置中，包括:設(shè)有多個調(diào)溫區(qū)塊的圓盤傳送帶，前述多個調(diào)溫區(qū)塊分別保持容納有反應(yīng)液的至少I個反應(yīng)容器；設(shè)置于前述圓盤傳送帶的溫度調(diào)節(jié)裝置；分別設(shè)置于前述多個調(diào)溫區(qū)塊、對前述反應(yīng)液的溫度進(jìn)行調(diào)整的溫度調(diào)節(jié)裝置；對核酸擴(kuò)增裝置內(nèi)部的氣氛溫度進(jìn)行調(diào)整的溫度調(diào)節(jié)裝置；根據(jù)溫度的測定結(jié)果進(jìn)行故障檢測的控制裝置。
[0015]發(fā)明的效果
[0016]本發(fā)明的核酸擴(kuò)增裝置使并列處理相同或不同的分析項(xiàng)目成為可能，另外，能夠容易地實(shí)現(xiàn)溫度調(diào)節(jié)裝置的異常檢測。也就是說，能夠?qū)⒑怂釘U(kuò)增裝置的分析失敗防患于未然，并且有效率地進(jìn)行裝置的維護(hù)。
【附圖說明】
[0017]圖1核酸擴(kuò)增裝置立體圖
[0018]圖2核酸擴(kuò)增裝置側(cè)面剖視圖
[0019]圖3核酸擴(kuò)增裝置側(cè)面剖視圖
[0020]圖4核酸擴(kuò)增裝置平面圖
[0021]圖5核酸擴(kuò)增裝置側(cè)面剖視圖
[0022]圖6故障判定
[0023]圖7校準(zhǔn)方法
【具體實(shí)施方式】
[0024]以下，采用附圖對實(shí)施例進(jìn)行說明。
[0025]實(shí)施例1
[0026]圖1為示意性示出本實(shí)施方式涉及的核酸擴(kuò)增裝置100的整體構(gòu)成的圖。圖1中，在核酸擴(kuò)增裝置100中包括:容納含有成為擴(kuò)增處理對象的核酸的檢查用材料的多個反應(yīng)容器101、保持反應(yīng)容器的調(diào)溫區(qū)塊102、對調(diào)溫區(qū)塊的溫度進(jìn)行監(jiān)測的溫度傳感器103、對調(diào)溫區(qū)塊的溫度進(jìn)行調(diào)整的溫度調(diào)節(jié)裝置104、對多個調(diào)溫區(qū)塊進(jìn)行固定的圓盤傳送帶105、圓盤傳送帶的溫度調(diào)節(jié)裝置106、圓盤傳送帶的溫度傳感器107、對反應(yīng)容器內(nèi)包含的檢查用材料進(jìn)行光學(xué)測定的檢測器108、圓盤傳送帶的旋轉(zhuǎn)機(jī)構(gòu)109、將圓盤傳送帶與旋轉(zhuǎn)機(jī)構(gòu)連接的旋轉(zhuǎn)軸110和控制裝置122，控制裝置122具有鍵盤、鼠標(biāo)等輸入裝置120、液晶監(jiān)測器等顯示裝置121且對核酸擴(kuò)增裝置100整體的動作進(jìn)行控制。另外，還包括覆蓋圓盤傳送帶和檢測器的覆蓋物、用于對由覆蓋物圍起來的區(qū)域的氣氛溫度進(jìn)行測定的溫度傳感器(圖1中省略)。
[0027]接下來，用圖1 (立體圖)和圖2 (側(cè)面剖視圖)說明核酸擴(kuò)增裝置的詳細(xì)情況。調(diào)溫區(qū)塊在圓盤傳送帶的中心軸周圍沿著外周配置I個以上(例如本實(shí)施方式中為12個)，圓盤傳送帶通過組入有步進(jìn)電機(jī)的旋轉(zhuǎn)機(jī)構(gòu)而被驅(qū)動旋轉(zhuǎn)時，安裝于調(diào)溫區(qū)塊的反應(yīng)容器的運(yùn)動曲線描繪出相同的圓。檢測器設(shè)有I個以上(例如本實(shí)施方式中為2個)，沿著圓盤傳送帶的外周等間隔地配置。另外，檢測器配置于反應(yīng)容器的下方。調(diào)溫區(qū)塊中，露出反應(yīng)容器的檢測窗口設(shè)置于底表面和外周方向的側(cè)表面，反應(yīng)容器一邊通過檢測器一邊進(jìn)行光學(xué)測定。這時可以同時使檢測器通過，也可以在檢測器上暫時停止。另外，檢測窗口可以根據(jù)檢測器的結(jié)構(gòu)適當(dāng)設(shè)定于底表面、上表面等。這里，檢測器有多個時，相互獨(dú)立地進(jìn)行反應(yīng)容器的反應(yīng)液的檢測或測定。
[0028]圓盤傳送帶由鋁、銅等導(dǎo)熱性優(yōu)異的材質(zhì)形成，通過溫度調(diào)節(jié)裝置將圓盤傳送帶整體控制為均勻的溫度。溫度調(diào)節(jié)裝置使用硅橡膠加熱器、膜加熱器等，根據(jù)核酸擴(kuò)增的方案所需的目標(biāo)溫度，也可以制成組合有帕爾貼元件、冷卻散熱片和DC風(fēng)扇的以更良好的精度控制加熱和冷卻的結(jié)構(gòu)。在使用加熱器時，為了抑制過度的溫度上升，可以在圓盤傳送帶中組合放熱片、DC風(fēng)扇。
[0029]另外，作為調(diào)溫區(qū)塊的溫度調(diào)節(jié)裝置的帕爾貼元件將吸熱面或放熱面與圓盤傳送帶和各個調(diào)溫區(qū)塊接觸固定。例如，通常的PCR反應(yīng)中使調(diào)溫區(qū)塊的溫度在50°C?95°C的范圍內(nèi)變化，因此通過加熱器將圓盤傳送帶的溫度維持在50°C，同時使作為調(diào)溫區(qū)塊的溫度調(diào)節(jié)裝置的帕爾貼元件運(yùn)作從而能夠使溫度快速變動。圓盤傳送帶的溫度和調(diào)溫區(qū)塊的溫度可以通過各自的溫度傳感器監(jiān)測。溫度傳感器可以使用熱敏電阻、熱電偶、測溫電阻等。為了更正確地測定調(diào)溫區(qū)塊的溫度，可以使溫度傳感器向周圍氣體的暴露為最小限度，具體而言，可以插入到設(shè)置于調(diào)溫區(qū)塊的孔中，為了與調(diào)溫區(qū)塊良好地密合，用導(dǎo)熱油、導(dǎo)熱性優(yōu)異的固定用液體硅橡膠等使接觸良好，在向周圍氣體暴露的表面使用具有絕熱性的固定用液體硅橡膠等進(jìn)行固定。另外，關(guān)于通過配線的導(dǎo)熱，使配線的長度最短，并通過用絕熱部件被覆等而使導(dǎo)熱最小，從而有助于溫度控制的精度提高。
[0030]另外，可以為圓盤傳送帶設(shè)置I個溫度傳感器。圓盤傳送帶由導(dǎo)熱性優(yōu)異的部件構(gòu)成，圓盤傳送帶與作為溫度調(diào)節(jié)裝置的加熱器之間的距離在沿著圓盤傳送帶的外周的角度方向上為一定，因此由溫度傳感器測定的溫度可以作為圓盤傳送帶的溫度的代表值處理。例如當(dāng)圓盤傳送帶的直徑設(shè)為140_時，