菌株、其應(yīng)用與生物肥料的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001 ] 本發(fā)明涉及生物肥料技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及菌株、其應(yīng)用與生物肥料。
【背景技術(shù)】
[0002] 水稻稻粒黑粉病和玉米黑粉病等作物黑粉病在我國(guó)的大部分地區(qū)都有發(fā)生。水 稻稻粒黑粉病病原物為狼尾草腥黑粉菌，屬擔(dān)子菌、黑粉菌目。冬孢子球形，黑色，大小為 (25~32)X(23~30)ym，表面密布無(wú)色或淡色的齒狀突起，在顯微鏡下呈網(wǎng)狀，略彎曲， 基部寬2~3ym，高2. 5~4ym，冬孢子經(jīng)5個(gè)月的休眠期后，在充足的水濕、溫度在30°C 左右以及一定光照條件下即可萌發(fā)；而擔(dān)孢子萌芽生菌絲或次生小孢子，呈香蕉狀或針狀， 大小為（8. 1 ~10. 3)X(1. 3 ~2. 5)ym和（10. 0 ~18. 5)X(1. 3 ~2. 5)ym，擔(dān)孢子在pH 值5~7的PSA培養(yǎng)基中，28°C經(jīng)15天左右，反復(fù)芽殖形成酵母狀菌落，表面粘稠，初期白 色后變奶酪色，后期革質(zhì)化，表面產(chǎn)生輻射狀皺褶。水稻黑粉病病菌在水稻抽穗至乳熟期侵 染，開花至乳熟期間如連續(xù)陰雨、大氣濕度高與溫度25~30°C時(shí)，對(duì)病菌侵染有利。若開穎 時(shí)間長(zhǎng)，穎殼張開角度大，柱頭外露率高的制種田母本品種發(fā)病重；氮肥施用過(guò)多，更有利 于發(fā)病。
[0003] 水稻發(fā)生黑粉病后，穗部病粒少則數(shù)粒，多則十?dāng)?shù)粒至數(shù)十粒，病谷米粒全部或部 分被破壞，變成青黑色粉末狀物即病原菌的冬孢子。自20世紀(jì)70年代中期推廣雜交稻以 來(lái)，發(fā)病加劇，一般年份病粒率5 %~20 %，重病年可高達(dá)40 %~60 %，嚴(yán)重影響制種的產(chǎn) 量和種子品質(zhì)。
[0004] 玉米黑粉菌又名玉蜀黍黑粉菌、玉米黑霉。病原菌為真菌，是由玉米黑粉菌所引起 的一種局部侵染性病害。孢子堆的小大、形狀不定，多呈瘤狀，長(zhǎng)或直徑為3~15cm，初期外 面有一層白色膜，往往由寄生組織形成，有時(shí)還帶黃綠色或紫紅色彩，后漸變灰白至灰色， 破裂后散出大量黑色粉末，即冬孢子。玉米黑粉菌在中國(guó)報(bào)道已有60多年的歷史，但沒(méi)有 引起足夠的重視。近兩年因天氣干旱，雨熱反常，玉米黑粉菌的發(fā)生具有明顯上升趨勢(shì)，常 年發(fā)生率在5%~10%，對(duì)于我國(guó)的玉米生產(chǎn)區(qū)，尤其對(duì)陜西、華北、東北地區(qū)玉米生產(chǎn)造 成了極大的損失。據(jù)不完全統(tǒng)計(jì)，2000年全國(guó)玉米發(fā)病面積在180萬(wàn)hm2,絕收的不低于3 萬(wàn)hm2。一般病田病株率達(dá)20 %~30 %，平均減產(chǎn)10 %~30 %，有的地塊發(fā)病率高達(dá)85 %， 如何控制防治玉米黑粉病是一個(gè)極具現(xiàn)實(shí)意義的問(wèn)題。
[0005] 現(xiàn)在防治作物黑粉病的方法主要有以下幾點(diǎn)：選用抗病品種；藥劑防治，噴灑多 菌靈、三唑酮等藥物。但是隨著人們生活水平的提高，對(duì)健康食品的追求日益強(qiáng)烈。綠色有 機(jī)食品的種植面積越來(lái)越大，但綠色有機(jī)作物禁止使用高毒高殘留的化學(xué)農(nóng)藥。
[0006] 申請(qǐng)?zhí)枮?01210463592的中國(guó)專利公開了一種防治植物病蟲害的復(fù)合微生物液 體菌肥及其制備方法，該專利主要是以乳酸菌和中藥提取物為主的微生物液體菌肥，此種 菌肥具有一定的防治作物病害與蟲害的功效，但該產(chǎn)品不針對(duì)作物黑粉病。而其它可以防 治稻粒黑粉病的均為化學(xué)農(nóng)藥，具有一定的毒性，綠色有機(jī)水稻無(wú)法使用?，F(xiàn)在研究領(lǐng)域或 市場(chǎng)還沒(méi)有一種針對(duì)黑粉病的生物菌制劑或功能性肥料。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007] 本發(fā)明解決的技術(shù)問(wèn)題在于提供能夠預(yù)防抵抗黑粉病且促進(jìn)作物生長(zhǎng)的生物肥 料。
[0008] 有鑒于此，本申請(qǐng)?zhí)峁┝艘环N菌株，其保藏編號(hào)為CGMCCNo.10570。
[0009] 本申請(qǐng)還提供了所述的菌株在預(yù)防抵抗農(nóng)作物黑粉病上的應(yīng)用。
[0010] 本申請(qǐng)還提供了 一種生物肥料，包括：上述方案所述菌株的孢子粉與肥料。
[0011] 優(yōu)選的，所述肥料包括可溶性氨基酸肥、甲殼素肥、氮磷鉀肥、可溶性中量元素肥 與微量兀素肥中的一種或多種。
[0012] 優(yōu)選的，所述孢子粉為1~5重量份，所述肥料包括500~800重量份的可溶性氨 基酸肥、30~60重量份的甲殼素肥、0~400重量份的氮磷鉀肥、50~200重量份的可溶性 中量兀素肥與30~100重量份的微量兀素肥中的一種或多種。
[0013] 優(yōu)選的，所述可溶性中量元素肥包括可溶性硅肥、可溶性鈣肥與可溶性鎂肥中的 一種或多種，所述微量元素肥包括銅肥、鋅肥、亞鐵肥、錳肥與鉬肥中的一種或多種。
[0014] 優(yōu)選的，所述孢子粉的數(shù)量為40~60億個(gè)/g。
[0015] 優(yōu)選的，所述孢子粉的制備方法為：
[0016] 將所述的菌株進(jìn)行固體培養(yǎng)，然后依次經(jīng)過(guò)浸泡、刮下與吸附，得到孢子粉。
[0017] 優(yōu)選的，所述固體培養(yǎng)的培養(yǎng)液包括：1~3重量份的可溶性淀粉、0. 1~0. 2重量 份的硝酸鉀、〇. 03~0. 06重量份的磷酸氫二鉀、0. 03~0. 08重量份的七水硫酸鎂、0. 03~ 0. 08重量份的氯化鈉、0. 001~0. 005重量份的硫酸亞鐵與1. 5~2. 0重量份的瓊脂粉。
[0018] 優(yōu)選的，所述固體培養(yǎng)的培養(yǎng)液的pH為7. 2~7. 4。
[0019] 本申請(qǐng)?zhí)峁┝吮２鼐幪?hào)為CGMCCNo.10570的菌株。本申請(qǐng)還提供了一種生物肥 料，其包括所述菌株的孢子粉與肥料，所述生物肥料中由于含有活性微生物菌的孢子粉，其 具有防治黑粉病生物藥的功效且不具有毒性，同時(shí)生物肥料中還包括肥料，肥料能夠提供 作物生長(zhǎng)所必需的營(yíng)養(yǎng)，因此，本申請(qǐng)的生物肥料兼具防止黑粉病與促進(jìn)植物生長(zhǎng)的作用。
[0020] 生物保藏說(shuō)明
[0021] HYFX-001 :分類命名：圈卷產(chǎn)色鏈霉菌淡色變種（Streptomyces ansochromogenes var.pallens)于2015年02月12日保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中 心（CGMCC)，保藏中心地址為北京市朝陽(yáng)區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào)中國(guó)科學(xué)院微生物研究所， 保藏編號(hào)為CGMCCNo.10570。
【附圖說(shuō)明】
[0022] 圖1為市售的具有拮抗黑粉病菌的菌種的拮抗試驗(yàn)照片；
[0023] 圖2為保藏編號(hào)為CGMCCNo.10570的菌株的拮抗試驗(yàn)照片。
【具體實(shí)施方式】
[0024] 為了進(jìn)一步理解本發(fā)明，下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明優(yōu)選實(shí)施方案進(jìn)行描述，但是 應(yīng)當(dāng)理解，這些描述只是為進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明的特征和優(yōu)點(diǎn)，而不是對(duì)本發(fā)明權(quán)利要求的 限制。
[0025] 本發(fā)明實(shí)施例公開了一種保藏編號(hào)為CGMCCNo. 10570的菌株。
[0026] 本申請(qǐng)所述菌株名稱為圈卷產(chǎn)色鏈霉菌淡色變種，保藏編號(hào)為CGMCCNo. 10570。 上述菌株是由具有拮抗黑粉病菌的微生物菌種中，篩選出來(lái)的抗性高的一株圈卷產(chǎn)色鏈霉 菌淡色變種；圈卷產(chǎn)色鏈霉菌淡色變種孢子四鉤狀、或圈卷，很少成圈環(huán)，孢子球形、橢圓 形，隸屬放線菌。本申請(qǐng)以此圈卷產(chǎn)色鏈霉菌淡色變種為出發(fā)菌種，用含有稀土混合物的營(yíng) 養(yǎng)液在28°C、100r/min下培養(yǎng)72~96小時(shí)，爾后選取出強(qiáng)壯的菌株重復(fù)前述的培養(yǎng)步驟 3~5次，再選取強(qiáng)壯的菌株進(jìn)行普通培養(yǎng)，當(dāng)菌數(shù)達(dá)到10s個(gè)/毫升以上時(shí)，利用紫外燈照 射（30w5~30秒）后，再放置微波處理器中處理（500W5~30s)，最終篩選得到一株誘變 圈卷產(chǎn)色鏈霉菌淡色變種菌株，編號(hào)為CGMCCNo. 10570。
[0027] 上述營(yíng)養(yǎng)液配制以重量份計(jì)，由2份可溶性淀粉、0. 1份硝酸鉀、0. 05分磷酸氫二 鉀、0. 05份七水硫酸鎂、0. 05份氯化鈉、0. 001份硫酸亞鐵與0. 0015份稀土混合物組成（氯 化釓：硝酸鈰重量比為2:1，市售），pH7. 2~7. 4。
[0028] 本申請(qǐng)還提供了保藏編號(hào)為CGMCCNo. 10570的菌株在預(yù)防抵抗農(nóng)作物黑粉病上 的應(yīng)用。編號(hào)為CGMCCNo.