miRNA分子在精神分裂癥的診斷和預(yù)后中的用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及miRNA分子在精神分裂癥的診斷和預(yù)后中的用途。特別地，本發(fā)明涉 及miR-130b和miR-193a-3p在精神分裂癥的診斷和預(yù)后中的用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 精神分裂癥（Schizophrenia，頂181500)是臨床最常見的重性精神疾患之一。它 是一種對(duì)內(nèi)在與外在現(xiàn)實(shí)感帶來嚴(yán)重影響的綜合征，主要表現(xiàn)為知覺、思維、情感、言語(yǔ)與 活動(dòng)方面的障礙和精神活動(dòng)與環(huán)境不協(xié)調(diào)。一般無(wú)智力障礙，部分患者在疾病過程中可以 出現(xiàn)認(rèn)知功能損害。該病人群終生患病率約為1%。多為青春后期和成年早期發(fā)病，男女發(fā) 病率相當(dāng)，男性的平均發(fā)病年齡較女性早。
[0003] 在全球范圍內(nèi)，精神分裂癥占15-44歲人群疾病負(fù)擔(dān)的2. 6%，是世界上導(dǎo)致殘疾 的第四大原因。目前，我國(guó)各類精神障礙患者已超過8300萬(wàn)人，以精神分裂癥為代表的重 性精神疾病患者達(dá)1600萬(wàn)人。精神疾病已成為社會(huì)和家庭的沉重負(fù)擔(dān)。WHO資料顯示，與 精神疾病和行為障礙相關(guān)的疾病負(fù)擔(dān)占全部疾病負(fù)擔(dān)的20 %，超過了心腦血管、呼吸系統(tǒng) 及惡性腫瘤等疾病，在我國(guó)疾病總負(fù)擔(dān)中排名首位。
[0004] 精神分裂癥癥狀復(fù)雜多樣，包括特征性的精神癥狀和非特異性的軀體、神經(jīng)系統(tǒng) 變化。特征性癥狀包括思維聯(lián)想障礙、情感障礙、意志行為障礙、幻覺和感知綜合障礙、妄 想、緊張綜合癥等等?；颊咭话銢]有意識(shí)障礙。通?？煞譃榧毙跃C合征和慢性綜合征。
[0005] 精神分裂癥在臨床上通常分為五種類型，分別為單純型（simple type)、青春型 (hebephrenic type)、緊張型（catatonic type)、偏執(zhí)型（paranoid type)和未分化型 (undifferentiated type)〇
[0006] 家系調(diào)查發(fā)現(xiàn)，精神分裂癥具有家族聚集性。精神分裂癥患者一級(jí)親屬精神分裂 癥的患病率是一般人群的10倍，約為4%~14%;二級(jí)親屬患病危險(xiǎn)約高于一般人群3倍； 當(dāng)雙親均罹患精神分裂癥時(shí)，子女遺傳本病的風(fēng)險(xiǎn)接近50%。
[0007] 寄養(yǎng)子研究可以幫助了解遺傳因素和生活環(huán)境對(duì)精神分裂癥的影響。發(fā)現(xiàn)由寄養(yǎng) 長(zhǎng)大成年后發(fā)生精神分裂癥患者的血緣親屬中該病的發(fā)生率比對(duì)照組高，而寄養(yǎng)家庭親屬 中的發(fā)病情況則與對(duì)照組相接近。研究結(jié)果支持遺傳因素在精神分裂癥發(fā)病中起相當(dāng)?shù)淖?用。
[0008] 雙生子研究的假設(shè)認(rèn)為，同卵雙生子之間的差異是由環(huán)境所決定，而異卵雙生子 之間的差異是由基因間的差異所決定的。不同的研究均顯示同卵雙生子的發(fā)病率（48%) 顯著高于異卵雙生子（17% )，提示遺傳因素在精神分裂癥的發(fā)生過程中起重要作用。
[0009] 在過去30年中，精神分裂癥研究的主旋律之一是易感基因的尋找。從單位點(diǎn)的 單核苷酸多態(tài)性（SNP)分析研究到全基因組關(guān)聯(lián)研究（GWAS)，科學(xué)家們到目前為止已經(jīng)找 到了 1008個(gè)易感基因，8788個(gè)SNP位點(diǎn)，遍布在除Y染色體外的所有基因組區(qū)域。但遺憾 的是，沒有任何基因或位點(diǎn)足以解釋精神分裂癥的發(fā)病原因。造成這種困境的原因可能有 兩個(gè)：樣本的異質(zhì)性和遺傳理論模型的局限性。由于精神分裂癥的診斷是基于癥狀學(xué)的量 表評(píng)估，很難保證研究中樣本的一致性。此外，目前大多數(shù)的遺傳學(xué)研究使用的是"常見疾 病-常見變異"假說。該假說認(rèn)為常見疾病是由多個(gè)相互作用的常見變異引起的，單個(gè)變異 只發(fā)揮很小的作用。而在這個(gè)模型下，像精神分裂癥這種異質(zhì)性很高的多基因疾病，要想得 到足夠可信的結(jié)果，需要對(duì)數(shù)十萬(wàn)計(jì)的患者進(jìn)行篩查，而這在研究實(shí)踐中是難以實(shí)現(xiàn)的。
[0010] 除傳統(tǒng)意義上的遺傳信息外，近年來，科學(xué)家們發(fā)現(xiàn)了大量隱藏在DNA序列之中 或之外更高層次的遺傳信息，使多年來分子生物學(xué)領(lǐng)域公認(rèn)的中心法則受到前所未有的挑 戰(zhàn)。目前認(rèn)為，這些高層次的基因組信息主要包括非編碼RNA(non-coding RNA，ncRNA)、DNA 甲基化和組蛋白修飾等表觀遺傳學(xué)信息。表觀遺傳學(xué)是指在基因的DNA序列沒有發(fā)生改變 的情況下，基因功能發(fā)生了可遺傳的信息變化，這種變化可通過減數(shù)分裂或有絲分裂進(jìn)行 遺傳，并最終導(dǎo)致了表型的改變。因此，這類變異被稱為"表觀遺傳修飾"，并被認(rèn)為是導(dǎo)致 遺傳物質(zhì)一致的孿生子出現(xiàn)個(gè)體差異的主要原因。
[0011] 越來越多的證據(jù)表明表觀遺傳機(jī)制參與了精神分裂癥的發(fā)病機(jī) 制。Petronis等的研究發(fā)現(xiàn)雙生子中未患病個(gè)體的淋巴細(xì)胞中多巴胺D2受體 (dopamine D2receptors，DAD2R)基因的DNA甲基化程度較高。DNA甲基轉(zhuǎn)移酶（DNA methyltransferasel，DNMTl)基因在精神分裂癥患者腦組織氨基丁酸（gamma amino butyric acid, GABA)能中間神經(jīng)元中過表達(dá)，通過表觀修飾機(jī)制進(jìn)而下調(diào)谷氨酸脫羧酶 (glutamic acid decarboxylase67，GAD67)和 Reelin 基因。GAD67 是 氛基丁酸的合成 酶，而Reelin蛋白是神經(jīng)元遷移、神經(jīng)信號(hào)傳導(dǎo)、大腦信息存儲(chǔ)和突觸可塑性所必需的蛋 白，在精神分裂癥患者腦組織中，GAD67和Reelin蛋白表達(dá)水平異常偏低。
[0012] 隨著這幾年 RNA 干擾（RNA interference, RNAi)和微小 RNA (microRNA, miRNA)領(lǐng) 域研究的不斷深入，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了大量miRNAs與精神分裂癥相關(guān)聯(lián)的證據(jù)。
[0013] 與高血壓、糖尿病等其它疾病不同，精神疾病的診斷缺乏客觀的生理、生化和病 理指標(biāo)。迄今為止，單純依賴癥狀學(xué)的診斷體系仍然是精神分裂癥診斷的金標(biāo)準(zhǔn)，即：醫(yī) 生對(duì)病人的診斷和療效判斷主要依靠人為劃分的一組癥狀集合，并基本采用面談的方式 進(jìn)行相關(guān)資料的采集。目前精神分裂癥的診斷標(biāo)準(zhǔn)是根據(jù)美國(guó)的《精神障礙診斷與統(tǒng)計(jì) 手冊(cè)第四版》（Diagnostic and Statistical Manual of Mental Disorders IV，DSM-IV) 和世界衛(wèi)生組織編寫的《國(guó)際疾病分類第10版》（International Classification of DiseaselO, ICD-10)制訂的[34, 35]〇
[0014] DSM-IV對(duì)精神分裂癥的診斷標(biāo)準(zhǔn)包括：⑴特征性癥狀：妄想、幻覺、語(yǔ)言紊亂、陰 性癥狀（情感淡漠、語(yǔ)言貧乏或意志、意向減退），至少兩項(xiàng)上述癥狀在一月內(nèi)有明顯表現(xiàn)； (2)社交或職業(yè)功能不良 ：自起病以來在很長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)，一個(gè)以上重要方面的功能水平較起 病前明顯較低；（3)病情至少持續(xù)6個(gè)月，這6個(gè)月應(yīng)包括至少1個(gè)月符合（1)標(biāo)準(zhǔn)，即急 性期癥狀，可包括前驅(qū)或殘留期癥狀；(4)排除心境障礙及分裂情感性精神障礙：分裂情感 性精神障礙及伴有精神病性表現(xiàn)的心境障礙均已排除：A)急性癥狀期無(wú)重性抑郁、躁狂或 混合發(fā)作同時(shí)出現(xiàn)，B)在急性癥狀期出現(xiàn)情感發(fā)作，其持續(xù)時(shí)期與急性期或殘留期相比均 明顯較短；（5)排除物質(zhì)或一般軀體情況：此病情并非由于某種物質(zhì)或一般軀體情況所致 的直接生理效應(yīng)；(6)與普遍性發(fā)育障礙的關(guān)系，如嬰幼兒孤獨(dú)癥或其它普遍性發(fā)育障礙 的病史，除非出現(xiàn)至少一個(gè)月（如經(jīng)有效成功的治療，期限可較短）的明顯妄想或幻覺，否 則不作精神分裂癥的附加診斷。
[0015] ICD-10對(duì)精神分裂癥的診斷標(biāo)準(zhǔn)包括：（1)思維鳴響、思維插入、思維被撤走及思 維廣播；（2)明確涉及軀體或四肢運(yùn)動(dòng)，或特殊思維、行動(dòng)或感覺的被影響、被控制或被動(dòng) 妄想、妄想性知覺；（3)對(duì)患者的行為進(jìn)行跟蹤性評(píng)論，或彼此對(duì)患者加以討論的幻聽，或 來源于身體某一部分的其它類型的幻聽；(4)與文化不相稱且根本不可能的其它類型的持 續(xù)性妄想，如具有某種宗教或政治身份，或超人的力量和能力；（5)伴轉(zhuǎn)瞬即逝或未充分形 成的無(wú)明顯情感內(nèi)容的妄想，或伴有持久的超價(jià)觀念，或連續(xù)數(shù)周或數(shù)月每日均出現(xiàn)的任 何感官的幻覺；(6)思潮斷裂或無(wú)關(guān)的插入語(yǔ)，導(dǎo)致言語(yǔ)不連貫，或不中肯或語(yǔ)詞新作；（7) 緊張性行為，如興奮、擺姿勢(shì)，或蠟樣屈曲、違拗、緘默及木僵；(8)陰性癥狀，如顯著情感淡 漠、言語(yǔ)貧乏、情感遲鈍或不協(xié)調(diào)，常導(dǎo)致社會(huì)退縮及社會(huì)功能下降，但需澄清這些癥狀并 非由抑郁癥或神經(jīng)阻滯劑治療所致；(9)個(gè)人行為的某些方面發(fā)生顯著而持久的總體性質(zhì) 的改變，表現(xiàn)為喪失興趣、缺乏目的、懶散、自我專注及社會(huì)退縮。需具備（1)~（4)任何一 組或（5)~（9)至少兩組癥狀群中的十分明確的癥狀，并且持續(xù)時(shí)間至少在1個(gè)月以上。
[0016] 上述標(biāo)準(zhǔn)的出現(xiàn)為臨床醫(yī)生提供了一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)化的執(zhí)行工具，極大地提高了精神分 裂癥診斷的可靠性。但是，需要指出的是，這些量表的制訂依據(jù)的是臨床醫(yī)師的觀察和患 者自身的反饋，具有很強(qiáng)的主觀性。而且，現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)為了提高其統(tǒng)一性、可辨認(rèn)性和可操作 性，對(duì)那些有爭(zhēng)議的、辨認(rèn)模糊的臨床現(xiàn)象或操作困難的診斷條目都只能舍棄。因此，這種 診斷標(biāo)準(zhǔn)只是對(duì)部分信息進(jìn)行了評(píng)估，其信度的提高是以犧牲效度為代價(jià)的。盡管如此， 現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)診斷的準(zhǔn)確性仍然差強(qiáng)人意，不同的精神疾病診斷標(biāo)準(zhǔn)間有重疊區(qū)域，也是其倍 受詬病的主要原因。面對(duì)嚴(yán)重的樣本"異質(zhì)性"問題，現(xiàn)在大多數(shù)精神科醫(yī)生和研究者們都 贊同的一個(gè)觀點(diǎn)是精神分裂癥是一組不同發(fā)病機(jī)制疾病的集合，只不過恰好具有相同的臨 床表現(xiàn)。就像人體發(fā)燒一樣，可能是由病毒感染、外傷甚至藥物使用引起的，應(yīng)對(duì)方式也應(yīng) 該有所區(qū)別。Mesholam GR等對(duì)43個(gè)報(bào)道中的2204名首發(fā)精神分裂癥患者的10項(xiàng)神經(jīng) 認(rèn)知功能進(jìn)行了薈萃分析，發(fā)現(xiàn)不同研究組中的患者表現(xiàn)差異很大（平均效應(yīng)量_〇.64~ 1.20)。同樣是神經(jīng)認(rèn)知功能的檢測(cè)，Kuswanto CN等對(duì)一組精神分裂癥和雙向情感障礙 患者的研究發(fā)現(xiàn)，這兩種疾病的患者的神經(jīng)認(rèn)知功能缺陷沒有顯著差異。Cheniaux E等通 過讓兩隊(duì)精神科醫(yī)生對(duì)100例包含精神分裂癥、雙向情感障礙和單向情感障礙的住院精神 病患者分別使用I⑶-10和DSM-IV進(jìn)行診斷，發(fā)現(xiàn)I⑶-10更容易將患者診斷為精神分裂 癥" =〇.37)?，F(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)的