柄羊肚菌926號的生物量為平均值為8.545 g/L,生產(chǎn)成本為0.355元/g。
[0027]實施例3
本實施例提供一種羊肚菌液態(tài)菌種的培養(yǎng)方法，選用粗柄羊肚菌926號原種作為羊肚菌栽培種的菌株進行培養(yǎng)，與實施例1不同的是，所述粗柄羊肚菌926號栽培種的培養(yǎng)過程中所采用的培養(yǎng)基原料如下:麥麩40g、玉米粉20g、黃豆粉10g、KH2P04 lg、MgS04 lg，實驗測得采用此液態(tài)菌種培養(yǎng)基培養(yǎng)出的粗柄羊肚菌926號的生物量為平均值為7.148 g/L，生產(chǎn)成本為0.465元/g。
[0028]實施例4
本實施例提供一種羊肚菌液態(tài)菌種的培養(yǎng)方法，選用粗柄羊肚菌926號原種作為羊肚菌栽培種的菌株進行培養(yǎng)，與實施例1、實施例2和實施例3均不同的是，所述粗柄羊肚菌926號栽培種的培養(yǎng)過程中所采用的培養(yǎng)基原料如下:土豆200 g、蔗糖30g、酵母膏5 g、KH2P04 0.5g、MgS04 0.5g，實驗測得采用此液態(tài)菌種培養(yǎng)基培養(yǎng)出的粗柄羊肚菌926號的生物量為平均值為6.754 g/L,生產(chǎn)成本為0.41元/g。
[0029]實施例5
本實施例提供一種羊肚菌液態(tài)菌種的培養(yǎng)方法，與實施例1不同的是，本實施例選用尖頂羊肚菌405號作為羊肚菌的菌株進行培養(yǎng)，具體培養(yǎng)步驟包括:
(I)尖頂羊肚菌405號母種的培養(yǎng)
將土豆60g、瓊脂10g、維生素B劑0.5g及葡萄糖5g放入1500ml的水中加熱至瓊脂全部煮化即得到羊肚菌母種培養(yǎng)基。
[0030]取150ml羊肚菌母種培養(yǎng)基放置于250ml的試管中并用棉花封口，將所述試管放置于130°C下的高壓鍋內(nèi)滅菌I小時，然后自然冷卻至室溫，將裝有所述羊肚菌母種培養(yǎng)基的所述試管放入密封的無菌接種箱中，并向所述試管中接入尖頂羊肚菌405號菌株菌絲，置于溫度為30°C的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，直至生長出尖頂羊肚菌405號母種。
[0031](2)尖頂羊肚菌405號一級原種的培養(yǎng)
將棉籽殼30g、雜木肩20g用水浸泡30小時且每隔5小時換水一次；將20g谷殼浸泡3小時；將麩皮25g、玉米粉8g分別用水浸泡3小時；然后將浸泡好的棉籽殼、麩皮、雜木肩、谷殼、玉米粉分別置于鍋中加水煮沸2小時，然后過濾、瀝干；然后向瀝干后的所述棉籽殼、麩皮、雜木肩、谷殼、玉米粉中加入鹿糖10g、碳酸|丐Ig和磷肥5g，混合均勾制得羊肚菌一級原種培養(yǎng)基。
[0032]將所述羊肚菌一級原種培養(yǎng)基裝入100 ml的廣口瓶中并用牛皮紙封口，每瓶裝入量折合干重為40g，將分裝好的廣口瓶用1cm X 10 cm的聚丙烯雙層膜封住瓶孔，在聚丙烯雙層膜對著廣口瓶位置剪開一個直徑為1.5 cm的孔，并用兩層牛皮紙封住，用線繩固定封口 ；將封口后的廣口瓶在120-130°C下滅菌3小時，然后在無菌室中自然冷卻；將尖頂羊肚菌405號母種按照每瓶接種量為4g接種到所述羊肚菌一級原種培養(yǎng)基中，放置于溫度為30°C的恒溫箱中培養(yǎng)，培養(yǎng)10天獲得尖頂羊肚菌405號一級原種。
[0033](3)尖頂羊肚菌405號二級原種的培養(yǎng)
將松針200g、金針菇200g和1800ml混合、煮沸并保持20分鐘，冷卻后過濾制得營養(yǎng)濾液，然后分別稱取小麥20g、玉米25g、谷殼15g、米糠15g、鹿糖lg、石膏l(xiāng)g、磷肥lg，將上述原料組分混合均勻得到混合料。
向所述混合料中加入同等質(zhì)量的所述羊肚菌二級原種培養(yǎng)基濾液，混合均勻制，并分成若干等份分別裝入多個三角瓶中并用棉花封口，放置于滅菌鍋中，在2kg/cm3、110°C下滅菌I小時，取出冷卻至室溫制得羊肚菌二級原種培養(yǎng)基。
[0034]將多個所述三角瓶置于接種箱中密封I小時，將尖頂羊肚菌405號一級原種接入到所述羊肚菌二級原種培養(yǎng)基中，并送入培養(yǎng)室，控制培養(yǎng)室的溫度為30°C，培養(yǎng)15天獲得尖頂羊肚菌405號二級原種。
[0035](4)尖頂羊肚囷405號羊肚囷栽i音種的培養(yǎng)
將松樹枝300g、土豆300g和水1800ml混合、煮沸并保持30分鐘，然后冷卻至室溫，過濾后制得營養(yǎng)濾液。
[0036]將蔗糖25g加入到所述濾液中并溶解制得羊肚菌液態(tài)菌種營養(yǎng)濾液，取所述羊肚菌液態(tài)菌種營養(yǎng)濾液150 ml置于培養(yǎng)瓶中，然后向所述培養(yǎng)瓶中加入洗凈烘干的谷殼20g和碳酸鈣5g，制得羊肚菌液態(tài)菌種培養(yǎng)基。
[0037]將裝有所述羊肚菌液態(tài)菌種培養(yǎng)基的三角瓶放置于滅菌鍋中，1.5kg/cmM20°C下滅菌I小時，取出冷卻至室溫，然后置于接種箱中密封3小時，將尖頂羊肚菌405號二級原種接入到所述羊肚菌液態(tài)菌種培養(yǎng)基中，置于30°C的培養(yǎng)室進行密封培養(yǎng)，當所述羊肚菌二級原種菌絲萌發(fā)后，每間隔I天充分搖動I次，培養(yǎng)10天獲得尖頂羊肚菌405號栽培種。
[0038]實驗測得采用此液態(tài)菌種培養(yǎng)基培養(yǎng)出的尖頂羊肚菌405號的平均生長速度為
0.7cm/d，長滿培養(yǎng)基時間為7天，且無雜菌生長。
[0039]實施例6
本實施例提供一種羊肚菌液態(tài)菌種的培養(yǎng)方法，與實施例5不同的是，本實施例選用美味羊肚菌918號作為羊肚菌栽培種的菌株進行培養(yǎng)，具體結(jié)果如下:實驗測得采用此液態(tài)菌種培養(yǎng)基培養(yǎng)出的美味羊肚菌918號的平均生長速度為0.8cm/d，長滿培養(yǎng)基時間為6天，且無雜菌生長。
[0040]最后應當說明的是:以上實施例僅用以說明本發(fā)明的技術(shù)方案而非對其限制；盡管參照較佳實施例對本發(fā)明進行了詳細的說明，所屬領域的普通技術(shù)人員應當理解:依然可以對本發(fā)明的【具體實施方式】進行修改或者對部分技術(shù)特征進行等同替換；而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的精神，其均應涵蓋在本發(fā)明請求保護的技術(shù)方案范圍當中。
【主權(quán)項】
1.一種羊肚菌液態(tài)菌種的培養(yǎng)方法，包括以下步驟: 提供一種羊肚菌液態(tài)菌種培養(yǎng)基； 將羊肚菌原種接種到所述羊肚菌液態(tài)菌種培養(yǎng)基中進行密封培養(yǎng)，當所述羊肚菌原種的菌絲萌發(fā)后，每天搖動所述羊肚菌液態(tài)菌種培養(yǎng)基I次，直至獲得羊肚菌栽培種。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的羊肚菌液態(tài)菌種的培養(yǎng)方法，其特征在于，提供所述羊肚菌液態(tài)菌種培養(yǎng)基的步驟包括: 將松樹枝200-300g、土豆200-400g和水1200ml-1800ml進行混合，然后依次經(jīng)過煮沸、冷卻、過濾處理得到濾液； 將糖類物質(zhì)15_30g加入到所述濾液中并溶解制得羊肚菌液態(tài)菌種營養(yǎng)濾液，取所述羊肚菌液態(tài)菌種營養(yǎng)濾液150 ml置于培養(yǎng)瓶中； 向所述培養(yǎng)瓶中加入洗凈烘干的谷殼10-30g和碳酸鈣l_5g，制得羊肚菌液態(tài)菌種培養(yǎng)基。3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的羊肚菌液態(tài)菌種的培養(yǎng)方法，其特征在于， 制備所述羊肚菌液態(tài)菌種營養(yǎng)濾液的步驟包括:用水浸泡新鮮麥粒300-400g，并在室溫下促使所述麥粒發(fā)芽直至麥芽長度約為所述麥粒長度的3-6倍，然后，將所述麥芽烘干并磨成麥芽粉，并向所述麥芽粉中加入所述麥芽粉5-7倍質(zhì)量的所述濾液，經(jīng)糖化、過濾后制得羊肚菌液態(tài)菌種營養(yǎng)濾液。4.根據(jù)權(quán)利要求1-3任一項所述的羊肚菌液態(tài)菌種的培養(yǎng)方法，其特征在于，所述羊肚菌原種菌絲萌發(fā)后，每間隔24小時搖動所述羊肚菌液態(tài)菌種培養(yǎng)基I次，使得所述羊肚菌液態(tài)菌種培養(yǎng)基中的谷殼完全被浸濕。5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的羊肚菌液態(tài)菌種的培養(yǎng)方法，其特征在于，所述羊肚菌原種是通過對羊肚菌母種進行一級培養(yǎng)或二級培養(yǎng)而制得的。6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的羊肚菌液態(tài)菌種的培養(yǎng)方法，其特征在于，所述羊肚菌母種進行一級培養(yǎng)的步驟包括: 將棉籽殼20-30g、雜木肩15-20g、谷殼20-30g、麩皮15_25g、玉米粉8_12g分別用水浸泡，過濾后分別加水煮沸、過濾瀝干，然后混合，制得混合料；向所述混合料中加入蔗糖5-10g、碳酸媽l_5g和磷肥l_5g，混合均勾制得羊肚菌一級原種培養(yǎng)基； 對所述羊肚菌一級原種培養(yǎng)基進行高溫滅菌、冷卻處理，然后向所述羊肚菌一級原種培養(yǎng)基中接入羊肚菌母種進行一級培養(yǎng)，獲得羊肚菌一級原種。7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的羊肚菌液態(tài)菌種的培養(yǎng)方法，其特征在于，所述羊肚菌母種進行二級培養(yǎng)的步驟包括: 將松針100-200g、金針菇100-200g和水1200ml-1800ml進行混合、煮沸，冷卻、過濾處理，制得羊肚菌二級原種營養(yǎng)液，然后將小麥20-30g、玉米25-40g、谷殼15-25g、米糠15-25g、鹿糖l-5g、石膏l(xiāng)_5g、磷肥l_5g混合均勾制得羊肚菌二級原種培養(yǎng)基混合料，并加入到與所述羊肚菌二級原種培養(yǎng)基混合料相同質(zhì)量的所述羊肚菌二級原種營養(yǎng)液中，混合均勻制得羊肚菌二級原種培養(yǎng)基； 對所述羊肚菌二級原種培養(yǎng)基進行高溫滅菌、冷卻處理；然后將所述羊肚菌一級原種接入到所述羊肚菌二級原種培養(yǎng)基中進行二級培養(yǎng)，獲得羊肚菌二級原種。8.根據(jù)權(quán)利要求5所述的羊肚菌液態(tài)菌種的培養(yǎng)方法，其特征在于，所述羊肚菌母種的培養(yǎng)方法包括如下步驟: 將土豆50-60g、瓊脂8-14g、維生素B劑0.5-0.8g及葡萄糖5_7g加入1500ml的水中進行加熱，直至所述瓊脂全部煮化，得到羊肚菌母種培養(yǎng)基； 對所述羊肚菌母種培養(yǎng)基進行高溫滅菌、冷卻處理；然后將羊肚菌菌株菌絲接入到所述羊肚菌母種培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)，獲得所述羊肚菌母種。
【專利摘要】本發(fā)明提供一種羊肚菌液態(tài)菌種的培養(yǎng)方法，包括提供一種羊肚菌液態(tài)菌種培養(yǎng)基，將羊肚菌原種接種到所述羊肚菌液態(tài)菌種培養(yǎng)基中進行密封培養(yǎng)，當所述羊肚菌原種的菌絲萌發(fā)后，每天搖動所述羊肚菌液態(tài)菌種培養(yǎng)基1次，直至獲得羊肚菌栽培種。本發(fā)明提供的羊肚菌液態(tài)菌種培養(yǎng)方法操作簡單，培養(yǎng)出的羊肚菌栽培種菌絲生長快，菌絲產(chǎn)出均勻整齊，受其它菌種污染小，提高了羊肚菌人工種植的存活率和產(chǎn)量，且培養(yǎng)工藝簡單易行，成本低。
【IPC分類】C12N1/14, C12R1/645
【公開號】CN105154342
【申請?zhí)枴緾N201510704225
【發(fā)明人】宋瑞鵬
【申請人】宋瑞鵬
【公開日】2015年12月16日
【申請日】2015年10月27日...