一種螺旋藻多糖及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于天然藥物提取制備領(lǐng)域，更具體設(shè)及一種螺旋藻多糖及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 螺旋藻是藍(lán)藻綱，顫藻科的一類(lèi)低等生物，原核生物，由單細(xì)胞或多細(xì)胞組成的絲 狀體，體長(zhǎng)200-500ym，寬5-10ym，圓柱形，呈疏松或緊密的有規(guī)則的螺旋旋形彎曲，形如 鐘表發(fā)條，故而得名。螺旋藻具有降低膽固醇、調(diào)節(jié)血糖、增強(qiáng)免疫力、保護(hù)腸胃功能、抗腫 瘤、抗氧化、抗衰老、抗疲勞、抗福射等多種功能。
[0003] 螺旋藻營(yíng)養(yǎng)成分的特點(diǎn)是蛋白質(zhì)含量高達(dá)60% -70%，而脂肪、纖維素含量低，并 且還含有種類(lèi)繁多的維生素，它是維生素B12和0-胡蘿h素含量最高的食品.此外，它 還是所有食物中可吸收性鐵質(zhì)含量最高的，同時(shí)還發(fā)現(xiàn)它含有具有防癌、治癌作用的藻類(lèi) 蛋白，W及其他大量礦質(zhì)元素和提高機(jī)體免疫力的生物活性物質(zhì)。
[0004] 多糖是由糖巧鍵結(jié)合的糖鏈，至少要超過(guò)10個(gè)的單糖組成的聚合糖高分子碳水 化合物，凡符合高分子化合物概念的碳水化合物及其衍生物均稱(chēng)為多糖。多糖在自然界分 布極廣，亦很重要。有的是構(gòu)成動(dòng)植物細(xì)胞壁的組成成分，如膚聚糖和纖維素；有的是作為 動(dòng)植物儲(chǔ)藏的養(yǎng)分，如糖原和淀粉；有的具有特殊的生物活性，像人體中的肝素有抗凝血作 用，肺炎球菌細(xì)胞壁中的多糖有抗原作用。由同一種類(lèi)型的單糖組成的多糖稱(chēng)為同多糖，如 淀粉、纖維素和糖原；W不同的單糖組成的多糖稱(chēng)為雜多糖，如阿拉伯膠是由戊糖和半乳糖 等組成，在化學(xué)結(jié)構(gòu)上實(shí)屬多種多樣。就分子量而論，有從0. 5萬(wàn)個(gè)分子組成的到超過(guò)106 個(gè)的多糖。
[0005] 螺旋藻多糖是螺旋藻藻體中碳水化合物的主要存在形式，含量高達(dá)干重的 14%~16%。螺旋藻多糖具有抗福射損傷和改善放、化療引起的副反應(yīng)作用、抗腫瘤、抗病 毒、抗衰老、增強(qiáng)免疫力等多種功能。有關(guān)螺旋藻多糖的報(bào)道已有很多文獻(xiàn)，但大多局限于 粗多糖，目前，并沒(méi)有文獻(xiàn)就螺旋藻中單一多糖的提取和應(yīng)用進(jìn)行研究。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明的目的是提供一種具有抗腫瘤活性的螺旋藻單一多糖及其制備方法，該螺 旋藻多糖具有很好的抗腫瘤活性，具有重要的臨床治療和預(yù)防腫瘤疾病的應(yīng)用價(jià)值。
[0007]為實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明提供一種螺旋藻多糖，由D-葡萄糖醒酸值-GlcUA)、 D-乙酷氨基半乳糖（GalN)a-巖藻糖化-Fuc)和半乳糖（Gal)四種單糖組成，W摩爾比計(jì)， 四種組成單糖比例為：3. 5~4. 5:3. 5~4. 5:1. 7~2. 3:1，優(yōu)選4:4:2:1 ;所述的螺旋藻多 糖的重均分子量范圍為：5000~ISOOODa;該螺旋藻多糖W其堿金屬、堿±金屬鹽的形式存 在，優(yōu)選鋼鹽、鐘鹽或巧鹽。
[0008] 進(jìn)一步的，所述的螺旋藻多糖由1個(gè)硫酸軟骨素E和7個(gè)其它非硫酸化軟骨素及 單硫酸化軟骨素組成的主鏈，和Wa-1，3-糖巧鍵連接4個(gè)k巖藻糖硫酸醋形成側(cè)鏈，末 端Wa-1，3-糖巧鍵連接2個(gè)半乳糖；
[0009]具體的，主鏈?zhǔn)荳D-葡萄糖醒酸和D-乙酷氨基半乳糖硫酸醋We-I，3-糖巧鍵 和0 -1,4-糖巧鍵鏈接形成[-4G1CAM- 3GalNAc4S/6SM-]硫酸軟骨素二糖結(jié)構(gòu)單元， 所述螺旋藻多糖結(jié)構(gòu)如下：
[0010]
[0011] 本發(fā)明還提供了一種上螺旋藻多糖的制備方法，按W下步驟進(jìn)行：
[0012] 1)取螺旋藻適量，加入10~30倍重量體積比的0. 5mol/L的化OH溶液，于60°C 的溶液溫度下攬拌提取2小時(shí)；冷卻后，加6mol/L肥1溶液調(diào)抑值為2~3;離屯、處理得 上清液；將上清液濃縮到約螺旋藻原料重量2倍體積后，加入=倍體積的95%食用乙醇，靜 置8-12小時(shí)，離屯、收集沉淀，得螺旋藻粗多糖；
[0013] 2)向螺旋藻粗多糖中加20~40倍重量體積比的水溶解；在35°C水浴下，分別加 入0. 5mol/L化C1、0. 5mol/LNaAc(乙酸鋼）；4.Ommol/L乙酸后；勻速滴加1~化10% 肥02;待反應(yīng)終止后，進(jìn)行超濾處理，得到螺旋藻純多糖。
[0014] 本發(fā)明中的螺旋藻多糖具有抑制人肝癌細(xì)胞增殖的作用，顯示該螺旋藻多糖具有 治療和預(yù)防腫瘤的潛在應(yīng)用價(jià)值，可W用于抗腫瘤的治療。
[0015]另外，本發(fā)明的螺旋藻多糖或其鹽可W與藥學(xué)上可接受的輔料形成藥用組合物用 于抗腫瘤治療。
[0016]W下將結(jié)合附圖和實(shí)施例，對(duì)本發(fā)明進(jìn)行較為詳細(xì)的說(shuō)明。
【附圖說(shuō)明】
[0017] 圖1本發(fā)明中螺旋藻多糖HPGPC色譜圖 [001引圖2本發(fā)明中螺旋藻多糖紅外吸收?qǐng)D譜
[0019] 圖3本發(fā)明中螺旋藻多糖IH-NMR圖
[0020] 圖4本發(fā)明中螺旋藻多糖13C-NMR圖
【具體實(shí)施方式】
[0021] 為更好地理解本發(fā)明的本質(zhì)，下面通過(guò)對(duì)本發(fā)明較佳實(shí)施方式的進(jìn)行描述，詳細(xì) 說(shuō)明本發(fā)明但不限制本發(fā)明。
[0022] W下實(shí)施例中使用的材料和試劑，除特殊說(shuō)明，均為普通市售。
[0023] 實(shí)施例1: 一種螺旋藻多糖的制備方法，具體為：
[0024] 取螺旋藻2Kg，加入40L0. 5mol/L的化OH溶液，于60°C的溶液溫度下攬拌提取2 小時(shí)；冷卻后，加6mol/L肥I溶液調(diào)節(jié)抑值為2. 5 ;離屯、處理得上清液。上清液濃縮到約SL加入15L的95%食用乙醇，靜置10小時(shí)，離屯、收集沉淀，得螺旋藻粗多糖300g。 陽(yáng)0巧]取上述螺旋藻粗多糖200g，加水化溶解；在35°C水浴下，加入0. 5mol/LNaCl、 0. 5mol/LNaAc;4.Ommol/L乙酸后；勻速滴加化10%肥02;待反應(yīng)4小時(shí)，反應(yīng)完成后，通 過(guò)超濾處理，得到螺旋藻均一多糖150g。經(jīng)高效凝膠色譜法（HPGPC)檢測(cè)為均一多糖，其重 均分子量為13500Da。
[00%] 實(shí)施例2 :-種螺旋藻多糖的制備方法，具體為：
[0027] 取螺旋藻2Kg，加入20L0.5mol/L的化OH溶液，于60°C的溶液溫度下攬拌提取2 小時(shí)；冷卻后，加6mol/L肥1溶液調(diào)節(jié)抑值至2 ;離屯、處理得上清液。將上清液濃縮到約 SL加入15L的95%食用乙醇，靜置11小時(shí)，離屯、收集沉淀，得螺旋藻粗多糖270g。
[0028] 取上述螺旋藻粗多糖200g，加水化溶解；在35°C水浴下，加入0.5mol/L化Cl、 0. 5mol/LNaAc;4.Ommol/L乙酸后；勻速滴加IL10%肥02 ;反應(yīng)4小時(shí)，待反應(yīng)結(jié)束后，進(jìn) 行超濾處理，得到螺旋藻均一