4. 47(d,J= 7. 7Hz, 1H,H-l),4. 36(dd,J=10. 5, 4. 9Hz, 1H),4. 15-4. 03 (m, 1H),3. 92-3. 72 (m, 3H),3. 65 -3. 46 (m, 4H),3. 41(m, 1H).
[0052] 實(shí)施例6化合物8的制備
[0053] 50ml前形瓶中加入化合物7、DMAP(6mg, 0. 05mmol)和Ac20 4ml，再加入吡啶 8ml，混勻，氬氣保護(hù)下室溫反應(yīng)。TLC(PE:EA=l:l，Rf= 0. 8)檢測，反應(yīng)完全。用甲 醇除去反應(yīng)液中多余的醋酸酐，反應(yīng)液用乙酸乙酯萃取，有機(jī)相用水洗滌兩次，再用飽和 碳酸氫鈉溶液與飽和氯化鈉溶液分別洗滌兩次，無水硫酸鈉干燥。過濾，減壓濃縮，硅 膠柱層析（?￡5厶=2.5:1)。得類白色固體 8(29011^，90.8%)。1!1匪1?(3001抱，〇)(：13) δ： 7. 70-7. 32 (m, 5Η,aromaticΗ), 5. 52 (s, 1H,phCH(0) 2-), 5. 34 (t,J= 9. 4Hz, 1H), 5. 11-4.98 (m, 1H),4. 68 (d,J= 7. 8Hz, 1H,H-l),4. 38 (dd,J= 10. 5, 4. 8Hz, 1H),4. 10-3. 99 (m, 1H), 3. 88-3. 66 (m, 3H),3. 62-3. 41 (m, 2H),3. 32 (m, 1H),2. 08 (s, 3H, -〇Ac),2. 06 (s, 3H, -〇Ac).
[0054] 實(shí)施例7化合物9的制備
[0055]100ml前形瓶，加入化合物8 (1. 43g, 3. 41mmol)，加入20ml四氫咲喃（重蒸）將 其溶解，再加入NaCHBH3 (2. 2g，34.lmmol)，適量的甲基橙，以及粉末狀分子篩2. 0g，混勻，氬 氣保護(hù)下室溫反應(yīng)2h。TLC(PE:EA= 2:l，Rf=0. 3)檢測，反應(yīng)完全。用三乙胺將反應(yīng)液 pH調(diào)至中性，并用乙酸乙酯萃取，有機(jī)相用水洗滌兩次，再用飽和碳酸氫鈉溶液與飽和氯化 鈉溶液分別洗滌兩次，無水硫酸鈉干燥。過濾，減壓濃縮，硅膠柱層析（PE:EA= 2:1)。得 棕色粘稠狀固體 9(1.2g，90.3%)。4NMR(300MHz，CDC13)S:7.42-7.29(m，5H，aromatic Η), 5. 05 (t,J= 9. 3Ηζ, 1Η), 4. 99-4. 91 (m, 1Η), 4. 74-4. 48 (m, 3H), 4. 08-3. 94 (m, 1H), 3. 84-3. 61 (m, 4H), 3. 60-3. 39 (m, 2H), 3. 34-3. 19 (m, 1H), 3. 06 (s, 1H), 2. 08 (s, 3H, -OAc), 2. 05 (s, 3H, -OAc).
[0056] 實(shí)施例8化合物11的制備
[0057] 500ml單口瓶，加入 10(53. 0g，0.32mol)，乙酸酐 370ml和醋酸鈉 (16·0g，0·20mol)，140°C條件下加熱反應(yīng)。TLC(PE:EA=l:l，Rf=0·5)檢測，反應(yīng)完 全后，將反應(yīng)體系轉(zhuǎn)移至冰水浴中，并向其中緩慢加入350ml甲醇，反應(yīng)2h。反應(yīng)液用 乙酸乙酯萃取，有機(jī)相用水洗滌兩次，再用飽和碳酸氫鈉溶液與飽和氯化鈉溶液分別洗 滌兩次，無水硫酸鈉干燥。過濾，減壓濃縮，硅膠柱層析（PE:EA= 1:1)。得白色泡沫狀 固體 11 (80. 0g，52. 3 % )。蟲NMR(300MHz，CDC13)δ: 5. 70 (d，J= 8. 3Hz，1H)，5. 43 (d，J =3. 2Hz, 1H), 5. 34 (m, 1H), 5. 08 (dd,J= 10. 4, 3. 4Hz, 1H), 4. 14 (m, 2H), 4. 06 (dd,J= 12. 2, 5. 5Hz, 1H),2. 17, 2. 13, 2. 05, 2. 05, 2. 00 (5s, 5X3H, -OAc).
[0058] 實(shí)施例9化合物12的制備
[0059]
[0060] 式5化合物12的合成路線
[0061] 250ml茄形瓶，加入化合物11(10. 0g，0.0256mol)，加入25ml二氯甲烷將其溶解， 再加入乙硫醇3. 84ml和粉末狀分子篩5. 0g，氮?dú)獗Ｗo(hù)下室溫反應(yīng)lh。將反應(yīng)體系轉(zhuǎn)移至 冰水浴中，并向其中緩慢滴加三氟化硼乙醚12.8ml，繼續(xù)過夜反應(yīng)。TLC(PE:EA=l:l，Rf =0. 55)檢測，反應(yīng)完全。抽濾，收集濾液，有機(jī)相用水洗滌兩次，再用飽和碳酸氫鈉溶液與 飽和氯化鈉溶液分別洗滌兩次，無水硫酸鈉干燥。過濾，減壓濃縮，硅膠柱層析（PE:EA= 1:1)。得淡黃色固體 12。4NMR(300MHz,CDC13)δ:5. 44(d,J= 2. 6Hz, 1H，H-1)，5. 26(m，1 H), 5. 05 (dd,J= 10. 0, 3. 4Hz, 1H), 4. 50 (d,J= 9. 9Hz, 1H), 4. 14 (m, 2H), 3. 94 (t,J= 6. 6Hz ,1H), 2. 85-2. 60 (m, 2H, -8??), 2. 16 (s, 3H, -Ac), 2. 07 (s, 3H, -Ac), 2. 05 (s, 3H, -Ac), 1. 9 9 (s, 3H, -Ac), 1. 29 (t,J= 7. 4Hz, 3H, ~SCH,CH,).
[0062] 實(shí)施例10化合物13的制備
[0063] 100ml茄形瓶，加入化合物12(2. 0g, 5.lOmmol)，加入20ml甲醇將其溶解，再加入 甲醇鈉（55mg，1.02mmol)，氮?dú)獗Ｗo(hù)下室溫反應(yīng) 2h。TLC(EA:Me0H= 8:l，Rf=0. 8)檢測， 反應(yīng)完全。用酸性離子交換樹脂將反應(yīng)液的pH調(diào)至4~5,過濾，減壓濃縮，離心干燥。得 棕色固體13(1161mg，93. 3% )，繼續(xù)下一步反應(yīng)。
[0064] 實(shí)施例11化合物14的制備
[0065] 100ml茄形瓶，加入化合物13 (1150mg，5.lOmmol)，加入20mlDMF將其溶解，再加 入Me2C(0Me)2(0. 95ml，7. 70mmol)，對甲苯磺酸（98mg，0. 51mmol)，氮?dú)獗Ｗo(hù)下室溫反應(yīng)。 TLC(PE:EA=l:l，Rf= 0. 2)檢測，反應(yīng)完全。用三乙胺將反應(yīng)液的pH調(diào)至7~8,并用 乙酸乙酯萃取，有機(jī)相用水洗滌兩次，再用飽和碳酸氫鈉溶液與飽和氯化鈉溶液分別洗滌 有機(jī)相兩次，無水硫酸鈉干燥。過濾，減壓濃縮，硅膠柱層析（PE:EA= 1:1)。得棕色固體 14-4. 07 (m, 1H),3. 99 (m, 1H),3. 93-3. 86 (m, 1H),3. 81 (dd,J= 11. 2, 3. 8Hz, 1H),3. 57 (dd,J=10. 2, 7. 1Hz, 1H),2. 81-2. 72 (m, 2H, -S%^),1. 53 (s, 3H, -CH3),1. 37 (s, 3H, -CH3),1. 35 -1. 27 (m, 3H, ~SCH,CH,).
[0066] 實(shí)施例12化合物15的制備
[0067] 100ml茄形瓶，加入化合物14 (1. 0g, 3. 78mmol)，加入10ml吡啶將其溶解，再加入 DMAP(46mg, 0· 38mmol)，Ac20(5. 3ml, 56. 75mmol)，混勻，氬氣保護(hù)下室溫反應(yīng)。TLC(PE:EA= 1: 1，Rf= 0. 8)檢測，反應(yīng)完全。用甲醇除去反應(yīng)液中多余的醋酸酐，并用乙酸乙酯萃取，有 機(jī)相用水洗滌兩次，再用飽和碳酸氫鈉溶液與飽和氯化鈉溶液分別洗滌兩次，無水硫酸鈉 干燥。過濾，減壓濃縮，硅膠柱層析（PE:EA= 1:1)。得棕色粘稠狀固體15(624mg，65. 0% )。 4 匪R(300MHz，CDC13)δ:5· 01 (m，1H)，4. 42-4. 29(m，3H)，4. 23-4. 14(m，2H)，4. 04-3. 94 (m, 1H), 2. 77-2. 61 (m, 2H, -8??), 2. 11 (s, 3H, -OAc), 2. 09 (s, 3H, -OAc), 1. 55 (s, 3H,-CH3),1. 34 (s, 3H, -CH3),1. 27 (t,J= 7. 4Hz, 3H, ~SCH,CH,).
[0068] 實(shí)施例13化合物16的制備
[0069] 100ml前形瓶，加入化合物 9 (1. 23g, 3. 54mmol)和 15 (1. 0g, 2. 36mmol)，加入 15ml 二氯甲烷將其溶解，再加入粉末狀分子篩l.Og，混勻，氬氣保護(hù)下室溫?cái)嚢柽^夜。再向反應(yīng) 體系中加入NIS(1. 60g，7. 09mmol)，繼續(xù)攪拌lh;將反應(yīng)體系轉(zhuǎn)移至冰水浴中，并向其中加 入Ag0Tf(61mg，0·21mmol)，反應(yīng)lh。TLC(PE:EA= 2:l，Rf=0·4)檢測，反應(yīng)完全。抽濾 (硅藻土助濾），用二氯甲烷洗滌濾餅，收集濾液，有機(jī)相用15%硫代硫酸鈉洗滌兩次，飽和 碳酸氫鈉溶液與飽和氯化鈉溶液分別洗滌兩次，無水硫酸鈉干燥。過濾，減壓濃縮，硅膠柱 層析（PE:EA= 4:1 ~PE:EA= 3:1)。得淺棕色固體 16(1. 0g, 59. 8% )。HR-MSCalcdfor C32H43N3015 [M+Na] +:732. 2592 ;found:732. 2587。
[0070] 實(shí)施例14目標(biāo)化合物1的制備
[0071] 100ml茄形瓶，加入 16(820mg，1. 16mmol)，15ml65%的乙酸將其溶解，75°(：條件 下加熱反應(yīng)1.5h。TLC(EA，Rf=0. 3)檢測，反應(yīng)完全。停止加熱，冷卻至室溫。反應(yīng)液用 乙酸乙酯萃取，有機(jī)相用水洗滌兩次，再用飽和碳酸氫鈉溶液與飽和氯化鈉溶液分別洗滌 兩次，無水硫酸鈉干燥。過濾，減壓濃縮，硅膠柱層析（PE:EA= 3:1~PE:EA= 2:1)。得棕 色固體l(360mg, 46.5% )。
[0072] 實(shí)施例15GM3的制備
[0073]
[0074] 目標(biāo)化合物1與N-乙酰神經(jīng)氨酸、親脂的神經(jīng)酰胺（Cer)等通過一系列反應(yīng)合成 GM3。經(jīng)1HNMR分析為GM3,得率高。
[0075] 以上所述僅是本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式，應(yīng)當(dāng)指出，對于本技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人 員，在不脫離本發(fā)明方法的前提下，還可以做出若干改進(jìn)和補(bǔ)充，這些改進(jìn)和補(bǔ)充也應(yīng)視為 本發(fā)明的保護(hù)范圍。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種用于合成GM3的關(guān)鍵中間體二糖化合物，所述的關(guān)鍵中間體二糖化合物的結(jié)構(gòu) 式為：2. 如權(quán)利要求1所述的關(guān)鍵中間體二糖化合物的制備方法，其特征在于，所述的制備 方法以葡萄糖為起始原料通過一系列反應(yīng)得到單糖受體化合物9 ;以半乳糖為起始原料通 過一系列反應(yīng)得到單糖供體化合物15 ;然后單糖受體化合物9和單糖供體化合物15通過 糖苷化脫保護(hù)得到目標(biāo)化合物；其中，單糖受體化合物9的結(jié)構(gòu)式為：單糖供體化合物15的結(jié)構(gòu)式為：3. 如權(quán)利要求1所述的關(guān)鍵中間體二糖化合物的制備方法，其特征在于，所述的制備 方法的合成路線為：4. 如權(quán)利要求1所述的關(guān)鍵中間體二糖化合物在制備抗腫瘤疫苗中的應(yīng)用。5. 如權(quán)利要求1所述的關(guān)鍵中間體二糖化合物在制備GM3中的應(yīng)用。
【專利摘要】本發(fā)明涉及基于抗腫瘤疫苗GM3關(guān)鍵中間體二糖化合物，屬于寡糖合成技術(shù)領(lǐng)域，其結(jié)構(gòu)式為：該化合物適用于腫瘤疫苗GM3的合成研究。本發(fā)明還提供了該化合物的制備方法，合成路線簡潔，操作簡單，原料成本低，通用性強(qiáng)，糖基化反應(yīng)立體選擇性好，適用于各類寡糖化合物的合成。
【IPC分類】C07H15/04, C07H1/00, C07H15/18
【公開號】CN105418700
【申請?zhí)枴緾N201510821929
【發(fā)明人】俞世沖, 白國靜, 吳俊琪, 李冉, 柴曉云, 汪亭, 王保剛, 丁紅梅, 蔡妹藝, 蔡藝, 孟慶國, 吳秋業(yè)
【申請人】中國人民解放軍第二軍醫(yī)大學(xué)
【公開日】2016年3月23日
【申請日】2015年11月24日