r>[0044] 2,2-二氟苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯稠雜環(huán)聯(lián)7-氟-3,4-二氫異喹啉（11-5)的合成 方法同實(shí)施例1，收率75%，其相關(guān)結(jié)構(gòu)表征數(shù)據(jù)如下：
[0045] 4NMR(600MHz，αχη3):δ7·20-7.18(m，2H) ,7.03-6.98(m，3H)，6.86((1,J= 8.4Hz， lH)，3.69-3.66(m，2H)，2.91-2.89(t，J=6.6Hz，2H).MS(EI):m/z305[M+]·
[0046] 實(shí)施例6 4-七氟異丙基苯環(huán)聯(lián)6,7-二甲氧基-3,4-二氫異喹啉（Π-6)的合成
[0048] 4-七氟異丙基苯環(huán)聯(lián)6，7-二甲氧基-3，4-二氫異喹啉（Π-6)的合成方法同實(shí)施例 1，收率68 %，其相關(guān)結(jié)構(gòu)表征數(shù)據(jù)如下：
[0049] 4NMR(600MHz，CDC13):S7.62((1,J= 9.0Hz，2H)，7.50((1,J= 9.0Hz，2H)，6.94(s， 1H)，6.82(s，lH),3.91(s，3H),3.85-3.83(m，2H)，3.73(s，3H),2.75-2.72(m，2H);MS(EI): m/z435[M+],
[0050] 實(shí)施例7 4-七氟異丙基苯環(huán)聯(lián)6,7-二甲基-3,4-二氫異喹啉（Π-7)的合成
[0052] 4-七氟異丙基苯環(huán)聯(lián)6,7_二甲基-3,4-二氫異喹啉（Π-7)的合成方法同實(shí)施例1， 收率69 %，其相關(guān)結(jié)構(gòu)表征數(shù)據(jù)如下：
[0053] 4NMR(600MHz，CDC13):S7.61((1,J= 9.0Hz，2H)，7.49((1,J= 9.0Hz，2H)，6.89(s， 1H)，6.79(s，1H)，3.84-3.82(m，2H)，2.73-2.70(m，2H)，2.30(s，3H)，2.28(s，3H);MS(EI): m/z403[M+] ·
[0054] 實(shí)施例8苯環(huán)聯(lián)7-氯-3,4_二氫異喹啉（Π-8)的合成
[0056] 苯環(huán)聯(lián)7-氯-3，4_二氫異喹啉（Π-8)的合成方法同實(shí)施例1，收率78%，其相關(guān)結(jié) 構(gòu)表征數(shù)據(jù)如下：
[0057] 4NMR(600MHz，CDC13):S7.57((1,J= 6.6Hz，2H)，7.44((1,J= 7.2Hz，3H)，7.35((1,J = 8·4Ηζ，1H)，7·24(s，lH)，7.20(d，J= 7.2Hz，lH) ,3.84-3.82(t，J= 6.6Hz，2H) ,2.76-2.74 (t，J= 6.6Hz，2H);GC-MS(EI):m/z241[M+]·
[0058] 實(shí)施例9所合成芳環(huán)或稠雜環(huán)聯(lián)3，4_二氫異喹啉類共輒結(jié)構(gòu)化合物的單胺氧化 酶抑制活性的測(cè)試
[0059] (1)樣品配制
[0060] 將實(shí)施例1~8制備的化合物（π-l)~（Π-8)溶于二甲基亞砜(DMS0)中，分別配成 0.5，1，10,25,50，100,200,400,800，160(^111〇1/1濃度梯度的樣品液，記為樣品1~8。
[0061] (2)芳環(huán)或稠雜環(huán)聯(lián)3,4_二氫異喹啉類共輒結(jié)構(gòu)化合物對(duì)單胺氧化酶-A抑制活性 測(cè)試檢測(cè)方法
[0062]分別向8份裝有371μ〇1酸緩沖液(pH=8.4)的EP管中加入15yL單胺氧化酶-A和10yL步驟（1)配制的樣品1~8混合，再將混合物在38°C水浴中反應(yīng)3h，然后分別向上述8份EP 管中加入2yL式（ΙΠ)所示的探針7-(3-氨基丙氧基)-4-甲基香豆素（20mmol/ml)和2yL的牛 血清蛋白（BSA，20mg/mL)，并把每個(gè)EP管置于38°C水浴中繼續(xù)反應(yīng)1.5h。與其同時(shí)需檢測(cè)未 加抑制劑的ΜΑ0-Α的酶活，即向裝有381μ〇1酸緩沖液(pH= 8.4)的EP管中加入15yL單胺氧 化酶-A(MAO-A)，在38°C水浴中反應(yīng)3h，再加入2yL探針（20mmol/ml)和2yL的BSA同樣也在38 °C水浴中反應(yīng)1.5h。
[0064] 最后在每個(gè)EP管(微量離心管）中取出100yL加入96孔板中并用全功能熒光分光光 度計(jì)（Aex/Aem= 365/460nm)(spectraMaxM,美國(guó)分子儀器公司）檢測(cè)樣品。根據(jù)所測(cè)的焚 光值計(jì)算樣品1~8的IC5Q，化合物（Π-l)~（Π-8)對(duì)單胺氧化酶-A活性抑制測(cè)試結(jié)果見表 1〇
[0065] 化合物的抑制效果用半數(shù)抑制濃度（IC5Q)來表示。IC5Q是指"反應(yīng)"被抑制一半時(shí) 抑制劑的濃度，化合物抑制能力越強(qiáng)，該數(shù)值越低。
[0066]IC5Q可以用以下方法計(jì)算：
[0067]1)檢測(cè)并計(jì)算只加酶與探針緩沖液的平均熒光強(qiáng)度(Fm);
[0068] 2)計(jì)算含有不同濃度梯度抑制劑的各組分酶的熒光強(qiáng)度(要扣除背景值）；
[0069 ] 3)根據(jù)不同濃度梯度抑制劑的各組分酶的熒光強(qiáng)度做抑制劑的濃度(C)與熒光強(qiáng) 度(F)之間關(guān)系的直線回歸，建立得到方程:F=aC+b(通過回歸直線確定方程系數(shù)a和截踞b)；
[0070] 4)根據(jù)方程，求F= 1/2FM下的對(duì)應(yīng)的抑制劑濃度，即可求出抑制率為50 %時(shí)的抑 制劑濃度，即為IC50
[0071] (3)芳環(huán)或稠雜環(huán)聯(lián)3,4_二氫異喹啉類共輒結(jié)構(gòu)化合物對(duì)單胺氧化酶-B抑制活性 測(cè)試
[0072]將單胺氧化酶A換成單胺氧化酶B，樣品配制及操作同步驟(2)，結(jié)果如表1所示。
[0073]表1實(shí)施例1~8制備的芳環(huán)或稠雜環(huán)聯(lián)3,4_二氫異喹啉類共輒結(jié)構(gòu)化合物（Π- 1)~（Π-8)對(duì)單胺氧化酶A和B的抑制活性[a]
[0074]
[0075] [a]抑制劑的活性用IC5Q表示，每個(gè)樣品做5個(gè)濃度梯度，每組3個(gè)平行；[b]對(duì)酶的 選擇性用SI表示，SI:selectivityindex=IC5Q(MA〇-A)/IC5〇(MA〇-B); [c]ND表示抑制活活 性很小。
[0076]從表1可以看出，（Π-1)~（Π-7)對(duì)單胺氧化酶A都有抑制活性，其中化合物（11-1)、（Π-6)、（Π-7)對(duì)單胺氧化酶A有較強(qiáng)抑制活性；（Π-1)~（Π-8)對(duì)單胺氧化酶B都有抑 制活性，其中化合物（Π-1)~（Π-7)對(duì)單胺氧化酶B有較強(qiáng)抑制活性，特別是化合物（Π- 6)、（Π-7)有極強(qiáng)的抑制活性。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種芳環(huán)或稠雜環(huán)聯(lián)3，4-二氫異喹啉類共輒結(jié)構(gòu)化合物，其結(jié)構(gòu)如式（Π )所示：其中，R\R2各自獨(dú)立為H、&~C4烷基、&~C4烷氧基、F、C1; R3、R4各自獨(dú)立為H、F或F取代的&~C4烷基，并且，1^、1?2、1? 3、1?4中至少一個(gè)為?或(：1或?取 代的&~C4烷基； 或者R3、R4環(huán)合形成F取代的氧雜環(huán)。2. 如權(quán)利要求1所述的芳環(huán)或稠雜環(huán)聯(lián)3，4-二氫異喹啉類共輒結(jié)構(gòu)化合物，其特征在 于:所述的F取代的&~C4烷基為全氟取代的&~C4烷基。3. 如權(quán)利要求1或2所述的芳環(huán)或稠雜環(huán)聯(lián)3，4-二氫異喹啉類共輒結(jié)構(gòu)化合物，其特征 在于:R3、R 4環(huán)合形成全氟取代的氧雜環(huán)。4. 如權(quán)利要求3所述的芳環(huán)或稠雜環(huán)聯(lián)3，4-二氫異喹啉類共輒結(jié)構(gòu)化合物，其特征在 于:R3、R4環(huán)合形成全氟取代的二氧雜環(huán)戊烯。5. 如權(quán)利要求1所述的芳環(huán)或稠雜環(huán)聯(lián)3，4-二氫異喹啉類共輒結(jié)構(gòu)化合物，其特征在 于:所述的芳環(huán)或稠雜環(huán)聯(lián)3，4-二氫異喹啉類共輒結(jié)構(gòu)化合物為下列之一：0 、F 〇6. 如權(quán)利要求1所述的芳環(huán)或稠雜環(huán)聯(lián)3，4-二氫異喹啉類共輒結(jié)構(gòu)化合物在制備單胺 氧化酶抑制劑中的應(yīng)用。7. 如權(quán)利要求6所述的應(yīng)用，其特征在于:所述的單胺氧化酶抑制劑為單胺氧化酶B抑 制劑。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種芳環(huán)或稠雜環(huán)聯(lián)3,4-二氫異喹啉類共軛結(jié)構(gòu)化合物及其應(yīng)用，所述芳環(huán)或稠雜環(huán)聯(lián)3,4-二氫異喹啉類共軛結(jié)構(gòu)化合物的結(jié)構(gòu)如式(Ⅱ)所示，其中，R1、R2各自獨(dú)立為H、C1～C4烷基、C1～C4烷氧基、F、Cl；R3、R4各自獨(dú)立為H、F或F取代的C1～C4烷基；并且，R1、R2、R3、R4中至少一個(gè)為F或Cl或F取代的C1～C4烷基；或者R3、R4環(huán)合形成F取代的氧雜環(huán)。本發(fā)明提供了所述芳環(huán)或稠雜環(huán)聯(lián)3,4-二氫異喹啉類共軛結(jié)構(gòu)化合物在制備單胺氧化酶(MAO)抑制劑中的應(yīng)用，該類化合物對(duì)單胺氧化酶具有顯著的抑制作用。
【IPC分類】A61K31/4725, A61P25/16, C07D405/04, C07D217/14, A61P25/24, A61K31/472
【公開號(hào)】CN105461626
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510955597
【發(fā)明人】王宇光, 朱冰春, 李欽
【申請(qǐng)人】浙江工業(yè)大學(xué)
【公開日】2016年4月6日
【申請(qǐng)日】2015年12月17日