一種堿水-超聲波協(xié)同提取植物中有機(jī)酸的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001 ]本發(fā)明涉及植物提取技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種植物中有機(jī)酸的提取方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 有機(jī)酸類（Organic acids)是分子結(jié)構(gòu)中含有羧基(一C00H)的化合物。在中草藥 的葉、根、特別是果實(shí)中廣泛分布，如烏梅、五味子，覆盆子等。常見的植物中的有機(jī)酸有脂 肪族的一元、二元、多元羧酸如酒石酸、草酸、蘋果酸、枸椽酸、抗壞血酸（即維生素 C)等，亦 有芳香族有機(jī)酸如苯甲酸、水楊酸、咖啡酸(Caffelc acid)等。除少數(shù)以游離狀態(tài)存在外， 一般都與鉀、鈉、鈣等結(jié)合成鹽，有些與生物堿類結(jié)合成鹽。脂肪酸多與甘油結(jié)合成酯或與 高級(jí)醇結(jié)合成蠟。
[0003] 常規(guī)的植物有機(jī)酸的提取方法一般有水提法、有機(jī)溶劑提取法、超聲波提取法等。 例如中國專利201310472558.5"食用土當(dāng)歸總有機(jī)酸提取純化工藝"先采用乙醇回流提取， 加入NaCl進(jìn)行鹽析，再加入低價(jià)(極)性有機(jī)溶劑萃取，加入Κ0Η進(jìn)行堿化處理，加濃鹽酸 進(jìn)行酸沉，加入NaCl進(jìn)行鹽析，再加入低價(jià)性有機(jī)溶劑萃取，最后進(jìn)行濃縮減壓干燥，即得 到食用土當(dāng)歸總有機(jī)酸提取物。中國專利申請(qǐng)201410169677.8 "核桃柏提取物及其制備方 法和應(yīng)用"是把核桃柏經(jīng)石油醚或超臨界提取后過濾得濾渣，濾渣再用水或醇溶液提取， 減壓濃縮得浸膏，浸膏總有機(jī)酸含量在30%以上。中國專利201110239056.9"芫根有機(jī)酸制 備降血糖藥物的用途"將芫根原料用乙醇溶液浸泡，加熱回流提取數(shù)次，合并提取液，過 濾;減壓濃縮成浸膏；浸膏加少量水溶解，大孔吸附樹脂吸附，洗脫，收集洗脫液，濃縮、干 燥，芫根有機(jī)酸得率為〇. 5~2重量％，純度為41 %~77 %。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種堿水-超聲波協(xié)同提取植物中有機(jī)酸的方 法，該方法相比于現(xiàn)有的提取方法具有提取率更高，工藝穩(wěn)定，重復(fù)性好，精密度高，省時(shí)節(jié) 能、安全可靠、操作簡(jiǎn)單的優(yōu)點(diǎn)。
[0005] 本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題通過以下技術(shù)方案予以實(shí)現(xiàn)： 一種堿水-超聲波協(xié)同提取植物中有機(jī)酸的方法:取待提植物，加工成粉末或小塊，加 堿性水溶液，超聲波提取，濾過，濾液用稀酸調(diào)節(jié)pH至酸性，靜置，過濾，所得沉淀物即所提 植物的有機(jī)酸。
[0006] 優(yōu)選的，所述堿性水溶液為氫氧化鈉水溶液、磷酸氫二鈉水溶液、磷酸二氫鈉水溶 液、磷酸氫鈉水溶液、磷酸鈉水溶液中的一種，優(yōu)選為氫氧化鈉水溶液。
[0007] 優(yōu)選的，所述堿性水溶液的濃度為0.8~1.2 mol · I/1。
[0008] 優(yōu)選的，所述堿性水溶液的pH為9~11。
[0009]優(yōu)選的，濾液用稀酸調(diào)節(jié)pH至3~5。
[0010] 優(yōu)選的，所述待提取的植物與堿性水溶液的料液比為1~10:10。
[0011] 優(yōu)選的，超聲提取的溫度為50~80°C。
[0012]更進(jìn)一步優(yōu)選的，所述堿性水溶液的濃度為1. o mol · I/1，堿性水溶液的pH為10， 濾液用稀酸調(diào)節(jié)pH至4,所述待提取的植物與堿性水溶液的料液比為1:10。所述植物為草珊 瑚。
[0013] 本發(fā)明具有如下有益效果： 本發(fā)明的提取方法中，超聲波具有剪切作用和沖擊波能，使植物細(xì)胞璧破碎或變形，細(xì) 胞內(nèi)化學(xué)成分容易滲出，堿能與有機(jī)酸結(jié)合生成鹽，提高有機(jī)酸從細(xì)胞內(nèi)滲出的速度和滲 出量，從而提高提取效率，再通過酸化作用，使有機(jī)酸游離出來，去除大部分的雜質(zhì)，所得產(chǎn) 品純度更高。本發(fā)明的堿水-超聲波法提取草珊瑚中有機(jī)酸類成分，工藝穩(wěn)定，提取率提高， 雜質(zhì)減少，操作簡(jiǎn)單、速度快。
【附圖說明】 [0014] 圖1為富馬酸與草珊瑚吸收光譜圖。
[0015] 圖2為富馬酸標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。
[0016] 圖3堿種類-吸光度變化。
[0017] 圖4堿液濃度-吸光度變化。
[0018] 圖5堿水pH-吸光度變化。
[0019]圖6沉淀pH值-吸光度變化。
[0020]圖7提取時(shí)間-吸光度變化。
[0021]圖8提取溫度-吸光度變化。
[0022]圖9料液比-吸光度變化。
【具體實(shí)施方式】
[0023]下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)的說明，實(shí)施例僅是本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式， 不是對(duì)本發(fā)明的限定。
[0024]下面以草珊瑚為例，通過實(shí)驗(yàn)來說明本發(fā)明的效果： 草珊瑚，又叫腫節(jié)風(fēng)、九節(jié)茶、滿山香、九節(jié)風(fēng)、接骨木等，為金粟蘭科植物草珊瑚 (Sarcandra glabra(Thunb.) Nakai)的干燥全草，含黃酮、有機(jī)酸、酸酸、縣質(zhì)、香豆素和內(nèi) 酯等成分，具有清熱涼血、鎮(zhèn)痛消炎、活血通絡(luò)、祛風(fēng)消斑等作用，已有草珊瑚含片、腫節(jié)風(fēng) 注射液等多種劑型上市。王鋼力、羅永明等發(fā)現(xiàn)草珊瑚含24種有機(jī)酚酸，如富馬酸、琥珀酸、 原兒茶酸、棕櫚酸、硬脂酸、綠原酸、迷迭香酸。
[0025] 1實(shí)驗(yàn)材料與方法 實(shí)驗(yàn)藥品 富馬酸(北京百靈威科技有限公司產(chǎn)品），分析純?cè)噭?。草珊瑚藥材?014年10月購于廣 西南寧北京同仁堂藥店，經(jīng)筆者鑒定為金粟蘭科植物草珊瑚[Sarcandra glabra(Thunb.) Nakai ]的干燥全草，粉碎成粗粉，備用。
[0026] 主要儀器設(shè)備 三源超聲波清洗器(東莞三源超聲波設(shè)備有限公司產(chǎn)品）;UV-2550島津-紫外可見分光 光度計(jì)(深圳市瑞盛科技有限公司銷售）;pH計(jì)(上海一恒科學(xué)儀器有限公司產(chǎn)品）。
[0027]實(shí)驗(yàn)方法 1標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備 對(duì)照品溶液的制備精密稱取10 mg富馬酸，60%乙醇溶解并定容到25 mL量瓶中，搖 勾，即得。
[0028]樣品溶液的制備精密稱取草珊瑚粉末0.500 g，置具塞錐形瓶中，加60%乙醇20 mL，密塞，混勻，超聲提取30 min，濾過，取續(xù)濾液1 mL置10 mL量瓶中，加60%乙醇至刻度， 搖勻，即得。光譜掃描取對(duì)照品溶液和樣品溶液各1 mL，分別置10 mL量瓶中，依次加無水 乙醇2 mL、0.08 mol · L-1的鹽酸羥胺溶液1 mL、0.04 mol · L-1的DCC溶液1 mL，搖勻，60 °C水浴15 min，加0.04 mol .Γ1的高氯酸鐵溶液1 mL，加無水乙醇至刻度，搖勻，在200~700 nm的范圍進(jìn)行波長掃描。結(jié)果表明，富馬酸與草珊瑚吸收光譜圖相似，在520 nm處有最大吸 收波長，見圖1。
[0029]標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制分別取對(duì)照品溶液1~6 mL置10 mL量瓶中，加甲醇至刻度。按上 法在520 nm處測(cè)定吸光度，以濃度為橫坐標(biāo)，以吸光度為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方 程式7= 0.00451+0.0099，相關(guān)系數(shù)妒=0.9992，結(jié)果表明，富馬酸在40~240以8.1111/1濃度 范圍內(nèi)與吸光度呈良好的線性關(guān)系，見圖2。
[0030] 2提取方法的比較 冷浸法取0.5 g草珊瑚粉末，精密稱定，置具塞錐形瓶中，加10倍量水，密塞，室溫放 置3 d，每天振搖2次，每次5 min，濾過。
[0031] 煎煮法取0.5 g草珊瑚粉末，精密稱定，置不銹剛鍋中，加10倍量水，浸泡30 min 后，加熱到沸，改用小火，保持微沸120 min，濾過。
[0032] 微波萃取法取0.5 g草珊瑚粉末，精密稱定，置具塞錐形瓶中，加 10倍量水，浸泡 30 min置微波爐中，60 °C提取30 min，濾過。
[0033]超聲波提取法取0.5g草珊瑚粉末，精密稱定，置具塞錐形瓶中，加10倍量水，浸 泡30 min密塞，置超聲波清洗器中，60 °C提取5 min，濾過。
[0034]以上各法所得濾液均置10 mL量瓶中，加水至刻度，搖勻，60 min內(nèi)按上法測(cè)定吸 光度