一種具有抗癌活性的化學物質及其制備方法與應用
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種具有抗癌活性的化學物質及其制備方法與應用，屬于化學合成藥物技術領域。解決了如何提供一種細胞毒性低、耐藥性低、抗腫瘤活性高的化學物質的問題。本發(fā)明的具有抗癌活性的化學物質為結構式如式(I)所示的化合物，或者為結構式如式(II)所示的化合物，或者為結構式如式(I)所示的化合物和結構式如式(II)所示的化合物的混合物。該化學物質通過青蒿琥酯與鉑(IV)化合物進行配合作用獲得，既通過引入青蒿琥酯配體，降低了鉑(IV)化合物的細胞毒性，又提高了鉑(IV)化合物的抗腫瘤活性，且耐藥性低，在制備抗癌藥物中具有廣泛應用。
【專利說明】
一種具有抗癌活性的化學物質及其制備方法與應用
技術領域
[0001] 本發(fā)明涉及化學合成藥物技術領域，尤其涉及一種具有抗癌活性的化學物質及其 制備方法與應用。
【背景技術】
[0002] 自從1967年人們發(fā)現順鉑有抗癌活性以來，鉑類金屬抗癌藥物的研究和應用得到 長久的發(fā)展，目前已經對幾千個鉑系列化合物進行了篩選，其中有幾十個化合物進入臨床 研究，有幾個已獲批準進入市場。
[0003] 其中，鉑（11)(表示二價鉑)在化療中已經得到了廣泛的運用，比如順式二氯二氨 合鉑（II)，也稱順鉑(cisplatin)，為一種周期性非特異性藥物，是臨床用量最大的二價鉑 類藥物，其能與DNA結合形成交叉鍵，從而破壞DNA的復制功能。臨床實踐證明順鉑具有抗癌 譜廣，作用強，與多種抗腫瘤藥具有協同作用，且無交叉耐藥等特點，廣泛用于卵巢癌，前列 腺癌，睪丸癌，肺癌，鼻咽癌，食道癌，惡性淋巴瘤，乳腺癌等實體腫瘤的治療。然而順鉑具有 重度消化道反應，骨髓抑制，聽神經毒性以及容易對腎臟造成不可逆損傷等毒副作用限制 了其治療指數的提高。同時，低水溶性與高毒副反應也是其它二價鉑類藥物普遍存在的問 題。除此以外，在生理條件下，鉑(II)有較高的反應活性，因此具有較低的穩(wěn)定性，往往在鉑 (II)到達目標癌細胞之前，大部分已經與GSH、金屬硫蛋白等生物活性分子結合而失活了， 而且癌細胞對鉑（II)往往具有先天或者后天可獲得耐藥性。上述種種原因限制了鉑（II)化 合物的應用。
[0004] 經研究發(fā)現，鉑（IV)(表示四價鉑)化合物與鉑（II)化合物相比，在豎直軸上多了 兩個配體，空間上形成八面體結構，因而具有動力學惰性，具有較低的反應活性，較小的毒 副作用。此外通過修飾豎直軸的結構，可以改變鉑(IV)化合物的還原電勢，以便在細胞內條 件下迅速還原為鉑（II )，發(fā)揮抗癌療效。親脂修飾還能增強親脂性，提高細胞攝取的效率， 提尚療效。
[0005] 到目前為止，最具有代表性的四價鉬藥為Satraplat in，其可以口服給藥。該藥由 美國Bristol-Squibb公司、英國Johnson Matthey公司和癌癥研究所共同開發(fā)，于1992年進 入臨床試驗，現已進入臨床ΠI期。但在療效方面，與順鉑、卡鉑比較，Satrap lat i η除具有口 服活性外優(yōu)勢并不突出，抗腫瘤活性有待進一步提高。
[0006] 青蒿素(artemisinin)是我國首次從菊科蒿屬(艾屬)黃花蒿中分離、鑒定出的抗 瘧藥物，經大量的研究及觀察發(fā)現青蒿素對搶救和治療腦型瘧疾和惡性瘧疾等療效顯著。 此后一系列有活性并可溶于油或水的衍生物被開發(fā)出來，青蒿琥酯(Art eSUnate，Art)即是 青蒿素的衍生物之一。除了良好的抗瘧疾作用外，近年來，研究發(fā)現青蒿素及其衍生物在抗 腫瘤方面也有著良好的應用前景，可選擇性殺傷腫瘤細胞、誘導腫瘤細胞凋亡、抑制腫瘤生 長，且毒副作用小，并且和某些藥物還有協同作用，可增強抗癌藥物的療效，提升腫瘤細胞 對化療藥物的敏感性，減少抗癌藥物的副作用，延緩耐藥性的發(fā)生。

【發(fā)明內容】

[0007] 有鑒于此，本發(fā)明的目的是如何提供一種具有抗癌活性的化學物質及其制備方法 與應用，該化學物質的細胞毒性低、耐藥性低、抗腫瘤活性高。
[0008] 本發(fā)明提供一種具有抗癌活性的化學物質，該化學物質為結構式如式（I)所示的 化合物，或者為結構式如式(II)所示的化合物，或者為結構式如式(I)所示的化合物和結構 式如式(II)所示的化合物的混合物：
[0011] 式(I)和式(II)中
：)以下結構中的一種：
[0012]
[0013] 本發(fā)明還提供一種具有抗癌活性的化學物質的制備方法，包括以下步驟：
[0014] A)將鉑（II)化合物與雙氧水反應，得到鉑（IV)化合物；
[0015] 所述鉬（II)化合物》
頓鉬Cisplatin)
(奧 沙利鉬Oxaliplatin)
(pyAA_Pt_Cl2)或
CHAA_Pt_Cl2);
[0016] B)無水無氧條件下，將步驟A)得到的鉑（IV)化合物與青蒿琥酯在縮合劑存在的條 件下進行反應，得到具有抗癌活性的化學物質。
[0017]優(yōu)選的，所述步驟B)中，鉬(IV)化合物和青蒿琥酯的摩爾比為1:(0.8~1.2)，青蒿 琥酯和縮合劑的摩爾比為1: (1~1.2)，得到結構式如式(I)所示的化合物。
[0018]優(yōu)選的，所述步驟B)中，鉑（IV)化合物和青蒿琥酯的摩爾比為1: (1.5~3)，青蒿琥 酯和縮合劑的摩爾比為1: (1~1.2)，得到結構式如式(II)所示的化合物。
[0019]優(yōu)選的，所述步驟A)中，雙氧水的體積與鉬（II)化合物的摩爾比為（5mL~15mL): (lmmol~3mmol)〇
[0020]優(yōu)選的，所述步驟A)中，鉑（II)化合物與雙氧水的反應在避光條件下進行。
[0021 ]優(yōu)選的，所述步驟A)中，鉑（II)化合物與雙氧水的反應溫度為室溫，反應時間為5 ~10h〇
[0022]優(yōu)選的，所述步驟B)中，縮合劑為N，N'_二環(huán)己基碳二亞胺(DCC)、1_羥基苯并三唑 (Η0ΒΤ)或N-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(EDC.HC1)。
[0023]優(yōu)選的，所述步驟B)中，反應的溶劑為N，N'_二甲基甲酰胺(DMF)。
[0024] 優(yōu)選的，所述步驟B)中，反應的溫度為0°C~20°C，時間為16h~24h。
[0025] 本發(fā)明還提供上述具有抗癌活性的化學物質在制備抗癌藥物中的應用。
[0026] 與現有技術相比，本發(fā)明的有益效果是：
[0027] 1、本發(fā)明的具有抗癌活性的化學物質，核心為結構式為式（I)和式（II)所示的化 合物，該化合物是以青蒿琥酯為軸向配體的鉑（IV)配合物，通過青蒿琥酯與鉑（IV)化合物 進行配合作用獲得，既通過引入青蒿琥酯配體，降低了鉑(IV)化合物的細胞毒性，又提高了 鉑(IV)化合物的抗腫瘤活性，且耐藥性低。經細胞毒性實驗結果表明，本發(fā)明提供的鉑（IV) 配合物對癌細胞（如人乳腺癌MCF-7細胞，人宮頸癌HeLa細胞，人肝癌HepG2細胞人肺腺癌 A549細胞)有很好的殺傷效果，對順鉑耐藥的人肺腺癌A549/DDP細胞也有很好的殺傷效果， 且細胞毒性低，能夠作為抗腫瘤藥物應用。
[0028] 2、本發(fā)明的具有抗癌活性的化學物質的制備方法簡單易行，無需采用特殊設備和 工藝，成本低、適用于工業(yè)化生產。
【附圖說明】
[0029] 圖1是本發(fā)明實施例1制備的化合物1的紅外吸收譜圖；
[0030]圖2是本發(fā)明實施例1制備的化合物1的核磁共振Η譜圖；
[0031] 圖3是本發(fā)明實施例1制備的化合物1的質譜圖；
[0032] 圖4是本發(fā)明實施例5制備的化合物2的紅外吸收譜圖；
[0033] 圖5是本發(fā)明實施例5制備的化合物2的核磁共振Η譜圖；
[0034]圖6是本發(fā)明實施例5制備的化合物2的質譜圖。
【具體實施方式】
[0035]為了進一步了解本發(fā)明，下面結合【具體實施方式】對本發(fā)明的優(yōu)選實施方案進行描 述，但是應當理解，這些描述只是為進一步說明本發(fā)明的特征和優(yōu)點而不是對本發(fā)明專利 要求的限制。
[0036]本發(fā)明的具有抗癌活性的化學物質，為式(I)結構的化合物，或者式(II)結構的化 合物，或者式(I)結構的化合物和式(Π )結構的化合物的混合物，其中，式(I)結構的化合物 和式（II)結構的化合物是以青蒿琥酯為軸向配體的鉑（IV)配合物(式（I)和式（II)結構在 上文中已經給出，此處不再贅述)該化學物質的細胞毒性低、耐藥性低、抗腫瘤活性高。
[0037] 上述具有抗癌活性的化學物質的制備方法，步驟如下：
[0038] A)將鉑（II)化合物與雙氧水在避光條件下攪拌反應，反應溫度為室溫，反應時間 為5~10h，反應結束后，提純(提純過程一般為過濾），得到黃色粉末，即為鉑(IV)化合物；
[0039] 其中，鉬（II)化合物為順鉬Cisplatin、奧沙利鉬0xaliplatin、pyAA-Pt_Cl2或 CHAA-Pt-Cl2，本發(fā)明對其來源并無特殊要求，可以為一般市售;雙氧水無特殊要求，優(yōu)選為 30%的雙氧水；雙氧水的體積與鉑（11)化合物的摩爾比優(yōu)選為（511^~1511^):(11]1111〇1~ 3mmο1);
[0040] 步驟A)的反應式如下(式中，Mi、M2、M3、M4均代表取代基，具體根據鉑（II)化合物的 結構確定，鉑(II)化合物上文中已給出，此處不再贅述）：
[0041]
[0042] B)無水無氧條件下，將步驟A)得到的鉑（IV)化合物與青蒿琥酯在縮合劑存在的條 件下進行酯化反應，得到具有抗癌活性的化學物質，具體根據反應物配比不同，所得產物不 同，優(yōu)選可以分為B1)、B2)、B3)三種情況：
[0043] B1)制備式（I)結構所示的化合物:無水無氧條件下，將步驟A)得到的鉑（IV)化合 物與青蒿琥酯在縮合劑存在的條件下進行反應，鉑（IV)化合物和青蒿琥酯的摩爾比為1: (0.8~1.2)，優(yōu)選1:(1~1.2)，青蒿琥酯和縮合劑的摩爾比為1:(1~1.2)，反應結束后，提 純，得到白色固體粉末，即為式(I)結構所示的化合物；
[0044] B2)制備式(II)結構所示的化合物:無水無氧條件下，將步驟A)得到的鉑（IV)化合 物與青蒿琥酯在縮合劑存在的條件下進行反應，鉑（IV)化合物和青蒿琥酯的摩爾比為1: (1.5~3)，優(yōu)選1:(1.5-2.5)，青蒿琥酯和縮合劑的摩爾比為1:(1~1.2)，反應結束后，提 純，得到白色固體粉末，即式(II)結構所示的化合物；
[0045] B3)制備式(I)結構所示的化合物和式(II)結構所示的化合物的混合物，無水無氧 條件下，將步驟A)得到的鉑（IV)化合物與青蒿琥酯在縮合劑存在的條件下進行反應，鉑 (IV)化合物與青蒿琥酯的摩爾比小于1:1.2大于1:1.5，青蒿琥酯和縮合劑的摩爾比為1: (1 ~1.2)，反應結束后，提純，得到白色固體粉末，即式(I)結構所示的化合物和式(II)結構所 示的化合物的混合物；
[0046]其中，青蒿琥酯結構如式（III)所示，
[0047]
[0048]縮合劑優(yōu)選為DCC、H0BT或EDC. HC1，來源并無特殊要求，可以為一般市售；反應的 溶劑優(yōu)選為DMF，鉑（IV)化合物、青蒿琥酯和縮合劑溶解在溶劑中的順序沒有限制；反應的 溫度優(yōu)選為〇°C~20°C ;反應的時間優(yōu)選為16h~24h;提純過程優(yōu)選先抽干體系中的溶劑， 然后將剩余物質用丙酮溶解，并過濾掉不溶物，再將濾液濃縮后乙醚沉降，過濾得到固體并 真空抽干，即可得到產品。
[0049] 本發(fā)明的具有抗癌活性的化學物質在降低細胞毒性的同時依然能取得與順鉑相 當的抗癌活性，且耐藥性低，能夠在制備抗癌藥物中應用。
[0050] 為了進一步說明本發(fā)明，下面結合實施例對本發(fā)明提供的具有抗癌活性的化學物 質及其制備方法進行詳細描述。實施例1-14中的換氣采用惰性氣體即可，沒有特殊限制，如 氬氣。
[0051 ] 實施例1
[0052] 將順鉬（600mg, 2mmol)置于燒瓶中，再加入30%雙氧水1〇1111^，室溫避光攪拌811后， 過濾除去雙氧水得到Cisplatin(IV)-(OH)2的黃色粉末。
[0053] 將得到的Ci splat in (I V)-(OH) 2 ( 334mg，lmmol)，N，N'_二環(huán)己基碳二亞胺 (185.6mg，0.9mmol)置于干燥過的聚合瓶中，換氣三次，然后向其中加入5ml干燥過的DMF， 20°C下攪拌0.5h，加入青蒿琥酯(307.5mg 0.8mmol)，并在10°C下充分攪拌反應16h。然后抽 干體系中的DMF，將剩余物質用丙酮溶解，并過濾掉不溶物，將濾液濃縮后乙醚沉降，過濾所 得到固體并真空抽干得到化合物1，為白色固體粉末317.3mg。
[0054] 反應式如下：
[0055；
[0056]采用紅外吸收光譜、核磁共振、以及電噴霧質譜對制備的化合物1進行表征，表征 結果見圖1、圖2和圖3。圖1是本發(fā)明實施例1制備的化合物1的紅外吸收譜圖，其中，1643CHT1 和1746CHT1處的吸收峰為青蒿琥酯對應的羰基C = 0的伸縮振動峰，SSlcnf^SSlcnfiP 1115cnf1處的吸收峰為其-0-0-伸縮振動峰，3250cnf1處的吸收峰為順鉑氨基配體的伸縮振 動峰，SSOOcnf 1處為其-OH伸縮振動峰，圖1說明青蒿琥酯與順鉑成功進行了配位，得到了化 合物1;圖2是本發(fā)明實施例1制備的化合物1的核磁共振Η譜圖，其中，5.54-5.60ppm處的吸 收峰為青蒿琥酯上與橋氧相連的次甲基的質子氫峰，5.64-5.71ppm處的吸收峰為青蒿琥酯 上連接酯基的次甲基的質子氫峰;5.73-6.17ppm處的吸收峰為順鉑氨配體質子氫峰，可見 各質子氫的峰歸屬明確，且比例吻合，從而再次證明了化合物1的成功合成；圖3是本發(fā)明實 施例1制備的化合物1的質譜圖，其中最大的吸收峰m/z = 699為化合物1的分子離子峰，與其 分子量吻合。
[0057]圖1、圖2和圖3證明了本發(fā)明中，化合物1的成功制備。
[0058] 實施例2
[0059] 將順鉬（600mg, 2mmol)置于燒瓶中，再加入30%雙氧水1〇1111^，室溫避光攪拌811后， 過濾除去雙氧水得到Cisplatin(IV)-(OH)2的黃色粉末。
[0060] 將得到的<^8口13衍11(1￥)-(0!〇2(33411^，1111111〇1)4少'-二環(huán)己基碳二亞胺（226.8， 1. lmmol)置于干燥過的聚合瓶中，換氣三次，然后向其中加入5ml干燥過的DMF，20°C下攪拌 lh，加入青蒿琥酯(384.4mg, lmmol)，并在10°C下充分攪拌反應18h。然后抽干體系中的DMF， 將剩余物質用丙酮溶解，并過濾掉不溶物，將濾液濃縮后乙醚沉降，過濾所得到固體并真空 抽干得到化合物1，為白色固體粉末335mg。
[0061] 反應式如實施例1。
[0062] 實施例3
[0063] 將順鉬（600mg, 2mmol)置于燒瓶中，再加入30%雙氧水1〇1111^，室溫避光攪拌811后， 過濾除去雙氧水得到Cisplatin(IV)-(OH)2的黃色粉末。
[0064] 將得到的Ci splat in (I V)-(OH) 2 ( 334mg，lmmol)，N，N'_二環(huán)己基碳二亞胺 (237. lmg，l. 15mmol)置于干燥過的聚合瓶中，換氣三次，然后向其中加入7ml干燥過的DMF， l〇°C下攪拌lh，加入青蒿琥酯(422.9mg，l. llmmol)，并在10°C下充分攪拌反應18h。然后抽 干體系中的DMF，將剩余物質用丙酮溶解，并過濾掉不溶物，將濾液濃縮后乙醚沉降，過濾所 得到固體并真空抽干得到化合物1，為白色固體粉末330mg。
[0065] 反應式如實施例1。
[0066] 實施例4
[0067] 將順鉬（600mg, 2mmol)置于燒瓶中，再加入30%雙氧水1〇1111^，室溫避光攪拌811后， 過濾除去雙氧水得到Cisplatin(IV)-(0H)2的黃色粉末。
[0068] 將得到的Ci splat in (I V)-(0H) 2 ( 334mg，lmmol)，N，N'_二環(huán)己基碳二亞胺 (247.4mg，1.2mmol)以及青蒿琥酯(422.9mg, 1 · lmmol)置于干燥過的聚合瓶中，換氣三次， 然后向其中加入5ml干燥過的DMF，并在10°C下充分攪拌反應16h。然后抽干體系中的DMF，將 剩余物質用丙酮溶解，并過濾掉不溶物，將濾液濃縮后乙醚沉降，過濾所得到固體并真空抽 干得到化合物1，為白色固體粉末330mg。
[0069] 反應式如實施例1。
[0070] 實施例5
[0071 ] 將順鉬（60〇11^，21]11]1〇1)置于燒瓶中，再加入30%雙氧水1〇1111^，室溫避光攪拌811后， 過濾除去雙氧水得到Cisplatin(IV)-(OH)2的黃色粉末。
[0072] 將得到的Ci splat in (I V)-(OH) 2 ( 334mg，lmmol)，N，N'_二環(huán)己基碳二亞胺 (434.5mg，2. lmmol)，1-羥基苯并三唑（283.8mg，2. lmmol)，以及青蒿琥酯（768.8mg，2mmol) 置于干燥過的聚合瓶中，換氣三次，然后向其中加入l〇ml干燥過的DMF，并在10°C下充分攪 拌反應16h。然后抽干體系中的DMF，將剩余物質用丙酮溶解，并過濾掉不溶物，將濾液濃縮 后乙醚沉降，過濾所得到固體并真空抽干，得到化合物2,為白色固體粉末650mg。
[0073] 反應式如下：
[0074]
[0075] 采用紅外吸收光譜、核磁共振、以及電噴霧質譜對制備的化合物2進行表征，表征 結果見圖4、圖5和圖6。圖4是本發(fā)明實施例5制備的化合物2的紅外吸收譜圖，其中，1651 cnf1 和17450^1處的吸收峰為青蒿琥酯對應的羰基C = 0的伸縮振動峰，SSlcnr^SSlcnr1和 1115cnf1處的吸收峰為其-0-0-伸縮振動峰，3250cnf 1處的吸收峰為順鉑氨基配體的伸縮振 動峰，且其3500(3!!^處-OH伸縮振動峰消失，圖4說明青蒿琥酯與順鉑成功進行了配位，得到 了化合物2;圖5是本發(fā)明實施例5制備的化合物2的核磁共振Η譜圖，其中，5.54-5.60ppm處 的吸收峰為青蒿琥酯上與橋氧相連的次甲基的質子氫峰，5.64-5.71ppm處的吸收峰為青蒿 琥酯上連接酯基的次甲基的質子氫峰;6.25-6.67ppm處的吸收峰為順鉬氨配體質子氫峰， 可見各質子氫的峰歸屬明確，且比例吻合，從而再次證明了化合物2的成功合成；圖6是本發(fā) 明實施例5制備的化合物2的質譜圖，其中最大的吸收峰m/z = 1066為化合物2的分子離子 峰，與其分子量吻合。
[0076] 圖4、圖5和圖6證明了本發(fā)明中，化合物2的成功制備。
[0077] 實施例6
[0078] 將順鉑（600mg，2mmo 1)置于燒瓶中，再加入30 %雙氧水10mL，室溫避光攪拌8h后， 過濾除去雙氧水得到Cisplatin(IV)-(0H)2的黃色粉末。
[0079] 將得到的Ci splat in (I V)-(0H) 2 ( 334mg，lmmol)，N，N'_二環(huán)己基碳二亞胺 (639.2mg，3 · lmmol)，1-羥基苯并三唑（419mg，3 · lmmol)，以及青蒿琥酯（1153 · 2mg，3mmol) 置于干燥過的聚合瓶中，換氣三次，然后向其中加入15ml干燥過的DMF，并在5°C下充分攪拌 反應16h。然后抽干體系中的DMF，將剩余物質用丙酮溶解，并過濾掉不溶物，將濾液濃縮后 乙醚沉降，過濾所得到固體并真空抽干，得到化合物2,為白色固體粉末700mg。
[0080] 反應式如實施例5。
[0081 ] 實施例7
[0082] 將順鉑（600mg，2mmo 1)置于燒瓶中，再加入30 %雙氧水10mL，室溫避光攪拌8h后， 過濾除去雙氧水得到Cisplatin(IV)-(OH)2的黃色粉末。
[0083] 將得到的Ci splat in (I V)-(OH) 2 ( 334mg，lmmol)，N，N'_二環(huán)己基碳二亞胺 (536 · lmg，2·6mmol)，1-羥基苯并三挫（351 · 3mg，2·6mmol)，以及青蒿琥酯（961mg，2· 5mmol) 置于干燥過的聚合瓶中，換氣三次，然后向其中加入15ml干燥過的DMF，并在10°C下充分攪 拌反應18h。然后抽干體系中的DMF，將剩余物質用丙酮溶解，并過濾掉不溶物，將濾液濃縮 后乙醚沉降，過濾所得到固體并真空抽干，得到化合物2,為白色固體粉末720mg。
[0084] 反應式如實施例5。
[0085] 實施例8
[0086] 將順鉬（600mg, 2mmol)置于燒瓶中，再加入30%雙氧水1〇1111^，室溫避光攪拌811后， 過濾除去雙氧水得到Cisplatin(IV)-(OH)2的黃色粉末。
[0087] 將得到的(^8口]^1:;[11(1\0-(0!02(33411^，11111]1〇1)，1^，1^'-二環(huán)己基碳二亞胺（26811^， 2.6mmol)，1-羥基苯并三唑（175 · 7mg，2.6mmol)，以及青蒿琥酯（576 · 3mg，2 · 5mmol)置于干 燥過的聚合瓶中，換氣三次，然后向其中加入l〇ml干燥過的DMF，并在5°C下充分攪拌反應 24h。然后抽干體系中的DMF，將剩余物質用丙酮溶解，并過濾掉不溶物，將濾液濃縮后乙醚 沉降，過濾所得到固體并真空抽干，得到化合物2,為白色固體粉末750mg。
[0088] 反應式如實施例5。
[0089] 實施例9
[0090] 將CHAA-Pt-Cl2(764mg，2mmol)置于燒瓶中，再加入30%雙氧水10mL，室溫避光攪 拌8h后，過濾除去雙氧水得到CHAA-Pt(IV)-(0H)2的黃色粉末。
[0091]將得到的CHAA-Pt(IV)-(0H)2(410mg，lmmol)，N，N'_二環(huán)己基碳二亞胺（226.8， 1. lmmol)置于干燥過的聚合瓶中，換氣三次，然后向其中加入5ml干燥過的DMF，20°C下攪拌 lh，加入青蒿琥酯（384.4mg, lmmol)并在10°C下充分攪拌反應16h。然后抽干體系中的DMF， 將剩余物質用丙酮溶解，并過濾掉不溶物，將濾液濃縮后乙醚沉降，過濾得到固體并真空抽 干，得到白色固體粉末330mg。
[0092]反應式如下：
[0093]
[0094] 實施例10
[0095] 將CHAA-Pt-Cl2(764mg，2mmol)置于燒瓶中，再加入30%雙氧水10mL，室溫避光攪 拌8h后，過濾除去雙氧水得到CHAA-Pt(IV)-(0H) 2的黃色粉末。
[0096] 將得到的 CHAA-Pt(IV)-(0H)2(410mg，lmmol)，N，N'-二環(huán)己基碳二亞胺（639.2mg， 3. lmmol)，1-羥基苯并三唑(419mg，3. lmmol)以及青蒿琥酯（1153.2mg，3mmol)溶解于5ml干 燥的DMF中，并在5°C下充分攪拌反應24h。然后抽干體系中的DMF，將剩余物質用丙酮溶解， 并過濾掉不溶物，將濾液濃縮后乙醚沉降，過濾得到固體并真空抽干，得到白色固體粉末 700mg〇
[0097] 反應式如下：
[0098]
[0099] 實施例11
[0100] 將奧沙利鉑(795mg，2mmol)置于燒瓶中，再加入30%雙氧水10mL，室溫避光攪拌8h 后，過濾除去雙氧水得到〇xaliplatin(IV)-(OH)2的黃色粉末。
[0101 ]將得到的Oxal iplatin(IV)-(0H)2(431mg, lmmol)，N，N'_二環(huán)己基碳二亞胺 (226.8，1. lmmol)置于干燥過的聚合瓶中，換氣三次，然后向其中加入5ml干燥過的DMF，20 °C下攪拌lh，加入青蒿琥酯（384.4mg，lmmol)并在10°C下充分攪拌反應16h。然后抽干體系 中的DMF，將剩余物質用丙酮溶解，并過濾掉不溶物，將濾液濃縮后乙醚沉降，過濾得到固體 并真空抽干，得到白色固體粉末320mg。
[0102] 反應式如下：
[0103]
[0104] 實施例12
[0105] 將奧沙利鉑(795mg，2mmol)置于燒瓶中，再加入30%雙氧水10mL，室溫避光攪拌8h 后，過濾除去雙氧水得到0xaliplatin(IV)_(0H)2的黃色粉末。
[0106] 將得到的 Oxal iplatin (IV)-(0H)2(431 mg, lmmol)，Ν, Ν'-二環(huán)己基碳二亞胺 (639.2mg，3. lmmol), 1-羥基苯并三唑（419mg，3. lmmol)以及青蒿琥酯（1153.2mg，3mmol)溶 解于5ml干燥的DMF中，并在5°C下充分攪拌反應24h。然后抽干體系中的DMF，將剩余物質用 丙酮溶解，并過濾掉不溶物，將濾液濃縮后乙醚沉降，過濾得到固體并真空抽干，得到白色 固體粉末750mg。
[0107] 反應式如下：
[0108]
[0109] 實施例13
[0110] 將PyAA-Pt-Cl2(752mg，2mmol)置于燒瓶中，再加入30%雙氧水10mL，室溫避光攪 拌8h后，過濾除去雙氧水得到PyAA-Pt(IV)-(OH) 2的黃色粉末。
[0111] 將得到的 PyAA-Pt(IV)-(0H)2(410mg，lmmol)，N，N'-二環(huán)己基碳二亞胺（226.8， 1. lmmol)置于干燥過的聚合瓶中，換氣三次，然后向其中加入5ml干燥過的DMF，20°C下攪拌 lh，加入青蒿琥酯（384.4mg, lmmol)并在10°C下充分攪拌反應16h。然后抽干體系中的DMF， 將剩余物質用丙酮溶解，并過濾掉不溶物，將濾液濃縮后乙醚沉降，過濾得到固體并真空抽 干，得到白色固體粉末300mg。
[0112] 反應式如下：
[0113]
[0114] 實施例14
[0115] 將PyAA-Pt-Cl2(752mg，2mmol)置于燒瓶中，再加入30%雙氧水10mL，室溫避光攪 拌8h后，過濾除去雙氧水得到PyAA-Pt(IV)-(0H) 2的黃色粉末。
[0116] 將得到的？7厶厶-?七（1￥)-(0!1)2(41〇11^，1111111〇1)，^-二環(huán)己基碳二亞胺（639.211^， 3. lmmol)，1-羥基苯并三唑(419mg，3. lmmol)以及青蒿琥酯（1153.2mg，3mmol)溶解于5ml干 燥的DMF中，并在5°C下充分攪拌反應24h。然后抽干體系中的DMF，將剩余物質用丙酮溶解， 并過濾掉不溶物，將濾液濃縮后乙醚沉降，過濾得到固體并真空抽干，得到白色固體粉末 650mg〇
[0117] 反應式如下：
[0118；
[0119] 實施例15
[0120] 對本發(fā)明實施例1制備的化合物1和實施例5制備的化合物2進行細胞毒性測試，分 別以1〇^-7、他1^^549、!1叩62^549/1)0?細胞為模型，以實施例1所提供的化合物1及實施例 5所提供的化合物2作為待檢測物，將所述待檢測物作用于細胞后，觀察細胞的存活率情況， 以噻唑藍(MTT)方法考察本發(fā)明所述的鉑配合物的細胞毒性，具體操作步驟如下：
[0121 ] 1)收集上述對數期細胞，調整細胞懸液的濃度，加入96孔板中，每孔加入100μΙ，每 孔細胞數約5千個；
[0122] 2)將上述試驗樣品置于⑶2濃度為5%的細胞培養(yǎng)箱中，在37°C，飽和濕度條件下 培養(yǎng)12h，使細胞充分貼壁；
[0123] 3)將化合物1按照一定梯度倍數稀釋，濃度分別為108μΜ、54μΜ、27μΜ、13.5μΜ、6.75 μΜ、3.375μΜ、1.6875μΜ，然后加入有細胞的96孔板中，每個濃度設三個復孔，培養(yǎng)時間設置 為24h，48h，72h;
[0124] 4)每孔加入20μ1的MTT溶液(5mg/ml，即0.5 %MTT)，繼續(xù)培養(yǎng)4h，吸去培養(yǎng)基，每孔 加150μ1的DMS0，搖床低速震蕩1 Omin，使結晶充分溶解；
[0125] 5)酶標儀490nm處檢測每個孔的吸光值；
[0126] 6)同時設置調零孔(培養(yǎng)基、MTT、DMS0)和對照組(細胞、培養(yǎng)基、MTT、DMS0)按照下 面公式計算細胞活力：
[0127]
[0128] 其中，Abs( sample)為樣品組細胞的吸光值;Abs (blank)為空白對照組培養(yǎng)孔中液 體的吸光值;Abs(control)為未經過處理實驗組細胞的吸光值。
[0129] 實驗結果見表1。
[0130] 比較例1
[0131] 對順鉑進行細胞毒性測試，分別以MCF-7、HeLa、A549、HepG2、A549/DDP細胞為模 型，以順鉑作為待檢測物，將所述待檢測物作用于細胞后，觀察細胞的存活率情況。以噻唑 藍(MTT)方法，考察順鉑的細胞毒性，具體操作步驟如下：
[0132] 1)收集上述對數期細胞，調整細胞懸液的濃度，加入96孔板中，每孔加入100μΙ，每 孔細胞數約5千個；
[0133] 2)將上述試驗樣品置于⑶2濃度為5%的細胞培養(yǎng)箱中，在37°C，飽和濕度條件下 培養(yǎng)12h，使細胞充分貼壁；
[0134] 3)將順鉑按照一定梯度倍數稀釋，濃度分別為108μΜ、54μΜ、27μΜ、13.5μΜ、6.75μΜ、 3.375μΜ、1.6875μΜ，然后加入有細胞的96孔板中，每個濃度設三個復孔，培養(yǎng)時間設置為 24h,48h,72h；
[0135] 4)每孔加入20μ1的MTT溶液(5mg/ml，即0.5 %MTT)，繼續(xù)培養(yǎng)4h，吸去培養(yǎng)基，每孔 加 150μ1的DMS0，搖床低速震蕩1 Omin，使結晶充分溶解；
[0136] 5)酶標儀490nm處檢測每個孔的吸光值；
[0137] 6)同時設置調零孔(培養(yǎng)基、MTT、DMS0)和對照組(細胞、培養(yǎng)基、MTT、DMS0)按照下 面公式計算細胞活力：
[0138]
[0139] 其中，Abs( sample)為樣品組細胞的吸光值;Abs (blank)為空白對照組培養(yǎng)孔中液 體的吸光值;Abs(control)為未經過處理實驗組細胞的吸光值。
[0140] 實驗結果見表1。
[0141] 表1順鉑和化合物1對不同細胞處理不同時間的IC5Q值(μΜ)
[0142]
[0143] 表1是本發(fā)明實施例15和比較例1中，化合物1、化合物2、順鉑分別對MCF-7、HeLa、 A549、HepG2、A549/DDP細胞處理24h、48h、72h的IC5Q值數據匯總。由表1可知，本發(fā)明提供的 鉑（IV)配合物對癌細胞如人乳腺癌MCF-7細胞，人宮頸癌Hela細胞，人肺腺癌A549細胞，以 及人肝癌HepG2細胞都有很好的殺傷效果，在降低系統(tǒng)毒性的同時依然能取得與順鉑相當 的抗癌活性，對順鉑耐藥的人肺腺癌A549/DDP細胞也有很好的殺傷效果，具備很低的耐藥 性。
[0144] 由上述實施例及比較例可知，本發(fā)明提供的鉑配合物具有較高的抗腫瘤活性和較 低的細胞毒性。
[0145] 以上實施例的說明只是用于幫助理解本發(fā)明的方法及其核心思想。應當指出，對 于本技術領域的普通技術人員來說，在不脫離本發(fā)明原理的前提下，還可以對本發(fā)明進行 若干改進和修飾，這些改進和修飾也落入本發(fā)明權利要求的保護范圍內。
【主權項】
1. 一種具有抗癌活性的化學物質，其特征在于，該化學物質為結構式如式(I)所示的化 合物，或者為結構式如式(II)所示的化合物，或者為結構式如式（I)所示的化合物和結構式 如式(II)所示的化合物的混合物：《（!1 ) 式(I)和式(II)中 W下結構中的一種：2. -種具有抗癌活性的化學物質的制備方法，其特征在于，包括W下步驟：A)將銷（II)化合物與雙窗水后而-俱蔚1曲化會物I.所述銷（II)化合物B)無水無氧條件下，將步驟A)得到的銷（IV)化合物與青葛班醋在縮合劑存在的條件下 進行反應，得到具有抗癌活性的化學物質。3. 根據權利要求2所述的具有抗癌活性的化學物質的制備方法，其特征在于，所述步驟 B)中，銷（IV)化合物和青葛班醋的摩爾比為1:(0.8~1.2)，青葛班醋和縮合劑的摩爾比為 1: (1~1.2)，得到結構式如式(I)所示的化合物。4. 根據權利要求2所述的具有抗癌活性的化學物質的制備方法，其特征在于，所述步驟 B)中，銷（IV)化合物和青葛班醋的摩爾比為1: (1.5~3)，青葛班醋和縮合劑的摩爾比為1: (1~1.2 )，得到結構式如式(II)所示的化合物。5. 根據權利要求2-4任何一項所述的具有抗癌活性的化學物質的制備方法，其特征在 于，所述步驟A)中，雙氧水的體積與銷（II)化合物的摩爾比為（5mL~15mL) : (Immo 1~ 3mmO1)。6. 根據權利要求2-4任何一項所述的具有抗癌活性的化學物質的制備方法，其特征在 于，所述步驟A)中，銷(II)化合物與雙氧水的反應在避光條件下進行。7. 根據權利要求2-4任何一項所述的具有抗癌活性的化學物質的制備方法，其特征在 于，所述步驟A)中，銷(II)化合物與雙氧水的反應溫度為室溫，反應時間為5~lOh。8. 根據權利要求2-4任何一項所述的具有抗癌活性的化學物質的制備方法，其特征在 于，所述步驟B)中，縮合劑為N，N'-二環(huán)己基碳二亞胺、1-徑基苯并S挫或N-(3-二甲氨基丙 基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽，反應的溶劑為N，N'-二甲基甲酯胺。9. 根據權利要求2-4任何一項所述的具有抗癌活性的化學物質的制備方法，其特征在 于，所述步驟B)中，反應的溫度為(TC~20°C，時間為16h~2地。10. 權利要求1所述的具有抗癌活性的化學物質在制備抗癌藥物中的應用。
【文檔編號】A61P35/00GK105906667SQ201610265097
【公開日】2016年8月31日
【申請日】2016年4月26日
【發(fā)明人】黃宇彬, 周東方, 景遐斌, 謝志剛
【申請人】中國科學院長春應用化學研究所