一種培養(yǎng)皿的制作方法
【專利摘要】本實(shí)用新型公開了一種培養(yǎng)皿。所述培養(yǎng)皿包括皿蓋和皿體；所述皿體內(nèi)側(cè)底面設(shè)有若干個(gè)弧形凹陷區(qū)域。該弧形凹陷區(qū)域，能夠利用重力作用將卵母細(xì)胞和胚胎聚集在一起，便于體外觀察和操作。避免了普通培養(yǎng)皿由于底部純平，導(dǎo)致人類卵母細(xì)胞和胚胎相互分散不易尋找的缺點(diǎn)。其結(jié)構(gòu)簡單、使用方便、成本低廉，能夠較為有效的改善對人類卵母細(xì)胞和胚胎進(jìn)行體外觀察和操作的效率，同時(shí)顯著提高培養(yǎng)皿的使用率。本實(shí)用新型除了適用于體外受精實(shí)驗(yàn)室中對于人類卵母細(xì)胞及胚胎體外操作和體外培養(yǎng)，也適用于對于其他物種的卵母細(xì)胞及胚胎進(jìn)行體外操作和體外培養(yǎng)的胚胎學(xué)及動(dòng)物學(xué)實(shí)驗(yàn)室。
【專利說明】
一種培養(yǎng)皿
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本實(shí)用新型屬于生物實(shí)驗(yàn)設(shè)備領(lǐng)域，具體涉及一種培養(yǎng)皿。
【背景技術(shù)】
[0002]據(jù)世界衛(wèi)生組織(WHO)估計(jì)，發(fā)達(dá)國家中10-15%的育齡夫婦受不孕癥困擾。發(fā)展中國家中(包括中國在內(nèi))，至2002年有1.86億的育齡婦女患不孕癥。2014年的統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)顯示，我國育齡人群不孕癥的發(fā)生率為12.5%，不孕癥人數(shù)大于4000萬。體外受精-胚胎移植(in-vitro fertilizat1n and embryo transfer, IVF-ET)技術(shù)是目前治療不孕癥的重要手段。自1978年在英國誕生世界上首例“試管嬰兒”以來，目前發(fā)達(dá)國家通過ART助孕出生的嬰兒已占出生嬰兒總數(shù)的1-3%，估計(jì)全世界試管嬰兒的出生人數(shù)已超過500萬人。
[0003]在體外受精-胚胎移植技術(shù)實(shí)施的過程中，需要在體外對人類卵母細(xì)胞以及胚胎進(jìn)行體外培養(yǎng)。體外培養(yǎng)是在培養(yǎng)皿中進(jìn)行的，目前大多數(shù)體外受精實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行卵母細(xì)胞與胚胎的體外培養(yǎng)是采用普通的細(xì)胞培養(yǎng)皿(如35mm，60mm陪替氏培養(yǎng)皿，4孔板等)，這些培養(yǎng)皿的皿底是純平的。而人類卵母細(xì)胞及胚胎是接近球形并且體積非常微小，其中人類卵母細(xì)胞，受精卵及卵裂期胚胎直徑大約120-150微米，囊胚大約200-300微米。由于有透明帶的保護(hù)，人類卵母細(xì)胞和胚胎也不會(huì)發(fā)生也普通細(xì)胞一樣的貼壁生長，因此非常容易發(fā)生滾動(dòng)。進(jìn)行體外受精-胚胎移植治療的患者往往有多個(gè)卵母細(xì)胞及胚胎(10-20個(gè)甚至更多)需要進(jìn)行體外培養(yǎng)和體外操作，在底部純平的培養(yǎng)皿中，這些卵母細(xì)胞和胚胎非常容易在培養(yǎng)基中發(fā)生滾動(dòng)而散落在培養(yǎng)皿的各個(gè)角落。例如，在胚胎移植時(shí)，需要將2-3枚胚胎放在內(nèi)徑約15mm含有Iml培養(yǎng)基的單孔器官培養(yǎng)皿中，稍作晃動(dòng)胚胎就會(huì)滾動(dòng)到內(nèi)孔的邊緣，這樣在將這些胚胎吸入移植導(dǎo)管的時(shí)候，將會(huì)增加操作的難度，非常容易吸入過多的培養(yǎng)基。另外，在胚胎冷凍解凍的時(shí)候，甚至需要將10枚以上的胚胎依次轉(zhuǎn)移至4孔板的孔中，每個(gè)孔內(nèi)徑約1mm含有0.5ml不同類型的冷凍保護(hù)劑，同樣稍作晃動(dòng)胚胎就會(huì)滾動(dòng)到孔的邊緣，這樣在將這些胚胎從一個(gè)孔轉(zhuǎn)移到另一個(gè)孔的時(shí)候，將會(huì)增加更大操作的難度，很難保證同一規(guī)定時(shí)間將所有胚胎轉(zhuǎn)移完畢。
[0004]微滴培養(yǎng)是最常用的胚胎培養(yǎng)方法，就是將10-50微升的培養(yǎng)基滴在培養(yǎng)皿底部，然后上面覆蓋石蠟油，將卵母細(xì)胞和胚胎放在培養(yǎng)基微滴中培養(yǎng)。微滴培養(yǎng)能夠一定程度的改善上述問題。但是微滴培養(yǎng)也有一定的局限性，首先微滴的體積不能太大(不能超過100微升)，否則培養(yǎng)基的表面張力不能夠維持液滴的形狀，稍作晃動(dòng)微滴就會(huì)發(fā)生分散。因此，一些需要培養(yǎng)基量較多的操作不適合使用微滴培養(yǎng)，例如卵母細(xì)胞的收集、胚胎移植及卵母細(xì)胞與胚胎冷凍解凍等。其次，在平底培養(yǎng)皿中進(jìn)行微滴培養(yǎng)也無法完全避免卵母細(xì)胞和胚胎的滾動(dòng)，而且移動(dòng)微滴培養(yǎng)皿仍然需要?jiǎng)幼鬏p柔，力量稍大也可能導(dǎo)致微滴分散，分散的培養(yǎng)基微滴可能將卵母細(xì)胞和胚胎漂散到其他微滴中，導(dǎo)致樣品混淆(例如正常受精與異常受精的胚胎混淆)，或是漂浮到石蠟油表面導(dǎo)致樣品丟失。
[0005]因此，如何能夠克服在平底培養(yǎng)皿中，多個(gè)卵母細(xì)胞和胚胎滾動(dòng)而相互分散，導(dǎo)致體外操作和體外觀察難度增加，是多數(shù)體外受精實(shí)驗(yàn)室尚未很好解決的難題。解決這一難題，將能夠較為有效改善操作者在對多個(gè)人類卵母細(xì)胞和胚胎進(jìn)行體外操作和體外培養(yǎng)時(shí)的操作速度，并顯著降低操作難度。
【實(shí)用新型內(nèi)容】
[0006]本實(shí)用新型旨在克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種培養(yǎng)皿，該裝置能夠利用重力作用將卵母細(xì)胞和胚胎聚集在一起，便于體外觀察和操作。
[0007]為了達(dá)到上述目的，本實(shí)用新型提供的技術(shù)方案為:
[0008]所述培養(yǎng)皿包括皿蓋和皿體;所述皿體內(nèi)側(cè)底面設(shè)有若干個(gè)弧形凹陷區(qū)域。
[0009]所述底部弧形的培養(yǎng)皿與常規(guī)的陪替氏培養(yǎng)皿外形基本接近，只是皿體內(nèi)側(cè)底面設(shè)有數(shù)量不等的弧形凹陷區(qū)域。
[0010]其中，所述皿底厚度為4mm，弧形凹陷區(qū)域的數(shù)量分別為I個(gè)(單孔弧形皿)，4個(gè)(4孔弧形皿)及16個(gè)(16孔弧形皿)，分別代替?zhèn)鹘y(tǒng)的單孔器官培養(yǎng)皿，四孔板及制作微滴的培養(yǎng)皿。
[0011]其中，所述底部弧形的培養(yǎng)皿與常規(guī)的陪替氏培養(yǎng)皿材料相同，為各種類型的塑料，如聚丙烯、聚苯乙烯或聚碳酸酯，優(yōu)選聚丙烯。
[0012]培養(yǎng)皿的大小，以及弧形凹陷區(qū)的大小與數(shù)量可以根據(jù)需要進(jìn)行定制，以實(shí)驗(yàn)室常用的60mm培養(yǎng)皿(57mmX 15mm)為例:皿蓋高為1mm，外徑為57mm，厚度為1mm，內(nèi)徑為55mm;皿體高為14mm,外徑為53mm，皿體邊緣圍擋厚內(nèi)徑為Imm,皿底厚度為4mm;其中單孔弧形皿，弧形凹陷區(qū)域直徑為40 ± 2mm，中央最大深度寬為3 ±0.5mm;4孔弧形皿，弧形凹陷區(qū)域直徑為20 ± 2mm，中央最大深度寬為2 ± 0.5mm; 16孔弧形皿，弧形凹陷區(qū)域直徑為1 土2mm，中央最大深度寬為I ±0.5mm。
[0013]下面結(jié)合原理對本實(shí)用新型作進(jìn)一步說明:
[0014]本實(shí)用新型與常規(guī)的陪替氏培養(yǎng)皿材料相同，為各種類型的塑料(如聚丙烯、聚苯乙烯或聚碳酸酯，優(yōu)選聚丙烯)，外形也與常規(guī)的陪替氏培養(yǎng)皿基本接近。因此，與常規(guī)培養(yǎng)皿相比，本實(shí)用新型在體外操作和體外培養(yǎng)的過程中，不會(huì)帶來額外的不良影響。本實(shí)用新型皿底厚度大約為4mm，皿底分別有數(shù)量不等的弧形凹陷區(qū)域，分別為I個(gè)(單孔弧形皿)，4個(gè)(4孔弧形皿)及16個(gè)(16孔弧形皿)。單孔弧形皿、4孔弧形皿及16孔弧形皿分別代替?zhèn)鹘y(tǒng)的單孔器官培養(yǎng)皿，四孔板及制作微滴的培養(yǎng)皿。在對多個(gè)人類卵母細(xì)胞和胚胎進(jìn)行體外操作和體外培養(yǎng)的過程中，這些卵母細(xì)胞和胚胎會(huì)由于重力作用，聚集在弧形凹陷區(qū)域的中央，因此非常有利于進(jìn)行體外觀察和操作。
[0015]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本實(shí)用新型的有益效果為:
[0016]本實(shí)用新型利用重力作用，在進(jìn)行體外操作和體外培養(yǎng)時(shí)卵母細(xì)胞和胚胎能夠聚集在培養(yǎng)皿底部的弧形凹陷區(qū)域中央，因此非常有利于進(jìn)行體外觀察和操作?？朔藗鹘y(tǒng)培養(yǎng)皿由于皿底純平，而導(dǎo)致卵母細(xì)胞和胚胎由于滾動(dòng)而相互分散，導(dǎo)致進(jìn)行體外操作和觀察困難的缺點(diǎn)。其結(jié)構(gòu)簡單，使用方便，并且無任何不良影響，能夠較為有效改善操作者在對多個(gè)人類卵母細(xì)胞和胚胎進(jìn)行體外操作和體外培養(yǎng)時(shí)的操作速度，并顯著降低操作難度。
[0017]總之，該培養(yǎng)皿底部的弧形凹陷區(qū)域，能夠利用重力作用將卵母細(xì)胞和胚胎聚集在一起，便于體外觀察和操作。同時(shí)通過在皿底劃分多個(gè)弧形凹陷區(qū)，能夠在同一個(gè)培養(yǎng)皿中建立不同的操作及培養(yǎng)區(qū)域。避免了普通培養(yǎng)皿由于底部純平，導(dǎo)致人類卵母細(xì)胞和胚胎相互分散不易尋找的情況。其結(jié)構(gòu)簡單、使用方便、成本低廉，能夠較為有效的改善對人類卵母細(xì)胞和胚胎進(jìn)行體外觀察和操作的效率，同時(shí)顯著提高培養(yǎng)皿的使用率。
[0018]本實(shí)用新型除了適用于體外受精實(shí)驗(yàn)室中對于人類卵母細(xì)胞及胚胎體外操作和體外培養(yǎng)，也適用于對于其他物種的卵母細(xì)胞及胚胎進(jìn)行體外操作和體外培養(yǎng)的胚胎學(xué)及動(dòng)物學(xué)實(shí)驗(yàn)室。
【附圖說明】
[0019]圖1為具有I個(gè)弧形凹陷區(qū)域的培養(yǎng)皿俯視圖；
[0020]圖2為圖1的A-A剖視圖；
[0021 ]圖3為具有4個(gè)弧形凹陷區(qū)域的培養(yǎng)皿俯視圖；
[0022]圖4為圖3的A-A剖視圖；
[0023]圖5為具有16個(gè)弧形凹陷區(qū)域的培養(yǎng)皿俯視圖；
[0024]圖6為圖5的A-A剖視圖。
[0025]圖中:1、皿蓋;2、皿體;3、弧形凹陷區(qū)域。
【具體實(shí)施方式】
[0026]實(shí)施例1
[0027]參見圖1和2，所述培養(yǎng)皿包括皿蓋I和皿體2;皿蓋I高為10_，外徑為57_，厚度為1mm，內(nèi)徑為55mm;皿體2高為14mm,夕卜徑為53mm，皿體2邊緣圍擋厚內(nèi)徑為1mm，皿體2的皿底厚度為4mm;所述皿體2內(nèi)側(cè)底面設(shè)有I個(gè)弧形凹陷區(qū)域3;所述弧形凹陷區(qū)域3的直徑為40mm，中心最大深度為3mm。
[0028]實(shí)施例2
[0029]參見圖3和4，所述培養(yǎng)皿包括皿蓋I和皿體2 ；皿蓋I高為10_，外徑為57_，厚度為1mm，內(nèi)徑為55mm;皿體2高為14mm,夕卜徑為53mm，皿體2邊緣圍擋厚內(nèi)徑為1mm，皿體2的皿底厚度為4mm;所述皿體2內(nèi)側(cè)底面設(shè)有4個(gè)弧形凹陷區(qū)域3;所述弧形凹陷區(qū)域3的直徑為20mm，中心最大深度為2mm。
[0030]實(shí)施例3
[0031 ] 參見圖5和6，所述培養(yǎng)皿包括皿蓋I和皿體2 ；皿蓋I高為10_，外徑為57_，厚度為1mm，內(nèi)徑為55mm;皿體2高為14mm,夕卜徑為53mm，皿體2邊緣圍擋厚內(nèi)徑為1mm，皿體2的皿底厚度為4mm;所述皿體2內(nèi)側(cè)底面設(shè)有I個(gè)弧形凹陷區(qū)域3;所述弧形凹陷區(qū)域3的直徑為10mm，中心最大深度為1mm。
[0032]上述實(shí)施例闡明的內(nèi)容應(yīng)當(dāng)理解為這些實(shí)施例僅用于更清楚地說明本實(shí)用新型，而不用于限制本實(shí)用新型的范圍，在閱讀了本實(shí)用新型之后，本領(lǐng)域技術(shù)人員對本實(shí)用新型的各種等價(jià)形式的修改均落入本申請所附權(quán)利要求所限定的范圍。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種培養(yǎng)皿，包括皿蓋(I)和皿體(2)；其特征在于，所述皿體(2)內(nèi)側(cè)底面設(shè)有I個(gè)弧形凹陷區(qū)域(3)，所述弧形凹陷區(qū)域(3)的直徑為40±2mm，中心最大深度為3±0.5mm;或者，所述皿體(2)內(nèi)側(cè)底面設(shè)有4個(gè)均勻分布的弧形凹陷區(qū)域(3)，所述弧形凹陷區(qū)域(3)的直徑為20±2mm，中心最大深度為2±0.5mm;或者，所述皿體(2)內(nèi)側(cè)底面設(shè)有16個(gè)均勻分布的弧形凹陷區(qū)域(3)，所述弧形凹陷區(qū)域(3)的直徑為10±2mm，中心最大深度為I ±0.5mm。
【文檔編號(hào)】C12M1/22GK205603601SQ201620020107
【公開日】2016年9月28日
【申請日】2016年1月11日
【發(fā)明人】顧亦凡, 歐陽琦, 林戈, 盧光琇
【申請人】中南大學(xué)