本發(fā)明涉及上轉(zhuǎn)換納米材料，具體地涉及ucnps-au-sh-ssdna及其制備方法以及二價(jià)汞離子的檢測方法。

背景技術(shù)：

目前，環(huán)境污染已成為人們、國家乃至整個世界關(guān)注的重點(diǎn)。當(dāng)今工業(yè)污染嚴(yán)重，特別是重金屬污染，微量的重金屬可致使身體疾病。hg(ⅱ)作為重金屬離子之一，能通過在水中沉積的微生物甲基化作用轉(zhuǎn)化成甲基汞。環(huán)境、水以及食品中汞離子通過血液循環(huán)累積在體內(nèi)汞離子濃度達(dá)到25nmol/l時，通過食物鏈富集在人體內(nèi)對許多器官如心臟，腎臟，腦，胃和腸道都具有不同程度的毒性。美國國家環(huán)境保護(hù)局(epa)評估所有的包括自然環(huán)境和人體排出金屬汞的排放量約7500噸/每年，其對人體的毒性量已經(jīng)非常大，所以準(zhǔn)確靈敏的檢測汞離子具有重要的意義。

在已創(chuàng)建的眾多hg²⁺的檢測方法中，迄今為止，檢測汞離子的方法有許多種。如利用上轉(zhuǎn)換納米粒子nayf4:yb,tm和金納米棒之間的熒光共振能量轉(zhuǎn)移檢測汞離子，但其過程較為復(fù)雜。文獻(xiàn)(s.j.wu,n.duan,z.shi,c.c.fang,z.p.wang,talanta,128(2014)327-336)用雙熒光共振能量轉(zhuǎn)移檢測鉛離子和汞離子，但是該檢測方法實(shí)驗(yàn)材料復(fù)雜，儀器昂貴，檢測的靈敏度和選擇性較低。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的是提供一種ucnps-au-sh-ssdna及其制備方法以及hg²⁺的檢測方法，該ucnps-au-sh-ssdna對二價(jià)汞離子(hg²⁺)的檢測具有優(yōu)異靈敏度、檢出限、穩(wěn)定性和選擇性，并且該制備方法具有條件溫和原料易得的優(yōu)點(diǎn)。

為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供了一種ucnps-au-sh-ssdna的制備方法，該制備方法包括：

1)將水、釔源、鐿源、銩源、釓源、ctab、檸檬酸鹽、乙醇、naf和濃硝酸進(jìn)行攪拌，接著進(jìn)行水熱反應(yīng)、純化得到nayf4:yb,tm,gducnps；

2)將水、堿性的鹽、氯金酸溶液進(jìn)行接觸反應(yīng)直至體系變成無色得到金陳化液；

3)在還原劑和羥胺的存在下，將所述ucnps、金陳化液進(jìn)行接觸反應(yīng)，純化得到aunps@nayf4:yb,tm,gd納米粒子(金納米粒子包覆的nayf4:yb,tm,gducnps)；

4)將所述aunps@nayf4:yb,tm,gd納米粒子分散于水中，然后加入ssdna進(jìn)行振蕩孵育，純化得到所述ucnps-au-sh-ssdna。

本發(fā)明還提供了一種ucnps-au-sh-ssdna，該ucnps-au-sh-ssdna通過上述的制備方法制備而得。

本發(fā)明更進(jìn)一步提供了一種hg²⁺的檢測方法，該檢測方法包括：

1)將tris-hcl緩沖溶液、如上述的ucnps-au-sh-ssdna混合形成混合液，接著將所述混合液加入已知濃度的hg²⁺溶液進(jìn)行反應(yīng)以得到樣品溶液，然后進(jìn)行光致發(fā)光檢測并基于等離子體共振增強(qiáng)效應(yīng)體系發(fā)光增強(qiáng)，最后以hg²⁺溶液的濃度的對數(shù)為橫坐標(biāo)，光致發(fā)光強(qiáng)度值為縱坐標(biāo)繪制工作曲線或者計(jì)算工作曲線方程；

2)將待檢hg²⁺溶液替換已知濃度的hg²⁺溶液按照步驟1)的方法測得光致發(fā)光強(qiáng)度，然后根據(jù)所述工作曲線或者工作曲線方程計(jì)算出待檢hg²⁺溶液的濃度。

在上述技術(shù)方案中，具體的原理如圖1所示，本發(fā)明制備ucnps-au-sh-ssdna過程中：首先制備nayf4:yb,tm,gducnps上轉(zhuǎn)納米粒子(nayf4:yb,tm,gducnps)，接著對其進(jìn)行金納米粒子包覆合成aunps@nayf4:yb,tm,gd納米粒子(金納米粒子包覆的nayf4:yb,tm,gducnps)提高其光致發(fā)光性能；隨后，加入ssdna，利用適配子末端的巰基可與金納米粒子之間形成金硫鍵作為發(fā)光主體。

hg²⁺的檢測的具體原理為：向含有ucnps-au-sh-ssdna對汞離子的檢測中加入hg²⁺后，hg²⁺與適配子中的胸腺嘧啶(t)形成t-hg²⁺-t穩(wěn)定的結(jié)構(gòu)，拉近aunps@nayf4:yb,tm,gd之間的距離，發(fā)生等離子體共振發(fā)光增強(qiáng)現(xiàn)象，同時，aunps@nayf4:yb,tm,gd的發(fā)光增強(qiáng)程度與加入的hg²⁺濃度相關(guān)，實(shí)現(xiàn)了對hg²⁺的定量檢測。進(jìn)一步地，便可利用aunps@nayf4:yb,tm,gd上轉(zhuǎn)換發(fā)光納米材料檢測自來水和湖水中的hg²⁺的含量。

本發(fā)明的其他特征和優(yōu)點(diǎn)將在隨后的具體實(shí)施方式部分予以詳細(xì)說明。

附圖說明

附圖是用來提供對本發(fā)明的進(jìn)一步理解，并且構(gòu)成說明書的一部分，與下面的具體實(shí)施方式一起用于解釋本發(fā)明，但并不構(gòu)成對本發(fā)明的限制。在附圖中：

圖1是本發(fā)明發(fā)光增強(qiáng)體系的原理圖；

圖2是檢測例1中摻雜不同量gd³⁺的ucnps掃描電鏡表征圖；

圖3是檢測例2中發(fā)光強(qiáng)度統(tǒng)計(jì)圖；

圖4是檢測例3中發(fā)光光譜圖；

圖5是檢測例4中發(fā)光強(qiáng)度統(tǒng)計(jì)圖；

圖6是檢測例4中發(fā)光光譜圖；

圖7是檢測例5中eds檢測圖；

圖8是檢測例6中aunps@nayf4:yb,tm,gducnps透射電鏡圖；

圖9是應(yīng)用例2中ucnps-au-sh-ssdna偶聯(lián)體溶液的濃度改變時體系的發(fā)光強(qiáng)度統(tǒng)計(jì)圖；

圖10是應(yīng)用例3中振蕩孵育時間改變時體系的發(fā)光強(qiáng)度統(tǒng)計(jì)圖；

圖11是應(yīng)用例1中發(fā)光強(qiáng)度對hg²⁺濃度的統(tǒng)計(jì)圖；

圖12是應(yīng)用例5的干擾檢測結(jié)果統(tǒng)計(jì)圖。

具體實(shí)施方式

以下對本發(fā)明的具體實(shí)施方式進(jìn)行詳細(xì)說明。應(yīng)當(dāng)理解的是，此處所描述的具體實(shí)施方式僅用于說明和解釋本發(fā)明，并不用于限制本發(fā)明。

本發(fā)明提供了一種ucnps-au-sh-ssdna的制備方法，該制備方法包括：

1)將水、釔源、鐿源、銩源、釓源、ctab、檸檬酸鹽、乙醇、naf和濃硝酸進(jìn)行攪拌，接著進(jìn)行水熱反應(yīng)、純化(離心分離)得到nayf4:yb,tm,gducnps；

2)將水、堿性的鹽、氯金酸溶液進(jìn)行接觸反應(yīng)顏色從黃色變成無色得到金陳化液，接著轉(zhuǎn)移到棕色細(xì)口瓶放入冰箱冷藏；

3)在還原劑和羥胺的存在下，將所述ucnps、金陳化液進(jìn)行接觸反應(yīng)，純化(離心分離)得到aunps@nayf4:yb,tm,gd納米粒子(金納米粒子包覆的nayf4:yb,tm,gducnps)；

4)將所述aunps@nayf4:yb,tm,gd分散于水中，隨后加入ssdna并進(jìn)行振蕩孵育，純化(離心水洗后)得到ucnps-au-sh-ssdna(ucnps-au-sh-ssdna偶聯(lián)體)。

在上述制備方法的步驟1)中，各物料的用量可以在寬的范圍內(nèi)選擇，但是為了使得制得的ucnps-au-sh-ssdna能夠作為更優(yōu)異的發(fā)光性能，進(jìn)而使得ucnps-au-sh-ssdna對汞離子的檢測具有更優(yōu)異的靈敏度，檢出限，穩(wěn)定性與選擇性，優(yōu)選地，在步驟1)中，相對于10μmol的所述銩源，，所述釔源的用量為0.4-0.48mmol，所述鐿源的用量為0.03-0.07mmol，所述釓源的用量為0.08-0.12mmol，所述檸檬酸三鈉的用量為0.165-0.185mmol，所述氟化鈉的用量為4-8mmol，所述醇的用量為14-16ml，所述ctab的用量為0.08-0.12g，所述濃硝酸的用量為0.5-1.5ml且所述濃硝酸的濃度為65-68重量％。

在上述制備方法的步驟1)中，攪拌和水熱反應(yīng)的條件可以在寬的范圍內(nèi)選擇，但是為了使得制得的ucnps-au-sh-ssdna能夠作為更優(yōu)異的發(fā)光體，進(jìn)而使得ucnps-au-sh-ssdna對汞離子的檢測具有更優(yōu)異的靈敏度，檢出限，穩(wěn)定性與選擇性，優(yōu)選地，在步驟1)中，攪拌至少滿足以下條件：攪拌溫度為15-35℃，攪拌時間為5-20min。反應(yīng)溫度為24-26℃，反應(yīng)時間為1.3-2.3h；所述水熱反應(yīng)至少滿足以下條件：反應(yīng)溫度為160-200℃，反應(yīng)時間為3-5h。

在上述制備方法的步驟1)中，銩源、釓源、鐿源、釔源和醇的種類可以在寬的范圍內(nèi)選擇，但是為了使得制得的ucnps-au-sh-ssdna能夠作為更優(yōu)異的發(fā)光體，進(jìn)而使得ucnps-au-sh-ssdna對汞離子的檢測具有更優(yōu)異的靈敏度，檢出限，穩(wěn)定性與選擇性，優(yōu)選地，銩源選自五水合硝酸銩、氧化銩、無水氯化銩和八水合硫酸銩中的至少一者，釓源選自四水合氯化釓、無水氯化釓、無水硫酸釓、一水合硫酸釓中的至少一者，鐿源選自氯化鐿、五水硝酸鐿、氧化鐿和碳酸鐿中的至少一者，釔源選自硝酸釔、氧化釔、六水合氧化釔和硝酸釔中的至少一者，醇選自甲醇、乙醇和丙醇中的至少一者，所述檸檬酸鹽選自檸檬酸一鈉、檸檬酸二鈉和檸檬酸三鈉中的至少一者，所述堿性的鹽選自碳酸鉀、碳酸鈉、碳酸鎂和碳酸銨中的至少一者。

在上述制備方法的步驟1)中，物料的添加順序以及物料的提供形式可以在寬的范圍內(nèi)選擇，但是為了使得制得的ucnps-au-sh-ssdna能夠作為更優(yōu)異的發(fā)光體，進(jìn)而使得ucnps-au-sh-ssdna對汞離子的檢測具有更優(yōu)異的靈敏度，檢出限，穩(wěn)定性與選擇性，優(yōu)選地，在步驟1)中，添料順序?yàn)椋合葘⑺鲠愒醇尤胫了鏊?，接著依次加入鐿源、銩源、釓源、檸檬酸鹽、ctab、醇和氟化鈉，然后加入濃硝酸；更優(yōu)選地，所述釓源、銩源、鐿源、檸檬酸鹽、氟化鈉、釔源均采用水溶液的形式提供，并且氟化鈉水溶液采用勻速滴加的方式加入體系中。

在上述制備方法的步驟2)中，各物料的用量可以在寬的范圍內(nèi)選擇，但是為了使得制得的ucnps-au-sh-ssdna能夠作為更優(yōu)異的發(fā)光體，進(jìn)而使得ucnps-au-sh-ssdna對汞離子的檢測具有更優(yōu)異的靈敏度，檢出限，穩(wěn)定性與選擇性，優(yōu)選地，在步驟2)中，相對于50mg的所述鹽，所述水的用量為200-300ml，所述氯金酸溶液的用量為2-6ml且所述氯金酸中的濃度為0.8-1.2重量％。

在上述制備方法的步驟2)中，接觸反應(yīng)的具體條件可以在寬的范圍內(nèi)選擇，但是為了使得制得的ucnps-au-sh-ssdna能夠作為更優(yōu)異的發(fā)光體，進(jìn)而使得ucnps-au-sh-ssdna對汞離子的檢測具有更優(yōu)異的靈敏度，檢出限，穩(wěn)定性與選擇性，優(yōu)選地，接觸反應(yīng)至少滿足以下條件：反應(yīng)溫度為15-35℃。

在上述制備方法的步驟3)中，各物料的用量可以在寬的范圍內(nèi)選擇，但是為了使得制得的ucnps-au-sh-ssdna能夠作為更優(yōu)異的發(fā)光體，進(jìn)而使得ucnps-au-sh-ssdna對汞離子的檢測具有更優(yōu)異的靈敏度，檢出限，穩(wěn)定性與選擇性，優(yōu)選地，相對于2.99mg的所述nayf4:yb,tm,gducnps，所述金陳化液的用量為8-12ml，所述還原劑的用量為30-50μl，所述羥胺的用量為8-12μmol。

在上述制備方法的步驟3)中，接觸反應(yīng)的具體條件可以在寬的范圍內(nèi)選擇，但是為了使得制得的ucnps-au-sh-ssdna能夠作為更優(yōu)異的發(fā)光體，進(jìn)而使得ucnps-au-sh-ssdna對汞離子的檢測具有更優(yōu)異的靈敏度，檢出限，穩(wěn)定性與選擇性，優(yōu)選地，在步驟3)中，所述接觸反應(yīng)至少滿足以下條件：反應(yīng)溫度為15-30℃，反應(yīng)時間為10-25min。

在上述制備方法的步驟3)中，還原劑的種類可以在寬的范圍內(nèi)選擇，但是為了使得制得的ucnps-au-sh-ssdna能夠作為更優(yōu)異的發(fā)光體，進(jìn)而使得ucnps-au-sh-ssdna對汞離子的檢測具有更優(yōu)異的靈敏度，檢出限，穩(wěn)定性與選擇性，優(yōu)選地，在步驟3)中，還原劑選自甲醛、乙醛和丙醛中的至少一者。

在上述制備方法的步驟4)中，各物料的用量可以在寬的范圍內(nèi)選擇，但是為了使得制得的ucnps能夠作為更優(yōu)異的能量供體，進(jìn)而使得ucnps-au-sh-ssdna對汞離子的檢測具有更優(yōu)異的靈敏度，檢出限，穩(wěn)定性與選擇性，優(yōu)選地，在步驟4)中，相對于2.99mg的所述aunps@nayf4:yb,tm,gd，所述水的用量為1.5-2.5ml，所述ssdna的用量為7-8×10^-10mol。

在上述制備方法的步驟4)中，振蕩孵育的具體條件可以在寬的范圍內(nèi)選擇，但是為了使得制得的ucnps能夠作為更優(yōu)異的能量供體，進(jìn)而使得ucnps-au-sh-ssdna對汞離子的檢測具有更優(yōu)異的靈敏度，檢出限，穩(wěn)定性與選擇性，優(yōu)選地，在步驟4)中，所述振蕩孵育至少滿足以下條件：孵育溫度為15-35℃，孵育時間為12-30h。

在上述制備方法的步驟4)中，ssdna的序列可以在寬的范圍內(nèi)選擇，但是為了使得制得的ucnps能夠作為更優(yōu)異的能量供體，進(jìn)而使得ucnps-au-sh-ssdna對汞離子的檢測具有更優(yōu)異的靈敏度，檢出限，穩(wěn)定性與選擇性，優(yōu)選地，ssdna的序列為gtcctttctg。

本發(fā)明還提供了一種ucnps-au-sh-ssdna，該ucnps-au-sh-ssdna通過上述的制備方法制備而得。

本發(fā)明進(jìn)一步提供了一種hg²⁺的檢測方法，該檢測方法包括：

1)將tris-hcl緩沖溶液、如上述的ucnps-au-sh-ssdna混合形成混合液，接著將所述混合液加入已知濃度的hg²⁺溶液進(jìn)行反應(yīng)以得到樣品溶液，然后進(jìn)行光致發(fā)光檢測并基于等離子體共振增強(qiáng)效應(yīng)體系發(fā)光增強(qiáng)，最后以hg²⁺溶液的濃度的對數(shù)為橫坐標(biāo)，光致發(fā)光強(qiáng)度值為縱坐標(biāo)繪制工作曲線或者計(jì)算工作曲線方程；

2)將待檢hg²⁺溶液替換已知濃度的hg²⁺溶液按照步驟1)的方法測得光致發(fā)光強(qiáng)度，然后根據(jù)所述工作曲線或者工作曲線方程計(jì)算出待檢hg²⁺溶液的濃度。

在上述檢測方法中，各物料的用量可以在寬的范圍內(nèi)選擇，但是為了使得該檢測方法具有更優(yōu)異的靈敏度，檢出限，穩(wěn)定性與選擇性，優(yōu)選地，相對于0.149mg的ucnps-au-sh-ssdna，檢測樣品的用量為40-60μl且檢測樣品的中hg²⁺的濃度為2-1000mmol/l。

在上述檢測方法中，tris-hcl緩沖溶液的用量可以在寬的范圍內(nèi)選擇，但是為了使得該檢測方法具有更優(yōu)異的靈敏度，檢出限，穩(wěn)定性與選擇性，優(yōu)選地，相對于40-60μl的樣品溶液，tris-hcl緩沖溶液的用量為1-3ml且ph為6.4-8.4。

在上述檢測方法中，等離子體共振增強(qiáng)發(fā)光反應(yīng)的條件可以在寬的范圍內(nèi)選擇，但是為了使得該檢測方法具有更優(yōu)異的靈敏度，檢出限，穩(wěn)定性與選擇性，優(yōu)選地，等離子體共振增強(qiáng)發(fā)光反應(yīng)至少滿足以下條件：反應(yīng)溫度25-35℃，反應(yīng)時間為40-60min。

在上述基礎(chǔ)上，在不同的檢測波長下工作曲線方程存在差異，但是為了使得具有更優(yōu)異的線性關(guān)系，優(yōu)選地，工作曲線方程為y＝28.6+1.76x，其中，y為光致發(fā)光強(qiáng)度增強(qiáng)值，x為hg²⁺的濃度。

此外，在上述檢測方法中，待檢hg²⁺溶液的來源可以在寬的范圍內(nèi)選擇，但是從實(shí)用性上考慮，優(yōu)選地，待檢hg²⁺溶液為自來水和湖水。

最后，在待檢hg²⁺溶液為自來水和湖水的情況下，關(guān)于自來水和湖水的來源方式也可以在寬的范圍內(nèi)選擇，但是為了簡化處理過程，優(yōu)選地，在步驟2)之前，檢測方法還包括：將水過濾，取純化后的自來水和湖水。

以下將通過實(shí)施例對本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)描述。以下實(shí)施例中，ssdna(單鏈dna)為海生共生物股份有限公司的序列號為gtcctttctg的市售品。

實(shí)施例1

1)nayf4:yb,tm,gd的制備：

25℃下，首先向50ml不斷攪拌的小燒杯中依次加2.20ml的超純水、ycl3溶液(2.20ml，0.200mol/l)、yb(no3)3溶液(0.500ml，0.100mol/l)、tm(no3)3溶液(0.100ml，0.100mol/l)、gd(no3)3溶液(0.100ml,1.00mol/l、檸檬酸鈉溶液(1.75ml，0.100mol/l)(以上均為逐滴加入)，5min后加入0.100gctab和15.0ml無水乙醇，再加入naf溶液(6.00ml，1.00mol/l，15min滴加完成)，2h后加入1.00ml濃硝酸(濃度為65-68重量％)得到混合液。

將得到的混合液放入50ml反應(yīng)釜180℃高溫反應(yīng)4h，冷卻至25℃。將得到的乳白色渾濁液倒入離心管中離心，超純水洗，乙醇洗再超純水洗得到nayf4:yb,tm,gducnps。

2)aunps@nayf4:yb,tm,gducnps(金納米粒子包覆的nayf4:yb,tm,gducnps)納米材料的制備：

首先，au前驅(qū)體溶液的制備：將0.0500g碳酸鉀加到盛有200ml去離子水大燒杯中于25℃下攪拌15min，攪拌均勻后加入haucl4溶液(4.00ml，1wt％)，顏色由金黃色變成無色得到金陳化液，冷藏于冰箱24h后備用。隨后取其中2.99mg的nayf4:yb,tm,gducnps加到10.0ml的金陳化液中攪拌，再加入0.0400ml的甲醛和羥胺溶液(0.100ml，0.100mol/l)，于25℃下持續(xù)攪拌15min，溶液的顏色由無色變成紫褐色，紫褐色物質(zhì)即為aunps@nayf4:yb,tm,gducnps，離心超純水洗。

3)aunps@nayf4:yb,tm,gd納米材料與巰基dna適配子的連接：

先將2.99mg的aunps@nayf4:yb,tm,gd納米粒子溶解于2.00ml去離子水中，然后加入0.0150mlssdna(50.0μmol/l)于上述溶液中，放入恒溫培養(yǎng)振蕩儀中孵育，設(shè)置溫度為30℃，24h后取出離心超純水洗得到較純凈的ucnps-au-sh-ssdna。

檢測例1

按照實(shí)施例1的方法進(jìn)行得到ucnps-au-sh-ssdna，所不同的是改變釓離子的摻雜量，然后利用牌號為hitachis-4800的掃描電子顯微對ucnps-au-sh-ssdna進(jìn)行形貌分析，具體結(jié)果見圖2，其中，a圖中釓離子的用量為0μmol，b圖中釓離子的用量為60.0μmol，c圖中釓離子的用量為80.0μmol，d圖中釓離子的用量為90μmol，e圖中釓離子的用量為100μmol，f圖中釓離子的用量為110μmol，g圖中釓離子的用量為130μmol，由圖可知隨著gd³⁺濃度增加，納米材料形貌也逐漸從球形變成棒狀。

檢測例2

按照實(shí)施例1的方法進(jìn)行得到ucnps-au-sh-ssdna，所不同的是改變釓離子的摻雜量，然后通過hitachif-4600熒光分光光度計(jì)ucnps-au-sh-ssdna進(jìn)行，發(fā)光強(qiáng)度的檢測，具體結(jié)果見圖3，圖3為摻雜不同量gd³⁺的濃度與nayf4:yb,tm上轉(zhuǎn)換納米材料發(fā)光強(qiáng)度關(guān)系，由于同時考慮其發(fā)光強(qiáng)度和納米粒子的形貌，球形結(jié)構(gòu)的納米材料沒有各向異性以及大的比表面積等優(yōu)點(diǎn)，綜合選擇球形結(jié)構(gòu)且發(fā)光強(qiáng)度相對較高的納米材料，則最終選擇gd³⁺的最優(yōu)用量為100μmol(1.00mol/l)。

檢測例3

按照實(shí)施例1的方法進(jìn)行得到ucnps-au-sh-ssdna，所不同的是改變釓離子的摻雜量，通過牌號為hitachif-4600熒光分光光度計(jì)對ucnps-au-sh-ssdna進(jìn)行熒光檢測，具體結(jié)果見圖4，由圖可知，摻雜后比未摻雜熒光強(qiáng)度增強(qiáng)約9倍，其中a曲線為未摻雜上轉(zhuǎn)換發(fā)光納米材料的熒光曲線圖，b曲線為摻雜釓離子上轉(zhuǎn)換發(fā)光納米材料(實(shí)施例1中步驟1)制得的nayf4:yb,tm,gd上轉(zhuǎn)換發(fā)光納米材料)的熒光曲線圖。

檢測例4

按照實(shí)施例1的方法進(jìn)行得到ucnps-au-sh-ssdna，所不同的是改變金的摻雜量，通過hitachif-4600熒光分光光度計(jì)對ucnps-au-sh-ssdna進(jìn)行發(fā)光檢測，具體結(jié)果見圖5，由該圖可知當(dāng)au³⁺濃度為5.77μmol/l，上轉(zhuǎn)換材料發(fā)光強(qiáng)度達(dá)到最大值。

通過牌號為hitachif-4600熒光分光光度計(jì)對上轉(zhuǎn)換發(fā)光納米材料nayf4:yb,tm,gducnps以及實(shí)施例1中的aunps@nayf4:yb,tm,gducnps進(jìn)行熒光檢測，具體結(jié)果見圖6，由圖可知，包覆后比未包覆熒光強(qiáng)度增強(qiáng)約2倍，其中a曲線為未摻雜上轉(zhuǎn)換發(fā)光納米材料的熒光曲線圖，b曲線為摻雜釓離子上轉(zhuǎn)換發(fā)光納米材料(實(shí)施例1步驟1)制得的nayf4:yb,tm,gd上轉(zhuǎn)換發(fā)光納米材料)的熒光曲線圖。

檢測例5

利用牌號為hitachis-4800的掃描電子顯微鏡對實(shí)施例1中aunps@nayf4:yb,tm,gducnps進(jìn)行元素分析(eds)，結(jié)果如圖7。由圖7可知，aunps@nayf4:yb,tm,gducnps成功制備。

檢測例6

通過牌號為jeol2010的透射電子顯微鏡對實(shí)施例1中aunps@nayf4:yb,tm,gducnps的形貌檢測，具體見圖8，上轉(zhuǎn)換材料呈現(xiàn)球形，且形貌均一粒徑分布較窄。

應(yīng)用例1

hg²⁺的檢測：以tris-hcl(2.00ml，10.0mmol/l，ph7.4，50.0mmol/lkcl，5.00mmol/lmgcl2)作為緩沖溶液溶解ucnps-au-sh-ssdna，向一系列2ml消毒離心管中分別加入100μlucnps-au-sh-ssdna和一系列不同量的hg²⁺離子標(biāo)準(zhǔn)溶液，最終用tris-hcl緩沖溶液定容至0.800ml。隨后將混合液在30℃的溫度下孵育50min。

光致發(fā)光檢測：以980nm激光器作為光源日立公司hitachif-4600熒光分光光度計(jì)激發(fā)光源來測定光致發(fā)光光譜，以對hg²⁺進(jìn)行發(fā)光檢測。緩沖溶液為含2.00mltis-hcl緩沖溶液(2.00ml，10.0mmol/l，ph7.4，50.0mmol/lkcl，5.00mmol/lmgcl2)，向內(nèi)加入50.0μl樣品溶液，用hitachif-4600熒光分光光度計(jì)對其進(jìn)行發(fā)光檢測，繪制工作曲線，結(jié)果見圖11，其中，線性方程為i-i0＝28.6+1.76c(hg²⁺)，相關(guān)系數(shù)為0.99(為加入hg²⁺上轉(zhuǎn)換納米材料發(fā)光強(qiáng)度，i0為不加入hg²⁺上轉(zhuǎn)換納米材料發(fā)光強(qiáng)度)。結(jié)果說明了隨著hg²⁺濃度的增大，發(fā)光強(qiáng)度逐漸增強(qiáng)。即i-i0逐漸增大，進(jìn)一步證明了等離子共振增強(qiáng)發(fā)光效應(yīng)的發(fā)生，且具有較好的線性關(guān)系。

應(yīng)用例2

采用應(yīng)用例1的方式進(jìn)行，所不同的是改變ucnps-au-sh-ssdna偶聯(lián)體溶液的濃度，然后通過牌號為hitachif-4600熒光分光光度計(jì)發(fā)光分析系統(tǒng)記錄，結(jié)果如圖9所示，結(jié)果顯示0.187mg/ml為ucnps-au-sh-ssdna偶聯(lián)體的最佳濃度。

應(yīng)用例3

采用應(yīng)用例1的方式進(jìn)行，所不同的是改變孕育時間，然后通過牌號為hitachif-4600熒光分光光度計(jì)發(fā)光分析系統(tǒng)記錄，結(jié)果如圖10所示，結(jié)果顯示50min以上為最佳的振蕩孵育時間。

應(yīng)用例4

檢測實(shí)際樣：

按照應(yīng)用例的方法進(jìn)行，所不同的是在不同待測樣品中加入一定量已知濃度的hg²⁺離子，按照上述的實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行檢測，結(jié)果如下表所示，湖水和自來水樣品中hg²⁺離子的回收率分別為98.5-104％和96.3％-104％之間，其中rsd為相對標(biāo)準(zhǔn)偏差。通過表1可以看出，ucnps-au-sh-ssdna對于hg²⁺的檢測具有優(yōu)異的準(zhǔn)確度。

表1

應(yīng)用例5

干擾檢測：

考察不同金屬離子、氨基酸、糖類等對ucnps-au-sh-ssdna對于hg²⁺的檢測的抗干擾能力：。存在干擾物質(zhì)時對發(fā)光體系的影響，各物質(zhì)濃度如下：fe3⁺、蔗糖的濃度均為：6.25×10⁵nmol/l；ca²⁺、k⁺，檸檬酸，尿素的濃度均為：6.25×10⁷nmol/l；cu²⁺：6.25×10⁴nmol/l；hg⁺：6.25×10⁵nmol/l；gd²⁺：6.25×10⁶nmol/l；na⁺：2.5×10⁷nmol/l；尿酸、苯丙氨酸、精氨酸、甘氨酸的濃度均為：6.25×10⁴nmol/l；hg²⁺：62.5nmol/l。具體結(jié)果見圖12，由圖可知，只有hg²⁺對體系響應(yīng)信號最大，此結(jié)果歸咎于t-hg²⁺-t的特異性結(jié)合，所以該實(shí)驗(yàn)對hg²⁺離子具有很好地選擇性。

其中urea表示為尿素，citricacid表示為檸檬酸，l-arg表示為丙氨酸，l-gly表示為甘氨酸，l-phe表示為苯丙氨酸，sucrose表示為蔗糖，ua表示為尿酸。

以上詳細(xì)描述了本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式，但是，本發(fā)明并不限于上述實(shí)施方式中的具體細(xì)節(jié)，在本發(fā)明的技術(shù)構(gòu)思范圍內(nèi)，可以對本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行多種簡單變型，這些簡單變型均屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。

另外需要說明的是，在上述具體實(shí)施方式中所描述的各個具體技術(shù)特征，在不矛盾的情況下，可以通過任何合適的方式進(jìn)行組合，為了避免不必要的重復(fù)，本發(fā)明對各種可能的組合方式不再另行說明。

此外，本發(fā)明的各種不同的實(shí)施方式之間也可以進(jìn)行任意組合，只要其不違背本發(fā)明的思想，其同樣應(yīng)當(dāng)視為本發(fā)明所公開的內(nèi)容。