胰島素的凍干工藝的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及藥品制造領(lǐng)域，特別是涉及藥品的純化干燥工藝，更為具體的說是涉及胰島素的凍干工藝。為了建立一種新的干燥工藝，本發(fā)明公開了胰島素的凍干工藝，通過預(yù)凍、一次干燥、二次干燥的冷凍干燥過程，使胰島素結(jié)晶在干燥過程中基本不受環(huán)境影響。通過本發(fā)明公開凍干工藝生產(chǎn)出的胰島素，雜質(zhì)含量比常規(guī)工藝顯著降低，質(zhì)量穩(wěn)定，工藝成熟可行。本工藝避免有機(jī)溶劑的使用，消除了對人員和環(huán)境的潛在不良影響，并節(jié)約了干燥時間2-3天，提高工業(yè)化生產(chǎn)效率。
【專利說明】胰島素的凍干工藝
[0001]
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0002]本發(fā)明涉及藥品制造領(lǐng)域，特別是涉及藥品的純化干燥工藝，更為具體的說是涉及胰島素的凍干工藝。
[0003]
【背景技術(shù)】
[0004]胰島素是治療糖尿病的特效多肽激素化合物，迄今為止尚無更有效的替代藥物。源自豬胰臟提取的胰島素一般都以鋅鹽結(jié)晶形式存在，很多醫(yī)藥工作者都發(fā)現(xiàn)胰島素的晶體形式，例如 Abel,proc.Nat.Acad.Sc1.12，132(126) ;Biochem.J.28，1592-1602(1934);29，1048-1054(1935) ;U.S.Patent 2，143，590.由于胰島素是一種蛋白質(zhì)，容易在生產(chǎn)過程中受到溫度、酸堿、有機(jī)溶劑的影響，造成不同程度的變形影響其純度。
[0005]在傳統(tǒng)的胰島素的生產(chǎn)工藝中，胰島素結(jié)晶使用大量的有機(jī)溶劑脫水、真空干燥。該干燥工藝不僅具有有機(jī)溶劑殘留的風(fēng)險(xiǎn)，且在常溫下干燥，干燥時間較長，干燥期間，溫度及干燥時間亦影響胰島素的生物活性與純度。
[0006]所以，如何在保證胰島素品質(zhì)不變的基礎(chǔ)上，對其進(jìn)行干燥成為目前制藥業(yè)，特別是膜島素制品制藥業(yè)亟待解決的問題。
[0007]

【發(fā)明內(nèi)容】

[0008]本發(fā)明的目的在于建立一種新的干燥工藝，也就是本發(fā)明中公開的凍干工藝，使胰島素結(jié)晶在干燥過程中基本不受環(huán)境影響。
[0009]為了實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明所公開的技術(shù)方案如下:
胰島素的凍干工藝，包括以下步驟:
a.預(yù)處理待凍干胰島素結(jié)晶；
b.開啟冷凍干燥機(jī)，調(diào)節(jié)冷凍干燥室內(nèi)溫度至_25°C以下，將經(jīng)過預(yù)處理的胰島素結(jié)晶放入冷凍干燥機(jī)內(nèi)快速冷凍；
c.調(diào)節(jié)冷凍干燥室內(nèi)溫度至_15°C，保持冷凍干燥室溫度_15±2°C，產(chǎn)品預(yù)凍f2小
時；
d.調(diào)節(jié)冷凝器溫度至_40±2°C，再調(diào)節(jié)冷凍干燥室溫度逐漸至0°C，每小時回溫不超過2°C，真空條件下，并保持f 2小時；
e.繼續(xù)調(diào)節(jié)冷凍干燥室溫度至15°C，每小時回溫不超過7.5°C，維持冷凍干燥室溫度在15°C左右，真空條件下，并保持廣2小時；
f.關(guān)閉冷凍干燥機(jī)，調(diào)節(jié)冷凍干燥室內(nèi)環(huán)境至常壓、常溫后，取出胰島素凍干品。[0010]所述步驟d中，真空條件為18.0±8.0pa。
[0011]所述步驟e中，真空條件為15.0±5.0pa。
[0012]所述步驟b中快速冷凍溫度為_20°C。
[0013]所述步驟a中胰島素結(jié)晶的預(yù)處理方法為: a~l.水洗漆膜島素結(jié)晶，棄去洗漆液；
a-2.平鋪于凍干盤中。
[0014]所述步驟a-2中，平鋪于凍干盤中的胰島素晶體厚度為<12mm。
[0015]本發(fā)明所公開的技術(shù)方案，采用凍干工藝對胰島素進(jìn)行干燥，通過產(chǎn)品預(yù)處理、凍干條件調(diào)節(jié)等方式，實(shí)現(xiàn)胰島素的冷凍干燥，從而在保證胰島素原有空間結(jié)構(gòu)、胰島素生物活性的基礎(chǔ)上，對胰島素結(jié)晶中的雜質(zhì)和水分達(dá)到去除目的，使得胰島素結(jié)晶在干燥過程中基本不受干燥環(huán)境的影響。
[0016]本發(fā)明所述凍干工藝生產(chǎn)出的胰島素，雜質(zhì)含量比常規(guī)工藝顯著降低，質(zhì)量穩(wěn)定，工藝成熟可行。本工藝避免有機(jī)溶劑的使用，消除了對人員和環(huán)境的潛在不良影響，并節(jié)約了干燥時間2-3天，提高工業(yè)化生產(chǎn)效率。
[0017]
【具體實(shí)施方式】
[0018]在本說明書中，對于％的表達(dá)，在沒有明示的條件下，指的是重量％;cm在沒有明示的條件下，指的是厘米;mm在沒有明示的條件下，指的是毫米；g在沒有明示的條件下，指的是克；h在沒有明示的條件下，指的是小時；pa在沒有明示的條件下，指的是帕。
[0019]本發(fā)明中所用試劑除特別說明，均為市售試劑。
[0020]實(shí)施例1
胰島素的凍干工藝，包括以下步驟:
a.預(yù)處理待凍干胰島素結(jié)晶；
b.開啟冷凍干燥機(jī)，調(diào)節(jié)冷凍干燥室內(nèi)溫度至_25°C以下，將經(jīng)過預(yù)處理的胰島素結(jié)晶放入冷凍干燥機(jī)內(nèi)快速冷凍；
c.調(diào)節(jié)冷凍干燥室內(nèi)溫度至_15°C，保持冷凍干燥室溫度_15±2°C，產(chǎn)品預(yù)凍f2小
時；
d.調(diào)節(jié)冷凝器溫度至_40±2°C，再調(diào)節(jié)冷凍干燥室溫度逐漸至0°C，每小時回溫不超過2°C，真空條件下，并保持f 2小時；
e.繼續(xù)調(diào)節(jié)冷凍干燥室溫度至15°C，每小時回溫不超過7.5°C，維持冷凍干燥室溫度在15°C左右，真空條件下，并保持廣2小時；
f.關(guān)閉冷凍干燥機(jī)，調(diào)節(jié)冷凍干燥室內(nèi)環(huán)境至常壓、常溫后，取出胰島素凍干品。
[0021]實(shí)施例2
在實(shí)施例1的基礎(chǔ)上，所述步驟d中，真空條件為18.0±8.0pa0
[0022]實(shí)施例3
在以上實(shí)施例的基礎(chǔ)上，所述步驟e中，真空條件為15.0±5.0pa0
[0023]實(shí)施例4
在以上實(shí)施例的基礎(chǔ)上，所述步驟b中快速冷凍溫度為-20°C。[0024]實(shí)施例5
在以上實(shí)施例的基礎(chǔ)上，所述步驟a中胰島素結(jié)晶的預(yù)處理方法為: a~l.水洗漆膜島素結(jié)晶，棄去洗漆液； a-2.平鋪于凍干盤中。
[0025]實(shí)施例6
在以上實(shí)施例的基礎(chǔ)上，所述步驟a-2中，平鋪于凍干盤中的胰島素晶體厚度為<12mm0
[0026]實(shí)施例組7
本實(shí)施例中，用于生產(chǎn)0904A04-D的水洗后胰島素結(jié)晶來源于0904A04，用于生產(chǎn)0904A05-D的水洗后胰島素結(jié)晶來源于0904A05，用于生產(chǎn)0904A06-D的水洗后胰島素結(jié)晶來源于0904A06。
[0027]實(shí)施例7-1
(I)將胰島素結(jié)晶0904A04，加適量水洗滌后棄掉母液，將胰島素結(jié)晶600g轉(zhuǎn)入不銹鋼盤內(nèi)，平鋪后，厚度基本為4_左右。
[0028](2)將冷凍干燥室的溫度降至-30°C，放入胰島素結(jié)晶，控制胰島素結(jié)晶溫度下降至-21°C，再調(diào)節(jié)冷凍干燥室的溫度至-15°C，保持I小時。
[0029](4)調(diào)節(jié)冷凝器溫度達(dá)到_38°C，系統(tǒng)預(yù)抽真空至12pa，升華開始。控制溫度和真空度，保持真空度16_20pa，8.0 h溫度由-15°C升至(TC，并保持(TC 1.5 h。
[0030](5)提高干燥箱的壓力以加快熱量傳送，產(chǎn)品進(jìn)入二次干燥階段，保持真空度15-18 pa，2.5 h溫度由(TC升至15°C，并保持15°C干燥I h。
(6)二次干燥后，待制品溫度上升至室溫，輸入無菌空氣，使箱內(nèi)壓力與大氣一致。產(chǎn)品出箱，制得冷凍干燥后胰島素結(jié)晶0904A04D。
[0031]實(shí)施例7-2
(I)將胰島素結(jié)晶0904A05，加適量水洗滌后棄掉母液，將胰島素結(jié)晶2000g轉(zhuǎn)入不銹鋼盤內(nèi)，平鋪后，厚度基本為12mm左右。
[0032](2)將冷凍干燥室的溫度降至-30°C，放入胰島素結(jié)晶，控制胰島素結(jié)晶溫度下降至_22°C，調(diào)節(jié)冷凍干燥室的溫度至_17°C，并保持2小時。
[0033](4)調(diào)節(jié)冷凝器溫度達(dá)到_42°C，系統(tǒng)預(yù)抽真空至10pa，升華開始?？刂茰囟群驼婵斩?，保持真空度16-20pa，9.0 h溫度由-17°C升至(TC，并保持(TC 2.0 h。
[0034](5)提高干燥箱的壓力以加快熱量傳送，產(chǎn)品進(jìn)入二次干燥階段，保持真空度10-13pa，3.5 h溫度由(TC升至15°C，并保持15°C干燥1.5 h。
(6)二次干燥后，待制品溫度上升至室溫，輸入無菌空氣，使箱內(nèi)壓力與大氣一致。產(chǎn)品出箱，制得冷凍干燥后胰島素結(jié)晶0904A05D。
[0035]實(shí)施例7-3
(I)將胰島素結(jié)晶0904A06，加適量水洗滌后棄掉母液，將胰島素結(jié)晶IOOOg轉(zhuǎn)入不銹鋼盤內(nèi)，平鋪后，厚度基本為7_左右。
[0036](2)將冷凍干燥室的溫度降至-30°C，放入胰島素結(jié)晶，控制胰島素結(jié)晶溫度下降至-21°C，調(diào)節(jié)冷凍干燥室的溫度至-15°C，并保持I小時。
[0037](4)調(diào)節(jié)冷凝器溫度達(dá)到_40°C，系統(tǒng)預(yù)抽真空至12pa，升華開始?？刂茰囟群驼婵斩?，保持真空度16_20pa，8.5 h溫度由-15°C升至(TC，并保持(TC 1.5 h。
[0038](5)提高干燥箱的壓力以加快熱量傳送，產(chǎn)品進(jìn)入二次干燥階段，保持真空度13-16pa，2.5 h溫度由0°C升至15°C，并保持15°C干燥1.0 h。
(6)二次干燥后，待制品溫度上升至室溫，輸入無菌空氣，使箱內(nèi)壓力與大氣一致。產(chǎn)品出箱，制得冷凍干燥后胰島素結(jié)晶0904A06D。
[0039]實(shí)施例7-4
根據(jù)《中國藥典》2010版，分別對實(shí)施例7-1、7-2、7-3中的胰島素結(jié)晶和凍干后胰島素結(jié)晶進(jìn)行高分子蛋白質(zhì)含量和相關(guān)蛋白質(zhì)含量檢測，檢測結(jié)果如表1和表2所示:
表1:高分子蛋白質(zhì)含量檢測結(jié)果
【權(quán)利要求】
1.胰島素的凍干工藝，其特征是包括以下步驟: a.預(yù)處理待凍干胰島素結(jié)晶； b.開啟冷凍干燥機(jī)，調(diào)節(jié)冷凍干燥室內(nèi)溫度至_25°C以下，將經(jīng)過預(yù)處理的胰島素結(jié)晶放入冷凍干燥機(jī)內(nèi)快速冷凍；c.調(diào)節(jié)冷凍干燥室內(nèi)溫度至_15°C，保持冷凍干燥室溫度_15±2°C，產(chǎn)品預(yù)凍f2小時； d.調(diào)節(jié)冷凝器溫度至_40±2°C，再調(diào)節(jié)冷凍干燥室溫度逐漸至0°C，每小時回溫不超過2 °C，真空條件下，保持廣2小時； e.繼續(xù)調(diào)節(jié)冷凍干燥室溫度至15°C，每小時回溫不超過7.5°C，維持冷凍干燥室溫度在15°C左右，真空條件下，保持廣2小時； f.關(guān)閉冷凍干燥機(jī)，調(diào)節(jié)冷凍干燥室內(nèi)環(huán)境至常壓、常溫后，取出胰島素凍干品。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的胰島素的凍干工藝，其特征是:所述步驟d中，真空條件為18.0±8.0pa0
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的胰島素的凍干工藝，其特征是:所述步驟e中，真空條件為15.0±5.0pa0
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的胰島素的凍干工藝，其特征是:所述步驟b中快速冷凍溫度為-20 0C ο
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的胰島素的凍干工藝，其特征是:所述步驟a中胰島素結(jié)晶的預(yù)處理方法為: a~l.水洗漆膜島素結(jié)晶，棄去洗漆液； a-2.平鋪于凍干盤中。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的胰島素的凍干工藝，其特征是:所述步驟a-2中，平鋪于凍干盤中的胰島素晶體厚度<12mm。
【文檔編號】F26B1/00GK103512318SQ201210203825
【公開日】2014年1月15日 申請日期:2012年6月20日 優(yōu)先權(quán)日:2012年6月20日
【發(fā)明者】陸海波, 李曉紅, 王冉, 花瓊瓊 申請人:徐州萬邦金橋制藥有限公司, 上海復(fù)星醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)發(fā)展有限公司