專利名稱：蛋白質(zhì)結(jié)晶板的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本實(shí)用新型總體涉及一種用于生物領(lǐng)域的結(jié)晶板，特別涉及一種用于高通量(生產(chǎn)量)的蛋白質(zhì)結(jié)晶并符合SBS標(biāo)準(zhǔn)中的前三項(xiàng) 標(biāo)準(zhǔn)的結(jié)晶板。
背景技術(shù)：
蛋白質(zhì)是生命活動(dòng)的主要承擔(dān)者，對(duì)其三維結(jié)構(gòu)的了解是理解 蛋白質(zhì)功能的前提。例如，許多疾病是由于某些蛋白質(zhì)在空間的錯(cuò) 誤折疊，形成異常的三維結(jié)構(gòu)而引發(fā)。生物大分子結(jié)構(gòu)特別是蛋白 質(zhì)結(jié)構(gòu)的解析，不僅對(duì)人類理解蛋白質(zhì)功能、探討生命的本質(zhì)和起 源有著重要意義，而且為致病機(jī)理以及藥物靶標(biāo)的發(fā)現(xiàn)與合理化的 藥物設(shè)計(jì)等提供了重要的依據(jù)。蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)數(shù)據(jù)庫(kù)PDB (Protein Data Bank)最近的結(jié)果顯示，到2006年3月14日，已有35579種 蛋白結(jié)構(gòu)被解析，其中86%以上的蛋白結(jié)構(gòu)是通過X射線晶體學(xué) 完成的?？梢?，X射線晶體學(xué)迄今仍然是解析蛋白三維結(jié)構(gòu)的最重 要手段。X射線單晶衍射方法測(cè)定蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)大體流程可以順次分 為克隆、表達(dá)、純化、結(jié)晶以及晶體結(jié)構(gòu)解析這五個(gè)步驟。由于所 需的步驟較多、時(shí)間消耗相應(yīng)較長(zhǎng)、儀器設(shè)備需求也較復(fù)雜，解析 每個(gè)蛋白晶體結(jié)構(gòu)的消耗還是很大的。根據(jù)美國(guó)NIH統(tǒng)計(jì)資料，就 目前的水平，平均解析一個(gè)蛋白晶體結(jié)構(gòu)需要十萬(wàn)美元以上的費(fèi) 用。得到具有衍射能力的蛋白質(zhì)單晶樣品是晶體結(jié)構(gòu)解析的前提， 也是目前X射線晶體結(jié)構(gòu)解析的"瓶頸"步驟。從理論上講，只要 找到合適的晶體生長(zhǎng)條件，可溶性的蛋白質(zhì)都可以得到高質(zhì)量、適 用于晶體結(jié)構(gòu)解析的單晶。但是目前蛋白晶體生長(zhǎng)條件的篩選及優(yōu)化很大程度上更像一門藝術(shù)，這個(gè)"合適條件"的尋找需要大量的 嘗試，進(jìn)行繁瑣的初篩和優(yōu)化。
目前常用的蛋白質(zhì)結(jié)晶方法有懸滴氣相擴(kuò)散法、坐滴氣相擴(kuò)散 法、油覆法等。懸滴氣相擴(kuò)散法是指在涂有密封材料(如凡士林8)的玻璃片6、塑料片或?qū)Ｓ媚z帶上滴加待結(jié)晶的蛋白質(zhì)溶液4和結(jié) 晶篩選溶液等，并倒扣在含有上述結(jié)晶篩選溶液的池液上。坐滴氣 相擴(kuò)散法需要將待結(jié)晶的蛋白質(zhì)溶液和結(jié)晶篩選溶液的混合液滴 加在一個(gè)滴液槽內(nèi)，并用專用塑料膜或膠帶密封。圖1和圖2分別描述了懸滴法和坐滴法蛋白質(zhì)結(jié)晶的示意圖。圖1為懸滴法的示意圖。大儲(chǔ)槽2中的用于蛋白質(zhì)結(jié)晶篩選的 溶液通常包含緩沖劑或沉淀劑等。蛋白質(zhì)溶液的小液滴4中也包含 按 一 定比例加入的相同的蛋白質(zhì)結(jié)晶篩選溶液以及待結(jié)晶的蛋白 質(zhì)溶液，使得這些溶液中的諸如緩沖劑或沉淀劑的濃度低于大儲(chǔ)槽 2中的;容液，在密去于后，4吏得各單元內(nèi)通過大4諸槽2的;容液與小液 滴4兩者之間的蒸汽擴(kuò)散達(dá)到進(jìn)行蛋白質(zhì)結(jié)晶的動(dòng)態(tài)平衡的內(nèi)部環(huán) 境。圖2為坐滴法的示意圖。在這種方法中，將蛋白質(zhì)小液滴4置 于儲(chǔ)槽溶液2上方的支架上，這與懸滴法是相反的。隨著人們對(duì)蛋 白結(jié)晶過程認(rèn)識(shí)的加深以及對(duì)各種試劑的大量嘗試與組合，晶體篩 選條件日益增多，以Hampton 7>司常用的篩選條件為例，Screen Kit I、 II及Index,共192個(gè)篩選條件，常用來優(yōu)化晶體的添加劑試劑 盒也有近100個(gè)條件，其他公司或?qū)嶒?yàn)室可以沖是供的常用晶體篩選 條件也有幾百到上千種。對(duì)每一種蛋白可以進(jìn)行成千條件的篩選， 但大量條件的"海選"是以大量時(shí)間及試劑的消耗為前提的，并且 也需要更多的蛋白，很多情況下大量蛋白質(zhì)的生產(chǎn)表達(dá)及純化是非 常困^,的。目前進(jìn)行蛋白質(zhì)晶體生長(zhǎng)的通常采用量在0.1 4.0pL之間，進(jìn) 行篩選的結(jié)晶板多為塑料制品。對(duì)于高通量、完全自動(dòng)化晶體生長(zhǎng) 來說，通常采用符合國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)(ANSI標(biāo)準(zhǔn)SBS ( Society for Biomolecular Sciences))的96孑L、 384孔甚至1536孔結(jié)晶板，篩 選條件多、加樣量小，大大節(jié)省了樣品和篩選試劑。^旦同時(shí)由于池 液槽和滴液槽太小，排列緊密，非常不適于人工操作，反而減慢了手動(dòng):t喿作的工作效率。 而對(duì)于大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室，晶體生長(zhǎng)和篩選 一 般還是由手工操作完成，使用傳統(tǒng)的24孔結(jié)晶板(未示出)，但是該結(jié)晶板不適合于坐 滴氣相擴(kuò)散法。此外，目前巿場(chǎng)有許多針對(duì)符合SBS國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)的工 具和自動(dòng)化儀器，如加樣器(如Multi-channel Pipette )、自動(dòng)化晶 體生長(zhǎng)乂見測(cè)系統(tǒng)，而傳統(tǒng)24孔結(jié)晶玲反因?yàn)椴环蟂BS國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)而 不能使用這些先進(jìn)技術(shù)。另一方面，樣品易揮發(fā)、試劑加樣量少等這些因素都嚴(yán)重影響 實(shí)-瞼結(jié)果的可重復(fù)性，尤其是在人工4乘作下準(zhǔn)確性更差、操作比較 慢。此外蛋白質(zhì)及溶液性質(zhì)不同，蛋白質(zhì)晶體生長(zhǎng)的速度可以從幾 小時(shí)到幾周甚至幾個(gè)月不等，因此對(duì)于晶體生長(zhǎng)環(huán)境體系的封閉性要求很高。但是目前許多適用于高通量的結(jié)晶板都普遍存在不同程 度的泄漏問題。針對(duì)上述問題，結(jié)合加樣工具和觀測(cè)系統(tǒng)等發(fā)展的4支術(shù)現(xiàn)狀， 并考慮到目前國(guó)內(nèi)外多數(shù)實(shí)驗(yàn)仍然采用人工或半自動(dòng)化方法進(jìn)行蛋白質(zhì)晶體生長(zhǎng)，本實(shí)用新型提出了一種蛋白質(zhì)結(jié)晶板以及蛋白質(zhì) 結(jié)晶方法，即適用于高通量的完全自動(dòng)化晶體生長(zhǎng)和觀測(cè)篩選系 統(tǒng)，又滿足多數(shù)實(shí)驗(yàn)室半自動(dòng)化的需要。實(shí)用新型內(nèi)容基于上述需要，本實(shí)用新型的一個(gè)方面提供了一種用于高通量 蛋白質(zhì)結(jié)晶的蛋白質(zhì)結(jié)晶板，包括結(jié)晶板主體部分，以及在結(jié)晶板 主體上以陣列形式分布的儲(chǔ)槽單元，每一所述儲(chǔ)槽單元具有第一面 板，在所述第一面板中間位置形成一凹槽，所述凹槽底部為第二面 板，在所述第二面板中間位置凹入形成第一儲(chǔ)槽，在所述第一儲(chǔ)槽 至少一側(cè)的第二面板中形成有至少二個(gè)滴液槽，所述第一面板與第 二面板通過連接部連4妻，所述結(jié)晶板主體部分在其四周具有支撐 部。優(yōu)選地，所述陣列形式分布的儲(chǔ)槽單元為24個(gè)或48個(gè)；而所 述至少二個(gè)滴液沖曹為兩個(gè)、三個(gè)、四個(gè)、五個(gè)或六個(gè)。優(yōu)選地，所述結(jié)晶板是由高純度熱塑性塑料制成的，如聚酰胺 (PA)、聚丙烯(PP)、聚苯乙烯(PS)、丙烯腈-丁二烯-苯乙烯共
聚物(ABS)、聚碳酸酯(PC)、聚曱基丙烯酸甲酯(PMMA)、苯 乙烯-丙烯腈樹脂(SAN)、聚環(huán)烯腈聚合物(COP)等。優(yōu)選地，所述結(jié)晶板由封口帶或封板膜進(jìn)行密封。優(yōu)選地，所述第一儲(chǔ)槽的體積為0.04 ~ 1.4ml,所述滴液槽的體 積為0.2 ~ 7|il。更優(yōu)選地，所述結(jié)晶板由聚苯乙烯制成。優(yōu)選地，其中，滴液槽與第一4諸槽的形狀獨(dú)立選自由圓柱體、 半球體、倒置的圓臺(tái)體或圓錐體、立方體、長(zhǎng)方體構(gòu)成的組。更^尤選i也，其中，所述結(jié)晶斗反為24 (即4 x 6 )孑Uf反或48 (即 8x6)孔板，其尺寸符合SBS標(biāo)準(zhǔn)，即符合標(biāo)準(zhǔn)ANSI/SBS1-2004: 覆蓋區(qū)尺寸、ANSI/SBS2-2004:高度尺寸、ANSI/SBS3-2004底部 外側(cè)凸纟彖尺寸，并對(duì)ANSI/SBS4-2004:孑L位置標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)4亍了改進(jìn)。更優(yōu)選地，其中，所述結(jié)晶板為48 (即8x6)孔板，包括結(jié) 晶4反主體部分，所述主體部分的第一面寺反的總長(zhǎng)度為120.5 ~ 125.5mm,總寬度為78.5 ~ 83.5mm;其中，每一4諸槽單元的長(zhǎng)度為 13.5~15.5mm、寬度為6.5 ~ 7.5mm;第一面板和第二面玲反上表面之 間的距離為2~8mm;第一儲(chǔ)槽的寬度為3.0-6.0 mm、長(zhǎng)度為 6.5 7.5mm、深度為3.5 ~ 9.5mm;滴液槽的上端直徑R上為3.0 > R 上> 1.5mm、下端直徑R下為2.5 > R下> 0.5mm，滴液槽的深度為0.2 ~ 1.0mm;在儲(chǔ)槽單元四周的第一面板的寬度為1.5 ~ 4.5mm，而在結(jié) 晶板主體部分的最外周的儲(chǔ)槽單元外周的第一面板的寬度為5.5 ~ 10.5mm;所述支撐部的總高度為13.8 14.6mm。更優(yōu)選地，其中，所述結(jié)晶板為24 (即4x6)孔板，包括結(jié) 晶板主體部分，所述主體部分的第一面板的總長(zhǎng)度為120.5-125.5mm,總寬度為78.5 ~ 83.5mm;其中，每一所述4諸槽單元的長(zhǎng) 度為15.0 16.5mm、寬度為15.0 16.5mm;所述第一面才反和第二面 板上表面之間的距離為2 ~ 8mm;第一儲(chǔ)槽的長(zhǎng)度為15.0 16.5mm、 寬度為5 9mm、深度為3.5 9.5mm;滴液槽的上端直徑R上為3.0^R 上^1.5mm、下端直徑R下為2.5上R下^0.5mm,滴'液才曹的深度為0.2 ~ l.Omm;在儲(chǔ)槽單元四周的第一面板的寬度為1.5 ~ 3.0mm,而在結(jié) 晶板主體部分的最外周的儲(chǔ)槽單元外周的第一面板的寬度為5.5 ~10.0mm;支撐部的總高度為13.8 14.6mm。更優(yōu)選地，其中，所述 支撐部由上支撐部、下支撐部以及連接上下支撐部的支撐連接部構(gòu) 成，其中上支撐部的高度為6.1~12.5mm、下支撐部的高度為2.0 ~ 8.0mm，以及連4妄上下支撐部的支撐連4妄部的寬度為1.0~4.0mm。 再優(yōu)選地，其中，上支撐部的高度為7.6 8.9mm、下支撐部的高度 為2.7 6mm,以及連4妄上下支撐部的支撐連4妾部的寬度為 1.5 3.0mm。優(yōu)選地，所述結(jié)晶板的第 一面板在其寬度方向上的 一端分別具 有兩個(gè)導(dǎo)角a和P;而所述結(jié)晶板的上支撐部、及支撐連接部也分 別具有對(duì)應(yīng)于結(jié)晶才反的第一面一反的導(dǎo)角a和p。更伊C選i也，導(dǎo)角a 和P為135+/-10°。優(yōu)選地，所述結(jié)晶板進(jìn)一步包括上部殼體，所述殼體由與所述 結(jié)晶板主體部分相適應(yīng)的上表面和多個(gè)側(cè)面組成，并支撐于所述支 撐部之上，用于所述結(jié)晶板的防塵與堆疊。由于才艮才居本實(shí)用新型的高通量蛋白質(zhì)結(jié)晶才反尺寸符合SBS (Society for Biomolecular Sciences ) 標(biāo)準(zhǔn)，即符合標(biāo)準(zhǔn) ANSI/SBS1-2004:覆蓋區(qū)尺寸、ANSI/SBS2-2004:高度尺寸、 ANSI/SBS3-2004底部外側(cè)凸緣尺寸，并對(duì)ANSI/SBS4-2004:孔位置標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行了改進(jìn)，因而可方便地用于才幾械化操作，并且其結(jié)構(gòu)簡(jiǎn) 單，使用方便。根據(jù)本實(shí)用新型的蛋白質(zhì)結(jié)晶板在每一儲(chǔ)槽單元內(nèi) 的第 一儲(chǔ)槽和至少二個(gè)滴液槽之間形成了進(jìn)行蛋白質(zhì)結(jié)晶的動(dòng)態(tài) 封/ 、 5 ' " ' ' ' - 、本實(shí)用新型提供的結(jié)晶板既適合于大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室中晶體生長(zhǎng) 和篩選的手工才喿作，又適合于坐滴氣相擴(kuò)散法。此外，本實(shí)用新型 提供的結(jié)晶板的結(jié)構(gòu)與目前市場(chǎng)上的符合SBS國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)的工具和 自動(dòng)4匕4義器，4口力口才羊器(^口 Multi-channel Pipette )、自動(dòng)4匕曰曰曰體生 長(zhǎng)乂見測(cè)系統(tǒng)等相匹配，因而可以利用符合SBS國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)的這些先進(jìn) 技術(shù)。利用根據(jù)本實(shí)用新型的蛋白質(zhì)結(jié)晶板進(jìn)行蛋白質(zhì)結(jié)晶，由于每 個(gè)4諸槽單元有多個(gè)滴液槽，可以同時(shí)進(jìn)4亍幾種不同蛋白質(zhì)的結(jié)晶條
件篩選，減少平均每個(gè)蛋白質(zhì)結(jié)晶條件篩選的試劑用量，因而可以 降低蛋白質(zhì)篩選的成本，而且由于在每一儲(chǔ)槽單元內(nèi)的各滴液槽或 者是分散的，或者相鄰兩者之間的距離大于現(xiàn)有4支術(shù)中的各滴液槽 之間的距離，為手工操作提供了更大的工作空間，同時(shí)該晶體板遵守SBS標(biāo)準(zhǔn)，可以用自動(dòng)化設(shè)備進(jìn)行操作。此外，每個(gè)儲(chǔ)槽單元之間的距離較大，在很大程度上克服了目前許多高通量結(jié)晶板密封性 差，泄露的問題。應(yīng)該理解，以上的 一般性描述和以下的詳細(xì)描述都是出于列舉和說明性的目的，是為了對(duì)本實(shí)用新型提供進(jìn)一步的說明，并不用 于限制本實(shí)用新型。


構(gòu)成i兌明書一部分的附圖有助于進(jìn)一步理解本實(shí)用新型，這些附圖圖示+兌明了本實(shí)用新型的一些實(shí)施例，并可與i兌明書一起用來 -說明本實(shí)用新型的原理。圖1示出了現(xiàn)有技術(shù)的懸滴法的蛋白質(zhì)結(jié)晶的示意圖；圖2示出了現(xiàn)有技術(shù)的坐滴法的蛋白質(zhì)結(jié)晶的示意圖；圖3示出了4艮據(jù)本實(shí)用新型的一種蛋白質(zhì)結(jié)晶板(48x2,即 (8x6) x2結(jié)晶板)的立體圖；圖4示出了4艮據(jù)本實(shí)用新型的一種蛋白質(zhì)結(jié)晶板(48x2，即 (8x6) x 2結(jié)晶^反)的俯一見圖；圖5示出了根據(jù)本實(shí)用新型的一種蛋白質(zhì)結(jié)晶板(48x2，即 (8x6) x2結(jié)晶才反)沿第A^f亍的滴液槽中心線的《從剖圖；圖6示出了4艮據(jù)本實(shí)用新型的一種蛋白質(zhì)結(jié)晶外反(48x2，即 (8x6) x2結(jié)晶;〖反)沿第1列的滴'液才曹中心線的》從剖圖；圖7示出了4艮據(jù)本實(shí)用新型的一種蛋白質(zhì)結(jié)晶板(48x2，即 (8x6) x2結(jié)晶板)的一個(gè)儲(chǔ)槽單元的縱剖圖；圖8示出了根據(jù)本實(shí)用新型的一種蛋白質(zhì)結(jié)晶板(48x2，即 (8x6) x 2結(jié)晶板)在結(jié)晶板主體邊緣兩個(gè)連續(xù)儲(chǔ)槽單元的局部 全從剖圖9示出了根據(jù)本實(shí)用新型的另一種蛋白質(zhì)結(jié)晶板(24x3， 即(4x6) x3結(jié)晶板)的立體圖；圖IO示出了根據(jù)本實(shí)用新型的另一種蛋白質(zhì)結(jié)晶板(24x3， 即(4x6) x3纟吉晶^反)的俯一見圖；圖11示出了根據(jù)本實(shí)用新型的另一種蛋白質(zhì)結(jié)晶板(24x3， 即(4 x 6 ) x 3結(jié)晶板)沿第A行中的一行滴液槽中心線的縱剖圖；圖12示出了根據(jù)本實(shí)用新型的另一種蛋白質(zhì)結(jié)晶板(24x3， 即(4x6) x3結(jié)晶玲反)沿第1列的滴液槽中心線的縱剖圖；圖13示出了根據(jù)本實(shí)用新型的又一種蛋白質(zhì)結(jié)晶板(24x6, 即(4 x 6 ) x 3結(jié)晶4反)的^府一見圖；圖14示出了根據(jù)本實(shí)用新型的鏡像對(duì)稱的蛋白質(zhì)結(jié)晶板的一 個(gè)儲(chǔ)槽單元中的滴液槽可能的平面布置圖；圖15示出了根據(jù)本實(shí)用新型的非鏡像對(duì)稱的蛋白質(zhì)結(jié)晶板沿 第A行的滴液槽中心線的縱剖圖，以及對(duì)應(yīng)的在一個(gè)儲(chǔ)槽單元中的 滴液槽可能的平面布置圖；圖16示出了圖4中的48 x 2，即(8 x 6 ) x 2結(jié)晶才反在利用無(wú) 接縫的封口帶(膠帶)進(jìn)行密封時(shí)相鄰的兩個(gè)儲(chǔ)槽單元內(nèi)部各自的 密封情況的》文大照片；圖17示出了圖4中的48 x 2,即(8x6) x2結(jié)晶—反利用在相 鄰的兩個(gè)儲(chǔ)槽單元之間的第一面板上搭接的封口帶(膠帶)進(jìn)行密 封時(shí)相鄰的兩個(gè)儲(chǔ)槽單元內(nèi)部各自的密封情況的放大照片；圖18示出了圖4中的48 x 2,即(8x6) x2結(jié)晶4反利用在相 鄰的兩個(gè)儲(chǔ)槽單元之間的第一面板上搭接的封口帶(膠帶)進(jìn)行密 封時(shí)搭接的封口帶(膠帶)的示意圖；圖19示出了現(xiàn)有技術(shù)中的結(jié)晶板在利用無(wú)接縫的封口帶(膠 帶)進(jìn)行密封時(shí)相鄰的兩個(gè)儲(chǔ)槽單元內(nèi)部各自的密封情況的放大照 片；
圖20示出了現(xiàn)有技術(shù)中的結(jié)晶板利用在相鄰的兩個(gè)儲(chǔ)槽單元之間的第一面板上招-接的封口帶(膠帶)進(jìn)行密封時(shí)相鄰的兩個(gè)儲(chǔ)槽單元內(nèi)部各自的密封情況的放大照片；以及圖21示出了圖4中的48x2，即(8x6) x2結(jié)晶板利用無(wú)接 縫的封口帶(膠帶)進(jìn)行密封時(shí)相鄰的兩個(gè)儲(chǔ)槽單元內(nèi)部各自的密 封情況、利用刀片將其中的一個(gè)儲(chǔ)槽單元上方的封口帶打開、以及 將打開的一個(gè)儲(chǔ)槽單元的封口帶再密封后的放大照片，其中左側(cè)的 圖代表進(jìn)行密封、切割并取出晶體、以及再密封操作時(shí)封口帶的狀 態(tài)，右側(cè)的圖代表進(jìn)行的密封、切割并取出晶體、以及再密封操作 時(shí)封口帶密封情況的放大照片。
具體實(shí)施方式
以下對(duì)于某些實(shí)施例的詳細(xì)i兌明纟會(huì)出了對(duì)本實(shí)用新型的具體 實(shí)施例的各種描述。但是本實(shí)用新型可以由權(quán)利要求所限定和覆蓋 的多種不同方式來實(shí)施。該具體實(shí)施方式
將結(jié)合附圖進(jìn)4亍，并且在 附圖中相同或相應(yīng)的要素或部件或部4立用同 一標(biāo)號(hào)表示。參見圖3至圖15，根據(jù)本實(shí)用新型的一個(gè)方面，在本實(shí)用新型 的 一 個(gè)具體實(shí)施例中，提供了 一種用于高通量蛋白質(zhì)結(jié)晶的蛋白質(zhì) 結(jié)晶板，包括結(jié)晶板主體部分IO,以及在結(jié)晶板主體上以陣列形式 分布的儲(chǔ)槽單元20，每一儲(chǔ)槽單元20具有第一面板240,在第一 面板中間位置形成一凹槽，該凹槽底部為第二面板250，在第二面 板中間位置或靠近一側(cè)的位置凹入形成第一儲(chǔ)槽220，在第一儲(chǔ)槽 220至少一側(cè)的第二面壽反250中形成有至少二個(gè)滴液槽230，第一 面4反240與第二面才反250通過連4矣部260連4妄，結(jié)晶外反主體部分10 在其四周具有支撐部300。優(yōu)選;也，支撐部300由上支撐部320和 下支撐部340及連接上下支撐部的支撐連接部360構(gòu)成。參見圖3至圖8以及圖14 ~圖15,在一具體實(shí)施例(48 (8 x 6)孑14反)中，至少二個(gè)滴液槽230為多個(gè)，可為2個(gè)(圖3至圖8、 圖14 )、 3個(gè)(圖15 )、 4個(gè)(圖14 )、 6個(gè)(圖15 )、或任何適宜個(gè) 凄t;多個(gè)滴液槽230凹入在第 一儲(chǔ)槽220兩側(cè)的第二面板250中。參見圖9至圖15,在另一具體實(shí)施例(24 (4x6)孔板)中， 至少二個(gè)滴液槽230為多個(gè)，可以為2個(gè)(圖14)、 3個(gè)(圖15 )、 4個(gè)(圖14)、 5個(gè)(圖15)、 6個(gè)(圖IO或圖15)、或任何適宜多 個(gè)；多個(gè)滴液槽230凹入在第一4諸槽220 —側(cè)的第二面才反250中。在又一具體實(shí)施例中，結(jié)晶一反主體部分10中以陣列形式分布 的儲(chǔ)槽單元20為24個(gè)，即為4x6個(gè)(即，24孔板，參見圖9至 15);在另一具體實(shí)施例中，陣列形式分布的^f諸槽單元20為48個(gè)， 即為8x6個(gè)(即，48孔板，參見圖3至8);在另一個(gè)具體實(shí)施例 中，陣列形式分布的儲(chǔ)槽單元20為96個(gè)，即為8xl2(即，96孔 板，未示出)，在一個(gè)儲(chǔ)槽單元20中，至少二個(gè)滴液槽230為兩個(gè)、 三個(gè)、\^個(gè)、五個(gè)或六個(gè)。在一具體實(shí)施例中，第一儲(chǔ)槽220的形狀為圓柱體、立方體、 長(zhǎng)方體、半球體、倒置的圓臺(tái)體或圓錐體；滴液槽230的形狀為圓 柱體、立方體、長(zhǎng)方體、半J求體、倒置的圓臺(tái)體或圓錐體。在一具體實(shí)施例中，第一儲(chǔ)槽220的體積為0.04 ~ 1.4ml,滴液 槽230的體積為0.2 ~ 7ji1。結(jié)晶板由不限于以下的材料制成，即由高純度熱塑性塑料制 成，如聚酰胺(PA)、聚丙烯(PP)、聚苯乙烯(PS)、丙烯腈-丁二 烯-苯乙烯共聚物(ABS)、聚碳酸酯(PC)、聚甲基丙烯酸曱酯 (PMMA)、苯乙烯-丙烯腈樹脂(SAN)、聚環(huán)烯腈聚合物(COP) 等等。優(yōu)選的聚合材料聚乙烯-丙烯腈樹脂、聚丙烯等。最優(yōu)選的聚 合材料為聚笨乙烯。在一具體實(shí)施例中，結(jié)晶板由封板膜或封口帶 進(jìn)行密封，優(yōu)選由封口帶密封。在一具體實(shí)施例中，結(jié)晶板進(jìn)一步 包括上部殼體(未示出)，該殼體由與結(jié)晶板主體部分IO相適應(yīng)的 上表面和多個(gè)側(cè)面組成，并支撐于結(jié)晶板的支撐連接部360之上， 用于結(jié)晶^^反的防塵與堆疊。在一具體實(shí)施例(48 (即8 x 6 x 2 4竟面只于稱)孑14反)中，蛋白 質(zhì)結(jié)晶板包括結(jié)晶板主體部分IO，主體部分的第一面板240的總 長(zhǎng)度為120.5 125.5mm,總寬度為78.5 83.5mm;每一儲(chǔ)槽單元20 的長(zhǎng)度為13.5-15.5mm、寬度為6.5 ~ 7.5mm,其中第一儲(chǔ)槽220 的長(zhǎng)度為6.5 7.5mm、寬度為3.0 ~ 6.0mm、；罙度為3.5~9.5mm,而 滴液槽230的深度為0.2 ~ l.Omm,直徑為1.6 ~ 2.4mm;支撐部300 的總高度為13.8 14.6mm;在儲(chǔ)"瞎單元20四周的第一面才反240的寬
度為1.5 ~ 4.5mm,而在結(jié)晶板主體部分10的最外周的儲(chǔ)槽單元20 四周的第一面板240的寬度為5.5 ~ 10.5mm;上支撐部320的高度 為6.1 ~ 12.5mm、下支撐部340的高度為2.0 ~ 8.0mm,以及連4妻上 下支撐部的支撐連接部360的寬度1.0~4.0mm。在一優(yōu)選實(shí)施例中，上支撐部320高度為7.6 8.9mm、下支撐 部340高度為2.7 6.0mm，及連4妾上下支撐部的支撐連4妄部360的 寬度為1.5 3.0mm。更優(yōu)選;也，每一4諸槽單元20的長(zhǎng)度為14.5+/-0.25mm、寬度為 7.25+/-0.25mm，第一儲(chǔ)槽220的長(zhǎng)度為7.25+/-0.5mm、寬度為 4.0+/-0.5mm 、 深度為 8.25+/-0.5mm , 滴液槽230的深度為 0.4+/-0.1mm、為上下端直徑分別為2.2+/-0.3mm與1.7+/-0.3mm的 圓臺(tái)狀；上支撐部320的高度為8.25+/-0.5mm、下支撐部340的高 度為6.10+/-0.38mm,以及連4妻上下支撐部的支撐連4姿部360的寬 度為1.8+/-0.5mm。在另一具體實(shí)施例(24 (即4x6xn)孑14反)中，蛋白質(zhì)結(jié)晶 4反包4舌結(jié)晶纟反主體部分IO，主體部分的第一面一反240的總長(zhǎng)度為 120.5 ~ 125.5mm,總寬度為78.5 ~ 83.5mm;每一4諸才會(huì)單元20的長(zhǎng) 度為15.0 16.5mm、寬度為15.0~16.5mm，其中第一4諸槽220的長(zhǎng) 度為15.0 16.5mm、寬度為5~9mm、；罙度為3.5 9.5mm,而滴液 槽(230)的上端直徑R上為3.0^R上2l.5mm 、下端直徑R下為2.5^R T>0.5mm,滴液槽的深度為0.2~1.0mm;支撐部300的總高度為 13.8 14.6mm;上支撐部320的高度為6.1 ~ 12.5mm、下支撐部340 的高度為2.0~8.0mm，以及連接上下支撐部的支撐連接部360的寬 度為1.0 ~ 4.0mm;在儲(chǔ)槽單元20四周的第一面板240的寬度為 1.5 ~ 3.0mm，而在結(jié)晶板主體部分10的最外周的儲(chǔ)槽單元20四周 的第一面才反240的寬度為5.5 ~ 10.0mm。在一優(yōu)選實(shí)施例中，上支撐部320高度為7.6 8.9mm、下支撐 部340高度為2.7 6.0mm，及連4妄上下支撐部的支撐連4妄部360的 寬度為1.5 3.0mm。更優(yōu)選地，每一儲(chǔ)槽單元20的長(zhǎng)度為16.0+/-0.25mm、寬度為 16.0+/-0.25mm，第 一儲(chǔ)槽220的長(zhǎng)度為16.0+/-0.5mm、寬度為說明書第ll/20頁(yè)8.0+/-0.5mm 、深度為8.25+/-0.5mm ， 滴液槽230的深度為 0.4+/-O.lmm、為上下端直徑分別為2.2+/-0.3mm與1.7+/-0.3mm的 圓臺(tái)狀或深度為1.0+/-0.2mm、直徑為2.0+/-0.3mm的近半J泉狀。上 支撐部320的高度為8.25+/-0.5mm 、下支撐部340的高度為 6.10+/-0.38mm，以及連4妻上下支撐部的支撐連纟妻部360的寬度為 2.8mm+/-0.5mm。在另一具體實(shí)施例中，結(jié)晶板由封板膜進(jìn)行密封。如圖3、圖5、圖6、圖8、圖9、圖11和圖12所示，支撐部 300由上支撐部320、下支撐部340以及連接上下支撐部320、 340 的支撐連4婁部360構(gòu)成。如圖4、圖9、圖10和圖13所示，結(jié)晶々反的第一面板240在 其寬度方向上的一端分別具有兩個(gè)導(dǎo)角a和p。相應(yīng)i也，J:匕處的上 支撐部320、及支撐連接部360也分別具有導(dǎo)角a和|3。優(yōu)選地， 上述導(dǎo)角a和卩為135+/-10°。更優(yōu)選地，導(dǎo)角a、 (3之間的第一面 板240的長(zhǎng)度為8.0~10.0mm,最優(yōu)選地，導(dǎo)角a、 p之間的第一面 氺反240的長(zhǎng)度為9.0+/-0.5mm。在本實(shí)用新型的一個(gè)具體實(shí)施例中提供了一種利用高通量蛋 白質(zhì)結(jié)晶板進(jìn)行的坐滴法蛋白質(zhì)結(jié)晶方法，包括以下步驟a. 將適當(dāng)體積的由緩沖劑、沉淀劑、去垢劑等或其組合組成的 結(jié)晶池液2加入到每個(gè)儲(chǔ)槽單元20中的第 一儲(chǔ)槽220中；b. 將適當(dāng)體積與步驟a中相同的溶液與要進(jìn)行結(jié)晶的蛋白質(zhì) 溶液4要照一定比例分別加入到每個(gè)儲(chǔ)槽單元20內(nèi)的至少一個(gè)滴液 槽230中，同時(shí)還可#4居需要在滴液槽中加入添加劑、去垢劑或其 組合；c. 利用封口帶或封板膜覆蓋在所述儲(chǔ)槽單元20的第一面板240 上，將在所述結(jié)晶板主體上以陣列形式分布的每一儲(chǔ)槽單元20密 封，而在每一儲(chǔ)槽單元內(nèi)部形成維持蛋白質(zhì)結(jié)晶的動(dòng)態(tài)平衡環(huán)境；d. 將該結(jié)晶板置于蛋白質(zhì)結(jié)晶的溫度下進(jìn)行蛋白質(zhì)結(jié)晶實(shí)驗(yàn)。 在本實(shí)用新型的一個(gè)具體實(shí)施例中4是供了一種利用高通量蛋白質(zhì)結(jié)晶板進(jìn)行的懸滴法蛋白質(zhì)結(jié)晶方法，包括以下步驟a. 將適當(dāng)體積的由緩沖劑、沉淀劑、添加劑、去垢劑等或其組 合組成的結(jié)晶池液2加入到每個(gè)^f諸槽單元20中的第一4諸槽220中；b. 將適當(dāng)體積的與步驟a中相同的溶液與要進(jìn)行結(jié)晶的蛋白 質(zhì)溶液按照一定比例根據(jù)結(jié)晶板10的儲(chǔ)槽單元20的分布情況滴加 到封口帶或封板膜6之上，同時(shí)還可根據(jù)需要在上述液滴中加入添 加劑、去垢劑或其組合；c. 將所述封口帶或封板膜6倒置并覆蓋在儲(chǔ)槽單元20的第一 面板240上，利用封口帶或封板膜提供在結(jié)晶板主體10上以陣列 形式分布的每一儲(chǔ)槽單元20的密封，而在每一儲(chǔ)槽單元內(nèi)部形成 維持蛋白質(zhì)結(jié)晶的動(dòng)態(tài)平衡環(huán)境；d. 將該結(jié)晶板置于蛋白質(zhì)結(jié)晶的溫度下進(jìn)行蛋白質(zhì)結(jié)晶實(shí)驗(yàn)。在一具體實(shí)施例中，在每一儲(chǔ)槽單元20中的蛋白質(zhì)溶液是相 同的，在另一個(gè)具體實(shí)施例中，在每一儲(chǔ)槽單元20中的蛋白質(zhì)溶 液是不同的。在一具體實(shí)施例中，利用封板膜或封口帶覆蓋在儲(chǔ)槽單元20 四周的第一面^反240上，來密去:]"每一4諸槽單元20。在一具體實(shí)施例中，蛋白質(zhì)結(jié)晶過程或結(jié)果由自動(dòng)化結(jié)晶觀測(cè) 系統(tǒng)進(jìn)行監(jiān)測(cè)。在另一實(shí)施例中，蛋白質(zhì)結(jié)晶過程或結(jié)果由照相機(jī) 進(jìn)行監(jiān)測(cè)。在又一實(shí)施例中，蛋白質(zhì)結(jié)晶過程或結(jié)果由4聶像機(jī)進(jìn)行 監(jiān)測(cè)。在另一實(shí)施例中，蛋白質(zhì)結(jié)晶過程或結(jié)果由人工進(jìn)行監(jiān)測(cè)。應(yīng)該理解，雖然本實(shí)用新型的上述用于蛋白質(zhì)結(jié)晶的結(jié)晶板4又 以坐滴法或懸滴法為例進(jìn)行了說明，但上述用于蛋白質(zhì)結(jié)晶的結(jié)晶 板并不僅限于蛋白質(zhì)結(jié)晶，其還適用于其他的蛋白質(zhì)培養(yǎng)、蛋白質(zhì) 染色實(shí)驗(yàn)、蛋白質(zhì)的特異性結(jié)合實(shí)驗(yàn)等用途。尤其是，適用于所有 利用24孔、48孔或96孑L結(jié)晶板所進(jìn)4亍的實(shí)-驗(yàn)研究中。由于本實(shí)用新型的結(jié)晶板的結(jié)構(gòu)尺寸至少符合SBS( Society for Biomolecular Sciences)標(biāo)準(zhǔn)之三，即符合ANSI/SBS1-2004 、 ANSI/SBS2-2004、 ANSI/SBS3-2004標(biāo)準(zhǔn)，并對(duì)ANSI/SBS4-2004標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行了改進(jìn)。根據(jù)本實(shí)用新型的高通量蛋白質(zhì)結(jié)晶板可方便地 用于機(jī)械化搡作，即機(jī)器人搡作，又可進(jìn)行人工搡作。根據(jù)本實(shí)用 新型的結(jié)晶板結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，使用方便，并且在每一儲(chǔ)槽單元內(nèi)的第一 儲(chǔ)，和至少，個(gè)滴液:曹之間形成一了 ，行蛋白，結(jié)晶的"態(tài)平衡的由于才艮據(jù)本實(shí)用新型的蛋白質(zhì)結(jié)晶板在每一儲(chǔ)槽單元中都具 有一個(gè)第一j諸槽和多個(gè)滴液槽，因此可以同時(shí)在相同的條件、相同 的蛋白質(zhì)濃度、相同的緩沖劑以及相同的沉淀劑條件下得到平行的 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，可以同時(shí)獲得2、 3、 4、 5或6組平行實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，從而 可以— 驗(yàn)i正平行實(shí) 一瞼的可靠性。同時(shí)，在不同的儲(chǔ)槽單元中，又可以同時(shí)進(jìn)行若干組不同條件 的實(shí)驗(yàn)，如不同的蛋白質(zhì)濃度、不同的緩沖劑種類和濃度、不同的 沉淀劑種類和濃度，可以同時(shí)進(jìn)4亍若干組(如24或48組)不同條 件的蛋白質(zhì)結(jié)晶的條件篩選的實(shí)驗(yàn)，加快了蛋白質(zhì)結(jié)晶條件的篩選 速度。并且同一儲(chǔ)槽的不同滴液槽可以滴加不同的蛋白質(zhì)，進(jìn)行多 組蛋白質(zhì)的平行篩選，從而大大提高篩選的效率，最終實(shí)現(xiàn)了高通 量的蛋白質(zhì)結(jié)晶條件篩選。本實(shí)用新型提供的24(4x6)孔板或 48 ( 8 x 6 )孔板既可以適用于手工操作，又適用于機(jī)械自動(dòng)化操作。此外，本實(shí)用新型提供的蛋白質(zhì)結(jié)晶板在相鄰的兩儲(chǔ)槽單元10 之間的第一面板240的寬度遠(yuǎn)大于現(xiàn)有技術(shù)的寬度，其中第一面板 240的寬度至少為1.5mm，因此，使得對(duì)結(jié)晶板的分區(qū)密封成為可 能。即，在每一行或每一列裝填蛋白質(zhì)溶液后即可利用封口帶(膠 帶)進(jìn)4亍該4亍或該列的密去于，由此避免了人工才喿作時(shí)由于時(shí)間長(zhǎng)而 引起的溶液濃度的變化使得結(jié)晶實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性差的問題。因而，本 實(shí)用新型的24或48孔板尤其適于在人工操作條件下，對(duì)結(jié)晶板的 分區(qū)密封，同時(shí)保證了各相鄰儲(chǔ)槽單元20內(nèi)部的氣密性。此夕卜，如圖14和圖15所示，本實(shí)用新型的蛋白質(zhì)結(jié)晶寺反中的 每一儲(chǔ)槽單元10內(nèi)不同的滴液槽230或者是位于第一儲(chǔ)槽220的 不同側(cè)，或者位于第一儲(chǔ)槽220同一側(cè)的相鄰滴液槽230間距離大 于現(xiàn)有4支術(shù)的結(jié)晶板，因此在利用坐滴法進(jìn)行蛋白質(zhì)結(jié)晶時(shí)，可以 實(shí)現(xiàn)在頂部準(zhǔn)確地滴液，避免了蛋白液的^l昔加、漏加或混雜，并在
加入結(jié)晶篩選溶液和待結(jié)晶的蛋白質(zhì)溶液后可以進(jìn)行可靠的樣品 密封，A/v而才是高蛋白質(zhì)晶體的效率。實(shí)施例1 48 x 2鎮(zhèn):^Mt稱的結(jié)晶板參見圖3至圖8，示出一種用于高通量蛋白質(zhì)結(jié)晶的48x2鏡 像對(duì)稱的蛋白質(zhì)結(jié)晶板，其尺寸符合SBS標(biāo)準(zhǔn)，即符合 ANSI/SBS1-2004覆蓋區(qū)尺寸、ANSI/SBS2-2004高度尺寸和 ANSI/SBS3-2004底部外側(cè)凸緣尺寸的標(biāo)準(zhǔn)、并對(duì)ANSI/SBS4-2004: 孔位置標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行了改進(jìn)，每一儲(chǔ)槽單元20具有的第一面板240的 寬度在SBS標(biāo)準(zhǔn)的基礎(chǔ)上進(jìn)行了改進(jìn)。其由聚苯乙烯制成。本實(shí)施 例的48 x 2結(jié)晶氺反為7乂4亍x六列x2(即8x6x2)的結(jié)晶氺反，不同 于5見有才支術(shù)的六4亍x /\歹寸x 2 (即6 x 8 x 2 )的結(jié)晶才反。本實(shí)施例的48 x2 (即8x6x2)鎮(zhèn)^象只于稱的蛋白質(zhì)結(jié)晶才反， 包4舌結(jié)晶纟反主體部分10，該主體部分的第一面^反的總長(zhǎng)度為 124+/-lmm，總寬度為82+/-lmm;在結(jié)晶板主體10上以8x6陣列形式分布的儲(chǔ)槽單元20，每一 所述儲(chǔ)槽單元20的長(zhǎng)度為14.5+/-0.25mm、寬度為7.25+/-0.25mm; 每一〗諸槽單元20在第一面々反240中間位置形成一凹槽，在該凹槽 底部為第二面板250，在第二面^反250正中間位置凹入形成一個(gè)第 一^f諸槽220,在第一^f諸槽220對(duì)稱兩側(cè)的第二面板250中形成有兩 個(gè)滴液沖曹230,第一面才反240與第二面^反250通過連4妻部260連4妄， 結(jié)晶板主體部分IO在其四周具有支撐部300,該支撐部由上支撐部 320、下支撐部340以及連接上下支撐部的支撐連接部360構(gòu)成。其中，第一面^反240和第二面々反250上表面之間的3巨離為3.0 +/-0.5mm;第一儲(chǔ)槽220的寬度為4.0+/-0.5 mm,第一儲(chǔ)槽220的 長(zhǎng)度為7.25+/-0.5mm,第一儲(chǔ)槽220的深度為8.25+/-0.5mm;滴液 槽230的上端直徑R上為2.2+/-0.3、下端直徑R下為1.7+/-0.3 mm， 滴液槽230的深度為0.4+/-O.lmm,為圓臺(tái)狀；相鄰兩4諸槽單元20 之間沿結(jié)晶板長(zhǎng)度方向的第一面板240的寬度為3.5+/-0.25 mm，沿 結(jié)晶纟反寬度方向的第一面才反240的寬度為1.75+/-0.25 mm;支撐部 300的總高度為14.35+/-0.25 mm,其中上支撐部320的高度為 8.25mm+/-0.5mm、下支撐部340的高度為6.10+/-0.38mm、而支撐 連才秦部360的寬度為1.8+/-0.5mm。結(jié)晶纟反的第一面一反240在其寬度方向上的一端分別具有兩個(gè)為 135+/-10°的導(dǎo)角a和p;而結(jié)晶板的上支撐部320、及支撐連接部 360也分別在相應(yīng)的位置具有135+/-10。的導(dǎo)角a和(3。導(dǎo)角a、 p之間的第一面一反240的長(zhǎng)度為9.0+/-0.5mm。其中，在兩個(gè)相鄰的儲(chǔ)槽單元20之間的第一面板240的寬度 為約3.5mm,其遠(yuǎn)大于現(xiàn)有技術(shù)中的蛋白質(zhì)結(jié)晶板的寬度(約 0.5mm)。因此，利用本實(shí)用新型的48x2 (即8x6x2)蛋白質(zhì)結(jié) 晶板可以在每一列或每一行儲(chǔ)槽單元裝填蛋白質(zhì)完畢后進(jìn)行每一 列或每一行儲(chǔ)槽單元的密封，并且密封后的各儲(chǔ)槽單元與周圍的儲(chǔ) 槽單元可以實(shí)現(xiàn)真正的完全密封。在圖16~圖20中示出了本申請(qǐng) 中的48x2 (即8x6x2)鏡像對(duì)稱蛋白質(zhì)結(jié)晶板與現(xiàn)有才支術(shù)中的 蛋白質(zhì)結(jié)晶板在密封后的各儲(chǔ)槽單元密封情況的照片。乂人圖16和圖19可看出，當(dāng)本實(shí)用新型的48 x2(即8x6x2) 結(jié)晶板在利用無(wú)接縫的封口帶(膠帶)進(jìn)行密封時(shí)相鄰兩個(gè)儲(chǔ)槽單 元內(nèi)部各自的密封情況好于現(xiàn)有技術(shù)的結(jié)晶板的密封情況，但后者 也基本上實(shí)現(xiàn)了相鄰兩個(gè)儲(chǔ)槽單元內(nèi)部各自的密封。但是從圖17和圖20可看出，當(dāng)本實(shí)用新型的48x2 (即8x6 x2)結(jié)晶板利用在相鄰的兩個(gè)儲(chǔ)槽單元之間的第一面板240上搭 接的封口帶(膠帶)進(jìn)行密封時(shí)，相鄰兩個(gè)儲(chǔ)槽單元內(nèi)部各自的密 封情況遠(yuǎn)好于現(xiàn)有技術(shù)的結(jié)晶板的密封情況，前者實(shí)現(xiàn)了相鄰兩個(gè) 儲(chǔ)槽單元內(nèi)部各自的完全密封，但后者在相鄰的兩個(gè)儲(chǔ)槽單元之間 出5見了泄漏。圖18示出了圖4中的48x2(即8x6x2)鏡i象對(duì)稱結(jié)晶板利 用在相鄰的兩個(gè)儲(chǔ)槽單元之間的第一面板上搭接的封口帶(膠帶) 進(jìn)行密封時(shí)招、接的封口帶(膠帶)的示意圖；從圖中看出，由于本 實(shí)用新型的48 x 2結(jié)晶板在相鄰的兩個(gè)儲(chǔ)槽單元之間具有比現(xiàn)有技 術(shù)的結(jié)晶板更寬的第一面板240，因此使得在其上招、接的兩封口帶 (膠帶)之間形成密封。
由于本實(shí)施例中的48x2 (即8x6x2)蛋白質(zhì)結(jié)晶氺反是4竟^f象 對(duì)稱的，在每一4諸槽單元20中的兩個(gè)滴液槽230的^f立置相對(duì)于第 一儲(chǔ)槽220完全對(duì)稱地凹入在第一儲(chǔ)槽220兩側(cè)的第二面板250中， 而且本實(shí)用新型的48 x 2結(jié)晶板在相鄰的兩個(gè)儲(chǔ)槽單元之間具有比 現(xiàn)有寺支術(shù)的結(jié)晶板更寬的第一面板240,因此使得在其上搭接的封 口帶(膠帶)之間形成密封，因而，本實(shí)用新型的蛋白質(zhì)結(jié)晶板既 實(shí)現(xiàn)了相鄰兩個(gè)儲(chǔ)槽單元內(nèi)部各自的可靠密封，又在每一儲(chǔ)槽單元 內(nèi)提供了完全相同的結(jié)晶條件，從而保證了結(jié)晶結(jié)果的可靠性和重 現(xiàn)性。jt匕外，由于本實(shí)施例中的48x2 (即8x6x2)蛋白質(zhì)結(jié)晶^反 是鏡像對(duì)稱的，兩個(gè)滴液槽230位于每一儲(chǔ)槽單元20中的第一儲(chǔ) 槽220兩側(cè)的第二面板250中，因而避免了在加樣過程中兩個(gè)滴液 槽230之間要結(jié)晶的蛋白質(zhì)溶液相互'滲漏。圖21示出了圖4中的48x2(即8x6x2)結(jié)晶4反利用無(wú)4妄縫 的封口帶密封時(shí)相鄰的兩個(gè)儲(chǔ)槽單元內(nèi)部各自的密封情況、利用刀 片將其中的 一個(gè)儲(chǔ)槽單元上方的封口帶打開、以及將打開的 一個(gè)儲(chǔ) 槽單元的封口帶再密封后的力文大照片，其中左側(cè)的圖代表進(jìn)行密 封、切割并取出晶體、以及再密封操作時(shí)封口帶的狀態(tài)，右側(cè)的圖 代表進(jìn)行密封、切割并取出晶體、以及再密封操作時(shí)封口帶密封情 況的》文大照片。從圖中可以看出，在將良好密封的覆蓋在其中的一個(gè)儲(chǔ)槽單元 之上的封口帶利用刀片切割開來之后，可以進(jìn)行取出晶體的操作， 并且在完成該操作之后可以再次對(duì)該儲(chǔ)槽單元進(jìn)行良好密封。其中，左側(cè)上部虛線框內(nèi)示出了無(wú)接縫的封口帶在相鄰的儲(chǔ)槽 單元之上的密封。左側(cè)中間虛線框內(nèi)示出了利用刀片切割其中一個(gè) 儲(chǔ)槽單元之上密封的封口帶；將封口帶打開，利用移取晶體的工具 (如Cryo-lo叩)移出晶體。左側(cè)下部虛線框內(nèi)示出了打開的封口帶 在儲(chǔ)槽單元之上的密封。相對(duì)應(yīng)地，右側(cè)上部示出了無(wú)接縫的封口 帶在相鄰的儲(chǔ)槽單元間的密封狀況良好。右側(cè)中間示出了封口帶打 開時(shí)的儲(chǔ)槽單元以及封口帶在與之相鄰的儲(chǔ)槽單元之上的密封狀 況良好。右側(cè)下部示出了打開的封口帶在儲(chǔ)槽單元之上的再密封狀 況良好。
而現(xiàn)有纟支術(shù)的結(jié)晶纟反，相鄰的4諸槽單元之間的第 一 面 一反過窄， 無(wú)法實(shí)現(xiàn)上述的封口帶的切割以及再密封。實(shí)施例2 24 x 3非鎮(zhèn)/f樹稱的結(jié)晶板參見圖9至圖12及圖15，示出了一種用于高通量蛋白質(zhì)結(jié)晶 的24x3 (即4x6x3)非鏡像對(duì)稱的蛋白質(zhì)結(jié)晶板，其尺寸符合 SBS標(biāo)準(zhǔn)，即符合ANSI/SBS1-2004覆蓋區(qū)尺寸、ANSI/SBS2-2004 高度尺寸和ANSI/SBS3-2004底部外側(cè)凸緣尺寸的標(biāo)準(zhǔn)、并對(duì) ANSI/SBS4-2004:孔位置標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行了改進(jìn)，而每一儲(chǔ)槽單元20具 有的第一面才反240的寬度在SBS標(biāo)準(zhǔn)的基礎(chǔ)上進(jìn)4亍了改進(jìn)。24 x 3非鏡像對(duì)稱的蛋白質(zhì)結(jié)晶板，包括結(jié)晶板主體部分10, 該主體部分的第一面^反240總長(zhǎng)度為124+/-lmm，總寬度為 82+/-lmm;在結(jié)晶板主體10上以4x6陣列形式分布的儲(chǔ)槽單元 20，每一所述儲(chǔ)槽單元20的長(zhǎng)度為16.0+/-0.25mm、寬度為 16.0+/-0.25mm;每一4諸槽單元20在第一面才反240中間位置形成一 凹槽，在該凹槽底部為第二面板250,在第二面板250 —側(cè)位置凹 入形成一個(gè)第一儲(chǔ)槽220,在第一儲(chǔ)槽220對(duì)側(cè)的第二面板250中 形成有三個(gè)滴液槽230，第一面4反240與第二面^反250通過連4妻部 260連接，結(jié)晶板主體部分10在其四周具有支撐部300,該支撐部 由上支撐部320、下支撐部340以及連4妄上下支撐部的支撐連4妻部 360構(gòu)成。其中，第一面板240和第二面氺反250上表面之間的距離為 3.0+/-0.5mm;第一儲(chǔ)槽220的寬度為8.0+/-0.5 mm，第一儲(chǔ)槽220 的長(zhǎng)度為16.0+/-0.5 mm，第一儲(chǔ)槽220的深度為8.25+/-0.5mm;滴 液槽230的深度為0.4+/-0.1 mm、為上端直徑R上為2.2+/-0.3、下端 直徑R下為1.7+/-0.3mm的圓臺(tái)狀或深度為1.0+/-0.2mm、直徑為 2.0+/-0.3mm的近半球狀；相鄰兩儲(chǔ)槽單元20之間沿結(jié)晶板長(zhǎng)度方 向的第一面板240的寬度為2.0+/-0.5 mm,沿結(jié)晶4反寬度方向的第 一面板240的寬度為2.0+/-0.5mm; 支撐部300的總高度為 14.35+/-0.25 mm，其中上支撐部320的高度為8.25mm+/-0.5mm、 下支撐部340的高度為6.10+/-0.38mm、而支撐連4妄部360的寬度 為2.8+/-0.5mm。
結(jié)晶板的第一面板240在其寬度方向上的一端分別具有兩個(gè)為 135°的導(dǎo)角ot和(3;而結(jié)晶板的上支撐部320、及支撐連接部360 也分別在相應(yīng)的位置具有135+/-10°的導(dǎo)角a和(3。導(dǎo)角a、 (3之間的第一面板240的長(zhǎng)度為9.0+/-0.5mm。其中，在兩個(gè)相鄰的儲(chǔ)槽單元20之間的第一面板240的寬度 約為2.0mm，其遠(yuǎn)大于現(xiàn)有4支術(shù)中的蛋白質(zhì)結(jié)晶板的寬度 (S0.5mm)。因此，利用本實(shí)用新型的24 x 3蛋白質(zhì)結(jié)晶板可以在 每一行或每一列儲(chǔ)槽單元裝填蛋白質(zhì)完畢后進(jìn)行每一行或每一列 儲(chǔ)槽單元的密封，并且密封后的各儲(chǔ)槽單元與周圍的儲(chǔ)槽單元可以 實(shí)3E見真正i也完全密去于。此外，在圖13中示出了 24x6(即4x6x6)的蛋白質(zhì)結(jié)晶一反。 在圖14中示出了其4也可能的4竟4象對(duì)稱的48 x 4 (即8 x 6x 4)結(jié)晶 板的滴液槽230的形狀與分布。其中40是ANSI/SBS4-2004中96 孔板的儲(chǔ)槽單元位置和加樣中心，可以看出對(duì)于48 x 4結(jié)晶板的滴 液槽230不遵守96孔板的加樣中心，因此才是示在設(shè)計(jì)類似方案時(shí)， 應(yīng)考慮結(jié)晶板是否需要遵守標(biāo)準(zhǔn)96孔板的自動(dòng)化加樣位置。在圖15中示出了其他可能的非鏡像對(duì)稱的24xn (n-5或6) 結(jié)晶板的滴液槽230的形狀與分布。其中40是ANSI/SBS4-2004中 96孔板的儲(chǔ)槽單元位置和加樣中心，可以看出每一儲(chǔ)槽單元20中 只是部分液滴槽230遵守標(biāo)準(zhǔn)96孔板的自動(dòng)化加樣位置。實(shí)施例3 利用48 x 2鏡像對(duì)稱的結(jié)晶板的坐滴法蛋白質(zhì)結(jié)晶利用高通量蛋白質(zhì)結(jié)晶板的坐滴法蛋白質(zhì)結(jié)晶方法，包括以下 步驟1. 將適當(dāng)體積的含有緩沖劑、去垢劑、沉淀劑或其組合的結(jié) 晶池液加入到每個(gè)儲(chǔ)槽單元20中的第一儲(chǔ)槽220中；其中可利用8 道槍加樣裝置進(jìn)行手動(dòng)加樣，也可利用自動(dòng)多通道加樣設(shè)備進(jìn)行自 動(dòng)力口樣。2. 將適當(dāng)體積的含有緩沖劑、沉淀劑、去垢劑或其組合的結(jié) 晶池液與要進(jìn)4于結(jié)晶的蛋白質(zhì)溶液以 一定比例，例如體積比為1: 1 ，
加入到每個(gè)儲(chǔ)槽單元20中的兩個(gè)滴液槽220中，同時(shí)還可根據(jù)需 要在滴液槽中加入添加劑、去祐劑或其組合；3. 利用封口帶6覆蓋在4諸槽單元20四周的第 一面板240上， 將在結(jié)晶板主體上以陣列形式分布的每一儲(chǔ)槽單元密封，而在每一 儲(chǔ)槽單元內(nèi)部形成了進(jìn)行蛋白質(zhì)結(jié)晶的動(dòng)態(tài)平#!"的內(nèi)部環(huán)境；4. 將結(jié)晶板置于適于蛋白質(zhì)結(jié)晶的溫度下進(jìn)行蛋白質(zhì)結(jié)晶實(shí)驗(yàn)。其中，每一儲(chǔ)槽單元中不同的滴液槽中的蛋白質(zhì)溶液可以是相 同的或不同的，而不同的每一j諸4曹單元中不同的滴液槽中的蛋白質(zhì) 溶液也可以是相同的或不同的?？蛇x地，蛋白質(zhì)結(jié)晶過程或結(jié)果由自動(dòng)化結(jié)晶只見測(cè)系統(tǒng)、照相 才幾、纟聶#4幾或人工進(jìn)行監(jiān)測(cè)。實(shí)施例4 利用48 x 2鏡^Jtt稱的結(jié)晶板的懸滴法蛋白質(zhì)結(jié)晶類4以;也，也可以利用48x2 (即8x6x2) 4竟^象對(duì)稱的結(jié)晶外反 進(jìn)行懸滴法蛋白質(zhì)結(jié)晶，包括以下步驟1. 將適當(dāng)體積的含有緩沖劑、沉淀劑、去垢劑或其組合的結(jié) 晶池液加入到每個(gè)儲(chǔ)槽單元20中的第一儲(chǔ)槽220中；其中可利用8 道槍加樣裝置進(jìn)行手動(dòng)加樣，也可利用自動(dòng)多通道加樣設(shè)備進(jìn)行自 動(dòng)力口樣。2. 將適當(dāng)體積的與步驟1中相同的池液與要進(jìn)行結(jié)晶的蛋白 質(zhì)溶液按照一定比例，例如l: 2,并根據(jù)結(jié)晶板10的儲(chǔ)槽單元20 的分布情況滴加到封板膜6之上，同時(shí)還可根據(jù)需要在上述液滴中 力口入添力。劑、去祐劑或其纟且合；3. 將封板膜6倒置并覆蓋在儲(chǔ)槽單元20四周的第一面板240 上，利用封板膜提供在結(jié)晶板主體10上以陣列形式分布的每一儲(chǔ) 槽單元20的密封，而在每一儲(chǔ)槽單元內(nèi)部形成維持蛋白質(zhì)結(jié)晶的 動(dòng)態(tài)平纟軒環(huán)境；4. 將結(jié)晶板置于適于蛋白質(zhì)結(jié)晶的溫度下進(jìn)行蛋白質(zhì)結(jié)晶實(shí)驗(yàn)。
其中，每一儲(chǔ)槽單元中不同的滴液槽中的蛋白質(zhì)溶液可以是相 同的或不同的，而不同的每 一 儲(chǔ)槽單元中不同的滴液槽中的蛋白質(zhì) 〉容液也可以是相同的或不同的?？蛇x地，蛋白質(zhì)結(jié)晶過程或結(jié)果由自動(dòng)化蛋白質(zhì)晶體生長(zhǎng)觀測(cè) 系統(tǒng)、照相才幾、才菱像才幾或人工進(jìn)行監(jiān)測(cè)。實(shí)施例5利用24 x 3非鏡像對(duì)稱的結(jié)晶板的蛋白質(zhì)結(jié)晶方法具體才喿作與實(shí)施例3相似，只是每一儲(chǔ)槽單元20中的多個(gè)滴 液槽230位于第一儲(chǔ)槽220的一側(cè)，具體的蛋白質(zhì)結(jié)晶操作與實(shí)施 例3或4相似，可以進(jìn)行手動(dòng)加樣和自動(dòng)力口樣。以上所述僅為本實(shí)用新型的優(yōu)選實(shí)施例而已，并不用于限制本 實(shí)用新型，對(duì)于本領(lǐng)域的4支術(shù)人員來說，本實(shí)用新型可以有各種更 ，，變化。凡在，實(shí)用,型的精神^原則之內(nèi)，所作的任何修改、護(hù)范圍之內(nèi)。
權(quán)利要求1.一種蛋白質(zhì)結(jié)晶板，其特征在于所述蛋白質(zhì)結(jié)晶板包括結(jié)晶板主體部分(10)，以及在所述結(jié)晶板主體上以陣列形式分布的儲(chǔ)槽單元(20)，每一所述儲(chǔ)槽單元(20)具有第一面板(240)，在所述第一面板中間位置形成一凹槽，所述凹槽底部為第二面板(250)，在所述第二面板中間位置或靠近一側(cè)的位置凹入形成第一儲(chǔ)槽(220)，在所述第一儲(chǔ)槽(220)至少一側(cè)的第二面板(250)中形成有至少二個(gè)滴液槽(230)，所述第一面板(240)與第二面板(250)通過連接部(260)連接，所述結(jié)晶板主體部分(10)在其四周具有支撐部(300)。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的結(jié)晶板，其中，所述至少二個(gè)滴液槽(230)為多個(gè)，在所述第一4諸槽(220)的一側(cè)或兩側(cè)的第二 面板(250 )中形成有多個(gè)滴液槽(230)，所述陣列形式分布 的儲(chǔ)槽單元(20 )為24個(gè)或48個(gè)；而所述至少二個(gè)滴液槽(230 ) 為兩個(gè)、三個(gè)、四個(gè)、五個(gè)或六個(gè)。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1的結(jié)晶板，其中，所述滴液槽(230)與所述 第一儲(chǔ)槽(220)的形狀獨(dú)立選自由圓柱體、半球體、倒置的 圓臺(tái)體或圓錐體、立方體、長(zhǎng)方體構(gòu)成的組。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1至3中任一項(xiàng)所述的結(jié)晶板，其中，所述結(jié)晶 板是由高純度熱塑性塑料制成的。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1至3中任一項(xiàng)所述的結(jié)晶板，其中，所述結(jié)晶 板由封口帶或封板膜進(jìn)行密封。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1至3中任一項(xiàng)所述的結(jié)晶板，其中，所述結(jié)晶 板為24孔板或48孔板，其尺寸符合SBS標(biāo)準(zhǔn)中的三個(gè)，即 符合標(biāo)準(zhǔn)ANSI/SBS1-2004:覆蓋區(qū)尺寸、ANSI/SBS2-2004: 高度尺寸、ANSI/SBS3-2004:底部外側(cè)凸^彖尺寸，并對(duì) ANSI/SBS4-2004:孔位置進(jìn)行了改進(jìn)。
7. 根據(jù)權(quán)利要求1至3中任一項(xiàng)所述的結(jié)晶板，其中，所述第一 儲(chǔ)槽(220)的體積為0.04 ~ 1.4ml,所述滴液槽(230)的體 積為0.2 ~ 7pl。
8. 根據(jù)權(quán)利要求1至3中任一項(xiàng)所述的結(jié)晶板，其中，所述結(jié)晶 板為48孑L板，包括結(jié)晶板主體部分(10),所述主體部分(IO) 的第一面板(240)的總長(zhǎng)度為120.5 ~ 125.5mm，總寬度為 78.5~83.5mm;其中，每一所述儲(chǔ)槽單元(20 )的長(zhǎng)度為13.5 ~ 15.5mm、寬度為6.5 ~ 7.5mm;所述第一面外反(240)和第二 面板(250)上表面之間的距離為2-8mm;第一儲(chǔ)槽(220) 的寬度為3.0 ~ 6.0mm，第一儲(chǔ)槽(220 )的長(zhǎng)度為6.5 7.5mm， 第一儲(chǔ)槽(220)的深度為3.5~9.5mm;滴液槽(230)的上 端直徑R上為3.0>R上> 1.5mm、下端直徑R下為2.5 >R下> 0.5mm，滴液槽(230)的深度為0.2~1.0mm;在儲(chǔ)槽單元(20) 四周的第一面才反(240)的寬度為1.5~4.5mm，而在所述結(jié)晶 板主體部分(10 )最外周的儲(chǔ)槽單元(20 )外周的第一面板(240 ) 的寬度為5.5~10.5mm;所述支撐部(300 )的總高度為13.8 ~ 14.6mm。
9. 根據(jù)權(quán)利要求1至3中任一項(xiàng)所述的結(jié)晶板，其中，所述結(jié)晶 4反為24孔^反，包括結(jié)晶^反主體部分(10),所述主體部分(10) 的第一面板(240)的總長(zhǎng)度為120.5 ~ 123.5mm,總寬度為 78.5~83.5mm;其中，每一所述儲(chǔ)槽單元(20)的長(zhǎng)度為15.0 16.5mm、寬度為15.0 16.5mm;所述第一面板(240)和 第二面才反(250 )上表面之間的3巨離為2 ~ 8 mm;第一^諸槽(220 ) 的長(zhǎng)度為15.0 16.5mm、寬度為5~9mm、深度為3.5 9.5mm; 滴液槽(230)的上端直徑R上為3.0^R上^1.5mm、下端直徑R 下為2.5SR下20.5mm,滴液槽的深度為0.2 ~ l.Omm;在儲(chǔ)槽單 元(20)四周的第一面才反(240)的寬度為1.5~3.0mm,而在 結(jié)晶板主體部分(10)的最外周的儲(chǔ)槽單元(20)外周的第一 面板(240 )的寬度為5.5 ~ 10.0mm;所述支撐部(300 )的總 高度為13.8 14.6mm。
10. 根據(jù)權(quán)利要求1至3中任一項(xiàng)所述的結(jié)晶板，其中，所述支撐 部(300)由上支撐部(320 )、下支撐部(340 )以及連4妾上下 支撐部的支撐連接部(360)構(gòu)成，其中所述上支撐部(320) 的高度為6.1 ~ 12.5mm、下支撐部(340 )的高度為2.0~8.0mm, 以及連接上下支撐部的支撐連接部(360 )的寬度為1.0 ~ 4.0mm。
11. 根據(jù)權(quán)利要求1至3中任一項(xiàng)所述的結(jié)晶板，其中，所述結(jié)晶 板的第一面板(240)至少在其寬度方向上的一端分別具有兩 個(gè)導(dǎo)角a和(3;上支撐部(320 )、及支撐連接部(360 )也分 別具有對(duì)應(yīng)于所述結(jié)晶板的第一面板(240)的導(dǎo)角a和(3, 所述導(dǎo)角a和p為135+/-10。。
12. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的結(jié)晶板，所述結(jié)晶板由選自聚酰胺、聚 丙烯、聚苯乙烯、丙歸腈-丁二烯-苯乙烯共聚物、聚碳酸酯、 聚甲基丙烯酸甲酯、苯乙烯-丙烯腈樹脂或聚環(huán)烯腈的高純度 熱塑性塑料制成。
13. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的結(jié)晶板，所述結(jié)晶板由聚苯乙烯制成。
專利摘要本實(shí)用新型涉及一種蛋白質(zhì)結(jié)晶板，包括結(jié)晶板主體部分(10)，以及在結(jié)晶板主體上以陣列形式分布的儲(chǔ)槽單元(20)，每一所述儲(chǔ)槽單元(20)具有第一面板(240)，在所述第一面板中間位置形成一凹槽，所述凹槽底部為第二面板(250)，在所述第二面板中間位置或靠近一側(cè)的位置凹入形成第一儲(chǔ)槽(220)，所述第一儲(chǔ)槽(220)至少一側(cè)的第二面板(250)中形成有至少一個(gè)滴液槽(230)，所述第一面板(240)與第二面板(250)通過連接部(260)連接，所述結(jié)晶板主體部分(10)在其四周具有支撐部(300)。
文檔編號(hào)B01D9/00GK201049218SQ200620120998
公開日2008年4月23日 申請(qǐng)日期2006年10月11日 優(yōu)先權(quán)日2006年10月11日
發(fā)明者埃里克·布羅斯特羅梅爾, 蘇曉東 申請(qǐng)人:博亞捷晶科技(北京)有限公司