衡，之后用外加磁場(chǎng)置于塑料管側(cè)壁將磁性顆粒分離，3s后棄去上清液，然后加入3mL含有20.0ng/mL黃酮類(lèi)藥物(木犀草素、槲皮素、山奈酚)的尿液樣品，搖動(dòng)lOmin，加外加磁場(chǎng)，棄去上清尿液，富集的分析物用含有2%醋酸的乙腈從磁性萃取劑上洗脫，洗脫液用氮?dú)獯蹈刹⒂眉状紡?fù)溶，過(guò)濾后用液相色譜進(jìn)行分析。
[0051]實(shí)施例8
[0052]將2.4g三氯化鐵、3.4g乙酸鈉和3.4g丙烯酸鈉加入到由33.75ml乙二醇和11.25ml 二乙二醇組成的混合溶劑中，超聲Ih得到黑色的混合溶液，將其轉(zhuǎn)入聚四氟乙烯材質(zhì)的反應(yīng)釜中，密封，置于馬弗爐中反應(yīng)12h，反應(yīng)結(jié)束后冷卻至室溫，用甲醇和水洗數(shù)次，于60°C真空干燥至恒重，備用；
[0053]將5.0mg上述制得的Fe3O4磁性納米顆粒、20.0mg氯代十六烷基吡啶(CPC)和2ml0.02M pH = 7.0的磷酸鈉緩沖溶液依次加入到塑料管中，混合液超聲分散5min，再平衡靜置lOmin，之后用外加磁場(chǎng)置于塑料管側(cè)壁將磁性顆粒分離，2s后棄去上清液，然后加入2mL含有20.0ng/mL黃酮類(lèi)藥物(木犀草素、槲皮素、山奈酹)的尿液樣品，搖動(dòng)2min,加夕卜加磁場(chǎng)，棄去上清尿液，富集的分析物用含有I %醋酸的甲醇從磁性萃取劑上洗脫，洗脫液用氮?dú)獯蹈刹⒂眉状紡?fù)溶，過(guò)濾后用液相色譜進(jìn)行分析。
[0054]實(shí)施例9
[0055]將2.4g三氯化鐵、3.4g乙酸鈉和3.4g丙烯酸鈉加入到由33.75ml乙二醇和
11.25ml 二乙二醇組成的混合溶劑中，超聲Ih得到黑色的混合溶液，將其轉(zhuǎn)入聚四氟乙烯材質(zhì)的反應(yīng)釜中，密封，置于馬弗爐中反應(yīng)10h，反應(yīng)結(jié)束后冷卻至室溫，用甲醇和水洗數(shù)次，于60°C真空干燥至恒重，備用；
[0056]將4.0mg上述制得的Fe3O4磁性納米顆粒、3.0mg氯化1-十二燒基_3_甲基咪唑(C12mimCl)和2ml0.02M pH = 8.8的磷酸鉀緩沖溶液依次加入到塑料管中，混合液超聲分散lOmin，再靜置2min使其平衡，之后用外加磁場(chǎng)置于塑料管側(cè)壁將磁性顆粒分離，2s后棄去上清液，然后加入2mL含有20.0ng/mL黃酮類(lèi)藥物(木犀草素、槲皮素、山奈酚)的尿液樣品，搖動(dòng)2min，加外加磁場(chǎng)，棄去上清尿液，富集的分析物用含有2%醋酸的甲醇從磁性萃取劑上洗脫，洗脫液用氮?dú)獯蹈刹⒂眉状紡?fù)溶，過(guò)濾后用液相色譜進(jìn)行分析。
[0057]實(shí)施例10
[0058]將2.4g三氯化鐵、3.4g乙酸鈉和3.4g丙烯酸鈉加入到由33.75ml乙二醇和
11.25ml 二乙二醇組成的混合溶劑中，超聲Ih得到黑色的混合溶液，將其轉(zhuǎn)入聚四氟乙烯材質(zhì)的反應(yīng)釜中，密封，置于馬弗爐中反應(yīng)4h，反應(yīng)結(jié)束后冷卻至室溫，用甲醇和水洗數(shù)次，于60°C真空干燥至恒重，備用；
[0059]將4.0mg上述制得的Fe3O4磁性納米顆粒、3.0mg氯化1-十二燒基_3_甲基咪唑(C12mimCl)和2ml0.02M pH = 7.0的磷酸鉀緩沖溶液依次加入到塑料管中，混合液超聲分散5min，再靜置1min使其平衡，之后用外加磁場(chǎng)置于塑料管側(cè)壁將磁性顆粒分離，2s后棄去上清液，然后加入2mL含有20.0nf/mL黃酮類(lèi)藥物(木犀草素、槲皮素、山奈酚)的尿液樣品，搖動(dòng)lOmin，加外加磁場(chǎng)，棄去上清尿液，富集的分析物用含有2%醋酸的乙腈從磁性萃取劑上洗脫，洗脫液用氮?dú)獯蹈刹⒂眉状紡?fù)溶，過(guò)濾后用液相色譜進(jìn)行分析。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種基于Fe3O4磁性納米顆粒的混合半膠束固相萃取劑的制備方法，其特征在于制備步驟為: a.基于Fe3O4磁性納米顆粒的混合半膠束固相萃取劑的制備:一、溶劑熱法制備Fe3O4磁性納米顆粒:三氯化鐵、乙酸鈉和丙烯酸鈉加入到由乙二醇和二乙二醇組成的混合溶劑中，超聲Ih得到黑色的混合溶液，將其轉(zhuǎn)入聚四氟乙烯材質(zhì)的反應(yīng)釜中，密封，置于馬弗爐中反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束后冷卻至室溫，用甲醇和水洗數(shù)次，于60°C真空干燥至恒重，備用；二、制備混合半膠束固相萃取劑:將步驟一制備得到的Fe3O4磁性納米顆粒加入到一定pH值的緩沖溶液中，然后加入一定量的表面活性劑或離子液體，超聲后靜置，磁場(chǎng)分離除去上清液，得到固相萃取劑。 b.基于Fe3O4OS12磁性納米顆粒的混合半膠束固相萃取劑的制備:一、溶劑熱法制備Fe3O4磁性納米顆粒:三氯化鐵、乙酸鈉和丙烯酸鈉加入到由乙二醇和二乙二醇組成的混合溶劑中，超聲Ih得到黑色的混合溶液，將其轉(zhuǎn)入聚四氟乙烯材質(zhì)的反應(yīng)釜中，密封，置于馬弗爐中反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束后冷卻至室溫，用甲醇和水洗數(shù)次，于60°C真空干燥至恒重，備用；二、Fe3O4OS12磁性納米顆粒的制備:將步驟二中制備的Fe3O4磁性納米顆粒加入到乙醇和去離子水中，超聲，然后依次加入一定量的氨水和正硅酸乙酯，攪拌下反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束后加外置磁場(chǎng)分離產(chǎn)物，用甲醇和水洗數(shù)次，于60°C真空干燥至恒重，備用；三、制備混合半膠束固相萃取劑:將步驟二制備得到的Fe3O4OS12磁性納米顆粒加入到一定pH值的緩沖溶液中，然后加入一定量的表面活性劑或離子液體，超聲后靜置，磁場(chǎng)分離除去上清液，得到固相萃取劑。
2.設(shè)計(jì)了一個(gè)簡(jiǎn)單的磁性分離流程，并將其應(yīng)用于生物樣品中黃酮類(lèi)藥物的富集和分離，向放有磁性混合半膠束固相萃取劑的塑料管加入含有一定濃度藥物的尿液樣品，超聲后靜置，磁場(chǎng)分離除去尿液，富集的分析物用有機(jī)溶劑從磁性萃取劑上洗脫，洗脫液用氮?dú)獯蹈刹⒂眉状紡?fù)溶，過(guò)濾后用液相色譜進(jìn)行分析。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于:所述步驟a( —)和b ( —)中，三氯化鐵的摩爾濃度為0.05?0.5mol/L，乙二醇和二乙二醇的比例為1: 5?5: 1，反應(yīng)時(shí)間為4?24h。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于:所述步驟b(二)中，F(xiàn)e3O4磁性納米顆粒的用量為0.5?1.5g，乙醇的體積為100?200mL，去離子水的體積為25?35mL，超聲時(shí)間為5?30min,氨水的體積為I?5mL,正娃酸乙酯的體積為2?1mL,反應(yīng)時(shí)間為4?12h。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，所述步驟a(二)和b(三)中，表面活性劑為十二烷基硫酸鈉(SDS)、氯代十六烷基吡啶(CPC)、十八烷基三甲基溴化銨(OTMABr)、十六烷基三甲基溴化銨(CTAB);離子液體為氯化1-己基-3-甲基咪唑(C6HiimCl)、溴化1-己基-3-甲基咪唑(C6HiimBr)、氯化1-十二烷基-3-甲基咪唑(C12mimCl)、溴化1-十二烷基-3-甲基咪唑(C12HiimBr)、氯化1-十六烷基-3-甲基咪唑(C16mimCl)、溴化1-十六烷基-3-甲基咪唑(C16HiimBr)。磁性碳納米管的用量為2?10mg，表面活性劑的用量為I?20mg，緩沖溶液為磷酸鈉緩沖溶液、磷酸鉀緩沖溶液、Tris-HCl緩沖溶液；緩沖溶液的pH分別為2.0?10.0、2.0?10.0,6.8?9.0 ;緩沖溶液的濃度為0.02?0.5M，緩沖溶液的體積為1.0?10.0mL0
6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法，加入尿液的體積為I?1mL ;超聲時(shí)間為2?1min ;靜置時(shí)間為2?1min ;有機(jī)溶劑的種類(lèi)為甲醇,含I %醋酸的甲醇，含2%醋酸的甲醇，乙腈，含I %醋酸的乙腈，含2%醋酸的乙腈；所用有機(jī)溶劑的體積為0.5?3mL ;清洗次數(shù)為I?5次。
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明涉及一種基于Fe3O4磁性納米顆粒的混合半膠束固相萃取劑的制備方法。制備過(guò)程主要包括三個(gè)步驟：Fe3O4磁性納米顆粒的制備，混合半膠束固相萃取劑的制備以及固相萃取過(guò)程。本發(fā)明提供的合成方法簡(jiǎn)單，易于控制，制得的磁性混合半膠束固相萃取劑萃取效率高，操作簡(jiǎn)便，可大大縮短樣品的預(yù)處理時(shí)間，不需大量有毒有害溶劑，避免污染，同時(shí)可有效減少樣品損失的特點(diǎn)，非常適合于快速樣品分析的要求。
【IPC分類(lèi)】B01J20-30, B01J20-28, B01J20-10, B01D15-08
【公開(kāi)號(hào)】CN104785197
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201410022383
【發(fā)明人】何華, 肖得力, 袁丹華, 張嬋, 戴昊, 邱盼子, 何佳
【申請(qǐng)人】中國(guó)藥科大學(xué)
【公開(kāi)日】2015年7月22日
【申請(qǐng)日】2014年1月16日