專利名稱：免疫色譜裝置以及使用該裝置測(cè)量樣品的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及在使用干化學(xué)法的測(cè)試方法中所用的免疫色譜裝置以及使用該裝置測(cè)量樣品的方法。
除了干化學(xué)法的上述優(yōu)點(diǎn)外，使用免疫色譜法的測(cè)試方法還具有以下優(yōu)點(diǎn)易于操作、測(cè)定快速、成本低。該測(cè)試方法可應(yīng)用于最近受到廣泛矚目的注意點(diǎn)測(cè)試法(point of care testing，POCT)。
抗原—抗體反應(yīng)是發(fā)生在體內(nèi)的特異性平衡反應(yīng)。在抗原—抗體反應(yīng)中，在給定的溫度下(i)抗原濃度和抗體濃度的合理產(chǎn)物與(ii)抗原—抗體復(fù)合物濃度的比例保持恒定。因此，所產(chǎn)生的抗原—抗體復(fù)合物濃度可以平衡反應(yīng)為基礎(chǔ)通過添加在給定濃度的抗體中的抗原濃度來測(cè)定。繪制抗原—抗體復(fù)合物的濃度相對(duì)于抗原濃度的校正曲線，由此可對(duì)抗原的未知濃度進(jìn)行定量。
根據(jù)多項(xiàng)免疫色譜法，在一個(gè)免疫色譜裝置中提供至少兩個(gè)固定部，這些固定部分別包括固定于其中的第一抗體，由此可同時(shí)測(cè)量至少兩種抗原。多項(xiàng)免疫色譜法是在能夠進(jìn)行多項(xiàng)測(cè)量的大型自動(dòng)儀器中進(jìn)行的。
使用免疫色譜法同時(shí)測(cè)量至少兩種抗原具有以下問題。例如，當(dāng)同時(shí)測(cè)量?jī)煞N類型的抗原時(shí)，樣品通過樣品施放部被引入裝置中。首先在比較接近樣品施放部(上游固定部)的固定部中發(fā)生反應(yīng)。接著在遠(yuǎn)離樣品施放部(下游固定部)的固定部中發(fā)生反應(yīng)。在下游固定部中發(fā)生反應(yīng)之前，在上游固定部中產(chǎn)生的抗原—抗體復(fù)合物起到障礙的作用，干擾了樣品向下游移動(dòng)的流量。該流量的干擾還影響下游固定部中的反應(yīng)。其結(jié)果是降低了免疫色譜法對(duì)抗原濃度的定量能力。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，多個(gè)目標(biāo)物質(zhì)是糖血紅蛋白和血紅蛋白。所述一種類型的第一抗體是特異性地與糖血紅蛋白和血紅蛋白都反應(yīng)的第一抗血紅蛋白單克隆抗體。多種類型的第二抗體包括特異性地與糖血紅蛋白和血紅蛋白都反應(yīng)的第二抗血紅蛋白單克隆抗體、以及特異性地與糖血紅蛋白反應(yīng)的抗糖血紅蛋白單克隆抗體。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，標(biāo)記物具有相互不同的吸收波長(zhǎng)。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，標(biāo)記物具有相互不同的熒光波長(zhǎng)。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，標(biāo)記物具有相互不同的磷光波長(zhǎng)。
根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)方面，其提供通過使用上述免疫色譜裝置來測(cè)量多種類型的目標(biāo)物質(zhì)的方法。該方法包括以下步驟(A)將液體樣品引入至樣品施放部；(B)在測(cè)定部測(cè)量通過所述多種類型的目標(biāo)物質(zhì)與相應(yīng)于各種類型的目標(biāo)物質(zhì)的第二抗體和第一抗體之間的反應(yīng)而形成的復(fù)合物的色調(diào)、透明度或者亮度；以及(C)基于步驟(B)中得到的測(cè)量值，測(cè)算液體樣品中所包含的多種類型的目標(biāo)物質(zhì)的每一種的絕對(duì)量或者多種類型的目標(biāo)物質(zhì)的量比。
因此，本發(fā)明使免疫色譜裝置具有以下優(yōu)點(diǎn)可在高水平的定量能力下檢測(cè)或者測(cè)量至少兩種類型的目標(biāo)物質(zhì)。
在參考附圖閱讀并理解以下的詳細(xì)描述后，本發(fā)明的上述以及其他優(yōu)點(diǎn)對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員將是顯而易見的。
如

圖1所示，免疫色譜裝置100包括樣品施放部11、測(cè)定部12、以及毛細(xì)管流動(dòng)部14，它們都設(shè)置在基底16上。樣品施放部11、測(cè)定部12以及毛細(xì)管流動(dòng)部14的位置如下設(shè)定被引入至樣品施放部11的液體樣品通過毛細(xì)管流動(dòng)部14轉(zhuǎn)移至測(cè)定部12中。標(biāo)號(hào)13是指水吸收部。
測(cè)定部12具有線性固定部15。該固定部15包含異性地與所有的多種類型的目標(biāo)物質(zhì)反應(yīng)的一種類型的第一抗體，或者分別特異性地與相應(yīng)類型的目標(biāo)物質(zhì)反應(yīng)的多種類型的第一抗體。所述一種類型的第一抗體或者多種類型的第一抗體固定在測(cè)定部12的區(qū)域中。
在樣品施放部11或者毛細(xì)管流動(dòng)部14上設(shè)有多種類型的第二抗體，該抗體分別特異性地與所有的多種類型的目標(biāo)物質(zhì)或者相應(yīng)類型的目標(biāo)物質(zhì)反應(yīng)，其狀態(tài)是該多種類型的第二抗體可被洗脫。至少一種類型的第二抗體特異性地與多種類型的目標(biāo)物質(zhì)中的一種類型的目標(biāo)物質(zhì)反應(yīng)。該多種類型的第二抗體標(biāo)記有不同的標(biāo)記物。
由于此等結(jié)構(gòu)，在固定部15中產(chǎn)生多個(gè)抗體—抗原—抗體復(fù)合物。每個(gè)抗體—抗原—抗體復(fù)合物都包括一種類型的目標(biāo)物質(zhì)、以及相應(yīng)于該目標(biāo)物質(zhì)的第二抗體和第一抗體。也就是說，免疫色譜裝置100包括單個(gè)固定部15，而所有多種類型的目標(biāo)物質(zhì)都固定在該固定部上。因此，液體樣品的流量比包括多個(gè)固定部的常規(guī)裝置更均勻。這樣，通過檢測(cè)每個(gè)標(biāo)記物，可高水平定量能力地檢測(cè)或測(cè)量多種類型的目標(biāo)物質(zhì)。
在本發(fā)明中所用的示例性液體樣品包括體液，如唾液、血液、經(jīng)溶血的血液、血漿、血清、尿、汗、以及眼淚。
示例性的目標(biāo)物質(zhì)包括細(xì)胞、蛋白、糖蛋白、酶、多糖、細(xì)菌以及病毒。
在本發(fā)明的樣品中所包含的多種類型的目標(biāo)物質(zhì)組合可以是蛋白與具有糖苷化端氨基的蛋白的組合；例如白蛋白與糖白蛋白的組合，或者血紅蛋白與糖血紅蛋白的組合。
如果多種類型的目標(biāo)物質(zhì)的組合是糖血紅蛋白與血紅蛋白的組合，則第一抗體和多種類型的第二抗體可以如下所述。第一抗體可以是特異性地與糖血紅蛋白和血紅蛋白都反應(yīng)的第一抗血紅蛋白單克隆抗體。多種類型的第二抗體可以是特異性地與糖血紅蛋白和血紅蛋白都反應(yīng)的第二抗血紅蛋白單克隆抗體、以及特異性地與糖血紅蛋白反應(yīng)的抗糖血紅蛋白單克隆抗體。
作為標(biāo)記物，可使用任何能夠標(biāo)記第二抗體的物質(zhì)。示例性的標(biāo)記物包括具有光學(xué)特性的物質(zhì)；具有磁性顆粒的物質(zhì)，如氧化鐵、氧化鋁、和細(xì)菌；具有超導(dǎo)顆粒的物質(zhì)，如錫和富勒烯；以及放射活性物質(zhì)。具有光學(xué)特性的物質(zhì)包括在特定波長(zhǎng)范圍內(nèi)具有吸收波長(zhǎng)的物質(zhì)、在特定波長(zhǎng)范圍內(nèi)具有熒光波長(zhǎng)的物質(zhì)、以及在特定波長(zhǎng)范圍內(nèi)具有磷光波長(zhǎng)的物質(zhì)。在特定波長(zhǎng)范圍內(nèi)具有吸收波長(zhǎng)的物質(zhì)例如是芳香化合物，如苯、萘、并四苯、紅熒烯、芘、和葸；被官能團(tuán)取代的芳香化合物；顆粒標(biāo)記物，如金膠體、銀膠體、硒膠體、和有色膠乳；具有偶氮基、醌基、三芳基、花菁基、酞菁基或者靛藍(lán)基骨架結(jié)構(gòu)的著色劑；以及包含上述著色劑的顆粒。在特定波長(zhǎng)范圍內(nèi)具有熒光波長(zhǎng)的物質(zhì)例如是芳香化合物，如苯、萘、并四苯、紅熒烯、和芘；被官能團(tuán)取代的芳香化合物，如丹酰；以及熒光化合物和熒光顆粒，如熒光素、若丹明、和香豆素。在特定波長(zhǎng)范圍內(nèi)具有磷光波長(zhǎng)的物質(zhì)例如是二苯酮。
用于標(biāo)記多種類型的第二抗體的標(biāo)記物的組合可以是相互具有不同吸收波長(zhǎng)的物質(zhì)的任意組合。例如，可以使用芘與葸的組合。使用此等標(biāo)記物的組合時(shí)，在單個(gè)固定部上可檢測(cè)在各標(biāo)記物的最大吸收波長(zhǎng)處的吸光度、反射吸光度或者透射比。這樣，在單個(gè)固定部上可以高水平的定量能力檢測(cè)或者測(cè)量多種類型的目標(biāo)物質(zhì)。
用于標(biāo)記多種類型的第二抗體的標(biāo)記物的組合可以是相互具有不同熒光波長(zhǎng)的物質(zhì)的任意組合。例如，可以使用芘與丹酰的組合。使用此等標(biāo)記物組合時(shí)，可在單個(gè)固定部上檢測(cè)在各標(biāo)記物的最大熒光波長(zhǎng)處相對(duì)于給定的激發(fā)波長(zhǎng)的熒光強(qiáng)度、熒光壽命、或者熒光量子效率?；蛘撸蓹z測(cè)多種類型的標(biāo)記物的相互反應(yīng)所導(dǎo)致的湮滅效果。這樣，在單個(gè)固定部上可以高水平的定量能力檢測(cè)或者測(cè)量多種類型的目標(biāo)物質(zhì)。
用于標(biāo)記多種類型的第二抗體的標(biāo)記物組合物可以是相互間具有不同磷光波長(zhǎng)的物質(zhì)的任意組合。
根據(jù)本發(fā)明的例子，多種類型的目標(biāo)物質(zhì)是如下由液體樣品中被檢測(cè)出來的。將樣品滴在樣品施放部11上，展開，同時(shí)洗脫多種類型的第二抗體，然后使其在固定部15中與第一抗體反應(yīng)?；诠潭ú?5中標(biāo)記物的信號(hào)，檢測(cè)液體樣品中所包含的多種類型的目標(biāo)物質(zhì)。
更具體而言，根據(jù)本發(fā)明測(cè)量目標(biāo)物質(zhì)的示例性方法包括以下步驟A、B和C。在該實(shí)施例中，使用在可見波長(zhǎng)范圍內(nèi)相互具有不同吸收波長(zhǎng)的多種標(biāo)記物。
在步驟A中，將液體樣品引入至樣品施放部11中。
在步驟B中，在測(cè)定部12中測(cè)量通過多種類型的目標(biāo)物質(zhì)與相應(yīng)于該目標(biāo)物質(zhì)的第二抗體和第一抗體之間的反應(yīng)而形成的復(fù)合物的色調(diào)、透明度或者亮度。
在步驟C中，基于步驟B中得到的測(cè)量值，測(cè)算液體樣品中所包含的多種類型的目標(biāo)物質(zhì)的每一種的絕對(duì)量或者多種類型的目標(biāo)物質(zhì)的量比。
標(biāo)記物的組合可以是在可見波長(zhǎng)范圍內(nèi)相互間具有不同吸收波長(zhǎng)的物質(zhì)的任意組合。特別優(yōu)選的是紅色著色劑與藍(lán)色著色劑的組合。
根據(jù)本發(fā)明的優(yōu)選方法，使用CCD攝像機(jī)或者類似的設(shè)備在步驟B中以數(shù)字?jǐn)?shù)值得到復(fù)合物的色調(diào)、透明度或者亮度。在步驟C中，通過計(jì)算機(jī)處理將數(shù)字?jǐn)?shù)值轉(zhuǎn)化為相應(yīng)于絕對(duì)量或者量比的物理量。
在此，可見波長(zhǎng)范圍是指350-750nm的范圍。
示例性的紅色著色劑包括以下通式1表示的花菁基紅色著色劑。示例性的藍(lán)色著色劑包括以下通式2表示的花菁基藍(lán)色著色劑。通式1 其中R1和R2分別是氫或者烷基；X是鹵素；M是氫或者堿金屬；而n是1-4的整數(shù)。通式2 其中R1和R2分別是氫或者烷基；X是鹵素；M是氫或者堿金屬；而n是1-4的整數(shù)。
通式3顯示了通式1所示的花菁基紅色著色劑的合成方法。通式3
如通式3所示，肼基苯磺酸(10)和異丙基甲基酮溶解在酸性溶劑中并加熱，由此制備磺酸假吲哚(11)?；撬峒龠胚?11)的醇溶液與金屬氫氧化物飽和的醇溶液混合，由此制得磺酸假吲哚的金屬鹽(12)。
接下來，金屬鹽(12)在有機(jī)溶劑中的溶液與鹵代烷基酸混合，然后加熱所得物質(zhì)，由此形成磺酸羧基烷基假吲哚的金屬鹽(13)?？紤]其水溶解度，鹵代烷基酸的碳數(shù)優(yōu)選為1-4。
金屬鹽(13)和原甲酸乙酯溶解在堿性有機(jī)溶劑中并加熱，由此形成羧酸衍生物(14)。之后，羧酸衍生物(14)在有機(jī)溶劑中的溶液與羥基琥珀酰亞胺和作為縮合劑的二環(huán)己基碳化二亞胺混合，然后攪拌所得物質(zhì)，由此制備通式1所示的花菁基紅色著色劑。
為合成通式2所示的花菁基藍(lán)色著色劑，可使用上述方法，但用戊烯二醛四甲基縮醛替代原甲酸乙酯。
通式1、通式2、式13和式14化合物中所含的鹵素例如包括氟、氯、溴和碘。通式1、通式2、式12、式13和式14化合物中所含的金屬例如是鋰、鈉和鉀。
對(duì)于第一和第二抗體，可使用能夠特異性地與目標(biāo)物質(zhì)反應(yīng)的任何抗體。示例性的抗體包括抗細(xì)胞抗體、抗蛋白抗體、抗糖蛋白抗體、抗酶抗體、抗多糖抗體、抗細(xì)菌抗體、以及抗病毒抗體。單克隆抗體或者多克隆抗體也是合適的。
對(duì)于能夠與一種相同類型的目標(biāo)物質(zhì)特異性地反應(yīng)的第一和第二抗體，可使用能夠識(shí)別目標(biāo)物質(zhì)的不同抗原決定簇的任意抗體組合。
樣品施放部11、毛細(xì)管流動(dòng)部14以及測(cè)定部12可用任何能夠以合適的速度展開液體樣品的材料制成。例如，樣品施放部11、毛細(xì)管流動(dòng)部14以及測(cè)定部12可用多孔載體如硝基纖維素或者玻璃纖維制成。
固定部15優(yōu)選是線性的，并設(shè)置在測(cè)定部12上。
使用血紅蛋白和糖血紅蛋白作為目標(biāo)物質(zhì)。使用紅色著色劑假吲哚部花菁(以下稱為IMC)和藍(lán)色著色劑假吲哚花菁(以下稱為IC)作為標(biāo)記物。IMC是其中X為碘、M為鉀、而n(碳數(shù))為2的通式1化合物。IC是其中X為碘、M為鉀、而n(碳數(shù))為2的通式2化合物。
使用特異性地與糖血紅蛋白和血紅蛋白都反應(yīng)的第一抗血紅蛋白抗體作為第一抗體。使用特異性地與糖血紅蛋白反應(yīng)的抗糖血紅蛋白抗體、以及特異性地與糖血紅蛋白和血紅蛋白都反應(yīng)的第二抗血紅蛋白抗體作為第二抗體。第一抗血紅蛋白抗體和第二抗血紅蛋白抗體都特異性地與糖血紅蛋白和血紅蛋白反應(yīng)，但識(shí)別不同的抗原決定簇。
如下制造根據(jù)本發(fā)明的免疫色譜裝置100(圖1)。
首先，如下制備經(jīng)IMC標(biāo)記的第二抗血紅蛋白抗體溶液。作為第二抗體的一種，第二抗血紅蛋白抗體溶解在磷酸鹽緩沖液(以下稱為PBS)中，以調(diào)節(jié)其濃度。所得溶液(pH7.4)與IMC溶液(PBS，pH7.4)混合，然后攪拌24小時(shí)。接著向其中加入牛血清白蛋白(以下稱為BSA)溶液(pH9.0)。所得的反應(yīng)混合物溶液包含經(jīng)IMC標(biāo)記的第二抗血紅蛋白抗體，對(duì)其進(jìn)行凝膠過濾，以除去未反應(yīng)的抗體和BSA。經(jīng)純制的IMC標(biāo)記的第二抗血紅蛋白抗體懸浮在PBS中，用0.8μm的過濾器過濾，然后儲(chǔ)存在4℃下。
接下來，如下制備經(jīng)IC標(biāo)記的抗糖血紅蛋白抗體溶液。作為第二抗體的一種，抗糖血紅蛋白抗體溶液(PBS，pH7.4)與IC溶液(PBS，pH7.4)混合，然后攪拌24小時(shí)。接著向其中加入BSA溶液(pH9.0)。所得的反應(yīng)混合物溶液包含經(jīng)IC標(biāo)記的抗糖血紅蛋白抗體，對(duì)其進(jìn)行凝膠過濾，以除去未反應(yīng)的抗體和BSA。經(jīng)純制的IC標(biāo)記的抗糖血紅蛋白抗體懸浮在PBS中，用0.8μm的過濾器過濾，然后儲(chǔ)存在4℃下。
用反射吸光度光譜儀(CS9300，Shimadzu Corporation)測(cè)量經(jīng)IMC標(biāo)記的第二抗血紅蛋白抗體以及經(jīng)IC標(biāo)記的抗糖血紅蛋白抗體的吸光度特性。結(jié)果如圖2所示。曲線a代表由IC標(biāo)記的抗糖血紅蛋白抗體得到的結(jié)果。曲線b代表由經(jīng)IMC標(biāo)記的第二抗血紅蛋白抗體與經(jīng)IC標(biāo)記的抗糖血紅蛋白抗體1∶1混合溶液得到的結(jié)果。曲線c代表由經(jīng)IMC標(biāo)記的第二抗血紅蛋白抗體與經(jīng)IC標(biāo)記的抗糖血紅蛋白抗體2∶1混合溶液得到的結(jié)果。曲線d代表由IMC標(biāo)記的第二抗血紅蛋白抗體得到的結(jié)果。由圖2可以看出，經(jīng)IMC標(biāo)記的第二抗血紅蛋白抗體在563nm處具有最大吸收，而經(jīng)IC標(biāo)記的抗糖血紅蛋白抗體在646nm處具有最大吸收。
將第一抗血紅蛋白抗體溶解在PBS中，以調(diào)節(jié)其濃度。通過溶液注射裝置，將所得的抗體溶液以線條的形式施加在硝基纖維素膜的中心區(qū)域上，然后干燥，由此形成固定部15。將硝基纖維素膜浸沒在包含1％撇乳的Tris-HCl緩沖液中并搖晃30分鐘。接著將硝基纖維素膜浸沒在Tris-HCl緩沖液(pH8.2)中，并搖晃10分鐘。所得硝基纖維素膜在室溫下干燥。
用溶液注射裝置，將IMC標(biāo)記的第二抗血紅蛋白抗體與IC標(biāo)記的抗糖血紅蛋白抗體的1∶1混合溶液施加在遠(yuǎn)離所得硝基纖維素膜之固定部15的區(qū)域上。由此形成毛細(xì)管流動(dòng)部14。
將具有固定部15和毛細(xì)管流動(dòng)部14的硝基纖維素膜、由硝基纖維素膜形成的樣品施放部11和水吸收部13粘結(jié)在基底16上，該基底是由白色PET形成的，其厚度為0.5mm。所得組件切成5mm寬的條。由此制成免疫色譜裝置100。
對(duì)于液體樣品，制備糖血紅蛋白比例為4％、5％、6％和7％的糖血紅蛋白—血紅蛋白混合溶液。這些糖血紅蛋白—血紅蛋白混合溶液是通過混合已知濃度的血紅蛋白溶液和糖血紅蛋白溶液而制得的。
如下測(cè)量液體樣品的反射吸光度。將各個(gè)糖血紅蛋白—血紅蛋白混合溶液分別稀釋4倍，然后將40μl的各稀釋液施加在免疫色譜裝置100的樣品施放部11上。在樣品施加后5分鐘，用反射吸光度光譜儀(CS9300，Shimadzu Corporation)測(cè)量在563nm和646nm處的固定部15的著色。結(jié)果如圖3所示。由該結(jié)果發(fā)現(xiàn)，563nm和646nm處的吸光度比與糖血紅蛋白和血紅蛋白的量比具有優(yōu)異的相關(guān)性。
可以看出，用根據(jù)本發(fā)明的免疫色譜裝置，通過測(cè)算僅包含已知濃度的血紅蛋白的樣品和僅包含已知濃度的糖血紅蛋白的樣品的濃度—反射吸光度校正曲線，可高精確度地測(cè)量糖血紅蛋白—血紅蛋白混合溶液中的糖血紅蛋白濃度和血紅蛋白濃度。
如上所述，本發(fā)明所提供的免疫色譜裝置能夠在高水平的定量能力下檢測(cè)或者測(cè)量至少兩種類型的目標(biāo)物質(zhì)。
在不偏離本發(fā)明的范圍和實(shí)質(zhì)的情況下，各種其他的改進(jìn)對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員是顯而易見的。因此，所附權(quán)利要求書的范圍并不僅限于在此所作的描述，而應(yīng)更廣泛地解釋。
權(quán)利要求
1.一種用于檢測(cè)或者測(cè)量液體樣品中所包含的多種目標(biāo)物質(zhì)的免疫色譜裝置，該免疫色譜裝置包括樣品施放部、測(cè)定部、以及毛細(xì)管流動(dòng)部，其特征在于，所述樣品施放部、測(cè)定部以及毛細(xì)管流動(dòng)部的位置如下設(shè)定被引入至樣品施放部的液體樣品通過毛細(xì)管流動(dòng)部轉(zhuǎn)移至測(cè)定部中，所述測(cè)定部具有固定部，該固定部包含一種類型的第一抗體，該抗體特異性地與所有的多種類型的目標(biāo)物質(zhì)反應(yīng)，或者該固定部包含多種類型的第一抗體，該抗體分別特異性地與相應(yīng)類型的目標(biāo)物質(zhì)反應(yīng)，其中所述一種類型的第一抗體或者多種類型的第一抗體是固定的，所述樣品施放部或者毛細(xì)管流動(dòng)部具有多種類型的第二抗體，該抗體分別特異性地與所有的多種類型的目標(biāo)物質(zhì)或者相應(yīng)類型的目標(biāo)物質(zhì)反應(yīng)，其中該多種類型的第二抗體可被洗脫，至少一種類型的第二抗體特異性地與多種類型的目標(biāo)物質(zhì)中的一種類型的目標(biāo)物質(zhì)反應(yīng)，以及該多種類型的第二抗體標(biāo)記有不同的標(biāo)記物。
2.如權(quán)利要求1所述的免疫色譜裝置，其中，所述多個(gè)目標(biāo)物質(zhì)是糖血紅蛋白和血紅蛋白，所述一種類型的第一抗體是特異性地與糖血紅蛋白和血紅蛋白都反應(yīng)的第一抗血紅蛋白單克隆抗體，以及所述多種類型的第二抗體包括特異性地與糖血紅蛋白和血紅蛋白都反應(yīng)的第二抗血紅蛋白單克隆抗體、以及特異性地與糖血紅蛋白反應(yīng)的抗糖血紅蛋白單克隆抗體。
3.如權(quán)利要求1所述的免疫色譜裝置，其中，所述標(biāo)記物具有相互不同的吸收波長(zhǎng)。
4.如權(quán)利要求1所述的免疫色譜裝置，其中，標(biāo)記物具有相互不同的熒光波長(zhǎng)。
5.如權(quán)利要求1所述的免疫色譜裝置，其中，標(biāo)記物具有相互不同的磷光波長(zhǎng)。
6.一種通過使用如權(quán)利要求3所述的免疫色譜裝置來測(cè)量多種類型的目標(biāo)物質(zhì)的方法，其包括以下步驟(A)將液體樣品引入至樣品施放部；(B)在測(cè)定部測(cè)量通過所述多種類型的目標(biāo)物質(zhì)與相應(yīng)于各種類型的目標(biāo)物質(zhì)的第二抗體和第一抗體之間的反應(yīng)而形成的復(fù)合物的色調(diào)、透明度或者亮度；以及(C)基于步驟(B)中得到的測(cè)量值，測(cè)算液體樣品中所包含的多種類型的目標(biāo)物質(zhì)的每一種的絕對(duì)量或者多種類型的目標(biāo)物質(zhì)的量比。
全文摘要
本發(fā)明涉及用于檢測(cè)或者測(cè)量液體樣品中所包含的多種目標(biāo)物質(zhì)的免疫色譜裝置,其包括樣品施放部、測(cè)定部、以及毛細(xì)管流動(dòng)部,其中被引入至樣品施放部的液體樣品通過毛細(xì)管流動(dòng)部轉(zhuǎn)移至測(cè)定部中。測(cè)定部上的固定部包含與目標(biāo)物質(zhì)反應(yīng)并固定的第一抗體。樣品施放部或者毛細(xì)管流動(dòng)部具有分別與目標(biāo)物質(zhì)反應(yīng)并可被洗脫的多種類型的第二抗體。至少一種類型的第二抗體與多種類型的目標(biāo)物質(zhì)中的一種反應(yīng)。該第二抗體標(biāo)記有不同的標(biāo)記物。
文檔編號(hào)G01N33/577GK1380551SQ0210616
公開日2002年11月20日 申請(qǐng)日期2002年4月5日 優(yōu)先權(quán)日2001年4月6日
發(fā)明者北脅文久, 重藤修行 申請(qǐng)人:松下電器產(chǎn)業(yè)株式會(huì)社