專利名稱：：用于定量分析物的裝置和方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及用于測(cè)量樣品中的分析物的數(shù)量的裝置和方法，該方法使用，例如，基于熒光的測(cè)定，基于吸光度的測(cè)定，或光散射測(cè)定。
背景技術(shù)：
：用于實(shí)施分析物讀數(shù)的常規(guī)熒光計(jì)典型地設(shè)計(jì)為可以使用一些類型的激發(fā)和發(fā)射濾波器并可以裝配有可調(diào)節(jié)的靈敏度的通用儀器，以致它們可以被設(shè)置用于許多不同類型的測(cè)定。TurnerBioSystemsTBS-380,和BioRadVersaFluor熒光計(jì)是典型的實(shí)驗(yàn)室熒光計(jì)的實(shí)例。這種設(shè)計(jì)的顯著缺點(diǎn)在于，使用者必須選擇要用的濾波器和/或光源，這需要使用者懂得熒光怎樣工作，査閱它們的測(cè)定的激發(fā)和發(fā)射值，懂得怎樣選擇適當(dāng)?shù)臑V波器設(shè)置，并且可能購買和安裝新的濾波器設(shè)置。另外，使用者必須經(jīng)常在開始測(cè)定之前通過反復(fù)的程序而確定所述儀器的適當(dāng)?shù)墨@得設(shè)置(gainsettings)(靈敏度)。隨這些儀器提供的廣泛性表格舉例說明了使用者設(shè)置所述儀器實(shí)施他們的目的測(cè)定的潛在的困難。特別地，如果使用者意欲只使用一種類型的測(cè)定，這種選擇過程對(duì)使用所述儀器形成令人畏懼的障礙。另外，常規(guī)熒光計(jì)典型地測(cè)量從樣品發(fā)射的光，并且以相對(duì)的熒光值顯示讀數(shù)。由于所述顯示是以相對(duì)的熒光值，所以使用者通常必須使用標(biāo)準(zhǔn)物來生成標(biāo)準(zhǔn)曲線，繪制標(biāo)準(zhǔn)物的相對(duì)熒光值，將所述曲線擬合成直線，將樣品的相對(duì)熒光值與標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行比較，并且最后二次計(jì)算(back-calculate)以確定所述樣品的濃度。這些操作可以給未經(jīng)訓(xùn)練的使用者并且甚至是有經(jīng)驗(yàn)的使用者帶來困難，這些操作是繁瑣而費(fèi)時(shí)的。通常，熒光計(jì)可以設(shè)置成下載數(shù)據(jù)到計(jì)算機(jī)，以使得這一操作更容易。不幸地是，這種省力的特點(diǎn)需要給兼容的計(jì)算機(jī)安裝軟件，這可能需要購買兼容的計(jì)算機(jī)，找到適當(dāng)?shù)耐ㄐ哦丝谝詫?shù)據(jù)從所述儀器傳送到計(jì)算機(jī)，在實(shí)驗(yàn)室中找到可以是所述儀器永久性與計(jì)算機(jī)連接的適當(dāng)?shù)奈恢?，然后希望所安裝的軟件與所述儀器儀器正確的操作。這些行為可能對(duì)想要成為的使用者帶來令人畏懼的障礙。存在至少一種熒光計(jì)，TurnerBioSystemsModulus儀器，其具有一些內(nèi)置的軟件用于自動(dòng)執(zhí)行來自由使用者提供的標(biāo)準(zhǔn)物的計(jì)算，使得那些選擇測(cè)定的執(zhí)行對(duì)于使用者更容易。然而，Turner熒光計(jì)需要5個(gè)標(biāo)準(zhǔn)物以計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)曲線，這需要使用者的顯著的時(shí)間投入，如果使用者只是測(cè)量少數(shù)樣品，其可以是特別繁瑣的。最后，這種儀器又被設(shè)計(jì)成用于最大的適應(yīng)性，提供用于每種測(cè)定的獨(dú)立的模塊，所述模塊必須快速按入儀器中，并且足夠得小，以致容易在典型的實(shí)驗(yàn)室環(huán)境中丟失。典型的熒光計(jì)還使用專門的小杯來盛放樣品。通常，所述小杯是具體的儀器專有的，對(duì)于小的樣品大小需要適配器，通常不能從標(biāo)準(zhǔn)化實(shí)驗(yàn)室供應(yīng)公司獲得，并且可能是昂貴的。本領(lǐng)域需要的是用于測(cè)量確定的測(cè)定設(shè)置的小裝置。所述裝置應(yīng)該設(shè)計(jì)成用于與具體的測(cè)定設(shè)置的無縫整合，以致使用者-界面將允許使用者從確定的測(cè)定設(shè)置中進(jìn)行選擇，并且立即開始實(shí)施所述測(cè)定。當(dāng)選擇目的測(cè)定時(shí)，所述裝置將自動(dòng)選擇用于所選擇的測(cè)定的正確的光源、濾波器設(shè)置和靈敏性設(shè)置。另外，所述裝置將被設(shè)計(jì)成具有用于適合所述具體測(cè)定的數(shù)據(jù)分析的精細(xì)的算法，以致使用者只需要測(cè)量少量的標(biāo)準(zhǔn)物(2或3個(gè))。所述裝置還將被設(shè)計(jì)成從這些標(biāo)準(zhǔn)物計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)曲線，并且當(dāng)測(cè)量樣品時(shí)，所述裝置將自動(dòng)執(zhí)行需要的分析，并且簡(jiǎn)單地為使用者顯示樣品的濃度。通過建立光源、濾波器設(shè)置、和獲得設(shè)置的自動(dòng)配置，并且通過將數(shù)據(jù)分析算法結(jié)合到所述裝置中，使用者將不再遇到學(xué)習(xí)曲線而只是使用所述儀器。另外，使用者將不需要選擇、購買和安裝濾波器，或者確定儀器的獲得設(shè)置或靈敏度。最后，使用者將節(jié)省使用大量的標(biāo)準(zhǔn)物用于曲線、繪制曲線、將所述曲線擬合成直線、比較樣品值與所述曲線、并且從所述標(biāo)準(zhǔn)曲線方程二次計(jì)算樣品濃度的繁瑣。所述裝置將具有小的底座，并且將不需要與計(jì)算機(jī)連接，以致所述儀器系統(tǒng)將不需要大的專門指定量的實(shí)驗(yàn)臺(tái)空間。另外，由于所述裝置將不需要與計(jì)算機(jī)連接而進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，所以消除了找到與軟件兼容的計(jì)算機(jī)、將所述軟件安裝到計(jì)算機(jī)上、并且將所述裝置與計(jì)算機(jī)連接的困難。最后，所述裝置將使用易于獲得的、廉價(jià)的、一次性的、實(shí)驗(yàn)室測(cè)試管，以將為所述儀器找到適當(dāng)?shù)奶娲”膲毫唾M(fèi)用減到最小。發(fā)明概述本發(fā)明涉及用于測(cè)量樣品中的多種分析物的量的裝置和方法。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述裝置包括保持具有分析物和任選地報(bào)道分子的樣品容器的容座(receptacle)、光檢測(cè)器、一個(gè)或多個(gè)分析物傳感元件和帶有機(jī)器可執(zhí)行指示的計(jì)算機(jī)處理部件。依次，所述分析物傳感元件包括下列各項(xiàng)用于激發(fā)樣品的能源，其中該能源被設(shè)置成發(fā)射預(yù)先確定最大波長(zhǎng)的光；激發(fā)濾波器，其分離來自能源的預(yù)先確定的波長(zhǎng)范圍的光；發(fā)射濾波器，其分離從被激發(fā)的樣品發(fā)射的預(yù)先確定的波長(zhǎng)范圍的光。所述裝置這樣設(shè)計(jì)，以致每個(gè)分析物傳感元件被設(shè)置成測(cè)量預(yù)先確定的分析物的量，并且所述機(jī)器可執(zhí)行指示被設(shè)置成選擇與待測(cè)量的分析物相對(duì)應(yīng)的適當(dāng)?shù)姆治鑫飩鞲性?。本發(fā)明還涉及用于測(cè)量樣品中的分析物的量的裝置，所述裝置包括能源、光檢測(cè)器、帶有機(jī)器可執(zhí)行指示的計(jì)算機(jī)處理部件和用于保持樣品管的容座，其中所述容座被設(shè)置成與微量離心管相配。本發(fā)明還涉及計(jì)算在樣品容器中的分析物的量的方法，所述方法包括生成熒光標(biāo)準(zhǔn)曲線，所述曲線包括測(cè)量低端(low-end)或空白樣品(g)的熒光強(qiáng)度，并且測(cè)量至少一個(gè)高端(high-end)標(biāo)準(zhǔn)物(v)的熒光強(qiáng)度，其中所述曲線使得熒光強(qiáng)度與分析物數(shù)量相關(guān)，并且其中所述曲線具有預(yù)先確定的S形(sigmoidicity)程度(n)和曲率(k)。在生成熒光標(biāo)準(zhǔn)曲線后，測(cè)量所述樣品(y)的熒光強(qiáng)度，其中所述樣品包括能夠指示所述分析物在樣品中的存在的熒光部分。然后，使用所述熒光標(biāo)準(zhǔn)曲線將樣品(y)的熒光強(qiáng)度與數(shù)量相關(guān)。本發(fā)明還涉及用于測(cè)量樣品中一種分析物與另一種分析物的比例的裝置，所述裝置包括光譜不同的能源，一個(gè)或多個(gè)能夠區(qū)分來自所述兩種分析物的熒光發(fā)射的光檢測(cè)器，帶有機(jī)器可執(zhí)行指示的計(jì)算機(jī)處理部件，和用于保持樣品管的容座，其中所述容座被設(shè)置成與微量離心管相配。本發(fā)明的一個(gè)方面提供用于測(cè)量多種分析物的量的裝置，所述裝置包括-用于保持具有分析物的樣品容器的容座，光檢測(cè)器，一個(gè)或多個(gè)分析物傳感元件，和帶有機(jī)器可執(zhí)行指示的計(jì)算機(jī)處理部件，所述分析物傳感元件包括a)用于激發(fā)所述樣品的能源，其中該能源被設(shè)置成發(fā)射預(yù)先確定最大波長(zhǎng)的光；b)激發(fā)濾波器，其中所述激發(fā)濾波器被設(shè)置成分離來自所述能源的預(yù)先確定的波長(zhǎng)范圍的光；c)發(fā)射濾波器，其中所述發(fā)射濾波器被設(shè)置成分離從被激發(fā)的樣品發(fā)射的預(yù)先確定的波長(zhǎng)范圍的光；并且其中每個(gè)所述分析物傳感元件被設(shè)置成測(cè)量預(yù)先確定的分析物的量，并且其中所述機(jī)器可執(zhí)行指示被設(shè)置成選擇與待測(cè)量的分析物相對(duì)應(yīng)的適當(dāng)?shù)姆治鑫飩鞲性?。在一個(gè)更具體的實(shí)施方案中，所述能源是發(fā)光二極管。更具體地，所述預(yù)先確定的分析物選自由下列各項(xiàng)組成的組DNA、RNA、蛋白質(zhì)、真核或原核細(xì)胞、碳水化合物、脂質(zhì)和金屬離子。更具體地，所述機(jī)器可執(zhí)行指示還被進(jìn)一步設(shè)置成基于來自被激發(fā)的樣品的發(fā)射光而確定所述具體分析物的濃度。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述裝置還包括使用者界面。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述使用者界面包括顯示器和非數(shù)字鍵區(qū)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述樣品容器容座被設(shè)置成適合0.5微量離心管。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述裝置還包括內(nèi)部電源。另一個(gè)實(shí)施方案還包括至少一個(gè)通信端口。更具體地，所述通信端口選自由下列各項(xiàng)組成的組通用串行總線(USB)端口、音頻/視頻串行總線(正EE1394)端口、紅外(IR)端口和無線電頻率(RF)端口。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述裝置包括第一和第二分析物傳感元件。更具體地，所述第一分析物傳感元件包括發(fā)射具有約470nm最大波長(zhǎng)的光的二極管，濾除具有大于約490nm的波長(zhǎng)的光的激發(fā)濾波器，和濾除具有小于約520nm和大于約580nm的波長(zhǎng)的光的發(fā)射濾波器。仍然更具體地，所述第二分析物傳感元件包括發(fā)射具有約640nm的最大波長(zhǎng)的光的二極管，濾除具有小于約570nm和大于約647nm的波長(zhǎng)的光的激發(fā)濾波器，和濾除具有小于約652nm的波長(zhǎng)的光的發(fā)射濾波器。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述使用者界面被設(shè)置成允許使用者選擇用于測(cè)量的分析物。更具體的，所述機(jī)器可執(zhí)行指示能夠在沒有使用者輸入時(shí)選擇所述用于測(cè)量的分析物。在一個(gè)更具體的實(shí)施方案中，所述裝置在終端使用者第一次使用所述裝置之前進(jìn)行校正。另一個(gè)實(shí)施方案還包括用于鑒定與所述樣品容器相關(guān)的鑒定標(biāo)記的工具。更具體地，所述鑒定標(biāo)記是機(jī)器可讀的。仍然更具體地，所述鑒定標(biāo)記選自由下列各項(xiàng)組成的組條形碼、數(shù)據(jù)矩陣條形碼和無線電頻率識(shí)別(RFID)標(biāo)記。本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案提供檢測(cè)樣品中的分析物的方法，所述方法包括使用本文所述的裝置。本發(fā)明的另一個(gè)方面提供計(jì)算在樣品容器中的分析物的量的方法，所述方法包括a)生成熒光標(biāo)準(zhǔn)曲線，包括測(cè)量空白樣品(g)的熒光強(qiáng)度，并且測(cè)量至少一個(gè)高端標(biāo)準(zhǔn)物(v)的熒光強(qiáng)度，其中所述曲線使得熒光強(qiáng)度與分析物數(shù)量相關(guān)，并且其中所述曲線具有預(yù)先確定的S形程度(n)和曲率(k);b)測(cè)量所述樣品(y)的熒光強(qiáng)度，其中所述樣品包括能夠指示所述分析物在所述樣品中的存在的熒光部分；和c)使用所述熒光標(biāo)準(zhǔn)曲線將所述樣品(y)中的所述熒光強(qiáng)度與所述分析物的量相關(guān)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述分析物數(shù)量是所述分析物的濃度。更具體地，所述分析物選自由DNA、RNA和蛋白質(zhì)組成的組。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述熒光標(biāo)準(zhǔn)曲線接近線性。在一個(gè)更具體的實(shí)施方案中，(n)約為1。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述曲線由下述方程表征(I)y=r(X7(xn+k))+g;其中r是通過下式確定的校正值(II)r=(v-g)((sn+k)/sn)其中(s)是在所述高端標(biāo)準(zhǔn)物中的分析物的量。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述熒光部分是選自由花青和部花青染料組成的組的熒光化合物。更具體地，所述熒光部分選自由NanoOmnge、OliGreen、PicoGreen、和RiboGreen組成的組。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述高端標(biāo)準(zhǔn)物存在于所述樣品容器中。更具體地，所述高端標(biāo)準(zhǔn)物被固定在固體表面上。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述固體表面選自由所述樣品容器的內(nèi)表面、珠子、芯片和纖維組成的組。本發(fā)明的另一個(gè)方面提供用于測(cè)量樣品中的分析物的量的裝置，所述裝置包括帶有機(jī)器可執(zhí)行指示的計(jì)算機(jī)處理部件，其設(shè)置成實(shí)施上述方法。在另一個(gè)更具體的實(shí)施方案中，所述裝置還包括用于保持具有分析物的樣品容器的容座，光檢測(cè)器和一個(gè)或多個(gè)分析物傳感元件，所述分析物傳感元件包括i)用于激發(fā)所述樣品的能源，其中該能源被設(shè)置成發(fā)射預(yù)先確定最大波長(zhǎng)的光；ii)激發(fā)濾波器，其中所述激發(fā)濾波器分離來自所述能源的預(yù)先確定的波長(zhǎng)范圍的光；iii)發(fā)射濾波器，其中所述發(fā)射濾波器分離從所述被激發(fā)的樣品發(fā)射的預(yù)先確定的波長(zhǎng)范圍的光；并且其中每個(gè)所述分析物傳感元件被設(shè)置成測(cè)量預(yù)先確定的分析物的量，并且其中所述機(jī)器可執(zhí)行指示被進(jìn)一步設(shè)置成選擇與待測(cè)量的分析物相對(duì)應(yīng)的適當(dāng)?shù)姆治鑫飩鞲性?。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述能源是發(fā)光二極管。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述預(yù)先確定的分析物選自由下列各項(xiàng)組成的組DNA、RNA、細(xì)胞和蛋白質(zhì)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述裝置還包括使用者界面。更具體地，所述使用者界面包括顯示器和非數(shù)字鍵區(qū)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述使用者界面被設(shè)置成允許使用者選擇用于測(cè)量的所述分析物。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述機(jī)器可執(zhí)行指示能夠在沒有使用者輸入時(shí)選擇用于測(cè)量的所述分析物。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述裝置在終端使用者第一次使用所述裝置前進(jìn)行校正。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述樣品容器容座被設(shè)置成適合0.5ml的微量離心管。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述裝置還包括內(nèi)部電源。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述裝置包括第一和第二分析物傳感元件。更具體地，所述第一分析物傳感元件包括發(fā)射具有約470nm最大波長(zhǎng)的光的二極管，濾除具有大于約490nm的波長(zhǎng)的光的激發(fā)濾波器，和濾除具有小于約520nm和大于約580nm的波長(zhǎng)的光的發(fā)射濾波器。仍然更具體地，所述第二分析物傳感元件包括發(fā)射具有約640nm最大波長(zhǎng)的光的二極管，濾除具有小于約570nm和大于約647nm的波長(zhǎng)的光的激發(fā)濾波器，和濾除具有小于約652nm的波長(zhǎng)的光的發(fā)射濾波器。本發(fā)明的另一個(gè)方面提供用于測(cè)量在樣品容器中的分析物的量的裝置，所述裝置包括能源、光檢測(cè)器、帶有機(jī)器可執(zhí)行指示的計(jì)算機(jī)處理部件、和保持所述樣品容器的容座，其中所述樣品容器包括選自由聚丙烯和聚乙烯組成的組的聚合物。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述能源是發(fā)光二極管。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述分析物選自由DNA、RNA、蛋白質(zhì)、碳水化合物、脂質(zhì)和金屬離子組成的組。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述裝置還包括使用者界面。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述使用者界面包括顯示器和非數(shù)字鍵區(qū)。更具體地，所述使用者界面被設(shè)置成允許使用者選擇用于測(cè)量的所述分析物。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述機(jī)器可執(zhí)行指示能夠在沒有使用者輸入時(shí)選擇用于測(cè)量的所述分析物。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述裝置還包括內(nèi)部電源。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述裝置還包括至少一個(gè)通信端口。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述通信端口選自由通用串行總線(USB)端口，音頻/視頻串行總線(IEEE1394)端口，紅夕卜(IR)端口和無線電頻率(RF)端口組成的組。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述裝置在終端使用者第一次使用所述裝置之前進(jìn)行校正。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述裝置還包括用于鑒定與所述樣品容器相關(guān)的鑒定標(biāo)記的方法。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述鑒定標(biāo)記是機(jī)器可讀的。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述鑒定標(biāo)記選自由條形碼、數(shù)據(jù)矩陣條形碼和無線電頻率識(shí)別(RFID)標(biāo)記組成的組。本發(fā)明的另一個(gè)方面提供檢測(cè)在樣品中的分析物的方法，所述方法包括使用上述裝置。本發(fā)明的另一個(gè)方面提供計(jì)算在樣品容器中的兩種分析物的比例的方法，所述方法包括a)生成關(guān)于所述兩種分析物的熒光標(biāo)準(zhǔn)曲線，其包括測(cè)量第一空白分析物樣品(gl)和第二分析物樣品(g2)的熒光強(qiáng)度，并且測(cè)量關(guān)于所述第一分析物的至少一個(gè)高端標(biāo)準(zhǔn)物(vl)和關(guān)于所述第二分析物的至少一個(gè)高端標(biāo)準(zhǔn)物(v2)的熒光強(qiáng)度，其中所述曲線使得熒光強(qiáng)度與每種分析物的量或相對(duì)量相關(guān)，并且其中所述曲線具有預(yù)先確定的S形程度(n)和曲率(k);b)測(cè)量所述樣品(yl和y2)的熒光強(qiáng)度，其中所述樣品包括能夠指示所述分析物在所述樣品中的存在的熒光部分；和c)使用所述熒光'標(biāo)準(zhǔn)曲線將所述樣品(yl和y2)中的所述熒光強(qiáng)度與所述分析物的量相關(guān)。附圖簡(jiǎn)述圖l描述本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案的側(cè)視表。圖2描述以樣品容器容座為中心的多個(gè)分析物傳感部件的一個(gè)實(shí)施方案。圖3描述可以使用方程I生成的關(guān)于RNA作為分析物的理論熒光標(biāo)準(zhǔn)曲線。用于生成所述曲線的高端標(biāo)準(zhǔn)物包含100ng的RNA，當(dāng)使用該100ng標(biāo)準(zhǔn)物時(shí)，測(cè)定的可靠性達(dá)到200ng。圖4描述測(cè)量報(bào)道子通過擴(kuò)散或主動(dòng)混合而從儀器光徑外區(qū)域分解成光徑內(nèi)的區(qū)域的裝置。，圖5A描述隨著活的死的細(xì)胞比例下降的藍(lán)色激發(fā)信號(hào)。圖5B描述隨著活的死的細(xì)胞比例下降而增加的紅色激發(fā)信號(hào)。圖5C描述活的死的細(xì)胞的比例確定。圖6描述在本文所述的裝置上的真核細(xì)胞計(jì)數(shù)，其中對(duì)于所有檢測(cè)的真核細(xì)胞系的熒光反應(yīng)顯示顯著高于背景。發(fā)明詳述導(dǎo)言本發(fā)明的裝置和方法允許所述儀器和使用者之間的連續(xù)的、直觀的相互作用，以及所述方法在日常工作中對(duì)使用者的可及性。這里我們公開了包括分析物傳感元件(ASE)的熒光計(jì)，所述分析物傳感元件可操作性地連接，允許檢測(cè)預(yù)先確定的分析物，以致選擇所述預(yù)先確定的分析物就選擇了適當(dāng)?shù)腁SE。因此，在一個(gè)實(shí)施方案中，所述裝置是這樣設(shè)置，以致機(jī)器-可執(zhí)行指示選擇與所用的測(cè)定相對(duì)應(yīng)的適當(dāng)?shù)姆治鑫飩鞲性赃M(jìn)行具體分析物的檢測(cè)。所述方法包括通過測(cè)量?jī)煞N或多種標(biāo)準(zhǔn)物而生成標(biāo)準(zhǔn)曲線，所述兩種或多種標(biāo)準(zhǔn)物中的一種可以是零或空白標(biāo)準(zhǔn)物。所述標(biāo)準(zhǔn)曲線可以這樣生成通過將所述標(biāo)準(zhǔn)物的值應(yīng)用到具體算法，以產(chǎn)生表達(dá)由所述儀器讀取的、由測(cè)定產(chǎn)生的信號(hào)與在樣品中的分析物的濃度之間的關(guān)系的方程。所述裝置可以這樣設(shè)計(jì)，以致所述使用者界面提示使用者選擇測(cè)定，插入標(biāo)準(zhǔn)物，和插入樣品。從這種簡(jiǎn)單的輸入，所述裝置自動(dòng)可以選擇適當(dāng)?shù)姆治鑫飩鞲性退惴?，進(jìn)行需要的計(jì)算，以確定標(biāo)準(zhǔn)曲線，并且將來自樣品的信號(hào)與所述標(biāo)準(zhǔn)曲線比較，并且進(jìn)行需要的計(jì)算，以便以使用者的讀數(shù)顯示樣品中的分析物的量。另外，所述裝置還可以設(shè)置成接受廉價(jià)的、一次性的塑料的、透光的微量離心形管，該微量離心形管容納標(biāo)準(zhǔn)物或樣品，并且易于獲得。此外，所述裝置可以用來監(jiān)測(cè)和定量同一樣品中的多種分析物，例如，通過用不同的染料標(biāo)記分析物，然后在特定的波長(zhǎng)激發(fā)和/或?yàn)V過發(fā)射光譜，以致目的染料/分析物可以在其它的染料/分析物的存在下被清楚地監(jiān)測(cè)。定義在詳細(xì)描述本發(fā)明之前，應(yīng)該理解，本發(fā)明不限于具體的組合物或方法步驟，原因在于這些可以變化。必須注意，當(dāng)用于本說明書和后附的權(quán)利要求中時(shí)，單數(shù)形式"一個(gè)","一種"和"所述"包括復(fù)數(shù)指示物，除非上下文另外清楚地指明。因此，例如，提及"報(bào)道分子"reportermolecule)"包括多種報(bào)道分子，和提及"熒光計(jì)"包括多種熒光計(jì)等等。除非另外定義，本文所用的所有技術(shù)和科學(xué)術(shù)語都具有與本發(fā)明所涉及的領(lǐng)域中的普通技術(shù)人員通常所理解的相同的意思。為了本文所述的發(fā)明目的，定義下述術(shù)語。術(shù)語"分析物"是指在本發(fā)明的測(cè)定中要被測(cè)量或檢測(cè)的分子。術(shù)語"分析物"包括任何物質(zhì)，對(duì)于其存在特異性結(jié)合分子，或者對(duì)于其可以制備特異性結(jié)合分子，或者對(duì)于其所述分析物與報(bào)道分子相互作用產(chǎn)生可檢測(cè)的信號(hào)。代表性的分析物包括，但不限于，藥物、抗原、半抗原、抗體、蛋白質(zhì)、肽、氨基酸、激素、類固醇、癌細(xì)胞標(biāo)記、組織細(xì)胞、病毒、維生素、核酸、金屬離子、酶、脂質(zhì)、放射活性同位素、病毒、細(xì)菌、病原體、化學(xué)污染物、和殺蟲劑。術(shù)語"分析物傳感元件"或"ASE"當(dāng)用于本文時(shí)是指下列各項(xiàng)的特定組合1)能源，其自身可以發(fā)射限定范圍內(nèi)波長(zhǎng)的電磁能，2)"激發(fā)濾波器"，其能夠分離一定波長(zhǎng)范圍的電磁能，諸如但不限于光，和3)"發(fā)射濾波器"，其能夠分離從所述樣品發(fā)射的一定波長(zhǎng)范圍的電磁能，其中所述三個(gè)部分可操作地連接。所述ASE是可操作地連接的，以致可以測(cè)量預(yù)先確定的分析物，而無需由終端使用者人工選擇波長(zhǎng)和濾波器，或者需要進(jìn)行額外的計(jì)算。術(shù)語"水溶液"在用于本文時(shí)是指主要是水并且保持水的溶液特征的溶液。其中所述水溶液包含除了水以外的溶劑，水是典型的主要溶劑。術(shù)語"緩沖液"在用于本文時(shí)是指針對(duì)加入或者消耗化學(xué)物質(zhì)而起作用將所述溶液的酸度或堿度的改變減少到最低的系統(tǒng)。術(shù)語"可檢測(cè)的反應(yīng)"在用于本文時(shí)是指通過觀察或者通過使用儀器而直接或間接可檢測(cè)到的信號(hào)的發(fā)生或改變。典型地，所述可檢測(cè)的反應(yīng)是這樣的光學(xué)反應(yīng)，即，其導(dǎo)致波長(zhǎng)分布模式、或者吸收或熒光強(qiáng)度的改變、或光散射中的改變、熒光壽命、熒光極性、或這些參數(shù)的組合中改變。備選地，所述可檢測(cè)的反應(yīng)是信號(hào)的發(fā)生，其中所述染料是固有發(fā)熒光的，并且在與金屬離子或磷酸化的靶分子結(jié)合時(shí)不產(chǎn)生信號(hào)的改變。備選地，所述可檢測(cè)的反應(yīng)是信號(hào)的結(jié)果，諸如所述可檢測(cè)標(biāo)記的顏色、熒光、放射活性或另一種物理性質(zhì)，所述可檢測(cè)的標(biāo)記變得空間位于樣品的子集中，諸如在凝膠中，在印跡上，或在陣列上，在小平板的孔中，在微流體室中，或在由于形成包括磷酸化的靶點(diǎn)分子的本發(fā)明的三重(temary)復(fù)合物而導(dǎo)致的微粒上。術(shù)語"能源"在用于本文時(shí)是指光或波長(zhǎng)發(fā)射裝置，優(yōu)選地是LED，其能夠激發(fā)在溶液中的顆粒。術(shù)語"熒光團(tuán)"在用于本文時(shí)是指固有熒光的或者當(dāng)與生物化合物或金屬離子結(jié)合時(shí)表現(xiàn)出熒光改變的，即熒光性的組合物。熒光團(tuán)可以包含改變所述熒光團(tuán)的溶解性、光譜特征或物理特征的取代基。許多熒光團(tuán)是本領(lǐng)域的技術(shù)人員已知的，并且包括，但不限于，香豆素，花青，苯并呋喃，喹啉，喹挫啉酮，卩引哚(indole),氮茚(benzazole),borapolyazaindacene禾口咕噸，其包括熒光素，羅丹明和對(duì)甲氨基酚以及半導(dǎo)體納米晶體和在RICHARDP.HAUGLAND，MOLECULARPROBESHANDBOOKOFFLUORESCENTPROBESANDRESEARCHCHEMICALS(熒光探針和研究化學(xué)品的分子探針手冊(cè))(第10版,2005)中描述的其它熒光團(tuán)。術(shù)語"試劑盒"在用于本文時(shí)是指相關(guān)成分，典型地一種或多種化合物或組合物的包裝的套系。術(shù)語"標(biāo)記"在用于本文時(shí)是指當(dāng)附著到標(biāo)記的試劑上并且用于本方法中時(shí)保留其天然特征(例如，光譜特征，構(gòu)象和活性)的化學(xué)部分或蛋白質(zhì)。所述標(biāo)記可以是直接可檢測(cè)的(熒光團(tuán))或間接可檢測(cè)的(半抗原或酶)。這樣的標(biāo)記包括，但不限于，可以使用放射性-計(jì)數(shù)裝置測(cè)量的放射性標(biāo)記；色素、染料或其它可以視覺觀察到或使用分光光度計(jì)測(cè)量的生色團(tuán)發(fā)色團(tuán)；可以使用自旋標(biāo)記分析儀測(cè)量的自旋標(biāo)記；和熒光標(biāo)記(熒光團(tuán))，在這種情形中，例如，輸出信號(hào)通過激發(fā)適當(dāng)?shù)姆肿蛹雍衔锒a(chǎn)生，并且其可以通過用被所述染料吸收的光激發(fā)而顯現(xiàn)，或者可以使用標(biāo)準(zhǔn)熒光計(jì)或成像系統(tǒng)測(cè)量。所述標(biāo)記可以是化學(xué)發(fā)光的物質(zhì)，在這種情形中，輸出信號(hào)通過對(duì)信號(hào)化合物的化學(xué)修飾而產(chǎn)生；含金屬的物質(zhì)；或酶，在這種情形中，發(fā)生信號(hào)的酶-依賴性二次發(fā)生，諸如從無色底物形成有色產(chǎn)物。術(shù)語標(biāo)記還可以指這樣的"標(biāo)記"或半抗原，即，其可以選擇性地與綴合的分子結(jié)合，以便當(dāng)隨后與底物一起加入時(shí)，所綴合的分子用來產(chǎn)生可檢測(cè)的信號(hào)。例如，人們可以使用生物素作為標(biāo)記，然后使用辣根過氧化物(HRP)的抗生物素蛋白或鏈霉抗生物素蛋白綴合物來結(jié)合所述標(biāo)記，并且然后使用比色底物(例如，N-四甲基聯(lián)苯斷TMB))或熒光底物如AmplexRed試劑(分子探針公司(MolecularProbes,Inc.))以檢測(cè)HRP的存在。許多標(biāo)記是本領(lǐng)域的技術(shù)人員己知的，并且包括但不限于，顆粒、熒光團(tuán)、半抗原、酶和它們的比色的、熒光的和化學(xué)發(fā)光的底物、以及其它在RICHARDP.HAUGLAND,MOLECULARPROBESHANDBOOKOFFLUORESCENTPROBESANDRESEARCHPRODUCTS(熒光探針和研究產(chǎn)物的分子探針手冊(cè))(第9版，CD-ROM,2002年9月)，^J:,述中描述的標(biāo)記。術(shù)語"機(jī)器可執(zhí)行指示"在用于本文時(shí)是指使得機(jī)器如CPU實(shí)施方法或測(cè)定的一系列指示。術(shù)語"光檢測(cè)器"在用于本文時(shí)是指能夠接受光信號(hào)并且產(chǎn)生包含與在所述光信號(hào)中相同的信息的電信號(hào)的任何裝置。術(shù)語"預(yù)先確定的分析物"在用于本文時(shí)是指與分析物傳感元件(ASE)配合的分析物，以致所述預(yù)先確定的分析物的選擇指示特定的ASE在裝置中的存在。術(shù)語"蛋白質(zhì)"和"多肽"以通用意義用于本文，包括任何長(zhǎng)度的氨基酸殘基的聚合物。術(shù)語"肽"用于本文是指具有小于IOO個(gè)氨基酸殘基，典型地小于10個(gè)氨基酸殘基的多肽。該術(shù)語應(yīng)用于其中一個(gè)或多個(gè)氨基酸殘基是相對(duì)應(yīng)的天然存在的氨基酸的人工化學(xué)類似物的氨基酸聚合物，以及天然存在的氨基酸聚合物。術(shù)語"樣品"在用于本文時(shí)是指可以包含用于檢測(cè)或定量的分析物的任何物質(zhì)。所述分析物可以包括反應(yīng)基團(tuán)，例如通過其本發(fā)明的化合物可以綴合到所述分析物上的基團(tuán)。所述樣品還可以包括稀釋劑、緩沖劑、去污劑、和污染種類、碎片等，發(fā)現(xiàn)它們與目標(biāo)物混合在一起。示例性的實(shí)例包括尿、血清、血漿、全血、唾液、淚水、腦脊液、從乳頭分泌的流體等。還包括混懸或溶解在液體物質(zhì)如緩沖液、提取劑、溶劑等中的固體、凝膠或半固體物質(zhì)如粘液、機(jī)體組織、細(xì)胞等。典型地，所述樣品是活細(xì)胞，包括內(nèi)源宿主細(xì)胞蛋白、核酸聚合物、核苷酸、寡核苷酸、肽、環(huán)境物質(zhì)、食品、工業(yè)物質(zhì)和緩沖溶液的生物流體。所述樣品可以在水溶液、存活細(xì)胞培養(yǎng)物中或固定在固體或半固體表面如玻璃或塑料管或小杯上。熒光計(jì)及使用方法本發(fā)明的一個(gè)方面提供一種裝置，該裝置包括保持具有分析物和任選地報(bào)道分子的樣品容器的容座，光檢測(cè)器，一個(gè)或多個(gè)分析物傳感元件和帶有機(jī)器可執(zhí)行指示的計(jì)算機(jī)處理部件。依次，所述分析物傳感元件包括用于激發(fā)樣品的能源，其中所述能源被配置成發(fā)射預(yù)先確定最大波長(zhǎng)的光；激發(fā)濾波器，其分離來自能源的預(yù)先確定的波長(zhǎng)范圍的光；發(fā)射濾波器，其分離從被激發(fā)的樣品發(fā)射的預(yù)先確定的波長(zhǎng)范圍的光。所述裝置這樣設(shè)計(jì)，以致每個(gè)分析物傳感元件被設(shè)置成測(cè)量預(yù)先確定的分析物的量，并且其中所述機(jī)器可執(zhí)行指示被設(shè)置成選擇與待測(cè)量的分析物相對(duì)應(yīng)的適當(dāng)?shù)姆治鑫飩鞲性?。圖1是本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案的側(cè)視圖。圖1描述一個(gè)所述裝置的元件結(jié)構(gòu)的實(shí)施方案，和怎樣實(shí)施備選結(jié)構(gòu)來實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的裝置的功能，對(duì)于本領(lǐng)域的技術(shù)人員將是顯而易見的。圖1圖示的系統(tǒng)包括保持樣品容器的容座101，電源103，計(jì)算機(jī)處理部件105，分析物傳感元件，所述分析物傳感元件包括能源107、激發(fā)濾波器109、和發(fā)射濾波器111，以及光檢測(cè)器113。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述裝置不限于所述容座所設(shè)置成接受的樣品容器。所述容座可以適合的樣品容器的實(shí)例包括但不限于，培養(yǎng)皿、培養(yǎng)瓶、4孔板、8孔板、24孔板、96孔板、小杯、離心管、和微量離心管，僅舉數(shù)例。當(dāng)用于本文時(shí)，"容座被設(shè)置成適合或者接受"意指用于樣品容器的容座這樣設(shè)計(jì)，以致樣品容器貼切地適合開口，允許樣品容器在超過垂直軸外很少或不移動(dòng)。另外，所述容座和所述計(jì)算機(jī)處理部件可以或者可以不彼此配合，以致除非所述樣品容器正確地放置在容座中，否則所述計(jì)算機(jī)處理部件將不開始測(cè)量所述樣品。所述容座可以只接受1個(gè)樣品容器，或者它可以設(shè)置成接受2,3,4,5,6，7,8,910或更多個(gè)樣品管。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述容座被設(shè)置成適合或者接受微量離心管。微量離心管的實(shí)例在本領(lǐng)域是公知的，并且包括但不限于EppendorfTM管，透光微量離心管形管如在實(shí)時(shí)PCR實(shí)驗(yàn)中所用的那些(一個(gè)實(shí)例是可從VWR獲得的AxygenPCR-05-C500iiLPCR管)和通用的離心管。在一個(gè)更具體的實(shí)施方案中，所述容座可以設(shè)置成只適合一種大小的微量離心管，或者它可以設(shè)置成適合多于一種大小的微量離心管，其包括但不限于，小于0.5ml的管，0.5ml的管，1.5ml的管，2ml的管和大于2ml的管。因此，在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及用于測(cè)量在樣品容器中的分析物的量的裝置，其中所述裝置包括能源，光檢測(cè)器，帶有機(jī)器可執(zhí)行指示的計(jì)算機(jī)處理部件，和保持樣品容器的容座，其中所述樣品容器包括透光塑料。在一個(gè)具體的實(shí)施方案中，塑料包括聚丙烯和/或聚乙烯。實(shí)時(shí)PCR儀器，諸如BioRadDNAEngine和Opticon2實(shí)時(shí)PC'R檢測(cè)系統(tǒng)是使用這種類型的管用于需要熒光團(tuán)進(jìn)行檢測(cè)的樣品的儀器的實(shí)例。這種類型的儀器和相對(duì)應(yīng)的管是通常所用的，并且因此所述管易于從許多來源獲得。本發(fā)明的裝置還包括光檢測(cè)器。所述光檢測(cè)器可以是能夠接受光信號(hào)并且產(chǎn)生含有與所述光信號(hào)相同的信息的電信號(hào)的任何裝置?？梢杂糜诒景l(fā)明的光檢測(cè)器的實(shí)例包括，但不限于，光敏電阻、光電元件、光敏二極管、光電倍增管、光電管、光電晶體管和檢測(cè)由于發(fā)光引起的溫度變化的熱電裝置。本發(fā)明的裝置還包括一個(gè)或多個(gè)分析物傳感元件。本發(fā)明的每個(gè)分析物傳感元件包括下列各項(xiàng)的特定組合1)能源，其自身可以發(fā)射限定波長(zhǎng)范圍內(nèi)的電磁能，2)"激發(fā)濾波器"，其能夠分離一定波長(zhǎng)范圍的電磁能，諸如但不限于光，和3)"發(fā)射濾波器"，其能夠分離從所述樣品發(fā)射的一定波長(zhǎng)范圍的電磁能。當(dāng)受到來自所述能源的能量的激發(fā)時(shí)，一般來說，所述樣品將發(fā)射某種形式的電磁能，諸如，但不限于，可以通過熒光、磷光或發(fā)光產(chǎn)生的光。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，所述裝置包括單個(gè)分析物傳感元件(ASE)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述裝置包括超過一個(gè)ASE。在一個(gè)更具體的實(shí)施方案中，所述裝置包括2，3，4，5，6，7，8，9，或述裝置包括多于1個(gè)ASE，那么所述多個(gè)ASEs可以共用ASEs的一個(gè)或多個(gè)單個(gè)組件。因此，例如，當(dāng)本發(fā)明的裝置包括2個(gè)ASEs時(shí)，這些ASEs可以共用一個(gè)能源，并且具有獨(dú)立的發(fā)射濾波器和激發(fā)濾波器。為了繼續(xù)本實(shí)伊i，所述ASEs可以共用能源和發(fā)射濾波器，但具有獨(dú)立的激發(fā)濾波器。當(dāng)然，在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的裝置可以包括多于l個(gè)不同的ASEs，其中所述不同的ASEs不共用能源，也不共用發(fā)射濾波器或激發(fā)濾波器。在一個(gè)更具體的實(shí)施方案中，所述裝置包括多于1個(gè)ASE，其中所述ASEs的組件沒有共用的，盡管它們可以整合或者連接到同一計(jì)算機(jī)處理部件上。當(dāng)用于本文時(shí)，能源是電磁能的來源，并且包括任何類型的能量與電磁光譜，其包括但不限于，無線電能、微波能、紅外、可見光、紫外光、x-射線光和甚至是Y射線。在一個(gè)實(shí)施方案中，從所述能源發(fā)射的能量是可見光。在一個(gè)更具體的實(shí)施方案中，最大波長(zhǎng)的可見光是從所述能源發(fā)射的。例如，最大波長(zhǎng)的可見光可以是，但不限于，在400nm和450nm之間，或在425和475nm之間，或在450nm和500nm之間，或在475nm和525nm之間，或在500nm和550nm之間，或在525和575nm之間，或在550nm和600nm之間，或在575nm和625nm之間，或在600nm和650nm之間，或在625和675nm之間，或在650nm和700nm之間，或在675nm和725nm之間。這些最大波長(zhǎng)理想地與為了檢測(cè)預(yù)先確定的分析物而選擇的報(bào)道分子的最佳激發(fā)波長(zhǎng)相對(duì)應(yīng)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述最大波長(zhǎng)與從所述預(yù)先確定的分析物產(chǎn)生自發(fā)熒光的最佳波長(zhǎng)相對(duì)應(yīng)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述最大波長(zhǎng)與用于測(cè)量來自所述預(yù)先確定的分析物的光散射的最佳波長(zhǎng)相對(duì)應(yīng)。所述能源可以是能夠發(fā)射電磁能的任何裝置或組合物。能源的實(shí)例包括，但不限于，發(fā)光二極管(LED)，白熾燈泡，氣充電燈(例如，氦氣、氪氣、氖氣、氬氣、鈉蒸汽和氮?dú)?，激光，微波激射器，游離帶電顆粒如離子，加速顆粒，化學(xué)發(fā)光化學(xué)品，熒光物質(zhì)，和磷光物質(zhì)。在一個(gè)具體的實(shí)施方案中，所述能源是至少一個(gè)發(fā)光二極管。在另一個(gè)具體的實(shí)施方案中，所述能源是多于一個(gè)的發(fā)光二極管。在一個(gè)更具體的實(shí)施方案中，所述能源是發(fā)射可見光的單個(gè)發(fā)光二極管。在一個(gè)更具體的實(shí)施方案中，所述能源是發(fā)射具有預(yù)定最大波長(zhǎng)的可見光的一個(gè)或多個(gè)發(fā)光二極管。本發(fā)明的ASE的另一個(gè)組件包括至少一個(gè)發(fā)射濾波器和一個(gè)激發(fā)濾波器。當(dāng)用于本文時(shí)，激發(fā)濾波器是放置在所述能源和所述樣品之間的濾波器，以便從所述能源發(fā)射的能量在激發(fā)所述樣品之前進(jìn)行濾波。當(dāng)用于本文時(shí)，所述發(fā)射濾波器是放置在所述樣品和所述光檢測(cè)器之間的濾波器，以便從所述樣品發(fā)射的能量在激發(fā)所述光檢測(cè)器之前進(jìn)行濾波。通常，濾波器作用排除(濾除)特定波長(zhǎng)的電磁能透過所述濾波器。濾波器可以排除低于或者高于特定波長(zhǎng)的電磁能的波長(zhǎng)。例如，濾波器可以排除低于650nm的所有波長(zhǎng)的光或高于490nm的所有波長(zhǎng)。濾波器還可以排除在特定的波長(zhǎng)范圍內(nèi)的電磁能。例如，濾波器可以排除除了具有在約520nm和約580nm之間的波長(zhǎng)的光之外的所有波長(zhǎng)的光。選擇適當(dāng)?shù)臑V波器與所述能源一起使用應(yīng)該是容易地顯而易見的。在一個(gè)特別的實(shí)施方案中，所述ASE包括發(fā)光的能源，濾除具有大于約490nm的波長(zhǎng)的光的激發(fā)濾波器，和濾除具有小于約520nm和大于約580nm的波長(zhǎng)的光的發(fā)射濾波器。在另一個(gè)特別的實(shí)施方案中，所述ASE包括發(fā)光的能源，濾除具有小于約570nm和大于約647nm的波長(zhǎng)的光的激發(fā)濾波器，和濾除具有小于約565nm的波長(zhǎng)的光的發(fā)射濾波器。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述裝置包括至少兩個(gè)ASEs，其中第一個(gè)ASE包括發(fā)光的能源，濾除具有大于約490nm的波長(zhǎng)的光的激發(fā)濾波器，和濾除具有小于約520nm和大于約580nm的波長(zhǎng)的光的發(fā)射濾波器，并且其中第二個(gè)ASE包括發(fā)光的能源，濾除具有小于570nm和大于約647nm的波長(zhǎng)的光的激發(fā)濾波器，和濾除具有小于約565nm的波長(zhǎng)的光的發(fā)射濾波器。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述裝置包括多于一個(gè)ASE，并且所述多個(gè)ASEs被設(shè)置成以這樣的空間排列，以致ASEs的核心組件不移動(dòng)。圖2描述具有2個(gè)ASEs的裝置的實(shí)例，其中ASEs的核心組件被置于樣品容座的中心。參照?qǐng)D2，所述第一ASE包括組件201，203和207，并且所述第二ASE包括組件213，215和217。在這種空間構(gòu)型的一個(gè)實(shí)例中，能量(例如，光)從能源201(例如，發(fā)光二極管)發(fā)射，并且在透過放置在容座205上的樣品之前透過激發(fā)濾波器203。當(dāng)所述光激發(fā)樣品時(shí)，從被激發(fā)的樣品發(fā)射的光透過發(fā)射濾波器207，并且通過鏡子209反射到光檢測(cè)器211內(nèi)或其上。繼續(xù)這一實(shí)例，能量(例如，光)從能源213(例如，發(fā)光二極管)發(fā)射，并且在透過放置在容座205上的樣品之前透過激發(fā)濾波器215。當(dāng)所述光激發(fā)樣品時(shí)，從被激發(fā)的樣品發(fā)射的光透過發(fā)射濾波器217，并且通過鏡子219反射到光檢測(cè)器211內(nèi)或其上。從圖2顯而易見，對(duì)于將能量束引導(dǎo)到所述光檢測(cè)器內(nèi)或其上，鏡子可以是或者可以不是必需的，這取決于從被激發(fā)的樣品發(fā)射的能量和所述光檢測(cè)器之間的空間關(guān)系。因此，一個(gè)或多個(gè)鏡子是任選的，并且可以在一些特別的實(shí)施方案中存在。本發(fā)明的裝置還包括計(jì)算機(jī)處理部件。所述處理器控制所述裝置的操作，并且還提供對(duì)所述裝置的各種功能性的控制。所述處理器可以是通過總線(bus)結(jié)構(gòu)或其它通信界面控制功能的中央處理器。所述處理器還可以通過將所述處理功能分布在用來實(shí)施本裝置的功能性的一個(gè)或多個(gè)所述各種組件中而實(shí)施。所述計(jì)算機(jī)處理部件的一個(gè)組件將包括存儲(chǔ)器。存儲(chǔ)器用來提供程序數(shù)據(jù)或在操作過程中計(jì)算機(jī)處理部件所用的其它數(shù)據(jù)的存儲(chǔ)，并且可以使用各種RAM或ROM存儲(chǔ)裝置而實(shí)施。存儲(chǔ)器可以用于，例如，存儲(chǔ)操作指示，和提供操作和存儲(chǔ)的存儲(chǔ)器登記。存儲(chǔ)器還可以與存儲(chǔ)裝置諸如但不限于盤存儲(chǔ)裝置或閃存裝置聯(lián)合使用。存儲(chǔ)裝置還可以用來存儲(chǔ)程序指示，對(duì)照和校正曲線，操作數(shù)據(jù)，歷史日志，和其它可以需要存儲(chǔ)在所述裝置內(nèi)的數(shù)據(jù)。備選地，所述存儲(chǔ)裝置，如果存在一個(gè)的話，不需要在所述裝置內(nèi)。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述存儲(chǔ)裝置將不存儲(chǔ)大量數(shù)據(jù)，但是他存儲(chǔ)的數(shù)據(jù)或指示能夠被經(jīng)常而快速地訪問。在另一個(gè)實(shí)施方案中，存在高速緩沖存儲(chǔ)器，已將與從所述存儲(chǔ)裝置找回常用的數(shù)據(jù)或指示相關(guān)的反應(yīng)時(shí)間最小化。在更具體的實(shí)施方案中，所述存儲(chǔ)裝置可以存儲(chǔ)小于l個(gè)十億字節(jié)(GB)，小于500兆字節(jié)(MB)，小于250MB,小于100MB，小于50MB，小于20MB，小于10MB,小于9MB,小于8MB，小于7MB，小于6MB，小于5MB,小于4MB,小于3MB,小于2MB或小于1MB的數(shù)據(jù)和/或指示。在另一個(gè)具體的實(shí)施方案中，所述存儲(chǔ)裝置可以存儲(chǔ)大量數(shù)據(jù)，例如1GB或更多的數(shù)據(jù)。所述裝置的存儲(chǔ)器將包括機(jī)器可執(zhí)行指示。所述機(jī)器可執(zhí)行指示控制在所述裝置內(nèi)的ASES的操作。例如，所述機(jī)器可執(zhí)行指示被設(shè)置成選擇適當(dāng)?shù)腁SE,這取決于被測(cè)量的具體的分析物。因此，在一個(gè)具體的實(shí)施方案中，所述裝置包括多于一個(gè)ASE，并且包括機(jī)器可執(zhí)行指示。終端使用者可以選擇并且將待測(cè)量的具體分析物輸入到所述裝置中，反過來，所述機(jī)器可執(zhí)行指示將選擇并使用所述裝置內(nèi)的正確的ASE來測(cè)量所選擇的分析物。在一個(gè)具體的實(shí)施方案中，所述ASE已被最優(yōu)化與特異的報(bào)道分子一起使用，所述報(bào)道分子用來測(cè)量所選擇的分析物。例如，參照?qǐng)D2，終端使用者可以選擇特定的分析物來通過所述裝置進(jìn)行測(cè)量，并且所述機(jī)器可執(zhí)行指示將確定使用哪一個(gè)ASE。如果選擇了一種具體的分析物，那么所述機(jī)器可執(zhí)行指示將操作打開能源201和光檢測(cè)器209的電源，而不是能源211或光檢測(cè)器217的電源。來自能源201的能量將透過激發(fā)濾波器203，并且激發(fā)放置在容座205中的樣品。然后，從所述樣品發(fā)射的能量將在傳播到光檢測(cè)器209之前透過發(fā)射濾波器207。如果然后終端使用者選擇不同的分析物進(jìn)行測(cè)量，那么所述機(jī)器可執(zhí)行指示將操作打開能源211和光檢測(cè)器217的電源，而不是能源201或光檢測(cè)器209的電源。來自能源211的能量將透過激發(fā)濾波器213，并且激發(fā)放置在容座205中的樣品。然后，從所述樣品發(fā)射的能量將在傳播到217中的光檢測(cè)器之前透過發(fā)射濾波器215。在這種意義中，所述機(jī)器可執(zhí)行指示能夠被設(shè)置成選擇與被測(cè)量的分析物相對(duì)應(yīng)的適當(dāng)?shù)腁SE。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述機(jī)器可執(zhí)行指示這樣設(shè)置，以便它們能夠在沒有終端使用者輸入時(shí)選擇待測(cè)量的分析物。在這一實(shí)施方案中，終端使用者將只是將樣品容器放置在容座205中。一旦放置就位，所述機(jī)器可執(zhí)行指示可以或可以不進(jìn)行一個(gè)或一系列操作，以確定最適合的ASE用于分析所述樣品。當(dāng)所述機(jī)器可執(zhí)行指示選擇與所述樣品內(nèi)的分析物相對(duì)應(yīng)的適當(dāng)?shù)腁SE時(shí)，然后，所述機(jī)器可執(zhí)行指示實(shí)施測(cè)定以確定分析物濃度。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述機(jī)器可執(zhí)行指示還可以包括校正數(shù)據(jù)，諸如但不限于，校正曲線數(shù)據(jù)，內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)等。例如，所述校正數(shù)據(jù)可以被寫入所述機(jī)器可執(zhí)行指示中，以便對(duì)于終端使用者不需要獲得空白和標(biāo)準(zhǔn)物測(cè)量數(shù)據(jù)。因此，所述機(jī)器可執(zhí)行指示可以允許所述裝置在終端使用者第一次使用之前進(jìn)行校正。并且所述機(jī)器可執(zhí)行指示還可以允許對(duì)于終端使用者所述裝置是完全"免于校正"的。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述裝置監(jiān)測(cè)并定量在同一份樣品中的多種分析物，其通過，例如，用不同的染料標(biāo)記分析物，然后激發(fā)和/或?yàn)V過在特定波長(zhǎng)的發(fā)射光譜，以便目的染料/分析物可以在其它染料/分析物的存在下被清楚地監(jiān)測(cè)。因此，本發(fā)明的一個(gè)具體的實(shí)施方案提供對(duì)多種分析物的同時(shí)監(jiān)測(cè)，諸如通過同時(shí)檢測(cè)在單一樣品中的多種染料/分析物而進(jìn)行。本發(fā)明的裝置被設(shè)計(jì)成測(cè)量在樣品中的多種分析物的量。所述裝置可以被設(shè)計(jì)成同時(shí)測(cè)量多種分析物，或者所述裝置可以被設(shè)置成"一次測(cè)量一種"分析物。所述被定量的分析物可以是任何分析物，條件是所述裝置被設(shè)置成測(cè)量所需要的具體的分析物。當(dāng)用于本文時(shí)，分析物是待分析的樣品中的分析物、組合物或生物體。待定量的分析物的實(shí)例包括，但不限于，核酸如DNA和RNA,蛋白質(zhì)，碳水化合物，脂質(zhì)，蛋白聚糖，糖蛋白，蛋白脂質(zhì)，脂蛋白，金屬離子，原核和真核細(xì)胞，和病毒顆粒。在一個(gè)具體的實(shí)施方案中，所述裝置能夠定量DNA,RNA，真核和原核細(xì)胞，以及蛋白質(zhì)。在一個(gè)實(shí)施方案中，所選擇的分析物使用報(bào)道分子進(jìn)行測(cè)量。術(shù)語"報(bào)道分子"在用于本文時(shí)是指當(dāng)與分析物締合時(shí)，能夠產(chǎn)生可見信號(hào)的任何發(fā)光分子，不管其是直接地還是間接地發(fā)光。包括典型用于熒光計(jì)檢測(cè)分析物如核酸和蛋白質(zhì)的報(bào)道子。目前可商購的報(bào)道分子包括但不限于，Quant-it⑧試劑盒(Invitrogen)中的染料，Sypro⑧染料，Picogreen⑧染料,深紫蛋白染料，Syto⑧染料，Sybr⑧染料，F(xiàn)lamingo⑧染料，和Lucy⑧染料。典型地，發(fā)光分子，當(dāng)用于本文時(shí)，包括染料，熒光蛋白，磷光染料，發(fā)色團(tuán)，酶底物，半抗原和化學(xué)發(fā)光化合物顆粒，半抗原，酶及它們?cè)谶m當(dāng)激活時(shí)能夠產(chǎn)生可檢測(cè)信號(hào)的比色、熒光和化學(xué)發(fā)光底物。術(shù)語"染料"是指發(fā)射光以產(chǎn)生可觀察的檢測(cè)信號(hào)的化合物。"染料"包括熒光的和非熒光的化合物，其包括但不限于，色素，熒光團(tuán)，化學(xué)發(fā)光化合物，發(fā)光化合物和發(fā)色團(tuán)。術(shù)語"發(fā)色團(tuán)"在用于本文時(shí)是指發(fā)射和/或反射在可以不用儀器輔助而觀察到的可見光譜中的光的標(biāo)記。術(shù)語"熒光團(tuán)"在用于本文時(shí)是指固有熒光性的，或者當(dāng)與生物化合物結(jié)合時(shí)表現(xiàn)出熒光改變，艮口，可以是熒光性的或者強(qiáng)度可以通過淬滅而減少的組合物。熒光團(tuán)可以包含改變所述熒光團(tuán)的溶解性、光譜特征或物理特征的取代基。許多熒光團(tuán)是本領(lǐng)域的技術(shù)人員已知的，并且包括，但不限于，香豆素，花青，苯并呋喃，喹啉，喹唑啉酮，n引哚，氮茚(benzazole)，borapolyazaindacene和咕噸，其包括熒光素，羅丹明和對(duì)甲氨基酚和在RICHARDP.HAUGLAND,TheHandbook,AGuidetoFluorescentProbesandLabelingTechnologies(手冊(cè)，熒光探針和標(biāo)記技術(shù)的指南)(第10版,2005年)中描述的其它熒光團(tuán)。存在許多用于擴(kuò)增信號(hào)的熒光性和比色的酶底物，以及用來直接檢測(cè)分析物的功能的底物，例如，分解底物形成可檢測(cè)的信號(hào)的酶。二者都包含在本發(fā)明中用于檢測(cè)預(yù)先確定的分析物。在用于擴(kuò)增信號(hào)的酶底物的情形中，所述分析物與酶締合。在酶底物直接檢測(cè)所述分析物的情形中，所述分析物是酶。比色的或熒光性的底物和酶組合包括，但不限于，使用氧化還原酶如辣根過氧化物酶和底物如3,3，-二氨基聯(lián)苯胺(DAB)和3-氨基-9-乙基咔唑(AEC),其產(chǎn)生有區(qū)別的顏色(分別為棕色和紅色)。其它產(chǎn)生可檢測(cè)的產(chǎn)物的比色的氧化還原酶底物包括，但不限于2，2-連氮基-二(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)(ABTS),鄰-苯二胺(OPD),3,3，,5，5，-四甲聯(lián)苯胺(TMB)，鄰-聯(lián)茴香胺，5-氨基水楊酸，4-氯-l-萘酚。熒光底物包括，但不限于，高香草酸或4-羥基-3-甲氧基苯乙酸，還原的吩噁嗪和還原的苯并噻嗪,包括AmplexRed和Amplex超紅試劑及其變體(美國(guó)專利號(hào)4,384,042和美國(guó)系列號(hào)10/980,139)和還原的二氫咕噸，包括二氫熒光素(美國(guó)專利號(hào)6,162,931)和二氫羅丹明，其包括二氫羅丹明123。是酪酰胺(tyramides)的過氧化物酶底物(美國(guó)專利號(hào)5,196,306;5,583,001和5，731,158)代表獨(dú)特種類的過氧化物酶底物，原因在于它們?cè)诿缸饔弥翱梢允枪逃锌蓹z測(cè)的，而通過過氧化物酶在描述為酪酰胺信號(hào)擴(kuò)增(TSA)的過程中的作用而"固定在適當(dāng)位置"。這些底物廣泛地用于標(biāo)記樣品中的目的物，其是細(xì)胞、組織或陣列，用于它們隨后通過顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、光學(xué)掃描和熒光計(jì)進(jìn)行檢測(cè)。另一種優(yōu)選的比色(并且在一些情形中是熒光性的)底物和酶組合使用磷酸酶諸如酸性磷酸酶、堿性磷酸酶或這樣的磷酸酶與比色底物如5-溴-6-氯-3』引哚磷酸(BCIP)，6-氯-3』引哚磷酸,5-溴-6-氯-3』引哚磷酸，對(duì)-石肖基苯基磷酸，或鄰-硝基苯基磷酸的組合形式，或者與熒光底物如4-甲基傘基磷酸(4-methylumbelliferylphosphate),6,8-二氟-7-羥基-4-甲基香豆素磷酸(DiFMUP，美國(guó)專利號(hào)5,830,912)熒光素二磷酸，3-鄰-甲基熒光素磷酸,試鹵靈磷酸，9仏(l,3-二氯-9，9-二甲基吖啶-2-酮-7-基)磷酸(DDAO磷酸)，或ELF97,ELF39或相關(guān)的磷酸鹽(酯)(美國(guó)專利號(hào)5，316,906和5,443,986)的組合形式。糖苷酶，特別是卩-半乳糖苷酶，(3-葡糖醛酸糖苷酶和(3-葡糖苷酶，是另外適合的酶類。適當(dāng)?shù)谋壬孜锇?，但不限于?-溴-4-氯-3-吲哚p-D-吡喃半乳糖苷(X-gal)和類似的吲哚半乳糖苷，葡糖苷，和葡糖醛酸糖苷，#/-硝基苯基卩-D-吡喃半乳糖苷(ONPG)和對(duì)-硝基苯基P-D-吡喃半乳糖苷。優(yōu)選的熒光性底物包括試鹵靈J3-D-吡喃半乳糖苷，熒光素二半乳糖苷(FDG),熒光素二葡糖醛酸糖苷以及它們的結(jié)構(gòu)變體(美國(guó)專利號(hào)5,208,148;5,242,805;5,362,628;5,576,424和5,773,236),4畫甲基傘基P-D陽吡喃半乳糖苷，羧基傘基卩-D-吡喃半乳糖苷和氟化的香豆素(3-D-吡喃半乳糖苷(美國(guó)專利號(hào)5，830，912)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，用于檢測(cè)與抗抗生素如(3-內(nèi)酰胺的微生物相關(guān)的酶的存在的酶底物包括(3-內(nèi)酰胺酶底物，其包括但不限于，在美國(guó)系列號(hào)11/040,924;和US20030003526中公開的任何底物和應(yīng)用方法。其它酶類包括，但不限于，水解酶諸如膽堿酯酶和肽酶，氧化酶諸如葡萄糖氧化酶和細(xì)胞色素氧化酶，和還原酶，對(duì)于它們適合的底物是已知的。產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光的酶和它們適當(dāng)?shù)牡孜飳?duì)于一些測(cè)定是優(yōu)選的。這些包括，但不限于，天然和重組的形式的螢光素酶和水母發(fā)光蛋白。用于磷酸酶、糖苷酶和氧化酶的產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光的底物，諸如包含穩(wěn)定的二氧雜環(huán)丁烷(dioxetane)、魯米諾、異魯米諾和吖啶酯(acridiniumesters)的那些也是有用的。除了酶類，半抗原如生物素也是優(yōu)選的標(biāo)記。生物素是有用的，原因在于它可以在酶系統(tǒng)中起作用，以進(jìn)一步擴(kuò)增可檢測(cè)的信號(hào)，并且它可以作用為標(biāo)記，以用于分離目的的親和層析中。對(duì)于檢測(cè)目的，使用對(duì)于生物素具有親和性的酶綴合物，諸如抗生物素蛋白-HRP。隨后，加入過氧化物酶底物，以產(chǎn)生可檢測(cè)的信號(hào)。半抗原還包括激素，天然存在的和合成的藥物，污染物，過敏原，效應(yīng)分子，生長(zhǎng)因子，化學(xué)因子，細(xì)胞因子，淋巴因子，氨基酸，肽，化學(xué)中間物，核苷酸，等。在一個(gè)獨(dú)立的實(shí)施方案中，所述報(bào)道分子是與特異的結(jié)合配偶體綴合的染料或標(biāo)記，其中所述特異的結(jié)合配偶體與所述分析物或共價(jià)附著到所述分析物上的分子結(jié)合。術(shù)語"標(biāo)記"在用于本文時(shí)是指當(dāng)附著到標(biāo)記試劑上并且用于本方法中時(shí)保留其天然特征(例如，光譜特征，構(gòu)象和活性)的化學(xué)部分或蛋白質(zhì)。所述標(biāo)記可以是直接可檢測(cè)的(熒光團(tuán))或間接可檢測(cè)的(半抗原或酶)。這樣的標(biāo)記包括，但不限于，可以使用放射性-計(jì)數(shù)裝置測(cè)量的放射性標(biāo)記；色素、染料或其它可以視覺觀察到或使用分光光度計(jì)測(cè)量的生色團(tuán)；可以使用自旋標(biāo)記分析儀測(cè)量的自旋標(biāo)記；和熒光標(biāo)記(熒光團(tuán))，在這種情形中，例如，輸出信號(hào)通過激發(fā)適當(dāng)?shù)姆肿蛹雍衔锒a(chǎn)生，并且其可以通過用被所述染料吸收的光激發(fā)而顯現(xiàn)，或者例如可以使用標(biāo)準(zhǔn)熒光計(jì)或成像系統(tǒng)測(cè)量。所述標(biāo)記可以是化學(xué)發(fā)光的物質(zhì)，在這種情形中，輸出信號(hào)通過對(duì)信號(hào)化合物的化學(xué)修飾而產(chǎn)生；含金屬的物質(zhì)；或酶，在這種情形中，發(fā)生信號(hào)的酶-依賴性二次發(fā)生，諸如從無色底物形成有色產(chǎn)物。術(shù)語標(biāo)記還可以指這樣的"標(biāo)記"或半抗原，即，其可以選擇性地與綴合的分子結(jié)合，以便當(dāng)隨后與底物一起加入時(shí)，所綴合的分子用來產(chǎn)生可檢測(cè)的信號(hào)。例如，人們可以使用生物素作為標(biāo)記，然后使用辣根過氧化物(HRP)的抗生物素蛋白或鏈霉抗生物素蛋白綴合物來結(jié)合所述標(biāo)記，并且然后使用比色底物(例如，N-四甲基聯(lián)苯胺(TMB))或熒光底物如AmplexRed試齊IJ(分子探針公司(MolecularProbes,Inc.))以檢測(cè)HRP的存在。許多標(biāo)記是本領(lǐng)域的技術(shù)人員已知的，并且包括但不限于，顆粒、熒光團(tuán)、半抗原、酶和它們的比色的、熒光的和化學(xué)發(fā)光的底物、以及其它在RICHARDP.HAUGLAND,MOLECULARPROBESHANDBOOKOFFLUORESCENTPROBESANDRESEARCHPRODUCTS(熒光探針和研究產(chǎn)物的分子探針手冊(cè))(第9版，CD-ROM,2002年9月)，y^J:^f述中描述的標(biāo)記。典型地，所述標(biāo)記將是抗體、抗原、生物素或鏈霉抗生物素蛋白、典型用于免疫測(cè)定中的所有的綴合物。然而，并不意欲限制可以綴合到標(biāo)記上并且用于本方法中來檢測(cè)目標(biāo)分析物的具體的結(jié)合配偶體。表2.代表性的具體的結(jié)合對(duì)<table>tableseeoriginaldocumentpage27</column></row><table>在一個(gè)特別的方面，載體分子是抗體片段，諸如，但不限于，抗-Fc，抗-Fc同種型，抗-J鏈，抗-K輕鏈，抗A輕鏈，或單鏈片段可變蛋白；或非抗體肽或蛋白，諸如，例如但不限于，可溶的Fc受體，蛋白質(zhì)G，蛋白質(zhì)A，蛋白質(zhì)L，凝集素，或其片段。在一個(gè)方面，所述載體分子是對(duì)靶-結(jié)合抗體的Fc部分或?qū)Π?結(jié)合抗體的Fc部分的同種型特異的Fab片段(美國(guó)系列號(hào)10/118,204)。單價(jià)Fab片段典型地從鼠源單克隆抗體或在各種動(dòng)物例如但不限于兔或山羊中產(chǎn)生的多克隆抗體而產(chǎn)生。這些片段可以從任何同種型諸如鼠源IgM,IgG,，IgG2a，IgG化或IgG3而產(chǎn)生。備選地，非抗體蛋白或肽如蛋白質(zhì)G，或其它適當(dāng)?shù)牡鞍踪|(zhì)，可以單獨(dú)使用或者與白蛋白偶聯(lián)。優(yōu)選的白蛋白包括人和牛血清白蛋白或卵清白蛋白。蛋白質(zhì)A,G和L定義為包括本領(lǐng)域的技術(shù)人員已知的包括至少一個(gè)IgG的結(jié)合結(jié)構(gòu)域的那些蛋白質(zhì)或其衍生物，即，對(duì)IgG有親和性的蛋白質(zhì)。這些蛋白質(zhì)可以進(jìn)行修飾，但是不必要進(jìn)行修飾，并且以與本發(fā)明其它載體分子相同的方式綴合到反應(yīng)標(biāo)記上。在另一個(gè)方面，所述載體分子是完整無損的抗體?？贵w是本領(lǐng)域的術(shù)語，表示由動(dòng)物應(yīng)答抗原而分泌或生產(chǎn)的可溶物質(zhì)或分子，并且其具有與誘導(dǎo)其形成的抗原特異性結(jié)合的特別的性質(zhì)?？贵w本身也作為抗原或免疫原，因?yàn)樗鼈兪翘堑鞍祝⑶乙虼擞脕懋a(chǎn)生抗-物種抗體?？贵w，也稱為免疫球蛋白，分成5個(gè)不同的種類-…lgG,IgA,IgM,IgD,和IgE?；镜腎gG免疫球蛋白結(jié)構(gòu)由兩個(gè)相同的輕多肽鏈和兩個(gè)相同的重多肽鏈(通過二硫鍵連接在一起)組成。當(dāng)用酶木瓜蛋白酶處理IgG時(shí)，可以分離單價(jià)抗原-結(jié)合片段，本文稱為Fab片段。當(dāng)將IgG用胃蛋白酶(另一種蛋白水解酶)處理時(shí)，產(chǎn)生更大的片段F(ab')2。通過用中等還原性緩沖液處理，這一片段可以分成兩半，這導(dǎo)致單價(jià)Fab'片段。Fab'片段比Fab稍大一些，并且包含一個(gè)或多個(gè)來自鉸鏈區(qū)的游離的巰基(在更小的Fab片段中沒有發(fā)現(xiàn)巰基)。術(shù)語"抗體片段"用于本文是定義抗體的Fab',F(ab，)2和Fab部分。用胃蛋白酶和木瓜蛋白酶處理抗體分子以產(chǎn)生抗體片段，在本領(lǐng)域內(nèi)是公知的(Gorevic等.，MethodsofEnzyol.(酶學(xué)方法)，116:3(1985))。本發(fā)明的單價(jià)Fab片段是從鼠源單克隆抗體而產(chǎn)生，或從在已經(jīng)用外來抗體或其片段免疫的各種動(dòng)物中產(chǎn)生的多克隆抗體而產(chǎn)生的，美國(guó)專利號(hào)4,196,265公開了生產(chǎn)單克隆抗體的方法。典型地，二級(jí)抗體來自于已經(jīng)在兔或山羊中產(chǎn)生的多克隆抗體，但是本領(lǐng)域技術(shù)人員已知產(chǎn)生多克隆抗體的任何動(dòng)物都可以用來產(chǎn)生抗-物種抗體。術(shù)語"一級(jí)抗體"描述直接與所述抗原結(jié)合的抗體，其與"二級(jí)抗體"相反，二級(jí)抗體結(jié)合所述一級(jí)抗體的區(qū)域。單克隆抗體是相等的，并且在一些情形中，比多克隆抗體優(yōu)選，條件是配體-結(jié)合抗體與所述單克隆抗體相容，所述單克隆抗體典型地使用本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的方法從鼠源雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生。在一個(gè)方面中，所述抗體只針對(duì)外來抗體的Fc區(qū)域產(chǎn)生。本質(zhì)上，動(dòng)物只用外來抗體如鼠源的Fc區(qū)域片段進(jìn)行免疫。所述多克隆抗體從隨后的采血中收集，用酶胃蛋白酶或木瓜蛋白酶消化，以產(chǎn)生單價(jià)片段。然后，將所述片段在柱上進(jìn)行親和純化，所述柱上包括動(dòng)物針對(duì)其免疫的完整的免疫球蛋白蛋白或只是Fc片段。本發(fā)明的標(biāo)記包括本領(lǐng)域技術(shù)人員己知的任何直接或間接可檢測(cè)的標(biāo)記，所述標(biāo)記可以共價(jià)附著到特異的結(jié)合配偶體上。標(biāo)記包括，但不限于，發(fā)色團(tuán)、熒光團(tuán)、熒光蛋白、磷光染料、串聯(lián)染料、顆粒、半抗原、酶和放射性同位素。優(yōu)選的標(biāo)記包括熒光團(tuán)、熒光蛋白、半抗原和酶。本發(fā)明的熒光團(tuán)是在超過280nm表現(xiàn)出最大吸收的任何化學(xué)部分，并且當(dāng)共價(jià)附著到標(biāo)記試劑上時(shí)保留其光譜特征。本發(fā)明的熒光團(tuán)包括，但不限于芘(包括在美國(guó)專利5,132,432中公開的任何相對(duì)應(yīng)的衍生化合物)，蒽，萘，吖啶，1,2-二苯乙烯，吲哚或苯并吲哚，噁唑或苯并噁唑,噻唑或苯并噻唑，4-氨基-7-硝基苯基-2-噁-1,3-二唑(NBD),花青(包括美國(guó)系列號(hào)09/968,401和09/969,853中的任何相對(duì)應(yīng)的化合物)，羰花青(包括在美國(guó)系列號(hào)09/557,275;09/969,853和09/968,401;美國(guó)專利號(hào)4,981,977;5,268,486;5，569，587;5,569,766;5,486,616;5,627,027;5,808,044;5,877,310;6,002,003;6,004,536;6,008,373;6,043,025;6,127,134;6,130,094;6,133,445;和公布WO02/26891,WO97/40104,WO99/51702，WO01/21624;EP1065250A1中的任何相對(duì)應(yīng)的化合物)，喹諾酮(carbostyryl),卟啉，水楊酸酯,氨茴酸酯，奧，茈，卩比啶，喹啉，aborapolyazaindacene(包括在美國(guó)專利號(hào)4,774,339;5,187,288;5,248,782;5,274,113;和5,433,896中公開的任何相對(duì)應(yīng)的化合物)，坫噸(包括在美國(guó)專利號(hào)6,162,931;6,130,101;6,229,055;6,339,392;5,451,343和美國(guó)系列號(hào)09/922,333中公開的任何相對(duì)應(yīng)的化合物)，噁嗪(包括在美國(guó)專利號(hào)4,714,763中公開的任何相對(duì)應(yīng)的化合物)或苯并噁嗪，carbazine(包括在美國(guó)專利號(hào)4,810,636中公開的任何相對(duì)應(yīng)的化合物)，phenalenone,香豆素(包括在美國(guó)專利號(hào)5,696,157;5，459，276;5,501,980和5,830,912中公開的相對(duì)應(yīng)的化合物)，苯并呋喃(包括在美國(guó)專利號(hào)4,603,209禾卩4,849,362中公開的相對(duì)應(yīng)的化合物)和benzphenalenone(包括在美國(guó)專利號(hào)4,812,409中公開的任何相對(duì)應(yīng)的化合物)以及它們的衍生物。當(dāng)用于本文時(shí)，噁嗪包括試鹵靈(包括在5,242,805中公開的任何相對(duì)應(yīng)的化合物)、氨基噁嗪酮、二氨基噁嗪、以及它們的苯并-取代的類似物。當(dāng)所述熒光團(tuán)是咕噸時(shí)，所述熒光團(tuán)任選地是熒光素、對(duì)甲氨基酚(包括在美國(guó)專利號(hào)5,227，487和5,442,045中公開的任何相對(duì)應(yīng)的化合物)或羅丹明(包括在美國(guó)專利號(hào)5，798,276;5,846,737;美國(guó)系列號(hào)09/129,015中公開的任何相對(duì)應(yīng)的化合物)。當(dāng)用于本文時(shí)，熒光素包括苯并-或二苯并熒光素、半萘熒光素、或萘熒光素。類似地，當(dāng)用于本文時(shí)，對(duì)甲氨基酚包括seminaphthorhodafluors(包括在美國(guó)專利號(hào)4，945，171中公開的任何相對(duì)應(yīng)的化合物)。備選地，所述熒光團(tuán)是咕噸，其通過在咕噸的9-位置上的單一共價(jià)鍵連接而鍵合。優(yōu)選的坫噸包括附著在9-位置上的3//-卩占噸-6-醇-3-酮的衍生物，附著在9-位置上的6-氨基-3//-咕噸-3-酮的衍生物，或附著在9-位置上的6-氨基-3//-咕噸-3-亞胺的衍生物。本發(fā)明優(yōu)選的熒光團(tuán)包括卩占噸(對(duì)甲氨基酚，羅丹明，熒光素及其衍生物)香豆素，花青，芘，噁嗪和borapolyazaindacene。最優(yōu)選的是磺化口占噸，氟化卩占噸，磺化香豆素，氟化香豆素和磺化花青。附著到特異性結(jié)合配偶體上的熒光團(tuán)的選擇將決定報(bào)道分子的吸收和熒光發(fā)射特征以及隨后的ASE選擇。熒光團(tuán)標(biāo)記的物理特征包括光譜特征(吸收、發(fā)射和斯托克斯頻移)、熒光強(qiáng)度、壽命、極性和光脫色速率，所有這些特征都可以用來區(qū)分一種熒光團(tuán)和另一種熒光團(tuán)。典型地，所述熒光團(tuán)包含一個(gè)或多個(gè)芳香族或雜芳香族環(huán)，其任選地由各種取代基取代一次或多次，所述取代基包括但不限于，鹵素，硝基,氰基烷基全氟烷基，烷氧基鏈烯基，炔基，環(huán)烷基芳垸基?；蓟螂s芳基環(huán)系統(tǒng)，苯并，或本領(lǐng)域已知的在熒光團(tuán)上典型存在的其它取代基。在本發(fā)明的一個(gè)方面中，所述熒光團(tuán)具有超過480nm的最大吸收。在一個(gè)特別有用的實(shí)施方案中，所述熒光團(tuán)在或者接近488nm到514nm(特別適用于通過氬離子激光激發(fā)源的輸出激發(fā))或接近546nm(特別適用于通過水銀弧光燈激發(fā))吸收。許多熒光團(tuán)還可以作用為發(fā)色團(tuán)，并且因此所述熒光團(tuán)也是本發(fā)明優(yōu)選的發(fā)色團(tuán)。熒光蛋白還可以用作本發(fā)明的標(biāo)記。熒光蛋白的實(shí)例包括綠色熒光蛋白(GFP)和藻膽蛋白以及它們的衍生物。所述熒光蛋白，特別是藻膽蛋白，特別用于生成被標(biāo)記試劑標(biāo)記的串聯(lián)染料。這些串聯(lián)染料包括用于獲得更大的斯托克斯頻移的目的的熒光蛋白和熒光團(tuán)，其中發(fā)射光譜從所述熒光蛋白的吸收光譜的波長(zhǎng)更遠(yuǎn)地頻移。對(duì)于檢測(cè)樣品中的少量目標(biāo)物，這是特別有'利的，其中所發(fā)射的熒光被最大程度的最優(yōu)化，換言之，所發(fā)射的光中很少至沒有被所述熒光蛋白重吸收。為了使這起作用，所述熒光蛋白和熒光團(tuán)作用為能量轉(zhuǎn)移對(duì)，其中所述熒光蛋白在所述熒光團(tuán)吸收的波長(zhǎng)發(fā)射，然后所述熒光團(tuán)在遠(yuǎn)離所述熒光蛋白的波長(zhǎng)處發(fā)射，這只能使用所述熒光蛋白而獲得。特別有用的組合是在美國(guó)專利4,520,110;4,859,582;5,055,556中公開的藻膽蛋白，和在5,798,276中公開的磺化羅丹明熒光團(tuán)，或在美國(guó)系列號(hào)09/968/401和09/969/853中公開的磺化花青熒光團(tuán)；或在6,130,101中公開的磺化咕噸衍生物，以及在美國(guó)專利4,542,104中公開的那些組合。備選地，所述熒光團(tuán)作用為能量供體，并且所述熒光蛋白是能量受體。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述標(biāo)記是選自由下列各項(xiàng)組成的組的熒光團(tuán)熒光素，香豆素，羅丹明，5-TMRIA(四甲基羅丹明-5-碘乙酰胺)，(9-(2(或4)-(N-(2-馬來酰亞胺基乙基)-氨磺?；?-4(或2)-磺基苯基)-2,3,6,7，12,13，16,17-八氫-(lH,5H,llH,15H-咕噸并(2,3,4-ij:5，6,7-i'j')聯(lián)喹嗪-18-鐵鹽)(德克薩斯紅⑧(TexasRed)),2-(5-(l-(6-(N-(2-馬來酰亞胺基乙基)-氨基)-6-氧代己基)-l，3-二氫-3，3-二甲基-5-磺基-2H-吲哚-2-基亞基)-l,3-丙基二烯基)-l-乙基-3,3-二甲基-5-磺基-3H-吲哚錄鹽(Cy3),>1，^-二甲基-^(碘乙?；?^'-(7-硝基苯基-2-氧雜-1,3-重氮-4-基)乙二胺(IANBD酰胺)，6-丙烯酰-2_二甲基氨基萘(acrylodan),芘，6-氨基-2,3_二氫-2-(2-((碘乙?；?氨基)乙基)-1,3-二氧代-111-苯基一)異喹啉-5,8-二磺酸鹽(熒光黃(luciferydlow)),2-(5-(l-(6-(N-(2-馬來酰亞胺基乙基)-氨基)-6-氧代己基)-1,3-二氫-3,3-二甲基-5-磺基-211-吲哚-2-基亞基)-1，3-戊二烯基)-1-乙基-3，3-二甲基-5-磺基-3H-吲哚鐺鹽(Cy5)，4-(5-(4-二甲基氨基苯基)噁唑-2-基)苯基-N-(2-溴乙酰氨基乙基)磺酰胺(Dapoxyl(2-溴乙酰氨基乙基)磺酰胺))，(4，4-二氟-1，3，5,7-四甲基-4-硼-3^43-二氮雜-5-^(1&06116-2-基)碘乙酰胺(BODIPY507/545IA),7\44,4-二氟-5,7-聯(lián)苯基-4-硼-3^4&-二氮雜-^11(1&061^-3-丙炔基)-7V'-碘乙?；叶?BODIPY530/550IA),5-((((2-碘乙?；?氨基)乙基)氨基)萘-l-磺酸(l,5-IAEDANS)，和羧基-X-羅丹明，5/6-碘乙酰胺(XRIA5，6)。標(biāo)記的另一種實(shí)例是BODIPY-FL-酰肼。其它發(fā)光標(biāo)記包括鑭系元素如銪(Eu3+)和鋱(Tb3+)，以及釕[Ru(II)],錸[Re(I)],或鋨[Os(II)]的金屬--配體絡(luò)合物，典型地在與二亞胺配體如菲咯啉的絡(luò)合物中。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述報(bào)道分子是熒光性的，其中它們?cè)谂c所述分析物締合時(shí)變成熒光性的。這樣的報(bào)道分子包括與核酸(DNA和/或RNA)、蛋白(總蛋白和子集蛋白如翻譯后修飾的蛋白)、pH、和金屬離子相關(guān)的染料。用于檢測(cè)核酸的報(bào)道分子典型地包括不對(duì)稱的花青化合物，單體或二聚體，其包括但不限于，在美國(guó)專利號(hào)4,957,870;4,883,867;5,436,134;5,658,751,5,534,416;5，863，753;5,410,030;5,582,977;6,664,047;美國(guó)系列號(hào)10/911,423;11/005,860;11/005,861;60/680,243和WO93106482中公開的化合物；溴化乙錠二聚體(美國(guó)專利號(hào)5,314,805),吖啶二聚體和吖啶-溴化乙錠異二聚體(美國(guó)專利號(hào)6,428,667和Rye,等.NucleicAcidsResearch(核酸研究)(1990)19(2),327)。下述參考文獻(xiàn)描述了DNA嵌入熒光二聚體和它們的物理特征Gaugain等，Biochemistry(生物化學(xué))(1978)17:5071-5078;Gaugain等,Biochemistry(生物化學(xué))(1978)17:5078-5088;Markovits等，Anal.Biochemistry(生物化學(xué)年刊)(1979)94:259-269;Markovits等，Biochemistry(生物化學(xué))(1983)22:3231-3237;禾nMarkovits等，Nucl.AcidsRes.(核酸研究)(1985)13:3773-3788。商購的染料包括PicoGreen,RiboGreen禾卩OIiGreen(Invitrogen)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述報(bào)道分子將蛋白染色，直接染色或者通過形成包含金屬離子的三重絡(luò)合物。這樣的報(bào)道分子包括，但不限于，在美國(guó)專利5,616,502;美國(guó)系列號(hào)11/241,323;11/199,641;11/063,707;10/966,536;10/703,816;禾B6,967,251中公開的那些。商購的染料包括NanoOrange，禾口CoomassieFluor(Invitrogen)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述報(bào)道分子在與離子締合后變成熒光性的。這樣的報(bào)道分子包括，但不限于，在美國(guó)專利6，316，267;6,162,931;5,648,270;6,013,802;5,405,975;5,516,864;5,453,517;6,962,992;美國(guó)系列號(hào)10/634,336;和11/191,799中公開的那些。商購的染料包括氟-3,氟畫4，CoronaRed,CoronaGreen,LeadmuinGreen,Fura纟丐指示劑。本發(fā)明的具體方面本發(fā)明的一個(gè)方面提供使用報(bào)道分子測(cè)量一種或多種預(yù)先確定的分析物的量的裝置，其中所述裝置是一個(gè)整合的部件，其包括用于保持具有分析物和報(bào)道分子的樣品容器的容座，光檢測(cè)器、一個(gè)或多個(gè)固定的并且不同的分析物傳感元件(ASE)、和帶有機(jī)器可執(zhí)行指示的計(jì)算機(jī)處理部件，其中所述ASE包括a)用于激發(fā)所述樣品的能源，其中該能源被設(shè)置成發(fā)射預(yù)先確定最大波長(zhǎng)的光；b)激發(fā)濾波器，其中所述激發(fā)濾波器被設(shè)置成分離來自所述能源的預(yù)先確定的波長(zhǎng)范圍的光；c)發(fā)射濾波器，其中所述發(fā)射濾波器被設(shè)置成分離從被激發(fā)的樣品發(fā)射的預(yù)先確定的波長(zhǎng)范圍的光；并且其中每個(gè)ASE被設(shè)置成測(cè)量預(yù)先確定的分析物的量，并且所述機(jī)器可執(zhí)行指示被設(shè)置成選擇與待測(cè)量的分析物相對(duì)應(yīng)的適當(dāng)?shù)腁SE。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述能源是發(fā)光二極管(LED)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述預(yù)先確定的分析物選自由下列各項(xiàng)組成的組DNA，RNA，蛋白質(zhì)，真核或原核細(xì)胞，碳水化合物，脂質(zhì)，病毒,pH和金屬離子。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述機(jī)器可執(zhí)行指示進(jìn)一步被設(shè)置成基于來自被激發(fā)的樣品的發(fā)射光而確定具體分析物的濃度。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述裝置還包括使用者界面。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述使用者界面包括顯示器和非數(shù)字鍵區(qū)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述樣品容器容座被設(shè)置成適合透光0.5微量離心管。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述裝置還包括內(nèi)部電源。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述裝置還包括至少一個(gè)通信端口。更具體地，所述通信端口選自由下列各項(xiàng)組成的組通用串行總線(USB)端口、音頻/視頻串行總線(IEEE1394)、紅夕卜OR)端口和無線電頻率(RF)端口。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述裝置包括第一和第二ASE。更具體地，所述第一ASE包括發(fā)射具有約470nm最大波長(zhǎng)的光的LED，濾除具有大于約490nm的波長(zhǎng)的光的激發(fā)濾波器，和濾除具有小于約520nm和大于約580nm的波長(zhǎng)的光的發(fā)射濾波器。仍然更具體地，所述第二ASE包括發(fā)射具有約640nm的最大波長(zhǎng)的光的LED,濾除具有小于約570nm和大于約647nm的波長(zhǎng)的光的激發(fā)濾波器，和濾除具有小于約652Tim的波長(zhǎng)的光的發(fā)射濾波器。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述使用者界面被設(shè)置成允許使用者選擇用于測(cè)量的分析物。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述機(jī)器可執(zhí)行指示能夠在沒有使用者輸入時(shí)選擇所述用于測(cè)量的分析物。權(quán)利要求l的裝置，其中所述裝置的尺寸在短軸上約30-300mm，在長(zhǎng)軸上100-500mm，并且可變厚度約10到100mm;條件是長(zhǎng)軸的尺寸大于短軸。本發(fā)明的另一個(gè)方面提供計(jì)算在透光樣品容器中的分析物的量的方法，所述方法包括a)生成熒光標(biāo)準(zhǔn)曲線，包括測(cè)量空白樣品(g)的熒光強(qiáng)度，并且測(cè)量至少一個(gè)高端標(biāo)準(zhǔn)物(v)的熒光強(qiáng)度，其中所述曲線使得熒光強(qiáng)度與分析物數(shù)量相關(guān)，并且其中所述曲線具有預(yù)先確定的S形程度(n)和曲率(k);b)測(cè)量所述樣品(y)的熒光強(qiáng)度，其中所述樣品包括能夠指示所述分析物在樣品中的存在的熒光部分；和c)使用所述熒光標(biāo)準(zhǔn)曲線使得所述樣品(y)中的所述熒光強(qiáng)度與所述分析物的量相關(guān)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述曲線由下述方程表征(I)y=r(xn/(xn+k))+g;其中r是通過下式確定的校正值(II)產(chǎn)(v-g)((sn+k)/sn)其中(s)是在所述高端標(biāo)準(zhǔn)物中的分析物的量。另一個(gè)實(shí)施方案提供用于檢測(cè)預(yù)先確定的分析物在樣品中的存在的方法，其中所述樣品是在透光樣品容器中，所述方法包括a)使樣品與報(bào)道分子接觸，以形成接觸的樣品；b)檢測(cè)所述預(yù)先確定的分析物的存在，其中檢測(cè)包括將所述透光容器放置在整合裝置的保持所述樣品容器的容座上，以測(cè)量預(yù)先確定的分析物，其中所述裝置還包括i)光檢測(cè)器，一個(gè)或多個(gè)固定的并且不同的分析物傳感元件(ASE)、和帶有機(jī)器可執(zhí)行指示的計(jì)算機(jī)處理部件，其中所述ASE包括用于激發(fā)所述樣品的能源，其中該能源被設(shè)置成發(fā)射預(yù)先確定最大波長(zhǎng)的光；激發(fā)濾波器，其中所述激發(fā)濾波器被設(shè)置成分離來自所述能源的預(yù)先確定的波長(zhǎng)范圍的光；發(fā)射濾波器，其中所述發(fā)射濾波器被設(shè)置成分離從被激發(fā)的樣品發(fā)射的預(yù)先確定的波長(zhǎng)范圍的光；并且其中每個(gè)ASE被設(shè)置成測(cè)量預(yù)先確定的分析物的量，并且其中機(jī)器可執(zhí)行指示被設(shè)置成選擇與待測(cè)量的分析物相對(duì)應(yīng)的適當(dāng)?shù)腁SE。本發(fā)明的另一個(gè)方面提供計(jì)算在樣品容器中的兩種分析物的比例的方法，所述方法包括a)生成關(guān)于所述兩種分析物的熒光標(biāo)準(zhǔn)曲線，其包括測(cè)量第一空白分析樣品(gl)和第二分析樣品(g2)的熒光強(qiáng)度，并且測(cè)量關(guān)于所述第一分析物的至少一個(gè)高端標(biāo)準(zhǔn)物(vl)和關(guān)于所述第二分析物的至少一個(gè)高端標(biāo)準(zhǔn)物(v2)的熒光強(qiáng)度，其中所述曲線使得熒光強(qiáng)度與每種分析物的量或相對(duì)量相關(guān)，并且其中所述曲線具有預(yù)先確定的S形程度(n)和曲率(k);b)測(cè)量所述樣品(yl和y2)的熒光強(qiáng)度，其中所述樣品包括能夠指示所述分析物在所述樣品中的存在的熒光部分；和c)使用所述熒光標(biāo)準(zhǔn)曲線使得所述樣品(yl和y2)中的所述熒光強(qiáng)度與所述分析物的量相關(guān)。本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案提供檢測(cè)在樣品中的酶或分解底物的方法，所述方法包括提供如本文所述的裝置，其包括包含與可裂解接頭結(jié)合的標(biāo)記的容座，其中所述可裂解接頭通過所述酶或可裂解底物而裂解；將懷疑含有所述酶或可裂解底物的樣品加入到所述容座；監(jiān)測(cè)所述容座的目標(biāo)部分，除了當(dāng)與所述可裂解接頭結(jié)合時(shí)被所述標(biāo)記占據(jù)的位點(diǎn)；和檢測(cè)所述標(biāo)記在所述容座的目標(biāo)部分的存在。在其一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，所述酶或可裂解底物裂解所述可裂解接頭，由此釋放所述標(biāo)記，其擴(kuò)散到被監(jiān)測(cè)所述標(biāo)記存在的容座部分上。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述標(biāo)記是熒光染料。本發(fā)明的優(yōu)選方面包括本發(fā)明的任何一個(gè)方面，更具體地由本發(fā)明所述的實(shí)施方案所定義。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述裝置被放置在具有短軸約30-300mm、長(zhǎng)軸100-500mm、可變厚度約10至l」100mm尺寸的橢圓或卵形部件中；條件是長(zhǎng)軸的長(zhǎng)度大于短軸。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述部件具有接近使用者的減小的厚度，以致屏幕傾斜向使用者。更具體的，所述部件被放置在具有約2-3mm厚度的材料中，更具體地所述框架材料是塑料。在一個(gè)具體的實(shí)施方案中，所述裝置具有美國(guó)外觀申請(qǐng)?zhí)?9/251,820中所述的外觀/結(jié)構(gòu)特征，其內(nèi)容通過引用如同在本文中充分描述那樣并入。爿西珍箭檢M體在CD4診斷測(cè)定中的最近的進(jìn)步允許2種簡(jiǎn)單的試劑用于鑒定和計(jì)數(shù)全血中的兩種細(xì)胞群體，其與簡(jiǎn)單的2通道熒光計(jì)相容。使用簡(jiǎn)單的分離機(jī)制，諸如手搖曲柄離心機(jī)，簡(jiǎn)單的細(xì)胞濾器或磁珠，將待計(jì)數(shù)的細(xì)胞與所述試劑分離。這3種組件包括用于偏遠(yuǎn)地區(qū)的AIDS診斷平臺(tái)(ADPURA)。用于這種應(yīng)用的主要生物化學(xué)試劑是抗-CD4抗體和抗-CD45抗體。這兩種抗體是PLG方法(Glencross等(2002)CD45assistedpanleucogatingforaccurate,costeffectivedualplatformCD4+Tcellenumeration,CytometryClinicalCytometry,SpecialIssue:CD4:20yearsandcounting(CD45輔助的panleucogating精確，成效雙重平臺(tái)CD4+T細(xì)胞計(jì)數(shù)血細(xì)胞計(jì)數(shù)臨床血細(xì)胞技術(shù)，特刊CD4:20年和計(jì)數(shù))50(2)69-77)的基礎(chǔ)，該方法使用表達(dá)CD45的細(xì)胞(全是白血細(xì)胞)進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化測(cè)量CD4+細(xì)胞。一起使用這兩種抗體(抗-CD4抗體和抗-CD45抗體)使得CD4計(jì)數(shù)變得如同計(jì)算表達(dá)CD4的細(xì)胞和表達(dá)CD45的細(xì)胞之間的比例那樣簡(jiǎn)單。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，一起使用下述組件a)具有2個(gè)檢測(cè)通道的熒光計(jì)，每個(gè)檢測(cè)通道包括LED、發(fā)射濾波器和光電二極管檢測(cè)器。所述熒光計(jì)具有使用者界面和在印刷的電路板上的CPU(中央處理器)上的數(shù)據(jù)分析。主體(body)是穩(wěn)定的，并且可以經(jīng)受存在風(fēng)、沙和水的環(huán)境，不同的LEDs和發(fā)射濾波器，流線型的使用者界面和更少的按鈕。另外，所述熒光計(jì)可以脫離電池、手搖曲柄或其它電源進(jìn)行工作，不需要插頭插入到電柵基礎(chǔ)結(jié)構(gòu)中。所述熒光計(jì)設(shè)計(jì)成只用于一個(gè)目的，在這種情形中，簡(jiǎn)化使用者界面，表達(dá)讀數(shù)的結(jié)果，并且將只需要一個(gè)按鈕來激活該儀器進(jìn)行讀數(shù)。備選地，可以進(jìn)行多個(gè)診斷應(yīng)用，使用具有USB連接的"閃盤(thumbdrive)",新的應(yīng)用能夠上載到該儀器上。b)試劑試劑盒，其包括CD4抗體，其用熒光染料如AlexaFluor488染料標(biāo)記，和CD45抗體，其用光譜與CD4標(biāo)記顯著不同的熒光染料如AlexaFluor647染料標(biāo)記。所述抗體將理想地在熱或冷條件下穩(wěn)定運(yùn)輸，可能是凍干的，或者可能是疊氮化物。存在一些可以應(yīng)用的備選的抗體-穩(wěn)定技術(shù)。所述抗體將以適當(dāng)?shù)臐舛?，并且在適當(dāng)?shù)娜萜髦?，以允許具有很少科技訓(xùn)練的人將其簡(jiǎn)單加入到樣品中。c)三個(gè)可能的細(xì)胞-分離平臺(tái)中的一種a.CD45抗體-標(biāo)記的Dynal珠和分離珠(DetachaBead)技術(shù)，以從全細(xì)胞群體分離白血細(xì)胞，然后使用簡(jiǎn)單的磁體從殘留的珠子分離。b.用于500pL管的手搖曲柄離心機(jī)，其可以用來沉淀細(xì)胞，與簡(jiǎn)單的塑料移液管組合，以去除上清，并且加入洗滌溶液。該離心機(jī)在原理上與目前市場(chǎng)上的手搖曲柄離心機(jī)類似，但是被修改成使用50(HiL的塑料管，為了操作者安全操作進(jìn)行包封，，以及樣品完整性，大小與目前的桌面"分子離心機(jī)(picofliges)"類似，并且與野外條件相容。c.濾器，以將細(xì)胞與標(biāo)記的CD4和CD45抗體分開。d)關(guān)于這一平臺(tái)的任選的附件包括廉價(jià)的塑料移液管和水凈化系統(tǒng)，諸如在出售露營(yíng)供應(yīng)品的商店中找到的那些。e)本發(fā)明還包括包含上述組件的試劑盒，使用細(xì)胞-標(biāo)記方法，細(xì)胞-分離方法和所述熒光計(jì)連續(xù)地一起工作。本申請(qǐng)的工作流程如下a.第一，血液樣品采自患者，并且使用公認(rèn)的方法制備用于抗體染色。b.第二，將所述樣品與在試劑試劑盒中的抗體混合。熒光團(tuán)-標(biāo)記的CD4抗體將結(jié)合CD4+細(xì)胞，并且熒光團(tuán)-標(biāo)記的CD45抗體將結(jié)合CD45+細(xì)胞。如果抗體-標(biāo)記的珠子用于所述分離方法，這些將在這一步驟中也結(jié)合細(xì)胞。c.第三，分離方法將用來從所述標(biāo)記的細(xì)胞中去除游離的標(biāo)記抗體。i如果本方法使用磁珠，那么將使用磁體來從樣品中去除CD4+和CD45+細(xì)胞。上清將被棄掉，并且將珠子重懸在緩沖液中。然后將珠子去除，例如，通過使用分離珠子技術(shù)進(jìn)行，使用所述磁體吸出珠子，將被標(biāo)記的細(xì)胞留在上清中。ii如果所述方法使用離心機(jī)，那么將樣品在離心機(jī)中旋轉(zhuǎn)離心，以沉淀被標(biāo)記的細(xì)胞。含有游離的標(biāo)記抗體的上清將被棄掉，并且將所述細(xì)胞重懸在緩沖液中。iii如果所述方法使用濾器，那么將所述樣品用于所述濾器，其將截留被標(biāo)記的細(xì)胞。流過液將被棄掉，并且將被標(biāo)記的細(xì)胞重懸在緩沖液中。d.第四，使用所述熒光計(jì)讀取所述樣品。將步驟c的被標(biāo)記的細(xì)胞轉(zhuǎn)移到500^L干凈透明的PCR管中，并且在所述熒光計(jì)上讀數(shù)。所述熒光計(jì)將自動(dòng)在兩個(gè)通道中進(jìn)行讀數(shù)，進(jìn)行計(jì)算，并且使用關(guān)于本檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)術(shù)語，在LCD或類似的屏幕上顯示該值作為CD4+的計(jì)數(shù)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述校正劑可以是已知濃度的分析物。例如，當(dāng)用適當(dāng)?shù)姆治鑫餀z測(cè)染料溫育時(shí)，含有零分析物的空白代表所述測(cè)定的低端，和包含高濃度分析物的管代表所述測(cè)定的高端。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述校正劑可以是液體或固體標(biāo)準(zhǔn)物，其產(chǎn)生與相對(duì)應(yīng)的分析物/染料混合物相等的熒光信號(hào)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述標(biāo)記可以是熒光或光散射納米晶體[Yguerabide,J.和Yguerabide,EE，2001J.CellBiochemSuppl.(細(xì)胞生物化學(xué)雜志增刊)37:71—81;美國(guó)專利號(hào)6,214,560;6,586,193和6,714,299]。這些熒光納米晶體可以是半導(dǎo)體納米晶體或摻雜的金屬氧化物納米晶體。納米晶體典型地包括這樣的核心，所述核心包括至少一種組n-vi半導(dǎo)體材料(其中，ZnS,和CdSe是示例性的實(shí)例)、或組III-V半導(dǎo)體材料(其中，GaAs是示例性的實(shí)例)、或組IV半導(dǎo)體材料、或它們的組合。所述核心可以用均勻沉淀在其上的半導(dǎo)體覆蓋層("外殼")鈍化。例如，組II-VI半導(dǎo)體核心可以用組II-VI半導(dǎo)體外殼鈍化(例如，ZnS或CdSe核心可以用包括YZ的外殼鈍化，其中Y是Cd或Zn，并且Z是S，或Se)。納米晶體可以在水基環(huán)境中可溶。半導(dǎo)體納米晶體的一個(gè)吸引人的特征是發(fā)射的光譜范圍可以通過改變所述半導(dǎo)體核心的大小而改變。使用原位裂解的實(shí)施方案在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述儀器可以測(cè)量報(bào)道子通過擴(kuò)散或者活性混合而從該儀器光徑之外的區(qū)域到所述光徑之內(nèi)的區(qū)域的裂解。圖4:描述了在該儀器內(nèi)的管(306)。結(jié)合到可裂解底物(301)上的報(bào)道元件(302)結(jié)合在管的底部。當(dāng)所述底物被裂解時(shí)，那么所述報(bào)道元件變成游離的(303)在管內(nèi)移動(dòng)到儀器(304)的光徑(300)之內(nèi)，在這里對(duì)它進(jìn)行檢測(cè)(305)。所述報(bào)道元件可以是熒光或比色的。所述可裂解底物可以是核酸、肽、或其它有機(jī)化學(xué)品。所述可裂解的底物可以通過酶或化學(xué)反應(yīng)而裂解。所述可裂解底物可以附著到管上或某些其它物理固定劑如磁性或非磁性珠子上所述報(bào)道元件可以從結(jié)合的粘合劑上而不是可裂解的底物上被置換下來，這也是可能的。這樣的實(shí)例是熒光標(biāo)記的脫硫生物素，其可以通過更高親和力結(jié)合的生物素而從鏈霉抗生物素蛋白上置換下來。使用多個(gè)參數(shù)裝置的實(shí)施方案a.在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述機(jī)器可執(zhí)行指示可以由終端使用者在計(jì)算機(jī)上"脫機(jī)"發(fā)展。以便測(cè)定的名稱、適當(dāng)?shù)腁SEs、相關(guān)校正的值和數(shù)目、曲線擬合算法、和顯示輸出的格式由終端使用者確定和設(shè)定，然后通過連接電纜"上載"到該儀器上。b.當(dāng)"上載"到該儀器上時(shí)，新程序?qū)⒆兂稍搩x器上永久可選擇的選擇。用于細(xì)胞測(cè)定的染料用于全細(xì)胞計(jì)數(shù)的染料SYTO9,11-18,20-25,和59-64,BC,TOTO-3,TO-PRO-3,DRAQ-5,Dil，DiO,WGA-546,FM1-43,,丐熒光素AM。用于死細(xì)胞計(jì)數(shù)的染料SYTOXGreen,SYTOXRed,SYBRGold,SYBRGreen，PicoGreen。液體標(biāo)準(zhǔn)物的制備a.將是液體標(biāo)準(zhǔn)物的高濃度校正點(diǎn)的樣品混合，意欲用于模擬。例如在Quant-iTDNA高靈敏度測(cè)定中，所述高標(biāo)準(zhǔn)物是在終體積200)liLTE中的100ngXDNA加上PicoGreen染料(終濃度0.7uM)。b.在儀器上(諸如本文所述的熒光計(jì))讀取相關(guān)的熒光值。例如在所述Quant-汀DNA高靈敏性測(cè)定中使用460nm激發(fā)能源讀數(shù)。c.將濃縮的穩(wěn)定熒光化合物逐步加入到稀釋溶液中。例如在Quant-iTDNA高靈敏性測(cè)定中，將濃縮的熒光素(10mM，在0.1M硼酸鈉，pH9的緩沖液中)加入到0.1M硼酸鈉，pH9的緩沖溶液中直到在所述裝置中的熒光信號(hào)等于在步驟b中獲得的信號(hào)(接近濃度lOOnM熒光素)。d.對(duì)于所有實(shí)驗(yàn)，繼續(xù)用熒光素溶液取代高標(biāo)準(zhǔn)物。例如在Quant-iTDNA高靈敏性測(cè)定中用100nM熒光素校正劑取代含有l(wèi)OOngDNA加PicoGreen的校正齊U。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，本文所述的裝置用于水和土壤檢測(cè)。在本發(fā)明的一個(gè)更具體的實(shí)施方案中，所述裝置監(jiān)測(cè)選自由下列各項(xiàng)組成的組的分析物或參數(shù)排泄物大腸菌，pH,重金屬，硝酸鹽，砷，朊病毒，揮發(fā)性的有機(jī)化合物(VOC)，氯，媽，鈉，和葡萄糖。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本文所述的裝置用于傳染病檢測(cè)和監(jiān)測(cè)。在本發(fā)明的一個(gè)更具體的實(shí)施方案中，所述裝置監(jiān)測(cè)選自由下列各項(xiàng)組成的組的分析物或參數(shù)AIDS(CD4lM定)，瘧疾，TB,SARS,BSE,炭疽熱，流感,感冒，瘟疫，和朊病毒。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本文所述的裝置用于生物標(biāo)記的檢測(cè)或鑒定。在本發(fā)明的在一個(gè)更具體的實(shí)施方案中，所述生物標(biāo)記指示下列各項(xiàng)癌癥，支原體(Mycoplasma)，妊娠，端粒酶，抗體，和遺傳病。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本文所述的裝置用于酶底物的檢測(cè)或鑒定。在本發(fā)明的一個(gè)更具體的實(shí)施方案中，所述酶底物選自由下列各項(xiàng)組成的組核酸酶，磷酸酶，glycoases，激酶，蛋白酶，和過氧化物酶。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本文所述的裝置用于細(xì)胞生物學(xué)試劑驗(yàn)證和質(zhì)量控制(QC)。在本發(fā)明的在一個(gè)更具體的實(shí)施方案中，所述裝置監(jiān)測(cè)選自由下列各項(xiàng)組成的組的分析物或參數(shù)鈉，鈣，葡萄糖，鎂，鉀，鋅，鉈,pH，氧，氧化氮，二氧化碳，氯化物和酶底物(核酸酶，磷酸酶，glycoeases,激酶，蛋白酶，和過氧化物酶)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本文所述的裝置用于細(xì)菌確定。在本發(fā)明的在一個(gè)更具體的實(shí)施方案中，所述裝置監(jiān)測(cè)與赤潮或大腸桿菌(E.Coli)相關(guān)的分析物。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本文所述的裝置用于化妝品領(lǐng)域。在其一個(gè)更具體的實(shí)施方案中，所述裝置監(jiān)測(cè)活性氧種類(ROS),細(xì)菌污染，活的/死的細(xì)胞，三聚氰胺確定，膽固醇。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述裝置監(jiān)測(cè)GFP，葉綠素，或生物戰(zhàn)爭(zhēng)試劑。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本文所述的裝置用于機(jī)動(dòng)車目的。更具體地，泄漏檢測(cè)、油檢測(cè)、空氣調(diào)節(jié)、冷凍劑檢測(cè)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本文所述的裝置用于法醫(yī)學(xué)；更具體地，用于樣品確定，諸如血液、尿或精子的檢測(cè)/定量。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本文所述的裝置用于農(nóng)業(yè)檢測(cè)/定量。更具體地，用于酶底物的檢測(cè)/定量，諸如植酸酶、纖維素酶和本文所述的其它酶底物的檢測(cè)/定量。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本文所述的裝置用于終點(diǎn)PCR。更具體地，所述裝置監(jiān)測(cè)/檢測(cè)染料，其特別包括SYBRGreen，PicoGreen，SYBRGold。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述裝置檢測(cè)/監(jiān)測(cè)分子信標(biāo)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述裝置檢測(cè)/監(jiān)測(cè)等溫?cái)U(kuò)增。本發(fā)明涉及用于定量多種分析物的裝置和方法。術(shù)語"定量"或"測(cè)量數(shù)量"在用于本文時(shí)是可互換的。定量測(cè)量可以是被設(shè)計(jì)成為終端使用者提供關(guān)于分析物在樣品中的量的信息的任何測(cè)量。因此，所述測(cè)量可以是所述分析物的絕對(duì)測(cè)量，諸如質(zhì)量，或所述測(cè)量可以是相對(duì)測(cè)量，諸如濃度或百萬分率(partspermillion),等。當(dāng)然，分析物的量可以等于零，表明不存在所尋找的分析物，或者所述分析物在由所述儀器測(cè)量的測(cè)定的可檢測(cè)的水平之下。所述量可以簡(jiǎn)單地作為由光檢測(cè)器檢測(cè)到的測(cè)量的能量，無需任何額外的測(cè)量或操作。備選地，所述量可以表示為所述分析物的測(cè)量值與另一種化合物包括但不限于標(biāo)準(zhǔn)物的測(cè)量值的差異、百分?jǐn)?shù)或比例。所述量甚至可以表示為分析物與在不同時(shí)間點(diǎn)測(cè)量的自身的差別或比例。分析物的量可以直接從所檢測(cè)的能量值確定，或者所檢測(cè)的能量值可以用于算法中，所述算法設(shè)計(jì)成將所檢測(cè)的能量值與分析物在樣品中的數(shù)量相關(guān)。為了這一目的，所述機(jī)器可執(zhí)行指示還可以被設(shè)置成基于所檢測(cè)的能量值而確定所述分析物的量。在一個(gè)具體的實(shí)施方案中，所述機(jī)器可執(zhí)行指示實(shí)施計(jì)算分析物在樣品中的數(shù)量的方法，其通過產(chǎn)生熒光標(biāo)準(zhǔn)曲線，并且使用這一熒光標(biāo)準(zhǔn)曲線將樣品的熒光強(qiáng)度與分析物的數(shù)量相關(guān)。在一個(gè)更具體的實(shí)施方案中，所述熒光標(biāo)準(zhǔn)曲線可以通過測(cè)量"空白"樣品，即已知不含所述分析物的樣品(g)的熒光強(qiáng)度，并且測(cè)量含有已知量的分析物的唯一一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)物(v)的熒光強(qiáng)度而產(chǎn)生。當(dāng)然，所述熒光標(biāo)準(zhǔn)曲線可以使用多于一種含有已知量的分析物的標(biāo)準(zhǔn)物而產(chǎn)生。當(dāng)已經(jīng)測(cè)量了所述空白和標(biāo)準(zhǔn)物的熒光值時(shí)，那么所述機(jī)器可執(zhí)行指示可以產(chǎn)生熒光標(biāo)準(zhǔn)曲線。在測(cè)量所述空白和標(biāo)準(zhǔn)物之前，所述熒光標(biāo)準(zhǔn)曲線可以具有預(yù)先確定的S形程度(n)和曲率(k)，并且所述機(jī)器可執(zhí)行指示可以擁有這些(k)和(n)值作為產(chǎn)生所述熒光標(biāo)準(zhǔn)曲線的算法的一部分。在所述機(jī)器可執(zhí)行指示產(chǎn)生所述熒光標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)，可以測(cè)量樣品(y)的熒光強(qiáng)度，并且可以使用所述熒光標(biāo)準(zhǔn)曲線使所述(y)值與分析物的數(shù)量相關(guān)。在一個(gè)具體的實(shí)施方案中，所述熒光標(biāo)準(zhǔn)曲線可以通過下述方程表征(I)y=r(X7(Xn+k))+g;其中r是通過下式確定的校正值<formula>formulaseeoriginaldocumentpage43</formula>其中(S)是在所述高端標(biāo)準(zhǔn)物中的分析物的量。在一個(gè)甚至更具體的實(shí)施方案中，方程I和II中的(n)值接近或大約等于1(1)。n的值包括但不限于，0SnS10，0￡nS5，0.5$nS3，0.75SnSl.5,0.8Sn^I.2,0.9Sn5l.l和0.95Sn2.05。另夕卜，所述曲線可以接近線性。由于k接近無窮大，故所述曲線接近線性。易于理解當(dāng)油線"接近線性"時(shí)是什么意思。在另一個(gè)具體的實(shí)施方案中，使用3個(gè)標(biāo)準(zhǔn)物，其中一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)物是空白，另一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)物是中間范圍的標(biāo)準(zhǔn)物，并且第三個(gè)標(biāo)準(zhǔn)物是高端標(biāo)準(zhǔn)物。在這個(gè)具體的實(shí)施方案中，(n)是預(yù)先確定的，但是(k)可以是變量，并且因此應(yīng)該被確定。在這一實(shí)施方案中，k使用下述方程IV求解。(<formula>formulaseeoriginaldocumentpage43</formula>值d是校正值，其等于所述兩種非空白背景-校正的非空白標(biāo)準(zhǔn)物的熒光值的比例，其使用下述方程V求解。(<formula>formulaseeoriginaldocumentpage43</formula>在方程V中，(w)是用于這一測(cè)定的中間范圍標(biāo)準(zhǔn)物的熒光強(qiáng)度，值(v)是高端標(biāo)準(zhǔn)物的熒光強(qiáng)度，并且(g)是空白的熒光強(qiáng)度。在方程IV中，(t)是在中間范圍標(biāo)準(zhǔn)物中的分析物的量。另一個(gè)實(shí)施方案提供計(jì)算在樣品容器中的兩種分析物的比例的方法，所述方法包括a)生成關(guān)于所述兩種分析物的熒光標(biāo)準(zhǔn)曲線，其包括測(cè)量第一空白分析物樣品(gl)和第二分析物樣品(g2)的熒光強(qiáng)度，并且測(cè)量關(guān)于所述第一分析物的至少一個(gè)高端標(biāo)準(zhǔn)物(vl)和關(guān)于所述第二分析物的至少一個(gè)高端標(biāo)準(zhǔn)物(v2)的熒光強(qiáng)度，其中所述曲線使得熒光強(qiáng)度與每種分析物的量或相對(duì)量相關(guān)，并且其中所述曲線具有預(yù)先確定的S形程度(n)和曲率(k);b)測(cè)量所述樣品(yl和y2)的熒光強(qiáng)度，其中所述樣品包括能夠指示所述分析物在所述樣品中的存在的熒光部分；和c)使用所述熒光標(biāo)準(zhǔn)曲線將所述樣品(yl和y2)中的所述熒光強(qiáng)度與所述分析物的量相關(guān)。因此，本發(fā)明涉及用于定量分析物的裝置，所述裝置包括使用上述熒光標(biāo)準(zhǔn)曲線方程I實(shí)施定量分析物方法的機(jī)器可執(zhí)行指示。這一裝置當(dāng)然可以進(jìn)一步包括本文列出的每種組件，諸如但不限于，保持樣品容器的容座，光檢測(cè)器，和一個(gè)或多個(gè)ASEs。計(jì)算機(jī)處理部件還可以包括充分的存儲(chǔ)器和用于使樣品鑒定標(biāo)記與具體的樣品締合的指示或操作。在這一實(shí)施方案中，所述裝置可以包括識(shí)別與樣品容器締合的鑒定標(biāo)記的工具。在一個(gè)具體的實(shí)施方案中，所述樣品識(shí)別標(biāo)記是機(jī)器可讀的。識(shí)別標(biāo)記的實(shí)例包括，但不限于，條形碼、數(shù)據(jù)矩陣條形碼、無線電頻率識(shí)別標(biāo)記、光學(xué)標(biāo)記等。識(shí)別所述鑒定標(biāo)記的工具當(dāng)然應(yīng)該適合所用的鑒定標(biāo)記的類型。然后，所述機(jī)器可執(zhí)行指示又可以能夠基于所述樣品識(shí)別標(biāo)記，使所確定的所述分析物的數(shù)量值與具體的樣品相匹配。本發(fā)明的裝置還可以包括使用者界面。可以提供多種使用者界面，以輔助使用者控制和提高所述裝置的可操作性。輸入界面包括，但不限于，數(shù)據(jù)輸入裝置，如鍵盤、鍵區(qū)、觸摸屏顯示器、鼠標(biāo)、聲音識(shí)別輸入、或其它數(shù)據(jù)輸入裝置。在一個(gè)具體的實(shí)施方案中，所述使用者界面包括非數(shù)字鍵區(qū)。輸出界面包括，但不限于，顯示屏、監(jiān)視器、打印機(jī)、揚(yáng)聲器或其它輸出裝置。在另一個(gè)具體的實(shí)施方案中，所述使用者界面包括顯示屏。在另一個(gè)具體的實(shí)施方案中，所述使用者界面包括非數(shù)字鍵區(qū)和顯示屏。在一個(gè)更具體的實(shí)施方案中，所述使用者界面被設(shè)置成允許終端使用者選擇要被定量的分析物。當(dāng)終端使用者選擇了分析物時(shí)，那么所述機(jī)器可執(zhí)行指示可以確定要用的ASE，如果需要的話，來定量所述分析物。本發(fā)明的裝置可以任選地包括內(nèi)部電源，用來為所述裝置的多個(gè)組件供電。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述電源是可充電的。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述內(nèi)部電源不是可充電的。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的裝置可以包括一個(gè)或多個(gè)通信端口。所述通信端口能夠與另一個(gè)裝置連接，所述另一個(gè)裝置例如，但不限于，計(jì)算機(jī)、盤驅(qū)動(dòng)、閃存驅(qū)動(dòng)、監(jiān)視器、打印機(jī)、另一種用于定量分析物的類似裝置。例如，所述裝置的功能可以更新或改變，并且所述裝置可以使用通過所述通信端口來自計(jì)算機(jī)、CD或DVD的新機(jī)器可執(zhí)行指示進(jìn)行校正或重新校正。所述裝置不受通信端口的類型的限制。通信端口的實(shí)例包括但不限于，通用串行總線(USB)、音頻/視頻串行總線(IEEE1394)("火線")、和紅外端口以及無線電頻率端口。無線電端口包括Bluetooth端口,Wi-Fi端口等。在前述實(shí)施方案中的任何一個(gè)的具體實(shí)施方案中，所述分析物是真核或原核細(xì)胞。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本文所述的裝置或方法用于定量在液體樣品中的低水平的DNA。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本文所述的裝置或方法用于定量在液體樣品中的寬范圍的DNA。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述裝置或方法用于定量在液體樣品中的RNA。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述裝置或方法用于定量在液體樣品中的蛋白質(zhì)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述裝置或方法用于定量在液體樣品中的活死細(xì)胞。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述裝置或方法用于定量在液體樣品中的GFP表達(dá)水平。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述裝置或方法用于檢測(cè)并定量細(xì)胞培養(yǎng)物和細(xì)胞培養(yǎng)試劑的支原體污染。這些實(shí)施方案的進(jìn)一步描述在下述的實(shí)施例中描述。實(shí)施例,纖O-分芥扁濃度使用方程I:y=r(xn/(xn+k))+g;其中(r)是通過下式確定的校正值(II)r=(v-g)((sn+k)/sn)確定樣品中的RNA濃度。值(y)是具有未知濃度的分析物的樣品的熒光強(qiáng)度。高端標(biāo)準(zhǔn)物，其是(s)值，具有500ng/ml的濃度。S形程度(n)設(shè)定為1.10的值，并且曲率(k)設(shè)定為2350?？瞻?g)的熒光強(qiáng)度是22.16個(gè)相對(duì)熒光單位(RFU)，并且所述高端標(biāo)準(zhǔn)物(v)的熒光強(qiáng)度是543.97RFU。這些值用于方程II以求解r，其為1839.20。關(guān)于x的求解方程I，在本實(shí)施例中其是樣品中RNA的濃度，導(dǎo)致方程III(III)x=I(k(y-g))/(r-(y-g)|1/n使用本發(fā)明的熒光計(jì)，含有400ng/mlRNA的樣品的熒光強(qiáng)度測(cè)量為459.40RPU。將該值輸入到方程III中，熒光計(jì)獲得樣品中的RNA濃度值402.34ng/ml。實(shí)嚴(yán)辨2-分被爍水柳扁濃度使用上述方程I、II和III，還可以估算低水平的DNA的濃度。在本實(shí)施例中，(n)設(shè)定為1.00，和(k)設(shè)定為9999999?？瞻拙哂?.61RFU的熒光值(g)，并且所述高端標(biāo)準(zhǔn)物具有3020.30RFU的熒光值(v)。所述高端標(biāo)準(zhǔn)物(s)具有500ng/ml的濃度。在方程II中使用這些值，校正值(r)確定為60256806.66。所述樣品含有400ng/ml的DNA，并且具有2401.60的熒光值(y)。使用方程III，DNA的濃度確定為397.31ng/ml。分析寬范微度游房^使用上述方程i、n禾nin，還可以估算DNA的濃度。在本實(shí)施例中，(n)設(shè)定為1.00，和(k)設(shè)定為22.5?？瞻拙哂?5.36RFU的熒光值(g)，并且所述高端標(biāo)準(zhǔn)物具有2213.20RFU的熒光值(v)。所述高端標(biāo)準(zhǔn)物(s)具有5嗎/ml的濃度。在方程II中使用這些值，校正值(r)確定為12033.12。所述樣品含有4.0嗎/ml的DNA，并且具有1841.10的熒光值(y)。使用方程ni，DNA的濃度確定為4.0嗎/ml。實(shí)細(xì)4-分析鵬微度使用上述方程I、II禾fUII，還可以估算蛋白質(zhì)的濃度。當(dāng)估算蛋白質(zhì)濃度時(shí)，可以理想地使用3個(gè)標(biāo)準(zhǔn)物而不是如上述的2個(gè)標(biāo)準(zhǔn)物。如果使用3個(gè)標(biāo)準(zhǔn)物，那么k可以是變量，并且如果k是變量，那么算法將首先使用這3個(gè)標(biāo)準(zhǔn)物來求解k。當(dāng)k被求解時(shí)，所述算法在上述方程I、II和III中使用該值。當(dāng)k是變量時(shí)，為了使用3個(gè)標(biāo)準(zhǔn)物求解K，使用下述方程(IV)k=[sntn(d-l)]/[sn-(tn*d)]其中d是校正值，其等于所述兩種非空白背景-校正的標(biāo)準(zhǔn)物的熒光值的比例，其使用下述方程V求解。(V)d=(v-g)/(w-g)在方程V中，W是用于這一測(cè)定的中間范圍標(biāo)準(zhǔn)物的熒光值。當(dāng)校正值d被確定后，將該值輸入到方程IV中以求解(k)。值(s)是高端標(biāo)準(zhǔn)物的濃度，如在方程II中，并且(t)是中間范圍標(biāo)準(zhǔn)物的濃度，并且(n)是預(yù)先確定的。當(dāng)(k)被求解時(shí)，使用方程IV和V，檢測(cè)未知物的熒光值(y)，并且使用上述方程m，確定所述未知物的濃度(x)。在本實(shí)施例中，(n)設(shè)定為2.15。'空白具有42RFU的熒光值(g)，并且所述高端標(biāo)準(zhǔn)物具有3230RPU的熒光值(v)。所述高端標(biāo)準(zhǔn)物(s)具有5.000ng/200pl的濃度。所述中間范圍標(biāo)準(zhǔn)物具有1286的熒光值(w)，和2.000|ig/200pl的濃度(t)。在方程IV和V中使用這些值，(k)等于10.79。在方程II中使用k:10.79和n-2.15，校正值(r)(基于高端標(biāo)準(zhǔn)物)等于4371.28。最后，含有3.000g/200pl蛋白質(zhì)的樣品的熒光值(y)測(cè)量為2334。所述熒光計(jì)，使用此處所述的算法，確定所述樣品的濃度是3.2pg/20(Hil。在下述實(shí)施例中，"Quant-it"測(cè)定固件選擇是與分析物傳感元件連接，所述分析物傳感元件帶有如上述用于各種類型的分析物的預(yù)先確定的算法、標(biāo)準(zhǔn)物、光源、濾波器等。這些調(diào)整的分析物傳感元件使得技術(shù)人員非常容易地操作所述裝置。實(shí)嚴(yán)翔5—在,伴摔^^爍/大乎游DA^游定量將PicoGreen染料稀釋在特定的緩沖液中，以制備0.7pM的工作染料溶液。將180-199pL的所述工作染料溶液加入到本文所述的500pL透明的塑料PCR管中。將兩個(gè)這樣的管子用于標(biāo)準(zhǔn)物，以校正用于所述測(cè)定的儀器。將10pL的TE溶液(IOmMTris,1mMEDTA)力卩入到一個(gè)管中作為"零"。將10)iL在TE中的10ng/VL的XDNA溶液加入到第二個(gè)管中，并且作為高標(biāo)準(zhǔn)物。對(duì)于其余的管子，加入1-20^L的未知樣品，在每個(gè)管中終濃度200pL。將每個(gè)管使用渦旋振蕩器或通過顛倒所述管混合，然后在室溫下溫育所述管2分鐘。為了確定在測(cè)定管中的DNA的量，使用者使用構(gòu)建在熒光計(jì)中的固件選擇"Quant-iTDNAHS"測(cè)定，然后按照提示允許所述熒光計(jì)讀取標(biāo)準(zhǔn)物l(上述零標(biāo)準(zhǔn)物)，標(biāo)準(zhǔn)物2(上述高標(biāo)準(zhǔn)物)，然后任何數(shù)目的樣品。使用這兩個(gè)標(biāo)準(zhǔn)物，所述儀器使用在實(shí)施例2中所述的方程確定樣品管中的DNA濃度。在所述測(cè)定管中的溶液中的DNA的濃度顯示在所述熒光計(jì)的屏幕上。在所述固件中包含選項(xiàng)，通過詢問使用者進(jìn)行稀釋計(jì)算，以選擇將1，2,3,4，5,10,15或20pL的樣品加入到所述樣品管中。然后，將在初始樣品管中的DNA的濃度顯示在所述熒光計(jì)的屏幕上。所有這些數(shù)據(jù)可以使用本文所述的兼容的端口和數(shù)據(jù)資料記錄軟件同時(shí)轉(zhuǎn)移到計(jì)算機(jī)上。實(shí)蕭"微##^簠范鵬廁游定蘆將HiQuant染料稀釋在特定的緩沖液中，以制備2的工作染料溶液。將180-199pL的所述工作染料溶液加入到本文所述的500(iL透明的塑料PCR管中。將兩個(gè)這樣的管子用于標(biāo)準(zhǔn)物，以校正用于所述測(cè)定的儀器。將10pL的TE溶液(IOmMTris,1mMEDTA)加入到一個(gè)管中作為"零"。將10|iL在TE中的100ng/pL的人DNA溶液加入到第二個(gè)管中，以作為高標(biāo)準(zhǔn)物。對(duì)于其余的管子，加入1-20的未知樣品，在每個(gè)管中終濃度200|iL。將每個(gè)管使用渦旋振蕩器或通過顛倒所述管混合，然后將所述管在室溫下溫育2分鐘。為了確定在測(cè)定管中的DNA的量，使用者使用構(gòu)建在熒光計(jì)中的固件選擇"Quant-iTDNABR"測(cè)定，然后按照提示允許所述熒光計(jì)讀取標(biāo)準(zhǔn)物l(上述零標(biāo)準(zhǔn)物)，標(biāo)準(zhǔn)物2(上述高標(biāo)準(zhǔn)物)，然后任何數(shù)目的樣品。使用這兩個(gè)標(biāo)準(zhǔn)物，所述儀器使用在實(shí)施例3中所述的方程確定樣品管中的DNA濃度。在所述測(cè)定管中的溶液中的DNA的濃度顯示在所述熒光計(jì)的屏幕上。在所述固件中包含選項(xiàng)，通過詢問使用者進(jìn)行稀釋計(jì)算，以選擇將1，2，3，4,5，10,15或20)iL的樣品加入到所述樣品管中。然后，將在初始樣品管中的DNA的濃度顯示在所述熒光計(jì)的屏幕上。所有這些數(shù)據(jù)可以使用本文所述的兼容的端口和數(shù)據(jù)資料記錄軟件同時(shí)轉(zhuǎn)移到計(jì)算機(jī)上。實(shí)細(xì)7-,凝沐摔^柳應(yīng)游定量將RiboRed染料稀釋在特定的緩沖液中，以制備0.04的工作染料溶液。將180-199pL的所述工作染料溶液加入到本文所述的500|iL透明的塑料PCR管中。將兩個(gè)這樣的管子用于標(biāo)準(zhǔn)物，以校正用于所述測(cè)定的儀器。將10|iL的TE溶液(IOmMTris,1mMEDTA)加入到一個(gè)管中作為"零"。將10nL在TE中的10ng4iL的核糖體RNA溶液加入到第二個(gè)管中，并且將作為高標(biāo)準(zhǔn)物。對(duì)于其余的管子，加入l-20pL的未知樣品，在每個(gè)管中終濃度200]iL。將每個(gè)管使用渦旋振蕩器或通過顛倒所述管混合，然后將其在室溫下溫育2分鐘。為了確定在測(cè)定管中的RNA的量，使用者使用構(gòu)建在熒光計(jì)中的固件選擇"Quant-iTRNA"測(cè)定，然后按照提示允許所述熒光計(jì)讀取標(biāo)準(zhǔn)物l(上述零標(biāo)準(zhǔn)物)，標(biāo)準(zhǔn)物2(上述高標(biāo)準(zhǔn)物)，然后任何數(shù)目的樣品。使用這兩個(gè)標(biāo)準(zhǔn)物，所述儀器使用在實(shí)施例2中所述的方程確定樣品管中的RNA濃度。在所述測(cè)定管中的溶液中的RNA的濃度顯示在所述熒光計(jì)的屏幕上。在所述固件中包含選項(xiàng)，通過詢問使用者進(jìn)行稀釋計(jì)算，以選擇將1,2,3，4，5,10,15或20HL的樣品加入到所述樣品管中。然后，將在初始樣品管中的RNA的濃度顯示在所述熒光計(jì)的屏幕上。所有這些數(shù)據(jù)可以使用本文所述的兼容的端口和數(shù)據(jù)資料記錄軟件同時(shí)轉(zhuǎn)移到計(jì)算機(jī)上。魏飾_凝銜絲糊節(jié)鄉(xiāng)定畫將NanoOrange染料稀釋在特定的緩沖液中，以制備4的工作染料溶液。將180-199的所述工作染料溶液加入到本文所述的500mL透明的塑料PCR管中。將3個(gè)這樣的管子用于標(biāo)準(zhǔn)物，以校正用于所述測(cè)定的儀器。將10的TE溶液(IOmMTris,1mMEDTA)加入到一個(gè)管中作為"零"。將10在TE中的200ng&L的BSA溶液加入到第二個(gè)管中，并且將作為中間標(biāo)準(zhǔn)物。將10pL在TE中的400ng/VL的BSA溶液加入到第三個(gè)管中，并且將作為高標(biāo)準(zhǔn)物。對(duì)于其余的管子，加入1-20pL的未知樣品，在每個(gè)管中終濃度200jaL。將每個(gè)管使用渦旋振蕩器或通過顛倒所述管混合，然后在室溫下溫育15分鐘。為了確定在測(cè)定管中的蛋白質(zhì)的量，使用者使用構(gòu)建在熒光計(jì)中的固件選擇"Quant-iT蛋白質(zhì)"測(cè)定，然后按照提示允許所述熒光計(jì)讀取標(biāo)準(zhǔn)物1(上述零標(biāo)準(zhǔn)物)，標(biāo)準(zhǔn)物2(上述中間標(biāo)準(zhǔn)物)，標(biāo)準(zhǔn)物3(上述高標(biāo)準(zhǔn)物)，然后任何數(shù)目的樣品。使用這3個(gè)標(biāo)準(zhǔn)物，所述儀器使用在實(shí)施例4中所述的方程確定樣品管中的蛋白質(zhì)濃度。在所述測(cè)定管中的溶液中的蛋白質(zhì)的濃度顯示在所述熒光計(jì)的屏幕上。在所述固件中包含選項(xiàng)，通過詢問使用者進(jìn)行稀釋計(jì)算，以選擇將1,2,3,4,5,10,15或20pL的樣品加入到所述樣品管中。然后，將在初始樣品管中的蛋白質(zhì)的濃度顯示在所述熒光計(jì)的屏幕上。所有這些數(shù)據(jù)可以使用本文所述的兼容的端口和數(shù)據(jù)資料記錄軟件同時(shí)轉(zhuǎn)移到計(jì)算機(jī)上。孺辨-絲雜^爐微應(yīng)f敲或微；游定量將SYTO9染料稀釋在特定的緩沖液中，以制備0.02mM的工作染料溶液。將180-199的所述工作染料溶液加入到本文所述的500|iL透明的塑料PCR管中。將兩個(gè)這樣的管子用于標(biāo)準(zhǔn)物，以校正用于所述測(cè)定的儀器。將200nL的水溶液加入到一個(gè)管中作為"零"。將200pL在O.lM硼酸鈉pH9的緩沖液中的100nM的熒光素溶液加入到第二個(gè)管中，并且將作為高標(biāo)準(zhǔn)物。對(duì)于其余的管子，加入l-20jiL的未知樣品，在每個(gè)管中終濃度200pL。將每個(gè)管使用渦旋振蕩器或通過顛倒所述管進(jìn)行混合，然后將所述管在室溫下溫育5分鐘。為了確定在測(cè)定管中的細(xì)胞的量，使用者使用構(gòu)建在熒光計(jì)中的固件選擇"Quant-iT細(xì)胞計(jì)數(shù)"測(cè)定，然后按照提示允許所述熒光計(jì)讀取標(biāo)準(zhǔn)物l(上述零標(biāo)準(zhǔn)物)，標(biāo)準(zhǔn)物2(上述高標(biāo)準(zhǔn)物)，然后任何數(shù)目的樣品。使用這兩個(gè)標(biāo)準(zhǔn)物，所述儀器使用本文所述的方程(參見方程I-V)確定樣品管中的蛋白質(zhì)濃度。在所述測(cè)定管中的溶液中的細(xì)胞的濃度顯示在所述熒光計(jì)的屏幕上。在所述固件中包含選項(xiàng)，通過詢問使用者進(jìn)行稀釋計(jì)算，以選擇將1,2,3,4,5,10，15或20|iL的樣品加入到所述樣品管中。然后，將在初始樣品管中的細(xì)胞的濃度顯示在所述熒光計(jì)的屏幕上。所有這些數(shù)據(jù)可以使用本文所述的兼容的端口和數(shù)據(jù)資料記錄軟件同時(shí)轉(zhuǎn)移到計(jì)算機(jī)上。雄銜瑞樣智應(yīng)f就或微J縱，鄉(xiāng)鄉(xiāng)定著將SYTO9染料和SYTOXRed染料稀釋在特定的緩沖液中，以制備每種染料0.02mM的工作染料溶液。將180-199的所述工作染料溶液加入到本文所述的500)iL透明的塑料PCR管中。將兩個(gè)這樣的管子用于標(biāo)準(zhǔn)物，以校正用于所述測(cè)定的儀器。將200ML的水溶液加入到一個(gè)管中作為"零"。將200|iL在0.1M硼酸鈉pH9的緩沖液中的100nM熒光素染料和100nM的AlexaFluor647染料溶液加入到第二個(gè)管中，并且將作為高標(biāo)準(zhǔn)物。對(duì)于其余的管子，加入1-20pL的未知樣品，在每個(gè)管中終濃度200ML。將每個(gè)管使用渦旋振蕩器或通過顛倒所述管進(jìn)行混合，然后在室溫下溫育5分鐘。為了確定在測(cè)定管中的活和死細(xì)胞的量，使用者使用構(gòu)建在熒光計(jì)中的固件選擇"Quant-iT活/死"測(cè)定，然后使用如在中所述的"藍(lán)色"波道(Ex/Em:460nm/520nm)和深紅波道(Ex/Em:630nm/650nm)，按照提示允許所述熒光計(jì)讀取標(biāo)準(zhǔn)物l(上述零標(biāo)準(zhǔn)物)，標(biāo)準(zhǔn)物2(上述高標(biāo)準(zhǔn)物)，然后任何數(shù)目的樣品。使用這兩個(gè)標(biāo)準(zhǔn)物，所述儀器使用在本文所述的方程確定樣品管中的總細(xì)胞和死細(xì)胞的相對(duì)濃度。這二者的比例顯示在所述熒光計(jì)的屏幕上。所有這些數(shù)據(jù)可以使用本文所述的兼容的端口和數(shù)據(jù)資料記錄軟件同時(shí)轉(zhuǎn)移到計(jì)算機(jī)上。,嚴(yán),-微沐存^頓潘應(yīng)柳，教^柳定蘆將SYT061染料稀釋在特定的緩沖液中，以制備0.02mM的工作染料溶液。將180-199nL的所述工作染料溶液加入到中所述的500pL透明的塑料PCR管中。將兩個(gè)這樣的管子用于標(biāo)準(zhǔn)物，以校正用于所述測(cè)定的儀器。將200ML的水溶液加入到一個(gè)管中作為"零"。將200在0.1M硼酸鈉pH9的緩沖液中的100nM熒光素染料和100nM的AlexaFluor647染料溶液加入到第二個(gè)管中，以作為高標(biāo)準(zhǔn)物。對(duì)于其余的管子，加入l-20)iL的未知樣品，在每個(gè)管中終濃度200pL。將每個(gè)管使用渦旋振蕩器或通過顛倒所述管混合，然后在室溫下溫育5分鐘。為了確定在測(cè)定管中的細(xì)胞的量，使用者使用構(gòu)建在熒光計(jì)中的固件選擇"Quant-iTGFP"測(cè)定，然后使用如在中所述的"藍(lán)色"波道(Ex/Em:460nm/520nm)和深紅波道(Ex/Em:630nm/650nm)，按照提示允許所述熒光計(jì)讀取1^示準(zhǔn)物1(上述零標(biāo)準(zhǔn)物)，標(biāo)準(zhǔn)物2(上述高標(biāo)準(zhǔn)物)，然后任何數(shù)目的樣品。使用這兩個(gè)標(biāo)準(zhǔn)物和來自SYT061的信號(hào)，所述儀器使用在中所述的方程確定樣品管中細(xì)胞的濃度。使用這兩個(gè)標(biāo)準(zhǔn)物和來自所述"藍(lán)色"波道的信號(hào)，所述儀器使用在中所述的方程確定樣品管中GFP的濃度。在所述測(cè)定管中的溶液中的GFP與細(xì)胞濃度的比例顯示在所述熒光計(jì)的屏幕上。所有這些數(shù)據(jù)可以使用本文所述的兼容的端口和數(shù)據(jù)資料記錄軟件同時(shí)轉(zhuǎn)移到計(jì)算機(jī)上。一,潘應(yīng)潛蕎激，潘應(yīng)潛蕎試^^游支嚴(yán)沐^#游檢錢GFP共價(jià)附著到結(jié)合在500(iL透明塑料管底部的肽的一端。將180-199nL的這種工作溶液加入到本文所述的500pL透明的塑料PCR管中。將兩個(gè)這樣的管子用于標(biāo)準(zhǔn)物，以校正用于所述測(cè)定的儀器。將200pL的水溶液加入到一個(gè)管中作為"零"。將200HL在0.1M硼酸鈉pH9的緩沖液中的100nM熒光素溶液加入到第二個(gè)管中，并且將作為高標(biāo)準(zhǔn)物。對(duì)于其余的管子，加入1-20^L的未知樣品，在每個(gè)管中終濃度200nL。將每個(gè)管使用渦旋振蕩器或通過顛倒所述管進(jìn)行混合，然后在室溫下溫育5分鐘。為了確定支原體污染的存在，使用者使用構(gòu)建在熒光計(jì)中的固件選擇"Quant-iT支原體"測(cè)定，然后按照提示允許所述熒光計(jì)讀取標(biāo)準(zhǔn)物1(上述零標(biāo)準(zhǔn)物)，標(biāo)準(zhǔn)物2(上述高標(biāo)準(zhǔn)物)，然后任何數(shù)目的樣品。使用這兩個(gè)標(biāo)準(zhǔn)物，所述儀器使用本文所述的方程確定樣品管中的支原體的濃度。在所述測(cè)定管中的溶液中的支原體的濃度顯示在所述熒光計(jì)的屏幕上。在所述固件中包含選項(xiàng)，通過詢問使用者進(jìn)行稀釋計(jì)算，以選擇將1,2,3,4,5,10,15或20iiiL的樣品加入到所述樣品管中。然后，將在初始樣品管中的支原體的濃度顯示在所述熒光計(jì)的屏幕上。所有這些數(shù)據(jù)可以使用本文所述的兼容的端口和數(shù)據(jù)資料記錄軟件同時(shí)轉(zhuǎn)移到計(jì)算機(jī)上。微汰'鄉(xiāng)應(yīng)線定將2mL金黃色葡萄球菌(S.aureus)收集到微量離心管中并且沉淀。一個(gè)管用70%IPA(異丙醇)在RT處理30min以殺死細(xì)胞，然后洗滌/旋轉(zhuǎn)沉淀2次。將沉淀物重懸并且轉(zhuǎn)移到10mL0.85%NaCl中。使用在表1所示的比例制備檢測(cè)溶液，并且加入適當(dāng)?shù)娜玖?.3pL的3.35mMSYT09禾口/或lpL的lmMSYTOXRed。將所述溶液在RT溫育15分鐘，將200pL轉(zhuǎn)移到PCR管中并且進(jìn)行分析。表1<table>tableseeoriginaldocumentpage53</column></row><table>結(jié)果藍(lán)色激發(fā)-SYT09隨著活死細(xì)胞比例的下降在信號(hào)中表現(xiàn)出很少的改變。SYTOXRed不是通過460nrn激發(fā)而最佳激發(fā)(參見圖5A)。紅色激發(fā)-SYTOXRed信號(hào)隨著活死細(xì)胞比例的下降而增加。SYTO9不是通過460nm激發(fā)而最佳激發(fā)(參見圖5B)。比例確定-隨著活死細(xì)胞比例的下降，SYT09信號(hào)稍微下降，而SYTOXRed信號(hào)在其染色死細(xì)胞時(shí)顯著增加。在來自460nm源(只激發(fā)SYTO9)的信號(hào)和來自630nm源(只激發(fā)SYTOXRed)的信號(hào)之間的比例與所述細(xì)胞的活死比例成比例地減小(參見圖5C)。真微冊(cè)教收集真核細(xì)胞系(Jurkat,MRC5,U20S,3T3，BPAE,COS,HeLa,CHO-Kl)，并且使用Coulter計(jì)數(shù)儀計(jì)數(shù)細(xì)胞濃度，并設(shè)為相等(lxl(^細(xì)胞/mL)。將lmL的細(xì)胞與SYTO9(終濃度lpM)在RT混合15分鐘。將200所述溶液轉(zhuǎn)移到PCR管中，并且使用460mn激發(fā)讀取。結(jié)果460nm激發(fā)-對(duì)于檢測(cè)的所有真核細(xì)胞系，SYT09表現(xiàn)出顯著高于背景的熒光反應(yīng)(參見圖6)。前述參考文獻(xiàn)中的每一篇通過引用如同其在本文中完全描述一樣并入本文中。權(quán)利要求1.一種用于測(cè)量一種或多種預(yù)先確定的分析物的量的裝置，其中所述裝置是一個(gè)整合部件，其包括用于保持具有分析物的樣品容器的容座，光檢測(cè)器，一個(gè)或多個(gè)不同的和可操作性連接的分析物傳感元件(ASE)，和帶有機(jī)器可執(zhí)行指示的計(jì)算機(jī)處理部件，其中所述ASE包括a)用于激發(fā)所述樣品的能源，其中該能源被設(shè)置成發(fā)射預(yù)先確定最大波長(zhǎng)的光；b)激發(fā)濾波器，其中所述激發(fā)濾波器被設(shè)置成分離來自所述能源的預(yù)先確定的波長(zhǎng)范圍的光；c)發(fā)射濾波器，其中所述發(fā)射濾波器被設(shè)置成分離從被激發(fā)的樣品發(fā)射的預(yù)先確定的波長(zhǎng)范圍的光；并且其中每個(gè)ASE被設(shè)置成測(cè)量預(yù)先確定的分析物的量，并且其中所述機(jī)器可執(zhí)行指示被設(shè)置成選擇與待測(cè)量的分析物相對(duì)應(yīng)的適當(dāng)?shù)腁SE。2.權(quán)利要求1的裝置，其中所述能源是發(fā)光二極管(LED)。3.權(quán)利要求l的裝置，其中所述預(yù)先確定的分析物選自由下列各項(xiàng)組成的組DNA、RNA、蛋白質(zhì)、真核或原核細(xì)胞、碳水化合物、脂質(zhì)、病毒、pH和金屬離子。4.權(quán)利要求1的裝置，其中所述機(jī)器可執(zhí)行指示還設(shè)置成基于來自被激發(fā)的樣品的發(fā)射光而確定所述具體的分析物的濃度。5.權(quán)利要求1的裝置，其中所述裝置還包括使用者界面。6.權(quán)利要求5的裝置，其中所述使用者界面包括顯示器和非數(shù)字鍵區(qū)。7.權(quán)利要求1的裝置，其中所述樣品容器容座被設(shè)置成與透光的0.5微量離心管相匹配。8.權(quán)利要求l的裝置，其中所述裝置還包括內(nèi)部電源。9.權(quán)利要求l的裝置，其還包括至少一個(gè)通信端口。10.權(quán)利要求9的裝置，其中所述通信端口選自由通用串行總線(USB)端口，音頻/視頻串行總線(IEEE1394)，紅夕卜(IR)端口和無線電頻率(RF)端口組成的組。11.權(quán)利要求l的裝置，其中所述裝置包括第一和第二ASE。12.權(quán)利要求11的裝置，其中所述第一ASE包括發(fā)射具有約470nm最大波長(zhǎng)的光的LED，濾除具有大于約490nm的波長(zhǎng)的光的激發(fā)濾波器，和濾除具有小于約520nm和大于約580nm的波長(zhǎng)的光的發(fā)射濾波器。13.權(quán)利要求11的裝置，其中所述第二ASE包括發(fā)射具有約640nm最大波長(zhǎng)的光的LED，濾除具有小于約570nm和大于約647nm的波長(zhǎng)的光的激發(fā)濾波器，和濾除具有小于約652nm的波長(zhǎng)的光的發(fā)射濾波器。14.權(quán)利要求5的裝置，其中所述使用者界面被設(shè)置成允許使用者選擇用于測(cè)量的分析物。15.權(quán)利要求1的裝置，其中所述機(jī)器可執(zhí)行指示能夠在沒有使用者輸入時(shí)選擇用于測(cè)量的分析物。16.權(quán)利要求l的裝置，其中所述裝置的尺寸在短軸上約30-300mm,在長(zhǎng)軸上100-500mm,并且可變厚度約10到100mm;條件是長(zhǎng)軸的尺寸大于短軸的尺寸。17.—種計(jì)算在透光樣品容器中的分析物的量的方法，所述方法包括a)生成熒光標(biāo)準(zhǔn)曲線，包括測(cè)量空白樣品(g)的熒光強(qiáng)度，并且測(cè)量至少一個(gè)高端標(biāo)準(zhǔn)物(v)的熒光強(qiáng)度，其中所述曲線使得熒光強(qiáng)度與分析物數(shù)量相關(guān)，并且其中所述曲線具有預(yù)先確定的S形程度(n)和曲率(k);b)測(cè)量所述樣品(y)的熒光強(qiáng)度，其中所述樣品包括能夠指示所述分析物在樣品中的存在的熒光部分；和c)使用所述熒光標(biāo)準(zhǔn)曲線將所述樣品(y)中的所述熒光強(qiáng)度與所述分析物的量相關(guān)。18.權(quán)利要求17的方法，其中所述曲線由下述方程表征(I)y=r(x7(xn+k))+g;其中r是通過下式確定的校正值(II)r=(v-g)((sn+k)/sn)其中(s)是在所述高端標(biāo)準(zhǔn)物中的分析物的量。19.一種用于檢測(cè)預(yù)先確定的分析物在樣品中的存在的方法，其中所述樣品是在透光樣品容器中，所述方法包括a)使樣品與報(bào)道分子接觸，以形成接觸的樣品；b)檢測(cè)所述預(yù)先確定的分析物的存在，其中檢測(cè)包括將所述透光容器放置在整合裝置的保持所述樣品容器的容座上，以測(cè)量所述預(yù)先確定的分析物，其中所述裝置還包括i)光檢測(cè)器，一個(gè)或多個(gè)不同的并且可操作連接的分析物傳感元件(ASE)、和帶有機(jī)器可執(zhí)行指示的計(jì)算機(jī)處理部件，其中所述ASE包括用于激發(fā)所述樣品的能源，其中該能源被設(shè)置成發(fā)射預(yù)先確定最大波長(zhǎng)的光；激發(fā)濾波器，其中所述激發(fā)濾波器被設(shè)置成分離來自所述能源的預(yù)先確定的波長(zhǎng)范圍的光；發(fā)射濾波器，其中所述發(fā)射濾波器被設(shè)置成分離從被激發(fā)的樣品發(fā)射的預(yù)先確定的波長(zhǎng)范圍的光；并且其中每個(gè)ASE被設(shè)置成測(cè)量預(yù)先確定的分析物的量，并且其中所述機(jī)器可執(zhí)行指示被設(shè)置成選擇與待測(cè)量的分析物相對(duì)應(yīng)的適當(dāng)?shù)腁SE。20.—種計(jì)算在樣品容器中的兩種分析物的比例的方法，所述方法包括a)生成關(guān)于所述兩種分析物的熒光標(biāo)準(zhǔn)曲線，其包括測(cè)量第一空白分析物樣品(gl)和第二分析物樣品(g2)的熒光強(qiáng)度，并且測(cè)量關(guān)于所述第一分析物的至少一個(gè)高端標(biāo)準(zhǔn)物(vl)和關(guān)于所述第二分析物的至少一個(gè)高端標(biāo)準(zhǔn)物(v2)的熒光強(qiáng)度，其中所述曲線使得熒光強(qiáng)度與每種分析物的量或相對(duì)量相關(guān)，并且其中所述曲線具有預(yù)先確定的S形程度(n)和曲率(k);b)測(cè)量所述樣品(yl和y2)的熒光強(qiáng)度，其中所述樣品包括能夠指示所述分析物在所述樣品中的存在的熒光部分；和c)使用所述熒光標(biāo)準(zhǔn)曲線使得所述樣品(yl和y2)中的所述熒光強(qiáng)度與所述分析物的量相關(guān)。全文摘要本發(fā)明涉及用于測(cè)量樣品中的多種分析物的量的裝置和方法。所述裝置這樣設(shè)計(jì)，以致每個(gè)分析物傳感元件被設(shè)置成測(cè)量預(yù)先確定的分析物的量，并且其中機(jī)器可執(zhí)行指示被設(shè)置成選擇與待測(cè)量的分析物相對(duì)應(yīng)的適當(dāng)?shù)姆治鑫飩鞲性?。文檔編號(hào)G01N15/14GK101375150SQ200780003354公開日2009年2月25日申請(qǐng)日期2007年1月24日優(yōu)先權(quán)日2006年1月24日發(fā)明者吉爾·亨德里克森,戴維·C·哈根,里奇·B·邁耶,馬修·P·博德特申請(qǐng)人:英濰捷基公司