專利名稱：一種無邊緣效應的96孔酶標板的制作方法
技術(shù)領域：
本實用新型涉及生物學中酶聯(lián)免疫實驗使用的酶標板，尤其是一種無邊緣效應的96孔酶標板。
背景技術(shù)：
目前，在生物學中酶聯(lián)免疫實驗使用的酶標板，在酶聯(lián)免疫實驗的過程中，經(jīng)常會
發(fā)生邊緣效應，酶聯(lián)免疫檢測(ELISA)中的邊緣效應是指在使用96孔酶標板檢測樣品時，
周邊孔的數(shù)值總是會高于中間孔的數(shù)值，外周孔顯色較中心孔深，表現(xiàn)為酶標板讀數(shù)在均
一的實驗條件下外周孔的讀數(shù)高于中間孔；這種現(xiàn)象在實驗中常用的96孔板中十分明顯；
而邊緣孔的數(shù)量占到總數(shù)的1/3，這就意味著因為此誤差所導致的影響相當巨大。 產(chǎn)生這種"邊緣效應"的原因為96孔板周邊孔與中心孔表面熱力學特征的不同；
但有研究證實在溫育中的熱力學梯度可能是根本原因之所；聚苯乙烯本身為不良熱導體，
在實驗室的常規(guī)ELISA測定中，將酶標板從室溫(通常在25t:左右)置于37t:溫箱，酶標
板也升溫時，在外周孔與中心孔之間存在一熱力學梯度；酶標板上產(chǎn)生的溫度差影響被包
被物(如抗原或抗體等)與酶標板的結(jié)合以及抗原、二抗或酶標記抗體與被包被物結(jié)合的
效率，造成溫育時間的相對不平衡，從而產(chǎn)生外周孔顯色較中心孔深的現(xiàn)象。 為了避免邊緣效應可以采取一些方法，如盡量采用水浴，溫育中讓微孔板浮于水
面上，或?qū)⒔杆纳巢挤湃胍淮箫埡兄谐梢粷窈?，放于溫箱中，這樣就會因為板條孔底部
直接與37t:水或濕布的接觸，以及水浴箱或濕盒內(nèi)的高溫度，而使反應溶液的溫度迅速與
溫室平衡；也有使用快速法ELISA來消除邊緣效應的，但是不是所有的ELISA試驗都適用快
速法，有一定的局限性；另外還可以借助一種分窗數(shù)字顯時自動酶免孵育儀來減輕頻繁開
啟溫育箱門引起的溫度波動從而減弱邊緣效應；但因此也就提高了試驗的條件和對試驗器
材的要求，增加了試驗的繁瑣程度。 導致目前常規(guī)的96孔酶標板產(chǎn)生邊緣效應的原因是目前應用的96孔酶標板外圈的孔側(cè)壁直接與外界接觸，對溫度非常敏感，從而在溫度波動很大時不能調(diào)控抗原抗體反應的溫度；而內(nèi)側(cè)的孔由于僅從底部接觸外界，免疫反應的條件就很均勻；因此如果能夠在外側(cè)孔的側(cè)面設計結(jié)構(gòu)使其僅從底部感受外界溫度變化，將會避免邊緣效應的產(chǎn)生。

發(fā)明內(nèi)容本實用新型的發(fā)明目的是提供了一種酶標板，該酶標板是通過改變原有96孔板的結(jié)構(gòu)，在最外側(cè)孔的外側(cè)設計了不同寬度及厚度的槽形結(jié)構(gòu)，達到最大程度消除邊緣效應的目的，同時又保證了酶聯(lián)免疫實驗的最佳狀態(tài)；為了實現(xiàn)上述目的，本實用新型是這樣實現(xiàn)的一種酶標板，是由上蓋、酶標板和酶標板孔組成；其特征在于酶標板上有96個酶標板孔，酶標板孔為8X12分布，每個孔為大小、形狀均相等的正圓形或方形，底端封閉，上端敞開便于培養(yǎng)液加入，周邊有側(cè)壁圍繞孔的周圍；酶標板孔的高度稍高于側(cè)壁形成的平面；在最外一圈孔與酶標板側(cè)圍之間存在槽的結(jié)構(gòu)；上蓋平坦，與酶標板上面孔形成的
3平面平行，有裙邊，與酶標板之間存在縫隙，間距為0. l-2mm ;孔的分布為矩陣形，每個孔的
中心距相等，距離為0. 5-2cm ;酶標板；其中酶標板上最外一圈酶標板孔與酶標板側(cè)圍之
間存在間隔，距離為12孔長邊側(cè)l-4mm，8孔短邊側(cè)2-6mm ;在酶標板上最外一圈酶標板孔 與酶標板側(cè)圍之間存在槽結(jié)構(gòu)，該槽結(jié)構(gòu)為四周連通的，四邊可以設計有一條或多條的槽， 或者四個轉(zhuǎn)角處相連通的槽，槽的高度為0-15mm，將孔與外界從底部隔開；其中槽的寬度 為12孔長邊側(cè)0. 5-3. 5mm，8孔短邊側(cè)0. 5-5. 5mm，槽的內(nèi)徑為12孔長邊側(cè)0-3. 5mm，8孔 短邊側(cè)0-5. 5mm，可以是實心槽，其長度覆蓋周邊所有的孔；槽可拆卸，或者與酶標板為一 體，槽可以是上端敞開的，或者上端封閉，在一處或多處有孔與外界連通；由于槽的結(jié)構(gòu)使 內(nèi)外隔絕了熱交換，因此可以達到最大程度消除邊緣效應的目的，同時又保證了酶聯(lián)免疫 實驗的最佳狀態(tài)。

附圖為一種薄底的酶標板簡單示意圖。
具體實施方式
以下結(jié)合附圖對本實用新型做進一步的說明 —種96孔酶標板，是由上蓋、酶標板和酶標板孔組成；其特征在于酶標板上 有96個酶標板孔，酶標板孔為8X 12分布，每個孔為大小、形狀均相等的正圓形或方形，底 端封閉，上端敞開便于培養(yǎng)液加入，周邊有側(cè)壁圍繞孔的周圍；酶標板孔的高度稍高于側(cè) 壁形成的平面；在最外一圈孔與酶標板側(cè)圍之間存在槽的結(jié)構(gòu)；上蓋平坦，與酶標板上面 孔形成的平面平行，有裙邊，與酶標板之間存在縫隙，間距為O. l-2mm;孔的分布為矩陣形，
每個孔的中心距相等，距離為0. 5-2cm ;酶標板；其中酶標板上最外一圈酶標板孔與酶標
板側(cè)圍之間存在間隔，距離為12孔長邊側(cè)l-4mm，8孔短邊側(cè)2-6mm ;在酶標板上最外一 圈酶標板孔與酶標板側(cè)圍之間存在槽結(jié)構(gòu)，該槽結(jié)構(gòu)為四周連通的，四邊可以設計有一條 或多條的槽，或者四個轉(zhuǎn)角處相連通的槽，槽的高度為0-15mm，將孔與外界從底部隔開；其 中槽的寬度為:12孔長邊側(cè)0. 5-3. 5mm，8孔短邊側(cè)0. 5-5. 5mm，槽的內(nèi)徑為:12孔長邊側(cè) 0-3. 5mm，8孔短邊側(cè)0_5. 5mm，可以是實心槽，其長度覆蓋周邊所有的孔；槽可拆卸，或者與 酶標板為一體，槽可以是上端敞開的，或者上端封閉，在一處或多處有孔與外界連通。
權(quán)利要求無邊緣效應的96孔酶標板，是由上蓋、酶標板和酶標板孔組成；其特征是孔呈8×12矩陣分布，每個孔為大小、形狀均相等的正圓形或方形，底端封閉，上端敞開便于培養(yǎng)液加入，周邊有側(cè)壁圍繞孔的周圍；酶標板孔的高度稍高于側(cè)壁形成的平面；在最外一圈孔與酶標板側(cè)圍之間存在槽的結(jié)構(gòu)。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的無邊緣效應的96孔酶標板，其特征是上蓋平坦，與酶標板上面孔形成的平面平行，有裙邊，與酶標板之間存在縫隙，間距為0. l-2mm。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的無邊緣效應的96孔酶標板，其特征是孔的分布為矩陣形，每個孔的中心距相等，距離為0. 5-2cm ;酶標板上最外一圈酶標板孔與酶標板側(cè)圍之間存在間隔，距離為12孔長邊側(cè)l-4mm，8孔短邊側(cè)2-6mm ;
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的無邊緣效應的96孔酶標板，其特征是該槽為四周連通的，或者四邊各有一條或多條的槽，或者四個轉(zhuǎn)角處相連通的槽，槽的高度為10-15mm，將孔與外界從底部隔開；槽的寬度為12孔長邊側(cè)0. 5-3. 5mm，8孔短邊側(cè)0. 5-5. 5mm，槽的內(nèi)徑為12孔長邊側(cè)1-3. 5mm，8孔短邊側(cè)1_5. 5mm。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的無邊緣效應的96孔酶標板，其特征是槽可以是實心的，其長度覆蓋周邊所有的孔。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的無邊緣效應的96孔酶標板，其特征是槽可拆卸，或者與酶標板為一體；槽可以是上端敞開的，或者上端封閉，在一處或多處有孔與外界連通。
專利摘要本實用新型涉及生物學中酶聯(lián)免疫使用的酶標板，尤其是一種無邊緣效應的96孔酶標板，是由上蓋、酶標板和酶標板孔組成；其特征在于酶標板上有96個酶標板孔，酶標板孔為8×12分布，每個孔為大小、形狀均相等的正圓形或方形，底端封閉，上端敞開便于培養(yǎng)液加入，周邊有側(cè)壁圍繞孔的周圍；酶標板孔的高度稍高于側(cè)壁形成的平面；在最外一圈孔與酶標板側(cè)圍之間存在槽的結(jié)構(gòu)；上蓋平坦，與酶標板上面孔形成的平面平行，有裙邊，與酶標板之間存在縫隙；孔的分布為矩陣形，每個孔的中心距相等；其中在96孔酶標板的外周孔的外側(cè)增加了新的槽結(jié)構(gòu)，這種結(jié)構(gòu)可以在ELISA實驗時減少內(nèi)、外孔之間的熱動力不平衡問題，使數(shù)據(jù)均一性提高，從而消除邊緣效應，減少實驗系統(tǒng)誤差。
文檔編號G01N33/543GK201464474SQ20092011040
公開日2010年5月12日 申請日期2009年7月24日 優(yōu)先權(quán)日2009年7月24日
發(fā)明者張 杰 申請人:無錫耐思生物科技有限公司