專利名稱：保健食品中七種人參皂苷含量的測(cè)定方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及七種人參皂苷含量的測(cè)定方法，特別是涉及一種高效液相色譜測(cè)定保健食品中七種人參皂苷含量的測(cè)定方法。
背景技術(shù)：
人參皂苷是人參的主要功效成分，目前通過(guò)科學(xué)、先進(jìn)的工藝技術(shù)可以分離和精制出數(shù)十種人參皂苷單體，皆由苷元和糖組成，除R0的苷元是齊墩果酸外，其他的是原人參二醇和原人參三醇；其中人參中單體皂苷Rgl和Rbl是人參中益智作用的主要陳分，此外一些人參皂苷還具有抗衰老、抗疲勞、調(diào)節(jié)中樞神經(jīng)系統(tǒng)、活化皮膚細(xì)胞、增強(qiáng)皮膚彈性，減少皺紋等作用，并且對(duì)于糖尿病，不同類型的神經(jīng)衰弱癥、抗癌等均具有較好的功效。人參單體皂苷因具有優(yōu)越的生理學(xué)、藥學(xué)特性，使之廣泛使用于保健食品中，同時(shí)又可用作醫(yī)藥行業(yè)的原料，是國(guó)內(nèi)外保健食品研究的熱門領(lǐng)域。隨著人們生活水平的提高，對(duì)食品尤其是保健食品的檢測(cè)，提出了更高的要求，而目前現(xiàn)有的保健食品標(biāo)準(zhǔn)體系尚不健全、信息交流和應(yīng)急反應(yīng)體系建設(shè)緩慢，現(xiàn)有的檢測(cè)方法與食品工藝要求和食品安全要求，仍有較大的差距，并且因?yàn)槿藚⒃碥諉误w種類繁多， 本底組分復(fù)雜，給日常檢測(cè)其中人參皂苷Rgl、Re、Rc、Rf、Rbl、Rb2、Rd的含量帶來(lái)了一定的困難。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是為了克服上述現(xiàn)有技術(shù)的缺陷，提供一種保健食品中七種人參皂苷含量的測(cè)定方法，該方法可以有效的測(cè)定保健食品中七種人參皂苷Rgl、 Re、Rc、Rf、Rbl、Rb2、Rd的含量，克服了現(xiàn)有《保健食品檢驗(yàn)與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范》檢測(cè)方法技術(shù)存在的缺陷，增加了人參皂苷Rf的測(cè)定，能夠更好的分析保健食品中人參皂苷Rgl、Re、Rc、 Rf、Rbl、Rb2、Rd的含量，更好的為西洋參和人參的判斷提供依據(jù)，填補(bǔ)了國(guó)內(nèi)相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)中關(guān)于此項(xiàng)內(nèi)容的空白。本發(fā)明是通過(guò)下述技術(shù)方案來(lái)達(dá)到上述目的的一種保健食品中七種人參皂苷含量的測(cè)定方法，包括以下步驟1)樣品預(yù)處理；2)使用反相高效液相色譜柱進(jìn)行色譜分析；3)紫外檢測(cè)器檢測(cè)；4)根據(jù)色譜峰的保留時(shí)間對(duì)其中的人參皂苷進(jìn)行定性；5)用外標(biāo)法對(duì)其中人參皂苷含量進(jìn)行定量。其中，上述測(cè)定方法，所述七種人參皂苷為Rgl、Re、Re、Rf、Rbl、Rb2、Rd。所述樣品預(yù)處理分固體試樣處理和液體試樣處理。所述固體試樣處理取試樣(片劑或膠囊內(nèi)容物等)研成粉末，并過(guò)20目篩，精確取該粉末于磨口三角瓶中，準(zhǔn)確加入35-45ml的乙醇/水溶液(體積比1 1)，50_60°C超聲30-60min，冷卻后加入少量的乙腈，二次水定容，離心后過(guò)0. 45 μ m膜，濾液進(jìn)行色譜分析。所述液體試樣處理準(zhǔn)確稱取試樣，加2.5ml的乙醇/水溶液(體積比1 1)，超聲溶解均勻，冷卻后加少量的乙腈，二次水定容，離心后過(guò)0. 45 μ m膜，濾液進(jìn)行色譜分析。所述反相高效液相色譜分析參數(shù)分別為色譜柱=AgilentClS柱，4. 6X 150mm， 5μπι;柱溫30°C;進(jìn)樣量10μ1 ；流動(dòng)相乙腈和水。測(cè)定時(shí)，首先，配制人參皂苷Rgl、Re、 Rc、Rf、Rbl、Rb2、Rd 混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，濃度分別為 0. 01,0. 05,0. 10,0. 20,0. 50mg/ml ；然后，采用梯度洗脫對(duì)目標(biāo)物進(jìn)行有效分離。所述紫外檢測(cè)是在波長(zhǎng)205nm處進(jìn)行檢測(cè)。所述人參皂苷定性是指采用人參皂苷標(biāo)樣色譜峰的保留時(shí)間對(duì)樣品色譜峰來(lái)進(jìn)行定性。所述人參皂苷含量采用外標(biāo)法進(jìn)行定量。本發(fā)明的檢測(cè)方法可以檢測(cè)市售任何一種含有人參制品的保健產(chǎn)品，例如袋泡茶、西洋參蜂王漿、養(yǎng)元益腎酒等。有益效果本發(fā)明為檢測(cè)保健食品中七種人參皂苷Rgl、Re、Re、Rf、Rbl、Rb2、Rd的含量提供了更準(zhǔn)確、方便和經(jīng)濟(jì)的檢測(cè)方法，更加有利于保健食品生產(chǎn)廠家監(jiān)控七種人參皂苷的添加使用量，以及為西洋參和人參的判斷提供了重要依據(jù)，填補(bǔ)了國(guó)內(nèi)相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)中關(guān)于此項(xiàng)內(nèi)容的空白。
具體實(shí)施例方式以下結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)一步解釋說(shuō)明。實(shí)施例11)取袋泡茶的內(nèi)容物研成粉末，并過(guò)20目篩，精確稱取0. 2g該粉末于磨口三角瓶中，準(zhǔn)確加入35-45ml乙醇/水溶液(體積比1 1)，50-60°C超聲30-60min，冷卻后加入少量的乙腈，二次水定容至50ml，離心后過(guò)0. 45 μ m膜，濾液進(jìn)行色譜分析。2)使用反相高效液相色譜柱進(jìn)行色譜分析。色譜柱為；AgilentClS柱， 4.6父150讓，5“111;柱溫301；進(jìn)樣量10 μ 1 ；流動(dòng)相乙腈和水。a.配制人參皂苷Rgl、Re、Re、Rf、Rbl、Rb2、Rd混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，濃度分別為0. 01、 0.05、0·10、0. 20,0. 50mg/ml。b.采用梯度洗脫對(duì)目標(biāo)物進(jìn)行有效分離。3)試樣進(jìn)行HPLC分析，用峰面積對(duì)濃度做各單體皂苷的標(biāo)準(zhǔn)回歸曲線。在波長(zhǎng) 205nm處進(jìn)行紫外檢測(cè)。4)將人參皂苷Rgl、Re、Re、Rf、RbU Rb2, Rd標(biāo)準(zhǔn)溶液和處理好的樣品按相同色譜測(cè)定條件進(jìn)行檢測(cè)，用工作站記錄系統(tǒng)記錄各色譜峰的保留時(shí)間和峰面積，用人參皂苷 Rgl、Re、Re、Rf、Rbl、Rb2、Rd標(biāo)樣色譜峰的保留時(shí)間對(duì)樣品色譜峰進(jìn)行定性。5)采用外標(biāo)法對(duì)樣品色譜峰定量。測(cè)定樣品中人參皂苷Rgl、Re、Re、Rf、Rbl、 Rb2、Rd的含量，從而計(jì)算出人參皂苷Rgl、Re、Re、Rf、Rbl、Rb2、Rd的含量，具體數(shù)據(jù)參見(jiàn)表 1 (KH-1600 型薄層色譜掃描儀和 WatersACQUITYUPLC)。
注若樣品為西洋參蜂王漿、養(yǎng)元益腎酒等，則按照前述液體樣品的前處理方式進(jìn)行操作，其他步驟均相同。表 權(quán)利要求
1.一種保健食品中七種人參皂苷含量的測(cè)定方法，其特征在于，包括以下步驟1)樣品預(yù)處理；2)使用反相高效液相色譜柱進(jìn)行色譜分析；3)紫外檢測(cè)器檢測(cè)；4)根據(jù)色譜峰的保留時(shí)間對(duì)其中人參皂苷進(jìn)行定性；5)用外標(biāo)法對(duì)其中人參皂苷含量進(jìn)行定量。
2.如權(quán)利要求1所述的保健食品中七種人參皂苷含量的測(cè)定方法，其特征在于，所述七種人參皂苷為 Rgl、Re、Re、Rf、Rbl、Rb2、Rd0
3.如權(quán)利要求1或2所述的保健食品中七種人參皂苷含量的測(cè)定方法，其特征在于，所述樣品預(yù)處理分固體試樣處理和液體試樣處理。
4.如權(quán)利要求3所述的保健食品中七種人參皂苷含量的測(cè)定方法，其特征在于，所述固體試樣處理如下取片劑或膠囊內(nèi)容物研成粉末，并過(guò)20目篩，精確取該粉末于磨口三角瓶中，準(zhǔn)確加入35-45ml體積比為1 1的乙醇/水溶液，50_60°C超聲30-60min，冷卻后加入少量的乙腈，二次水定容，離心后過(guò)0. 45 μ m膜，濾液進(jìn)行色譜分析。
5.如權(quán)利要求3所述的保健食品中七種人參皂苷含量的測(cè)定方法，其特征在于，所述液體試樣處理如下準(zhǔn)確稱取試樣，加2.5ml體積比為1 1的乙醇/水溶液，超聲溶解均勻，冷卻后加少量的乙腈，二次水定容，離心后過(guò)0. 45 μ m膜，濾液進(jìn)行色譜分析。
6.如權(quán)利要求1或2所述的保健食品中七種人參皂苷含量的測(cè)定方法，其特征在于，所述反相高效液相分析參數(shù)分別為色譜柱:AgilentC18柱，4. 6X 150mm，5 μ m ；柱溫:30°C ； 進(jìn)樣量10μ 1 ；流動(dòng)相乙腈和水。
7.如權(quán)利1或2或6所述的保健食品中七種人參皂苷含量的測(cè)定方法，其特征在于，所述反相高效液相分析包括以下步驟首先，分別配制七種人參皂苷混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，濃度分別為0. 01,0. 05,0. 10,0. 20,0. 50mg/ml ；然后再采用梯度洗脫對(duì)目標(biāo)物進(jìn)行有效分離。
8.如權(quán)利要求1或2所述的保健食品中七種人參皂苷含量的測(cè)定方法，其特征在于，所述紫外檢測(cè)是在205nm處進(jìn)行檢測(cè)。
9.如權(quán)利要求1或2所述的保健食品中七種人參皂苷含量的測(cè)定方法，其特征在于， 將人參皂苷標(biāo)準(zhǔn)溶液和處理好的樣品按相同色譜測(cè)定條件進(jìn)行檢測(cè)，用工作站記錄系統(tǒng)記錄各色譜峰的保留時(shí)間和峰面積，用人參皂苷標(biāo)樣色譜峰的保留時(shí)間對(duì)樣品色譜峰進(jìn)行定性。
10.如權(quán)利要求1所述的保健食品中七種人參皂苷含量的測(cè)定方法，其特征在于，所述人參皂苷含量采用外標(biāo)法進(jìn)行定量。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種保健食品中七種人參皂苷含量的測(cè)定方法，所述七種人參皂苷為Rg1、Re、Rc、Rf、Rb1、Rb2、Rd。所述測(cè)定方法包括以下步驟1)樣品預(yù)處理；2)使用反相高效液相色譜柱進(jìn)行色譜分析；3)紫外檢測(cè)器(UV)檢測(cè)；4)根據(jù)色譜峰的保留時(shí)間對(duì)其中人參皂苷進(jìn)行定性；5)用外標(biāo)法對(duì)其中人參皂苷含量進(jìn)行定量。本發(fā)明有效克服了現(xiàn)有檢測(cè)技術(shù)存在的缺陷，增加了人參皂苷Rf的測(cè)定，能夠更好的分析保健食品中人參皂苷的含量，并能更好的為西洋參和人參的判斷提供依據(jù)，填補(bǔ)了國(guó)內(nèi)相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)中關(guān)于此項(xiàng)內(nèi)容的空白。
文檔編號(hào)G01N30/02GK102183588SQ20101011881
公開(kāi)日2011年9月14日 申請(qǐng)日期2010年3月5日 優(yōu)先權(quán)日2010年3月5日
發(fā)明者宋薇 申請(qǐng)人:上海譜尼測(cè)試技術(shù)有限公司