專(zhuān)利名稱(chēng)：檢測(cè)膀胱癌的裝置的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明關(guān)于一種用于檢測(cè)膀胱癌的裝置，尤其關(guān)于一種用于檢測(cè)受檢者尿液中的鈣激活蛋白酶-9(Calpain-9)，以判斷受檢者是否罹患膀胱癌的裝置。
背景技術(shù)：
膀胱癌是最常發(fā)生于泌尿系統(tǒng)中的惡性腫瘤，全球每年約有十萬(wàn)人罹患膀胱癌， 其中四分之三為男性，且以中老年人居多。一般認(rèn)為膀胱癌的發(fā)生與飲食、抽煙或化學(xué)致癌物質(zhì)(例如砷)等因素有關(guān)。膀胱癌于早期并無(wú)明顯癥狀，一旦出現(xiàn)無(wú)痛性血尿、尿頻、尿痛、小腹脹痛、排尿困難等癥狀時(shí)，通常已進(jìn)入膀胱癌的中晚期，而膀胱癌腫瘤發(fā)展快，且易進(jìn)行遠(yuǎn)處及多處的轉(zhuǎn)移，故一旦發(fā)現(xiàn)罹癌時(shí)，往往已無(wú)法有效地進(jìn)行治療。此外，膀胱癌的復(fù)發(fā)率高，更使其難以根治。因此，若能于膀胱癌早期即發(fā)現(xiàn)罹癌，則可提升治愈率，此更突顯膀胱癌篩檢的重要性。目前常見(jiàn)的膀胱癌檢測(cè)方法包括非侵入性(non-invasive)的尿液細(xì)胞學(xué)(urine cytology)檢查、以及侵入性(invasive)的膀胱鏡檢查與病理組織切片檢查。其中，以細(xì)胞形態(tài)判讀為依據(jù)的尿液細(xì)胞學(xué)檢查的靈敏度與準(zhǔn)確度均偏低，對(duì)于低度變異的細(xì)胞往往無(wú)法進(jìn)行判別，因而影響篩檢結(jié)果。至于膀胱鏡檢查及病理組織切片檢查，其靈敏度與準(zhǔn)確度雖較高，但檢測(cè)費(fèi)用昂貴，且會(huì)造成受檢者的痛苦。因此，臨床上仍亟須一種可方便、快速且準(zhǔn)確地檢測(cè)膀胱癌的方法。本發(fā)明即針對(duì)上述需求所為的研究，本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)膀胱癌患者尿液中具有高濃度的鈣激活蛋白酶-9 (Calpain-9)，從而開(kāi)發(fā)一種檢測(cè)膀胱癌的裝置，其可用于快速且精確地篩檢膀胱癌。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種可方便、快速且準(zhǔn)確地檢測(cè)膀胱癌的裝置。為達(dá)到上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)手段如下一種用于檢測(cè)膀胱癌的裝置，包含一樣本接受墊，用于吸收一尿液樣本；一檢測(cè)試劑墊，連接至該樣本接受墊，且包含一鈣激活蛋白酶-9 (Calpain-9)的第一抗體、以及一與該第一抗體結(jié)合的金屬顆粒；一顯示膜，其連接至該檢測(cè)試劑墊，且包含一檢驗(yàn)區(qū)及一品質(zhì)管控區(qū)；以及一吸收墊，其連接至該顯示膜的該品質(zhì)管控區(qū)，其中，該檢驗(yàn)區(qū)位于該品質(zhì)管控區(qū)與該檢測(cè)試劑墊之間，且包含一固定于該檢驗(yàn)區(qū)上的蛋白質(zhì)，及一結(jié)合至該蛋白質(zhì)上的鈣激活蛋白酶-9，且其中該品質(zhì)管控區(qū)包含一固定于其上的第二抗體，其是該第一抗體的抗體。本發(fā)明的有益效果在于本發(fā)明一種檢測(cè)膀胱癌的裝置利用膀胱癌患者尿液中具有高濃度的鈣激活蛋白酶-9 (Calpain-9)，能夠快速且精確地篩檢膀胱癌。本發(fā)明的詳細(xì)技術(shù)及較佳實(shí)施形態(tài)，將配合附圖而描述于以下內(nèi)容中，以供本發(fā)明所屬領(lǐng)域具通常知識(shí)者據(jù)以明了本發(fā)明的特征。


圖1是本發(fā)明裝置的上視圖；圖2是本發(fā)明裝置的剖面圖；圖3是本發(fā)明裝置的連接示意圖；圖4是本發(fā)明的一實(shí)施形態(tài)的剖面圖；圖5是本發(fā)明裝置的作用原理的示意圖；圖6是本發(fā)明裝置呈陽(yáng)性反應(yīng)的示意圖；以及圖7是本發(fā)明裝置呈陰性反應(yīng)的示意圖。主要元件符號(hào)說(shuō)明1樣本接受墊6 粘著劑2 檢測(cè)試劑墊
7金屬顆粒3 顯示膜8 第一抗體
3A檢驗(yàn)區(qū)9 金屬顆粒-第--抗體復(fù)合體
3B品質(zhì)管控區(qū)10鈣激活蛋白酶-94吸收墊
11第:二抗體5背襯
具體實(shí)施例方式除非文中有另外說(shuō)明，于本說(shuō)明書(shū)中(尤其是在權(quán)利要求中)所使用的“一”、“該” 及類(lèi)似用語(yǔ)應(yīng)理解為包含單數(shù)及數(shù)個(gè)形式。鈣激活蛋白酶(Calpain)是一種鈣依賴(lài)性的細(xì)胞內(nèi)非溶酶體的半胱胺酸蛋白酶家族(calcium-requiring intracellular non-lysosomal cysteine protease family), 其是細(xì)胞增生的調(diào)控劑，且經(jīng)由參與細(xì)胞周期進(jìn)程、細(xì)胞分化及細(xì)胞凋亡等過(guò)程，而于各種癌癥的致癌機(jī)制中扮演關(guān)鍵角色。目前已知有十四種鈣激活蛋白酶，其中，鈣激活蛋白 Sl -9 (Calpain-9)(Yoshikawa et al. , Isolation of two novel genes，down—regulated in gastric cancer. Jpn. J. Cancer Res. 2000，91，459—463，i亥文獻(xiàn)全文并于此處以供參考)。本發(fā)明發(fā)明人利用尿液檢體易于取得的便利性，以及膀胱癌患者尿液中具有高濃度的鈣激活蛋白酶-9的特性，使用鈣激活蛋白酶-9作為膀胱癌的生物腫瘤標(biāo)記，而開(kāi)發(fā)一種用于檢測(cè)膀胱癌的裝置。以下將參照?qǐng)D1及圖2以說(shuō)明根據(jù)本發(fā)明裝置的一實(shí)施形態(tài)，其中，圖1及圖2分別為該實(shí)施形態(tài)的上視圖及剖面圖。如圖1所示，根據(jù)本發(fā)明的用于檢測(cè)膀胱癌的裝置，包含樣本接受墊1、檢測(cè)試劑墊2、顯示膜3、以及吸收墊4，且顯示膜3包含檢驗(yàn)區(qū)3A及品質(zhì)管控區(qū):3B。樣本接受墊1用于吸收受檢者的尿液樣本，以供進(jìn)行尿液中鈣激活蛋白酶-9的檢測(cè)。于此，樣本接受墊1可以滴入尿液樣本或浸泡至尿液樣本中的方式來(lái)吸收該樣本；較佳地，以滴入尿液樣本的方式吸收該樣本，蓋因相較于浸泡方式，滴定方式可更為精確地控制受測(cè)樣本的量，使檢測(cè)結(jié)果具有更高的準(zhǔn)確性。
樣本接受墊1的材料采用對(duì)尿液具良好吸收性，舉例言之，于本發(fā)明的一實(shí)施形態(tài)中，以纖維素纖維作為樣本接受墊的材料。檢測(cè)試劑墊2連接至樣本接受墊1，其包含一鈣激活蛋白酶-9的第一抗體以及一與該第一抗體結(jié)合的金屬顆粒。該第一抗體的來(lái)源并無(wú)特別限制，其可利用一般基因選殖技術(shù)或使用勝肽合成儀來(lái)制得；也可采用將鈣激活蛋白酶-9接種至一動(dòng)物體內(nèi)，使其產(chǎn)生鈣激活蛋白酶-9的抗體的方法來(lái)獲得該第一抗體。此外，該第一抗體經(jīng)該金屬顆粒標(biāo)定 (label)，兩者結(jié)合而形成一金屬顆粒-第一抗體的復(fù)合體。此復(fù)合體的第一抗體可與鈣激活蛋白酶-9結(jié)合，進(jìn)一步形成一金屬顆粒-第一抗體-鈣激活蛋白酶-9的復(fù)合體，其可因金屬顆粒與鈣激活蛋白酶-9間發(fā)生反應(yīng)而呈色。于檢測(cè)試劑墊2中，由于金具有良好的生物相容性，且易經(jīng)由蛋白質(zhì)(或抗體)上的硫氫基(-SH)而與蛋白質(zhì)(或抗體)結(jié)合，故可采用金顆粒作為所需的金屬顆粒。一般采用具納米等級(jí)尺寸的金屬顆粒，較佳為粒徑不大于100納米，更佳為不大于80納米，例如粒徑在15納米至80納米的范圍。此外，可使用任何合宜的材料以提供檢測(cè)試劑墊2，只要其可提供所欲的尿液吸收性。舉例言之，于本發(fā)明一實(shí)施形態(tài)中，以玻璃纖維提供檢測(cè)試劑墊。顯示膜3用于呈現(xiàn)或顯示本發(fā)明裝置的檢測(cè)結(jié)果，以供判斷受檢者是否罹患膀胱癌。顯示膜3連接至檢測(cè)試劑墊2，且包含檢驗(yàn)區(qū)3A及品質(zhì)管控區(qū):3B，其中，檢驗(yàn)區(qū)3A位于品質(zhì)管控區(qū)3B與檢測(cè)試劑墊2之間。檢驗(yàn)區(qū)3A包含一固定(immobilize)于其上的蛋白質(zhì)，及一結(jié)合至該蛋白質(zhì)上的鈣激活蛋白酶-9。該蛋白質(zhì)的功能類(lèi)似于錨，可使鈣激活蛋白酶-9固定于檢驗(yàn)區(qū)3A上。該蛋白質(zhì)的種類(lèi)并無(wú)特別限制，舉例言之，于本發(fā)明一實(shí)施形態(tài)中，以牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)作為該固定于檢驗(yàn)區(qū)3A上的蛋白質(zhì)。借助該蛋白質(zhì)固定于檢驗(yàn)區(qū)3A 上的鈣激活蛋白酶_9，用于捕捉位于檢測(cè)試劑墊2但隨檢測(cè)樣本傳送至檢驗(yàn)區(qū)3A，且尚未與鈣激活蛋白酶-9反應(yīng)的金屬顆粒-第一抗體復(fù)合體。品質(zhì)管控區(qū)IBB包含一固定于其上的第二抗體，其是該第一抗體的抗體。該第二抗體用于捕捉第一抗體，并進(jìn)行呈色反應(yīng)，以供確認(rèn)第一抗體的反應(yīng)活性，借此檢視本發(fā)明裝置的有效性。該第二抗體的來(lái)源并無(wú)特別限制，其可利用一般基因選殖技術(shù)或使用勝肽合成儀來(lái)制得；也可采將第一抗體接種至一動(dòng)物體內(nèi)，使其產(chǎn)生第一抗體的抗體來(lái)獲得該第二抗體。可使用任何合宜的材料以提供顯示膜3，舉例言之，于本發(fā)明一實(shí)施形態(tài)中，以硝化纖維素(nitrocellulose)作為該顯示膜的材料。吸收墊4連接至顯示膜3的品質(zhì)管控區(qū)3B，其用于提供本發(fā)明裝置的毛細(xì)流動(dòng) (capillary flow)或橫向流動(dòng)(lateral flow)的驅(qū)動(dòng)力，故其對(duì)尿液樣本的吸收能力較樣本接受墊1、檢測(cè)試劑墊2及顯示膜3為強(qiáng)。較佳地，于本裝置中，各區(qū)的吸收能力為吸收墊4 >品質(zhì)管控區(qū):3B檢驗(yàn)區(qū)3A檢測(cè)試劑墊2 >樣本接受墊1，以使尿液可輕易地自樣本接受墊1往吸收墊4的方向移動(dòng)，使本發(fā)明裝置發(fā)生作用?？墒褂萌魏魏弦说牟牧弦蕴峁┪諌|4，舉例言之，于本發(fā)明一實(shí)施形態(tài)中，以纖維素纖維作為吸收墊4的材料。一般而言，本發(fā)明裝置中的樣本接受墊1、檢測(cè)試劑墊2、顯示膜3及吸收墊4如圖1及圖2所示般地呈一長(zhǎng)條狀的形式。于此，較佳地，如圖3中虛線處所示，于各相鄰區(qū)的連接處以交互重疊的方式連接，以提供更為緊密的接合。此外，如圖4所示，本發(fā)明裝置可更包含一背襯5，以支撐樣本接受墊1、檢測(cè)試劑墊2、顯示膜3及吸收墊4，其中，可透過(guò)一粘著劑6，使樣本接受墊1、檢測(cè)試劑墊2、顯示膜3及吸收墊4得以粘附于背襯5上，使彼此更緊密連接。以下將參照?qǐng)D5、圖6及圖7，以進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明裝置的作用。就膀胱癌患者而言，當(dāng)將其尿液樣本滴定至樣本接受墊1，或?qū)颖窘邮軌|1浸泡于尿液樣本中，然后橫置本發(fā)明裝置時(shí)，尿液會(huì)借助毛細(xì)作用原理以及吸收墊4所提供的驅(qū)動(dòng)力，向吸收墊4的方向移動(dòng)。當(dāng)尿液移動(dòng)至檢測(cè)試劑墊2時(shí)，因膀胱癌患者尿液中具有高濃度的鈣激活蛋白酶-9， 其會(huì)與檢測(cè)試劑墊2中由金屬顆粒7與第一抗體8所組成的金屬顆粒-第一抗體復(fù)合體9 結(jié)合，而形成一金屬顆粒-第一抗體-鈣激活蛋白酶-9復(fù)合體。此復(fù)合體會(huì)隨著尿液繼續(xù)移動(dòng)至顯示膜3的檢驗(yàn)區(qū)3A。于此，由于此復(fù)合體上的第一抗體8已與尿液樣本中的鈣激活蛋白酶-9結(jié)合，故不會(huì)與固定于檢驗(yàn)區(qū)3A上的鈣激活蛋白酶-9結(jié)合，因此，此復(fù)合體會(huì)繼續(xù)往品質(zhì)管控區(qū)3B的方向移動(dòng)；而固定于檢驗(yàn)區(qū)3A上的鈣激活蛋白酶-910則因無(wú)法與第一抗體8結(jié)合，遂無(wú)法與金屬顆粒7反應(yīng)而呈色，因此，在檢驗(yàn)區(qū)3A處不會(huì)有呈色反應(yīng)。 隨后，當(dāng)金屬顆粒-第一抗體-鈣激活蛋白酶-9復(fù)合體移動(dòng)至品質(zhì)管控區(qū):3B時(shí)，固定于品質(zhì)管控區(qū):3B上的第二抗體11會(huì)與此復(fù)合體上的第一抗體8結(jié)合，使該復(fù)合體固定于品質(zhì)管控區(qū):3B處而呈色，至于過(guò)量而無(wú)法與第二抗體11結(jié)合的復(fù)合體則繼續(xù)往吸收墊4移動(dòng)。 因此，對(duì)于罹患膀胱癌的受檢者而言，其尿液樣本經(jīng)本發(fā)明裝置的檢測(cè)分析后，會(huì)于顯示膜 3上呈現(xiàn)單一色帶，即于品質(zhì)管控區(qū):3B所呈現(xiàn)的色帶(如圖6所示)，說(shuō)明第一抗體具有反應(yīng)活性，故本發(fā)明裝置運(yùn)作正常，且也說(shuō)明此測(cè)試結(jié)果為膀胱癌的陽(yáng)性反應(yīng)。另一方面，就正常受檢者(即，未罹患膀胱癌的受檢者)而言，當(dāng)將其尿液樣本滴定至樣本接受墊1，或?qū)颖窘邮軌|1浸泡于其尿液樣本中，然后橫放本發(fā)明裝置時(shí)，尿液會(huì)借助毛細(xì)作用原理以及吸收墊4所提供的驅(qū)動(dòng)力向吸收墊4的方向移動(dòng)。當(dāng)尿液移動(dòng)至檢測(cè)試劑墊2時(shí)，因膀胱癌患者尿液中不具有鈣激活蛋白酶_9，或鈣激活蛋白酶-9濃度過(guò)低，故檢測(cè)試劑墊2中由金屬顆粒7及第一抗體8所組成的金屬顆粒-第一抗體復(fù)合體 9以未與鈣激活蛋白酶-9結(jié)合的形式，而隨著尿液移動(dòng)至顯示膜3的檢驗(yàn)區(qū)3A。于此，金屬顆粒-第一抗體復(fù)合體9上的第一抗體8會(huì)與固定于檢驗(yàn)區(qū)3A上的鈣激活蛋白酶-910 結(jié)合，使金屬顆粒-第一抗體復(fù)合體9固定于檢驗(yàn)區(qū)3A處，且使鈣激活蛋白酶-910與金屬顆粒-第一抗體復(fù)合體9上的金屬顆粒7發(fā)生反應(yīng)而呈色，因而在檢驗(yàn)區(qū)3A處發(fā)生呈色反應(yīng)，而出現(xiàn)一色帶。隨后，過(guò)量而無(wú)法與固定于檢驗(yàn)區(qū)3A上的鈣激活蛋白酶-910結(jié)合的金屬顆粒-第一抗體復(fù)合體9會(huì)繼續(xù)往品質(zhì)管控區(qū):3B的方向移動(dòng)，當(dāng)其移動(dòng)至品質(zhì)管控區(qū):3B 時(shí)，固定于品質(zhì)管控區(qū)3B上的第二抗體11會(huì)與金屬顆粒-第一抗體復(fù)合體9上的第一抗體8結(jié)合，使金屬顆粒-第一抗體復(fù)合體9固定于品質(zhì)管控區(qū):3B處而呈色，過(guò)量而無(wú)法與第二抗體11結(jié)合的金屬顆粒-第一抗體復(fù)合體9則繼續(xù)往吸收墊4移動(dòng)。因此，對(duì)于正常受檢者而言，其尿液樣本經(jīng)本發(fā)明裝置的檢測(cè)分析后，會(huì)于顯示膜3上呈現(xiàn)兩個(gè)色帶，即于檢驗(yàn)區(qū)3A與品質(zhì)管控區(qū):3B所呈現(xiàn)的色帶(如圖7所示)，說(shuō)明第一抗體具有反應(yīng)活性，故本發(fā)明裝置運(yùn)作正常，且也說(shuō)明此測(cè)試結(jié)果為膀胱癌的陰性反應(yīng)。于任何情形中，若品質(zhì)管控區(qū):3B未呈現(xiàn)色帶，則代表該裝置失效，須重新使用另一裝置再行檢測(cè)。
綜上，本發(fā)明提供一種檢測(cè)膀胱癌的裝置，其可方便、快速且準(zhǔn)確地進(jìn)行膀胱癌的早期檢測(cè)，且可用于監(jiān)測(cè)膀胱癌是否復(fù)發(fā)。茲以下列具體實(shí)施形態(tài)以進(jìn)一步例示說(shuō)明本發(fā)明。其中該些實(shí)施形態(tài)僅提供作為說(shuō)明，而非用以限制本發(fā)明的范疇。制備例依以下步驟制備本發(fā)明裝置中的樣本接受墊、檢測(cè)試劑墊、顯示膜、以及吸收墊。制備樣本接受墊及吸收墊樣本接受墊及吸收墊使用一材質(zhì)為非織物、100%純纖維素纖維的墊片(C048， Millipore，馬薩諸塞州，美國(guó))。樣本接受墊裁成15X300毫米的尺寸，并使其浸泡于一包含20毫摩爾濃度/公升硼酸鈉、2. 0重量/體積％蔗糖、2. 0重量/體積％牛血清白蛋白、 以及0. 1重量/體積％疊氮化鈉的緩沖液(pH 8. 0)中，再于56°C下干燥1小時(shí)。吸收墊則裁成40X300毫米的尺寸。將樣本接收墊及吸收墊置于室溫下，以干燥劑儲(chǔ)存。制備檢測(cè)試劑墊使用一含有8. 75重量/體積％蔗糖、8. 75重量/體積％牛血清白蛋白、0. 6摩爾/ 公升氯化鈉、10毫摩爾/公升乙二胺四乙酸(EDTA)、及0. 1重量/體積％疊氮化鈉的硼酸鈉緩沖液(PH 8.0，20毫摩爾/公升)稀釋膠體狀的經(jīng)金(Ag)結(jié)合標(biāo)定的鈣激活蛋白酶-9 的單株抗體至最終濃度為2微克/毫升，以制備一檢測(cè)試劑溶液。將一尺寸為7X300毫米的玻璃纖維墊(型號(hào)GFCP203000，4004311，Millipore，馬薩諸塞州，美國(guó))浸泡于該檢測(cè)試劑溶液中，再于56°C下干燥1小時(shí)，以制備一檢測(cè)試劑墊。將該檢測(cè)試劑墊置于室溫下， 以干燥劑儲(chǔ)存。制備顯示膜[制備檢驗(yàn)區(qū)試劑]利用一般基因工程技術(shù)將鈣激活蛋白酶-9連結(jié)至牛血清白蛋白上(即，鈣激活蛋白酶-9-BSA)，以作為檢驗(yàn)區(qū)的試劑。將5毫克鈣激活蛋白酶-9-BSA溶于4毫升氯化氫 (0. 01摩爾/公升，冷卻至0至5°C )中，并與10毫克亞硝酸鈉混合。于4°C下攪拌該混合物達(dá)6小時(shí)后，添加2毫升磷酸鹽緩沖液(0. 1摩爾/公升，pH 8. 6，含有20毫克牛血清白蛋白)，并于4°C下再次攪拌該混合物達(dá)6小時(shí)。將所得溶液置于室溫下一夜，再以kphadex G-50(購(gòu)自Roche公司，美國(guó))過(guò)濾或以透析方式(使用一磷酸鹽(PBQ緩沖液(含有8公克氯化鈉、0. 2公克氯化鉀、1. 44公克磷酸氫二鈉、0. 24公克磷酸二氫鉀(溶于1公升二次水中)純化鈣激活蛋白酶-9-BSA，即制得檢驗(yàn)區(qū)的試劑。[制備品質(zhì)管控區(qū)試劑]使用羊的抗老鼠免疫球蛋白(Goat anti-mouse immunoglobulin)作為品質(zhì)管控區(qū)的試劑。以?xún)尚瞧谝淮蔚闹芷?，將老鼠的鈣激活蛋白酶-9抗體(即第一抗體)的免疫球蛋白G(先以Freimd's complete佐劑(Pierce，伊利諾伊州，美國(guó))進(jìn)行均質(zhì)化一次，再以 Freund' s incomplete佐劑進(jìn)行其余均質(zhì)化程序)接種至一羊體內(nèi)，使其產(chǎn)生抗體(即第二抗體)，共進(jìn)行四次。在最后一次接種后，使該羊流血達(dá)14天，并收集血清。根據(jù)產(chǎn)品說(shuō)明，使用一蛋白質(zhì)-G 親合性管柱(protein-G affinity column，Amersham Biosciences， Uppsala，瑞士)自血清中純化出羊的抗老鼠免疫球蛋白G抗體(第二抗體)，即制得品質(zhì)管控區(qū)的試劑。
[固定檢驗(yàn)區(qū)與品質(zhì)管控區(qū)的試劑]將以上制備的鈣激活蛋白酶-9-BSA與羊的抗老鼠免疫球蛋白G分別以PB S稀釋至1.0毫克/毫升的濃度，并使用一連接至XYZ Biostrip分散器(Bio-Dot，加州，美國(guó)) 的Quanti 3000 Biojets，以50點(diǎn)/微升/厘米的點(diǎn)狀形式，分別施用及固定鈣激活蛋白酶-9-BSA與羊的抗老鼠免疫球蛋白G至一膜(HiFlow Plus Cellulose Ester Membrane, 300X25毫米，Millipore, Bedford，馬薩諸塞州，美國(guó))上，以完成包含一檢驗(yàn)區(qū)與一品質(zhì)管控區(qū)的顯示膜。該顯示膜的毛細(xì)流動(dòng)時(shí)間(capillary flow time)為180秒/4厘米，且厚度為135微米。于40°C下干燥1小時(shí)后，將該顯示膜密封并置于干燥環(huán)境及室溫下儲(chǔ)存。組裝本發(fā)明的裝置于一塑料襯板上依序粘貼以上制得的樣本接受墊、檢測(cè)試劑墊、顯示膜與吸收墊， 并于兩端覆蓋彩色薄膜，再使用一 CM 4000裁切器(Bio-Dot，加州，美國(guó))將粘貼好的墊片裁切成3毫米寬的長(zhǎng)條，即制得本發(fā)明的裝置。將本發(fā)明裝置密封于一塑料袋中，并以干燥劑儲(chǔ)存于4°C下備用。上述實(shí)施例僅用以例示說(shuō)明本發(fā)明的原理及功效，而非用于限制本發(fā)明。任何熟于此項(xiàng)技藝的人士均可在不違背本發(fā)明的技術(shù)原理及精神的情況下，對(duì)上述實(shí)施例進(jìn)行修改及變化。因此，本發(fā)明的權(quán)利保護(hù)范圍應(yīng)如后述的申請(qǐng)專(zhuān)利范圍所列者。
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權(quán)利要求
1.一種用于檢測(cè)膀胱癌的裝置，其特征在于包含一個(gè)樣本接受墊，用于吸收尿液樣本；一個(gè)檢測(cè)試劑墊，連接至該樣本接受墊，且包含鈣激活蛋白酶-9 (Calpain-9)的第一抗體、以及與該第一抗體結(jié)合的金屬顆粒；一個(gè)顯示膜，其連接至該檢測(cè)試劑墊，且包含一個(gè)檢驗(yàn)區(qū)及一個(gè)品質(zhì)管控區(qū)；以及一個(gè)吸收墊，其連接至該顯示膜的該品質(zhì)管控區(qū)，其中，該檢驗(yàn)區(qū)位于該品質(zhì)管控區(qū)與該檢測(cè)試劑墊之間，且包含固定于該檢驗(yàn)區(qū)上的蛋白質(zhì)，及結(jié)合至該蛋白質(zhì)上的鈣激活蛋白酶-9，且其中該品質(zhì)管控區(qū)包含固定于其上的第二抗體，該第二抗體是該第一抗體的抗體。
2.如權(quán)利要求1所述的裝置，其特征在于，該樣本接受墊及該吸收墊的材料是纖維素纖維。
3.如權(quán)利要求1所述的裝置，其特征在于，該檢測(cè)試劑墊中的金屬顆粒的粒徑為小于或等于100納米。
4.如權(quán)利要求3所述的裝置，其特征在于，該檢測(cè)試劑墊中的金屬顆粒的粒徑為小于或等于80納米。
5.如權(quán)利要求3或4所述的裝置，其特征在于，該檢測(cè)試劑墊中的金屬顆粒是金顆粒。
6.如權(quán)利要求1所述的裝置，其特征在于，該檢測(cè)試劑墊的材料是玻璃纖維。
7.如權(quán)利要求1所述的裝置，其特征在于，該固定于該檢驗(yàn)區(qū)上的蛋白質(zhì)是牛血清白蛋白(bovine serum albumin)。
8.如權(quán)利要求1所述的裝置，其特征在于，該顯示膜的材料是硝化纖維素 (nitrocellulose)。
9.如權(quán)利要求1所述的裝置，其特征在于，該樣本接受墊供以浸泡尿液樣本的方式來(lái)吸收該樣本。
10.如權(quán)利要求1所述的裝置，其特征在于，該樣本接受墊供以滴入尿液樣本的方式來(lái)吸收該樣本。
全文摘要
一種用于檢測(cè)膀胱癌的裝置，其包含一樣本接受墊，用于吸收一尿液樣本；一檢測(cè)試劑墊，連接至該樣本接受墊，且包含一鈣激活蛋白酶-9的第一抗體、以及一與該第一抗體結(jié)合的金屬顆粒；一顯示膜，連接至該檢測(cè)試劑墊，且包含一檢驗(yàn)區(qū)及一品質(zhì)管控區(qū)；以及一吸收墊，其連接至該顯示膜的該品質(zhì)管控區(qū)，其中，該檢驗(yàn)區(qū)位于該品質(zhì)管控區(qū)與該檢測(cè)試劑墊之間，且包含一固定于該檢驗(yàn)區(qū)上的蛋白質(zhì)，及一結(jié)合至該蛋白質(zhì)上的鈣激活蛋白酶-9，且其中該品質(zhì)管控區(qū)包含一固定于其上的第二抗體，其是該第一抗體的抗體。本裝置可方便、快速且準(zhǔn)確地檢測(cè)膀胱癌。
文檔編號(hào)G01N33/574GK102338803SQ201010238920
公開(kāi)日2012年2月1日 申請(qǐng)日期2010年7月28日 優(yōu)先權(quán)日2010年7月28日
發(fā)明者陳黎明, 高忠漢 申請(qǐng)人:陳黎明, 高忠漢