專利名稱：血液中多巴胺的電化學快速檢測方法
技術領域：
本發(fā)明涉及到臨床醫(yī)學檢測技術領域，特別是血液中多巴胺的檢測方法。
技術背景
多巴胺是存在于生命體內的小分子物質。它的檢測具有重要的醫(yī)學參考價值。
多巴胺(DA)是哺乳動物體內一種非常重要的神經遞質，用來幫助細胞傳送脈沖化學物質。它廣泛分布于中樞神經系統(tǒng)，中腦和人體體液中。主要負責大腦的感情、感覺， 傳遞興奮及開心的信息，與上癮也有關。由于吸煙和吸毒都可以增加多巴胺的分泌，從而使上癮者感到開心及興奮。而多巴胺不足則會令人失去控制肌肉的能力，嚴重會令人的手腳不自主地震動導致帕金森氏癥或者失去控制個人情緒的能力而導致精神分裂癥、雙相情感障礙、和阿爾茲海默癥等多種精神類疾病。此外，多巴胺是去甲基腎上腺素的前體物質， 是下丘腦和腦垂體腺中的一種關鍵神經遞質，中樞神經系統(tǒng)中多巴胺的濃度受精神因素的影響；多巴胺作為中腦的神經原物質，則直接影響人們的情緒。所以人之所以有思想，有感覺，對一些事物有熱烈追求，這都來自我們大腦內多巴胺的化學作用，所以多巴胺的不足還會令人失去控制個人情緒的能力，這是由于多巴胺在人體中特定區(qū)域內濃度分布的多寡會直接影響到垂體內分泌作用的協(xié)調，并直接作用于神經系統(tǒng)的一系列活動，從而達到調節(jié)情緒的能力。
另外，多巴胺還具有興奮心臟、增加腎血流量的作用，可用于治療心肌梗塞、腎功能衰竭、充血性心力衰竭等引起的休克綜合征。因此，對其測定方法的研究無論是在神經生理學研究還是在疾病診斷及相關藥物的質量控制和臨床應用方面都有重要意義。目前，測定多巴胺的方法有色譜法和熒光光度法。用于修飾電極測定DA也有報道、電聚合膜法、自組裝膜法。因為多巴胺分子內含有兩個容易被氧化的酚羥基，具有很高的電化學活性，所以可用電化學方法直接測定。但是，多巴胺氧化產物的吸附會使電極污染，而導致電化學測定多巴胺的選擇性和重現(xiàn)性較差。
然而，在以碳材料、貴金屬材料等各類基體電極作為電化學檢測器時，多巴胺的電化學檢測卻常常受到體內共存組分抗壞血酸和尿酸的干擾。因此通過化學修飾電極法提高測定多巴胺的選擇性成為該類研究的熱點。發(fā)明內容
本發(fā)明目的在于發(fā)明一種成本低、便捷式快速檢測血液中多巴胺的方法。
本發(fā)明采用電化學法，以修飾多壁碳納米管/膽堿的玻碳電極為工作電極，將血液樣品用中性磷酸緩沖溶液稀釋，在-0. 4V 0. 8V的電位范圍內做循環(huán)伏安掃描，根據(jù)所得電化學曲線，對血液中多巴胺的含量進行初步定性分析和定量分析。
如被檢測的血液樣品中含有多巴胺，則經電化學掃描后，多巴胺會吸附在修飾后的工作電極表面發(fā)生氧化還原反應。采用循環(huán)伏安法，在循環(huán)伏安曲線上0.2V左右如出現(xiàn)相應的氧化還原峰，則證明血液樣品中含有多巴胺；如無，則說明血液樣品中不含這個物質。
因此，初步鑒定血液樣品中是否含有多巴胺只需1 lOmin，本發(fā)明快捷、準確、方便。
多壁碳納米管具有抗污染，穩(wěn)定性好等特點。因此，使用過的修飾電極只需用超純水沖洗即可再次使用。
在檢測限內，如血液樣品中含有多巴胺，在制得的循環(huán)伏安曲線中，在-0.4V 0.8V電位范圍內就會出現(xiàn)相應的氧化還原峰。反之就沒有峰。多巴胺的測量方法是峰電流與相應的多巴胺的濃度成正比，可用標準加入法或工作曲線法或其它方法定量檢測血液樣品中多巴胺的含量。
故，本發(fā)明樣品不需預處理，檢測方法簡單，測定時間只需1 lOmin，較現(xiàn)行方法快速。且抗干擾能力強，成本低，不需要復雜的儀器設備。
本發(fā)明所述工作電極為經過多壁碳納米管/膽堿修飾的玻碳電極。
稀釋緩沖溶液為中性磷酸緩沖溶液。


圖為含有多巴胺血液樣品的循環(huán)伏安圖。
具體實施方式
一、定性檢測
檢測方法電化學法，如循環(huán)伏安法。
電極工作電極為經多壁碳納米管/膽堿修飾的玻碳電極。對電極用鉬片電極，參比電極用銀-氯化銀電極或飽和甘汞電極。
電解質溶液中性磷酸緩沖溶液
操作方法、初步分析
循環(huán)伏安法
將三電極插入用中性磷酸緩沖溶液稀釋的血液樣品中，循環(huán)伏安掃描，制得循環(huán)伏安圖，觀察在-0. 4V 0. 8V電位范圍內是否有相應的氧化還原峰。
結果
若再-0. 4V 0. 8V電位范圍內出現(xiàn)相應的氧化還原峰，如圖所示，表明血液樣品中含有多巴胺。
若無，表明在檢測限內血液樣品中不含多巴胺。
二、定量測定
檢測方法電化學法，如循環(huán)伏安法。
電極工作電極為經多壁碳納米管/膽堿修飾的玻碳電極。對電極用鉬片電極，參比電極用銀-氯化銀電極或飽和甘汞電極。
電解質溶液中性磷酸緩沖溶液
操作方法
將經過以上使用的工作電極，經超純水清洗后，再移入一系列濃度多巴胺的中性磷酸緩沖溶液中，作出循環(huán)伏安掃描或差分脈沖掃描或線性伏安掃描或方波伏安掃描圖。
結果
在循環(huán)伏安圖上在-0. 4V 0. 8V電位范圍內有相應的氧化還原峰，如圖所示，表明血液樣品中含有多巴胺。如用循環(huán)伏安掃描或線性伏安掃描或方波伏安掃描，則在伏安曲線圖上-0. 4V 0. 8V電位范圍內有相應的氧化峰或還原峰，表明血液樣品中有多巴胺。 峰電流與多巴胺的濃度成正比，與多巴胺的標準樣的峰電流值進行比較，用標準加入法或工作曲線法或其它方法定量檢測血液樣品中的多巴胺的含量。
三、樣品的處理
將得到的血液樣品用中性磷酸緩沖溶液稀釋到一定濃度即可。
權利要求
1.血液中多巴胺的電化學快速檢測方法，其特征在于采用電化學法，以修飾多壁碳納米管/膽堿的玻碳電極為工作電極，將血液樣品用中性磷酸緩沖溶液稀釋，在-0. 4V 0. 8V 的電位范圍內做循環(huán)伏安掃描，根據(jù)所得電化學曲線，對血液中多巴胺的含量進行初步定性分析和定量分析。
2.根據(jù)權利要求1所述血液中多巴胺的電化學快速檢測方法，其特征在于將經過多壁碳納米管/膽堿修飾的玻碳電極移入溶有一定濃度的多巴胺的中性磷酸緩沖溶液中作循環(huán)伏安掃描或差分脈沖掃描或線性伏安掃描或方波伏安掃描，根據(jù)制得的伏安曲線對多巴胺進行準確的定性和定量分析。
3.根據(jù)權利要求1和2所述血液中多巴胺的電化學快速檢測方法，其特征在于所述工作電極為經過多壁碳納米管/膽堿修飾的玻碳電極。
4.根據(jù)權利要求1和2所述血液中多巴胺的電化學快速檢測方法，其特征在于所述中性溶液為磷酸緩沖溶液。
全文摘要
血液中多巴胺的電化學快速測定方法，涉及到臨床醫(yī)學檢測技術領域，特別是血液中多巴胺的檢測方法。采用電化學方法，以修飾多壁碳納米管/膽堿的玻碳電極為工作電極，將多巴胺溶于中性磷酸緩沖溶液中，在-0.4V～0.8V的電位范圍內做循環(huán)伏安掃描，根據(jù)所得電化學曲線，對血液中多巴胺的含量進行初步定性分析和定量分析。觀察在循環(huán)伏安曲線上0.2V左右如出現(xiàn)相應的氧化還原峰，則證明血樣中含有多巴胺；如無，則說明血樣中不含這種物質。因此，初步鑒定血樣中是否含有多巴胺只需1～10min，本發(fā)明快捷、準確、方便。
文檔編號G01N27/48GK102495126SQ201110406860
公開日2012年6月13日 申請日期2011年12月9日 優(yōu)先權日2011年12月9日
發(fā)明者丁振東, 夏曉莉, 季文艷, 宋啟霞, 張華 , 王海軍, 許冰冰, 馬潔 申請人:江南大學