一種基于穩(wěn)定同位素比值鑒別冬蟲夏草產(chǎn)地的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種基于穩(wěn)定同位素比值鑒別冬蟲夏草產(chǎn)地的方法，屬冬蟲夏草真實性鑒別【技術(shù)領(lǐng)域】。主要步驟如下：（1）采用穩(wěn)定同位素質(zhì)譜技術(shù)測定真實產(chǎn)地冬蟲夏草樣品的δ15N值，構(gòu)建真實產(chǎn)地冬蟲夏草樣品δ15N數(shù)據(jù)庫；（2）測定待測冬蟲夏草樣品的δ15N值；（3）將待測樣品的δ15N值與數(shù)據(jù)庫中真實產(chǎn)地冬蟲夏草樣品δ15N值進行顯著性差異分析，若無顯著差異這表明待測樣品與真實樣品來自于同一產(chǎn)地，反之則表明來自不同的產(chǎn)地。本發(fā)明利用穩(wěn)定同位素質(zhì)譜技術(shù)建立了一種能夠準(zhǔn)確鑒別冬蟲夏草產(chǎn)地的方法，解決我國冬蟲夏草產(chǎn)地的市場監(jiān)管存在的技術(shù)難題，利于規(guī)范市場行為，保護消費者和企業(yè)的合法權(quán)益，促進冬蟲夏草產(chǎn)業(yè)的健康有序發(fā)展。
【專利說明】一種基于穩(wěn)定同位素比值鑒別冬蟲夏草產(chǎn)地的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于藥材鑒別領(lǐng)域，具體涉及一種冬蟲夏草的產(chǎn)地鑒別方法。
【背景技術(shù)】
[0002]冬蟲夏草是我國青藏高原地區(qū)的珍稀物種資源，具有提高人體免疫力、抗腫瘤等保健功能和特殊藥效，其有效作用在民間已得到廣泛的認(rèn)可。
[0003]冬蟲夏草的產(chǎn)地屬性是衡量其價值的重要指標(biāo)，不同產(chǎn)地的冬蟲夏草在營養(yǎng)成分和功能上具有明顯差別，價值上也存在差異。然而我國尚缺乏冬蟲夏草產(chǎn)地有效鑒別的技術(shù)手段和方法，僅僅依靠企業(yè)自律和現(xiàn)有的標(biāo)準(zhǔn)管理體系無法有效規(guī)范市場，極少部分企業(yè)受到利益驅(qū)動，利用假冒偽劣冬蟲夏草冒充優(yōu)質(zhì)產(chǎn)地冬蟲夏草，獲取高額利潤，對冬蟲夏草市場造成較大沖擊，不利于我國冬蟲夏草產(chǎn)業(yè)的良性發(fā)展和有序競爭，同時損害了消費者的利益和知情權(quán)。因此開發(fā)一種能夠有效鑒別冬蟲夏草產(chǎn)地的技術(shù)方法對于規(guī)范市場行為，促進我國冬蟲夏草產(chǎn)業(yè)健康發(fā)展，維護合法企業(yè)和消費者利益具有十分重要的現(xiàn)實意義。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的是提供一種用于冬蟲夏草原冬蟲夏草產(chǎn)地鑒別的可靠方法。
[0005]為達到上述目的，本發(fā)明的發(fā)明人經(jīng)過多年研究發(fā)現(xiàn)，不同地區(qū)的冬蟲夏草在形成過程中，不斷與外界環(huán)境進行物質(zhì)交換，從冬蟲夏草侵染幼蟲到菌絲長滿幼蟲蟲體的整個過程中，蟲草處于土壤下，其體內(nèi)物質(zhì)組成受當(dāng)?shù)赝寥烙绊戄^大，待蟲草長出子座后與空氣直接接觸，受到當(dāng)?shù)乜諝?、雨水等其他環(huán)境因素的影響，冬蟲夏草體內(nèi)同位素(如N)受土壤、空氣、氣候條件等因素影響而發(fā)生自然分餾效應(yīng)，導(dǎo)致不同產(chǎn)地冬蟲夏草體內(nèi)同位素自然豐度的差異；成熟冬蟲夏草的同位素豐度在一定程度上能夠反映所處環(huán)境的同位素特征。因此利用穩(wěn)定同位素比值質(zhì)譜檢測冬蟲夏草中氮穩(wěn)定同位素的比值差異可鑒別不同產(chǎn)地的冬蟲夏草。
[0006]本發(fā)明采用穩(wěn)定同位素比值質(zhì)譜儀對來自真實產(chǎn)地的冬蟲夏草中氮同位素比值進行了測定，通過對待測冬蟲夏草樣品進行氮穩(wěn)定同位素比值測定，然后將待測樣品氮穩(wěn)定同位素比值與參考的真實產(chǎn)地冬蟲夏草氮穩(wěn)定同位素比值進行顯著性差異分析，若無顯著差異則表明待測樣品與真實樣品來自于同一產(chǎn)地，反之則表明來自不同的產(chǎn)地。
[0007]優(yōu)選的，在實施本發(fā)明過程中，可構(gòu)建真實產(chǎn)地冬蟲夏草S 15N值數(shù)據(jù)庫，從而在使用本發(fā)明的方法鑒別冬蟲夏草產(chǎn)地時，不需要每次都測定真實產(chǎn)地冬蟲夏草S 15N值，而是使用已經(jīng)建立的真實產(chǎn)地冬蟲夏草S 15N值數(shù)據(jù)庫。
[0008]當(dāng)然，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以選擇在同一檢測周期內(nèi)，既測定真實產(chǎn)地冬蟲夏草s 15N,有測定待測樣品中的S15Ntj
[0009]優(yōu)選的，本發(fā)明的真實產(chǎn)地冬蟲夏草樣品是從冬蟲夏草主產(chǎn)區(qū)實地采集獲得的真實樣品。[0010]本發(fā)明的真實產(chǎn)地冬蟲夏草5 15N值數(shù)據(jù)庫可通過如下方法構(gòu)建:采集樣品，其中任一產(chǎn)地至少采集10個以上不同草甸的樣品，然后測定樣品的5 15N值，建立真實產(chǎn)地冬蟲夏草S 15N值數(shù)據(jù)庫，其中采用統(tǒng)計學(xué)方法分析原產(chǎn)地樣品的S 15N值與產(chǎn)地的相關(guān)性。
[0011]本發(fā)明中樣品的5 15N值測定方法為:取冬蟲夏草樣品I根(0.2-0.4g)，采用組織粉碎儀將樣品粉碎為粉末狀，組織粉碎儀粉碎條件為1600 rpm,5 min,先經(jīng)過元素分析儀轉(zhuǎn)化為純凈的N2氣體，再經(jīng)過型號為稀釋儀，最后進入質(zhì)譜儀進行檢測。元素分析儀工作參數(shù)為:進樣器氦氣吹掃流量為200ml ? mirT1，氧化爐溫度為980°C，還原爐溫度為650°C，載氣氦氣流量為90 ml ?mirT1。稀釋儀條件設(shè)定:氦氣稀釋壓力為0.6 bar，N2參考氣壓力為 0.6 bar o
[0012]本發(fā)明經(jīng)過充分的前期試驗摸索和優(yōu)化，發(fā)明的方法穩(wěn)定可靠，且無需復(fù)雜的前處理過程，操作簡單，成本低，解決了冬蟲夏草產(chǎn)地鑒別的技術(shù)問題，有利于促進冬蟲夏草產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展，具有良好的應(yīng)用前景。
[0013]
【專利附圖】

【附圖說明】
[0014]附圖1不同產(chǎn)地冬蟲夏草樣品S 15N統(tǒng)計，其中QH代表青海，SC代表四川，YN代表云南，NBR代表尼泊爾
具體實施案例
下面結(jié)合實施案例對本發(fā)明進行具體說明，實施案例是為了進一步闡述本發(fā)明，而不會給本發(fā)明造成任何限制。
[0015]實施例一:真實產(chǎn)地冬蟲夏草樣品的S 15N測定
1.1真實產(chǎn)地樣品的采集
實地采集來自我國青海省、四川省、云南省以及尼泊爾的12個不同產(chǎn)區(qū)冬蟲夏草樣品，每個產(chǎn)區(qū)采集10個不同草甸上生長的樣品，詳見下表1。
[0016]表1真實產(chǎn)地樣品的米集列表
【權(quán)利要求】
1.一種基于氮穩(wěn)定同位素比值鑒別冬蟲夏草產(chǎn)地的方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟: 測定待測冬蟲夏草樣品的S 15N值； 將待測樣品的S 15N值在真實產(chǎn)地冬蟲夏草樣品S 15N值數(shù)據(jù)庫中進行顯著性差異分析，若無顯著差異則表明待測樣品與真實樣品來自于同一產(chǎn)地，反之則表明來自不同的產(chǎn)地。
2.根據(jù)權(quán)利要求1-2中任一項所述的方法，其特征在于，采用穩(wěn)定同位素質(zhì)譜技術(shù)測定冬蟲夏草樣品的S 15N值。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，測定樣品S15N值前，利用組織粉碎儀將冬蟲夏草樣品粉碎成細微粉末。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，組織粉碎儀的粉碎條件為1600rpm,5miri。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于，粉碎后的冬蟲夏草樣品采用FlashEA1112型元素分析儀轉(zhuǎn)化為純凈N2氣體后經(jīng)稀釋儀進入同位素質(zhì)譜儀進行測定。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，在將樣品轉(zhuǎn)化為純凈N2氣體過程中，元素分析儀工作參數(shù)為:進樣器氦氣吹掃流量為200ml IirT1,氧化爐溫度為1020°C，還原爐溫度為650°C，載氣氦氣流量為90 ml ? min—1。
【文檔編號】G01N27/62GK103645238SQ201310668819
【公開日】2014年3月19日 申請日期:2013年12月11日 優(yōu)先權(quán)日:2013年12月11日
【發(fā)明者】程池, 扎西才吉, 李輝, 姚粟, 劉洋, 白飛榮, 鐘其頂 申請人:中國食品發(fā)酵工業(yè)研究院, 玉樹藏族自治州三江源藥業(yè)有限公司