用于農(nóng)藥西維因檢測(cè)的電化學(xué)發(fā)光傳感器及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種基于鈷酞菁模擬酶性質(zhì)、乙醇淬滅特性的農(nóng)藥西維因電化學(xué)發(fā)光方法的建立，屬于電化學(xué)發(fā)光傳感領(lǐng)域。首先利用簡(jiǎn)單的平衡吸附法制備了鈷酞菁和石墨烯氧化物的復(fù)合材料（GO-CoPc）；然后將其修飾在玻碳電極表面，利用復(fù)合材料的模擬酶性質(zhì)和信號(hào)放大作用，以luminol為發(fā)光劑，乙醇為信號(hào)淬滅劑構(gòu)建電化學(xué)發(fā)光傳感平臺(tái)；進(jìn)一步在體系中加入不同濃度的西維因標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行測(cè)定，得到西維因濃度和電化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度之間的對(duì)應(yīng)關(guān)系，建立了靈敏檢測(cè)農(nóng)藥西維因的傳感平臺(tái)。本發(fā)明旨在發(fā)明一種制備工藝簡(jiǎn)單，靈敏度高、檢測(cè)成本低的電化學(xué)發(fā)光西維因傳感器。
【專利說(shuō)明】用于農(nóng)藥西維因檢測(cè)的電化學(xué)發(fā)光傳感器及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種利用鈷酞菁模擬酶性質(zhì)、乙醇淬滅發(fā)光信號(hào)特性構(gòu)建檢測(cè)平臺(tái)的電化學(xué)發(fā)光傳感器及其制備方法，尤其涉及用于農(nóng)藥西維因檢測(cè)的電化學(xué)發(fā)光傳感器及其制備方法，屬于電化學(xué)發(fā)光傳感領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002]西維因(Carbaryl)，又名甲萘威，化學(xué)名1_萘基-N -甲基氨基甲酸酯，與有機(jī)磷農(nóng)藥混用對(duì)多種農(nóng)作物害蟲有明顯的增效作用，可用于141種作物，防治565種害蟲，是一種被廣泛應(yīng)用的氨基甲酸酯類殺蟲劑。自1953年由美國(guó)聯(lián)碳公司首次合成以來(lái)，受到了世界上多數(shù)國(guó)家的青睞，至今仍為氨基甲酸酯類殺蟲劑的大噸位品種。西維因的大量使用有效解決了農(nóng)作物的病蟲害難題，成為農(nóng)作物增收的重要保證。但由于西維因在土壤、水果、糧食等介質(zhì)中具有良好的殘效和內(nèi)吸作用，使得西維因通過(guò)食物鏈在人體內(nèi)累積，能夠抑制膽堿酯酶的活性使乙酰膽堿在組織中蓄積，從而給人類帶來(lái)嚴(yán)重的健康問(wèn)題，主要表現(xiàn)為流涎、惡心、流淚、瞳孔縮小、視力模糊、痙攣等，甚至造成致畸、慢性神經(jīng)中毒等危害，帶來(lái)了非常嚴(yán)峻的食品安全和環(huán)境污染問(wèn)題。因此，如何簡(jiǎn)便、快速、靈敏地測(cè)定西維因殘留量已成為迫在眉睫的重要研究課題。
[0003]目前食品、飼料中西維因的傳統(tǒng)檢測(cè)方法主要依靠氣相色譜法、液相色譜法、固相萃取-液相色譜法、液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)、毛細(xì)管電泳法等。但因其技術(shù)含量高(需要專業(yè)人員進(jìn)行操作)、分析周期長(zhǎng)、設(shè)備昂貴且需要特殊的測(cè)試環(huán)境，所以不易推廣。為了滿足大量樣品的現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)要求，基于西維因生化特性制得的各種酶試劑盒和速測(cè)卡不斷推出，但調(diào)查研究表明，許多速測(cè)卡的靈敏度、重現(xiàn)性不高但是檢測(cè)成本較高，因此多數(shù)僅用于西維因殘留的初步定性篩選。因此，建立簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確和高效的西維因殘留檢測(cè)方法，對(duì)于解決由西維因殘留超標(biāo)引起的食品安全和環(huán)境污染，甚至由此涉及的經(jīng)濟(jì)貿(mào)易等問(wèn)題具有重要意義。
[0004]石墨烯是由碳六元環(huán)組成的二維周期蜂窩狀點(diǎn)陣結(jié)構(gòu)，它可以翹曲成零維的富勒烯，卷成一維的碳納米管或者堆垛成三維的石墨，因此石墨烯是構(gòu)成其他碳材料的基本單元。石墨烯材料還兼具石墨和碳納米管的一些優(yōu)良性質(zhì)，例如高熱導(dǎo)性和高機(jī)械強(qiáng)度。但未功能化的石墨烯的水溶性較差，而且極易通過(guò)層層堆積形成類石墨，因此，構(gòu)造石墨烯復(fù)合材料是解決這些問(wèn)題并充分駕馭石墨烯優(yōu)良性能的有效途徑。另一方面，金屬酞菁能催化生物分子的氧化反應(yīng)，具有模擬酶的作用，在溶液體系中可以催化溶解氧產(chǎn)生活性氧基團(tuán)，但其主要的缺點(diǎn)是水溶性較差。因此，可以利用石墨烯具有較大的比表面積、豐富的官能團(tuán)以及大面積SP2雜化軌道碳結(jié)構(gòu)等性質(zhì)將其作為優(yōu)良的載體與金屬酞菁復(fù)合。目前的研究表明，金屬酞菁/石墨烯納米復(fù)合材料可以展現(xiàn)出優(yōu)異的物理化學(xué)性能，一方面，所制備的復(fù)合材料可以兼具石墨烯和金屬酞菁的各自的性能優(yōu)點(diǎn)；另一方面，因石墨烯與金屬酞菁的相互作用而衍生出許多新的性能。
[0005]本發(fā)明首先利用平衡吸附法成功制備了氧化石墨烯-鈷酞菁(GO-CoPc)納米復(fù)合材料，并基于鈷酞菁(CoPc)的模擬酶的性質(zhì)首次構(gòu)建了可用于西維因靈敏檢測(cè)的電化學(xué)發(fā)光傳感器，建立了西維因標(biāo)準(zhǔn)濃度和電化學(xué)發(fā)光(ECL)強(qiáng)度之間的對(duì)應(yīng)關(guān)系，實(shí)現(xiàn)了簡(jiǎn)單、靈敏、快速檢測(cè)西維因這一典型農(nóng)藥的目的。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]本發(fā)明旨在提供一種制備工藝簡(jiǎn)單、檢測(cè)靈敏度高、成本低廉的電化學(xué)發(fā)光傳感器。首先，采用平衡吸附法制備了 GO-CoPc復(fù)合材料；其次，基于CoPc模擬酶性質(zhì)將復(fù)合材料修飾在玻碳電極表面構(gòu)建傳感器，并將傳感器置于魯米諾-乙醇溶液中構(gòu)建電化學(xué)發(fā)光傳感體系。最后，通過(guò)加入不同濃度西維因建立西維因濃度與ECL強(qiáng)度之間的對(duì)應(yīng)關(guān)系，繪制ECL方法靈敏檢測(cè)西維因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
[0007]本發(fā)明提供一種基于CoPc模擬酶性質(zhì)、乙醇淬滅特性的農(nóng)藥西維因電化學(xué)發(fā)光方法:首先，以鈷酞菁和氧化石墨為原料，1- 丁基-3-甲基咪唑六氟磷酸鹽([BMIM]PF6)離子液體為溶劑，采用平衡吸附法制備了 GO-CoPc ;然后將其修飾到玻碳電極(GCE)表面，與甘汞電極、鉬電極構(gòu)成三電極體系，在魯米諾(Iuminol)溶液中可以采集到較強(qiáng)的ECL信號(hào)；加入乙醇之后，由于乙醇的淬滅作用使得ECL信號(hào)顯著降低，并在特定濃度使得ECL信號(hào)得到最大限度的淬滅；此時(shí)，向發(fā)光體系中加入不同濃度的西維因發(fā)現(xiàn)ECL強(qiáng)度隨著西維因濃度的增加而增強(qiáng)。在一定濃度范圍內(nèi)，西維因濃度與ECL信號(hào)強(qiáng)度呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系，由此構(gòu)建了靈敏檢測(cè)西維因的電化學(xué)發(fā)光傳感器。
[0008]本發(fā)明中農(nóng)藥西維因檢測(cè)傳感器制作方法，包括以下幾個(gè)步驟:
Cl) GO-CoPc復(fù)合材料的制備:將CoPc和GO加入到離子液體[BM頂]PF6中，超聲10h，離心，半透膜中水洗至溶劑[BMM]PF6完全去除，而后真空干燥制得GO-CoPc納米復(fù)合材料，備用。
[0009](2)玻碳電極(GCE)表面預(yù)處理:將GCE電極依次用氧化鋁粉末進(jìn)行打磨處理，循環(huán)伏安法測(cè)量電極，將電極置于5 mmol/L鐵氰化鉀溶液,在一 0.2~0.6 V掃描,峰電位差在110 mV以下表明電極預(yù)處理完成；然后依次在乙醇、二次蒸餾水中超聲清洗，氮?dú)獯蹈蓚溆谩?br> [0010](3)電化學(xué)發(fā)光傳感器界面的修飾過(guò)程:將GO-CoPc納米復(fù)合材料分散在二次水中，超聲至完全分散；用微量注射器移取上述分散液滴涂到玻碳電極表面，室溫干燥得到GO-CoPc修飾的玻碳電極，記為GO-CoPc/GCE。
[0011]其中，步驟(1)中所述的CoPc、GO和離子液體[BMM]PF6的比例為:100 mg: 10^ 25 mg: 30 mL。
[0012]其中，步驟(2)中所述的氧化鋁粉末粒徑為I μπι、0.05 μ m。
[0013] 其中，步驟(3)中所述的GO-CoPc納米復(fù)合材料和二次水的用量比為2 mg: 0.5~2 mL ;所述的滴涂到玻碳電極表面的分散液為5~10 UL0
[0014]按照上述方法制備的電化學(xué)發(fā)光傳感器用于檢測(cè)農(nóng)藥西維因的殘留量，具體方法如下:
西維因濃度與電化學(xué)發(fā)光信號(hào)之間的對(duì)應(yīng)關(guān)系:將GO-CoPc/GCE置于PBS緩沖溶液和Iuminol溶液的混合液中，設(shè)置光電倍增管高壓為800 V,以鉬絲電極為對(duì)電極，Ag/AgCl電極為參比電極進(jìn)行循環(huán)伏安掃描；接著加入無(wú)水乙醇將ECL信號(hào)淬滅；再?gòu)男〉酱蠹尤氩煌瑵舛鹊奈骶S因收集ECL信號(hào)，根據(jù)不同濃度的西維因?qū)?yīng)的ECL信號(hào)強(qiáng)度建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。
[0015]其中，所述PBS緩沖溶液濃度為0.lmol/L、pH為7.4，Iuminol溶液濃度為
0.01mol/L,其中0.01mol/L Iuminol溶液用0.1 mol/L的氫氧化鈉溶液溶解Iuminol得到；所述混合液中Iuminol的濃度為0.1~0.3 mmol/L ;所述循環(huán)伏安掃描的電位掃描范圍為一 0.5~0.7 V，掃描速度為100 mV/s ;所述加入的無(wú)水乙醇為按每5mL的PBS溶液加入450 yL ;所述加入的西維因的濃度為2X10 —13~5X10 —9 mol/L。
[0016]本發(fā)明的有益效果在于:
(I)本發(fā)明利用離子液體作為溶劑，通過(guò)分子間的物理作用成功制備了 GO-CoPc復(fù)合材料，GO的引入為農(nóng)藥西維因的檢測(cè)提供了信號(hào)放大的平臺(tái)。
[0017](2)本發(fā)明利用乙醇作為自由基清除劑，淬滅光信號(hào)，形成了分子開關(guān)，為簡(jiǎn)便、靈敏、聞效的農(nóng)藥檢測(cè)提供可能。
[0018](3)本發(fā)明首次構(gòu)建了用于檢測(cè)農(nóng)藥西維因的電化學(xué)發(fā)光傳感器，制備工藝簡(jiǎn)單，具有靈敏度高、檢出限低、檢測(cè)成本低等優(yōu)點(diǎn)。
【專利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0019]圖1 (A)為G0，(B)為GO-CoPc的透射電鏡圖；
圖2中(A)為西維因濃度與電化學(xué)發(fā)光信號(hào)強(qiáng)度之間的對(duì)應(yīng)關(guān)系，(B)為檢測(cè)西維因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；·
【具體實(shí)施方式】:
下面結(jié)合具體實(shí)施實(shí)例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步說(shuō)明，以使本領(lǐng)域技術(shù)人員更好地理解本發(fā)明，但本發(fā)明的保護(hù)范圍并不局限于以下實(shí)施例。
[0020]實(shí)施例1:
(I)石墨烯氧化物-酞菁復(fù)合材料的制備:
GO-CoPc復(fù)合材料的制備方法為,將100 mg CoPc和10 mg GO分別加入到30 mL離子液體([BMM]PF6)中，超聲10 h，離心，半透膜中水洗至溶劑[811頂]--6完全去除，而后60 0C真空干燥制得GO-CoPc納米復(fù)合材料，備用。
[0021](2)玻碳電極(GCE)表面預(yù)處理:
將GCE電極依次用粒徑為I μπι、0.05 μ m的氧化鋁粉末進(jìn)行打磨處理，循環(huán)伏安法測(cè)量電極置于5 mmol/L鐵氰化鉀溶液，在一 0.2~0.6 V掃描,峰電位差在110 mV以下表明電極預(yù)處理完成，然后依次在乙醇、二次蒸餾水中超聲清洗，氮?dú)獯蹈蓚溆谩?br> [0022](3)電化學(xué)發(fā)光傳感器界面的修飾過(guò)程:
將2 mg GO-CoPc納米復(fù)合材料分散在0.5 mL 二次水中，超聲振蕩得到均一的分散液。用微量注射器移取5 μ L上述分散液滴涂到GCE表面，室溫干燥得到GO-CoPc修飾的玻碳電極(GO-CoPc/GCE)。
[0023]實(shí)施例2:
(I)石墨烯氧化物-酞菁復(fù)合材料的制備:
GO-CoPc復(fù)合材料的制備方法為,將100 mg CoPc和16 mg GO分別加入到30 mL離子液體([BMM]PF6)中，超聲10 h，離心，半透膜中水洗至溶劑[811頂]--6完全去除，而后60 0C真空干燥制得GO-CoPc納米復(fù)合材料，備用。[0024](2)玻碳電極(GCE)表面預(yù)處理:
將GCE電極依次用粒徑為I μπι、0.05 μ m的氧化鋁粉末進(jìn)行打磨處理，循環(huán)伏安法測(cè)量電極置于5 mmol/L鐵氰化鉀溶液，在一 0.2~0.6 V掃描,峰電位差在110 mV以下表明電極預(yù)處理完成，然后依次在乙醇、二次蒸餾水中超聲清洗，氮?dú)獯蹈蓚溆谩?br> [0025](3)電化學(xué)發(fā)光傳感器界面的修飾過(guò)程:
將2 mg GO-CoPc納米復(fù)合材料分散在1.0 mL 二次水中，超聲振蕩得到均一的分散液。用微量注射器移取6 μ L上述分散液滴涂到GCE表面，室溫干燥得到GO-CoPc修飾的玻碳電極(GO-CoPc/GCE)。
[0026]實(shí)施例3:
(I)石墨烯氧化物-酞菁復(fù)合材料的制備:
GO-CoPc復(fù)合材料的制備方法為,將100 mg CoPc和25 mg GO分別加入到30 mL離子液體([BMM]PF6)中，超聲10 h，離心，半透膜中水洗至溶劑[811頂]--6完全去除，而后60 0C真空干燥制得GO-CoPc納米復(fù)合材料，備用。圖1 (A)為G0，(B)為GO-CoPc的透射電鏡圖，由圖可以看出CoPc吸附在GO的表面，表明復(fù)合材料成功制備。
[0027](2)玻碳電極(GCE)表面預(yù)處理:
將GCE電極依次用粒徑為I μπι、0.05 μ m的氧化鋁粉末進(jìn)行打磨處理，循環(huán)伏安法測(cè)量電極置于5 mmol/L鐵氰化鉀溶液,在一 0.2~0.6 V掃描,峰電位差在110 mV以下表明電極預(yù)處理完成，然后依次在乙醇、二次蒸餾水中超聲清洗，氮?dú)獯蹈蓚溆谩?br> [0028](3)電化學(xué)發(fā)光傳感器界面的修飾過(guò)程:
將2 mg GO-CoPc納米復(fù)合材料分散在2 mL 二次水中，超聲振蕩得到均一的分散液。用微量注射器移取IOyL上述分散液滴涂到GCE表面，室溫干燥得到GO-CoPc修飾的玻碳電極(GO-CoPc/GCE)。
[0029]實(shí)施例4 =ECL方法檢測(cè)西維因及標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制
西維因濃度與電化學(xué)發(fā)光信號(hào)之間的對(duì)應(yīng)關(guān)系:將GO-CoPc/GCE置于5 mL濃度為0.1mol/L PBS ( pH = 7.4)+ 50 μ L luminol (0.01 mol/L)溶液中，設(shè)置光電倍增管高壓為800 V,以鉬絲電極為對(duì)電極，Ag/AgCl電極為參比電極進(jìn)行循環(huán)伏安掃描。電位掃描范圍為一0.5~0.7 V，掃描速度為100 mV/s ;接著加入450 μ L的乙醇將ECL信號(hào)淬滅；再依次加入 0.2 pmol/L,0.4 pmol/L,I pmol/L,5 pmol/L,60 pmol/L,I nmol/L,3 nmol/L和 5nmol/L的西維因收集ECL信號(hào)，根據(jù)不同濃度的西維因?qū)?yīng)的ECL信號(hào)強(qiáng)度建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。
[0030]實(shí)施例5 =ECL方法檢測(cè)西維因及標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制
西維因濃度與電化學(xué)發(fā)光信號(hào)之間的對(duì)應(yīng)關(guān)系:將GO-CoPc/GCE置于5 mL 0.1 mol/LPBS ( pH = 7.4)+ 100 μ L luminol (0.01 mol/L)溶液中，設(shè)置光電倍增管高壓為800V,以鉬絲電極為對(duì)電極，Ag/AgCl電極為參比電極進(jìn)行循環(huán)伏安掃描，。電位掃描范圍為一
0.5~0.7 V，掃描速度為100 mV/s;接著加入450 μ L的乙醇將ECL信號(hào)淬滅；再依次加入
0.2 pmol/L,0.4 pmol/L,I pmol/L,5 pmol/L,60 pmol/L,I nmol/L,3 nmol/L和5 nmol/L的西維因收集ECL信號(hào)，根據(jù)不同濃度的西維因?qū)?yīng)的ECL信號(hào)強(qiáng)度建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。
[0031]圖2中(A)為西維因濃度與電化學(xué)發(fā)光信號(hào)強(qiáng)度之間的對(duì)應(yīng)關(guān)系，(B)為檢測(cè)西維因的標(biāo)準(zhǔn)曲線，圖2表明檢測(cè)的線性范圍為2X10 —13~5X10 —9 mol/L。
[0032]實(shí)施例6 =ECL方法檢測(cè)西維因及標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制 西維因濃度與電化學(xué)發(fā)光信號(hào)之間的對(duì)應(yīng)關(guān)系:將GO-CoPc/GCE置于5 mL 0.1 mol/LPBS ( pH = 7.4)+ 150 μ L luminol (0.01 mol/L)溶液中，設(shè)置光電倍增管高壓為800V,以鉬絲電極為對(duì)電極，Ag/AgCl電極為參比電極進(jìn)行循環(huán)伏安掃描。電位掃描范圍為一0.5?0.7 V，掃描速度為100 mV/s;接著加入450 μ L的乙醇將ECL信號(hào)淬滅；再依次加入
0.2 pmol/L,0.4 pmol/L,I pmol/L,5 pmol/L,60 pmol/L,I nmol/L,3 nmol/L和5 nmol/L的西維因收集ECL信號(hào)，根據(jù)不同濃度的西維因?qū)?yīng)的ECL信號(hào)強(qiáng)度建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。
【權(quán)利要求】
1.用于農(nóng)藥西維因靈敏檢測(cè)的電化學(xué)發(fā)光傳感器，其特征在于，所述傳感器由氧化石墨烯-鈷酞菁納米復(fù)合材料修飾在玻碳電極表面構(gòu)建而成。
2.用于農(nóng)藥西維因靈敏檢測(cè)的電化學(xué)發(fā)光傳感器的制備方法，其特征在于，按照以下步驟進(jìn)行: Cl) GO-CoPc復(fù)合材料的制備:將CoPc和GO加入到離子液體[BM頂]PF6中，超聲10h，離心，半透膜中水洗至溶劑[BMM]PF6完全去除，而后真空干燥制得GO-CoPc納米復(fù)合材料，備用； (2)玻碳電極(GCE)表面預(yù)處理:將GCE電極依次用氧化鋁粉末進(jìn)行打磨處理，循環(huán)伏安法測(cè)量電極，將電極置于5 mmol/L鐵氰化鉀溶液，在一 0.2?0.6 V掃描，峰電位差在110mV以下表明電極預(yù)處理完成；然后依次在乙醇、二次蒸餾水中超聲清洗，氮?dú)獯蹈蓚溆茫? (3)電化學(xué)發(fā)光傳感器界面的修飾過(guò)程JfGO-CoPc納米復(fù)合材料分散在二次水中，超聲至完全分散；用微量注射器移取上述分散液滴涂到玻碳電極表面，室溫干燥得到GO-CoPc修飾的玻碳電極，記為GO-CoPc/GCE。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于農(nóng)藥西維因靈敏檢測(cè)的電化學(xué)發(fā)光傳感器，其特征在于，步驟(I)中所述的CoPc、GO和離子液體[BMHQPF6的比例為:100 mg: 10?25 mg:.30 mLo
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于農(nóng)藥西維因靈敏檢測(cè)的電化學(xué)發(fā)光傳感器，其特征在于,步驟(2)中所述的氧化招粉末粒徑為I μηι、0.05 μ m0
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于農(nóng)藥西維因靈敏檢測(cè)的電化學(xué)發(fā)光傳感器，其特征在于，步驟(3)中所述的GO-CoPc納米復(fù)合材料和二次水的用量比為2 mg: 0.5?2 mL ;所述的滴涂到玻碳電極表面的分散液為5?10 UL0
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于農(nóng)藥西維因靈敏檢測(cè)的電化學(xué)發(fā)光傳感器，其特征在于，按照上述方法制備的電化學(xué)發(fā)光傳感器用于檢測(cè)農(nóng)藥西維因的殘留量，具體方法如下: 將GO-CoPc/GCE置于PBS緩沖溶液和Iuminol溶液的混合液中，設(shè)置光電倍增管高壓為800 V,以鉬絲電極為對(duì)電極，Ag/AgCl電極為參比電極進(jìn)行循環(huán)伏安掃描；接著加入無(wú)水乙醇將ECL信號(hào)淬滅；再?gòu)男〉酱蠹尤氩煌瑵舛鹊奈骶S因收集ECL信號(hào)，根據(jù)不同濃度的西維因?qū)?yīng)的ECL信號(hào)強(qiáng)度建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的用于農(nóng)藥西維因靈敏檢測(cè)的電化學(xué)發(fā)光傳感器，其特征在于，所述PBS緩沖溶液濃度為0.lmol/L、pH為7.4，Iuminol溶液濃度為0.01 mol/L，其中0.0lmol/L的Iuminol溶液用0.1 mol/L的氫氧化鈉溶液溶解Iuminol得到；所述混合液中Iuminol的濃度為0.1?0.3 mmol/L ;所述循環(huán)伏安掃描的電位掃描范圍為一 0.5?.0.7 V，掃描速度為100 mV/s ;所述加入的無(wú)水乙醇為按每5mL的PBS溶液加入450 μ L ;所述加入的西維因的濃度為2X10 —13?5X10 —9 mol/L。
【文檔編號(hào)】G01N27/30GK103713029SQ201310699994
【公開日】2014年4月9日 申請(qǐng)日期:2013年12月19日 優(yōu)先權(quán)日:2013年12月19日
【發(fā)明者】王坤, 杜曉嬌, 錢靜 申請(qǐng)人:江蘇大學(xué)