本發(fā)明涉及分析化學(xué)與電化學(xué)傳感器分析領(lǐng)域，具體涉及一種基于Au/N-C/SiO₂/3D-GONs復(fù)合材料的檢測(cè)過(guò)氧化氫的電化學(xué)生物傳感器以及制備方法與應(yīng)用。

背景技術(shù)：

過(guò)氧化氫是普遍存在于自然界是的一種成分。例如：在生物體肝臟中生成；存在于污染的大氣或者雨水中；酸乳酪等乳制品使用的部分乳酸菌也能生成過(guò)氧化氫。在食品工業(yè)中，過(guò)氧化氫主要用于消毒、殺菌、漂白、脫色等，也用作生產(chǎn)加工助劑。過(guò)氧化氫作為一種重要的漂白劑和氧化劑也被廣泛應(yīng)用于染發(fā)，燙發(fā)類(lèi)化妝品中，由于其具有很強(qiáng)的氧化性，過(guò)量使用會(huì)對(duì)皮膚，毛發(fā)產(chǎn)生很?chē)?yán)重的損傷。

目前對(duì)過(guò)氧化氫檢測(cè)的研究方法包括高效液相、熒光共振轉(zhuǎn)移等等。雖然這些方法能夠準(zhǔn)確的檢測(cè)過(guò)氧化氫，但是他們都存在一些缺點(diǎn)比如復(fù)雜的設(shè)備，復(fù)雜的處理過(guò)程，昂貴的價(jià)格等等。

20世紀(jì)90年代末，Sen等首次報(bào)道了具有過(guò)氧化物酶催化活性的脫氧核酶——G-四聯(lián)體型脫氧核酶。G-四聯(lián)體是由大量鳥(niǎo)嘌呤序列的DNA通過(guò)Hoogsteen氫鍵形成的特殊的二級(jí)結(jié)構(gòu)，但G-四聯(lián)體只有在單價(jià)陽(yáng)離子存在下才能穩(wěn)定形成，其中K⁺的穩(wěn)定效果最為顯著，并能發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)。氯化血紅素可作為過(guò)氧化物模擬酶，與傳統(tǒng)的過(guò)氧化氫酶相比，其價(jià)格低廉，穩(wěn)定，可在較寬的酸度和溫度范圍內(nèi)使用。當(dāng)某些G-四聯(lián)體與氯化血紅素作用時(shí)，可極大地增強(qiáng)氯化血紅素的酶活性，因此，G-四聯(lián)體在K⁺及氯化血紅素的共同作用下，可形成具有顯著過(guò)氧化氫酶活性的DNA模擬酶。但是目前的酶生物傳感器的電極比表面積過(guò)小，導(dǎo)電性不好、信號(hào)相應(yīng)強(qiáng)度過(guò)弱、靈敏度過(guò)低。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于提供一種用于檢測(cè)過(guò)氧化氫的電化學(xué)生物傳感器及其制備與應(yīng)用以解決目前的酶生物傳感器的電極比表面積過(guò)小，導(dǎo)電性不好、信號(hào)相應(yīng)強(qiáng)度過(guò)弱、靈敏度過(guò)低等問(wèn)題。

一種用于檢測(cè)過(guò)氧化氫的電化學(xué)生物傳感器的制備方法，主要包括以下步驟：

（1）合成二氧化硅-三維石墨烯（SiO₂/3D-GONs）復(fù)合材料的合成；

（2）對(duì)步驟（1）所得二氧化硅-三維石墨烯復(fù)合材料進(jìn)行氮、碳摻雜（N-C/SiO₂/3D-GONs）；

（3）對(duì)玻碳電極進(jìn)行預(yù)處理；

（4）采用滴涂法制備氮碳摻雜的二氧化硅-三維石墨烯復(fù)合材料修飾的玻碳電極；

（5）把步驟（4）中修飾好的玻碳電極在氯金酸溶液中采用計(jì)時(shí)電流法制備金納米-氮碳摻雜的二氧化硅-三維石墨烯（Au/N-C/SiO₂/3D-GONs）玻碳電極；

（6）將步驟（5）中修飾好的玻碳電極浸入含有雙巰基修飾的G DNA溶液中培育2-4 h；

（7）把步驟（6）得到的復(fù)合電極侵入到含有氯高鐵血紅素溶液中10-16 h。

其中，G四聯(lián)體DNA的序列5-(HS)₂-CH-(CH₂)₅-CCCAAATTT-GGGTAGGGCGGGTTGGG-3’； 所述二氧化硅和三維石墨烯的質(zhì)量比為4:7，所述N和C的質(zhì)量比為2:3。

進(jìn)一步的，步驟（4）所述氮碳摻雜的二氧化硅-三維石墨烯復(fù)合材料修飾的玻碳電極的制備方法為：取5.0-7.0 mg 氮碳摻雜的二氧化硅-三維石墨烯復(fù)合材料粉末先分散于10mL N-甲基吡咯烷酮(NMP)溶液中，超聲1-1.5h，然后稀釋?zhuān)偃∠♂尯玫娜芤旱渭拥讲Ｌ茧姌O上，室溫干燥6-8h。

進(jìn)一步的，步驟（5）所述金納米-氮碳摻雜的二氧化硅-三維石墨烯玻碳電極的制備方法為：把步驟（4）得到的氮碳摻雜的二氧化硅-三維石墨烯玻碳電極在含有10-60 μM的氯金酸溶液中采用計(jì)時(shí)電流法高電位為1.1 V低電位為-1.0 V沉積金納米5-20 s。

對(duì)玻碳電極進(jìn)行預(yù)處理方法為：將玻碳電極用α-A1₂O₃拋光粉拋光；洗滌，分別在去離子水和乙醇中超聲10 min。

進(jìn)一步的，所述三維石墨烯的合成主要包括：將氧化石墨烯，配置成濃度為1mg·mL^-1的氧化石墨烯溶膠，加入不銹鋼反應(yīng)釜內(nèi)襯中，在180℃的條件下反應(yīng)12h，反應(yīng)結(jié)束后自然冷卻至室溫，再經(jīng)過(guò)冷凍干燥。

進(jìn)一步的，所述二氧化硅-三維石墨烯的合成主要包括：取三維石墨烯加入到乙醇溶液中并超聲30-45min，再加入氨丙基三乙氧基硅烷和氨水并磁力攪拌6h，再滴加體積比為19:1的乙醇/正硅酸四乙酯混合溶液，攪拌24h，最后離心、真空干燥。

進(jìn)一步的，二氧化硅-三維石墨烯復(fù)合材料進(jìn)行氮碳摻雜主要包括：稱(chēng)取一定量的二氧化硅-三維石墨烯復(fù)合材料和多巴胺混合于pH=8.5的PBS緩沖溶液中加熱到80℃并攪拌12h，然后離心、洗滌、真空干燥，再把獲得的固體粉末放入管式爐中，在N₂的氛圍中以5℃·min^-1的升溫速率加熱到700℃，保持1h。

上述檢測(cè)過(guò)氧化氫電化學(xué)生物傳感器制備方法得到的檢測(cè)過(guò)氧化氫的電化學(xué)生物傳感器。

上述檢測(cè)過(guò)氧化氫的電化學(xué)生物傳感器的應(yīng)用，用于檢測(cè)生物樣品、化妝品等樣品中的過(guò)氧化氫的含量。

進(jìn)一步的，過(guò)氧化氫的檢測(cè)主要包括以下步驟：

（1）用pH=7.4含有0.1M的KCl和0.1M的NaCl的磷酸緩沖溶液配置濃度為不同濃度的過(guò)氧化氫溶液；

（2）利用所述電化學(xué)生物傳感器在不同濃度的過(guò)氧化氫溶液中利用循環(huán)伏安法進(jìn)行測(cè)試，記錄下穩(wěn)定電流值，并得到線性曲線；

（3）取待檢樣品溶于pH=7.4含有0.1M的KCl和0.1M的NaCl的磷酸緩沖溶液中；

（4）將所述電化學(xué)生物傳感器作為工作電極在三電極系統(tǒng)中，用循環(huán)伏安法，以20-100 mV s^-1的掃描速度進(jìn)行測(cè)試，并得到穩(wěn)定的電流值，記錄下電流值，與標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)照計(jì)算出待測(cè)溶液的濃度。

本發(fā)明的Au/N-C/SiO₂/3D-GONs復(fù)合材料，既具有氧化石墨烯所有良好的性質(zhì)，其獨(dú)特的結(jié)構(gòu)使其具有優(yōu)異的熱學(xué)、力學(xué)以及化學(xué)性質(zhì)，并且由于是三維結(jié)構(gòu)，不但增大了整個(gè)材料的比表面積還為G四聯(lián)體的修飾引入了更多的活性位點(diǎn)。而且在金納米、二氧化硅納米粒子以及氮碳原子的相互協(xié)同作用，使整體性能有明顯的增強(qiáng)，使導(dǎo)電能力、信號(hào)強(qiáng)度和靈敏度均增強(qiáng)。金納米不但能夠提供雙巰基修飾的DNA分子修飾的位點(diǎn)，而且也可以增強(qiáng)修飾材料的導(dǎo)電能力。二氧化硅納米粒子的加入不但可以增加復(fù)合材料的比表面積，負(fù)載更多的G四聯(lián)體，而且在很大程度上增強(qiáng)了信號(hào)響應(yīng)強(qiáng)度。由于石墨烯中存在碳碳雙鍵，有較強(qiáng)的π-π^*共軛效應(yīng)，很容易發(fā)生團(tuán)聚，氮原子和碳原子的引入不但可以增強(qiáng)復(fù)合材料的導(dǎo)電能力，還可以防止三維氧化石墨烯發(fā)生團(tuán)聚。同時(shí)氮碳雜原子的摻雜可以在氧化石墨烯表面形成大量有效的催化活性位點(diǎn)，這些活性位點(diǎn)有利于加快電子的傳遞速率，促進(jìn)過(guò)氧化氫的分解。層層組裝得到的N-C/SiO₂/3D-GONs復(fù)合材料分散性好，導(dǎo)電性好。將具有過(guò)氧化氫酶催化活性的DNA模擬酶通過(guò)非共價(jià)鍵吸附（包括靜電組裝或SH-與金、鉑等的相互作用）的方式固定于這種復(fù)合材料上制備的生物傳感器具有顯著增強(qiáng)催化還原過(guò)氧化氫的作用。在本發(fā)明中，電極表面的金納米和雙巰基修飾的G四聯(lián)體DNA通過(guò)Au-S化學(xué)鍵結(jié)合可以有效的固定G四聯(lián)體DNA分子信標(biāo)，由于DNA的末端引入了兩個(gè)巰基，可以增強(qiáng)金納米對(duì)雙巰基修飾的DNA的吸附力，使DNA更牢固的吸附在電極表面。由于K⁺、Na⁺等陽(yáng)離子的存在可以促進(jìn)某些DNA聚合形成G四聯(lián)體，所以在配置緩沖溶液時(shí)加入了0.1M的KCl和0.1M的NaCl。另一方面氯化血紅素能夠嵌入到G四聯(lián)體結(jié)構(gòu)中從而和G四聯(lián)體DNA分子結(jié)合形成一種對(duì)過(guò)氧化氫具有催化活性的類(lèi)過(guò)氧化氫酶。由于酶本身的高效性，再加上電化學(xué)方法本身的快速靈敏的特點(diǎn)，所構(gòu)建的電化學(xué)生物傳感器能夠快速對(duì)不同濃度的過(guò)氧化氫產(chǎn)生反應(yīng)。在存在過(guò)氧化氫時(shí)，由于氯化血紅素和G四聯(lián)體結(jié)合生成的類(lèi)過(guò)氧化氫酶對(duì)過(guò)氧化氫具有很好的催化作用，類(lèi)過(guò)氧化氫酶就會(huì)催化過(guò)氧化氫分解。過(guò)氧化氫失去電子，傳遞到電極表面，從而產(chǎn)生電流。通過(guò)電流的大小來(lái)實(shí)現(xiàn)對(duì)過(guò)氧化氫的定量檢測(cè)。同時(shí)由于Au/N-C/SiO₂/3D-GONs復(fù)合材料的存在，加快了電子從過(guò)氧化氫到電極的傳遞速率，從而增大了反應(yīng)產(chǎn)生的電流，從而提高了傳感器的靈敏度。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明制備的檢測(cè)過(guò)氧化氫的電化學(xué)生物傳感器具有如下優(yōu)點(diǎn)：1）具有良好的穩(wěn)定性、重現(xiàn)性、對(duì)過(guò)氧化氫具有很高的特異性，不易受到檢測(cè)樣品中其他物質(zhì)的干擾；2）利用酶的高效以及Au/N-C/SiO₂/3D-GONs復(fù)合材料促進(jìn)電子的傳導(dǎo)作用，極大地增加了傳感器的靈敏度；3）操作簡(jiǎn)單方便，能夠快速準(zhǔn)確檢測(cè)樣品中過(guò)氧化氫的含量。本發(fā)明的電化學(xué)生物傳感器可以實(shí)現(xiàn)對(duì)生物樣品、化妝品等樣品中過(guò)氧化氫含量的檢測(cè)。

附圖說(shuō)明

圖1為本發(fā)明的玻碳電極在不同階段的在5 mM鐵氰化鉀/亞鐵氰化鉀中的循環(huán)伏安圖，其中a為玻碳電極；b為Au/N-C/SiO₂/3D-GONs復(fù)合材料修飾玻碳電極；c為H₂O₂生物傳感器；

圖2為發(fā)明的生物傳感器在不同階段的電化學(xué)阻抗，其中a為玻碳電極；b為Au/N-C/SiO₂/3D-GONs復(fù)合材料修飾玻碳電極；c為H₂O₂生物傳感器，插圖為模擬電路圖；

圖3為H₂O₂生物傳感器在氯化血紅素中浸泡不同時(shí)間，傳感器的響應(yīng)效果， (a)4h；(b)8h；(c)12h；(d)16h；(e)20h；(f)24h；

圖4為傳感器在不同H₂O₂濃度下的響應(yīng)， (a)5mM；(b)10mM；(c)15mM；(d)20mM；(e)30mM；(f)40mM；(g)50mM；

圖5為標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。

具體實(shí)施方式

為使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案和優(yōu)點(diǎn)更加清楚，下面將結(jié)合附圖對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步地詳細(xì)描述。

實(shí)施例1

一種檢測(cè)過(guò)氧化氫的電化學(xué)生物傳感器的制備方法，包括以下步驟：

（1）玻碳電極預(yù)處理：玻碳電極經(jīng)0.05μm的α-A1₂O₃拋光粉拋光后，用去離子水沖洗干凈，并分別在去離子水和乙醇中超聲10 min。采用三電極系統(tǒng)檢測(cè)，工作電極為玻碳電極，對(duì)電極為鉑絲電極，參比電極為Ag/AgCl電極，在0.5 M硫酸中，設(shè)置電壓為-0.2～1.6 V，對(duì)玻碳電極進(jìn)行循環(huán)伏安掃描，檢測(cè)完畢后，用去離子水沖洗電極，吹干電極表面，備用。

（2）Au/N-C/SiO₂/3D-GONs修飾玻碳電極的制備：

a.三維石墨烯的合成：將氧化石墨烯，配置成濃度為1mg·mL^-1一定體積的氧化石墨烯溶膠待用，取50mL氧化石墨烯凝溶膠加入到100mL的不銹鋼反應(yīng)釜內(nèi)襯中，在180℃的條件下反應(yīng)12h，反應(yīng)結(jié)束后自然冷卻至室溫，再經(jīng)過(guò)冷凍干燥即得到三維氧化石墨烯（3D-GONs）。

b.二氧化硅-三維石墨烯的合成：取50mL 3D-GONs加入到100mL的乙醇溶液中并超聲30min，再加入2mL氨丙基三乙氧基硅烷（APTS）和1mL氨水并磁力攪拌6h，再滴加把20mL乙醇/正硅酸四乙酯（體積比為19:1）混合溶液，攪拌24h。然后經(jīng)過(guò)離心、真空干燥獲得SiO₂/3D-GONs固粉末。

c.對(duì) SiO₂/3D-GONs復(fù)合材料進(jìn)行N、C摻雜：稱(chēng)取一定量的SiO₂/3D-GONs復(fù)合材料和多巴胺混合于80mL PBS（pH=8.5）緩沖溶液中加熱到80℃并攪拌12h，然后離心、洗滌、真空干燥。再把獲得的固體粉末放入管式爐中，在N₂的氛圍中加熱到700℃（升溫速率為5℃·min^-1）保持1h。

d.采用計(jì)時(shí)電流法制備Au/N-C/SiO₂/3D-GONs修飾玻碳電極：取5.0mg N-C/SiO₂/3D-GONs粉末先分散于10ml N-甲基吡咯烷酮(NMP)溶液中，超聲1h，取一定體積上述溶液稀釋到一定濃度待用，取稀釋好的溶液滴加到玻碳電極上，室溫干燥6-8h。即得到上述復(fù)合材料修飾的玻碳電極；再利用修飾好的玻碳電極在60 μM的氯金酸溶液中采用計(jì)時(shí)電流法高電位為1.1 V低電位為-1.0 V沉積金納米5 s。

（3）把步驟（2）得到的Au/N-C/SiO₂/3D-GONs復(fù)合材料修飾的玻碳電極侵入到含有20μL 10 μM的G四聯(lián)體DNA溶液中2 h。

（4）把步驟（3）得到的復(fù)合電極浸入到含有氯高鐵血紅素溶液中10 h。

其中，G DNA的序列為5’-(HS)₂-CH-(CH₂)₅-CCCAAATTT-GGGTAGGGCGGGTTGGG-3’。

上述傳感器用于檢測(cè)化妝品中的過(guò)氧化氫的步驟主要包括：

（1）用pH=7.4含有0.1M的KCl和0.1M的NaCl的磷酸緩沖溶液配置濃度為0.05 mM、0.1 mM、0.15 mM、0.2 mM、0.25 mM、0.3 mM、0.35 mM、0.4 mM、0.45 mM、0.5 mM的過(guò)氧化氫溶液；

（2）用上述修飾的電極在不同濃度的過(guò)氧化氫中采用掃描速度為20 mV s^-1，利用循環(huán)伏安法進(jìn)行測(cè)試記錄下電流值；

（3）根據(jù)得到的數(shù)據(jù)作出標(biāo)準(zhǔn)曲線；

（4）把待測(cè)化妝品溶解到pH=7.4含有0.1M的KCl和0.1M的NaCl的磷酸緩沖溶液中；

（5）把上述修飾好的電極侵入到50 μL pH=7.4含有0.1M的KCl的磷酸緩沖溶液含有過(guò)氧化氫的待測(cè)溶液中采用掃描速度為20 mV s^-1，利用循環(huán)伏安法進(jìn)行測(cè)試。

實(shí)施例2

一種檢測(cè)過(guò)氧化氫的電化學(xué)生物傳感器的制備方法，包括以下步驟：

（1）玻碳電極預(yù)處理：玻碳電極經(jīng)0.05μm的α-A1₂O₃拋光粉拋光后，用去離子水沖洗干凈，并分別在去離子水和乙醇中超聲10 min。采用三電極系統(tǒng)檢測(cè)，工作電極為玻碳電極，對(duì)電極為鉑絲電極，參比電極為Ag/AgCl電極，在0.5 M硫酸中，設(shè)置電壓為-0.2～1.6 V，對(duì)玻碳電極進(jìn)行循環(huán)伏安掃描，檢測(cè)完畢后，用去離子水沖洗電極，吹干電極表面，備用。

（2）Au/N-C/SiO₂/3D-GONs修飾玻碳電極的制備：

a.三維石墨烯的合成：將氧化石墨烯，配置成濃度為1mg·mL^-1一定體積的氧化石墨烯溶膠待用，取50mL氧化石墨烯凝溶膠加入到100mL的不銹鋼反應(yīng)釜內(nèi)襯中，在180℃的條件下反應(yīng)12h，反應(yīng)結(jié)束后自然冷卻至室溫，再經(jīng)過(guò)冷凍干燥即得到三維氧化石墨烯（3D-GONs）。

b.二氧化硅-三維石墨烯的合成：取50mL 3D-GONs加入到100mL的乙醇溶液中并超聲45min，再加入2mL氨丙基三乙氧基硅烷（APTS）和1mL氨水并磁力攪拌6h，再滴加把20mL乙醇/正硅酸四乙酯（體積比為19:1）混合溶液，攪拌24h。然后經(jīng)過(guò)離心、真空干燥獲得SiO₂/3D-GONs固體粉末。

c.對(duì) SiO₂/3D-GONs復(fù)合材料進(jìn)行N、C摻雜：稱(chēng)取一定量的SiO₂/3D-GONs復(fù)合材料和多巴胺混合于80mL PBS（pH=8.5）緩沖溶液中加熱到80℃并攪拌12h，然后離心、洗滌、真空干燥。再把獲得的固體粉末放入管式爐中，在N₂的氛圍中加熱到700℃（升溫速率為5℃·min^-1）保持1h。

d.采用計(jì)時(shí)電流法制備Au/N-C/SiO₂/3D-GONs修飾玻碳電極：取7.0mg N-C/SiO₂/3D-GONs粉末先分散于10ml N-甲基吡咯烷酮(NMP)溶液中，超聲1.5h，取一定體積上述溶液稀釋到一定濃度待用，取稀釋好的溶液滴加到玻碳電極上，室溫干燥8h。即得到上述復(fù)合材料修飾的玻碳電極；再利用修飾好的玻碳電極在10 μM的氯金酸溶液中采用計(jì)時(shí)電流法高電位為1.1 V低電位為-1.0 V沉積金納米20 s。

（3）把步驟（2）得到的Au/N-C/SiO₂/3D-GONs復(fù)合材料修飾的玻碳電極侵入到含有20μL 10 μM的G四聯(lián)體DNA溶液中2-4 h。

（4）把步驟（3）得到的復(fù)合電極浸入到含有氯高鐵血紅素溶液中16 h。

其中，G DNA的序列為5’-(HS)₂-CH-(CH₂)₅-CCCAAATTT-GGGTAGGGCGGGTTGGG-3’。

上述傳感器用于檢測(cè)化妝品中的過(guò)氧化氫的步驟主要包括：

（1）用pH=7.4含有0.1M的KCl和0.1M的NaCl的磷酸緩沖溶液配置濃度為0.05 mM、0.1 mM、0.15 mM、0.2 mM、0.25 mM、0.3 mM、0.35 mM、0.4 mM、0.45 mM、0.5 mM的過(guò)氧化氫溶液；

（2）用上述修飾的電極在不同濃度的過(guò)氧化氫中采用掃描速度為20 mV s^-1，利用循環(huán)伏安法進(jìn)行測(cè)試記錄下電流值；

（3）根據(jù)得到的數(shù)據(jù)作出標(biāo)準(zhǔn)曲線；

（4）把待測(cè)化妝品溶解到pH=7.4含有0.1M的KCl和0.1M的NaCl的磷酸緩沖溶液中；

（5）把上述修飾好的電極侵入到50 μL pH=7.4含有0.1M的KCl的磷酸緩沖溶液含有過(guò)氧化氫的待測(cè)溶液中采用掃描速度為20 mV s^-1，利用循環(huán)伏安法進(jìn)行測(cè)試。

將實(shí)施例1和實(shí)施例2的玻碳電極在不同階段的在5 mM鐵氰化鉀/亞鐵氰化鉀中的循環(huán)伏安圖如圖1所示。從圖1可以得知電極性能的變化，與裸玻碳電極相比, Au/N-C/SiO2/3D-GONs/GCE修飾后的電極電流得到很大提高。

將實(shí)施例1和實(shí)施例2的生物傳感器在不同階段的電化學(xué)阻抗如圖2所示，從圖2中可以得出，當(dāng)把復(fù)合材料Au/N-C/SiO₂/3D-GONs修飾到玻碳電極上后，電極的阻抗變小了，說(shuō)明該復(fù)合材料增強(qiáng)了電極的導(dǎo)電性能。再把G四聯(lián)體修飾到電極上后發(fā)現(xiàn)阻抗變大了，這是因?yàn)镚四聯(lián)體不導(dǎo)電，阻礙了電子的傳遞，所以阻抗增大。

將實(shí)施例1和實(shí)施例2的生物傳感器在不同階段的電化學(xué)阻抗如圖3所示，比較浸泡時(shí)間對(duì)催化還原H₂O₂的影響，浸泡時(shí)間太短，Au-S鍵不飽和；時(shí)間過(guò)長(zhǎng)Au-S鍵飽和，但未與Au成鍵的-S-DNA會(huì)與-Au-S-DNA發(fā)生交互，增大空間位阻，影響G四聯(lián)體復(fù)合物與H₂O₂相互作用。從圖中可以發(fā)現(xiàn)當(dāng)浸泡時(shí)間為16h時(shí)，催化H₂O₂分解效果最好。

將實(shí)施例1和實(shí)施例2的生物傳感器對(duì)不同濃度H₂O₂進(jìn)行檢測(cè)，其結(jié)果如圖4所示，隨著H₂O₂濃度的增大，H₂O₂的還原電流逐漸減小。如圖5所示，在10^-3~1.5×10^-1mol/L的濃度范圍內(nèi)，還原峰電流與H₂O₂濃度呈良好的線性關(guān)系，線性方程為y=-17.30211x+0.70337(R²=0.99017)，檢測(cè)下限為3.8×10^-5mol/L。

以上所述僅為本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施例而已，并不用于限制本發(fā)明，盡管參照前述實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行了詳細(xì)的說(shuō)明，對(duì)于本領(lǐng)域的技術(shù)人員來(lái)說(shuō)，其依然可以對(duì)前述各實(shí)施例所記載的技術(shù)方案進(jìn)行修改，或者對(duì)其中部分技術(shù)特征進(jìn)行等同替換。凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)，所作的任何修改、等同替換、改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。