高脂肪含量食品中七種指示性多氯聯(lián)苯的同時測定方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種高脂肪含量食品中七種指示性多氯聯(lián)苯（PCB28、PCB52、PCB101、PCB118、PCB138、PCB153、PCB180）的同時測定方法。
【發(fā)明內(nèi)容】
包括使用有機(jī)溶劑對目標(biāo)物進(jìn)行提取、濃縮、轉(zhuǎn)溶、對提取液進(jìn)行兩次凈化，以及標(biāo)準(zhǔn)曲線的配制、分析測試條件、對不同樣品中七種指示性多氯聯(lián)苯的線性、回收率、精密度、檢出限等因素進(jìn)行方法學(xué)考察和實際樣品測定。該方法不需要配備昂貴的去除樣品中脂肪的前處理設(shè)備，以及使用復(fù)雜、低效率、低通量的柱層析前處理過程，具備檢測速度快、適應(yīng)基質(zhì)范圍寬、靈敏度高、選擇性強(qiáng)、準(zhǔn)確性高等優(yōu)點，可滿足于常規(guī)實驗室對高脂肪含量樣品中七種指示性多氯聯(lián)苯的檢測需要。而且，本發(fā)明可同時測定高脂肪含量樣品中七種指示性多氯聯(lián)苯的含量，具有簡便、快捷、準(zhǔn)確等特點。
【專利說明】高脂肪含量食品中七種指示性多氯聯(lián)苯的同時測定方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于食品安全檢測【技術(shù)領(lǐng)域】，涉及高脂肪含量食品中七種指示性多氯聯(lián)苯的同時檢測方法。

【背景技術(shù)】
[0002]多氯聯(lián)苯類物質(zhì)對人體有“致畸、致突變、致癌”危害，且其化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定、難于被降解，可通過多種載體進(jìn)行遷移，并通過食物鏈在人體內(nèi)富集。全球環(huán)境監(jiān)測系統(tǒng)/食品規(guī)劃部分(GEMS/Food)中規(guī)定了 PCB28，PCB52，PCB101，PCB118，PCB138，PCB153 和 PCB180 共7種多氯聯(lián)苯同系物異構(gòu)體作為PCBs污染狀況的指示性單體(Indicator PCBs)，代替所有多氯聯(lián)苯同系物異構(gòu)體進(jìn)行檢測。由于多氯聯(lián)苯已成為危害人類健康的重要因素，各國對食品中多氯聯(lián)苯類物質(zhì)均設(shè)定了相應(yīng)的最大殘留限量(MRL)，其中歐盟對油脂、動物肉類及其制品、奶粉、水產(chǎn)品及其制品等多種產(chǎn)品設(shè)定了最大殘留量值要求，我國也將水產(chǎn)動物及其制品中的殘留限量設(shè)定為0.5 mg/kg。
[0003]當(dāng)前關(guān)于食品中多氯聯(lián)苯的檢測方法中，報道的前處理提取方法主要集中于索氏提取法、振蕩提取法、加速溶劑提取法、微波輔助提取法及超聲波輔助提取法等；常用的凈化方法有固相萃取法、凝膠滲透色譜結(jié)合固相萃取法、基質(zhì)固相萃取法及酸處理法。
[0004]現(xiàn)有的方法中對于測定高脂肪含量樣品中七種指示性多氯聯(lián)苯含量未給出較好的解決辦法，且存在對前處理設(shè)備要求高、選擇性差、前處理操作步驟繁瑣、檢測耗時長、效率低等缺點。因此，針對高脂肪含量食品中七種指示性多氯聯(lián)苯含量的檢測方法開發(fā)具有重要意義。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的在于針對現(xiàn)有高脂肪含量食品中七種指示性多氯聯(lián)苯檢測技術(shù)存在的不足，提供一種操作簡便、靈敏度高、結(jié)果準(zhǔn)確且能夠滿足七種指示性多氯聯(lián)苯含量同時定量檢測的方法。該方法不需要配備昂貴的去除樣品中脂肪的前處理設(shè)備，以及使用復(fù)雜、低效率、低通量的柱層析前處理過程，具備檢測速度快、適應(yīng)基質(zhì)范圍寬、靈敏度高、選擇性強(qiáng)、準(zhǔn)確性高等優(yōu)點。
[0006]為實現(xiàn)發(fā)明目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案:
除非另有說明，本發(fā)明所采用的百分?jǐn)?shù)均為質(zhì)量百分?jǐn)?shù)，使用試劑均為分析純，其中硅膠為48?75 μ m。
[0007]高脂肪含量食品中七種指示性多氯聯(lián)苯的同時測定方法，包括以下步驟:樣品中多氯聯(lián)苯的提取，轉(zhuǎn)溶，濃硫酸-硅膠分散固相萃取兩次凈化。
[0008]高脂肪含量食品中七種指示性多氯聯(lián)苯的同時測定方法，具體步驟為:樣品中多氯聯(lián)苯的提取，濃縮，轉(zhuǎn)溶，濃硫酸-硅膠分散固相萃取兩次凈化，濃縮，定容，過濾和氣相色譜分析測試，采用基質(zhì)匹配工作溶液校正定量。
[0009]油脂樣品中多氯聯(lián)苯的提取方式為:采用正己烷溶解樣品后用乙腈直接提??；固體樣品中多氯聯(lián)苯的提取方式為:采用乙腈高速勻漿提取。
[0010]所述的高速勻漿條件為:以1000(Tl5000 rpm分散勻漿提取I?3min。
[0011]所述的轉(zhuǎn)溶方式為采用正己烷將乙腈提取濃縮物轉(zhuǎn)溶。
[0012]所述的濃硫酸-硅膠分散固相萃取兩次凈化，其操作方式為:向轉(zhuǎn)溶后的溶液中加入濃硫酸，進(jìn)行渦旋、離心處理；去掉硫酸溶液后，再加入無水硫酸鈉和硅膠，進(jìn)行渦旋、離心處理；取上清液，35?45°C旋轉(zhuǎn)蒸干。
[0013]所述的渦旋、離心為:渦旋0.5?2 min，以轉(zhuǎn)速4000?5000 r/min轉(zhuǎn)速離心3?5min。
[0014]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下優(yōu)點:
①本發(fā)明能對高脂肪含量食品中七種指示性多氯聯(lián)苯含量同時進(jìn)行測定，可以解決現(xiàn)有技術(shù)對前處理設(shè)備要求高、選擇性差、前處理操作步驟繁瑣、檢測耗時長、效率低等缺占.②本方法具有檢測速度快，靈敏度高、準(zhǔn)確率高、選擇性好、對前處理設(shè)備要求低、在常規(guī)檢測實驗室中適應(yīng)性好等優(yōu)點；
③操作方法簡便、回收率高、重現(xiàn)性好。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0015]圖1橄欖油樣品中七種指示性多氯聯(lián)苯的凈化效果色譜圖；
圖2鯧魚樣品中七種指示性多氯聯(lián)苯的凈化效果色譜圖。

【具體實施方式】
[0016]下面結(jié)合實例對本發(fā)明作進(jìn)一步地說明，但本發(fā)明的保護(hù)范圍并不限于此。
[0017]高脂肪含量食品中七種指示性多氯聯(lián)苯的同時測定方法，包括如下步驟:將樣品提取、濃縮、正己烷轉(zhuǎn)溶、濃硫酸凈化和硅膠分散固相萃取凈化、濃縮、定容、過濾和氣相色譜分析測試，采用基質(zhì)匹配工作溶液校正定量。
[0018]油脂樣品采用正己烷溶解后用乙腈直接提取，固體樣品采用乙腈高速分散勻漿提取，高速分散勻漿的條件是:以1000(Tl5000rpm高速分散勻漿提取I?3min。
[0019]所述的正己烷轉(zhuǎn)溶，其方式為:依次用10mL、5mL、5mL的正己烷將100 mL雞心瓶中的樣品提取物轉(zhuǎn)溶至50 mL具塞離心管中。
[0020]使用濃硫酸凈化和硅膠分散固相萃取進(jìn)行兩次凈化，其操作方式為:向已用正己烷轉(zhuǎn)溶的50 mL具塞離心管中加入2.00 mL濃硫酸，渦旋、離心后均勻加入去離子水2.0mL,潤旋、離心,去掉下層硫酸溶液，依次加入2.0 g的無水硫酸鈉和1.0 g的娃膠,潤旋、離心，取全部上清液并在40°C下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)近干，用2.00 mL正己烷定容并經(jīng)0.22 μ m濾膜過濾，待分析。
[0021]所述的潤旋、離心為潤旋0.5?2 min,以轉(zhuǎn)速4000?5000 r/min轉(zhuǎn)速離心3?5min。
[0022]實施例1
以橄欖油為樣品:
稱取橄欖油樣品2.00 g于50 mL具塞離心管中，加入2.0 mL的正己烷溶解樣品，加入25.0 mL的乙腈,潤旋I min,加入10.0 g的無水硫酸鈉，潤旋30 s,離心管于4500 r/min轉(zhuǎn)速離心3 min,上清液全部傾倒入100 mL雞心瓶中；加入25.0 mL的乙腈重提一次,合并上清液并在40°C下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至近干；用20.0 mL的正己燒分三次(1mL, 5mL, 5mL)將上述100 mL雞心瓶中樣品提取物轉(zhuǎn)溶至50 mL具塞離心管中，加入2.00 mL濃硫酸，渦旋I min，以轉(zhuǎn)速4500 r/min轉(zhuǎn)速離心3 min,均勻加入去離子水2.0 mL，潤旋15 s,以轉(zhuǎn)速4500 r/min轉(zhuǎn)速離心3 min,用吸管吸去下層硫酸溶液,依次加入2.0 g的無水硫酸鈉和1.0 g的硅膠，潤旋I min,以轉(zhuǎn)速4500 r/min轉(zhuǎn)速離心3 min,取全部上清液并在40°C下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)近干，用2.00 mL正己烷定容并經(jīng)0.22 μ m濾膜過濾，待分析；
基質(zhì)匹配工作曲線的制定:
取適量的七種指示性多氯聯(lián)苯混合標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，用正己烷定容至10.0 mL配制成1000μ g/L標(biāo)準(zhǔn)儲備液，于-4°C冰箱中保存?zhèn)溆茫?br> 分別在五個不同的50 mL具塞離心管中各稱取2.0 g的空白植物油樣品，按照“樣品前處理”節(jié)進(jìn)行提取和凈化，得到空白基質(zhì)的提取液以空白基質(zhì)提取液和適量的標(biāo)準(zhǔn)儲備液配制得到基質(zhì)匹配工作曲線，校正曲線濃度點分別為10、20、40、100、500μ g/L。
[0023]樣品測定:
①使用氣相色譜儀(配備μ ECD檢測器)對分析樣品進(jìn)行測定，分析測試條件如下:色譜柱:ΗΡ-5毛細(xì)管(30 mX0.32 mmX0.25 μ m);載氣:高純氮氣(99.999%)，恒流模式，柱流速:0.80 mL/min ;進(jìn)樣量:1.00 μ L，不分流進(jìn)樣；進(jìn)樣口溫度250 °C ;尾吹氣流量:100.0 mL/min ;檢測器(μ E⑶)溫度310 V ;柱溫升溫程序:初始溫度60 °C，保持2min,以 30 °C/min 升至 180 °C ,保持 16 min,以 20 °C/min 升至 280 °C ,保持 5 min,以30°C/min 升至 300 °C，保持 2 min。
[0024]應(yīng)用與儀器相配的色譜工作站軟件對分析數(shù)據(jù)進(jìn)行采集和分析；其中基質(zhì)匹配校正曲線質(zhì)量濃度點分別為10、20、40、100和500 μ g/L,以工作溶液的峰面積為縱坐標(biāo)(7)，質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)(X μ g/kg)繪制校正曲線；分別對空白樣品、校正曲線濃度點、質(zhì)控樣品和實際樣品進(jìn)行分析測試與數(shù)據(jù)采集。
[0025]用基質(zhì)匹配校正曲線對高脂肪含量食品中七種指示性多氯聯(lián)苯含量進(jìn)行校正，計算得到含量值。
[0026]測定橄欖油樣品的線性范圍、線性方程、相關(guān)系數(shù)、檢出限和定量限見表1 ;
表1橄欖油中七種指示性多氯聯(lián)苯的線性方程、相關(guān)系數(shù)、線性范圍、檢出限和定量限

【權(quán)利要求】
1.高脂肪含量食品中七種指示性多氯聯(lián)苯的同時測定方法，其特征在于:包括以下步驟:樣品中多氯聯(lián)苯的提取，轉(zhuǎn)溶，濃硫酸-硅膠分散固相萃取兩次凈化。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的高脂肪含量食品中七種指示性多氯聯(lián)苯的同時測定方法，其特征在于:油脂樣品中多氯聯(lián)苯的提取方式為:采用正己烷溶解樣品后用乙腈直接提?。还腆w樣品中多氯聯(lián)苯的提取方式為:采用乙腈高速勻漿提取。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的高脂肪含量食品中七種指示性多氯聯(lián)苯的同時測定方法，其特征在于:所述的高速勻漿條件為:以1000(Tl5000 rpm分散勻漿提取I?3min。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的高脂肪含量食品中七種指示性多氯聯(lián)苯的同時測定方法，其特征在于:所述的轉(zhuǎn)溶方式為采用正己烷將乙腈提取濃縮物轉(zhuǎn)溶。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的高脂肪含量食品中七種指示性多氯聯(lián)苯的同時測定方法，其特征在于:所述的濃硫酸-硅膠分散固相萃取兩次凈化，其操作方式為:向轉(zhuǎn)溶后的溶液中加入濃硫酸，進(jìn)行渦旋、離心處理；去掉硫酸溶液后，再加入無水硫酸鈉和硅膠，進(jìn)行渦旋、離心處理；取上清液，35?45°C旋轉(zhuǎn)蒸干。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的高脂肪含量食品中七種指示性多氯聯(lián)苯的同時測定方法，其特征在于:所述的渦旋、離心為:渦旋0.5?2 min,以轉(zhuǎn)速4000?5000 r/min轉(zhuǎn)速離心3?5min。
【文檔編號】G01N30/02GK104076109SQ201410344101
【公開日】2014年10月1日 申請日期:2014年7月18日 優(yōu)先權(quán)日:2014年7月18日
【發(fā)明者】丁立平 申請人:中華人民共和國福清出入境檢驗檢疫局