本發(fā)明涉及醫(yī)學(xué)檢測領(lǐng)域，具體而言，涉及一種確定應(yīng)用于待校準(zhǔn)測量系統(tǒng)的校準(zhǔn)系數(shù)的方法，以及一種用于校準(zhǔn)待測樣本中的分析物的測量值的方法和系統(tǒng)，以用于臨床檢驗中。

背景技術(shù)：

在臨床醫(yī)學(xué)檢驗中，通常需要對生化分析儀進(jìn)行定期校準(zhǔn)或者對在每次測量前或測量時對標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行測量從而控制儀器狀態(tài)、不同批次的試劑、室內(nèi)環(huán)境因素或人員操作造成的誤差。在質(zhì)控過程中，需要確定校準(zhǔn)曲線，并且根據(jù)確定的校準(zhǔn)曲線對分析物的測量值進(jìn)行校準(zhǔn)。

而在傳統(tǒng)的醫(yī)學(xué)檢驗中使用的樣本通常是病人到醫(yī)院現(xiàn)場采集的新鮮樣本，這樣的樣本采集方法存在受時間空間限制、樣本運(yùn)輸不便或保存時間短暫等問題，因此現(xiàn)階段開發(fā)了一些新型的不需要到醫(yī)院去采樣的方法，例如，在家或其他任意場所隨時根據(jù)需要進(jìn)行干血斑片采樣或者干尿斑片采樣方法等。這些采樣方法提供了方便廉價的樣品采集，可以很容易地通過郵件、包裹等方式被運(yùn)到分析實驗室，并且可以穩(wěn)定地進(jìn)行長期貯存。

然而由于上述采樣方法不同于傳統(tǒng)的采樣方法，并且存儲時間較長，所以迫切地需要建立一種校準(zhǔn)對新型采樣方法得到的樣品進(jìn)行測量的系統(tǒng)的方法。同時也迫切需要確定存儲時間的長短對于通過新型采樣方法獲得的樣品中分析物的測量值的影響。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本申請?zhí)峁┝艘环N確定使用了不同的樣本處理方法并經(jīng)一定存儲時間的待校準(zhǔn)測量系統(tǒng)的校準(zhǔn)系數(shù)的方法以及校準(zhǔn)上述使用了不同的樣本處理方法并經(jīng)一定存儲時間的待測樣本中的分析物的測量值的方法。

在本申請的一個方面中，提供了一種一種確定應(yīng)用于待校準(zhǔn)測量系統(tǒng)的校準(zhǔn)系數(shù)的方法，包括：獲取N₁個校準(zhǔn)用樣本對，其中每個校準(zhǔn)用樣本對包括方法一樣本以及方法二樣本，且所述每個校準(zhǔn)用樣本對中的方法一樣本和方法二樣本是基于同一來源的樣本；將所述N₁個校準(zhǔn)用樣本對存儲時間T₁，對每個所述存儲時間T₁后的方法一樣本M_T1以及相應(yīng)的方法二樣本S_T1中的分析物的含量進(jìn)行檢測，其中N₁個所述方法一樣本中的分析物的測量值分別為Y_1,T1,Y_2,T1…Y_N1,T1，并且對應(yīng)的N₁個所述方法二樣本中的分析物的測量值分別為X_1,T1,X_2,T1…X_N1,T1，N₁為大于等于2的整數(shù)；以及通過對上述測量值Y_1,T1,Y_2,T1…Y_N1,T1以及X_1,T1,X_2,T1…X_N1,T1進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，確定反映在存儲時間T₁時方法一樣本與方法二樣本中的分析物的測量值之間映射關(guān)系的校準(zhǔn)方程的校準(zhǔn)系數(shù)。在某些實施方式中，所述數(shù)據(jù)處理是通過魯棒的估計方法進(jìn)行的。在某些實施方式中，所述校準(zhǔn)方程為線性方程。在某些實施方式中，所述校準(zhǔn)系數(shù)包括斜率A_T1及軸截距B_T1。

在某些實施方式中，所述確定校準(zhǔn)系數(shù)的步驟包括：以所述X_1,T1,X_2,T1…X_N1,T1中的每一個為橫坐標(biāo)和所述Y_1,T1,Y_2,T1…Y_N1,T1中的相應(yīng)一個為縱坐標(biāo)獲得N₁個校準(zhǔn)點(diǎn)；確定所述N₁個校準(zhǔn)點(diǎn)之間的一個或多個可能斜率，其中借助至少一個魯棒的估計方法，確定概率斜率A_T1，其中所述魯棒的估計方法是在出現(xiàn)異常值或分布假設(shè)僅近似有效的情況下也仍提供穩(wěn)定的統(tǒng)計估計量的統(tǒng)計估計方法；并且通過所述N₁個校準(zhǔn)點(diǎn)確定多條具有概率斜率A_T1的直線，確定每條所述具有概率斜率A_T1的直線的軸截距，借助至少一個所述魯棒的估計方法，由多個軸截距確定概率及軸截距B_T1。在某些實施方式中，所述確定校準(zhǔn)系數(shù)的步驟進(jìn)一步包括：執(zhí)行似然性觀察，其中在似然性觀察時丟棄不現(xiàn)實的校準(zhǔn)點(diǎn)和/或不現(xiàn)實的斜率和/或不現(xiàn)實的軸截距。

在某些實施方式中，所述確定應(yīng)用于待校準(zhǔn)測量系統(tǒng)的校準(zhǔn)系數(shù)的方法進(jìn)一步包括：獲取N_i個校準(zhǔn)用樣本對，將其存儲時間T_i，其中所述T_i不等于T₁；對 每個所述存儲時間T_i后的方法一樣本M_Ti以及相應(yīng)的方法二樣本S_Ti中的分析物的含量進(jìn)行檢測，其中N_i個所述方法一樣本中的分析物的測量值分別為Y_1,Ti,Y_2,Ti…Y_Ni,Ti，并且對應(yīng)的N_i個所述方法二樣本中的分析物的測量值分別為X_1,Ti,X_2,Ti…X_Ni,Ti，N_i為大于等于2的整數(shù)；以及通過對上述測量值Y_1,Ti,Y_2,Ti…Y_Ni,Ti以及X_1,Ti,X_2,Ti…X_Ni,Ti進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，確定反映在存儲時間T_i時方法一樣本與方法二樣本中的分析物的測量值之間映射關(guān)系的校準(zhǔn)方程的校準(zhǔn)系數(shù)。在某些實施方式中，所述數(shù)據(jù)處理是通過魯棒的估計方法進(jìn)行的。在某些實施方式中，所述校準(zhǔn)方程為線性方程。在某些實施方式中，所述校準(zhǔn)系數(shù)包括斜率A_Ti及軸截距B_Ti。

在某些實施方式中，所述確定應(yīng)用于待校準(zhǔn)測量系統(tǒng)的校準(zhǔn)系數(shù)的方法進(jìn)一步包括：獲取Z對斜率A_Ti及軸截距B_Ti，其中所述Z為大于等于2的整數(shù)；分別確定斜率A_Ti以及軸截距B_Ti隨存儲時間T_i變化的回歸曲線；基于所述斜率隨時間變化的回歸曲線確定所述斜率隨時間變化的回歸方程A(t)；以及基于所述軸截距隨時間變化的回歸曲線確定所述軸截距隨存儲時間變化的回歸方程B(t)。

在某些實施方式中，所述方程A(t)和B(t)均為指數(shù)方程。在某些實施方式中，所述校準(zhǔn)方程為：y＝A(t)*x+B(t)。

在某些實施方式中，所述確定應(yīng)用于待校準(zhǔn)測量系統(tǒng)的校準(zhǔn)系數(shù)的方法進(jìn)一步包括：根據(jù)所述回歸方程A(t)和所述回歸方程B(t)，對于任意存儲時間T_β，獲得A_Tβ及B_Tβ的值；將所述A_Tβ及B_Tβ的值代入所述校準(zhǔn)方程中，從而根據(jù)所述方法一樣本中的分析物的測量值Y_Nj,Tβ推得與其對應(yīng)的所述方法二樣本中的分析物的測量值X_Nj,Tβ。

在某些實施方式中，所述A(t)＝(A₁-A₂)e^-k(t-T0)+A₂，其中t為樣本的存儲時間，所述t的范圍為T₀-T_∞，單位為小時，A₁為t＝T₀時獲得的所述校準(zhǔn)方程的斜率，A₂為t＝T_∞時后獲得的所述校準(zhǔn)方程的斜率。并且，在某些實施方式中，所述T_∞的值隨著所述測量值y的不同而具有不同的值。在某些實施方式中，所述T₀的范圍為1-2小時。在某些實施方式中，T_∞的范圍為120-240小時。在某些實施方式中，k的范圍為0.010-0.100。在某些實施方式中，A₁的范圍為0.5-5.0，優(yōu)選地為0.85-0.90，A₂的范圍為0.5-5.0，優(yōu)選地為0.65-0.80，A的范圍為0.5-5.0， 優(yōu)選地為0.65-0.90。

在某些實施方式中，所述B(t)＝(B₂-B₁)(1-e^-p(t-T0))+B₁，其中t為樣品存儲的時間，所述t的范圍為T₀-T_∞，單位為小時，B₁為t＝T₀時獲得的所述校準(zhǔn)方程的軸截距，B₂為t＝T_∞時后獲得的所述校準(zhǔn)方程的軸截距。并且，在某些實施方式中，所述T_∞的值隨著所述測量值y的不同而具有不同的值。在某些實施方式中，所述T₀的范圍為1-2小時。在某些實施方式中，T∞的范圍為120-240小時。在某些實施方式中，p的范圍為0.010-0.100。在某些實施方式中，B₁大于等于0，優(yōu)選地為0.0040-0.0050，B₂大于等于0，優(yōu)選地為0.0085-0.0170，B大于等于0，優(yōu)選地為0.0040-0.0101。

本申請的另外一方面提供了一種用于校準(zhǔn)經(jīng)方法一處理的待測樣本中的分析物的測量值的方法，包括：對所述待測樣本中的分析物的含量進(jìn)行檢測，以確定測量值y，其中所述待測樣本是經(jīng)方法一處理后存儲了時間t后所得到的；確定與所述存儲時間t相對應(yīng)的校準(zhǔn)方程的校準(zhǔn)系數(shù)，其中所述校準(zhǔn)系數(shù)隨著存儲時間t的不同而變化；以及基于所述校準(zhǔn)方程，將所述分析物的測量值y換算為其所對應(yīng)的經(jīng)方法二處理的樣本中的分析物的測量值x，其中，所述測量值x代表與所述待測樣本同一來源的經(jīng)方法二處理的樣本中將檢測到的所述分析物的含量值。在某些實施方式中，每個經(jīng)方法二處理的樣本中所述分析物的測量值x不隨存儲時間的變化而變化。

在某些實施方式中，所述校準(zhǔn)方程為：y＝A(t)*x+B(t)。

在某些實施方式中，所述方程A(t)和B(t)均為指數(shù)方程。

在某些實施方式中，所述其中t為樣本的存儲時間，所述t的范圍為T₀-T_∞，單位為小時，A₁為t＝T₀時獲得的所述校準(zhǔn)方程的斜率，A₂為t＝T_∞時后獲得的所述校準(zhǔn)方程的斜率。在某些實施方式中，所述T₀的范圍為1-2小時。在某些實施方式中，T_∞的范圍為120-240小時。在某些實施方式中，k的范圍為0.010-0.100。在某些實施方式中，A₁的范圍為0.5-5.0，優(yōu)選地為0.85-0.90。在某些實施方式中，A₂的范圍為0.5-5.0，優(yōu)選地為0.65-0.80。在某些實施方式中，A的范圍為0.5-5.0，優(yōu)選地為0.65-1.0，更優(yōu)選地為0.65-0.90。 在某些實施方式中，所述其中t為樣品存儲時間，所述t的范圍為T₀-T_∞，單位為小時，B₁為t＝T₀時獲得的所述校準(zhǔn)方程的軸截距，B₂為t＝T_∞時后獲得的所述校準(zhǔn)方程的軸截距。在某些實施方式中，所述T₀的范圍為1-2小時。在某些實施方式中，T_∞的范圍為120-240小時。在某些實施方式中，p的范圍為0.010-0.100。在某些實施方式中，B₁大于等于0，優(yōu)選地為0.0040-0.0050。在某些實施方式中，B₂大于等于0，優(yōu)選地為0.0085-0.0170。在某些實施方式中，B大于等于0，優(yōu)選地為0.0020-0.0200，更優(yōu)選地為0.0040-0.0101。

在某些實施方式中，所述待測樣本為體液樣本。在某些實施方式中，所述待測樣本是經(jīng)干燥處理后存儲時間t后的體液干燥樣本。在某些實施方式中，所述待測樣本為干血樣本，所述與待測樣本同一來源的經(jīng)方法二處理的樣本為與所述待測樣本同一來源的全血樣本。在一些實施方式中，所述干血樣本被采集和存儲在干血斑片上。在某些實施方式中，所述待測樣本為干尿樣本，所述與待測樣本同一來源的經(jīng)方法二處理的樣本為與所述待測樣本同一來源的新鮮尿液樣本。在一些實施方式中，所述干尿樣本被采集和存儲在干尿斑片上。

在某些實施方式中，所述分析物為蛋白，所述測量值x和y為蛋白含量百分比或蛋白重量。在某些實施方式中，所述蛋白是糖化血紅蛋白、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、堿性磷酸酶、r-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶、膽堿酯酶、谷氨酸脫氫酶、異檸檬酸脫氫酶、亮氨酸氨基肽酶、高密度脂蛋白膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇、肌酸激酶、肌酸激酶同工酶、乳酸脫氫酶、a-羥丁酸脫氫酶、補(bǔ)體C3、補(bǔ)體C4、免疫球蛋白A、免疫球蛋白M、免疫球蛋白G、抗鏈球菌溶血素、類風(fēng)濕因子、前白蛋白、a-L-巖藻糖苷酶、轉(zhuǎn)鐵蛋白、脂蛋白a、尿微量白蛋白、5’核苷酸酶、載脂蛋白B、β2-微球蛋白、載脂蛋白A、糖化血紅蛋白、腺苷脫氨酶、C-反應(yīng)蛋白、胱抑素C、總蛋白、白蛋白、淀粉酶中的至少一種。在某些實施方式中，所述蛋白是糖化血紅蛋白。

在某些實施方式中，所述待測樣本的校準(zhǔn)得到的標(biāo)準(zhǔn)測量值與其實際值的差異不超過20％，優(yōu)選的不超過10％，更優(yōu)選的在5％-10％之間，或在2％-5％之間，或不超過2％。

本申請的再一個方面提供了一種用于檢測經(jīng)方法一處理的待測樣本中的分析物的測量值的系統(tǒng)，包括：樣本收集器，其用于采集并儲存待測樣本；檢測設(shè)備，其用于對所述待測樣本中的分析物的含量進(jìn)行檢測，以確定測量值y，其中所述待測樣本是經(jīng)方法一處理后存儲了時間t后所得到的；以及校準(zhǔn)裝置，其用于確定與所述存儲時間t相對應(yīng)的校準(zhǔn)方程的校準(zhǔn)系數(shù)，其中所述校準(zhǔn)系數(shù)隨著存儲時間t的不同而變化，并用于基于所述校準(zhǔn)方程，將所述分析物的測量值y換算為其所對應(yīng)的經(jīng)方法二處理的樣本中的分析物的測量值x，其中，所述測量值x代表與所述待測樣本同一來源的經(jīng)方法二處理的樣本中將檢測到的所述分析物的含量值。

并且，在某些實施方式中，所述樣本收集器為干血斑片。所述檢測設(shè)備為高效液相色譜儀。

以上為本申請的概述，可能有簡化、概括和省略細(xì)節(jié)的情況，因此本領(lǐng)域的技術(shù)人員應(yīng)該認(rèn)識到，該部分僅是示例說明性的，而不旨在以任何方式限定本申請范圍。本概述部分既非旨在確定所要求保護(hù)主題的關(guān)鍵特征或必要特征，也非旨在用作為確定所要求保護(hù)主題的范圍的輔助手段。

附圖說明

通過下面說明書和所附的權(quán)利要求書并與附圖結(jié)合，將會更加充分地描述本申請內(nèi)容的上述和其他特征。可以理解，這些附圖僅描繪了本申請內(nèi)容的若干實施方式，因此不應(yīng)認(rèn)為是對本申請內(nèi)容范圍的限定。通過采用附圖，本申請內(nèi)容將會得到更加明確和詳細(xì)的說明。

圖1示出了根據(jù)本發(fā)明的一種具體實施方式的用于確定應(yīng)用于待校準(zhǔn)測量系統(tǒng)的校準(zhǔn)系數(shù)的方法100的示例性流程圖。

圖2示出了根據(jù)本發(fā)明的另一種具體實施方式的用于確定應(yīng)用于待校準(zhǔn)測量系統(tǒng)的校準(zhǔn)系數(shù)的方法200的示例性流程圖。

圖3示出了根據(jù)本發(fā)明的一種具體實施方式的用于校準(zhǔn)經(jīng)方法一處理的待測樣本中的分析物的測量值的方法300的示例性流程圖。

圖4示出了將DBS(干血斑片)樣本與WB(全血)樣本均存儲2小時，與其相對應(yīng)的DBS(干血斑片)樣本中HbA1c(糖化血紅蛋白)的測量值y與WB(全血)樣本中HbA1c的測量值x的關(guān)系。其中待測樣本對數(shù)量為62對，以DBS樣本中HbA1c的測量值為橫坐標(biāo)，以WB樣本中HbA1c的測量值為縱坐標(biāo)，獲得62個校準(zhǔn)點(diǎn)，借助魯棒的線性回歸方法確定概率斜率A為0.8713，概率軸截距B為0.0052，線性回歸相關(guān)系數(shù)的平方R²＝0.9923。

圖5示出了將DBS樣本存儲2小時，WB樣本存儲時間19小時，與其相對應(yīng)的DBS樣本中HbA1c的測量值y與WB樣本中HbA1c的測量值x的關(guān)系。其中待測樣本對數(shù)量為62對，以DBS樣本中HbA1c的測量值為橫坐標(biāo)，以WB樣本中HbA1c的測量值為縱坐標(biāo)，獲得62個校準(zhǔn)點(diǎn)，借助魯棒的線性回歸方法確定概率斜率A為0.8788，概率軸截距B為0.0053，線性回歸相關(guān)系數(shù)的平方R²＝0.9951。

圖6示出了在3個不同的存儲時間(分別為T₀＝2小時(圖6a)，T₂＝19小時(圖6b)，T₃＝38小時(圖6c))的條件下DBS樣本中HbA1c的測量值y與WB樣本中HbA1c的測量值x的關(guān)系。其中待測樣本對數(shù)量為62對，以相同存儲時間條件下獲得的DBS樣本中HbA1c的測量值為橫坐標(biāo)，WB樣本中HbA1c的測量值為縱坐標(biāo)，相對應(yīng)每個存儲時間均獲得62個校準(zhǔn)點(diǎn)。在圖6a中借助魯棒的線性回歸方法確定概率斜率A₂為0.8699，概率軸截距B₂為0.0058，線性回歸相關(guān)系數(shù)的平方R²＝0.996。在圖6b中借助魯棒的線性回歸方法確定概率斜率A₁₉為0.8191，概率軸截距B₁₉為0.0075，線性回歸相關(guān)系數(shù)的平方R²＝0.9956。在圖6c中借助魯棒的線性回歸方法確定概率斜率A₃₈為0.8109，概率軸截距B₃₈為0.0079，線性回歸相關(guān)系數(shù)的平方R²＝0.9956。

圖7示出了在3個不同的存儲時間(分別為T₀＝2小時(圖7a)，T₂＝70小時(圖7b)，T₃＝93小時(圖7c))的條件下DBS樣本中HbA1c的測量值y 與WB樣本中HbA1c的測量值x的關(guān)系。其中待測樣本對數(shù)量為72對，以相同存儲時間條件下獲得的DBS樣本中HbA1c的測量值為橫坐標(biāo)，WB(全血)樣本中HbA1c的測量值為縱坐標(biāo)，相對應(yīng)每個存儲時間均獲得72個校準(zhǔn)點(diǎn)。在圖7a中借助魯棒的線性回歸方法確定概率斜率A₂為0.917，概率軸截距B₂為0.0031，線性回歸相關(guān)系數(shù)的平方R²＝0.9969。在圖7b中借助魯棒的線性回歸方法確定概率斜率A₇₀為0.7812，概率軸截距B₇₀為0.0096，線性回歸相關(guān)系數(shù)的平方R²＝0.994。在圖7c中借助魯棒的線性回歸方法確定概率斜率A₉₃為0.7654，概率軸截距B₉₃為0.0106，線性回歸相關(guān)系數(shù)的平方R²＝0.9931。

圖8示出了斜率A以及軸截距和存儲關(guān)系的關(guān)系圖，圖中以存儲時間t為橫坐標(biāo)，以在各個存儲時間分別確定的斜率A以及軸截距B分別作為縱坐標(biāo)，將各個數(shù)據(jù)點(diǎn)用平滑的線相連，并且借助魯棒的回歸估算方法得到模擬的回歸曲線。

圖9示出了校準(zhǔn)系數(shù)A與B之間的關(guān)系，圖中以斜率A為橫坐標(biāo)以及軸截距B為縱坐標(biāo)，將每個存儲時間下確定的A與B一一對應(yīng)獲得數(shù)據(jù)點(diǎn)，并且借助魯棒的估算方法得到A與B之間近線性的關(guān)系。

圖10示出了根據(jù)本發(fā)明的一種具體實施方式的用于校準(zhǔn)經(jīng)方法一處理的待測樣本中的分析物的測量值的系統(tǒng)400的示例框圖。

具體實施方式

在下面的詳細(xì)描述中，參考了構(gòu)成其一部分的附圖。在附圖中，類似的符號通常表示類似的組成部分，除非上下文另有說明。詳細(xì)描述、附圖和權(quán)利要求書中描述的示例性實施方式并非旨在限定。在不偏離本申請的主題的精神或范圍的情況下，可以采用其他實施方式，并且可以做出其他變化?？梢岳斫猓梢詫Ρ疚闹幸话阈悦枋龅?、在附圖中圖解說明的本申請內(nèi)容的各個方面進(jìn)行多種不同構(gòu)成的配置、替換、組合、設(shè)計，而所有這些都明確地構(gòu)成本申請內(nèi)容的一部分。

在下文中，為了對具體實施例進(jìn)行清楚的描述，將采用一些特定的術(shù)語。然而采用這些術(shù)語的本意并非限制本申請的保護(hù)范圍，這些術(shù)語的范圍應(yīng)該擴(kuò)展至 任何以大致相同的手段達(dá)到大致相同的目的的等同替換。

首先參考圖1和圖2來具體說明根據(jù)本發(fā)明中所提供的確定應(yīng)用于待校準(zhǔn)測量系統(tǒng)的校準(zhǔn)系數(shù)的方法的具體實施方式。

圖1示出了根據(jù)本發(fā)明的一種具體實施方式的用于確定應(yīng)用于待校準(zhǔn)測量系統(tǒng)的校準(zhǔn)系數(shù)的方法100的示例性流程圖，所述方法100包括以下步驟：獲取N₁個校準(zhǔn)用樣本對(101)，其中每個校準(zhǔn)用樣本對包括方法一樣本以及方法二樣本，且所述每個校準(zhǔn)用樣本對中的方法一樣本和方法二樣本是基于同一來源的樣本；將所述N₁個校準(zhǔn)用樣本對存儲時間T₁(102)；對每個所述存儲時間T₁后的方法一樣本M_T1以及相應(yīng)的方法二樣本S_T1中的分析物的含量進(jìn)行檢測，其中N₁個所述方法一樣本中的分析物的測量值分別為Y_1,T1,Y_2,T1…Y_N1,T1，并且對應(yīng)的N₁個所述方法二樣本中的分析物的測量值分別為X_1,T1,X_2,T1…X_N1,T1，N₁為大于等于2的整數(shù)(103)；以及通過對上述測量值Y_1,T1,Y_2,T1…Y_N1,T1以及X_1,T1,X_2,T1…X_N1,T1進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，確定反映在存儲時間T₁時方法一樣本與方法二樣本中的分析物的測量值之間映射關(guān)系的校準(zhǔn)方程的校準(zhǔn)系數(shù)(104)。

在本申請中使用的術(shù)語“校準(zhǔn)用樣本對”涉及基于同一來源但經(jīng)不同方法處理的一對用于確定待校準(zhǔn)測量系統(tǒng)的校準(zhǔn)系數(shù)的樣本，其包括方法一樣本以及方法二樣本。

在本申請中涉及的“樣本”可以是本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的能夠用于醫(yī)學(xué)檢驗的任意類型的樣本。在某些實施方式中，所述樣本可以是體液樣本，包括但不限于，血液、尿液、唾液、膿液、痰液、精液、胸膜積水、羊水等。在某些具體的實施方式中，所述樣本為血液。而本申請中涉及的對樣本的不同處理方法也可以包括任何本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的處理方法，例如：對于血液的肝素抗凝、冷藏處理、離心分離血清、抗體孵育、點(diǎn)樣干燥以獲得干血斑片等，或者對于尿液的冷藏處理、離心分離、過濾、抗體孵育、點(diǎn)樣干燥以獲得干尿斑片等。

本申請中述及的“存儲時間T”是指以取樣的時間點(diǎn)為0，至測量發(fā)生時樣本經(jīng)歷的時間。在某些具體的實施方式中，由于取樣后對樣本進(jìn)行的不同處理需要一定時間，從而導(dǎo)致了即使經(jīng)處理后的樣本即刻進(jìn)行了分析物的測量，該樣本此刻的存儲時間T₀仍大于0，但本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解這種樣本實際上是“未經(jīng) 存儲”的。在一些實施方式中，上述T₀的值在不超過48小時、不超過24小時、0-24小時、0-12小時、0-6小時、0-3小時、0-2小時、0-1小時、或者0-0.5小時的范圍內(nèi)。

本申請中涉及的術(shù)語“分析物”是指本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的可以在醫(yī)學(xué)檢驗中被檢測的任意物質(zhì)，包括但不限于，蛋白、核酸、細(xì)胞、化合物、金屬、重金屬、離子等。在某些實施方式中，分析物可以是蛋白，其包括糖化血紅蛋白、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、堿性磷酸酶、r-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶、膽堿酯酶、谷氨酸脫氫酶、異檸檬酸脫氫酶、亮氨酸氨基肽酶、高密度脂蛋白膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇、肌酸激酶、肌酸激酶同工酶、乳酸脫氫酶、a-羥丁酸脫氫酶、補(bǔ)體C3、補(bǔ)體C4、免疫球蛋白A、免疫球蛋白M、免疫球蛋白G、抗鏈球菌溶血素、類風(fēng)濕因子、前白蛋白、a-L-巖藻糖苷酶、轉(zhuǎn)鐵蛋白、脂蛋白a、尿微量白蛋白、5’核苷酸酶、載脂蛋白B、β2-微球蛋白、載脂蛋白A、糖化血紅蛋白、腺苷脫氨酶、C-反應(yīng)蛋白、胱抑素C、總蛋白、白蛋白、淀粉酶中的至少一種。在某些特定的實施方式中，分析物是糖化血紅蛋白。分析物的“含量”通常指分析物的質(zhì)量百分比、體積百分比、數(shù)量百分比、質(zhì)量或數(shù)量等?！皽y量值”通常指在醫(yī)學(xué)檢驗中通過儀器測量獲得的信號在經(jīng)過某種內(nèi)置的數(shù)據(jù)處理或者程序轉(zhuǎn)化后得到的分析物的含量的測定值。

以下將以分析物為糖化血紅蛋白為例進(jìn)行舉例說明方法100。

在步驟101中，獲取來源于同一供體的N₁個校準(zhǔn)用血液樣品對，其中的方法一樣本是干血斑片樣本，而其相對應(yīng)的方法二樣本則是與上述方法一樣本來源于同一供體的新鮮采集的靜脈血樣本。

在步驟102中，將N₁個校準(zhǔn)用樣本對存儲時間T₁。本申請中的“存儲時間”可以是任意長的時間。在一些實施方式中存儲時間在0-3年范圍內(nèi)。在一些實施方式中存儲時間在0-180天范圍內(nèi)。在某些特定的實施方式中，存儲時間在0-240小時范圍內(nèi)。就新鮮采集的靜脈血樣本來說，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以根據(jù)需要測定的分析物的穩(wěn)定性、靜脈血樣本是否經(jīng)過抗凝處理、使用的抗凝劑種類以及存儲環(huán)境條件等來選取適當(dāng)?shù)拇鎯r間范圍，例如：針對在4℃環(huán)境下存儲的經(jīng)肝素抗凝的靜脈血樣本，當(dāng)其中分析物為糖化血紅蛋白時存儲時間可以在0-240小時 的范圍內(nèi)，優(yōu)選地在0-120小時的范圍內(nèi)。就干血斑片樣本來說，本領(lǐng)域技術(shù)人員也可以根據(jù)需要測定的分析物的穩(wěn)定性以及存儲環(huán)境條件等來選取適當(dāng)?shù)拇鎯r間范圍，例如：針對在室溫環(huán)境下存儲的干血斑片，當(dāng)其中分析物為糖化血紅蛋白時存儲時間可以在0-240小時的范圍內(nèi)，優(yōu)選地在0-120小時的范圍內(nèi)，而當(dāng)存儲的環(huán)境變?yōu)?80℃超低溫存儲時，存儲時間可以在0-180天范圍內(nèi)。

在步驟103中，對每個所述存儲時間T₁后的方法一樣本M_T1以及相應(yīng)的方法二樣本S_T1中的分析物的含量進(jìn)行檢測，假設(shè)N₁＝5，5個所述存儲時間T₁后的方法一樣本M_T1中的分析物的測量值分別為Y_1,T1,Y_2,T1,Y_3,T1,Y_4,T1,Y_5,T1，并且對應(yīng)的5個存儲時間T₁后的方法二樣本S_T1中的分析物的測量值分別為X_1,T1,X_2,T1,X_3,T1,X_4,T1,X_5,T1。在某些實施方式中，每個所述方法二中的分析物的測量值是隨存儲時間變化的。在另一些實施方式中，每個所述方法二樣本中的分析物的測量值是基本不隨存儲時間變化的。在一些實施方式中，上述測量值X_1,T1,X_2,T1,X_3,T1,X_4,T1,X_5,T1是對應(yīng)的5個標(biāo)準(zhǔn)樣本經(jīng)存儲時間T₁后所測得的。在另一些實施方式中，方法二樣本中的分析物的測量值是基本不隨存儲時間變化而變化的，因此所述測量值X_1,T1,X_2,T1,X_3,T1,X_4,T1,X_5,T1可以是對應(yīng)的5個方法二樣本未經(jīng)存儲所測得的。

在步驟104中，通過對上述測量值Y_1,T1,Y_2,T1,Y_3,T1,Y_4,T1,Y_5,T1以及X_1,T1,X_2,T1,X_3,T1,X_4,T1,X_5,T1進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，確定反映在存儲時間T₁時方法一樣本與方法二樣本中的分析物的測量值之間映射關(guān)系的校準(zhǔn)方程的校準(zhǔn)系數(shù)。具體地，確定校準(zhǔn)系數(shù)的步驟104包括以測量值X_1,T1,X_2,T1,X_3,T1,X_4,T1,X_5,T1中的每一個為橫坐標(biāo)和以測量值Y_1,T1,Y_2,T1,Y_3,T1,Y_4,T1,Y_5,T1中的與之相應(yīng)的一個為縱坐標(biāo)獲得5(N₁)個校準(zhǔn)點(diǎn)，用平滑的曲線將各個校準(zhǔn)點(diǎn)相連，基本估計反映待測樣本與標(biāo)準(zhǔn)樣本中的分析物的測量值之間映射關(guān)系的校準(zhǔn)方程的種類。常用的校準(zhǔn)方程可以是任意形式的方程，包括但不限于，線性方程、指數(shù)方程、對數(shù)方程、拋物線方程等。H.Passing和W.Bablok發(fā)表在Journal of Clinical Chemistry Clinical Biochemistry,Vol.21,1983,709-720頁上的文章“A New Biometrical Procedure for Testing the Equality of Measurements from Two Different Analytical Methods:Application of linear regression procedures for method comparison studies in Clinical Chemistry,part I”中詳細(xì)地描述了線性回歸的方法在臨床化學(xué)的方法比較研究中 的使用。在本申請的一些實施方式中，反映在存儲時間T₁時方法一樣本與方法二樣本中的分析物的測量值之間映射關(guān)系的校準(zhǔn)方程為線性方程，因此相應(yīng)的待確定的校準(zhǔn)系數(shù)包括斜率A_T1和軸截距B_T1。對于線性方程校準(zhǔn)系數(shù)的確定，可以通過在上述獲得的校準(zhǔn)點(diǎn)中任選兩個校準(zhǔn)點(diǎn)定義一條直線，即確定該直線的斜率A_T1和軸截距B_T1。在N₁個校準(zhǔn)點(diǎn)的情況下，可以得到N₁*(N₁-1)/2個可能的斜率，即當(dāng)N₁＝5時可以得到10個可能的斜率。在此可以考慮所有的校準(zhǔn)點(diǎn)，從而確定校準(zhǔn)點(diǎn)之間的所有可能的斜率。但是替換地，也可以在所述校準(zhǔn)方法中忽略可能的斜率中的一個或多個斜率，從而確定少于所有可能斜率的最大數(shù)量個的斜率。但是在任何情況下都應(yīng)當(dāng)確定校準(zhǔn)點(diǎn)之間的至少兩個可能斜率，優(yōu)選至少三個可能斜率，和特別優(yōu)選地多于三個可能斜率。由通過上述方式確定的在校準(zhǔn)點(diǎn)之間的多個可能的斜率，借助至少一種魯棒的估計方法確定校準(zhǔn)直線的斜率的至少一個估計量，該斜率稱為概率斜率A_T1。之后通過上述5個校準(zhǔn)點(diǎn)確定多條(最多5條)具有概率斜率A_T1的直線，確定每條所述具有概率斜率A_T1的直線的軸截距，并且借助至少一個魯棒的估計方法，由多個軸截距確定概率軸截距B_T1。本申請所述的魯棒的估計方法是指在出現(xiàn)異常值或分布假設(shè)僅近似有效的情況下也仍提供穩(wěn)定的統(tǒng)計估計量的統(tǒng)計估計方法。在一些實施方式中，本申請所用的魯棒的估計方法是魯棒的回歸估計方法。魯棒的估計方法的一種實施方式可以是，首先對獲得的系列數(shù)字(例如：上文中確定的多個可能的斜率或多個可能的軸截距)取中值，而后根據(jù)所述中值對隨機(jī)參量的預(yù)期值的概率分布進(jìn)行估計。通常來說，中值的選取應(yīng)當(dāng)使得所述系列數(shù)字中的至少一半小于或等于該中值并且所述系列數(shù)字中的至少一半大于或等于中值。具體地，中值的選取可以通過將所有獲得的可能的斜率(假設(shè)為m個)按照其數(shù)值大小排列為集合{A₁,A₂,...A_m}中，當(dāng)m為奇數(shù)時，通常可以選擇上述集合中的A_(m+1)/2作為中值，而當(dāng)m為偶數(shù)時，中值則可以為上述集合中各數(shù)值的算術(shù)平均值。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，中值的選取可以是基于剔除了異常值的系列數(shù)字集合的，例如：當(dāng)將上述m個可能的斜率按照其數(shù)值大小排列為集合時，若A₁或者A_m明顯偏離集合中其他數(shù)值較大程度時，將該偏離的數(shù)值剔除之后再選取中值。替換地或附加于生成中值的魯棒的估計方法，原則上還可以采用其它魯棒的估計方法，尤其是基于一個或多個置換算法和/或一個或多個分類算法的其它魯棒的估計方 法和/或其它類型的魯棒的估計方法。也可以采用多個不同的魯棒的估計方法的組合。

在一些實施方式中，步驟104進(jìn)一步包括：執(zhí)行似然性觀察，其中在似然性觀察時丟棄不現(xiàn)實的校準(zhǔn)點(diǎn)和/或不現(xiàn)實的斜率和/或不現(xiàn)實的軸截距。在本申請中所述的似然性觀察是一種統(tǒng)計學(xué)上估計分布概率的方法，其可以通過本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的任意方法實施。在本申請的一些實施方式中，所述似然性觀察可以通過迭代地用校準(zhǔn)點(diǎn)/斜率/軸截距的多個子集合來實施。舉例來說，對于每個校準(zhǔn)點(diǎn)C_N，可以以所有除其以外的校準(zhǔn)點(diǎn)為子集合，根據(jù)子集合中的校準(zhǔn)點(diǎn)確定概率斜率及概率軸截距，檢查該校準(zhǔn)點(diǎn)C_N對概率斜率或概率軸截距是否產(chǎn)生影響。將那些對于根據(jù)其余的校準(zhǔn)點(diǎn)所確定的概率斜率或概率軸截距具有超出預(yù)定偏移影響的，或者處于根據(jù)其余的校準(zhǔn)點(diǎn)所預(yù)期的分布圖或值域之外的校準(zhǔn)點(diǎn)被稱為具有“異常值”或者“不現(xiàn)實”的校準(zhǔn)點(diǎn)。在本申請的另一些實施方式中，上述似然性觀察可以通過如上文描述魯棒的估計方法時涉及的中值確定的方法實施。

圖2示出了根據(jù)本發(fā)明的另一種具體實施方式的用于確定應(yīng)用于待校準(zhǔn)測量系統(tǒng)的校準(zhǔn)系數(shù)的方法200的示例性流程圖。圖1所示的方法公開了對于存儲時間T₁，計算其相應(yīng)的校準(zhǔn)方程的校準(zhǔn)系數(shù)A_T1和B_T1的具體步驟，而方法200則公開了對于不同的時間存儲時間T_i，計算其相應(yīng)的校準(zhǔn)方程的校準(zhǔn)系數(shù)A_Ti和B_Ti，并基于所計算的Z組A_Ti和B_Ti，確定A_Ti和B_Ti的時間回歸曲線，從而確定回歸方程A(t)以及B(t)，具體如下文所述。

所述方法200包括以下步驟：獲取N₁個校準(zhǔn)用樣本對(201)；將所述N₁個校準(zhǔn)用樣本對存儲時間T₁(202)；對每個所述存儲時間T₁后的方法一樣本M_T1以及相應(yīng)的方法二樣本S_T1中的分析物的含量進(jìn)行檢測(203)；以及通過對上述測量值進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，確定反映在存儲時間T₁時方法一樣本與方法二樣本中的分析物的測量值之間映射關(guān)系的校準(zhǔn)方程的校準(zhǔn)系數(shù)(204)；。獲取N_i個校準(zhǔn)用樣本對(201_i)；將其存儲時間T_i，其中所述T_i不等于T₁(202_i)；對每個所述存儲時間T_i后的方法一樣本M_Ti以及相應(yīng)的方法二樣本S_Ti中的分析物的含量進(jìn)行檢測(203_i)；以及通過對上述測量值進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，確定反映在存儲時間T_i時方法一樣本與方法二樣本中的分析物的測量值之間映射關(guān)系的校準(zhǔn) 方程的校準(zhǔn)系數(shù)(204_i)；獲取Z組校準(zhǔn)系數(shù)，并且確定上述校準(zhǔn)系數(shù)隨時間變化的回歸方程(205)。

其中方法200中的步驟201、201_i對應(yīng)于方法100中的步驟101；步驟202、202_i對應(yīng)于步驟102；步驟203、203_i對應(yīng)于步驟103；步驟204、204_i對應(yīng)于步驟104；具體操作細(xì)節(jié)參見方法100中對相應(yīng)的步驟的描述。并且步驟201中的N₁個校準(zhǔn)用樣本對與步驟201_i中的N_i個校準(zhǔn)用樣本對可以是相同的，也可以是不同的；步驟201-204及步驟201_i-204_i可以是同時進(jìn)行的，也可以是先后進(jìn)行的；但存儲時間T_i不等于T₁。在本申請的一些實施方式中，反映在存儲時間T₁或T_i時方法一樣本與方法二樣本中的分析物的測量值之間映射關(guān)系的校準(zhǔn)方程為線性方程，因此相應(yīng)的待確定的校準(zhǔn)系數(shù)包括斜率和軸截距，即步驟201-204中確定的校準(zhǔn)系數(shù)為A_T1和B_T1，而步驟201_i-204_i中確定的校準(zhǔn)系數(shù)為A_Ti和B_Ti。

在步驟205中，獲取Z組校準(zhǔn)系數(shù)，并且確定上述校準(zhǔn)系數(shù)隨時間變化的回歸方程。以校準(zhǔn)方程為線性方程為例，步驟205具體包括獲取Z對斜率{A_T1…A_Ti…A_Tz}及軸截距{B_T1…B_Ti…B_Tz}，其中所述Z為大于等于2的整數(shù)；并且基于斜率隨時間變化的回歸曲線確定所述斜率隨時間變化的回歸方程A(t)；以及基于所述軸截距隨時間變化的回歸曲線確定所述軸截距隨存儲時間變化的回歸方程B(t)。例如，以存儲時間為橫坐標(biāo)，斜率和軸截距分別作為縱坐標(biāo)，獲得Z個數(shù)據(jù)點(diǎn)，用平滑的曲線將各個數(shù)據(jù)點(diǎn)相連，基本估計斜率或軸截距隨存儲時間變化的回歸方程的種類，其中所述回歸方程可以是任意形式的方程，包括但不限于，線性方程、指數(shù)方程、對數(shù)方程、拋物線方程等。類似地，在本申請的一些實施方式中，校準(zhǔn)系數(shù)A及B隨時間t變化的方程可以均為指數(shù)方程、均為對數(shù)方程、或者一個為指數(shù)方程另一個為對數(shù)方程。

在某些實施方式中，所述方程A(t)和B(t)均為指數(shù)方程。在某些實施方式中，所述校準(zhǔn)方程為：y＝A(t)*x+B(t)。在某些實施方式中，可以借助至少一個魯棒的估計方法確定校準(zhǔn)系數(shù)A及B隨時間t變化的指數(shù)方程。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，根據(jù)不同的樣本處理方式、不同的存儲環(huán)境條件(例如不同的存儲溫度或濕度等)上述校準(zhǔn)系數(shù)A及B隨時間t變化的方程可能是不同類型的，或者同是指數(shù)方程但各相關(guān)參數(shù)、系數(shù)等是不同的。在某些特定的實施例中上述估計方 法包括：首先借助上述各數(shù)據(jù)點(diǎn)相連后所得到曲線的趨勢(例如：校準(zhǔn)系數(shù)隨存儲時間的增加而升高或降低的趨勢，存儲時間及校準(zhǔn)系數(shù)各自的取值極限等)確定所述方程中應(yīng)當(dāng)包含的各種參數(shù)，并且建立包含上述各種未知參數(shù)的方程，而后通過將至少三個數(shù)據(jù)點(diǎn)(包括但不限于，所述方程中指數(shù)趨向于0時的數(shù)據(jù)點(diǎn)以及所述方程中指數(shù)趨向于負(fù)無窮時的數(shù)據(jù)點(diǎn)等)代入上述方程中推導(dǎo)出所述指數(shù)方程的各參數(shù)的估計方式。在某些實施方式中，樣本在取樣并且經(jīng)處理后即刻進(jìn)行了分析物的測量(即未經(jīng)存儲)，此時存儲時間為T₀，根據(jù)測量值x和y獲得的斜率A及軸截距B分別為A₁和B₁。同時應(yīng)當(dāng)理解，為了保證樣本中的分析物能夠被有效檢測出，針對不同的待測量分析物的性質(zhì)、樣本的處理方法、存儲環(huán)境等因素，經(jīng)處理的樣本的最大存儲時間T∞實際上是受限制的，例如：在0-3年范圍內(nèi)、0-180天范圍內(nèi)或0-120小時范圍內(nèi)等。對經(jīng)最大存儲時間T∞的經(jīng)處理的樣本進(jìn)行測量，獲得A₂和B₂。據(jù)此設(shè)定所述指數(shù)方程的指數(shù)系數(shù)為負(fù)，此時所述指數(shù)方程中A與B的值隨時間增長最終分別無限接近A₂和B₂。

以分析物為糖化血紅蛋白、待測樣品為經(jīng)干燥處理的存儲在室溫環(huán)境下的干血斑片、標(biāo)準(zhǔn)樣本為經(jīng)肝素抗凝的4℃環(huán)境下存儲的靜脈血樣為例，設(shè)指數(shù)方程的底數(shù)為自然常數(shù)e(其值約為2.71828)。由于干血斑片在指尖采血后通常需要經(jīng)室溫條件下1-2小時的干燥處理，即T₀為1-2小時。在本申請的某些實施方式中T₀為2小時，獲得斜率A₁及軸截距B₁。同時，由于若需在上述靜脈血樣中有效的檢測出糖化血紅蛋白，樣本的存儲時間T∞一般不能超過120-240小時，否則檢測結(jié)果將失去其可靠性，即本申請的某些實施方式中T∞在120-240小時之間，獲得斜率A₂及軸截距B₂。另外通過實驗得到至少一個存儲時間介于T₀與T∞之間的數(shù)據(jù)點(diǎn)，并根據(jù)各數(shù)據(jù)點(diǎn)相連后所得到曲線的趨勢建立包含各種未知參數(shù)的方程，例如設(shè)，其中g(shù)、i、k、j均為未知參數(shù)，當(dāng)將t＝T₀＝2小時、A＝A₁；t＝T∞＝120-240小時、A＝A₂；以及t趨向于正無窮時、A＝A₂這三個數(shù)據(jù)點(diǎn)分布代入上述含有未知參數(shù)g、i、k、j的指數(shù)方程，可以推導(dǎo)出i＝T₀，在此處i＝2，并且j＝A₂，g＝(A₁-A₂)，即由此得到斜率A隨時間t變化的指數(shù)方程為：雖然根據(jù)上述數(shù)據(jù)點(diǎn)不能推出k值，但是可以根 據(jù)上述的至少一個存儲時間介于T₁與T₂之間的數(shù)據(jù)點(diǎn)進(jìn)一步對k值進(jìn)行推導(dǎo)。在本申請的一些具體實施方式中得到的A₁的范圍為0.5-5.0，優(yōu)選地為0.85-0.90，A₂的范圍為0.5-5.0，優(yōu)選地為0.65-0.80，A的范圍為0.5-5.0，優(yōu)選地為0.65-0.90。同理，設(shè)B(t)＝o*e^-p(t-r)+q，其中o、p、r、q均為未知參數(shù)，當(dāng)將t＝T₀＝2小時、B＝B₁；t＝T_∞＝120-240小時、B＝B₂；以及t趨向于正無窮時、B＝B₂這三個數(shù)據(jù)點(diǎn)分布代入上述含有未知參數(shù)o、p、r、q的指數(shù)方程，可以推導(dǎo)出r＝T₀，在此處r＝2，并且q＝B₂，g＝(B₁-B₂)，即由此得到軸截距B隨時間t變化的指數(shù)方程為：由于B值隨著時間的增長而升高，即B₁-B₂為負(fù)值，為了方便理解，將上述方程轉(zhuǎn)換為B(t)＝(B₂-B₁)(1-e^-p(t-2))+B₁。在本申請的一些具體實施方式中得到的B₁大于等于0，優(yōu)選地為0.0040-0.0050，B₂大于等于0，優(yōu)選地為0.0085-0.0170，B大于等于0，優(yōu)選地為0.0040-0.0101。

并且，需要注意的是，T_∞的值隨著所述測量值y的不同而具有不同的值。T_∞可以等于也可以不等于存儲時間值。具體而言，隨著測量值y(例如實施例中的干血紙片DBS的HbA1c測量值)的不同，T_∞可以具有不同的最大值Tmax。如果實際存儲時間<＝Tmax,T_∞＝實際存儲時間；但是如果實際存儲時間〉Tmax,T_∞＝Tmax。以下為示例性的對于干血紙片的HbA1c測量值的Tmax的值。

當(dāng)HbA1c值<＝5.5％時，Tmax＝30小時；而當(dāng)5.5％<HbA1c值<＝6.5％時，Tmax＝60小時；而當(dāng)HbA1c>6.5％時，Tmax＝200小時。在某些實施方式中，方法200還進(jìn)一步包括步驟206：根據(jù)校準(zhǔn)系數(shù)隨時間變化的方程，獲得對應(yīng)任意存儲時間T_β的校準(zhǔn)系數(shù)的值,代入校準(zhǔn)方程中從而根據(jù)在存儲時間為T_β時所述方法一樣本中的分析物的測量值Y_Nj,Tβ推得與其對應(yīng)的所述方法二樣本中的分析物的測量值X_Nj,Tβ。以校準(zhǔn)方程為線性方程為例，根據(jù)所述回歸方程A(t)和所述回歸方程B(t)，對于任意存儲時間T_β，獲得A_Tβ及B_Tβ的值；將所述A_Tβ及B_Tβ的值代入所述校準(zhǔn)方程y＝A(t)*x+B(t)中，從而根據(jù)在存儲時間為T_β時所述方法一樣本中的分析物的測量值Y_Nj,Tβ推得與其對應(yīng)的所述方法二樣本中的分析物的測量值X_Nj,Tβ。

以下將參考圖3來具體說明根據(jù)本發(fā)明中所提供的用于校準(zhǔn)待測樣本中的分析物的測量值的方法的具體實施方式。

圖3示出了根據(jù)本發(fā)明的一種具體實施方式的用于校準(zhǔn)經(jīng)方法一處理的待測樣本中的分析物的測量值的方法300的示例性流程圖，所述方法300包括以下步驟：確定經(jīng)方法一處理并且存儲時間t后所得的待測樣本中的分析物的測量值y(301)；確定與存儲時間t相對應(yīng)的校準(zhǔn)方程的校準(zhǔn)系數(shù)(302)，其中所述校準(zhǔn)系數(shù)隨著存儲時間t的不同而變化；以及，基于校準(zhǔn)方程將分析物的測量值y換算為與所述待測樣本同一來源的經(jīng)方法二處理的樣本中將檢測到的所述分析物的含量值x(303)。其中步驟301與步驟302可以同時或任意先后地進(jìn)行，兩者的順序并不對方法300的實施產(chǎn)生任何影響。

在步驟302中，確定與存儲時間t相對應(yīng)的校準(zhǔn)方程的校準(zhǔn)系數(shù)的詳細(xì)方法和步驟可以參照上文中對方法100及方法200的詳細(xì)描述。

在步驟303中，通過將在步驟302中確定的與存儲時間t相對應(yīng)的校準(zhǔn)方程的校準(zhǔn)系數(shù)代入所述校準(zhǔn)方程中，并且將步驟301中的存儲時間t的實際值以及待測樣本中分析物的測量值y的值代入上述校準(zhǔn)方程中，得到一個x的一元一次方程，從而可以反推出x的值。在一些實施方式中，方法二樣本中的分析物的測量值x是基本不隨存儲時間變化而變化的，因此x又被稱為標(biāo)準(zhǔn)測量值。

例如，在某些實施方式中，所述方法一為干血收集法，而方法二則為測量新鮮全血收集法，所以所述待測樣本為干血樣本，而與待測樣本同一來源的經(jīng)方法二處理的樣本為與所述待測樣本同一來源的全血樣本，通過對干血樣本所對應(yīng)的測量值利用與所述存儲時間t相對應(yīng)的校準(zhǔn)方程進(jìn)行換算，從而得到全血樣本中的分析物的含量值，從而有利于借鑒標(biāo)準(zhǔn)測量方法的指標(biāo)來評價分析物含量，從而實現(xiàn)考慮時間因素的兩個方法學(xué)間的校準(zhǔn)。

并且，上述方法可以通過如圖10的系統(tǒng)來實現(xiàn)：如圖10所示，根據(jù)本發(fā)明的一種具體實施方式的用于校準(zhǔn)經(jīng)方法一處理的待測樣本中的分析物的測量值的系統(tǒng)400包括樣本收集器410，其用于采集并儲存待測樣本；檢測設(shè)備420，其用于對所述待測樣本中的分析物的含量進(jìn)行檢測，以確定測量值y，其中所述待測樣本是經(jīng)方法一處理后存儲了時間t后所得到的；以及校準(zhǔn)裝置430，其用于確定與所述存儲時間t相對應(yīng)的校準(zhǔn)方程的校準(zhǔn)系數(shù)，其中所述校準(zhǔn)系數(shù)隨著存儲時間t的不同而變化，并用于基于所述校準(zhǔn)方程，將所述分析物的測量值y 換算為其所對應(yīng)的經(jīng)方法二處理的樣本中的分析物的測量值x，其中，所述測量值x代表與所述待測樣本同一來源的經(jīng)方法二處理的樣本中將檢測到的所述分析物的含量值。

在某些實施方式中，所述樣本收集器410為干血斑片，所述待測樣本即為干血樣本，所述方法一為干血樣本的采集和處理。對于待采血的人群來說，通過使用包括干血基質(zhì)的樣本收集器410，比如干血紙片、干血高分子塑料片、干血海綿以及干血棉等，方便人群自己采血，無需到醫(yī)藥采血，節(jié)省了時間和精力，而且只需要少量的指尖血量，也便于收集大量樣本。而且血液樣品即干血樣本的運(yùn)輸也非常便捷，為病人和實驗室節(jié)省了成本。而所述方法二為測量新鮮全血收集法，而與待測樣本同一來源的經(jīng)方法二處理的樣本為與所述待測樣本同一來源的全血樣本。

并且在某些實施方式中，所述檢測設(shè)備420為高效液相色譜儀，其用于檢測樣本收集器410所收集的待測樣本，以確定測量值y。而所述校準(zhǔn)裝置430則可以是任何形式的數(shù)字平臺，包括臺式計算機(jī)、筆記本、便攜式掌上電腦、數(shù)字平臺、計算機(jī)集群、網(wǎng)絡(luò)工作站等。例如，其可以包括：一個或多個輸入組件；一個或多個輸出組件；一個或多個中央處理器(CPU)；以及一個或多個存儲組件，所述存儲組件在其中存儲一個或多個計算機(jī)程序、一個或多個操作系統(tǒng)、以及可選的一個或多個數(shù)據(jù)庫。

其中，輸入組件使得可以向系統(tǒng)提供數(shù)據(jù)輸入。常用的輸入組件包括數(shù)據(jù)輸入接口、網(wǎng)絡(luò)傳輸接口，或者其它類型的輸入部件。在本申請中，輸入組件用于獲取由檢測設(shè)備420所檢測的分析物含量值。

并且，輸出組件用于向用戶提供計算結(jié)果，常見的輸出組件包括用戶圖形界面(GUI)、三維顯示界面、輸出數(shù)據(jù)接口、網(wǎng)絡(luò)傳輸接口，或者其它類型的輸出部件等。在本申請中，輸出組件用于輸出分析物的測量值y所對應(yīng)的經(jīng)方法二處理的樣本中的分析物的測量值x。

中央處理器(CPU)通?？刂葡到y(tǒng)的整體操作，諸如與顯示、數(shù)據(jù)處理、數(shù)據(jù)存儲、數(shù)據(jù)通信以及記錄操作相關(guān)聯(lián)的操作等。中央處理器(CPU)可以包括一個或多個處理器來執(zhí)行指令，以完成上述的方法的全部或部分步驟。此外，中 央處理器(CPU)可以包括一個或多個模塊，便于處理中央處理器(CPU)和其他組件之間的交互。例如，中央處理器(CPU)可以包括輸入/輸出模塊，以方便輸入組件、輸出組件和中央處理器(CPU)之間的交互。

存儲器可以由任何類型的隨機(jī)存取存儲設(shè)備RAM或只讀存儲設(shè)備ROM或者它們的組合實現(xiàn)，如靜態(tài)隨機(jī)存取存儲器(SRAM)、電可擦除可編程只讀存儲器(EEPROM)、可擦除可編程只讀存儲器(EPROM)、可編程只讀存儲器(PROM)、只讀存儲器(ROM)、CD-ROM、磁帶、軟盤和光數(shù)據(jù)存儲設(shè)備等。存儲器可以被配置為存儲各種類型的數(shù)據(jù)以支持在系統(tǒng)的操作。

其中，本申請的方法可以用例如計算機(jī)軟件、硬件或者其組合來在計算機(jī)可讀介質(zhì)中實現(xiàn)。對于硬件實現(xiàn)而言，這里所述的實施例可以通過專用集成電路(ASIC)、數(shù)字信號處理器(DSP)、數(shù)字信號處理設(shè)備(DSPD)、可編程邏輯器件(PLD)、現(xiàn)場可編程門陣列(FPGA)、處理器、控制器、微控制器、微處理器、設(shè)計成執(zhí)行這里所述功能的其它電子單元或者其選擇性組合內(nèi)的一個或多個來實現(xiàn)。

對于軟件實現(xiàn)而言，這里所述的實施例可以用單獨(dú)的軟件模塊，諸如過程模塊和功能模塊來實現(xiàn)，其每一個都執(zhí)行一個或多個這里所述的功能和操作。軟件代碼可以用任何適當(dāng)?shù)木幊陶Z言編寫的軟件應(yīng)用來實現(xiàn)，并且可以存儲在專用的計算機(jī)系統(tǒng)的存儲器或者其他計算機(jī)可讀介質(zhì)中，并且由計算機(jī)系統(tǒng)的處理器來執(zhí)行，也可以安裝在具備數(shù)據(jù)存儲和處理功能的其他電子設(shè)備中，如平板電腦、服務(wù)器等。

在一些實施方式中，可以通過校準(zhǔn)裝置430實現(xiàn)：確定與所述存儲時間t相對應(yīng)的校準(zhǔn)方程的校準(zhǔn)系數(shù)，其中所述校準(zhǔn)系數(shù)隨著存儲時間t的不同而變化，并用于基于所述校準(zhǔn)方程，將所述分析物的測量值y換算為其所對應(yīng)的經(jīng)方法二處理的樣本中的分析物的測量值x，其中，所述測量值x代表與所述待測樣本同一來源的經(jīng)方法二處理的樣本中將檢測到的所述分析物的含量值。

并且，在其他實施例中，校準(zhǔn)裝置430還可以為包含于檢測設(shè)備420中的一個內(nèi)置單元。例如，所述校準(zhǔn)裝置430則可以為包含于檢測設(shè)備420中的一個內(nèi)置中央處理器、微處理器、單片機(jī)等。

綜上所述，利用系統(tǒng)400，通過對干血樣本所對應(yīng)的測量值利用與所述存儲 時間t相對應(yīng)的校準(zhǔn)方程進(jìn)行換算，從而得到全血樣本中的分析物的含量值，從而有利于借鑒標(biāo)準(zhǔn)測量方法的指標(biāo)來評價分析物含量，從而實現(xiàn)考慮時間因素的兩個方法學(xué)間的校準(zhǔn)。

以下將通過實驗例具體描述本發(fā)明。

實驗例

通過下述非限制性實驗例進(jìn)一步描述本發(fā)明。需要說明的是舉出這些實驗例只是用于進(jìn)一步說明本發(fā)明的技術(shù)特征，并非旨在也不能夠被解釋為對本發(fā)明的限制。所述實驗例不包含本領(lǐng)域一般技術(shù)人員所公知的傳統(tǒng)方法的詳細(xì)描述。

以下實施例中，通用的分析物為糖化血紅蛋白，其測量值反映糖化血紅蛋白占總血紅蛋白的數(shù)量百分比。

在現(xiàn)有的臨床實驗室中，對于糖尿病等的檢測所使用的標(biāo)準(zhǔn)方法是基于全血(例如新鮮的靜脈血)的糖化血紅蛋白實驗。對于基于全血的糖化血紅蛋白實驗，可以使用多種分析儀器和方法，比如使用美國伯樂公司Varriant II高效液相色譜儀(Bio-Rad Variant II)，或者使用另一種HPLC儀器(比如日本東商HLC-723G8)，或使用免疫比濁儀(比如羅氏自動生化分析儀)等等。在這些分析儀中，美國伯樂公司Varriant II高效液相色譜儀是金標(biāo)準(zhǔn)儀器，因為它被用于糖尿病控制和并發(fā)試驗(DCCT)項目中，該項目設(shè)定了糖化血紅蛋白的臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)。美國伯樂公司Varriant II高效液相色譜儀也被美國國家糖化血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)化計劃(NGSP)認(rèn)證。本發(fā)明使用的儀器是美國伯樂公司Varriant II高效液相色譜儀，其基于HPLC技術(shù)，可用于精確檢測糖化血紅蛋白，高效液相色譜儀的操作流程是糖化血紅蛋白HbA1c檢測試劑盒(HPLC法)說明書(VRIANTTM II Hemoglobin A1c program)中的標(biāo)準(zhǔn)操作流程。

以下基于糖化血紅蛋白含量檢測的實施例中，待校準(zhǔn)樣本對中的待測樣本為干血斑片樣本，待校準(zhǔn)樣本對中的標(biāo)準(zhǔn)樣本為靜脈采集的全血樣本。

實施例1：

樣本的采集及制備

對照實驗的采血方法：對于每一位受試者采集新鮮的靜脈血液樣品，將其血液樣品分成兩份，第一份是全血血液，存儲在含有抗凝劑的采血管中置于4℃冷藏備用，用于測定基于全血樣本的糖化血紅蛋白含量；第二份涂布在樣本收集器例如一系列的干血紙片上，進(jìn)一步室溫干燥約1個小時，得到存儲在干血紙片上的干血樣本，用于測定基于干血樣本的糖化血紅蛋白含量。

樣本中糖化血紅蛋白的檢測

對于在全血樣本中進(jìn)行糖化血紅蛋白檢測前的樣本處理步驟采用HbA1c檢測試劑盒(HPLC法)說明書(VRIANTTM II Hemoglobin A1c program)中的標(biāo)準(zhǔn)操作流程進(jìn)行。

對于在干血樣本中進(jìn)行糖化血紅蛋白檢測前的樣本處理主要包括如下步驟：1)取出干血紙片，用3毫米打孔儀(GE Micro-Punch WB100038)與打孔墊(GE打孔墊)在干血紙片上打孔，得到直徑3毫米的干血樣本。盡可能在左側(cè)的樣品圓圈處打兩個孔(忽略樣品五個樣品圓圈中最左側(cè)的樣品圓圈)，并將得到的兩個圓紙片置于試管中。必要時，可用酒精試紙擦拭3毫米打孔儀的打孔機(jī)頭。2)將得到的圓形干血樣本放入試管后，用瑞寧移液器和槍頭(Rainin XLS+LTS)將1.3毫升的0.01％NaN₃水溶液作為溶血試劑加入每個試管中，以得到干血樣本和溶血試劑的混合液。所述干血樣本面積和所述溶血試劑體積的比例是1mm²:92ul。3)將試管置于大龍旋轉(zhuǎn)混勻儀(Dragonlab MX-RL-Pro)上，在室溫下以每分鐘30轉(zhuǎn)的轉(zhuǎn)速旋轉(zhuǎn)30分鐘，充分混合干血樣本和溶血試劑，完成檢測前樣本處理，其中經(jīng)處理的樣本可以在沒有去除干血樣本的情況下直接進(jìn)行后續(xù)檢測。

對于經(jīng)過處理后的全血樣本及經(jīng)過處理后的干血紙片樣本，之后均可使用美國伯樂公司Varriant II高效液相色譜儀(Bio-Rad Variant II)根據(jù)是糖化血紅蛋白檢測試劑盒(HPLC法)說明書(VRIANTTM II Hemoglobin A1c program)中的操作流程進(jìn)行糖化血紅蛋白含量的檢測。對于N個校準(zhǔn)用樣本對來說，將每個成對的方法一樣本(干血樣本)以及方法二樣本(全血樣本)交替上樣檢測，以保證在每對校準(zhǔn)用樣本的檢測中維持最小的由于儀器狀態(tài)、環(huán)境因素、上樣時間等引起的誤差。

實施例2

采用實施例1中所述的樣本采集、處理及對糖化血紅蛋白進(jìn)行檢測的方法，其中校準(zhǔn)用樣本對的數(shù)量為62對。樣本采集后經(jīng)處理并且進(jìn)行檢測前的樣本處理后，開始檢測，此時距離取樣大約在1.5小時-2小時之間?？紤]到由于樣本量較大(共124個樣本)上樣時間也延續(xù)較長，各個樣本從取樣到檢測相距的時間平均值大約為2小時，即T₀為2小時。

如圖4所示，以干血樣本(DBS)中HbA1c的測量值為橫坐標(biāo)，以全血樣本(WB)中HbA1c的測量值為縱坐標(biāo)，獲得62個校準(zhǔn)點(diǎn)，借助魯棒的線性回歸方法確定概率斜率A為0.8713，概率軸截距B為0.0052，線性回歸相關(guān)系數(shù)的平方R²＝0.9923。

實施例3

先根據(jù)實施例1中所述的方法采集全血樣本，兩天后對全血樣本來源一致的受試者對應(yīng)獲取干血樣本、處理及對糖化血紅蛋白進(jìn)行檢測的方法，其中校準(zhǔn)用樣本對的數(shù)量為62對。干血樣本在被采集后經(jīng)處理干燥并且進(jìn)行檢測前的樣本處理后，開始檢測，此時與干血樣本的取樣點(diǎn)相距大約1.5小時-2小時之間。同樣考慮到由于樣本量較大(共124個樣本)上樣時間也延續(xù)較長，各個干血樣本從取樣到檢測相距的時間平均值大約為2小時，即T₀為2小時。而與其相對應(yīng)的全血樣本距離其相應(yīng)的取樣時間已經(jīng)歷了大約兩天時間。

如圖5所示，以干血樣本(DBS)中HbA1c的測量值為橫坐標(biāo)，以全血樣本(WB)中HbA1c的測量值為縱坐標(biāo)，獲得62個校準(zhǔn)點(diǎn)，借助魯棒的線性回歸方法確定概率斜率A為0.8788，概率軸截距B為0.0053，線性回歸相關(guān)系數(shù)的平方R²＝0.9951。

比較實施例2與實施例3中獲得的斜率A及軸截距B，發(fā)現(xiàn)兩者并未發(fā)生明顯變化。由此可以推斷，全血樣本中糖化血紅蛋白的測量值x相對穩(wěn)定，基本不隨時間發(fā)生改變，其對于反映上述兩種經(jīng)不同處理方法的血液樣本中糖化血紅蛋白的測量值之間映射關(guān)系的校準(zhǔn)方程中的校準(zhǔn)系數(shù)基本不產(chǎn)生隨時間改變的影響。

實施例4

采用實施例1中所述的樣本采集、處理及對糖化血紅蛋白進(jìn)行檢測的方法，其中校準(zhǔn)用樣本對的數(shù)量為62對。樣本采集后經(jīng)處理并且取出部分進(jìn)行檢測前的樣本處理后，開始檢測，此時距離取樣大約在1.5小時-2小時之間?？紤]到由于樣本量較大(共124個樣本)上樣時間也延續(xù)較長，各個樣本從取樣到檢測相距的時間平均值大約為2小時，即T₀為2小時。之后剩余的樣本被分別保存在4℃(全血樣本)或者封裝后保存在室溫下(干血樣本)，經(jīng)約18小時及37小時后分別取出所有樣本的部分進(jìn)行檢測前的處理并開始檢測，考慮到樣本的處理及平均上樣時間的因素，上述的兩個數(shù)據(jù)采集點(diǎn)t分別記為19小時和38小時。

圖6示出了在3個不同的存儲時間(分別為T₀＝2小時(圖6a)，T₂＝19小時(圖6b)，T₃＝38小時(圖6c))的條件下DBS樣本中HbA1c的測量值y與WB樣本中HbA1c的測量值x的關(guān)系。其中以相同存儲時間條件下獲得的DBS樣本中HbA1c的測量值為橫坐標(biāo)，WB樣本中HbA1c的測量值為縱坐標(biāo)，相對應(yīng)每個存儲時間均獲得62個校準(zhǔn)點(diǎn)。在圖6a中借助魯棒的線性回歸方法確定概率斜率A₂為0.8699，概率軸截距B₂為0.0058，線性回歸相關(guān)系數(shù)的平方R²＝0.996。在圖6b中借助魯棒的線性回歸方法確定概率斜率A₁₉為0.8191，概率軸截距B₁₉為0.0075，線性回歸相關(guān)系數(shù)的平方R²＝0.9956。在圖6c中借助魯棒的線性回歸方法確定概率斜率A₃₈為0.8109，概率軸截距B₃₈為0.0079，線性回歸相關(guān)系數(shù)的平方R²＝0.9956。

由此可見干血樣本的存儲時間對于斜率A及軸截距B均有影響，A與B的值隨存儲時間的增加分別減少和增加。為了進(jìn)一步驗證這個發(fā)現(xiàn)，以下進(jìn)一步驗證了更長的存儲時間對斜率A及軸截距B的影響。

實施例5

采用實施例4中所述的樣本采集、處理、存儲及對糖化血紅蛋白進(jìn)行檢測的方法，其中校準(zhǔn)用樣本對的數(shù)量增加至72對，各數(shù)據(jù)點(diǎn)的采集時間則分別為2小時、70小時和93小時。

圖7示出了在3個不同的存儲時間(分別為T₀＝2小時(圖7a)，T₂＝70小時(圖7b)，T₃＝93小時(圖7c))的條件下DBS樣本中HbA1c的測量值y與WB樣本中HbA1c的測量值x的關(guān)系。以相同存儲時間條件下獲得的DBS樣 本中HbA1c的測量值為橫坐標(biāo)，WB(全血)樣本中HbA1c的測量值為縱坐標(biāo)，相對應(yīng)每個存儲時間均獲得72個校準(zhǔn)點(diǎn)。在圖7a中借助魯棒的線性回歸方法確定概率斜率A₂為0.917，概率軸截距B₂為0.0031，線性回歸相關(guān)系數(shù)的平方R²＝0.9969。在圖7b中借助魯棒的線性回歸方法確定概率斜率A₇₀為0.7812，概率軸截距B₇₀為0.0096，線性回歸相關(guān)系數(shù)的平方R²＝0.994。在圖7c中借助魯棒的線性回歸方法確定概率斜率A₉₃為0.7654，概率軸截距B₉₃為0.0106，線性回歸相關(guān)系數(shù)的平方R²＝0.9931。

該實施例的結(jié)果進(jìn)一步證明了干血樣本的存儲時間對于斜率A及軸截距B具有影響，且A與B的值在較長的存儲時間條件下與2小時存儲時間條件下或的相應(yīng)值相比分別減少和增加。但同時該實施例的結(jié)果也發(fā)現(xiàn)了在70小時后，A與B的值都趨于穩(wěn)定，70小時與93小時確定的A與B的值均變化不大。

實施例6

采用實施例1中所述的樣本采集、處理及對糖化血紅蛋白進(jìn)行檢測的方法，其中校準(zhǔn)用樣本對的數(shù)量為59對。為了確定斜率A及軸截距B分別隨時間t變化的方程，將該14對校準(zhǔn)用樣本對分別存儲10個不同的存儲時間：T₀＝2小時，T₁＝29小時，T₂＝46小時，T₃＝70小時，T₄＝93小時，T₅＝117小時，T₆＝144小時，T₇＝169小時，T₈＝190小時，T₉＝217小時。獲得不同存儲時間條件下校準(zhǔn)用樣本對中分析物測量值x和y的數(shù)據(jù)。

如實施例3中所述全血樣本中糖化血紅蛋白的測量值x相對穩(wěn)定，基本不隨時間發(fā)生改變。并且在本實驗中也再次證明全血樣本中糖化血紅蛋白測量值x在不同的存儲時間0-215小時范圍內(nèi)基本不隨時間變化而變化(數(shù)據(jù)未顯示)，因此本實驗中x值為不同存儲時間下各全血樣本中糖化血紅蛋白測量值的平均值，且該平均值基本等于T₀時全血樣本中的糖化血紅蛋白測量值。由此可以推斷，對于針對全血樣本和干血樣本的方法學(xué)測量值校準(zhǔn)來說，全血樣本并不必須存儲與干血樣本相同的存儲時間之后再對其中的糖化血紅蛋白進(jìn)行測量，代入校準(zhǔn)方程的T_i存儲時間條件下的x或者根據(jù)T_i存儲時間條件下的y由校準(zhǔn)方程推出的T_i存儲時間條件下的x的值可以等同于T₀下的測量值x。

根據(jù)不同存儲時間條件下校準(zhǔn)用樣本對中分析物測量值x和y的數(shù)據(jù)，按照如實施例2-實施例5中所述的數(shù)據(jù)處理方法，獲得10組不同存儲時間條件下的校準(zhǔn)方程，從而確定10組不同存儲時間下的校準(zhǔn)系數(shù)A與B。

表1：不同存儲時間條件下獲得的校準(zhǔn)系數(shù)A與B的值

根據(jù)表1中所列的數(shù)據(jù)，如圖8A及圖8B所示，分別以存儲時間t為橫坐標(biāo)，以在各個存儲時間條件下確定的斜率A以及軸截距B的值作為縱坐標(biāo)，獲得兩組數(shù)據(jù)點(diǎn)，根據(jù)數(shù)據(jù)點(diǎn)的連線確定反映斜率A以及軸截距B和存儲時間t關(guān)系的方程的類型，之后設(shè)定參數(shù)并代入數(shù)據(jù)點(diǎn)確定方程A(t)和方程B(t)。此處，根據(jù)圖8A及圖8B所示的模擬趨勢線，判定方程A(t)和方程B(t)均為指數(shù)方程，并且根據(jù)數(shù)據(jù)點(diǎn)的代入得到斜率A隨時間t變化的指數(shù)方程為：A(t)＝(A₁-A₂)軸截距B隨時間t變化的指數(shù)方程為：B(t)＝(B₂-B₁)(1-e^-p(t-2))+B₁。此處A₁為t＝T₀時獲得的A值，A₂為t＝T₉時獲得的A值；B₁為t＝T₀時獲得的B值，B₂為t＝T₉時獲得的B值。根據(jù)上述確定的方程A(t)和方程B(t)，相應(yīng)的校準(zhǔn)方程為y＝A(t)*x+B(t)，當(dāng)將前文所述的每個樣本對中基本不變的x值代入，則可推出各存儲時間條件下，y的相應(yīng)值。而實際操作中，在不方便獲取病人的全血樣本的情況下，根據(jù)干血樣本中的糖化血紅蛋白測量值y，該樣本的存儲時間t，也可以從上述校準(zhǔn)方程中推出其對應(yīng)的全血樣本中糖化血紅蛋白的測量值x。另外，以不同存儲時間條件下獲得的A值與相應(yīng)的B值分別為x、y軸，獲得不同存儲時間條件下斜率A與相應(yīng)的軸截距B之間的關(guān)系，由圖9中所示可以看出，斜率A與其相應(yīng)的軸截距B之間具有負(fù)相關(guān)的線性關(guān)系。

上述示意圖僅僅為了示例的目的而示出的，并非是對本發(fā)明的限制。在一些情況下，可以根據(jù)需要添加或者減少其中的一些模塊或裝置。

應(yīng)當(dāng)注意，盡管在上文詳細(xì)描述中提及了檢測設(shè)備的若干裝置或子裝置，但是這種劃分僅僅是示例性的而并非強(qiáng)制性的。實際上，根據(jù)本發(fā)明的實驗例，上 文描述的兩個或更多裝置的特征和功能可以在一個裝置中具體化。反之，上文描述的一個裝置的特征和功能可以進(jìn)一步劃分為由多個裝置來具體化。

那些本技術(shù)領(lǐng)域的一般技術(shù)人員可以通過研究說明書、公開的內(nèi)容及附圖和所附的權(quán)利要求書，理解和實施對披露的實施方式的其他改變。在權(quán)利要求中，措詞“包括”不排除其他的元素和步驟，并且措辭“一”、“一個”不排除復(fù)數(shù)。在發(fā)明的實際應(yīng)用中，一個零件可能執(zhí)行權(quán)利要求中所引用的多個技術(shù)特征的功能。權(quán)利要求中的任何附圖標(biāo)記不應(yīng)理解為對權(quán)利要求的范圍的限制。