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      一種組合型雙向膠體金免疫層析試紙條的制作方法

      文檔序號:12358658閱讀:290來源:國知局
      一種組合型雙向膠體金免疫層析試紙條的制作方法與工藝

      本發(fā)明涉及一種組合型雙向膠體金免疫層析試紙條,針對樣品可能含有的不同主要兩種目標,可選用不同方向的襯板與樣品墊組合形成雙向層析試劑條。實現(xiàn)檢測目標與檢測設備的可調節(jié)性。



      背景技術:

      膠體金是一種常用的標記技術, 是以膠體金作為示蹤標志物應用于抗原抗體的一種新型 的免疫標記技術,有其獨特的優(yōu)點。近年已在各種生物學研究中廣泛使用。在臨床使用的免 疫印跡技術幾乎都使用其標記。同時在流式、電鏡、免疫、分子生物學以至生物芯片中都可 能例用到。

      膠體金標記實質上是抗體蛋白等生物大分子被吸附到膠體金顆粒表面的包被過程。吸附的機理可能是膠體金表面所帶的負電荷與蛋白質分子所帶的正電荷之間靠靜電力相互吸引,達到范德華引力內即形成牢固的結合。另外,膠體金顆粒的粗糙也是有利于形成吸附的重要條件。由于這種標記過程主要是靠物理吸附作用,因而對蛋白質分子的生物學活性沒有明顯影響。

      常用的免疫膠體金檢測技術及應用包括:(1)免疫膠體金光鏡染色法細胞懸液涂片或組織切片,可用膠體金標記的抗體進行染色,也可在膠體金標記的基礎 上,以銀顯影液增強標記,使被還原的銀原子沉積于已標記的金顆粒表面,可明顯增強膠體 金標記的敏感性。(2)免疫膠體金電鏡染色法,可用膠體金標記的抗體或抗抗體與負染病毒樣本或組織超薄切片結合,然后進行負染??捎糜诓《拘螒B(tài)的觀察和病毒檢測。(3)斑點免疫金滲濾法,應用微孔濾膜(如膜)作載體,先將抗原或抗體點于膜上,封閉后加待檢樣本,洗滌后用膠體金標記的抗體檢測相應的抗原或抗體。(4)膠體金免疫層析法,將特異性的抗原或抗體以條帶狀固定在膜上,膠體金標記試劑(抗體或單克隆抗體)吸 附在結合墊上,當待檢樣本加到試紙條一端的樣本墊上后,通過毛細作用向前移動,溶解結 合墊上的膠體金標記試劑后相互反應, 再移動至固定的抗原或抗體的區(qū)域時,待檢物與金標 試劑的結合物又與之發(fā)生特異性結合而被截留, 聚集在檢測帶上,可通過肉眼觀察到顯色結果。上述四種方法已經(jīng)逐步發(fā)展成為診斷試紙條,前景廣泛。

      傳統(tǒng)膠體金速測卡的組裝過程為將聚氯乙烯襯板作為支撐載體固定于試劑卡槽下殼體中,然后樣品墊、復合膠體金結合墊、硝酸纖維素膜和吸水濾紙依次排列連接于襯板右側上表面,單一膠體金結合墊、硝酸纖維素膜和吸水濾紙依次排列連接于樣品墊左側襯板的上表面得到膠體金免疫層析速測卡。除了常用檢測標記試劑條,通常在明確檢測目標后,再組裝膠體金試劑條,在多組分分析時,效率低下,雙向層析控制困難。一種利用不同檢測襯板,實現(xiàn)即時組裝、即時投入使用的簡易組裝膠體金試劑條,目前未有報道。



      技術實現(xiàn)要素:

      本發(fā)明描述了一種組合型雙向膠體金免疫層析試紙條,可針對樣品可能含有的不同主要兩種目標,選用不同方向的襯板與樣品墊組合形成雙向層析試劑條。所述襯板為提前制備完成,在檢測時即時組裝、即時使用??蓪崿F(xiàn)檢測設備針對檢測目標的可調節(jié)性。

      一種組合型雙向膠體金免疫層析試紙條,其主體結構包含:襯板與樣品墊,所述襯板與樣品墊為獨立組件,所述襯板為組裝好的獨立組件,一般儲存于15 oC以下冰箱保存。所述襯板組合方法但并不局限為 :將聚氯乙烯底托作為支撐載體固定于試劑卡槽下殼體中,然后樣品墊、復合膠體金結合墊、硝酸纖維素膜和吸水濾紙依次排列連接于襯板上表面。 所述襯板為獨立的兩組帶有卡扣的襯板,每組襯板上黏貼的組件包括:膠體金結合墊、硝酸纖維膜、吸水濾紙及或者其他本技術領域工作人員可以理解的棉衣分析配件。所述卡扣為襯板底部外凸部位構成,形狀為環(huán)形或者楔形。

      所述的樣品墊包括樣品吸收材料和底部固定材料,以及樣品吸收材料和底部固定材料所構成的卡槽。所述樣品墊的原料為聚酯纖維膜。所述的組合型雙向膠體金免疫層析試紙條,膠體金結合墊的底層為聚酯纖維膜,在該聚酯纖維膜表面吸附有膠體金蛋白,所述硝酸纖維膜表面包被有抗原或抗體蛋白。所述樣品墊通過卡槽與兩個方向的襯板卡扣相連接。所述硝酸纖維膜上的包被抗原或抗體蛋白位于膜的兩端。所述的組合型雙向膠體金免疫層析試紙條,在所述硝酸纖維膜的兩端,分別存在至少一條所述抗原或抗體蛋白。硝酸纖維素膜上設有第一檢測線和第一對照線,硝酸纖維素上設有第二檢測線和第二對照線,第一檢測線上包被的是第一目標抗體,第二檢測線上包被的是第二目標抗體,第一對照線上包被的是第一目標純化抗體,第二對照線上包被的是第二目標純化抗體,抗體合適包被量分別為1.0-2.0μg,復合金標探針合適抗體標記量均為10-20 μg/mL。

      所述的組合型雙向膠體金免疫層析試紙條,備用襯板卡扣與樣品墊卡槽契合,從任意兩組或多組襯板中挑選兩組襯板,可與樣品墊通過卡槽相連接。

      附圖說明

      在接下來對實施例的描述中,本發(fā)明將更易于理解,僅通過實施例并參考附圖描述,其中:

      圖1為所述組合型雙向膠體金免疫層析試紙條未組合時的側視圖,其中a為樣品墊,b為膠體金結合墊,c為兩組中的一個襯板,d為硝酸纖維膜,e為第一檢測線,f為第一對照線,g為吸水濾紙,h為第一對照線,i為第二檢測線;

      圖2為所述組合型雙向膠體金免疫層析試紙條組合后的俯視圖,本圖中,字母指代與圖1中所描述一致。

      具體實施方式

      為使本發(fā)明的目的、技術方案和優(yōu)點更加清楚,下面將結合附圖對本發(fā)明的實施方式進行詳細的闡述。然而,本領域的普通技術人員可以理解,在本發(fā)明實施方式中,為了使讀者更好地理解本申請而提出了許多技術細節(jié)。但是,即使沒有這些技術細節(jié)和基于以下實施方式的種種變化和修改,也可以實現(xiàn)本申請各權利要求所要求保護的技術方案。

      本發(fā)明的第一實施方式涉及一種膠體金免疫層析試紙條,包含:a為樣品墊,b為膠體金結合墊,c為兩組中的一個襯板,d為硝酸纖維膜,e為第一檢測線,f為第一對照線,g為吸水濾紙,h為第一對照線,i為第二檢測線,如圖1 所示。

      圖1中,右側未標示的組件為與左側對稱的結構。單獨底襯c上面的端部粘貼膠體金結合墊d,底襯c 末端粘貼吸水墊g ;膠體金結合墊d 上面的中部粘貼膠體金結合墊b ;樣品墊a與膠體金結合墊b相卡連接。并通過膠體金免疫層析試紙條的外殼來壓緊吸水墊g 和樣品墊a。

      其中,膠體金結合墊b 的底層為聚酯纖維膜,在該聚酯纖維膜表面吸附有膠體金蛋白;膠體金結合墊d的底層為聚酯纖維膜,在該聚酯纖維膜表面包被有抗原或抗體蛋白;樣品墊a的材質是聚酯纖維膜;吸水墊g的材質為紙質復合纖維材料;底襯c的材質為聚氯乙烯纖維或者玻璃纖維。本實施方式中的組合型雙向膠體金免疫層析試紙條的制備方法為備用襯板卡扣與樣品墊卡槽契合,從任意兩組或多組襯板中挑選兩組襯板,可與樣品墊通過卡槽相連接。

      本實施方式的膠體金免疫層析試紙條的使用方法如下:將樣本溶液滴加在樣品墊a 上,樣本溶液經(jīng)過樣品墊a的滲透過濾,擴散到膠體金結合墊b上,由于兩側膠體金結合墊緊密卡扣相連,及兩側膠體金結合墊與樣品墊a的襯底均相、纖維互通。金蛋白均勻的向兩邊層析擴散,本實施方式通過將膠體金結合墊、吸附膠體金蛋白的膠體金結合墊以及樣品墊分層設置于底襯的中部,并將吸水墊設置于底襯的兩端,使得膠體金免疫層析試紙條能夠雙向層析。且常被襯底儲存于冰箱,即時使用,從而可以增加膠體金層析的穩(wěn)定性,提高工作效率。

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