1.測定血清中的視黃醇結(jié)合蛋白4水平的方法,包括如下步驟:
2.根據(jù)權(quán)利要求1的方法,其中所述微球稀釋液中包含:0.25%~0.55%的tris、1%~2%的bsa、0.5%~1.5%的s9、4%~6%的海藻糖。
3.根據(jù)權(quán)利要求1的方法,其中所述微球稀釋液中包含:0.25%的tris、1%的bsa、1%的s9、5%海藻糖。
4.根據(jù)權(quán)利要求1的方法,其中:
5.根據(jù)權(quán)利要求1的方法,其中還可另外通過標準曲線法計算血清中rbp4濃度;例如,所述標準曲線是如下方式建立的:取濃度為600、300、150、75、37.5ng/ml的rbp4質(zhì)控品,每個濃度進行3次檢測,以濃度和t/c的對數(shù)分別作為橫縱坐標繪制標準曲線。
6.根據(jù)權(quán)利要求1的方法,其中還可另外通過精密度的測定驗證方法學性能,所述精密度是如下方式測定的:隨機抽取3個批次的試劑盒,分別以300、75ng/ml的rbp4質(zhì)控品點樣,各濃度重復(fù)檢測10次,計算3個批次批內(nèi)和批間重復(fù)性cv。
7.根據(jù)權(quán)利要求1的方法,其中還可另外通過準確度的測定驗證方法學性能,所述準確度是如下方式測定的:采用基質(zhì)血清作為稀釋液,將rbp4抗原稀釋至300、75、37.5ng/ml為預(yù)測濃度,用所述4試劑盒進行測試,測試結(jié)果為實測濃度,按如下公式計算:
8.根據(jù)權(quán)利要求1的方法,其中還可另外通過靈敏度的測定驗證方法學性能,所述靈敏度是如下方式測定的:采用空白稀釋液進行檢測,重復(fù)檢測20次,檢測結(jié)果代入標準曲線計算濃度平均值和標準差(sd),得出均值+2sd,即為最低檢出量,能反映試劑盒的靈敏度。
9.根據(jù)權(quán)利要求1的方法,其中還可另外通過特異性的測定驗證方法學性能,所述特異性是如下方式測定的:將0.1ml?10mm?pbs添加至1ml高濃度和低濃度質(zhì)控品作為對照樣本,將0.1ml干擾物溶液(3850μmol/l膽紅素、440mmol/l甘油三酯、22g/l血紅蛋白)添加至1ml高濃度和低濃度質(zhì)控品作為干擾樣本,每個樣本檢測3次,計算干擾樣本與對照樣本的相對偏差。
10.用于測定血清中的視黃醇結(jié)合蛋白4水平的試劑盒,其包括用于稀釋血清樣本的pbs緩沖液以及試紙條,該試紙條依次通過將樣品墊、結(jié)合墊、包被有t線和c線的nc膜和吸水紙組裝而成;例如,所述t線和c線分別用0.8mg/ml的包被抗體和0.6mg/ml的羊抗鼠抗體包被,噴液量為1μl/cm;例如,所述結(jié)合墊上涂漬有熒光免疫微球。
11.根據(jù)權(quán)利要求10的試劑盒,其中所述試紙條是通過如下方式組成而成的:
12.根據(jù)權(quán)利要求10的試劑盒,其中所述熒光免疫微球是通過如下方式制備得到的: